专利名称：：清洁用酶和臭味预防的制作方法
技术领域：
：本发明提供了包含酰基转移酶和酰基转移酶的醇底物的组合物。在一些特别优选的实施方式中，组合物可用于生产芳香酯。在一些其它实施方式中，组合物可用于洗衣洗涤剂，以清洁含有至少一种甘油三酯的污渍。在另外一些实施方式中，组合物用于生产具有清洁性质的化合物(例如表面活性酯)。
背景技术：
：当用含有脂肪酶的洗衣洗涂剂来清洗衣物，特别是5f皮奶制品(例如，奶、冰淇淋或黄油)玷污的衣物时，衣物干燥后，通常会从织物中散发出类似嬰儿"呕咳物"或变质黄油的不愉悦的味道。人们认为，这种臭味是脂肪酶催化水解存在于织物和/或洗涤衣物中的短链甘油三酯(例如，含C4至C12的甘油三酯)产生的。这种水解反应产生了具有不愉悦的味道、挥发性并且导致持续臭味的短链脂肪酸(例如，丁酸)。尽管在臭味预防和/或向衣物添加愉人香味方面进行了很多研究，但是本领域中仍需要解决该问题的洗衣组合物。
发明内容本发明提供了包含酰基转移酶和酰基转移酶的醇底物的组合物。在一些特别优选的实施方式中，组合物可用于生产芳香酯。在一些其它实施方式中，组合物可用于洗衣洗涤剂，以清洁含有至少一种甘油三酯的污渍。在另外一些实施方式中，组合物用于生产具有清洁性质的化合物(例如表面活性酯)。本发明提供了包含酰基转移酶以及酰基转移酶的醇底物的清洁组合物，其中，所述酰基转移酶和醇底物以在清洁組合物与酰基供体组合时能有效产生可检测到的酯的量存在。在一些实施方式中，酰基转移酶是SGNH酰基转移酶。在一些其它实施方式中，清洁组合物还包含酰基供体和作为酰基转移酶催化的醇底物和酰基供体之间的反应结果产生的酯。在又一些实施方式中，酰基转移酶是SGNH酰基转移酶，特别是AcT。在还一些实施方式中，酯是织物护理剂。在另一些实施方式中，织物护理剂是酯表面活性剂。在又一些实施方式中，酯是芳香酯。在一些实施方式中，酰基供体存在于物体上的污渍中。在一些其它实施方式中，含有酰基供体的物体被酰基供体弄脏了。在还一些实施方式中，酰基供体是C1至C18的酰基供体。在一些其它实施方式中，清洁组合物不包含脂肪酶，而在一些备选的实施方式中，清洁组合物还包含脂肪酶。在一些其它实施方式中，清洁组合物还包含蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶、角质酶、果胶酸裂合酶、甘露聚糖酶或氧化还原酶。在一些其它实施方式中，清洁组合物还包含至少一种表面活性剂、助洗剂、聚合物、盐、漂白活化剂、漂白系统、溶剂、緩冲剂或香料。本发明还提供了下述用于清洁的方法，所述方法包括将酰基转移酶、酰基转移酶的醇底物和酰基供体组合起来，其中，酰基转移酶催化酰基基团从酰基供体转移到醇底物上，产生织物护理产物。在又一些实施方式中，酰基转移酶是SGNH酰基转移酶。在一些实施方式中，SGNH酰基转移酶是AcT。在还一些实施方式中，酯是织物护理剂。在另一些实施方式中，织物护理剂是酯表面活性剂。在又一些实施方式中，酯是芳香酯。本发明还提供了包含SGNH酰基转移酶和SGNH酰基转移酶的醇底物的清洁组合物，其中，SGNH酰基转移酶和醇底物以在清洁组合物与酰基供体接触时能有效产生可检测到的酯的量存在。在一些实施方式中，清洁組合物还包含含有酰基供体的物体以及作为SGNH酰基转移酶催化的醇底物和酰基供体之间的反应结果产生的酯。在又一些实施方式中，酰基供体是C1至C18或C1至C10的酰基供体。在额外的实施方式中，酰基供体是含有酰基供体的物体。在再一些实施方式中，含有酰基供体的物体被酰基供体弄脏了。在一些优选的实施方式中，物体被乳制品玷污。在另一些实施方式中，清洁组合物不包含脂肪酶，而在一些备选的实施方式中，清洁组合物还包含脂肪酶或至少一种脂肪酶。在又一些其它实施方式中，清洁组合物是水性组合物。在一些优选的实施方式中，水性组合物除任何固体组分之外包含至少90%的水。在另一些实施方式中，酯是酯表面活性剂或芳香酯。在一些其它实施方式中，清洁组合物还包含至少一种表面活性剂。在另一些实施方式中，清洁组合物还包含过氧化物来源。在一些其它实施方式中，本发明提供了还包含至少一种蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶、角质酶、果胶酸裂合酶、甘露聚糖酶和/或氧化还原酶或其混合物的清洁组合物。在再一些实施方式中，本发明的清洁组合物包含至少一种表面活性剂、助洗剂、聚合物、盐、漂白活化剂、漂白系统、溶剂、緩沖剂和/或香料或其混合物。本发明还提供了下述用于清洁的方法，所述方法包括将SGNH酰基转移酶、SGNH酰基转移酶的醇底物和被含酰基供体的物质弄脏的物体组合起来，其中，SGNH酰基转移酶能催化酰基基团从酰基供体转移到醇底物上，从而产生酯。在一些实施方式中，酯是C4至C6的羧酸酯。在一些优选的实施方式中，酯是丁酸酯或丁酸千酯。在还一些实施方式中，酯是伯醇和C4至C6脂肪酸的酯。在另一些实施方式中，物体是织物。在一些优选的实施方式中，织物被含油物质弄脏了。在一些特别优选的实施方式中，织物被含三酰甘油的物质弄脏了。在还一些实施方式中，含三酰甘油的物质含有C4-C18三酰甘油。在另外一些实施方式中，SGNH酰基转移,化酰基基团从织物上存在的酰基供体转移到醇底物上，从而产生芳香酯。在再一些实施方式中，SGNH酰基转移酶的醇底物还作为表面活性剂或乳化剂发挥作用。在又一些实施方式中，SGNH酰基转移酶催化酰基基团从酰基供体转移到表面活性剂或乳化剂上，从而产生酯。在一些其它实施方式中，所述方法还包括将过氧化物来源与SGNH酰基转移酶组合起来，所述方法导致产生过酸。本发明提供了包含酰基转移酶(例如SGNH酰基转移酶)和酰基转移酶的醇底物的清洁组合物。在这些实施方式中的一些中，酰基转移酶和醇底物以在清洁组合物与含酰基供体的物体接触时能有效产生可检测到的酯的量存在。在一些实施方式中，清洁组合物还包含含酰基供体的物体和作为酰基转移酶催化的醇底物与酰基供体之间的反应的结果产生的酯。在一些优选的实施方式中，酰基供体是Cl至C10的酰基供体。在一些其它实施方式中，清洁组合物还包含加入的与醇底物反应的酰基供体(例如甘油三酯、脂肪酸酯等)。在一些特别优选的实施方式中，组合物产生的酯是芳香酯、表面活性酯、表面活性剂或织物护理剂或它们的组合。在一些实施方式中，含酰基供体的物体被酰基供体弄脏了。在一些优选的实施方式中，酰基供体是油性物质，例如动物脂肪、植物脂肪、奶制品等。在另一些优选的实施方式中，酰基供体和醇底物的组合导致芳香酯、表面活性酯、水溶性酯或织物护理剂或其任何组合的产生。事实上，本发明意欲提供益处的组合。在一些实施方式中，清洁組合物还包含至少一种脂肪酶。在一些其它实施方式中，清洁组合物还包含至少一种表面活性剂和/或至少一种过氧化物来源。在一些实施方式中，清洁组合物的表面活性剂或乳化剂作用于醇底物，用于酰基转移。在另一些实施方式中，本发明的清洁组合物还包含至少一种额外的酶，它们包括但不限于半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、果胶酸裂合酶、淀粉酶、甘露聚糖酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、malanases、p-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶和淀粉酶或其混合物。在一些实施方式中，使用包含常规可应用的酶(例如蛋白酶、脂肪酶、角质酶和/或纤维素酶)与酰基转移酶的酶组合(即"混合物")。9在另一些实施方式中，清洁组合物还包含至少一种表面活性剂、助洗剂、聚合物、盐、漂白活化剂、溶剂、緩沖剂或香料等，如本文更详细描述的。在一些实施方式中，清洁组合物是水性组合物。在一些优选的实施方式中，清洁组合物除了任何固体组分之外包含至少大约90%的水。本发明还提供了利用本文提供的清洁组合物的清洁方法。这些方法通常包括将酰基转移酶(例如，SGNH酰基转移酶)、酰基转移酶的醇底物和被含酰基供体的物质弄脏的物体(例如织物)组合，其中，酰基转移酶能催化酰基基团从酰基供体转移到醇底物上，从而产生酯。在一些实施方式中，物体净皮含油物质(例如，含三酰甘油的物质，例如，含C4-C18三酰甘油的物质)弄脏。在一些优选的实施方式中，含油物质与醇组合，产生的酯是芳香酯，而在一些其它实施方式中，产生是非芳香酯，在又一些实施方式中，产生了表面活性剂或其它织物护理剂或这些酯的组合。在这些实施方式中的一些中，使用酰基转移酶，通过与脂肪酶协同工作，增加从三酰甘油去除酰基链的速率；和/或将酰基链与醇底物连起来，由此形成酯产物而非挥发性脂肪酸，从而降低甘油三酯水解通常产生的臭味的量。在一些特别优选的实施方式中，本发明还提供了用于产生芳香酯的组合物。在一些实施方式中，组合物包含酰基转移酶(例如，SGNH酰基转移酶)、酰基转移酶的醇底物和酰基供体，其中，酰基转移酶能在水性环境中催化酖基基团从酰基供体转移到醇底物，从而产生芳香酯。在一些特别优选的实施方式中，醇底物和酰基供体被用来产生特别的芳香酯。在一些实施方式中，组合物是还包含芳香酯的水性组合物。在一些其它实施方式中，组合物是脱水的组合物，其中在随后对组合物进行再水化时产生芳香酯。在一些实施方式中，酰基供体向醇底物提供C1至C10的酰基链。在一些特别优选的实施方式中，用于产生芳香酯的组合物是清洁组合物。在一些实施方式中，酰基转移酶被固定到固相支持体上。在另一些实施方式中，组合物包含食品。在一些其它实施方式中，組合物是清洁组合物。在再一些实施方式中，组合物还含有至少一种表面活性剂。本发明还提供了利用本文提供的组合物来产生至少一种芳香酯的方法。通常，这些方法包括将酰基转移酶(例如SGNH酰基转移酶)、酰基转移酶的醇底物和酰基供体组合起来，其中，酰基转移酶催化酰基基团从酰基供体转移到醇底物上，从而产生芳香酯。在一些实施方式中，醇底物和酰基供体产生了特别的芳香酯。在组合物被脱水的一些实施方式中，所述方法包括在组合之后对组分进行再水化的步骤。在一些实施方式中，通过加入任何合适的水性介质，包括水、奶或唾液来进行再水化。因此，在一些实施方式中，在咀嚼期间发生再水化，以释放芳香酯。在一些其它实施方式中，醇底物和酰基供体在水性环境中组合。附图简述当参考附图阅读时，能最好地理解下文详细描述的内容的某些方面。应当强调，根据通常的实践，附图的多个特征并不代表量度。相反，为清楚而言，多个特征的尺寸可任意扩大或缩小。图l提供的图显示了用甘油三丁酸酯(tributyrin)和两种酰基转移酶时顺-3-己烯醇、2-苯基乙醇和2-甲基-l-丁醇向其各自的丁酰酯的转化。图2提供的图显示了在10、30和120分钟时酰基转移酶(AcT)的游离和溶胶-凝胶包裹形式用于用甘油三乙酸酯来对顺-3-己烯醇的酯化的比较。图3提供了LC/MS数据的组图，其显示了在洗涤剂背景中使用甘油三丁酸酯和AcT对四甘醇的酯交换。图4提供了LC/MS数据的组图，其显示了在洗涤剂背景中使用甘油三丁酸酯和AcT对"C-U-甘油的酯交换。脂肪酶和AcT时从乳脂和苯甲醇产生丁酸千酯。图6提供了对用于从乳脂生产芳香酯的一种示例性方法的阐述。图7提供了对来自蛋黄/山梨糖醇与1)KLM3突变体pLA231和2)对照温育的脂类TLC分析。在该图中，"PE"是磷脂酰乙醇胺，"PC，，是磷脂酰胆碱。图8提供了经KLM3，pLA231处理的样品2467-112-1:蛋黄/山梨糖醇的GLC色i普图。图9提供了对样品2467-112-2:蛋黄/山梨糖醇对照样品的GLC色傳图。图10提供了从GrindstedSMO鉴定的山梨糖醇单油酸酯的GLC/MS镨和在用KLM3pLA231处理的蛋黄/山梨糖醇(2467-112-1)中鉴定的峰的MSi脊。发明详述本发明提供了包含酰基转移酶和酰基转移酶的醇底物的组合物。在一些特别优选的实施方式中，组合物可用于生产芳香酯。在一些其它实施方式中，組合物可用于洗衣洗涤剂，以清洁含有至少一种甘油三酯的污渍。在另一些实施方式中，组合物被用于生产具有清洁性质的化合物(例如，表面活性酯)。除非另有指明，本发明的某些方面的实践涉及分子生物学、微生物学、蛋白质纯化、蛋白质工程、蛋白质和DNA测序以及重组DNA领域中的常用的常规技术，它们是本领域技术人员已知的。本文提到的所有专利、专利申请、文章和公开文献，包括上文和下文中提到的，都通过引用明确并入本文。此外，本文提供的标题并非是对本发明的多个方面或实施方式的限制，可参照作为整体的说明书而得到所述标题。因此，下文示出的术语将参照作为整体的说明书进行更详细地定义。但是，为方便对本发明的理解，下文对多个术语进行了定义。定义除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域的普通技术人员通常的理解相同的含义。虽然与本文的描述相似或等同的任何方法和材料都可用于本文所述的实践，但本文仍描述了示例性的方法和材料。在本文中使用时，除非上下文另有清楚指示，单数术语"一个/种"和"这个/种"("a"、"an"和"the")也包括复数指代。除非另有指明，分别地，核酸是按照5，至3，的方向从左到右书写的；氨基酸是按照氨基到羧基的方向从左到右书写的。应当理解，本发明并不限于所述的具体方法、方案和试剂，它们可根据本领域技术人员使用它们的背景而有所改变。应当注意，本说明书通篇中给出的每个最大数值限制包括每一个更低的数值限制，就好像在本文中明确给出了这些更低的数值限制。本说明书通篇中给出的每个最小数值限制也将包括每一个更高的数值限制，就好像在本文中明确给出了这些更高的数值限制。本说明书通篇中给出的每个数值范围也将包括落在此类较宽数值范围内的每一个较窄的数值范围，这就好像在本文中明确给出了这些较窄的数值范围。在本文中使用时，术语"酰基基团"表示式(RC=0-)的有机基团。在本文中使用时，术语"酰化"表示将酰基(RCO-)基团从一个分子("酰基供体")转移到另一个分子("底物")上的化学反应，通常这通过用酰基基团取代底物-OH基团的氢来实现。在本文中使用时，术语"酰基供体"指在酰基转移反应中提供酰基基团的分子。在本文中使用时，术语"醇底物，，指包含与碳原子结合的反应活性羟基(-OH)的任何有机分子。该术语不包括多糖和蛋白质。水不是醇底物。示例性的醇底物包括但不限于脂肪族醇、脂环族醇和芳香族醇、薛烯醇和多元醇(包括单体、二聚、三聚和四聚多元醇)。在一些实施方式中，醇含有一个以上羟基。醇底物能在下文所述的酰基转移反应中接受酰基基13团。在一些实施方式中，醇是伯醇、仲醇或叔醇。在本文中使用时，术语"转移酶"指能催化官能化合物向一系列底物转移的酶。术语"酰基转移酶"在本文中使用时指通常被分类为E.C.2丄l.x的酶，它们能将酰基基团从酰基供体(例如脂类)转移到醇底物上。在本文中使用时，术语"GDSX酰基转移酶"指具有含GDSX序列基序(其中X通常是L)(通常在N-末端附近)的区分性活性位点的酰基转移酶。GDSX酶具有5条共有序列(I-V)。这些酶是已知的(见，例如，Upton"ff/"TrendsBiochem.Sci，20:178-179[1995和Akoh"/.，Prog.LipidRes"43:534-52[2004)。GDSX酰基转移酶的一个亚组在共有序列中含有保守的SG和H残基。这些GDSX酰基转移酶被称为"SGNH酰基转移酶"。在本文中使用时"SGNH酰基转移酶"指SGNH水解酶家族的酰基转移酶，其中，SGNH水解酶家族的成员含有SGNH水解酶类型的酯酶结构域，其具有三层的a/p/a结构，其中，p-片层由五条平行链构成。含有该结构域的酶作为酯酶、脂肪酶和酰基转移酶发挥作用，但是与典型脂肪酶仅有极少的序列同源性(见Akoh""，Prog.LipidRes.，43:534-552[2004J和Wei"Nat.Struct.Biol"2:218-221995)。已在多个物种中发现了含SGNH水解酶类型的酯酶结构域的蛋白，这包括但不限于来自疮痂病链霉菌(A^pto/wyc^"fl^ey)的酯斷见SheffieldProteinEng.,14:513-519[2001)、来自流感C病毒、冠状病毒和环状病毒的病毒血细胞凝集素酯酶表面糖蛋白的酯酶(见，MolgaardWfl/.，ActaCrystallogr.D58:111-119[2002]);哺乳动物乙酰水解酶(见,Lo"a/.,J.Mol.Biol.，330:539-551[2003)；真菌鼠李糖半乳糖醛酸聚糖乙酰酯酶(见，MolgaardW"/.,Structure8:373-383[2000)和来自大肠杆菌的多功能酶碌u酯酶I(TAP)(见，Molgaard"a/.，ActaCrystallogr.D60:472-478[2004)。SGNH水解酶类型的酯酶结构域含有独特的氬键网络，其稳定它们的催化中心。在一些优选的实施方式中，它们含有保守的Ser/Asp/His催化三联体。SGNH酰基转移酶还以检录号cd01839.3被描述于GENBANK⑧数据库(通过引用并入本文)的保守结构域数据库中。SGNH酰基转移酶在与酰基供体接触时形成酰基-酶中间体，并将酰基基团转移到除了水之外的受体上。在本文中使用时，术语"典型脂肪酶"指具有脂肪酶活性以及标志性GXSXG基序(其含有活性位点丝氨酸)的酶(见，例如，DerewendaWa/.,BiochemCellBiol.，69:842-1991)。在一些实施方式中，典型脂肪酶是三酰甘油酯脂肪酶，其具有针对三酰甘油酯的和s"3位置的特异性。SGNH酰基转移酶和GDSL酰基转移酶具有相似的结构，两者都在结构上与典型脂肪酶不同。术语"酯交换"在本文中使用时指酶催化的酰基基团从脂类供体(非游离脂肪酸)转移到酰基受体(非水)上。在本文中使用时，术语"醇解，，指酶催化的通过与醇ROH的反应来对酸衍生物的共价键进行的切割，使得产物之一与醇的H组合，另一产物与醇的OR基团组合。在本文中使用时，术语"水解"指酶催化的酰基基团从脂类转移至水分子的OH基团。在本文中使用时，术语"水性"用于短语"水性組合物"和"水性环境"中时指由至少大约50%的水构成的组合物。在一些实施方式中，水性组合物包含至少大约50%的水，至少大约60%的水，至少大约70%的水，至少大约80%的水，至少大约卯％的水，至少大约95%的水或者至少大约97%的水。在一些实施方式中，水性组合物的剩余部分的一部分包含至少一种醇。在一些优选的实施方式中，术语"水性"指较之蒸馏水而言具有至少大约0.75，至少大约0.8，至少大约0.9或者至少大约0.95的水活度(Aw)的组合物。在本文中使用时，术语"芳香酯"指具有愉人香气或味道的酯。该术语包括芳香酯和香p未酯(flavorsomeesters)。这些酯是本领域中公知的。在本文中使用时，术语"织物护理剂"指具有清洁性质和/或给织物带来益处的化合物。此类化合物包括表面活性剂和乳化剂。在一些实施方式中，织物护理剂赋予软化、织物手感的改进、消除起球、颜色驻留等益处。在本文中使用时，术语"表面活性酯"指具有表面活性剂性质的酯，其中，表面活性剂是降低液体表面张力的化合物。在本文中使用时，术语"可检测到的香味，，指可由人的鼻子或味蕾检测到的芳香酯的量。以仅可通过质语仪而非人的鼻子或味蕾检测到的量存在的芳香酯并非可检测到的香味。在本文中使用时，术语"物体"指待清洁的物体。其意欲表示，本发明包括适于清洁的任何物体，这包括但不限于织物(例如，衣物)、内饰、地毯、硬表面(例如，工作台、地板等)或餐具(例如，盘、杯、碟、碗、刀叉、银器等)。在本文中使用时，术语"玷污，，或"弄脏"表示物体脏了。对于被玷污的物体来说，污渍并不必肉眼看见。例如，被玷污或弄脏的物体指含有来自动物(例如奶制品)、植物、人汗液等的脂肪物质的物体(例如织物)。在本文中使用时，术语"奶制品"指奶(例如，全脂、低脂、脱脂奶或酪乳)或者由其制得的产品，例如，任何类型的奶酪(例如，奶油奶酪、硬奶酪、软奶酪等)、黄油、酸奶和冰淇淋。事实上，本发明并不限于任何特定奶制品的，任何基于奶的产品都被该定义所包括。在本文中使用时，术语"含酰基供体的物体"指包含酰基供体的物体(例如，甘油三酯)。在一些实施方式中，酰基供体作为污渍存在。在本文中使用时，术语"固定的"在固定的酶的上下文中表示酶被固定(例如束缚)到基质(例如固体或半固体的支持体)上，而非在溶液中游离。在本文中使用时，术语"在溶液中"指并没有固定到基质上并且在液体组合物中游离的分子(例如酶)。在本文中使用时，术语"有效......的量"和"有效量"在短语"有效产生可检测到的酯的量"的上下文中指在所使用的条件下产生想要的产品的组分(例如，酶、底物、酰基供体或其任何组合)的量。在本文中使用时，术语"过氧化氢来源，，包括过氧化氢以及能自发或酶促产生过氧化氢作为反应产物的系统的组分。在本文中使用时，"个人护理产品"指用于毛发、皮肤、头皮和牙齿的清洁、漂白和/或消毒的产品，其包括但不限于洗发水、润肤露、沐浴露、局部保湿剂、牙膏和/或其它局部清洁剂。在一些特别的实施方式中，这些产品用于人类，在一些其它实施方式中，这些产品可用于非人类的动物(例如，兽用应用中)。在本文中使用时，"清洁组合物"和"清洁制剂"指可用于从待清洁的物体(例如织物、餐具、隐形眼镜、其它固体基质、毛发(洗发水)、皮肤(肥皂和霜剂)、牙齿(漱口水、牙膏)等)去除不想要的化合物的组合物。该术语包括针对想要的特定类型的清洁组合物和产品形式(例如，液体、凝胶剂、粒剂或喷雾组合物)选择的任何材料/化合物，只要组合物与酰基转移酶和组合物中存在的任何其它酶和/或组分相容即可。考虑到待清可容易地对清洁组合物材料加以特别的选择。所述术语还指适于对任何物体和/或表面进行清洁、漂白、消毒和/或灭菌的任何组合物。所述术语意欲包括但不限于洗涤剂组合物(例如，液体和/或固体洗衣洗涤剂和精细织物洗涤剂，适于清洁玻璃、木材、陶f:和金属台面和窗户等的硬表面清洁制剂；地毯清洁剂；炉灶清洁剂；织物清新剂(fresheners);织物软化剂和纺织品和洗衣预去渍剂以及餐具洗涤剂)。事实上，除非另有指明，术语"清洁组合物"在本文中使用时包括粒剂或粉剂形式的所有用途的或重负荷洗涤剂，尤其是清洁洗涤剂；液体、凝胶剂或糊剂形式的所有用途的洗涤剂，尤其是重负荷液体(HDL)类型的；液体精细织物洗涤剂；手洗餐具洗涤剂或轻负荷餐具洗涤剂，尤其是高泡沫类型的那些；机洗餐具洗涤剂，包括多种片状、颗粒、液体和漂洗辅助类型的，用于家庭和公共机构的；液体清洁和消毒剂，包括抗细菌的洗手类型的、清洁条块(cleaningbars)、漱口水、口齿清洁剂、车或地毯清洗剂、浴室清洁剂；洗发水和染发液；沐浴露和泡沫浴露以及金属清洁剂；以及清洁用助剂例如漂白添加剂和"污渍贴"、"预处理"和/或"预洗涤"类型的。在本文中使用时，用术语"洗涤剂组合物"和"洗涤剂制剂"表示意欲用于清洁被弄脏的物体的洗涤介质中的混合物。在一些实施方式中，在提到对织物和/或衣服进行洗涤时使用该术语(例如"洗衣洗涤剂")。在一些备选的实施方式中，该术语指其它洗涤剂，例如用于清洁餐具、银器、刀叉等的洗涤剂(例如"餐具洗涤洗涤剂")。本发明不欲受到任何特别的洗涂剂制剂或组合物的限制。事实上，除了酰基转移酶之外，该术语还包括含有表面活性剂、其它转移酶、水解酶和其它酶、氧化还原酶、助洗剂、漂白剂、漂白活化剂、蓝色试剂和焚光染料、结块抑制剂、掩蔽剂、酶活化剂、抗氧化剂和增溶剂的洗涂剂。在本文中使用时，术语"硬表面清洁组合物"指用于清洁硬表面，例如地板、台面、橱拒、墙壁、瓷砖、浴室和厨房设备等的洗漆剂组合物。此类组合物以任何形式提供，其包括但不限于固体、液体、乳液等。在本文中使用时，"餐具洗涤组合物"指用于清洁餐具和用于食物消费和/或食物操作的其它器具的所有形式的组合物，其包括但不限于凝胶剂、粒剂和液体形式。在本文中使用时，"织物清洁组合物，，指用于清洁织物的所有形式的洗涤剂组合物，其包括但不限于凝胶剂、粒剂、液体和棒剂形式。在本文中使用时，"纺织品"指机织织物以及适于转化为或用作为纱线、机织物、编织品和非机织织物的短纤维(staplefibers)和纤丝(filament)。该术语包括从天然以及合成(例如人造)纤维制造的纱线。在本文中使用时，"纺织品材料"是用于纤维、纱线中间物、纱线、织物和从织物制造的产品(例如衣服和其它产品)的一般性术语。在本文中使用时，"织物"包括任何纺织品材料。因此，该术语意欲包括衣服以及织物、纱线、纤维、非机织材料、天然材料、合成材料以及任何其它纺织品材料。在本文中使用时，术语"相容，，表示在正常使用情况下，清洁组合物材料不将酰基转移酶的酶促活性降低到酰基转移酶不能像所期待的那样有效的程度。在下文中详细示例了一些特定的清洁组合物材料。在本文中使用时，"酶的有效量"表示实现特定应用(例如个人护理产品、清洁組合物等)中需要的除&活性所必需的酶的量。此类有效量是本领域普通^R术人员易于确定的，它们基于很多因素，例如所使用的具体的酶或变体，清洁应用，清洁组合物的特定组成以及是否需要液体、凝胶或干的(例如颗粒、条形)组合物等。在本文中使用时，"非织物清洁组合物"包括硬表面清洁组合物、餐具洗涤组合物、个人护理清洁组合物(例如口腔清洁组合物、口齿清洁组合物、个人清洁组合物等)以及适用于纸浆和造纸工业的组合物。在本文中使用时，术语"酶促转化，，指通过将底物或中间产物与酶相接触将底物改变为中间产物或将中间产物改变为终产物。在一些实施方式中，通过将底物或中间产物直接暴露给合适的酶来进行接触。在一些其它实施方式中，接触包括将底物或中间产物暴露给表达和/或分泌所述酶，和物。在本文中使用时，"目的蛋白质，，指被分析、鉴定和/或修饰的蛋白质(例如酶或"目的酶，，)。天然存在的目的蛋白质和重组蛋白都可用于本发明。在本文中使用时，"蛋白质"指由氨基酸组成并被本领域技术人员识别为蛋白质的任何组合物。术语"蛋白质"、"肽"和多肽在本文中可互换使用。其中肽是蛋白质的一部分的情况下，本领域技术人员理解上下文中所述术语的使用。在本文中使用时，功能上和/或结构上相似的蛋白质被认为是"相关蛋白质"。在一些实施方式中，这些蛋白质源于不同的属和/或种，包括生物的纲之间的差异(例如，细菌蛋白质和真菌蛋白质)。在一些实施方式中，这些蛋白质源于不同的属和/或种，包括生物的纲之间的差异(例如，细菌酶和真菌酶)。在另外一些实施方式中，提供了来自相同物种的相关蛋白19质。事实上，本发明并不限于来自任何特别来源的相关蛋白质。此外，术语"相关蛋白质"包括三级结构同源物和一级序列同源物.在另一些实施方式中，该术语包括有免疫交叉反应性的蛋白质。在本文中使用时，术语"衍生物"是指通过在C-和N-末端之一或二者添加一个或多个氨基酸，在氨基酸序列的一个或多个不同位点取代一个或多个氨基酸，和/或在蛋白质的一端或两端或氨基*列的一个或多个位点缺失一个或多个氨基酸，和/或在氨基酸序列的一个或多个位点插入一个或多个氨基酸而从该蛋白质获得的蛋白质。蛋白质衍生物的制备可通过对编码天然蛋白质的DNA序列加以修饰，将该DNA序列转化进合适的宿主以及表达经修饰的DNA序列以形成衍生蛋白质来实现。相关(以及衍生)蛋白质包含"变体蛋白质"。在一些实施方式中，变体蛋白质与亲本蛋白质不同，互相之间有少量的氨基酸残基差异。有差异的氨基酸残基的数量可以是一个或多个(例如大约l、大约2、大约3、大约4、大约5、大约IO、大约15、大约20、大约30、大约40、大约50或更多个)氨基酸残基。在一些实施方式中，变体之间不同氨基酸的数量在大约1至大约IO个之间。在一些特别的实施方式中，相关蛋白质以及特别是变体蛋白质包含至少大约35%，大约40%，大约45%，大约50%,大约55%，大约60%，大约65%，大约70%，大约75%,大约80%,大约85%,大约90%，大约95%，大约97V。，大约98%或大约99%的氨基酸序列同一性。此外，本文中使用的相关蛋白质或变体蛋白质指在显著区域的数量方面与另一相关蛋白质或亲本蛋白质有所不同的蛋白质。例如，在一些实施方式中，变体蛋白质具有与亲本蛋白质不同的大约l、大约2、大约3、大约4、大约5或大约IO个相应的显著区域。本领域已知有若干方法适于产生本发明的酶的变体，所述方法包括但不限于位点饱和诱变、扫描诱变、插入诱变、随机诱变、定点诱变和定向进化以及多种其它重组方法。在一些实施方式中，对同源蛋白质进行工程改造，以产生具有想要的活性的酶。在一些实施方式中，经工程改造的蛋白质被包括在SGNH水解20酶蛋白质家族中。在一些实施方式中，经工程改造的蛋白质包含下述保守残基中的至少一个或其组合L6、W14、W34、L38、R56、D62、L74、L78、H81、P83、M90、K97、GllO、LI14、L135、F180、G205。在一些备选的实施方式中，这些经工程改造的蛋白质包含GDSL-GRTT和/或ARTT基序。在另一些实施方式中，酶是多聚体，其包括但不限于二聚体、八聚体和四聚体。在一些实施方式中，为建立一级结构的同源性，将酰基转移酶的氨基酸序列与酰基转移酶的一级氨基酸序列以及与在序列已知的所有酰基转移酶中已知不变的一组残基直接相比较。对保守残基加以比对之后(其中允许必要的插入和缺失以保持比对(即，避免由于任意缺失和插入导致保守残基消除))，与酰基转移酶一级序列中特定氨基酸等同的残基被确定。在一些实施方式中，对保守残基的比对确定了100%的等同残基。但是，对超过大约75%或者低至大约50%的保守残基的比对也足以确定等同残基。在一些实施方式中，催化性的丝氨酸和组氨酸残基的保守性被保持。在一些实施方式中，保守残基可用于确定其它酰基转移酶(例如，来自分枝杆菌属(j的物种以及任何其它生物的酰基转移酶)中包皮垢分枝杆菌(Ms/we^mi似9酰基转移酶的相应等同氨基酸残基。在本发明的一些实施方式中，WO05/056782中提供的编码包皮祐分枝杆菌酰基转移酶的DNA序列被修饰。在一些实施方式中，下述残基被修饰Cys7、AsplO、Serll、Leul2、Thrl3、Trpl4、Trpl6、Pro24、Thr25、Leu53、Ser54、Ala55、Thr64、Asp65、Arg67、Cys77、Thr91、Asn94、Asp95、Tyr99、Val125、Pro138、Leul40、Pro146、Pro148、Trpl49、Phel50、IIel53、Phel54、Thrl59、Thrl86、Ilel92、Ilel94和Phel96。然而，本发明并不欲限于在这些位置被修饰的序列。事实上，本发明意欲包括多种修饰和修饰的组合。在一些其它实施方式中，通过在其三级和四级结构已通过x4t线晶体学确定的酰基转移酶的三级和四级结构水平上确定同源性来定义等同残基。就该上下文来说，"等同残基，，被定义为这样的残基比对后，羰基水解酶和包皮垢分枝杆菌酰基转移酶的特定氨基酸残基的两个或多个主链原子的原子坐标在大约0.13nm和大约0.1nm内(N对N、CA对CA、C对C以及O对O)。在最佳模型被定向及定位，以实现所讨论的酖基转移酶与包皮垢分枝杆菌酰基转移酶非氢的蛋白质原子的原子坐标的最大重叠之后，达成比对。如本领域所已知的，最佳模型是在可获得的最高分辨率下针对实验衍射数据实现最低R因子的晶体模型。功能上和/或结构上与包皮垢分枝杆菌酰基转移酶的特定残基类似的等同残基被定义为优先采用下述构象的酰基转移酶的那些氨基酸，所述构象它们改变、修饰或调节蛋白质结构，从而以确定的并且归因于包皮垢分枝杆菌酰基转移酶的特定残基的方式实现底物结合和/或催化的改变。此外，它们是以下述程度占据类似位置的酰基转移酶的残基(在已通过x-射线晶体学获得三级结构的情况下)，所述程度使得虽然给定残基的主链原子基于占据同源位置并不满足等同性的标准，但是残基的至少两个侧链原子的原子坐标位于包皮垢分枝杆菌酰基转移酶的相应侧链原子的0.13nm之内。包皮垢分枝杆菌酰基转移酶的三维结构的坐标被确定，并且示于WO05/056782的实施例14中，并可按照上文所概括的，用于在三级结构水平上确定等同残基。对野生型和突变蛋白质的表征是通过任何合适的手段来完成的，其优选基于对目的性质的评估。例如，在本发明的一些实施方式中，测定pH和/或温度以及洗涤剂稳定性和/或氧化稳定性。事实上，预期可使用在这些特征(pH、温度、蛋白水解稳定性、洗涤剂稳定性和/或氧化稳定性)的一个或多个方面具有多种稳定性程度的酶。在本文中使用时，"对应于"指蛋白质或肽中列举的位置上的残基，或与蛋白质或肽中列举的残基类似、同源或等同的残基。在本文中使用时，"相应区域，，通常指沿着相关蛋白质或亲本蛋白质的类似位置。术语"编码……的核酸分子"、"编码......的核酸序列"、"编码......的DNA序列"和"编码......的DNA"指沿着脱氧核糖核酸链的脱氧核糖核苦酸的顺序或序列。这些脱氧核糖核苷酸的顺序决定了沿着多肽(蛋白质)链的氨基酸的顺序。DNA序列由此编码氨基酸序列。在本文中使用时，术语"类似序列"指蛋白质中提供与目的蛋白质(典型地，最初目的蛋白质)相似的功能、三级结构和/或保守残基的序列。例如，在含有a螺旋或p折叠结构的表位区域中，在类似序列中替换氨基酸能保持相同的特定结构。该术语还指核苷酸序列和氨基酸序列。在一些实施方式中，开发这样的类似序列，使得替换氨基酸导致显示相似或改进功能的变体酶。在一些优选的实施方式中，目的蛋白质中氨基酸的三级结构和/或保守残基位于目的区段或片段上或附近。因此，在目的区段或片段含有例如a螺旋或p折叠结构时，替换氨基酸保持该特定结构。在本文中使用时，"同源蛋白质"指具有与目的蛋白质(例如来自另一来源的酰基转移酶)相似作用和/或结构的蛋白质(例如酰基转移酶)。同源物并不必须在进化上相关。因此，该术语意欲包括从不同物种获得的相同或相似的酶(即，在结构和功能方面)。在一些优选的实施方式中，人们想要鉴定出具有与目的蛋白质相似的四级、三级和/或一级结构的同源物，因为用来自同源物的类似区段替换目的蛋白质中的区段或片段将降低改变的破坏性。在一些实施方式中，同源蛋白质能诱导与目的蛋白质相似的免疫应答。在本文中使用时，"同源基因"指来自不同物种的至少一对基因，所述基因互相对应，并且所述基因互相相同或非常相似。该术语包括通过物种形成(即，新物种的发展)分离的基因(例如，直向同源基因)以及已通过遗传复制分离的基因(例如，共生同源基因)。这些基因编码"同源蛋白质"。在本文中使用时，"直向同源物"和"直向同源基因"指通过物种形成从共同祖先基因(即，同源基因)进化出的不同物种中的基因。典型地，直向同源物在进化期间保留了相同的功能。对直向同源物的鉴定可用于在新测序的基因组中可靠地预测基因功能。在本文中使用时，"共生同源物"和"共生同源基因"指通过在基因组中复制而相关的基因。尽管直向同源物在进化过程中保留了相同的功能，但是共生同源物则进化出新的功能，即使一些功能通常与原来的功能相关。共生同源基因的例子包括编码胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶和凝血酶的基因，它们都是丝氨酸蛋白酶并且在同一物种中一起存在。在本文中使用时，"野生型"、"天然"和"天然存在的"蛋白质是自然界中发现的那些。术语"野生型序列"和"野生型基因"在本文中可互换使用，它们表示在宿主细胞中是天然的或天然存在的序列。可按照本领域技术人员已知的一般性方法来获得编码天然存在的蛋白质的基因。所述方法通常包括合成具有编码目的蛋白质区域的推定序列的经标记探针，从表达该蛋白质的生物制备基因组文库，以及通过与所述探针的杂交从文库筛选目的基因。然后可对阳性杂交克隆进行作图和测序。可使用本领域已知的任何合适方法来确定序列间的同源性程度(见，例如，SmithandWaterman,Adv.Appl.Math.,2:482[1981；NeedlemanandWunsch,J.Mol.Biol"48:443[1970；PearsonandLipman,Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:2444[1988;程序，例如WisconsinGenetics软件包(GeneticsComputerGroup,Madison,WI)中的GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA以及Devereux"fl/"Nucl.AcidRes.，12:387-395[1984)。在本文中使用时，"百分比(％)核酸序列同一性，，被定义为候选序列中与序列的核苷酸序列相同的核苷酸残基的百分比。在本文中使用时，术语"杂交"表示核酸链与互补链通过碱基配对相连的过程，这是本领域已知的。在本文中使用时，短语"杂交条件"表示杂交反应进行的条件。典型地，通过条件的"严紧性"程度来对这些条件加以归类，其中在所述条件下测量杂交。严紧性程度可基于例如核酸结合复合体或探针的解链温度(Tm)。例如，"最大严紧度"典型地大约Tm-5°C时(比探针的Tm低5。C)下发生；"高严紧度"比Tm低大约5-10。；"中等严紧度"比探针的Tm低大约10-20。；"低严紧度，，比Tm低大约20-25°。备选或额外地，杂交条件基于杂交和/或一次或多次严紧洗涤的盐或离子强度条件。例如，6xSSC=非常低的严紧度；3xSSC=低至中等的严紧度；lxSSC-中等严紧度；以及O.SxSSC-高严紧度。功能上，最大严紧度条件可用于鉴定具有与杂交探针有严格同一性或接近严格同一性的核i^列；而高严紧度条件用于鉴定与探针具有大约80%或更高的序列同一性的核酸序列。对于需要高选择性的应用而言，在一些实施方式中，可能想要使用相对严紧的条件来形成杂交体(例如，使用相对低的盐和/或高温度条件)。在提到至少两条核酸或多肽时，短语"实质性相似"和"实质性同一，，通常表示多核苷酸或多肽包含较之参照(即野生型)序列而言具有至少大约40。/。同一性，至少大约50%同一性，至少大约60%同一性，至少大约75%同一性，至少大约80%同一性，至少大约90%同一性，至少大约95%同一性，至少大约97%同一性，一些时4矣多达大约98%和大约99%序列同一性的序列。可使用已知的程序，例如BLAST、ALIGN和CLUSTAL,采用标准参数来确定序列同一性(见，例如，Altschul，"《r/.,J.Mol.Biol.215:403-410[1990]、HenikoffCW"Proc.Natl.Acad,Sci.USA89:109119891、Karinfl/.，Proc.Natl.Acad.SciUSA90:581993和Higginsetal，Gene73:237-244[1988])。用于进行BLAST分析的软件是公众可通过NationalCenterforBiotechnologyInformation获4寻的。jt匕夕卜，可寸吏用FASTA来检索数据库(Pearson""/"Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:2444-2448[1988)。两条多肽实质性同一的一种指征是第一条多肽与第二条多肽有免疫交叉反应性。典型地，由于保守氨基酸取代而有所不同的几条多肽具有免疫交叉反应性。因此，当两条肽不同仅在于保守取代时，该多肽与笫二多肽实质性同一。两条核^列实质性同一的指征是两条分子能在严紧条件(例如在中等至高度严紧度范围内)下互相杂交。术语"回收的"、"分离的"和"分开的，，在本文中使用时表示从中除去了至少一种与之天然相关联的组分的蛋白质、细胞、核酸或氨基酸。在某些情况下，经分离的蛋白质是分泌进培养基然后从该培养基回收的蛋白质。术语"重组"表示在宿主细胞中不天然存在的多核苷酸或多肽。重组分子可以含有两种或多种天然发生的序列，它们以不天然发生的方式连接在一起。重组细胞含有重组多核苷酸或多肽。使用重组方法生产的蛋白质是用正常情况下不生产这些蛋白质的宿主细胞来生产的。术语"异源，，表示正常情况下并不相互关联的元件。例如，如果宿主细胞生产异源蛋白质，该蛋白质是正常情况下并不在该宿主细胞中生产的。类似地，与异源编码序列有效连接的启动子是与编码序列有效连接的启动子，所述启动子在野生型宿主细胞中通常并不与该编码序列有效连接。在提到多核苷酸或蛋白质表达时，术语"同源，，指在表达其的宿主细胞中天然存在的多核苷酸或蛋白质。在本文中使用时，"宿主细胞"通常是使用本领域已知的重组DNA技术构建的载体转化或转染过的原核或真核宿主。经转化的宿主细胞能复制编码蛋白质变体的载体或表达想要的蛋白质变体。在编码蛋白质变体的前或前原形式的载体的情况下，典型地，此类变体表达的时候从宿主细胞分泌进宿主细胞培养基。在一些实施方式中，本发明涉及某些酰基转移酶高效催化水性环境中酰基基团从酰基供体(例如C2至C20的酯)向醇底物转移的活性。如本文中更详细描述的，在一些实施方式中，这些酶的这种活性;陂用于制备具有愉人香味或风味的酯。在一些其它实施方式中，这些酶的活性优选用于在清洁应用中减少臭味。并不限于任何具体的酶、醇底物或酰基供体，以及仅仅是为了帮助对本文所述的方法的一些实施方式的理解，下文阐迷了通过本发明方法的一些实施方式进行的反应，其中"AcT"代表"酰基转移酶"。ooIIACTIIX—OH+R——C——O—Y——^-R—C——Q—X醇底物酰基供体、酯产物Y—OH例如，并且再次不受限于任何具体的酶、醇底物或酰基供体，以及仅仅是为了帮助对本文所述的方法的一些实施方式的理解，利用酰基转移酶来将酰基基团从合适的酰基供体(例如甘油三酯，例如甘油三丁酸酯或甘油三乙酸酯)转移到萜烯醇例如香叶醇或香茅醇上，从而产生芳香酯。类似地，在其它实施方式中，酰基转移酶用于降低油类污渍的臭味。在一些26特别优选的实施方式中，油类污渍是奶制品污渍。在这些臭味降低/预防的实施方式中，利用AcT酶来降低甘油三酯的水解产生的气味不悦的挥发性脂肪酸(例如丁酸)的量。在一些实施方式中，跣基转移酶与至少一种脂肪酶协同工作，以增加从三酰甘油酯去除酰基链的速率，而在其它实施方式中，酰基转移酶通过将酰基链连接到醇底物上产生酯产物(而非挥发性脂肪酸)来发挥作用。在一些实施方式中，酰基转移酶以上述两种方式工作。在一些实施方式中，来自三酰甘油酯的酰基链与醇底物相连，从而产生芳香酯。在这些实施方式中，芳香酯(而非气味不悦的挥发性脂肪酸)作为副产物产生。该实施方式在图6中被示意性阐述。下文更详细地描述这些实施方式以及其它很多实施方式。在下文详细描述之前，需要注意，本文所讨论的方法可使用多种不同的酶，所述酶具有催化酰基基团从酰基供体转移到醇底物上从而产生酯的能力。此类酶包括但不限于典型的脂肪酶、酰基-CoA依赖性转移酶、磷脂酶、角质酶、GDSX水解酶、SGNH水解酶、丝氨酸蛋白酶和酯酶以及在与酰基供体接触时能形成酰基-酶中间产物并将酰基基团转移到非水的受体上的任何酶。在一些实施方式中，酶是野生型酶，而在一些其它实施方式中，酶具有经修饰的氨基酸序列，这使得酶较之野生型酶而言具有改变的底物特异性或增加的酰基转移酶活性。在进一步描述的这些实施方式中，提供了可用于本发明的额外组分。酰基转移酶如上文所述，本发明提供了产生酯的组合物，其含有至少一种酰基转移酶，还提供了使用所述酶的方法。预期本发明组合物的酰基转移酶包含能催化酰基基团从酰基供体转移至醇底物的任何酶。如上文所述，若干种类型的酶可用于本发明的方法。在一些实施方式中，所利用的酶对醇底物的特异性比水高。在这些实施方式中的一些中，酶展示出相对低的水解活性(即，在存在水时相对较差的水解酰基供体的能力)以及相对高的酰基转移酶活性(即，在水性环境中存在醇时更高的水解酰基供体的能力)，其中，醇解:水解的比例超过大约1.0,至少大约1.5的比例或者至少大约2.0。在一些实施方式中，酰基转移酶对过氧化物的特异性也比水高，这导致产生了过酸清洁剂(例如，过氧化物水解:水解的比例超过大约1.0，至少大约1.5的比例或者至少大约2.0)。在一些实施方式中，可使用GDSX酰基转移酶，特别是SGNH酰基转移酶。可用于本发明的示例性SGNH酰基转移酶包括在NCBI的GENBANK⑧数据库中以检录号YP_890535(GID:11846860;还见WO05/056782;包皮垢分枝杆菌)；NP_436338.1(GID:16263545;W"油.油.薩膨脂/);ZP—01549788.1(GID:118592396;5"鄉/;,Vi);NP066659.1(GID:10954724;发才艮土壤杆菌(/^ra6""eW"附Wi&叩e"M));YP_368715.1(GID:78065946;伯克霍尔德氏菌属(必w/^/^^teWfls/.));YP一674187.1(GID:110633979;3f^o/^&M/"附W.)和NP_532123.1(GID:17935333;才艮瘤土壤杆菌(/^ra6"cteW"附^i附e/fl"'e附))保藏的野生型SGNH酰基转移酶，其野生型直向同源物和同源物，及其具有下述氨基酸序列的变体，所述M酸序列与那些野生型酶中任一种有至少大约70%同一性，至少大约80%同一性，至少大约卯％同一性，至少大约95%同一性或者至少大约98%同一性。这些GENBANK⑧检录号通过整体引用并入本文，包括其中的核酸和蛋白质序列以及对这些序列的注释。通过使用本领域已知的标准序列比较方法(例如BLAST等)，对NCBI的GENBANK⑧数据库进行基于同源性的序列检索，来获得此类酶的其它一些例子。在一些实施方式中，酰基转移酶具有与GENBANK⑧条目YP—890535(GID:11846860;包皮垢分枝杆菌；还见WO05/056782)所示的氨基酸序列至少大约70%同一性的氨基#列。其它示例性的SGNH酰基转移酶包括下述这些，它们通过其物种和GENBANK⑧检录号被引用发根土壤杆菌(Q9KWA6)、发根土壤杆菌(Q9KWB1)、根瘤土壤杆菌(Q8UFG4)、根瘤土壤杆菌(Q8UAC0)、28根瘤土壤杆菌(Q9ZI09)、根瘤土壤杆菌(ACA)、P^w汰"oM"er(RVM04532)、百乐財艮根瘤菌(及Ai'zM/"附)(Q98MY5)、苜藉根瘤菌(/.挑e/,7o"J(Q92XZ1)、苜蓿根瘤菌(Q9EV56)、发根根瘤菌(及.rAi^ge"as)(NF006)、发根根瘤菌(NF00602875)、及.so/"wflcemr"附(Q8XQI0)、S/wwW^^/w附附e/"W/(RSM02162)、5".RSM05666)、百乐M艮中间根瘤菌(M^^/^M/"附/W)(RMLO00301)、发根土壤杆菌(Q9KWA6)、发根土壤杆菌(Q9KWB1)、根瘤土壤杆菌(AAD02335)、百脉根中间根瘤菌(Q98MY5)、百脉根中间根瘤菌(ZP00197751)、/a/stow/"so/"冊ceflrM附(Q8XQI0)、及a/s^w,Vxe旨o/;/rflr(ZP00166901)、A^jmxe//"6ov/s(AAK53448)、洋葱伯克霍尔德氏菌(丑w/^/^WeWflrce/mc/")(ZP00216984)、青紫色素杆菌(Or/wwo6acfeW"附v/o/flcew附AQ7NRP5)、小小梨形菌属(/^>e//"to印.>(NP_865746)、创伤贝内克氏菌(vw/"诉c"s,(AA007232)、鼠伤寒軒菌(iSVi/wio/jc//"妙/f/附w/77/wij(AAC38796)、57/1orA/zo6/M附附e/i7W(SMal993)、57朋由^6/附附W/W/(Q92XZ1)和S,"wAi'^Wm附me似ori(Q9EV56)。本着所有目的而言，这些蛋白质的氨基酸序列、序列比对和与上文所述相关的所有其它信息都通过引用从WO05/056782并入本文。WO05/056782中对此类酶的若干例子进行了结晶，并且描迷了对保留或改变了其活性的变体酶提供了很多示例性M酸取代，该文献并入本文作为参考。WO05/056782的表10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8和10-9中示出了数百种氨基酸取代的列表，这些取代被耐受并且在一些实施方式中可用于改变包皮垢分枝杆菌过水解酶的水解活性、过水解活性、过酸降解活性和/或稳定性。考虑到SGNH酰基转移酶的结构相似性，WO05/056782中描述的氨基酸取代易于转移至SGNH酰基转移酶家族的其它成员。WO05/056782中描述的每个氨基酸取代以及通过这些取代产生的氨基酸序列被并入本文作为参考。在一些实施方式中，本文所用的酰基转移酶不是乙酰CoA依赖性的酶。在一些备选的实施方式中，用于本发明方法中的GDSX或SGNH酰2008基转移酶是野生型酰基转移酶近平滑假丝酵母(CVim^i/mm/w7卵&)、杜氏气单胞菌(y4^v附owfls/rj;rffvp/^7fl)或杀鲑气单胞菌(y4ew附卵assfl/附om'c^/a)，而在一些其它实施方式中，酰基转移酶是与其至少大约95%同一性的变体。使用本领域已知的常规方法来生产和分离用于本发明中的酰基转移酶。在一些实施方式中，使用重组方法和非天然宿主来完成酰基转移酶的生产，所述宿主在细胞内产生酰基转移酶或分泌酰基转移酶。在一些实施方式中，向酶加上信号序列，其通过分泌进周质(如，革兰氏阴性生物，例如大肠杆菌中)或细胞外空间(如，革兰氏阳性生物，例如芽孢杆菌(5flf"7/"s)和放线菌(^"i'"owy;c"^J中)或真核宿主(例如，木霉属(7Wc/^flfe尸附aJ、曲霉属(y4s/e尸gi7/oy,、酵母属(5^ccA"ro，cesJ和毕赤酵母属(Pic似ff))来协助酶的表达。本发明的任何方面并不欲限于这些具体的宿主，因为很多其它生物可在本发明中用作为表达宿主。例如，公知芽孢杆菌的细胞是表达细胞外蛋白质(例如蛋白酶)的合适宿主。蛋白质的细胞内表达较少被公知。酶蛋白质在枯草芽孢杆菌CBfldW附sn6说Zs)细胞内的表达通常在不存在该基因的5，末端信号序列时用多种启动子来进行，所述启动子包括但不限于pVeg、pSPAC、pAprE或pAmyE。在一些实施方式中，表达是从复制型质粒(高或低拷贝数)实现的，而在一些备选的实施方式中，表达是通过将想要的构建体整合进染色体来实现的。整合可在任何基因座进行，包括但不限于印r五、或/>戸基因座。在一些实施方式中，从整合的构建体的一个或多个拷贝来表达酶。在一些备选的实施方式中，通过整合能扩增的构建体(例如，与抗生素盒相连，侧翼有正向重复序列)或通过将多个拷贝连接起来并随后整合进染色体，来获得多个整合的拷贝。在一些实施方式中，在合适的培养物中，用pNB活性测定法来监测用复制型质粒或整合的构建体进行的酶的表达。和用芽孢杆菌一样，在一些实施方式中，使用复制型质粒来完成酶在革兰氏阳性宿主链霉菌中的表达，而在一些其它实施方式中，通过栽体向链霉菌染色体中的整合来完成酶的表达。能在链霉菌中被识别的任何启动子都可用于驱动酶基因的转录(例如，葡萄糖异构酶启动子，A4启动子)。复制型质粒，无论是穿梭载体或仅链霉菌均可用于本发明进行表达(例如pSECGT)。在一些其它实施方式中，在其它一些宿主细胞中生产酶，所述宿主细胞包括但不限于真菌宿主细胞(例如，毕赤酵母属CPZdiViw.)、曲霉属(v45/w7/附5p.)或木霉属(7WcAorfe簡fls/;.)宿主细胞等)。在一些实施方式中，酶从宿主细胞分泌，使得可从培养宿主细胞的培养基中回收酶。一旦分泌进培养基，可通任何合适的和/或方便的方法(例如通过沉淀、离心、亲和性、亲和层析、离子交换层析、疏水相互作用层析两相分配、乙醇沉淀、反相HPLC、硅胶层析或阳离子交换树脂(例如DEAE)上层析、层析聚焦、SDS-PAGE、疏酸铵沉淀、凝胶过滤(例如SephadexG-75)、过滤和本领域已知的任何其它方法)来回收酶。事实上，本领域技术人员已知多种合适的方法。在一些备选的实施方式中，不从培养基的其它组分纯化而直接使用酶。在这些实施方式的一些中，对培养基进行简单浓缩，不进一步针对生长培养基的组分对蛋白质加以纯化就加以使用，而在一些其它实施方式中，不进行任何进一步的改变就^f吏用。醇底物可用于本发明的醇底物包括含有与碳原子结合的反应性羟基基团的任何有机分子，但这不包括含羟基的多糖和蛋白质。在一些实施方式中，醇底物是下式的醇底物Z-OH,其中Z是任何带支链的、直链的、环状的、芳香族的或线性的有机基团或者其任何取代形式。在一些实施方式中，Z是经取代或未经取代的含有2-30个碳原子的烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基杂芳基或杂芳基。在另一些实施方式中，Z是脂肪族部分、被脂环族或芳香族部分(例如碎)取代的脂肪族部分。在一些其它实施方式中，醇底物是多元醇，例如含二醇的分子(例如，四甘醇、聚乙二醇、聚丙二醇或聚四氢呔喃)。合适的醇底物包括单体多元醇(例如甘油)以及二聚、三聚或四聚多元醇以及糖醇，例如赤藓醇、异麦芽糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇、甘露醇、山梨醇和木糖醇。在一些实施方式中，多元醇是式(Z^OH)n或Z-(OH)n的分子，其中，n是至少大约l、大约2、大约3、大约4、大约5或大约6(例如其中n是l-4)。在一些实施方式中，醇作为表面活性剂或乳化剂的一部分存在(例如，高线性度的伯醇，例如NEODOLTM洗涤剂)。在一些实施方式中，用于下文所述的芳香酯生产方法中的醇底物是式Z-OH的分子，其中Z是脂环族或芳香族的部分或者例如薛。可用于本发明的方法中的示例性的醇底物包括但不限于乙醇、甲醇、甘油、丙醇、丁醇和下表l-3所示的醇底物。酰基供体用于本发明方法中的酰基供体包含含有可转移的酰基基团的任何有机分子。在一些实施方式中，典型的酰基供体是式I^C(-0)OI^的酯，其中，W和W独立地是任何有机部分，虽然也可使用其它分子。在一些实施方式中，合适的酰基供体是单体形式的，而在一些其它实施方式中，它们是多聚形式的，包括二聚体、三聚体和更高级的多元醇酯。在本文中使用时，"短链酰基供体"是式I^C(-0)ORZ的酯，其中，R1是含有至少1至9个碳原子的链的任何有机部分，W是任何有机部分。在一些实施方式中，短链酰基酯含有2-10个碳原子的酰基链(即，Qrdo碳链)。示例性的长链酰基酯含有C6、C7、C8、C9、Cm碳链。示例性的长链酰基酯含有乙酰基、丙基、丁基、戊基或己基基团等。"长链酰基供体，，是式1^<:(=0)0112的酯，其中，Rt是含有至少10个碳原子的链的任何有机部分，RZ是任何有机部分。例如，在一些实施方式中，长链酰基供体含有C、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19、C20、(:21或(:22酰基链。可用于本发明的示例性的酯包括下式的那些R1。，[(R2)m(Rp其中，Ri是选自H或经取代或未经取代的烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基杂芳基和杂芳基构成的組的部分。在一些实施方式中，R1包含大约1至大约50,000个碳原子，大约1至大约10,000个碳原子或者甚至大约2至大约100个碳原子；其中，每个RZ是任选被取代的烷氧基化物部分(在一些实施方式中，每个W独立地是乙氧基化物、丙氧基化物或丁氧基化物部分)；Rs是具有下式的酯形成部分R4CO-，其中"R是H、经取代的或未经取代的烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基杂芳基和杂芳基(在一些实施方式中，W是包含5至22或更多个碳原子的经取代的或未经取代的直链或支链的烷基、烯基或炔基部分，包含5至12或更多个碳原子的芳基、烷基芳基、烷基杂芳基或杂芳基部分，或者R"是经取代或未经取代的Cs-do或更长的烷基基团部分，或者R"是经取代或未经取代的C"-C22或更长的烷基部分)；当R'是H时，x是l;当W不是H时，x是等于或小于R1中碳原子数的整数；p是等于或小于x的整数；m是0至50的整数、0至18的整数或0至12的整数，n为至少l。在本发明的一些实施方式中，包含酯部分的分子是具有式R力x[(ie)m(R、p的烷基乙氧基化物或丙氧基化物，其中R1是C2-C32经取代或未经取代的烷基或杂烷基部分；每个W独立地是乙氧基化物或丙氧基化物部分；R"是具有下式的酯形成部分R4CO-，其中"R""是H、经取代的或未经取代的烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基杂芳基和杂芳基，在一些实施方式中，R"是包含5至22或更多个碳原子的经取代的或未经取代的直链或支链的烷基、烯基或炔基部分，包含5至12或更多个碳原子的经取代的或未经取代的芳基、烷基芳基、烷基杂芳基或杂芳基部分，或者W是经取代或未经取代的C5-C10或更长的烷基基团部分，或者W是经取代或未经取代的Cs-C22或更长的烷基部分；x是等于或小于R1中碳原子数的整数；P是等于或小于x的整数；m是l至12的整数，以及n为至少1。在本发明的一些实施方式中，包含酯部分的分子具有下式我[(R2)m(R3)np其中，W是H或包含伯胺、仲胺、7k胺或季胺部分的部分，其中，所述W部分包含选自经取代或未经取代的烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基杂芳基和杂芳基部分构成的组的胺部分。在一些实施方式中，R1包含大约1至大约50,000个碳原子，大约1至大约IO，OOO个碳原子或者甚至大约2至大约100个碳原子；每个W是烷氧基化物部分(在一些实施方式中，每个W独立地是乙氧基化物、丙氧基化物或丁氧基化物部分)；Rs是具有下式的酯形成部分R4CO-，其中"R"是H、经取代的或未经取代的烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基杂芳基和杂芳基(在一些实施方式中，RA是包含5至22个碳原子的经取代的或未经取代的直链或支链的烷基、烯基或炔基部分)，包含9至12或更多个碳原子的经取代或未经取代的芳基、烷基芳基、烷基杂芳基或杂芳基部分，或者R"是经取代或未经取代的C5-Cw或更长的烷基部分，或者W是经取代或未经取代的C『C22或更长的烷基部分；当W是H时，x是l;当W不是H时，x是等于或小于R'中碳原子数的整数；p是等于或小于x的整数；m是0至12的整数或者甚至1至12的整数，n为至少1。合适的酰基供体包括任何类型的甘油三酯，包括源于动物的甘油三酯，奶制品甘油三酯，源于植物的甘油三酯和合成的甘油三酯，其包括但不限于甘油三乙酸酯和甘油三丁酸酯分别提供乙酰基、丁酰基和更长链的酰基基团的更长链的分子。二酰甘油、单酰甘油、磷脂、溶血磷脂、糖脂也可用于本发明。在一些实施方式中，二酰甘油和三酰甘油含有相同的脂肪酸链，而在一些其它实施方式中，它们含有不同的脂肪酸链。其它合适的酯包括颜色形成酯，例如，对硝基酚酯。其它酯包括脂肪族的酯(例如丁酸乙酯)、类异戊二烯酯(例如乙酸香茅酯)和芳香族的酯(例如乙酸苯曱酯)。在本发明的一些清洁实施方式中，酰基供体存在于物体上(例如作为物体上的污渍)。在一些特别优选的实施方式中，通过本发明的组合物原位对酰基供体脱酰基。在一些实施方式中，本文更详细描述的芳香酯生产方法中的一些需要转移短链(例如C2-C10)酰基基团，例如乙酰基和丁酰基基团。清洁组合物本发明还提供了清洁组合物，其包含至少一种酰基转移酶和至少一种酰基转移酶的醇底物。在一些实施方式中，清洁组合物^皮配制为-皮酰基供体分子(例如，甘油三酯)原位玷污的清洁物体。因此，在一些实施方式中，酰基转移酶和醇底物以能在清洁组合物与含酰基供体的物体接触时产生可检测到的酯的量存在。在一些实施方式中，与含酰基供体的物体接触时，清洁組合物还包含含酰基供体的物体以及作为酰基转移酶催化的醇底物和酰基供体之间的反应的结果产生的酯。如上文所提到的，在一些实施方式中，酰基转移酶是SGNH酰基转移酶。在一些其它实施方式中，清洁组合物含有醇底物和酰基供体组合，使得来自酰基供体的酰基基团通过酰基转移酶^L转移至醇底物时，产生织物护理剂(例如，表面活性酯)。在一些实施方式中，醇固体是双目的分子，因为其还作为清洁组合物中存在的表面活性剂或乳化剂发挥功能。此类醇底物的例子包括但不限于脂肪醇(例如，C8-C18线性或支链的脂肪醇)，例如鲸蜡醇(例如，十六烷-l-醇)，源于脂肪醇的脂肪醇乙氧基化物(例如，NEODOLTM乙氧基化物)以及多元醇乙氧基化物(例如甘油乙氧基化物)，它们通常用于清洁组合物中。如下文更为详细地描述的，本发明的清洁组合物以任何合适的形式提供，包括固体(例如，酶和醇底物被吸附到固体材料上)、液体和凝胶。在一些优选的实施方式中，组合物以浓缩形式提供。在一些其它实施方式中，本发明的清洁组合物原样使用，在另一些实施方式中，它们用作为喷雾剂或预洗涤组合物。使用中，清洁组合物的工作形式(例如，清洁组合物的溶解或稀释形式)是水性的，并因此含有至少大约50%的水，在很多情况下，含有大约50%至大约99.99%的水。在一些实施方式中，本发明的清洁组合物中醇底物的工作浓度为大约0.0001%至大约50%(v/v或w/v),小于大约1%，小于大约0.1%，小于大约0.01%或者小于大约0.001%的醇。在一些实施方式中，在清洁组合物中本发明酰基转移酶的工作浓度为大约0.01ppm(百万分之，w/v)至大约1000ppm，大约0.01ppm至大约0.05ppm，大约0.05ppm至大约0.1ppm,大约0.1ppm至大约0.5ppm，大约0.5ppm至大约1ppm,大约1ppm至大约5ppm,大约5ppm至大约10ppm,大约10ppm至大约50ppm，大约50ppm至大约100ppm，大约100ppm至大约500ppm，或者大约500ppm至大约1000ppm。在一些实施方式中，本发明的清洁组合物还包含至少一种脂肪酶(例如，具有才艮据IUBMB酶命名系统定义为EC3.1.1.3的活性的三酰甘油脂肪酶)。在一些实施方式中，脂肪酶是如上文所述的典型脂肪酶。预期酰基转移酶和脂肪酶协同作用以从物体上的酰基甘油分子(例如三酰甘油)除去酰基链。但是，本发明并不受限于任何具体的作用机制。在一些实施方式中，清洁组合物包含过氧化物的来源，其可以是过氧化氢本身或产生作为反应产物的过氧化氢的组合物。合适的产生过氧化氬作为反应产物的过氧化氢来源包括但不限于过氧(peroxygen)来源,其选自(i)大约0.01至大约50,大约0.1至大约20，大约1至10重量百分比的过酸盐、有机过氧酸、过氧化氢尿素及其混合物；(ii)大约0.01至大约50，大约0.1至大约20或者大约1至10重量百分比的碳水化合物和大约0.0001至大约1，大约0.001至大约0.5，大约0.01至大约0.1重量百分比的碳水化合物氧化酶；以及(iii)它们的混合物。合适的过酸盐包括但不限于过硼酸碱金属盐、过碳酸碱金属盐、过磷酸碱金属盐、过硫酸碱金属盐及其混合物。在一些实施方式中，糖选自单糖、二糖、三糖、寡糖(例如碳水化合物)及其混合物。合适的糖包括但不限于选自D-阿拉伯糖、L-阿拉伯糖、D-纤维二糖、2-脱氧-D-半乳糖、2-脱氧-D-核糖、D-果糖、L-果糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-甘油-D-古洛-庚糖、D-乳糖、D-来苏糖、L-来苏糖、D画麦芽糖、D-甘露糖、松三糖、L-蜜二糖、帕拉金糖、D-蜜三糖、L-鼠李糖、D-核糖、L-山梨糖、水苏糖、蔗糖、D-海藻糖、D-木糖、L-木糖及其混合物的糖。合适的碳水化合物氧化酶包括但不限于选自醛糖氧化酶(IUPAC分类EC1,1.3.9)、半乳糖氧化酶(IUPAC分类EC1.1.3.9)、纤维二糖氧化瞰IUPAC分类EC1.1.3.25)、吡喃糖氧化斷IUPAC分类EC1.1.3.10)、山梨糖氧化酶(IUPAC分类EC1.1.3.11)和/或己糖氧化酶(IUPAC分类EC1.1.3.5)、葡萄糖氧化酶(IUPAC分类EC1.1.3.4)及其混合物的碳水化合物氧化酶。在一些实施方式中，被清洁组合物清洁的含酰基供体物体被油性物质(例如，含有三酰甘油酯等的物质)玷污。在一些实施方式中，物体(例如织物),皮奶制品玷污。虽然对于下文所述的方法的实施并非必要，但在一些实施方式中，选择能在与酰基供体反应时产生芳香酯的醇底物。下文中更详细地描述了芳香酯。在一些实施方式中，清洁组合物是织物清洁組合物(即，洗衣洗涤剂)、表面清洁组合物或者餐具清洁组合物或者自动餐具洗涤机洗涂剂组合物。示例性清洁组合物的配方在WO0001826中有更为详细的描述，其通过引用并入本文。在一些实施方式中，本发明的清洁组合物含有大约1%至大约80%，大约5%至大约50%(按重量计)的至少一种表面活性剂(例如非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂或两性离子表面活性剂或它们的任何混合物)。示例性的表面活性剂包括但不限于烷基恭晴酸盐(ABS)(包括线性烷基苯磺酸盐)和线性烷基磺酸钠、烷基苯氧基聚乙氧乙醇(例如，壬基苯氧基乙氧基化物或壬基苯酚)、二乙醇胺、三乙醇胺和单乙醇胺。可用于洗涤剂(特别是洗衣洗涤剂)中的示例性表面活性剂包括美国专利号3，664，961、3,919,678、4,222,905和4,239,659中描述的那些。在一些实施方式中，洗涤剂是固体，而在一些其它实施方式中，其是液体，在另一些实施方式中，其是凝胶。在一些优选的实施方式中，洗涤剂还包含緩沖剂(例如碳酸钠或碳酸氢钠)、洗涤剂助洗剂、漂白剂、漂白活化剂、额外的酶、酶稳定剂、起泡强化剂、阻遏剂、防黯剂、防蚀剂、污物悬浮剂、污物释放剂、杀菌剂、pH调节剂、非助洗剂碱度来源、螯合剂、有机或无机填充剂、溶剂、水溶助长剂、荧光增白剂、染料和/或香料。在一些实施方式中，本发明的清洁组合物包含一种或多种其它的酶(例如，胶质裂合酶、内切糖苷酶、半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、果胶酸裂合酶、淀粉酶、甘露聚糖酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、氧化还原酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、malanases、P-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶和淀粉酶)或其混合物。在一些实施方式中，使用包含常规可应用的酶(例如蛋白酶、脂肪酶、角质酶和/或纤维素酶)与酰基转移酶的酶组合(即"混合物")。本文组合物中还提供了可用于洗涤剂清洁組合物中的多种其它成分，它们包括其它活性成分、载体、水溶助长剂、加工助剂、染料或色素、用于液体配制的溶剂等。在希望额外增加起泡的实施方式中，组合物中掺入起泡强化剂，例如C『d6的alkolamides，典型地，大约1%至大约10%的水平。在一些实施方式中，洗涤剂组合物含有水和其它溶剂作为载体。低分子量的伯醇或仲醇(例如曱醇、乙醇、丙醇和异丙醇)是合适的。单羟基醇优选用于溶解表面活性剂，但是多元醇，例如，含有大约2至大约6个碳原子以及大约2至大约6个羟基的那些(例如1，3-丙二醇、乙二醇、甘油和1，2-丙二醇)也可使用。在一些实施方式中，组合物含有大约5%至大约90%，典型大约10%至大约50%的此类载体。在一些实施方式中，将本文提供的洗涤剂组合物配制为使得在水性清洁操作中使用时，洗涤用水的pH在大约6.8至大约11.0之间。因此，典型地，终产物被配制为该范围内。用于在推荐的使用水平下控制pH的技术包括使用緩冲剂、碱金属、酸等，并且是本领域技术人员公知的。在一些实施方式中，清洁组合物包含工作pH在大约pH9.0至大约pH11.5,大约pH9.0至大约pH9.5,大约pH9.5至大约pH10.0，大约pH10.0至大约pH10.5，大约pH10.5至大约pH11.0或大约pH11.0至大约pH11.5的范围内的自动餐具洗涤洗涤剂。在一些其它实施方式中，清洁组合物包含工作pH在大约pH7.5至大约pH8.5，大约pH7.5至大约pH8.0，或大约pH8.0至大约pH8.5的范围内的液体洗衣洗涤剂。在一些其它实施方式中，清洁组合物包含工作pH在大约pH9.5至大约pH10.5,大约pH9.5至大约pH10.0或大约pH10.0至大约pH10.5的范围内的固体洗衣洗涤剂。多种漂白化合物，例如过碳酸盐、过硼酸盐等也可用于本发明的组合物，典型地，以按重量计大约1%至大约15%的水平使用。如所希望的，此类组合物还含有漂白活化剂，例如，四乙酰乙二胺、壬酰氧基苯磺酸盐等，它们也是本领域公知的。使用水平典型地在按重量计大约1%至大约10%的范围内。多种污物释》欠剂(尤其是阴离子寡酯类型的)、多种螯合剂(尤其是氨基膦酸盐和乙二胺二琥珀酸盐)、多种粘土去除剂(尤其是乙氧基化的四亚乙基五胺)、多种分散剂(尤其是聚丙烯酸盐和聚天冬氨酸盐)、多种增白剂(尤其是阴离子增白剂)、多种起泡阻遏剂(尤其是聚硅氧烷和仲醇)、多种织物软化剂(尤其是蒙脱石粘土)等都可以按重量计大约1%至大约35%范围内的水平用于本发明组合物的多种实施方式中。标准配方是本领域技术人员公知的。酶稳定剂也可用于本发明清洁组合物的一些实施方式中。此类稳定剂包括但不限于丙二醇(优选大约1%至大约10%)、曱酸钠(优选大约0.1%至大约1%)以及甲酸钾(优选大约0.1%至大约1%)。在又一些实施方式中，本发明的清洁组合物还包含至少一种助洗剂。在一些优选的实施方式中，助洗剂以按重量计大约5%至大约50%的水平存在于组合物中。典型的助洗剂包括1-10微米的沸石、聚羧酸盐(例如柠檬酸盐和氧联二琥珀酸盐)、层状硅酸盐、磷酸盐等。其它常规的助洗剂在标准配方手册中列出，并且是本领域技术人员公知的。其它任选的成分包括螯合剂、粘土去除/抗再沉积剂、聚合物分散剂、漂白剂、增白剂、起泡阻遏剂、溶剂和美，见剂(aestheticagent)。本发明还提供了使用本文提供的清洁组合物的方法。在一些实施方式中，清洁方法包^^:将至少一种酰基转移酶、酰基转移酶的至少一种醇底物以及被含酰基供体的物质弄脏的物体组合，其中，所述酰基转移酶催化酰基基团从酰基供体转移到醇底物上，从而产生酯。在一些实施方式中，对醇底物加以选择，使得产生所得的芳香酯。在一些其它实施方式中，酰基基团转移至表面活性剂或乳化剂，或者上文列出的其它试剂中的一种或多种上。在一些实施方式中，清洁组合物还包含除了产生香味之外不提供其它清洁功能的酰基供体(即，不用作为表面活性剂、乳化剂、氧化剂等)。此类酰基供体包括但不限于甘油三乙酸酯和甘油三丁酸酯。在一些备选的实施方式中，本发明的清洁方法包括产生具有清洁性质的酯(例如，酯表面活性剂或酯乳化剂，其在洗涤期间具有清洁活性)的步骤。在一些实施方式中，物体可以是织物(包括但不限于，衣物、室内装饰、地毯、寝具等)或硬表面(包括但不限于厨房表面、浴室表面、资砖等)或餐具。在一些实施方式中，织物被含油物质(例如含三酰甘油的物质)弄脏。在一些实施方式中，含油物质包含至少一种C4-C18三酰甘油酯(例如奶制品)Q在一些实施方式中，清洁方法利用含有乙酰转移酶但是不含脂肪酶(例如典型脂肪酶)的清洁组合物。在一些备选的实施方式中，本发明的清洁方法利用含有本发明乙酰转移酶和脂肪酶(例如LipolaseTM、LipozymTM、LipomaxTM、LipexTM、AmanoTM脂肪酶、Toyo誦Joz。tm脂肪酶、MeitoTM脂肪酶或DiosynthTM)的清洁组合物。在一些实施方式中，使用特定的酰基转移酶-脂肪酶组合比单独使用脂肪酶的方法导致明显更少的臭味。但是预期本发明并不限于任何具体机制或理论。然而，预期酰基转移酶和脂肪酶协同工作，以从三酰甘油酯(例如，含丁酸的三酰甘油酯)除去酖基基团，以降低臭味。因此，在一些实施方式中，在清洁组合物中使用酰基转移酶使得较之不含酰基转移酶的等同的清洁组合物而言，致臭味的脂肪酸降低超过大约10%,致臭味脂肪酸降低大约20%，致臭味脂肪酸降低超过大约30。/。，致臭味脂肪酸降低超过大约50%，致臭味脂肪酸降低超过大约70%，致臭味脂肪酸降低超过大约80%，或者致臭味脂肪酸降低超过大约90%。在一些特别优选的实施方式中，在清洁组合物中使用本发明的酰基转移酶不产生臭味。用于生产芳香酯的组合物如上文所述，本发明提供了生产芳香酯的组合物和方法。在一些实施方式中，组合物包含至少一种酰基转移酶、酰基转移酶的醇底物以及酖基供体。在这些实施方式的一些中，酰基转移酶在水性环境中催化酰基基团从酰基供体转移至醇底物，从而产生芳香酯。在一些实施方式中，该组合物是基本上干的(例如脱水的)组合物，其中，芳香酯仅在组合物重新水化时产生。在一些其它实施方式中，组合物是水性组合物，其还包含芳香酯。在很多实施方式中，对组合物的醇底物和酰基供体加以选择，以产生特定的芳香酯。使用本发明组合物产生的示例性芳香酯列于下表l-3中，还列出了用于生产这些酯的醇底物和酰基供体的合适的组合。其它一些芳香酯是已知的，在给出了此类芳香酯的分子结构的情况下，存在本发明的酰基转移酶时可组合的醇底物和酯是显而易见的。在这些表中，"AcT"是包皮垢分枝杆菌的野生型酰基转移酶，"KLM3"是气单胞菌(y4era附卵肪W.)的酰基转移酶，如WO04/064987中所述，LipomaxTM是来自产碱假单胞菌(jPseM^/o附ow"sflf/cfltZ/gewes)的月旨肪酵(Genencor)。表l:脂族醇的酯交换<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>在一些实施方式中，SGNH酰基转移酶被固定到基质(例如固体或半固相支持体)，例如柱或凝胶上，以允许通过从酶洗去醇底物和酰基供体来终止反应。产生芳香酯的方法上文所述的组合物可用于多种芳香酯生产方法，所述方法通常包括将至少一种酰基转移酶、酰基转移酶的至少一种醇底物以及至少一种酰基供体组合起来，其中，在水性环境中，酰基转移酶催化酰基基团从酰基供体转移到醇底物上，从而产生芳香酯。在一些实施方式中，所述方法包括在它们组合之后对组分进行再水化。在一些备选的实施方式中，酰基转移酶、醇底物和酰基供体在水性环境中组合。如上文所提到的，在一些备选的实施方式中，酰基转移酶是SGNH酰基转移酶。这些方法可用于想获得芳香酯的多种工艺中。例如，在一些实施方式中，将组合物掺入食品中，以改进或产生消费期间的风味或香味，或者将组合物用于清洁方法，如上文所述。在另一些实施方式中，组合物^皮用于制造酯的方法。在一个实例中，产生芳香酯的组合物以干燥形式(例如，吸附到基质上)掺入食品(例如口香糖或糖果)中。对食品的再水化(例如咀嚼期间或通过加入含水液体，例如水或奶)启动了酰基转移酶反应，从而原位产生芳香酯。类似地，在一些实施方式中，用所述方法来制造用于食物、香料和/或清洁工业的大量芳香酯。在一些实施方式中，醇底物本身是芳香醇。这样，在一些实施方式中，上文所述的反应的气味随着时间改变(例如，从芳香醇底物的气味变成该醇的酯的气味)。在另一些实施方式中，使用长酰基链(例如长链脂肪酸)来对芳香醇进行酯交换，以生产无香味的酯。在这些实施方式中的一些中，无香味的酯随着时间自发水解或在存在水解酶时水解，重新产生芳香醇。用于原位产生表面活性酯的方法在一些实施方式中，使用含有酰基转移酶、磷脂和山梨醇的颗粒来进行对脂类的原位修饰。在一些实施方式中，颗粒包括通过纳米嚢化、微嚢化、片剂制造、造粒和/或通过WAX酯包衣生产(如本领域技术人员已知的"Bariere系统"所指出的)的形式。在一些实施方式中，还通过温度保护技术(TPT)系统提供了进一步的包衣。在一些实施方式中，脂类底物——磷脂和受体分子——山梨醇的浓度在洗涤工艺中都非常低，这由此限制了绿色洗涤剂的生产。在一些实施方式中，通过将底物和受体分子与KLM3酶一起包括进封闭的区室确保了反应物的浓度足够高以进行快速的生物转化工艺。在一些实施方式中，在特定的温度和湿度条件下贮藏期间，KLM3原位催化修饰过程，由此产生溶血-PC和山梨醇-酰基酯。为令磷脂(PC)完全转化，将PC和山梨醇之间的比例优化为大约1:2，大约1:5，大约1:10,大约1:50，或者最优选地，大约1:100(对于PC:山梨醇而言)。在一些实施方式中，为提供最好的洗涤剂组合物，所有磷脂都被转化为溶血磷脂衍生物和等同量的山梨醇-酰基酯。采用最优的KLM3酰基转移酶突变体，S^Pl反应仅产生溶血磷脂和山梨醇-酰基酯，而没有显著量的游离脂肪酸。为实现洗涤剂的强大效力，所有磷脂都^L转化为溶血磷脂衍生物。在一些实施方式中，生物化学反应在嚢化之后发生，在一些实施方式中，这需要额外的保质期。当反应完成时，向洗涤粉中加入颗粒。颗粒在洗涤过程期间溶解，洗涤剂被释放出来。可以使用宽范围的两种底物(脂肪酸的甘油三酯、甘油二酸酯、甘油单酸酯、磷脂、半乳糖脂、乙烯酯、曱酯等)。类似地，大量受体分子也是合适的。这些受体包含山梨醇，木糖醇，葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，多元醇和长链、中链和短链的醇，多糖，例如，果胶、淀粉、半乳甘露聚糖、藻酸、鹿角菜胶、壳聚糖、经水解的壳聚糖以及源于这些多糖的寡糖。在另外一些实施方式中，受体分子是多糖和肽。为了所有目的，WO05/056782的完全公开内容，包括但不限于对酰基转移酶、氨基酸改变、晶体结构、测定方法、使用方法、序列、同源物、直向同源物、序列比对、图、表、清洁组合物等，都通过引用并入本文。实验下述实施例^L提供来展示和进一步阐述本发明的某些优选的实施方式和方面，并且不将它们理解为限制本发明的范围。PCT公开文本WO05/056782涉及对酰基转移酶的鉴定和使用。PCT公开文本WO05/05678的实施例1-27中每个都各自通过引用并入本文，用于公开本文公开的所有方法，这些方法包括但不限于制备酰基转移酶的方法、鉴定酰基转移酶的方法、测试酰基转移酶的方法、酰基转移酶多核苷酸和多肽序列，使用酰基转移酶的方法和其中可使用酰基转移酶的组合物。实施例l:对顺-3-己烯醇、2-苯基乙醇和异戊醇的酰基化对顺-3-己烯醇、2-苯基乙醇和异戊醇的酰基化在水中用甘油三丁酸酯和可溶性酰基转移酶来进行。在一种典型步骤中，用酰基转移酶(包皮垢分枝杆菌；AcT)(34ppm)或KLM3，(20卯m)在45。C对200mM磷酸盐緩沖液pH7(500uL)中的醇(2uL)和甘油三丁酸酯(2uL)进行40分钟的处理。然后向每个管中加入二氯甲烷(500uL)，接着涡旋搅动(IO秒)，并离心，以分离有机层和水性层。然后移出有机层，通过GC/MS分析。使用30mx0.25mm(0.25um的膜)HP-5MS柱，用Agilent68卯GC/MS进行该分析。GC/MS方法利用氦作为栽气(1cc/分钟)，注射器端口温度为250°C,采用20:1的分流比。烘箱温度程序以60。C保持1分钟开始，并以30。C/分钟升温至300°C，总运行时间为10分钟。质量检测仪在注射后2分钟时起始，从30至400AMU扫描。图l表明，在这些实验的每项中，一部分醇被转化为其各自的丁酸酯。对于AcT来说，该量显著高于KLM3'。实施例2:对香茅醇和香叶醇的酰基化使用甘油三乙酸酯和甘油三丁酸酯作为酰基供体，评估作为酰基转移酶AcT和KLlVO，底物的辟烯醇香茅醇(1)和香叶醇(2)。'OH香茅醇(l)香叶醇(2)用AcT(34ppm)或KLM3，(20ppm)在45。C处理50raM磷酸盐緩冲液pH7(500uL)中的辟烯醇(2uL)和甘油三乙酸酯或甘油三丁酸酯(2nL)40分钟。然后从每种反应中移出等分试样(50uL)，稀释进曱醇/二氯曱烷(1:3,500uL)，通过GC/MS来分析酯产生的证据。结果提供于表4中。表4:采用两种酖基转移酶，香茅醇和香叶醇转化为其各自乙酰和丁酰酯的程度<table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>实施例3:用织物I上吸附的酰基转移酶对水中醇的酰基化向正方形的棉织布(10x10cm)片中央加入1mL的酰基转移酶溶液(100ppm，处于5mMHEPES緩冲液，pH8中)的等分试样，让布过夜风干。将处于50mM磷酸钠緩沖液(pH7)中的含苯曱醇(1%v/v)和甘油三乙酸酯(1%v/v)的溶液的等分试样加入到具有吸附的AcT以及没有酶对照的布样上。在含AcT酶的织物上，2分钟内即产生了乙酸苯甲酯的特征性气味，相比，对照没有产生任何能被注意到的气味。实施例4:用固定到织物II上的酰基转移酶对水中醇的酰基化将棉织织物样布(20x20cm)放到塑料片上，用AcT(1ml12mg/mL)、聚乙烯亚胺(500uL的20%w/v溶液)和去离子水(1mL)处理。令织物在环境条件下干燥过夜，之后从塑料片上移出，浸泡于50mM磷酸钠緩沖液(400mL，pH7)中，并緩慢搅拌过夜。然后用自来水彻底漂洗棉布样，令其滴干。按照上文所述的方法，制备第二块棉布样，但是不同之处在于应用到织物上的酶混合物除了含有上文列出的组分之外还含有胶乳悬浮液(1mLAIRFLEXTM423，AirProducts，Allentown，PA)。并排放置两份布样，用50mM磷酸钠緩沖液(40mL，pH7)中的苯甲醇(2%v/v)和甘油三乙酸酯(2%v/v)水溶液来处理它们。与对照布样相比，来自两份布样的乙酸苯曱酯的气味是明显的。还用丁酸对硝基苯酯的溶液(200uL,水中10mM)对布样进行了处理，以观察结合的AcT的水解活性。在该情况下，只有用AcT/PEI处理的棉布样产生了可注意到的颜色。实施例5:通过吸附到淀粉上的甘油三乙酸酯/醇混合物的再7JC化对水中的苯甲醇进行酰基化将苯曱醇(0.5mL)和甘油三乙酸酯(0.5mL)加入到10g麦芽糊精(GrainProcessingCorp.,IA)中，接着进行剧烈的机械搅动，以产生没有或极少气味的自由流动粉末。将一部分该混合物(1g)放进培养亚，然后用AcT溶液(1ppm)对其加以处理，导致乙酸苯甲酯特有的气味在5分钟内产生。用水进行了对照实验，并且在l小时内没有产生乙酸苯曱酯。实施例6:用硅溶胶-凝胶中固定的AcT进行酯交换在硅溶胶凝胶中固定酰基转移酶(AcT)，并与可溶形式的酶比较在水性条件下产生芳香酯的能力。i)AcT的溶胶凝胶嚢化将硅酸钠(27%Si02，14%NaOH，SigmaAldrichCorp"WI)和曱基硅酸(siliconate)钠(水中30%，Gelest，NJ)的1:1混合物的等分试样(2.2mL)在搅拌下加入磷酸(4mL,1.5mM)中。然后加入酖基转移酶的溶液(1mL,12mg/mL)，混合物在室温下静置直到确保胶凝化。然后用50mM磷酸盐緩沖液pH7(50mL)对得到的凝胶洗涤两次，在密封容器中过夜固化。ii)顺-3-己烯醇的酯化将上文所述的湿润溶胶-凝胶的一部分(0.66g，等同于1mgAcT)与顺-3-己烯醇(20uL)和甘油三乙酸酯UOuL)在50mM磷酸钠緩冲液，pH7中一起温育。将顺-3-己烯醇向乙酰酯的转化与含可溶AcT(0.5mgAcT)的对照相比。在10、30和120分钟时从两个反应物中取等分试样(10uL),通过GC/MS加以分析。结果示于图2。虽然清楚表明，固定化的酶以比游离的酶更低的速率形成乙酰酯(停留时间4.5分钟)，但是酶的固定化形式的去除防止了芳香酯的随后水解，这在游离酶的情况下在30分钟和120分钟的时间点时是明显的。实施例7:使用AcT对醇和芳香酯进行酯交换用AcT(10ppm)在室温对50mM磷酸钾緩冲液pH7中的苯甲醇和乙酸香茅酯的混合物(每种l%v/v)进行处理。数分钟内，乙酸苯甲酯和香茅醇的特征性气味变得明显.使用实施例1所述的方法，通过GC/MS来验证这些化合物的存在。实验结果表明同时从具有较不明显气味的前体产生两种香味的可能性。实施例8:从被黄油弄脏的织物产生芳香酯向6块编织棉样品(每块250-300mg)应用熔化的黄油(40-50mg)，令其冷却至室温。对样品进4亍称重，用LIPOMAX或AcT或这两种酶的组合进行处理(表5)。将每块样品加入至含有苯曱醇(10uL，0.005%v/v)和这些酶的20mL5mMHEPES緩冲液pH7中。室温下搅动20分钟后，移出样品，由两组人员在干燥前后评估气味。干燥后还测量了重量的总减轻。结果概括于表6中。表5:从被黄油弄脏的棉织物样品除去黄油的程度<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>AcT=包皮垢分枝杆菌酰基转移酶；LM-LIPOMAXtm脂肪酵。表6:酶处理之后被黄油弄脏的样品的臭味形成程度<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>实施例9:测定酯交换与水解的比例将甘油三丁酸酯(10uL)加入含有4%乙醇的緩沖液(1mL)中，用AcT或KLM3，以及不含酶的对照在40°C处理超过2小时。从每份样品取等分试样(100uL)，稀释进二氯甲烷(900uL)中，接着进行GC/MS分析。针对每种条件记录丁酸乙酯与丁酸的量和比例。对照没有显示底物的酰基转移或水解。经AcT处理的样品显示出甘油三丁酸酯的完全消化以及1:2的丁酸与丁酸乙酯的比例。经KLM3，处理的样品则仅显示出甘油三丁酸酯的部分消化，但是丁酸与丁酸乙酯的比例为1:5。实施例10:-使用可溶的和固定化形式的AcT实现同时产生过酸和香味AcT、甘油三乙酸酯、稀释的过氧化氢水溶液(50至500ppm)和苯曱醇(10-50ppm)的组合导致过乙酸和香味乙酸苯曱酯均产生。用30%过氧4匕氬(100uL)和75ppm的酰基转移酶溶液(100uL)处理苯甲醇(50uL)、三乙酸甘油(甘油三乙酸酯，100uL)和染料氯化频哪氰醇(50uL，1mg/mL，80%丙酮中)的溶液在1至2分钟内检测苯甲醇的特征香味。在10分钟内染料完全脱色。香味几乎掩盖了过乙酸的不'lt气p木。用环己基甲醇(50uL)重复实验，导致染料漂白以及香味乙酸环己基曱酯的形成。省略了AcT的对照实验没有导致显著的香味形成或染料漂白。向小的编织棉样品(5x5cm)加入酰基转移酶溶液(1mL，10ppm),让其干燥。加入苯甲醇(50uL)、三乙酸甘油(甘油三乙酸酯，100uL)、30%过氧化氢(100uL)和染料氯化频哪氰醇(50uL,1mg/mL，80%丙酮中)的l-2mL溶液，导致香味乙酸苯甲酯的产生和染料的漂白。加入顺序可以颠倒，其中，向织物样品加入苯曱醇(50uL)、三乙酸甘油(甘油三乙酸酯，100uL)和染料氯化频哪氰醇(50uL，lmg/mL,处于80%丙酮)的l-2mL溶液，并允许干燥。随后加入AcT(lmL，10卯m)和过氧化氢(lmL，3%)，导致10分钟之内染料就从紫色漂白为无色，并且产生乙酸苯甲酯的气味。实施例11:洗涤剂背景中用甘油三丁酸酯对多元醇的酰化A)通过彻底涡旋混合制备5mMHEPES緩沖液pH7.8(含有1.5g/LAATCCHDL)中的甘油三丁酸酯(l%v/v)和四甘醇(l%v/v)乳液。通过加入至1.8mL5mMHEPES緩冲液pH7.8(含有1.5g/LAATCCHDL)将上述混合物的等分试样(200uL)稀释10倍，在室温搅拌下用AcT(10ppm)进行处理。在给定的时间点取小的等分试样(S0uL),并稀释进20%含水乙腈中，接着进行LC/MS分析。在与以正电喷雾(+veESI)模式运行的QuantumTSQ三重四Mi普仪(ThermoFisher,SanJose,CA)相接的SurveyorHPLC系统上进行LC/MS分析。所用的HPLC柱是AgilentZorbaxSB-AqC18柱(100x2，1mm)。对化合物进行梯度洗脱，使用的梯度从溶剂A(H20中的25mM曱酸铵)开始，在10分钟内逐渐增加溶剂B(卯％曱醇+10%溶剂A)的量，再回到溶剂A。最初，仅观察到两种起始材料，四甘醇以212的m/z在3.9分钟时洗脱，甘油三丁酸酯以320的m/z在6.9分钟时洗脱。两种化合物都给出了它们的铵离子加合物的预计m/z比。加入AcT酶之后，在5.8分钟时观察到了m/z为282的新的峰，对应于四甘醇的单丁酰酯(图3)。过夜搅拌后，丁酸气味非常明显。B)使用"C-均匀标记的甘油("C-U-甘油)和甘油三丁酸酯来重复上述实验。经同位素标记的底物允许区分源于甘油三丁酸酯酰基供体的甘油(m/z110)、甘油一丁酸酯(m/z180)和甘油二丁酸酯(m/z250)与经标记的甘油酰基受体(m/zl13)的酰化形成的丁酸酯(对甘油一丁酸酯和甘油二丁酸酯来说分别是m/zl83和253)。过夜温育之后对混合物进行的LC/MS分析(图4)显示，除了未经标记的类似物之外，形成了经标记的甘油一丁酸酯和甘油二丁酸酯。实施例12:在洗衣条件下从被乳脂弄脏的织物产生香味在洗衣条件下，在存在脂肪酶和/或酰基转移酶(AcT)加受体醇时，在Terg-O-tomer(U.S.Testing，Co.Inc.Hoboken,N.J.)中洗涤被乳脂弄脏的棉样品，目的是降低游离短链脂肪酸(C4至C8)的量和产生味道愉人的短链脂肪酸酯。不用月旨肪酶、用Lipex(Novozymes)(1.2ppm)或Lipomax(Genencor)基转移酶(AcT)(2ppm)(处于重负荷液体洗涤剂(AATCCHDL)背景(1.5g/L)中)在5mMHEPES緩沖液pH7.8(硬度6gpg)中处理4皮乳脂弄脏的样品(CFTCS-IO，TestFabrics,Inc.WestPittston，PA，USA)。在77。F进行30分钟洗涤期之前，向每个盆中加入苯曱醇(lg/L)。在15和30分钟的时间点，从每个盆中取等分试样(8mL)，用己烷(2mL)萃取。在离心机中将己烷层与水性乳液分开，向气相色语(GC)管加入1mL。用30mx0.25mm(0.25um膜)HP-5MS柱，用Agilent6890GC/MS进行GC/MS分析。GC/MS方法利用氦作为载气(1cc/分钟)，注射器端口温度为250。C，分流比为20:1。烘箱温度程序以60°C保持1分钟开始，并以20。C/分钟升温至240。C，总运行时间为10分钟。质量检测仪在注射后2分钟时开始，从30至400AMU扫描。图5和下表7显示了GC/MS结果。在对照(盆1)或对照+AcT(盆2)盆中没有检测到丁酸节酯。仅Lipex和Lipomax产生了一定的丁酸千酯，Lipex在两个时间点产生的更多。对两种脂肪酶而言，加入AcT都增强了产生的丁酸爷酯的量，但是对Lipomax来说效果要大得多，这表明了强协同作用。表7:洗衣条件下从被乳脂弄脏的棉布形成丁酸节酯<table>tableseeoriginaldocumentpage53</column></row><table>实施例13:在洗衣条件下从被乳脂弄脏的织物降低臭味实施例12描述的洗涤实验之后，对棉样品干燥过夜，主观地评估臭味，结果概括于表8中。表8:洗涤之后，在被黄油弄脏的棉布上的臭味评估<table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table>最糟糕的臭P未与Lipex处理的样品相关。Lipomax处理的样品的不悦气味略低，虽然比对照更糟。在Lipomax加AcT处理的样品中，相对于仅Lipomax而言，臭味有显著降低。实施例14:用KLM3，从山梨醇和蛋黄产生一油酸山梨酯通过在含有蛋黄和山梨醇的系统中于40。C温育4小时来测试脂类酰基转移酵KLM3突变体pLA231。用有机溶剂萃取反应产物，通过HPTLC和GLC/MS来分析经分离的脂类。结果证实了KLM3突变体pLA231能够从山梨醇和蛋黄产生一油酸山梨醇酯。在洗涤剂工业中，已知在不同制剂中使用山梨醇。还已知，织物通常含有包括脂肪/油和蛋的脂肪污渍。该研究的一个目的是研究KLM3突变体在山梨醇和蛋黄混合物中产生用于清洁目的的表面活性剂的效果。材料和方法KLM3变体pLA231:突变W122A、A236E、L31F(活性:1.6TlPU/ml)山梨醇，70%(Danisco)蛋黄经巴氏灭菌的蛋黄，来自Hedegaard,DK9560Hadsund。一油酸山梨酯参照组分，鉴定自GrindstedSMOitemno.452454。HPTLC上样器CAMAG上样器AST4。HPTLC板20x10cm(Merckno.1.05641)在使用前通过在烘箱中于160。C干燥20-30分钟来活化板。上样使用AST4上样器，将溶解于氯仿:甲醇(2:1)中的经萃取的脂类上样到HPTLC板上。运行緩冲液4:氯仿:甲醇:水(74:26:4)上样/洗脱时间16分钟。展开液体16%H3P04中的6%Cupriacetate。洗脱之后，在160°C于烘箱中对板进行10分钟的千燥，冷却，并浸入展开液体中，再在160°C干燥额外6分钟。对板进行视觉评估并扫描(CamagTLC扫描仪)。GLC分析装备有WCOT融合珪胶柱12.5mx0.25mmIDx0.1n膜厚5%苯基國甲基-珪酮(来自Chrompack的CPSil8CB)的PerkinElmerAutosystem卯00毛细气相色i普。载气氦注射器。PSSI冷分流注射(起始温度为50°C,加热至385。C),体积为1.0pi检测仪FID:395°C烘箱程序123烘箱温度90280350等温，时间，分钟1010温度速率，。C/分钟154样品制备将从样品提取的脂类溶解于0.5ml庚烷吡啶(2:1，含有内标十七烷，0.5mg/ml)中。将300nl样品溶液转移到巻曲管(crimpvial)中，加入300piMSTFA(N-曱基-N-三曱基甲硅烷基-三氟乙酰胺)，在60。C反应20分钟。实验按照表9所列出的方案，用底物蛋黄和山梨醇测试KLM3pLA231。表9Jour.2467-11212蛋黄g0.670.67山梨醇，70%g0.330.33KLM3,pLA231，1TlPU/mlml0.1水ml0.1步骤在dramglass中用磁力搅拌器来混合蛋黄和山梨醇，并加热至50。C。加入酶，并在50。C温育4小时。通过加入7,5ml氯仿曱醇2:1并在Whirley上混合来终止反应。在Rotamix(25rpm)上对脂类进行30分钟的提取，样品在700g下离心10分钟。取1ml溶剂相用于TLC和GLC/MS分析。结果来自样品1和2的脂类的HPTLC分析示于图7。HPTLC色镨图表明极性组分的形成，其预计是山梨醇的酯。为进一步鉴定，通过GLC/MS分析样品。经酶处理过的样品(1)和对照样品(2)的GLC色语图示于图8和9中。图8中标记一油酸山梨醇酯的峰的MS镨显示于图10中，并将其与一油酸山梨醇酯的MS谦进行比较。对反应产物的HPTLC分析显示，在温育期间已形成了极性组分。GLC/MS分析证实形成了一油酸山梨醇酯。一油酸山梨醇酯是具有表面活性性质的极性组分，其将在水系统中作为表面活性剂发挥作用。本说明书中提到的所有专利和出版物都表明本发明所属领域技术人员的水平。所有专利和出版物都通过引用并入本文，其程度就好像每份各自的出版物被特别和各自指明通过引用并入一样。已经描述了本发明的一些实施方式，本领域普通技术人员显而易见的是，可对公开的实施方式进行多种修改，这些修改也将落在本发明的范围内。技术人员易于认识到，本发明易于被改造以实施目标并得到所提到的结果和优点以及其中固有的那些。本文提到的组合物和方法是代表性的实施方式，是示例性的，并且不意在作为对本发明范围的限制。对本领域技不会偏离本发明的范围和精神。本文阐述性描述的本发明可以在缺少本文没有具体公开的任何一种或多种要素、一种或多种限制的情况下实施。使用的术语和表达仅用作为描述而非限制性的术语，并且此类术语和表达的使用并不欲排除显示和描述的特征的任何等同特征或其部分，而应当认识到，多种修改在要求保护的本发明范围内。因此，应当理解，虽然已参考一些实施方式和任选特征对本发明进行了具体公开，但是本领域技术人员可采取本文公开的概念的修改和变化，此类修改和变化也被认为在所附权利要求所定义的本发明的范围内。本文已经广义地一般性描述了本发明。落在该一般性公开内容中的每个更窄的种类和次一般性的组别也是本发明的一部分。这包括用从该类中排除任一主题的前提或否定性限制对本发明进行一般性描述，而不管排除的材料是否在本文中被特别提及。权利要求1.清洁组合物，其包含a)酰基转移酶，和b)所述酰基转移酶的醇底物；其中，所述酰基转移酶和醇底物以在所述清洁组合物与酰基供体组合时有效产生可检测到的酯的量存在。2.权利要求l的组合物，其中所述酰基转移酶是SGNH酰基转移酶。3.权利要求1的清洁组合物，还包含c)酰基供体，以及d)所述酰基转移酶催化的所述醇底物和所述酰基供体之间的反应所产生的酯。4.权利要求3的组合物，其中所述酰基转移酶是SGNH酰基转移酶。5.权利要求3的清洁组合物，其中所述酯是织物护理剂。6.权利要求5的清洁组合物，其中所述织物护理剂是酯表面活性剂。7.权利要求3的方法，其中所述酯是芳香酯。8.权利要求l的清洁组合物，其中所述酰基供体存在于物体上的污渍中。9.权利要求l的清洁組合物，其中所述含有酰基供体的物体被所述酰基供体弄脏。10.权利要求1的清洁组合物，其中所述酰基供体是Cl至C18酰基供体。11.权利要求l的清洁组合物，其中所述清洁组合物不包含脂肪酶。12.权利要求l的清洁组合物，其中所述清洁组合物还包含脂肪酶。13.权利要求1的清洁组合物，其中所述清洁组合物还包含蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶、角质酶、果胶酸裂合酶、甘露聚糖酶和/或氧化还原酶。14.权利要求1的清洁组合物，其中所述清洁组合物还包含表面活性剂、助洗剂、聚合物、盐、漂白活化剂、漂白系统、溶剂、緩冲剂和/香料。15.清洁方法，其包括将a)酰基转移酶b)所述酰基转移酶的醇底物，和c)酰基供体组合，其中所述酰基转移酶催化酰基基团从所述酰基供体转移到所述醇底物上以产生织物护理产物。16.权利要求15的方法，其中所述酰基转移酶是SGNH酰基转移酶。17.权利要求15的方法，其中所述织物护理产物是酯表面活性剂或芳香酯。18.清洁组合物，其包含a)SGNH酰基转移酶，以及b)所迷SGNH酰基转移酶的醇底物；其中，所述SGNH酰基转移酶和醇底物以在所述清洁组合物与酰基供体接触时有效产生可检测到的酯的量存在。19.权利要求18的清洁组合物，还包含c)含酰基供体的物体，以及d)所述SGNH酰基转移酶催化的所述醇底物和所述酰基供体之间的反应所产生的酯。20.权利要求18的清洁组合物，其中所述酰基供体是C1至C18的酰基供体。21.权利要求18的清洁组合物，其中所述跣基供体是含酰基供体的物体。22.权利要求21的清洁组合物，其中所述含酰基供体的物体被所述酰基供体弄脏。23.权利要求21的清洁组合物，其中所述物体被乳制品玷污。24.权利要求18的清洁组合物，其中所述清洁组合物不包含脂肪酶。25.权利要求18的清洁组合物，其中所述清洁组合物还包含脂肪酶。26.权利要求18的清洁组合物，其中所述清洁组合物是水性组合物。27.权利要求26的清洁组合物，其中所述清洁组合物除任何固体组分之外包含至少90%的水。28.权利要求18的清洁组合物，其中所述酯是芳香酯。29.权利要求18的清洁组合物，其中所述清洁组合物还包含至少一种蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶、角质酶、果胶酸裂合酶、甘露聚糖酶或氧化还原酶或其混合物。30.权利要求18的清洁组合物，其中所述清洁组合物还包含至少一种表面活性剂、助洗剂、聚合物、盐、漂白活化剂、漂白系统、溶剂、緩冲剂或香料。31.清洁方法，所述方法包括将a)SGNH酰基转移酶b)所述SGNH酰基转移酶的醇底物，和c)被含酰基供体的物质弄脏的物体到所述醇底物上以产生酯。32.权利要求31的方法，其中所述酯是C4至C6羧酸酯。33.权利要求31的方法，其中所述酯是丁酸酯或丁酸千酯。34.权利要求31的方法，其中所迷酯是伯醇和C4至C6脂肪酸的酉旨。35.权利要求31的方法，其中所述物体是织物。36.权利要求35的方法，其中所述织物被含油物质弄脏。37.权利要求35的方法，其中所述织物被含三酰甘油酯的物质玷污。38.权利要求37的方法，其中所述含三酰甘油酯的物质含有C4-C18三酰甘油酉旨。39.权利要求31的方法，其中所述SGNH酰基转移酶催化酰基基团从所述织物上存在的酰基供体转移到所述醇底物上以产生芳香酯。40.权利要求31的方法，其中所述SGNH酰基转移酶的所述醇底物还作为表面活性剂或乳化剂。41.权利要求40的方法，其中所述SGNH酰基转移酶催化酰基基团从所述酰基供体转移到所述表面活性剂或乳化剂上以产生酯。42.权利要求31的方法，其中所述方法还包括将过氧化物的来源与所述SGNH酰基转移酶组合，并且所述方法导致产生过酸。全文摘要本发明提供了包含酰基转移酶和酰基转移酶的醇底物的组合物。在一些特别优选的实施方式中，组合物可用于生产芳香酯。在一些其它实施方式中，组合物可用于洗衣洗涤剂，以清洁含有至少一种甘油三酯的污渍。在另外一些实施方式中，组合物用于生产具有清洁性质的化合物(例如表面活性酯)。文档编号C11D3/386GK101622335SQ200880006302公开日2010年1月6日申请日期2008年2月27日优先权日2007年2月27日发明者A·J·保罗斯,J·B·瑟,J·C·麦考利夫,J·D·米克尔森申请人:丹尼斯科美国公司