一种钻叶龙胆挥发油的提取方法
【专利摘要】本发明涉及一种钻叶龙胆挥发油的提取方法，其处理步骤包括：取钻叶龙胆地上部分干燥粉碎，过40目筛，置于发酵桶中，加入原料重量1.0~1.5%的生物酶，混合均匀，加入pH4.0~5.0的柠檬酸/柠檬酸钠的缓冲溶液，达到手握成团即可，密封，于40~50℃发酵5~7d；将发酵后的原料取出，采用微波法进行萃取，于微波功率600~800W的条件下连续提取1~2h，过滤，将滤液用有机溶剂萃取2~3次，合并萃取液，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，即得钻叶龙胆挥发油。本发明采用混合酶自然发酵和微波提取相结合的方法，有效地提高了钻叶龙胆挥发油的得率，操作简单，反应条件温和，适用于规模化生产。
【专利说明】一种钻叶龙胆挥发油的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种钻叶龙胆挥发油的提取方法，属于天然植物有效成分提取【技术领域】。
【背景技术】
[0002]钻叶龙胆为多民族广泛使用的传统民族药材，是中国的特有植物。钻叶龙胆长于消炎、止痛、镇咳，在治疗天花、气管炎、炭疽、风湿关节炎方面有独特疗效。钻叶龙胆挥发油的化学成分主要包括脂肪酸类、烷烃类、冠醚类、烯烃类、酮类、醛类和酯类等化合物。挥发油中含量最高的化合物依次为:棕榈酸、15-冠醚-5、二十二烷、二十九玩、3，7，11，15-四甲基-2-十六烯、肉豆蘧酸、二十四烷、叶绿醇。棕榈酸作为钻叶龙胆挥发油的主要组成成分，具有免疫应答作用，可用于调节感染损伤后的炎症。此外，钻叶龙胆挥发油中含量较高的15-冠醚-5是能够络合碱金属和碱土金属离子以及些中性配体，广泛应用于核能工业、电子电化学工业、感官材料工业及其他生产领域；肉豆蘧酸还可以作为生产表面活性剂的原料，也可用于消泡剂、增香剂以及配制各种食用香料；叶绿醇可作为合成维生素K1以及维生素E的中间体。因此挥发油成分也应该是钻叶龙胆的活性成分之一，应受到重视以更好地控制该药材质量。
[0003]有关钻叶龙胆中挥发油的提取方法而未见报道。挥发油常用的提取方法有水蒸气蒸馏法和超临界流体萃取法。水蒸气蒸馏法虽工艺简单易行，但由于加热时间长，提取温度较高，有效成分易被破坏，所提取出的挥发油得率低、杂质多；而超临界流体对挥发油成分的提取，其具有活性物质含量高、不存在有害物残留、环保等优点，但此法对提取设备的要求较高，不适宜工业化生产。
[0004]经文献检索，未见与本发明相同的的公开文献报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种得率高且产品品质佳的从钻叶龙胆中提取挥发油的方法。
[0006]本发明包括以下步骤:
取钻叶龙胆地上部分干燥粉碎，过40目筛，置于发酵桶中，加入原料重量1.(Tl.5%的生物酶，混合均匀，加入ρΗ4.0-5.0的柠檬酸/柠檬酸钠的缓冲溶液，达到手握成团即可，密封，于4(T50°C发酵5~7d ;将发酵后的原料取出，采用微波法进行萃取，加入原料4飞倍的50^70%的乙醇，于微波功率60(T800W的条件下连续提取l~2h，过滤，得滤液；将滤液用有机溶剂萃取2~3次，合并萃取液，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，即得钻叶龙胆挥发油。
[0007]所述的生物酶为质量比为2:1:1的纤维素酶、半纤维素酶和酸性淀粉酶。
[0008]所述的纤维素酶与半纤维素酶的活性为3(T60u/mg、酸性淀粉酶的活性为300~400u/mg。
[0009]所述的有机溶剂为石油醚或乙醚中的一种。
[0010]本发明工艺简单，利用混合酶采用自然发酵法结合微波提取技术提取钻叶龙胆挥发油，有效地提高了钻叶龙胆挥发油的得率，操作简单，反应条件温和，适用于规模化生产。
[0011]下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0012]【具体实施方式】:
实施例1:
取钻叶龙胆地上部分干燥粉碎，过40目筛，置于发酵桶中，加入原料重量1.0%的生物酶(纤维素酶、半纤维素酶和酸性淀粉酶的质量比为2:1:1，其活性分别为30U/mg、30U/mg、300u/mg),混合均匀，加入pH4.0的柠檬酸/柠檬酸钠的缓冲溶液，达到手握成团即可，密封，于40°C发酵5d ;将发酵后的原料取出，采用微波法进行萃取，加入原料4倍的50%的乙醇，于微波功率600W的条件下连续提取lh，过滤，得滤液；将滤液用石油醚萃取2次，合并萃取液，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，即得棕黄色的钻叶龙胆挥发油，得率为2.11%。
[0013]实施例2:
取钻叶龙胆地上部分干燥粉碎，过40目筛，置于发酵桶中，加入原料重量1.2%的生物酶(纤维素酶、半纤维素酶和酸性淀粉酶的质量比为2:1:1，其活性分别为60U/mg、60U/mg、400u/mg),混合均匀，加入pH4.5的柠檬酸/柠檬酸钠的缓冲溶液，达到手握成团即可，密封，于50°C发酵7d ;将发酵后的原料取出，采用微波法进行萃取，加入原料5倍的60%的乙醇，于微波功率700W的条件下连续提取1.5h，过滤，得滤液；将滤液用乙醚萃取3次，合并萃取液，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，即得棕黄色的钻叶龙胆挥发油，得率为3.03%。
[0014]实施例3:
取钻叶龙胆地上部分干燥粉碎，过40目筛，置于发酵桶中，加入原料重量1.5%的生物酶(纤维素酶、半纤维素酶和酸性淀粉酶的质量比为2:1:1，其活性分别为35U/mg、35U/mg、350u/mg)，混合均匀，加入pH5.0的柠檬酸/柠檬酸钠的缓冲溶液，达到手握成团即可，密封，于45°C发酵6d ;将发酵后的原料取出，采用微波法进行萃取，加入原料6倍的70%的乙醇，于微波功率800W的条件下连续提取2h，过滤，得滤液；将滤液用石油醚萃取2次，合并萃取液，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，即得棕黄色的钻叶龙胆挥发油，得率为2.88%。
【权利要求】
1.一种钻叶龙胆挥发油的提取方法，其特征在于，包括以下步骤:取钻叶龙胆地上部分干燥粉碎，过40目筛，置于发酵桶中，加入原料重量1.(Tl.5%的生物酶，混合均匀，加入ρΗ4.0-5.0的柠檬酸/柠檬酸钠的缓冲溶液，达到手握成团即可，密封，于4(T50°C发酵5^7d ;将发酵后的原料取出，采用微波法进行萃取，加入原料4飞倍的50-70%的乙醇，于微波功率60(T800W的条件下连续提取f 2h，过滤，得滤液；将滤液用有机溶剂萃取2~3次，合并萃取液，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，即得钻叶龙胆挥发油。
2.根据权利要求1所述的一种钻叶龙胆挥发油的提取方法，其特征在于，所述的生物酶为质量比为2:1:1的纤维素酶、半纤维素酶和酸性淀粉酶。
3.根据权利要求1或2所述的一种钻叶龙胆挥发油的提取方法，其特征在于，所述的纤维素酶与半纤维素酶的活性为3(T60u/mg、酸性淀粉酶的活性为30(T400U/mg。
4.根据权利要求1所述的一种钻叶龙胆挥发油的提取方法，其特征在于，所述的有机溶剂为石油醚或 乙醚中的一种。
【文档编号】C11B1/10GK104073342SQ201410266471
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2014年6月16日 优先权日:2014年6月16日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司