拉胶、单宁、水溶性壳 聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速150r/min，充分溶解30min，停止搅拌，升温，常压煮 沸lOmin，自然降至室温，继续降温至-0.5°C，保温3h，重复上述常压煮沸和低温保温操作4 次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速120r/min，均匀 混合，于功率400W，频率45KHz条件下进行超声波处理30min，同时在电场强度45kV/cm，脉冲 时间800ys，脉冲频率600Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.4μπι微孔膜过滤，除去 絮凝物，滤液无菌灌装即得储存稳定性好的奶牛护蹄喷雾。
[0081 ]经上述方法制备的护蹄喷雾保质期为48个月。
[0082] 实施例5
[0083] -种储存稳定性好的奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：
[0084]中草药提取液60份，芦荟提取物40份，植物提取物20份，改性膳食纤维13份，海藻 糖12份，单宁2份，水溶性壳聚糖2份，卡拉胶1份，葡萄籽原花青素1份，角蛋白酶0.5份，角质 酶0.1份；
[0085] 制备方法，包括如下步骤:按照配方，首先将中草药提取液、芦苔提取物和植物提 取物均匀混合，放入胶体磨中，调节定子和转子之间的间隙，使出口混合物粒径达到100μπι， 然后通过高压均质机于温度75°C，压力lOOMPa条件下循环4次，使得均质机出口物料粒径为 100nm，得到纳米粒子混合液;升温至75°C，保温，边搅拌边依次加入卡拉胶、单宁、水溶性壳 聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速130r/min，充分溶解30min，停止搅拌，升温，常压煮 沸5min，自然降至室温，继续降温至-0.5 °C，保温lh，重复上述常压煮沸和低温保温操作4 次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速l〇〇r/min，均匀 混合，于功率400W，频率35KHz条件下进行超声波处理30min，同时在电场强度35kV/cm，脉冲 时间800ys，脉冲频率400Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.4μπι微孔膜过滤，除去 絮凝物，滤液无菌灌装即得储存稳定性好的奶牛护蹄喷雾。
[0086] 经上述方法制备的护蹄喷雾保质期为45个月。
[0087] 实施例6
[0088] -种储存稳定性好的奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：
[0089]中草药提取液80份，芦荟提取物60份，植物提取物40份，改性膳食纤维17份，海藻 糖18份，单宁5份，水溶性壳聚糖5份，卡拉胶4份，甘草提取物4份，角蛋白酶1.5份，角质酶1 份；
[0090] 制备方法，包括如下步骤:按照配方，首先将中草药提取液、芦荟提取物和植物提 取物均匀混合，放入胶体磨中，调节定子和转子之间的间隙，使出口混合物粒径达到200μπι， 然后通过高压均质机于温度55°C，压力120MPa条件下循环2次，使得均质机出口物料粒径为 150nm，得到纳米粒子混合液;升温至65°C，保温，边搅拌边依次加入卡拉胶、单宁、水溶性壳 聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速150r/min，充分溶解20min，停止搅拌，升温，常压煮 沸lOmin，自然降至室温，继续降温至-1.5Γ，保温3h，重复上述常压煮沸和低温保温操作2 次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速120r/min，均匀 混合，于功率200W，频率45KHz条件下进行超声波处理lOmin，同时在电场强度45kV/cm，脉冲 时间600ys，脉冲频率600Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.2μπι微孔膜过滤，除去 絮凝物，滤液无菌灌装即得储存稳定性好的奶牛护蹄喷雾。
[0091] 经上述方法制备的护蹄喷雾保质期为42个月。
[0092] 实施例7本发明护蹄喷雾储藏稳定性试验
[0093] 护蹄喷雾作为一种主要由中草药提取液制备的液体制剂，参照中药液体制剂的稳 定性标准，将澄明度确定为护蹄喷雾的质量稳定性指标，它不仅直接反映了产品的外观质 量，亦反映了产品内在质量及稳定性，是护蹄喷雾最重要质控指标。
[0094] 澄明度表征方法:澄清透明90-100分;微浊80-89分;浑浊70-79分；较混浊60-69 分;严重浑浊50-59分;沉淀49分以下(沉淀颗粒越大、数量越多，分数越低）。
[0095] 将本发明实施例2制备的护蹄喷雾和市售同类型、同规格、同生产日期的护蹄喷雾 于室温、通风、避光条件储藏，观察护蹄喷雾澄明度，每6个月观察记录结果一次，结果见表 1：
[0096]表1:储藏期护蹄喷雾澄明度检测结果 ΓηηΡ7?
Lw%」 以上结朱衣明：不及明r蹄喷务和巾wr蹄喷务ffiK外观质重牧奸，利t喷务，个 会发生堵塞喷嘴、粘结喷雾器内壁等现象，随着时间的延长，护蹄喷雾液相相对不稳定，按 照护蹄喷雾的使用及药效标准，本发明护蹄喷雾保质期可达42-54个月，比市售(24个月）延 长18-30个月，同时也说明本发明内在质量较好，药效安全、稳定。
[0099] 需要说明的是:本发明实施例3-6制备的护蹄喷雾同样具有上述实验效果，各实施 例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0100] 实施例8本发明护蹄喷雾预防奶牛蹄病防疫试验
[0101] 1材料与方法
[0102] 1.1、试验材料
[0103] 1.1.1、本发明实施例2制备的护蹄喷雾和市售护蹄喷雾
[0104] 1.1.2、试验奶牛:试验在北京密云某一奶牛场进行，品种为中国荷斯坦奶牛2胎以 上围产期奶牛，共46头，均无蹄病，其中2胎16头，3胎12头，4胎10头，5胎8头。试验牛按胎次、 前期产奶量相同或相近的配对原则，分为实验组与对照组，每组23头。
[0105] 1.2、试验日粮组成：试验组和对照组采用同样的饲养管理方法。日粮组成为精料 (玉米52.7%、麸皮8%、豆柏7%、棉柏9%、花生柏9%、玉米0063 8%、预混料7115八6%)， 粗料为玉米青贮、羊草、豆穰、苜蓿等。
[0106] 1.3、试验方法:试验组和对照组分别喷雾防疫蹄病，试验组使用本发明实施例2制 备的护蹄喷雾，对照组使用市售护蹄喷雾，使用方法：1)将牛固定在颈夹;2)用清水冲洗蹄 子，包括趾间隙；3)将护蹄喷雾与无菌水按体积比1:1配比，使其浓度为50% ;4)用喷雾器将 护蹄喷雾喷于蹄背部、趾间隙、蹄底部;5)每周1次，连续喷雾3次为一个预防性防疫周期，每 季度一个防疫周期;6)试验期间观察、记录试验组和对照组奶牛各种蹄病发生情况，年底统 计蹄病发生率，结果如表2;所有供试奶牛饲喂场内自配的产奶精料4-8kg，根据饲养阶段和 产奶量进行调整，玉米青贮定量饲喂20kg/天，粗饲料(羊草、豆穰、苜蓿）自由采食。
[0107] 1.4、试验时间：试验期从2014年4月10日一2015年4月10日结束，历时一年。
[0108]表2:奶牛蹄病防疫结果
[0109]
[0110] 以上结果表明：本发明护蹄喷雾可有效防止奶牛各种体病的发生，尤其对腐蹄病、 蹄底溃疡、疣性皮炎及其它蹄病具有较好的防疫效果，与市售护蹄喷雾相比，其蹄病发生率 降低39.14%。同时也说明本发明护蹄喷雾具有较好的渗透性、粘结性、高效性。
[0111] 需要说明的是:本发明实施例3-6制备的护蹄喷雾同样具有上述实验效果，各实施 例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0112] 实施例9本发明护蹄喷雾在治疗奶牛蹄病时的效果试验
[0113] 为验证本发明护蹄喷雾的临床疗效，于2014年6月-2015年10月在河北省和内蒙古 自治区的三个奶牛养殖场，共选择320例奶牛蹄病，其中疣性皮炎100例，趾间增生60例，蹄 底溃疡70例，腐蹄病50例，其它类型蹄病40例，按照蹄病类型随机分为两组:试验组和对照 组，经养殖场兽医和修蹄工分别使用本发明实施例2制备的护蹄喷雾和市购护蹄喷雾进行 治疗，试验组和对照组除用药(护蹄喷雾)不同外，其它饲养和管理方式、日粮、治疗方法、饲 喂环境、疗效评定等均相同。
[0114] 病例选择标准:有明显跛行症状，喜趴卧，站立困难或站立时间较短；患肢负重不 实或各肢蹄交替负重;触诊患肢蹄温升高，叩诊时疼痛敏感。病牛表现精神沉郁，食欲不振， 产奶量下降，有时体温升高，可达40 °C以上。如病情加重，个别患病奶牛表现出一些全身症 状，重者患部红肿，卧地不起。
[0115] 护蹄喷雾使用方法：1)将牛固定在颈夹;2)用清水冲洗蹄子，包括趾间隙；3)将护 蹄喷雾与无菌水按体积比1:1配比，使其浓度为50% ; 4)用喷雾器将护蹄喷雾喷于蹄背部、 趾间隙、蹄底部的创伤处或病灶;5)每周2次，连续喷雾4次为一个治疗周期，康复后连续喷 雾3次即可。护蹄喷雾前三次的使用浓度为50%，之后每次的使用浓度为20%。试验组和对 照组各进行一个治疗周期。
[0116] 疗效判定标准:于用药后第7天、14天观察病牛症状，根据判定标准确定疗效。患牛 跛行消失，疼痛消失，肿胀消退，创面愈合为治愈;疼痛明显减轻，肿胀范围缩小，跛行减轻 或不明显为有效;疼痛不消失，肿胀无消退，跛行无消退，有运动障碍的为无效。总有效头数 等于痊愈和有效的头数总和。
[0117] 对治疗的结果进行统计和分析，具体如表3、4所示：
[0118] 表3:用药7天治疗结果
[0119]
[0120]表4:用药14天治疗结果
[0121]
[0122]以上结果表明：本发明护蹄喷雾可快速、有效治疗各种奶牛蹄病，对牛蹄病具有抑 菌抗感染、解毒收敛、去腐生肌和促进伤口愈合的作用，与市购护蹄喷雾相比渗透性强、药 效高、粘结性强。在用药7天时，其治愈率已达65.7-80%、总有效率达88.6-94% ;分别比对 照组（13.3-16 % )高49.7-66.7%和（55-80 % )和8.6-39% ;在用药14天时，其治愈率已达 90-96 %、总有效率达96 · 7-100 % ;分别比对照组(60-76 % )高 14-36 % 和（70-86 % ) 10 · 7-30%;达到同样的治疗效率，治疗时间至少缩短7天，特别是对疣性皮炎、腐蹄病和其它类型 的蹄病治疗效果最好，同时说明，治疗过程在不使用抗生素类药物辅助治疗时，本发明护蹄 喷雾治疗时间短、效率高，不仅降低了奶牛养殖成本、增加了养殖经济效益，而且提高了奶 牛深加工产品的食品安全性，同时还保护了养殖环境，杜绝了因使用抗生素、化学及有毒物 质产生的安全隐患，为应用护蹄喷雾治疗奶牛蹄病开辟了一条新的绿色捷径。
[0123] 需要说明的是:本发明实施例3-6制备的护蹄喷雾同样具有上述实验效果，各实施 例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0124] 实施例10本发明护蹄喷雾对奶牛生产性能、繁殖性能和防疾病的影响
[0125] 1材料与方法
[0126] 1.1、试验材料
[0127] 1.1.1、本发明产品
[0128] 1.1.2、试验奶牛:实施例9实验组和对照组经治疗蹄病的奶牛。
[0129] 1.2、试验日粮组成：试验组和对照组采用同样的饲养管理方法。日粮组成为精料 (玉米52.7%、麸皮8%、豆柏7%、棉柏9%、花生柏9%、玉米0063 8%、预混料7115八6%)， 粗料为玉米青贮、羊草、豆穰、苜蓿等。
[0130] 1.3、试验方法:根据奶牛配种记录，试验组除与对照组采取同样的方法饲喂，所有 供试奶牛饲喂场内自配的产奶精料4_8kg，根据饲养阶段和产奶量进行调整，玉米青贮定量 饲喂20kg/天，粗饲料(羊草、豆穰、苜蓿）自由采食。
[0131] 1.4、生产、代谢、繁殖性能记录:在产后120天期间内测定和记录每头奶牛的产奶 量;观察、评价奶牛体况;检测繁殖性能;在产后120天期间内观察记录参试奶牛的发情配种 情况，妊娠与否以配种后60天直肠检查为准。
[0132] 1.5、疾