表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活中的应用，即在废纸脱墨用碱性脂肪酶中加入表面活性剂，室温下以50转/分钟搅拌30分钟，将废纸脱墨用碱性脂肪酶与所述表面活性剂混合均匀；表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚中的一种或两种。表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活的同时，还具有降低表面张力的能力，促进碱性脂肪酶分子快速到达油墨粒子表面，提高油墨分解效率，进一步提升脱墨效果。
【专利说明】表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物工程【技术领域】，特别是涉及表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活中的应用。
【背景技术】
[0002]脂肪酶是重要的工业酶制剂品种之一，可以催化解脂、酯交换、酯合成等反应，广泛应用于油脂加工、食品、医药、饲料、油脂加工、造纸、皮革等工业。不同来源的脂肪酶具有不同的催化特点和催化活力。
[0003]用于废纸脱墨的碱性脂肪酶，如绿微康⑶06脱墨酶，是一种特殊的酯键水解酶，它可作用于甘油三酯的酯键，使甘油三酯降解为甘油二酯、单甘油酯、甘油和脂肪酸。印刷油墨中大量使用植物油脂作为连接料，在现有脱墨工艺中，碱性脂肪酶可直接将植物油脂分解成脂肪酸和甘油，从而代替传统皂、烧碱、硅酸钠等脱墨化学品，大幅降低污水COD和B0D,减少污水处理压力，有利于环境保护。
[0004]在废纸制浆工艺中，为了适应连续化生产，通常使用废纸脱墨用液体碱性脂肪酶。但是与固体脂肪酶相比，废纸脱墨用液体碱性脂肪酶在运输、储存和使用过程中，由于温度和环境的变化，酶的稳定性较差，酶活力损失较大，对脱墨效果造成不良影响，后续工艺中产生纸机纸病，严重影响成纸质量，导致经济损失。因此，稳定液体碱性脂肪酶的酶活是液体碱性脂肪酶能用于废纸脱墨的前提条件。目前常用的液体碱性脂肪酶稳定剂通常是小分子的多元醇和无机盐类化合物，而脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚在稳定废纸脱墨用液体碱性脂肪酶的酶活中的应用未见报道。
【发明内容】
[0005]本发明主要解决的技术问题是提供一种表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活中的应用，所述表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活的同时，还具有降低表面张力的能力，促进碱性脂肪酶分子快速到达油墨粒子表面，提高油墨分解效率，进一步提升脱墨效果。
[0006]为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是:提供一种表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活中的应用，即在废纸脱墨用碱性脂肪酶中加入表面活性剂，室温下以50转/分钟搅拌30分钟，将所述废纸脱墨用碱性脂肪酶与所述表面活性剂混合均匀；其中所述表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚中的一种或两种。
[0007]优选地，按重量计，所述废纸脱墨用碱性脂肪酶为85~99%，所述表面活性剂为1~15%。
[0008]优选地，所述脂肪醇聚氧乙烯醚的脂肪醇为碳链长度为8~18的直链或支链，聚氧乙烯醚的聚合单元数为3~100。
[0009]最优选地，所述脂肪醇聚氧乙烯醚的脂肪醇为碳链长度为12的直链或支链，聚氧乙烯醚的聚合单元数为9。[0010]优选地，所述烷基酚聚氧乙烯醚的烷基酚为碳链长度为8~18的直链或支链，聚氧乙烯醚的聚合单元数为3~100。
[0011]最优选地，所述烷基酚聚氧乙烯醚的烷基酚为碳链长度为9的直链或支链，聚氧乙烯醚的聚合单元数为10。
[0012]优选地，所述废纸脱墨用碱性脂肪酶为绿微康⑶06脱墨酶。
[0013]本发明的有益效果是:区别于现有液体碱性脂肪酶在存放、运输的过程中酶活损失较大的情况，本发明应用脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚中的一种或两种按一定比例加入到废纸脱墨用碱性脂肪酶中，所述表面活性剂不仅能稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活，而且还具有降低表面张力的能力，促进碱性脂肪酶分子快速到达油墨粒子表面，提闻油墨分解效率，进一步提升脱墨效果。
【专利附图】
【附图说明】
[0014]图1为本发明表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活应用效果示意图。【具体实施方式】
[0015]下面结合附图及实施例对本发明进行详细说明。
[0016]表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活中的应用，即在85~99%废纸脱墨用碱性脂肪酶中加入为I~15%表面活性剂，室温下以50转/分钟搅拌30分钟，将废纸脱墨用碱性脂肪酶与所述表面活性剂混合均匀；表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚中的一种或两种；废纸脱墨用碱性脂肪酶为绿微康CD06脱墨酶，该酶可以从深圳市绿微康生物工程有限公司购买。
[0017]实施例1`[0018]在1000升反应釜中，依次加入850公斤废纸脱墨用碱性脂肪酶、100公斤十二醇聚氧乙烯(9)醚、50公斤壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以50转/分钟搅拌30分钟使其混合均匀，停止搅拌后，得浅黄色液体。
[0019]实施例2
[0020]在1000升反应釜中，依次加入950公斤废纸脱墨用碱性脂肪酶、50公斤壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以50转/分钟搅拌30分钟使其混合均匀，停止搅拌后，得浅黄色液体。
[0021]实施例3
[0022]在1000升反应釜中，依次加入900公斤废纸脱墨用碱性脂肪酶、100公斤十二醇聚氧乙烯(9)醚、以50转/分钟搅拌30分钟使其混合均匀，停止搅拌后，得浅黄色液体。
[0023]实施例4
[0024]在1000升反应釜中，依次加入900公斤废纸脱墨用碱性脂肪酶、50公斤十二醇聚氧乙烯(9)醚、50公斤壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以50转/分钟搅拌30分钟使其混合均匀，停止搅拌后，得浅黄色液体。
[0025]实施例5
[0026]在1000升反应釜中，依次加入990公斤废纸脱墨用碱性脂肪酶、10公斤十二醇聚氧乙烯(9)醚，以50转/分钟搅拌30分钟使其混合均匀，停止搅拌后，得浅黄色液体。
[0027]实施例6[0028]在1000升反应釜中，依次加入990公斤废纸脱墨用碱性脂肪酶、10公斤壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以50转/分钟搅拌30分钟使其混合均匀，停止搅拌后，得浅黄色液体。
[0029]比较例I
[0030]以废纸脱墨用碱性脂肪酶中不添加表面活性剂为对照组，以实施例1~6为实验组，分别对实验组和对照组进行酶活检测。
[0031]脂肪酶酶活测定方法:
[0032]I 试剂
[0033]1.10.05mol/L Gly-NaOH 缓冲液(ρΗ9.4)
[0034]A 液:0.2mol/L NaOH，称取 NaOH(A.R)8.0g，用蒸馏水定容至 1000ml ；
[0035]B液:0.2mol/L Gly,称取甘氨酸15.014g,用蒸懼水定容1000ml ；
[0036]使用前取A液16.8ml+B液50ml，加部分蒸馏水稀释，再用酸度计调节pH至9.4，定容到200ml。
[0037]1.2橄榄油
[0038]分析纯。
[0039]1.34%聚乙烯醇(PVA)溶液
[0040]称取聚乙烯醇40g(聚`合度 1750+50)，加 1000ml 0.05mol/L pH 9.4 的 Gly-NaOH缓冲液，沸水浴完全溶解后，冷却，必要时过滤，溶解过程中蒸发的水分要用蒸馏水补充，定容至 1000ml。
[0041]1.4 乙醇
[0042]含量在95%以上，为分析纯。
[0043]1.50.01mol/L NaOH 标准滴定溶液
[0044]制备标准滴定溶液的浓度值应在规定浓度值的± 10 %范围以内。标准溶液置于塑料瓶中保存，I个月后需重新标定。
[0045]2仪器设备
[0046]2.1乳化容器:体积为500ml
[0047]2.2均质机:转速10000转/分
[0048]2.3震荡恒温水浴锅
[0049]2.4液晶式酸度计
[0050]2.5多头磁力搅拌器
[0051]3乳化液的制备
[0052]取4% PVA溶液与橄榄油2: I混合，放入烧杯或三角瓶中，然后用均质机乳化(外包冰块)，转速10000转/分，一次乳化3分钟，每次乳化间隔时间为3分钟，共4次，立即使用。
[0053]4酶活测定
[0054]4.1酶活测定(NaOH滴定法):
[0055]准确吸取Iml样品于100ml容量瓶中，用缓冲液定容到刻度，摇匀，进行下一步稀释，稀释倍数:以样品与对照消耗碱量之差在4.5ml~5.5ml范围内。
[0056]注意:再次稀释次数不得超过两次。
[0057]测定:取100ml三角瓶3只，其中2只是试样，I只是空白照，每只中的组成液为:4.0ml缓冲液(pH9.4),5.0ml橄榄油乳化液，1.0ml酶液。以上除酶液以外的组成液置于36°C水浴锅预热5分钟，然后精确加入Iml酶液，精确计时，缓慢振荡(80次/分钟)，保温10分钟，立即加入95%酒精20ml，取出，加入10ml30%的氯化钠溶液，摇匀，使之破乳约I分钟。并同时做空白对照，对照同样品一样，先预热5分钟，保温10分钟，立即加入20ml95%酒精(Iml酶液先加入该20ml 95%酒精中灭活)。
[0058]用0.01mol/LNaOH滴定样品至空白溶液的pH。反应后的样品应在半小时内完成滴定。
[0059]4.2 计算
【权利要求】
1.表面活性剂在稳定废纸脱墨用碱性脂肪酶的酶活中的应用，其特征在于，在废纸脱墨用碱性脂肪酶中加入表面活性剂，室温下以50转/分钟搅拌30分钟，将所述废纸脱墨用碱性脂肪酶与所述表面活性剂混合均匀；其中所述表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚中的一种或两种。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，按重量计，所述废纸脱墨用碱性脂肪酶为85~99%，所述表面活性剂为I~15%。
3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述脂肪醇聚氧乙烯醚的脂肪醇为碳链长度为8~18的直链或支链，聚氧乙烯醚的聚合单元数为3~100。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述脂肪醇聚氧乙烯醚的脂肪醇为碳链长度为12的直链或支链，聚氧乙烯醚的聚合单元数为9。
5.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述烷基酚聚氧乙烯醚的烷基为碳链长度为8~18的直链或支链，聚氧乙烯醚的聚合单元数为3~100。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述烷基酚聚氧乙烯醚的烷基为碳链长度为9的直链或支链，聚氧乙烯醚的聚合单元数为10。
7.如权利要求1~6任一项所述的应用，其特征在于，所述废纸脱墨用碱性脂肪酶为绿微康⑶06脱墨酶。`
【文档编号】D21C5/02GK103667231SQ201210326112
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年9月5日 优先权日:2012年9月5日
【发明者】郭宏涛, 王剑英, 张清辉 申请人:东莞市绿微康生物科技有限公司