一种用忍冬茎叶和黑蒿制成的有机肥料的制作方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及肥料领域，尤其是有机肥料技术领域。
【背景技术】
[0002] 有机肥料中的有机物质和营养物质均十分丰富，不仅能为作物的生长提供所需的 养分，还可以提高作物产量，改善作物品质，保持土壤肥力，同时可提高肥料利用率，降低生 产成本。
[0003] 随着人们生活水平的提高，安全卫生无污染的有机、绿色食品的需求在不断增加， 广大农民迫切需要施用有机肥来提高农产品的市场竞争力。目前，美国等西方国家有机肥 料用量已占总量的50 %，我国有机肥产业商品化生产初具规模，农田的大规模施用尚未普 及，所占比不到10%。
[0004] 油菜是中国主要的油料作物，油菜菌核病是油菜生产中的重要病害之一，常年株 发病率高达10%~30%，严重的达80%以上；病株一般减产10%~70%。
[0005] 油菜菌核病的致病菌系核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum(Lib.) de Bary)，属 子囊菌亚门真菌。菌核长圆形至不规则形，似鼠粪状，初白色后变灰色，内部灰白色。菌核 萌发后长出1至多个具长柄的肉质黄褐色盘状子囊盘，盘上着生一层子囊和侧丝，子囊无 色棍棒状，内含单胞无色子囊孢子8个，侧丝无色，丝状，夹生在子囊之间。
[0006] 忍冬（Lonicera japonica Thunb.)为忍冬科多年生半常绿缠绕灌木。中国大部 分地区多有分布，不少地区已栽培生产，其中以河南、山东所产最为闻名。幼枝洁红褐色， 密被黄褐色、开展的硬直糙毛、腺毛和短柔毛，下部常无毛。叶纸质，卵形至矩圆状卵形，有 时卵状披针形，稀圆卵形或倒卵形，极少有1至数个钝缺刻，长3-5 (-9. 5)厘米，顶端尖或渐 尖，少有钝、圆或微凹缺，基部圆或近心形，有糙缘毛，上面深绿色，下面淡绿色，小枝上部叶 通常两面均密被短糙毛，下部叶常平滑无毛而下面多少带青灰色；叶柄长4-8毫米，密被短 柔毛。其花作为中药金银花使用，带叶的茎枝常常被作为林业废弃物丢弃，既污染了环境， 又造成资源的浪费。
[0007] 黑蒿（Artemisia palustris Linn.)，菊科，蒿属一年生草本植物。莖单生，叶薄纸 质，头状花序近球形，无梗，圆锥花序，花冠管状，花药线形，花柱与花冠近等长，瘦果褐色长 卵形略扁小，花果期8-11月。其常常被作为田间杂草处理，没有得到很好的利用。
[0008] 白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)，菌号为：CICC 14076。
[0009] 康宁木霉（Trichoderma koningii)，菌号为：CICC 401〇8〇
[0010] 黑曲霉（Aspergillus niger)，菌号为：CICC 2157。 toon] 现有技术中，尚未有用忍冬茎叶和黑蒿为主要原料制备有机肥料的报道，更没有 用该肥料防治油菜菌核病的报道。
【发明内容】
[0012] 本发明所要解决的技术问题是提供一种能防治油菜菌核病、且肥力优异的有机肥 料。
[0013] 为了解决上述技术问题，本发明提出下列技术方案：
[0014] 一种用忍冬茎叶和黑蒿制成的有机肥料，其特征在于，所述的有机肥料是以质量 比为5:1的忍冬茎叶与黑蒿为基础原料，采用固体发酵法制备而得。
[0015] 所述的固体发酵法包括下列步骤：
[0016] (1)菌种扩大培养：取康宁木霉、白腐菌、黑曲霉，接种到液体PDA培养基中，摇床 培养进行扩大，制得含菌液；
[0017] (2)固体培养基制备：取所述的基础原料，粉碎，置入70-90°C烘箱内干燥，按每 100g基础原料加入100-300g水及3-5g葡萄糖的比例加入水和葡萄糖，混合均匀，作为固体 培养基；
[0018] (3)固体发酵：按每100g基础原料加入20-40mL所述含菌液的比例进行接种， 28-35°C条件下培养8-12天；
[0019] (4)灭菌、干燥：取第⑶步所得物料，高压灭菌，置入KKTC烘箱内干燥，即得。
[0020] 菌种扩大培养所用的液体PDA培养基为不加琼脂的PDA培养基，其制备方法是称 取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水1000 ml煮沸半个小时或高压蒸煮20分钟，纱布过 滤，再加10-20g葡萄糖，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，灭菌左右后取出贮存备用。
[0021] 优选的，所述第（2)步，基础原料的干燥温度为80 °C。
[0022] 优选的，所述第（2)步，每100g基础原料加入水的质量为200g。
[0023] 优选的，所述第（2)步，每100g基础原料加入葡萄糖的质量为4g。
[0024] 优选的，所述第（3)步，每100g基础原料加入含菌液的体积为30mL。
[0025] 本发明的有益效果可以通过下列试验证明
[0026] 试验例1肥效试验 [0027] 材料与试剂
[0028] 本发明有机肥料1 (标为供试组1)，按实施例1制备；本发明有机肥料2 (标为供 试组2)，按实施例2制备；本发明有机肥料3 (标为供试组3)，按实施例3制备。
[0029] 上海抗热605青菜种子。
[0030] 试验方法
[0031] 采用随机区组设计方法设计盆栽试验。取体积相同，形状一致的花盆，分为供试组 (1、2、3)及空白对照组。将供试肥料按照土肥比7:3与土壤混合，装入花盆后用水浇透，作 为供试组（1、2、3);空白对照组不加肥料。每组试验10盆，每盆播种9粒上海抗热605种 子（考虑到种子的发芽率，在花盆中固定3个间距相同的点，每个点放3粒种子，待发芽后 间苗，每个点只保留一颗生长好，且长势一致的幼苗），播种后撒上一层活灰土（经高温烧 制而成，防止种子污染）。
[0032] 将栽培40天的上海抗热605青菜采摘称重，记录各组上海抗热605青菜的生长情 况。
[0033] 试验结果
[0034] 试验结果见表1，结果表明，本发明有机肥料能够提高作物的产量。
[0035] 表1本发明有机肥料对上海抗热605青菜生长的影响
[0036]
[0037] 试验例2对油菜核盘菌菌核萌发率的影响
[0038] 材料与试剂
[0039] 本发明有机肥料1 (标为供试组1)，按实施例1制备；本发明有机肥料2 (标为供 试组2)，按实施例2制备；本发明有机肥料3 (标为供试组3)，按实施例3制备。
[0040] 油菜核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum (Lib. ) de Bary) 〇
[0041] 试验方法
[0042] 采用随机区组设计方法设计盆栽试验。取体积相同，形状一致的花盆，分为供试组 (1、2、3)及空白对照组。将供试肥料按照土肥比7:3与土壤混合，装入花盆后用水浇透，作 为供试组（1、2、3);空白对照组不加肥料。每组试验3盆，用尼龙小网袋5cmX5cm装入21 颗油菜菌核病菌核，埋入深度2cm，60天时，用马铃薯蔗糖培养基（PDA)测定菌核的萌发率。
[0043] 试验结果
[0044] 试验结果见表2,结果表明，本发明有机肥料能显著降低油菜核盘菌核的萌发率， 对油菜菌核病具有一定的防治作用。
[0045] 表2本发明有机肥料对核盘菌核萌发率的影响
[0046]
[0047]
[0048] 为了更好的阐述本发明的技术方案，下面结合【具体实施方式】对本发明作进一步的 说明，但本发明所要求的保护范围不限于下列实施例。
【具体实施方式】
[0049] 实施例1
[0050] 有机肥料的制备方法如下：
[0051] (1)菌种扩大培养：取康宁木霉、白腐菌、黑曲霉，接种到液体PDA培养基中，摇床 培养进行扩大，制得含菌液；
[0052] (2)固体培养基制备：按质量称取5份忍冬茎叶与1份黑蒿，粉碎，置入70°C烘箱 内干燥，按每100g基础原料加入100g水及3g葡萄糖的比例加入水和葡萄糖，混合均勾，作 为固体培养基；
[0053] (3)固体发酵：按每100g基础原料加入20mL所述含菌液的比例进行接种， 28-35 °C条件下培养8天；
[0054] (4)灭菌、干燥：取第⑶步所得物料，高压灭菌，置入KKTC烘箱内干燥，即得。
[0055] 实施例2
[0056] 有机肥料的制备方法如下：
[0057] (1)菌种扩大培养：取康宁木霉、白腐菌、黑曲霉，接种到液体PDA培养基中，摇床 培养进行扩大，制得含菌液；
[0058] (2)固体培养基制备：按质量称取5份忍冬茎叶与1份黑蒿，粉碎，置入90°C烘箱 内干燥，按每100g基础原料加入300g水及5g葡萄糖的比例加入水和葡萄糖，混合均勾，作 为固体培养基；
[0059] (3)固体发酵：按每100g基础原料加入40mL所述含菌液的比例进行接种， 28-35°C条件下培养12天；
[0060] (4)灭菌、干燥：取第⑶步所得物料，高压灭菌，置入l〇〇°C烘箱内干燥，即得。
[0061] 实施例3
[0062] 有机肥料的制备方法如下：
[0063] (1)菌种扩大培养：取康宁木霉、白腐菌、黑曲霉，接种到液体PDA培养基中，摇床 培养进行扩大，制得含菌液；
[0064] (2)固体培养基制备：按质量称取5份忍冬茎叶与1份黑蒿，粉碎，置入80°C烘箱 内干燥，按每100g基础原料加入200g水及4g葡萄糖的比例加入水和葡萄糖，混合均勾，作 为固体培养基；
[0065] (3)固体发酵：按每100g基础原料加入30mL所述含菌液的比例进行接种， 28-35 °C条件下培养10天；
[0066] (4)灭菌、干燥：取第⑶步所得物料，高压灭菌，置入KKTC烘箱内干燥，即得。
【主权项】
1. 一种用忍冬茎叶和黑蒿制成的有机肥料，其特征在于，所述的有机肥料是以质量比 为5:1的忍冬茎叶与黑蒿为基础原料，采用固体发酵法制备而得。2. 根据权利要求1所述一种有机肥料，其特征在于，所述的固体发酵法包括下列步骤： (1) 菌种扩大培养：取康宁木霉、白腐菌、黑曲霉，接种到液体PDA培养基中，摇床培养 进行扩大，制得含菌液； (2) 固体培养基制备：取所述的基础原料，粉碎，置入70-90°C烘箱内干燥，按每100g基 础原料加入100-300g水及3-5g葡萄糖的比例加入水和葡萄糖，混合均匀，作为固体培养 基； ⑶固体发酵：按每100g基础原料加入20-40mL所述含菌液的比例进行接种，28-35°C 条件下培养8-12天； (4)灭菌、干燥：取第（3)步所得物料，高压灭菌，置入KKTC烘箱内干燥，即得。3. 根据权利要求2所述一种有机肥料，其特征在于，所述第（2)步，基础原料的干燥温 度为80°C。4. 根据权利要求2所述一种有机肥料，其特征在于，所述第（2)步，每100g基础原料加 入水的质量为200g。5. 根据权利要求2所述一种有机肥料，其特征在于，所述第（2)步，每100g基础原料加 入葡萄糖的质量为4g。6. 根据权利要求2所述一种有机肥料，其特征在于，所述第（3)步，每100g基础原料加 入含菌液的体积为30mL。
【专利摘要】本发明一种用忍冬茎叶和黑蒿制成的有机肥料，涉及一种肥力优异的新型有机肥料。该肥料系以质量比为5:1的忍冬茎叶与黑蒿为基础原料，采用固体发酵法制备而得。本发明有机肥料能显著提高作物的产量，并能一定程度的防治油菜菌核病。
【IPC分类】C05F17/00, C05F11/08
【公开号】CN105016805
【申请号】CN201510447686
【发明人】戴勤, 王冬梅, 李慧珍
【申请人】芜湖欧标农业发展有限公司
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2015年7月24日