专利名称：塞曲司特衍生物及其制备方法与抗哮喘活性的制作方法
技术领域：
本发明涉及不同类型的NO供体以及具有PAF受体拮抗活性和LTs抑制活性的基团通过酰亚胺键、酯键或酰胺键分别与抗哮喘药TXA2受体拮抗剂塞曲司特(Seratrodast，简称SD)相偶联的化合物，其制备方法以及在制备抗哮喘药方面的应用。
技术背景哮喘是一种常见的呼吸道疾病。近年来的研究表明，炎性介质引发炎性细胞对气道的浸润是哮喘产生的重要原因。哮喘治疗药物已由原来的吸入性甾体激素配伍β2-受体激动剂，逐步扩展到应用一些新型炎性介质抑制剂，如5-脂氧酶(5-LO)抑制剂、白三烯(LTs)受体拮抗剂、血栓素A2(TXA2)受体拮抗剂和血小板激活因子(PAF)受体拮抗剂等。
从目前炎性介质抑制剂研究的结果来看，单一的抑制剂其治疗效果还不是十分理想。鉴于哮喘的发病机制涉及到多种炎性介质，需要研究能抑制两种或多种炎性介质即多靶点作用的药物。
发明内容
本发明要解决的技术问题是如何应用药物设计的基本理论，设计并合成一系列能抑制两种或多种炎性介质即多靶点作用的塞曲司特衍生物，并对其进行抗哮喘活性筛选，以便获得抗哮喘活性比现有药物更好的新型抗哮喘药物，用于哮喘疾病的治疗。本发明的目的还在于提供一种新型抗哮喘药物的可工业化生产的制备方法。
为解决上述问题本发明提供如下技术方案。由下述通式(I)表示的塞曲司特偶联衍生物 通式(I)包括I-1、I-2、I-3；I-1为抗哮喘药塞曲司特的酰亚胺类化合物X代表-N＝；R1代表3-R2-1，2，3，4-噁三唑-5-，其中R2代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2，3-二甲基苯基、2，4-二甲基苯基、2，5-二甲基苯基、2，6-二甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、2，3-二氯苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、3-硝基苯基、4-硝基苯基、2-氰基苯基、3-氰基苯基、4-氰基苯基；I-2为塞曲司特的酯类化合物，包括I-2A、I-2BI-2AX代表O；R1代表-N′-胍-N-R3，其中R3代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，4-二甲基苯基、2，5-二甲基苯基、2，6-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基、2，5-二甲基氧苯基、2，6-二甲基氧苯基；I-2BX代表O；R1代表4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-、4-苯磺酰基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-，R4代表亚甲基或邻-、间-、对-亚甲基苯氧甲基；I-3为塞曲司特的酰胺类化合物，包括I-3A、I-3B、I-3CI-3AX代表NH；R1代表5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧(硫)戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基、5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，或5-[5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，其中R5代表1-4个碳的饱和直链或支链烷氧基、烯丙氧基；I-3BX代表NH；R1代表3-硝基苯磺酰基、4-乙酰氨基苯磺酰基、苯磺酰基、2-甲基苯磺酰基、3-甲基苯磺酰基、4-甲基苯磺酰基、4-氟苯磺酰基、4-氯苯磺酰基、4-溴苯磺酰基、4-碘苯磺酰基；I-3CX代表NR6，其中R6代表氢、1-4个碳的饱和直链或支链烷烃、环戊基、环己基、苄基；R1代表羟基。
前述塞曲司特偶联衍生物，选自I-1为抗哮喘药塞曲司特的酰亚胺类化合物X代表-N＝；R1代表3-R2-1，2，3，4-噁三唑-5-，其中R2代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2，3-二甲基苯基、2，3-二氯苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、2-氰基苯基；I-2为塞曲司特的酯类化合物，包括I-2A、I-2BI-2AX代表O；R1代表-N′-胍-N-R3，其中R3代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，4-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基；I-2BX代表O；R1代表4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-、4-苯磺酰基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-，R4代表亚甲基或邻-、间-、对-亚甲基苯氧甲基；I-3为塞曲司特的酰胺类化合物，包括I-3A、I-3B、I-3CI-3AX代表NH；R1代表5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧(硫)戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基或5-[5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，其中R5代表1-4个碳的饱和直链或支链烷氧基、烯丙氧基；I-3BX代表NH；R1代表3-硝基苯磺酰基、4-乙酰氨基苯磺酰基、苯磺酰基、2-甲基苯磺酰基、3-甲基苯磺酰基、4-甲基苯磺酰基、4-氟苯磺酰基、4-氯苯磺酰基、4-溴苯磺酰基；I-3CX代表NR6，其中R6代表氢、1-4个碳的饱和直链或支链烷烃、环戊基、环己基、苄基；R1代表羟基。
所述塞曲司特偶联衍生物中，疗效较好的有(±)-N-[3-(4-氯苯基)-1，2，3，4-噁三唑-5-基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰亚胺；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酸(N-4-甲基苯基-N′-羟基胍)酯；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酸(N-2，4-二氟苯基-N′-羟基胍)酯；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酸4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-甲酯；(±)-N-[2-正丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧戊环-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-N-[2-烯丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二硫戊环-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-N-(4-甲基苯磺酰基)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚异羟肟酸。
通式I-1化合物的制备方法是塞曲司特先与草酰氯作用，然后在碳酸氢钠存在下与通式(I-1a)反应，通式(I-1a)中R2同通式I-1。 具体反应步骤为 SD1的结构下同通式I-2化合物的制备方法是塞曲司特与N-羟基胍化合物(I-2a)或含羟基的呋咱氮氧化合物(I-2b)在二环己基碳二亚胺和N，N-二甲氨基吡啶存在下缩合，其中R3和R4 同通式I-2。
具体反应步骤为 通式I-3A化合物的制备方法是塞曲司特先与草酰氯作用，然后在三乙胺存在下与通式(I-3a)反应，其中R5同通式I-3A；A、B相同或不相同，各自独立地表示O或S。 具体反应步骤为 通式I-3B化合物的制备方法是塞曲司特先与草酰氯作用，然后在三乙胺存在下与通式(I-3b)反应，其中R1同通式I-3B。
NH2R1I-3b具体反应步骤为 通式I-3C化合物的制备方法是塞曲司特先与对硝基苯酚作用，然后在碳酸氢钠存在下与盐酸羟胺(I-3c)反应，其中R1和R6同通式I-3C。
NHR1R6·HCl I-3c具体反应步骤为 药物组合物，其中含有治疗有效量的前述塞曲司特偶联衍生物以及常规药用载体。
前述塞曲司特偶联衍生物在制备抗哮喘药物中的应用。
一氧化氮(NO)具有舒张支气管和诱导炎性细胞凋亡的作用。申请人将NO供体与炎性介质抑制剂相偶联，偶联物在体内释放原药(或活性物)和NO，获得了较原药疗效更强的抗哮喘药物化合物。
通式化合物的药理试验1.通式化合物中I-1、I-2的药理试验如下实验方法见徐叔云，卞如濂，陈修主编，《药理实验方法学》第三版，北京人民卫生出版社，2002版，1380-1381SD由常州华生制药有限公司提供，规格为药用，下同。
所有药物均用0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液配成1.42×10-3mol/L悬液(与SD等摩尔浓度)。SD的给药剂量为1.25mg/kg。
将豚鼠逐个放入玻璃钟罩内，用引喘喷雾装置喷入2％氯化乙酰胆碱和0.1％磷酸组织胺等体积混合液，观察豚鼠的引喘潜伏期(作为给药前引喘潜伏期)，150s内出现哮喘的豚鼠为合格的敏感动物。将筛选合格的豚鼠随机分成11组，每组8只，分别为阳性药对照、阴性对照、以及9个受试药组。灌胃给药后1小时，同上法测定各组动物给药后的引喘潜伏期(观察时间为150s，不跌倒者引喘潜伏期以150s计算)。潜伏期越长，抗哮喘活性越强。将各组数据进行t检验，比较组间差异的显著性。
表1 受试药对乙酰胆碱-组胺所致豚鼠哮喘的影响(n＝8，x±S)组别 剂量 引喘潜伏期引喘潜伏期(mg/kg)(s，给药前) (s，给药后)CMC-Na -- 41.75±5.8 48.12±14.2SD 1.25 54.88±19.565.00±8.8I-1A12.5 45.88±17.866.38±36.1I-1A22.5 49.00±11.6100.38±43.7**I-1A32.5 50.88±19.490.63±33.6*I-2A11.77 51.50±11.195.38±31.0**#I-2A21.84 46.50±11.984.50±28.8**I-2A31.85 50.62±10.097.00±33.4**#
I-2B11.8453.12±15.6114.75±30.1**##I-2B22.2449.38±12.166.75±21.3I-2B32.2447.50±17.273.75±17.3**P＜0.05，**P＜0.01，与CMC-Na组比较；#P＜0.05，##P＜0.01，与阳性药SD组比较由表1可见，受试药中I-1A2、I-1A3、I-2A1、I-2A2、I-2A3、I-2B1和I-2B3组给药前后的引喘潜伏期有显著性差异，与CMC-Na对照组相比引喘潜伏期亦有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)，其中I-2A1、I-2A3、I-2B1的抗哮喘活性显著强于阳性对照药SD(P＜0.05，P＜0.01)。
2.通式化合物中I-3的药理试验如下实验方法见徐叔云，卞如濂，陈修主编，《药理实验方法学》第三版，北京 人民卫生出版社，2002版，1410-1411SD由常州华生制药有限公司提供，规格为药用，下同。
所有药物均用0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液配成1.42×10-3mol/L悬液(与SD等摩尔浓度)。SD的给药剂量为1.25mg/kg。
取体重150～200g豚鼠，每只豚鼠腹腔注射1mL5％卵蛋白生理盐水溶液，并在注射后第3天及第5天重复同样步骤再次致敏。
分别灌胃给予受试的已致敏豚鼠CMC-Na、阳性药SD以及受试药物。1小时后，将致敏豚鼠置于4L的密闭钟罩，恒压喷入5％蛋清生理盐水溶液30秒。然后取出观察反应级数1级仅呼吸困难，2级呼吸困难和咳嗽，3级剧烈哮喘乃至跌倒。以动物出现3级反应的时间作为引喘潜伏时间。将各组数据进行t检验，比较组间差异的显著性。
由表2可见，在给予受试药的豚鼠中，I-3A5、I-3A6、I-3A8组的引喘潜伏时间与CMC-Na对照组有显著差异(P＜0.05)，I-3A1、I-3A2、I-3A7、I-3B4、I-3C1组的引喘潜伏时间与CMC-Na对照组有极显著差异(P＜0.01)，其中IIIB4组的引喘潜伏时间与SD对照组有显著差异(P＜0.05)，I-3A1、I-3A2组的引喘潜伏时间与SD对照组有极显著差异(P＜0.01)，表明这些化合物具有明显地对抗卵蛋白所致的豚鼠过敏性支气管痉挛的作用。
表2 受试药对卵蛋白所致豚鼠过敏性支气管痉挛的影响(n＝8.x±S)组别 给药剂量(mg/kg)引喘潜伏时间(s)CMC-Na -- 153.125±60.13SD 1.25 211.375±53.90I-3A12.69 290.375±27.22**##I-3A22.69 288.125±31.42**##I-3A32.67 237.875±83.30I-3A42.67 203.000±39.24I-3A52.70 239.625±71.80*I-3A62.70 230.125±62.40*I-3A72.77 252.375±68.18**I-3A82.77 239.125±71.90*I-3B11.90 206.250±91.44I-3B31.75 224.125±95.78I-3B41.80 269.750±39.17**#I-3C11.30 255.750±69.38**I-3C31.60 194.250±90.22I-3C41.60 176.500±91.76I-3C51.50 182.500±61.55I-3C61.45 202.250±70.51*P＜0.05，**P＜0.01与CMC-Na组比较；#P＜0.05，##P＜0.01与阳性药SD组比较3.NO体外释放研究实验方法可参见Gasco AM，Boschi D，Stilo AD，et al.Characterization of furoxan-carbonitiles as a new class ofvasodilators[J].Arzneim-Forsch/Drug Res.1998，48(1)212-218；Sorba G，Medana C，Fruttero R，et al.Water soluble furocan der-ivatives as NO prodrugs[J].JMed Chem，1997，40(4)463-469。
选择化合物I-1A2、I-2A1、I-2A2、I-2A3、I-2B1、I-2B3作为受试药物。
Griess试剂的配制氨苯磺胺4g，N-萘乙烯二胺盐酸盐0.2g，85％磷酸10ml，用蒸馏水稀释至100ml。
标准曲线的制备配置0.01、0.03、0.05、0.07、0.09、0.2、0.4μg/ml的亚硝酸盐氮系列标准溶液，各取10ml与2.5mlGriess试剂充分混匀，室温放置10min后，于540nm波长处测定其吸收值。根据所得数据绘制标准曲线(图1)，线性回归方程y＝3.067×10-3+2.390x；相关系数r＝0.9999
受试药物NO释放量的测定所有受试药物先溶于二甲亚砜中(0.01mol/l)，再用磷酸缓冲液(pH7.4)稀释。缓冲液中含有过量的半胱氨酸(5mmol/l)，受试药物终浓度为10-4mol/l。将溶液置于37℃环境下孵化，于不同时间点取反应液2ml与500μlGriess试剂混合，室温放置10分钟，在540nm处测吸收值。NO的释放量以其相当于氧化产物——亚硝酸盐(NO2-)的量μg/ml表示(图2)。由图2可见，受试物I-2A1、I-2A3、I-2B1、I-2B3在短时间内NO释放量达到最高值，并在随后时间内一直维持在较高水平。其中以化合物IIB1的释放量最高。受试物I-1A2、I-2A2在体外环境中NO释放量维持在较低水平。
图1 NO体外释放试验标准曲线2 NO-体外释放图具体实施方式
以下为本发明化合物的实施例，这些实施例并不意味着对本发明的限制。
本发明塞曲司特偶联衍生物的制备方法均是利用已知化合物塞曲司特进行酰亚胺、酯化或酰胺化反应制得，如无特别说明，这类偶联反应是有机化学领域的常规反应，所涉及反应试剂亦为常规化学试剂。
IR(KBr，cm-1)1702(酰胺)，1642(C＝O)；ESI-MS527[M+H]+，549[M+Na]+；1HNMR(500MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.14～1.71(m，6H，3×CH2)，1.95(s，3H，CH3)，1.98(s，3H，CH3)，2.05(s，3H，CH3)，2.10～2.25(m，2H，C6-CH2)，2.44(s，3H，ArCH3)，2.49(s，3H，ArCH3)，2.50～2.53(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.27～4.31(q，1H，CH)，7.14～7.27(m，7H，ArH)；7.69～7.70(d，1H，J＝8.2Hz，ArH)实施例2(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酸(N-4-甲基苯基-N′-羟基胍)酯(I-2A1)将SD(0.1g，0.28mmol)，对甲基苯基-N-羟基胍(0.05g，0.31mmol)，DMAP数粒和二氯甲烷5ml加入10ml茄形瓶中，搅拌溶解后，分批加入DCC(0.069g，0.34mmol)，室温搅拌过夜，有白色沉淀生成。过滤，柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶丙酮∶冰醋酸＝4∶1∶0.01(v∶v∶v)]，得淡黄色粉末状固体0.085g，收率60.5％，mp 106℃～108℃。
IR(KBr，cm-1)3376(NH)，1731(酯)，1642(C＝O)；ESI-MS502[M+H]+，524[M+Na]+1HNMR(300MHz，d-DMSO)，δ(ppm)1.24～1.68(m，6H，3×CH2)，1.87(s，3H，CH3)，1.91(s，3H，CH3)，1.98(s，3H，CH3)，2.10～2.18(m，2H，C6-CH2)，2.19(s，3H，CH3)，2.30～2.35(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.27～4.31(q，1H，CH)，6.98～7.00(d，2H，J＝9.1Hz，ArH)，7.14～7.26(m，7H，ArH)；Anal.C30H35N3O4·H2OFound(％)N7.81 C69.53 H7.40Calcd(％)N8.08 C 69.34 H7.17实施例3(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酸(N-4-氯苯基-N′-羟基胍)酯(I-2A2)参照I-2A1的制备方法由对氯苯基-N-羟基胍制得。柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶丙酮∶冰醋酸＝4∶1∶0.01(v∶v∶v)]，得淡黄色粉末状固体，收率56.8％，mp 44℃～46℃。
IR(KBr，cm-1)3310(NH)，1731(酯)，1643(C＝O)；ESI-MS522[M+H]+，544[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CD3COCD3)，δ(ppm)1.24～1.68(m，6H，3×CH2)，2.00(s，3H，CH3)，2.02(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.10～2.18(m，2H，C6-CH2)，2.34～2.39(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.34～4.35(q，1H，CH)，5.48(s，2H，NH2)，7.14～7.25(m，5H，ArH)；7.30～7.32(m，2H，ArH)，7.49～7.52(m，2H，ArH)；Anal.C29H32ClN3O4·0.4H2O Found(％)N7.46 C66.12 H6.67Calcd(％)N7.94 C66.19 H6.25
IR(KBr，cm-1)3377(NH)，1740(酯)，1644(C＝O)；ESI-MS524[M+H]+，546[M+Na]+；
1HNMR(300MHz，CD3COCD3)，δ(ppm)1.24～1.68(m，6H，3×CH2)，1.94(s，3H，CH3)，1.97(s，3H，CH3)，2.04(s，3H，CH3)，2.10～2.28(m，2H，C6-CH2)，2.37～2.42(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.34～4.35(q，1H，CH)，6.93～7.36(m，7H，ArH)；8.28～8.36(m，1H，ArH)；Anal.C29H32ClN3O4Found(％)N8.04 C66.34 H6.27Calcd(％)N8.02 C66.53 H5.97
IR(KBr，cm-1)1747(酯)，1643(C＝O)，1603(C＝C)；ESI-MS551[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.14～1.60(m，6H，3×CH2)，1.88(s，3H，CH3)，1.91(s，3H，CH3)，1.97(s，3H，CH3)，2.02～2.12(m，2H，C6-CH2)，2.21～2.26(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.18～4.23(q，1H，CH)，5.06(s，2H，OCH2)，7.08～7.20(m，5H，ArH)；7.42～7.63(m，5H，ArH)；Anal.C31H32N2O6Found(％)N5.15 C70.38 H6.33Calcd(％)N5.30 C70.44 H6.10
IR(KBr，cm-1)1736(酯)，1642(C＝O)，1603(C＝C)；ESI-MS657[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.20～1.69(m，6H，3×CH2)，1.94(s，3H，CH3)，1.97(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.08～2.22(m，2H，C6-CH2)，2.32～2.37(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.25～4.30(q，1H，CH)，5.06(s，2H，OCH2)，5.08(s，2H，OCH2)，6.91～7.01(m，3H，ArH)；7.11～7.31(m，6H，ArH)；7.47～7.57(m，3H，ArH)，7.81～7.85(m，2H，ArH)Anal.C38H38N2O7Found(％)N4.51 C71.59 H6.21Calcd(％)N4.41 C71.91 H6.03实施例7(±)-N-[2-正丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧戊环-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰胺(I-3A1)25ml两颈瓶中加入(cis)-2-丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧戊环-2-]苯胺(0.34mmol)，5mlCH2Cl2，三乙胺0.2ml，搅拌溶解，氮气保护下，滴加SD-COCl(0.34mmol)的5ml无水CH2Cl2溶液，室温搅拌2小时后停止反应，有机层依次用水10ml和饱和食盐水10ml洗涤除去三乙胺盐酸盐，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶丙酮∶氯仿＝4∶1∶1(v∶v∶v)]，得淡黄色泡沫状固体]64.2mg，收率63.8％(cis/trans 0.95∶1)，mp 48℃～50℃。
IR(KBr，cm-1)3466(NH)，1690(酰胺)，1641(C＝O)，1128；ESI-MS756[M+H]+，778[M+Na]+；1HNMR(500MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.04(t，3H，J＝3.5Hz，CH3)，1.25～1.80(m，8H，4×CH2)，1.96(s，3H，CH3)，1.99(s，3H，CH3)，2.05(s，3H，CH3)，2.07～2.23(m，2H，C6-CH2)，2.32～2.37(m，2H，C2-CH2)，3.82～4.00(m，15H，4×OCH3，OCH2，C5-CH)，4.10～4.35(m，2H，CH，C5-CH)，5.10～5.18(m，1H，C4-CH)，5.92/6.11(cis/trans，s，1H，C2-CH)，6.59～7.27(m，9H，ArH)，8.56(s，1H，NH)；Anal.C44H53NO10Found(％)N 1.77 C 69.45 H 6.92Calcd(％)N 1.85 C 69.91 H 7.07
IR(KBr，cm-1)3413(NH)，1693(酰胺)，1642(C＝O)，1127；ESI-MS756[M+H]+，778[M+Na]+；1HNMR(500MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.04(t，3H，J＝3.5 Hz，CH3)，1.25～1.80(m，8H，4×CH2)，1.96(s，3H，CH3)，1.99(s，3H，CH3)，2.05(s，3H，CH3)，2.07～2.23(m，2H，C6-CH2)，2.32～2.37(m，2H，C2-CH2)，3.82～4.00(m，15H，4×OCH3，OCH2，C5-CH)，4.3～4.34(m，2H，CH，C5-CH)，5.12(m，1H，C4-CH)，5.93/6.11(cis/trans，s，1H，C2-CH)，6.60～7.27(m，9H，ArH)，9.88(s，1H，NH)；Anal.C44H53NO10Found(％)N 1.82 C 69.43 H 6.95Calcd(％)N 1.85 C 69.91 H 7.07实施例9(±)-N-[2-烯丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二硫戊环-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰胺(I-3A7)参照I-3A1的制备方法由(trans/cis)-2-烯丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二硫戊环-2-]苯胺制得，柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶丙酮∶氯仿＝4∶1∶1(v∶v∶v)]，得淡黄色泡沫状固体，收率45.0％(cis/rans 0.64∶1)，mp 56℃～58℃。
IR(KBr，cm-1)3414(NH)，1692(酰胺)，1641(C＝O)，1127；ESI-MS808[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.22～1.66(m，6H，3×CH2)1.93(s，3H，CH3)，1.96(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.06～2.22(m，2H，C6-CH2)，2.27～2.35(m，2H，C2-CH2)，3.39～3.65(m，2H，C5-CH2)，3.80～4.00(m，12H，4×OCH3)，4.23～4.28(q，1H，CH)，4.62～4.64(d，2H，J＝6.3Hz，OCH2)，4.79～5.08(m，1H，C4-CH)，5.21～5.37(m，2H，＝CH2)，5.69/5.79(cis/trans，s，1H，C2-CH)，6.74(s，2H，ArH)，7.12～7.31(m，7H，ArH)；Anal.C44H51NO8S2Found(％)N 1.71 C 67.03 H 6.53Calcd(％)N 1.78 C 67.24 H 6.54
IR(KBr，cm-1)3459(NH)，1724(酰胺)，1642(C＝O)，1343(SO2)，1171(SO2)；ESI-MS508[M+H]+，530[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.16～1.56(m，6H，3×CH2)，1.95(s，3H，CH3)，1.98(s，3H，CH3)，2.02(s，3H，CH3)，2.05～2.17(m，2H，C6-CH2)，2.20～2.24(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，2.42(s，3H，CH3)，4.23～4.26(q，1H，CH)，7.14～7.27(m，5H，ArH)，7.30～7.33(d，2H，J＝8.1Hz，ArH)，7.90～7.93(d，2H，J＝8.1Hz，ArH)，8.93(s，1H，NH)；Anal.C28H33NO5S·0.5H2O Found(％)N 2.42 C 67.33 H 6.73Calcd(％)N 2.71 C 67.42 H 6.63
IR(KBr，cm-1)3223(OH)，1642(C＝O)；ESI-MS392[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.16～1.62(m，6H，3×CH2)，1.95(s，3H，CH3)，1.98(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.05～2.17(m，2H，C6-CH2)，2.20～2.24(t，2H，J＝7.5 Hz，C2-CH2)，4.25～4.30(q，1H，CH)，7.14～7.27(m，5H，ArH)；Anal.C22H27NO4Found(％)N 3.60 C 71.82 H 7.56Calcd(％)N 3.79 C 71.52 H 7.36
IR(KBr，cm-1)3377(OH)，1741(酰胺)，1642(C＝O)；ESI-MS406[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.16～1.64(m，6H，3×CH2)，1.93(s，3H，CH3)，1.97(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.05～2.17(m，2H，C6-CH2)，2.31～2.36(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，2.78(s，3H，CH3)，4.24～4.29(q，1H，CH)，7.14～7.25(m，5H，ArH)；Anal.C23H29NO4Found(％)N 3.75 C 71.83 H 7.66Calcd(％)N 3.65 C 72.04 H 7.6权利要求
1.由下述通式(I)表示的塞曲司特偶联衍生物 通式(I)包括I-1、I-2、I-3；I-1为塞曲司特的酰亚胺类化合物X代表-N＝；R1代表3-R2-1，2，3，4-噁三唑-5-，其中R2代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2，3-二甲基苯基、2，4-二甲基苯基、2，5-二甲基苯基、2，6-二甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、2，3-二氯苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、3-硝基苯基、4-硝基苯基、2-氰基苯基、3-氰基苯基、4-氰基苯基；I-2为塞曲司特的酯类化合物，包括I-2A、I-2BI-2AX代表O；R1代表-N′-胍-N-R3，其中R3代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，4-二甲基苯基、2，5-二甲基苯基、2，6-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基、2，5-二甲基氧苯基、2，6-二甲基氧苯基；I-2BX代表O；R1代表4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-、4-苯磺酰基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-，R4代表亚甲基或邻-、间-、对-亚甲基苯氧甲基；I-3为塞曲司特的酰胺类化合物，包括I-3A、I-3B、I-3CI-3AX代表NH；R1代表5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧(硫)戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基、5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，或5-[5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，其中R5代表1-4个碳的饱和直链或支链烷氧基、烯丙氧基；I-3BX代表NH；R1代表3-硝基苯磺酰基、4-乙酰氨基苯磺酰基、苯磺酰基、2-甲基苯磺酰基、3-甲基苯磺酰基、4-甲基苯磺酰基、4-氟苯磺酰基、4-氯苯磺酰基、4-溴苯磺酰基、4-碘苯磺酰基；I-3CX代表NR6，其中R6代表氢、1-4个碳的饱和直链或支链烷烃、环戊基、环己基、苄基；R1代表羟基。
2.权利要求1的塞曲司特偶联衍生物，选自I-1为塞曲司特的酰亚胺类化合物X代表-N＝；R1代表3-R2-1，2，3，4-噁三唑-5-，其中R6代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2，3-二甲基苯基、2，3-二氯苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、2-氰基苯基；I-2为塞曲司特的酯类化合物，包括I-2A、I-2BI-2AX代表O；R1代表-N′-胍-N-R3，其中R3代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，4-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基；I-2BX代表O；R1代表4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-、4-苯磺酰基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-，R4代表亚甲基或邻-、间-、对-亚甲基苯氧甲基；I-3为塞曲司特的酰胺类化合物，包括I-3A、I-3B、I-3CI-3AX代表NH；R1代表5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧(硫)戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基或5-[5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊环-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，其中R5代表1-4个碳的饱和直链或支链烷氧基、烯丙氧基；I-3BX代表NH；R1代表3-硝基苯磺酰基、4-乙酰氨基苯磺酰基、苯磺酰基、2-甲基苯磺酰基、3-甲基苯磺酰基、4-甲基苯磺酰基、4-氟苯磺酰基、4-氯苯磺酰基、4-溴苯磺酰基；I-3CX代表NR6，其中R6代表氢、1-4个碳的饱和直链或支链烷烃、环戊基、环己基、苄基；R1代表羟基。
3.权利要求2的塞曲司特偶联衍生物，选自(±)-N-[3-(4-氯苯基)-1，2，3，4-噁三唑-5-基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰亚胺；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酸(N-4-甲基苯基-N′-羟基胍)酯；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酸(N-2，4-二氟苯基-N′-羟基胍)酯；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酸4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-甲酯；(±)-N-[2-正丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧戊环-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-N-[2-烯丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二硫戊环-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-N-(4-甲基苯磺酰基)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-环己二烯-1-基)苯庚异羟肟酸。
4.权利要求1的通式I-1化合物的制备方法，其特征在于塞曲司特先与草酰氯作用，然后在碳酸氢钠存在下与通式(I-1a)反应，通式(I-1a)中R2同通式I-1。
5.权利要求1的通式I-2化合物的制备方法，其特征在于塞曲司特与N-羟基胍化合物(I-2a)或含羟基的呋咱氮氧化合物(I-2b)在二环己基碳二亚胺和N，N-二甲氨基吡啶存 在下缩合，其中R3和R4同通式I-2。
6.权利要求1的通式I-3A化合物的制备方法，其特征在于塞曲司特先与草酰氯作用，然后在三乙胺存在下与通式(I-3a)反应，其中R5同通式I-3A；A、B相同或不相同，各自独立地表示O或S。
7.权利要求1的通式I-3B化合物的制备方法，其特征在于塞曲司特先与草酰氯作用，然后在三乙胺存在下与通式(I-3b)反应，其中R1同通式I-3B。NH2R1I-3b
8.权利要求1的通式I-3C化合物的制备方法，其特征在于塞曲司特先与对硝基苯酚作用，然后在碳酸氢钠存在下与盐酸羟胺(I-3c)反应，其中R1和R6同通式I-3C。NHR1R6·HCl I-3c
9.药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1的塞曲司特偶联衍生物以及常规药用载体。
10.权利要求1～3之一塞曲司特偶联衍生物在制备抗哮喘药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了抗哮喘药塞曲司特(Seratrodast，SD)偶联衍生物的通式I，其包括SD的的一氧化氮供体型酰亚胺类化合物(I－1)，一氧化氮供体型酯类化合物(I－2)和酰胺类化合物(I－3)；经豚鼠哮喘模型筛选，上述化合物显示和SD相当或增强的抗哮喘活性。
文档编号C07D273/00GK1480455SQ03132060
公开日2004年3月10日 申请日期2003年7月18日 优先权日2003年7月18日
发明者张奕华, 张治国, 季晖, 邱苏赣 申请人:中国药科大学