可促进牙种植体周围成骨的口腔施用组合物及其制剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药生物领域，具体涉及具有促进牙种植体周围成骨作用的口腔施用 组合物及其制剂。
【背景技术】
[0002] 人工种植技术是牙列缺损、牙列缺失和颂面部缺损的有效修复手段，目前已作为 一种成熟可靠的修复方法广泛应用于临床。但是糖尿病患者的种植修复往往存在较差的初 期骨结合和较高的失败率，病情未得到良好控制的糖尿病患者，易发生种植失败。
[0003] 虽然II型糖尿病影响种植修复的机制还不是十分明确，但大量临床和实验研究 表明由糖尿病引起的小血管病变、免疫低下、胶原分解等因素，可使软硬组织对局部致病因 子的抵抗力下降，影响骨的整合。临床研究显示糖尿病引起的骨愈合能力的减弱（尤其是 种植术后的第2周）是导致种植体骨结合发生时间上的延迟和质量上的下降的最重要原因 之一。骨整合的发生是牙科种植体成功的基础，然而高血糖会抑制成骨细胞的分化，还可以 对骨基质及其成分产生有害作用，同时影响细胞外基质的粘连、生长、聚集导致糖尿病患者 种植体周围出现骨形成障碍。
[0004] 另外，目前许多学者已将牙周炎列为糖尿病的第六并发症。糖尿病本身并不引起 牙周炎，而是由于该病的基本病理变化，如小血管和大血管病变、免疫反应低下、中性多形 核白细胞功能低下、胶原分解增加而合成减少等，在引起肾、视网膜和神经系统病变之外， 也可使牙周组织对局部致病因子的抵抗力下降，从而牙周炎破坏加重和加速。而牙周炎可 以导致种植体周围组织病变，包括种植体周围黏膜炎和种植体周围炎。种植体周围黏膜炎 是指行使功能的种植体周围软组织的可逆性炎症反应。种植体周围炎是指在行使功能的种 植体周围，已经发生了支持骨吸收的炎症反应。这也可能是导致糖尿病患者种植失败的重 要原因之一。
【发明内容】
[0005] 本发明的一个目的是提供一种可施用于口腔的药物组合物，其可以促进种植体周 围的骨整合，并提高种植成功率，其由花生四烯酸、棕榈酸、还原型谷胱甘肽和维生素 C组 成。
[0006] 在本发明的一个实施方案中，所述组合物的具体重量比为：1~10重量份的花生 四烯酸、1~10重量份的棕榈酸、1~10重量份的还原型谷胱甘肽和1~10重量份的维生 素 C。在进一步地实施方案中，所述组合物的具体重量比为：6~8重量份的花生四烯酸、 2~4重量份的棕榈酸、7~9重量份的还原型谷胱甘肽和1重量份的维生素 C。在更进一 步地实施方案中，所述组合物的具体重量比为：7重量份的花生四烯酸、3重量份的棕榈酸、 8重量份的还原型谷胱甘肽和1重量份的维生素 C。
[0007] 本发明的另一个目的是所述药物组合物在制备促进牙种植体周围骨整合药物中 的应用。
[0008] 本发明的另一个目的是提供一种口腔喷雾剂，其由所述药物组合物和药学上可接 受的辅料组成。
[0009] 在本发明另一个实施方案中，所述口腔喷雾剂的具体组成为：2g的药物组合物； 〇. 3g的羟丙甲基纤维素；0. 3g的壳聚糖；Ig的丙二醇；100mL的水。
[0010] 本发明提供所述口腔喷雾剂的制备方法，具体为：将配方比的药物组合物和丙二 醇溶于50ml水中，搅拌溶解，然后向溶液中加入壳聚糖和羟丙甲基纤维素，溶解后加水定 容至100mL，过0. 22 μ m微孔滤膜，灌装于带有定量阀的喷雾瓶中。
[0011] 本发明的药物组合物促进糖尿病种植体骨结合方面表现出极佳的治疗效果，并且 组合物中的四个化合物产生了明显的协同效应。由于牙周组织毛细血管丰富，利于药物直 接吸收，因此本发明进一步地还提供了一种口腔喷雾剂，可以使药物组合物直接应用于发 病部位，并且通过辅料选择从而使口腔喷雾剂具有极佳的稳定性。
【具体实施方式】
[0012] 下面将举例说明本发明。需要指出的是，以下说明仅仅是对本发明要求保护的技 术方案的举例说明，并非对这些技术方案的任何限制。本发明的保护范围以所附权利要求 书记载的内容为准。
[0013] 实施例1
[0014] MG-63细胞置于培养瓶中用MEM/EBSS培养基培养（其中含10%的胎牛血清（FBS) 和非必需氨基酸（NEAA))。当细胞在培养瓶中贴壁融合达80~90 %左右时传代。将MG-63 细胞按2000个/孔接种于96孔板细胞培养24小时，血清饥饿12小时后，培养基更换为下 列之一 ：（a)MEM/EBSS(含有 NEAA，5% FBS 和 1.0 g/L 葡萄糖（生理糖浓度，NG)) ; (b)MEM/ EBSS (含有NEAA，5% FBS和4. 5g/L葡萄糖（高糖浓度，HG));添加培养基同时添加 GSH和 包含GSH的药物组合物的培养基溶液，各组中，对照组添加 a培养基，模型组及给药组添加 b 培养基，各给药组的剂量一致，但药物组合物中的化合物配比存在不同，各给药组的药物终 浓度均为50 μ g/L/孔。
[0015] 各给药组的药物重量比分别如下：
[0017] 细胞在上述培养基中培养3天后，进行MTT试验。具体结果如下：
[0019] 经过one-way ANOVA检验，组1和3较模型组具有显著的促进细胞增值作用 (p〈0. 01)，组5较其他给药组具有显著的促进细胞增值作用（p〈0. 01)。
[0020] 另外，将MG-63细胞按2X IO5个/孔接种于24孔板细胞培养24小时，血清饥饿 12小时后，余下处理与上述增殖试验相同。在细胞培养7天后，检测碱性磷酸酶（ALP)活 性，在细胞培养21天后，用茜素红染色吸光度值评估矿化结节的形成状况，具体结果如下：
[0022] 经过one-way ANOVA检验，组1和3较模型组具有显著的提高ALP活性作用 (p〈0. 01)，组5较其他给药组具有显著的提高ALP活性作用（p〈0. 01)。
[0023] 实施例2
[0024] 精密称取2g的药物组合物；0. 3g的羟丙甲基纤维素；0. 3g的壳聚糖；Ig的丙二 醇；然后将配方比的药物组合物和丙二醇溶于50ml水中，搅拌溶解，然后向溶液中加入壳 聚糖和羟丙甲基纤维素，溶解后加水定容至100mL，过0. 22 μ m微孔滤膜，灌装于带有定量 阀的喷雾瓶中。药物组合物配方比参见实施例1中组3、组5和组6。
[0025] 实施例3
[0026] 取1至2周岁的比格犬，体重15kg左右，随机分组，每组5只，然后采用硫喷妥钠 (25mg/kg)全身麻醉，拔除下颂双侧前磨牙、第1磨牙；饲养2个月后开始对模型组及各给 药组静脉注射20mg/kg的四氧嘧啶和12mg/kg的链脲霉素，从而进行糖尿病建模，对照组静 脉注射等量的生理盐水，连续注射15天后，在每个拔牙处切龈、翻瓣在牙槽骨内植如纯钛 螺纹状种植体（3mmX 8mm)，每侧2枚，术后静脉给予抗菌素，动物喂以软食十天，第10天拆 除缝线，之后正常饮食并且对给药组比格犬种植体部位给予实施例2制备的喷雾剂，每次 三噴，每喷喷量为〇. 5ml，每天三次，模型组及对照组给予不含药物组合物的喷雾剂（制备 方法同实施例2)，给药方案相同。连续给药1个月后处死所有比格犬，取下种植体，将颂骨 置于10%甲醛溶液中，固定1周，石蜡包埋，切片染色，通过计算机彩色病理图像采集系统 做骨组织形态学分析。并且在处死比格犬时取少许种植体周围牙龈组织，采用常规方法提 取总蛋白，通过ELISA方法检测组织中IL-I β、TNF- a、SOD和MDA的含量。
[0027] 具体结果如下：
[0028] 1、骨组织形态学分析结果
[0030] TbAr(Trabercular Area)为种植体周围松质区的骨量；CBLW(Combinded Bone lamella Width)为结合骨板宽度；OBN(Osteoblast Number)为成骨细胞个数。
[0031] 2、种植体周围组织中IL-I β、TNF- a、SOD和MDA的含量
[0033] 实施例4喷雾剂稳定性考察
[0034] 按照中国药典2010年版二部附录XIXC原料药与药物制剂稳定性试验指导原则， 将实施例2制备的喷雾剂（药物组合物配方参见组5)在高温条件下（温度为40°C ±2°C， 相对湿度为75% RH± 5 % RH)进行加速稳定性试验（6个月），采用HPLC法测定喷雾剂中测 定花生四烯酸、棕榈酸、还原型谷胱甘肽和维生素 C含量。另外，为了说明本发明辅料选择 性，特设定对比例进行对比，对比例制备方法同实施例2,区别仅在于对比例中不添加丙二 醇。
[0035] 实施例2制备喷雾剂稳定性试验结果
[0037] " ％ "代表与喷雾剂标示含量相比
[0038] 对比例制备喷雾剂稳定性试验结果
[0040] 本
【发明内容】
仅仅举例说明了要求保护的一些具体实施方案，其中一个或更多个技 术方案中所记载的技术特征可以与任意的一个或多个技术方案相组合，这些经组合而得到 的技术方案也在本申请保护范围内，就像这些经组合而得到的技术方案已经在本发明公开 内容中具体记载一样。
【主权项】
1. 可促进牙种植体周围成骨的口腔施用的药物组合物，其可以促进种植体周围的骨整 合，并提高种植成功率，其特征在于，其是由花生四烯酸、棕榈酸、还原型谷胱甘肽和维生素 C组成。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物的具体重量比为：1~ 10重量份的花生四烯酸、1~10重量份的棕榈酸、1~10重量份的还原型谷胱甘肽和1~ 10重量份的维生素C。3. 根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物的具体重量比为：6~ 8重量份的花生四稀酸、2~4重量份的棕榈酸、7~9重量份的还原型谷胱甘肽和1重量份 的维生素C。4. 根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物的具体重量比为：7重 量份的花生四烯酸、3重量份的棕榈酸、8重量份的还原型谷胱甘肽和1重量份的维生素C。5. 权利要求1-4任一项所述的药物组合物在制备促进牙种植体周围骨整合药物中的 应用。6. -种药物组合物的口腔喷雾剂，其由权利要求1所述药物组合物和药学上可接受的 辅料组成。7. 根据权利要求6所述的口腔喷雾剂，其特征在于，所述口腔喷雾剂的具体组成为：2g 的药物组合物；0. 3g的羟丙甲基纤维素；0. 3g的壳聚糖；lg的丙二醇；100ml的水。8. -种权利要求6或7所述的口腔喷雾剂的制备方法，具体为：将配方比的药物组合 物和丙二醇溶于50ml水中，搅拌溶解，然后向溶液中加入壳聚糖和羟丙甲基纤维素，溶解 后加水定容至l〇〇ml，过0. 22μm微孔滤膜，灌装于带有定量阀的喷雾瓶中。
【专利摘要】本发明属于医药生物领域，具体涉及具有促进牙种植体周围成骨作用的口腔施用组合物及其制剂。其可以促进种植体周围的骨整合，并提高种植成功率，其由花生四烯酸、棕榈酸、还原型谷胱甘肽和维生素C组成。
【IPC分类】A61K38/06, A61P1/02, A61K31/20, A61K9/12, A61K31/375, A61P19/08, A61K31/202
【公开号】CN105327333
【申请号】CN201510725924
【发明人】张静莹
【申请人】大连大学
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2015年10月30日