专利名称：西曲瑞克的制备方法
技术领域：
本发明涉及药物的制备方法，具体地说，本发明是一种西曲瑞克的制备方法。
背景技术：
西曲瑞克是德国Asta Medica公司研制的一种LHRH拮抗剂，能控制卵巢的刺激作 用，预防不成熟卵泡过早排出，帮助受孕。大量研究表明，西曲瑞克对卵巢癌、前列腺癌、子 宫纤维瘤、子宫内膜异位等疾病有较好的疗效，而且对良性前列腺肥大和卵巢过度刺激综 合征有预防和改善作用。西曲瑞克的结构为十肽AC-D-2-Nal-D-4-Cl-Phe-D-3-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2或N-Acetyl-3-(2-naphthalenyl)-D-alanyl-4-chloro-D-phenylalanyl-3- (3-py ridinyl) -D-alanyl-L-seryl-L-tyrosyl-N5-(aminocarbonyl)-D-ornithyl-L-leucyl-L_arginyl_L_prolyl_D_alariiri amide。
发明内容
本发明的目的是提供一种西曲瑞克的制备方法。为了说明的方便，先列出官能团的简称与全称的对照Fmoc:芴甲氧羰基 Boc 叔丁氧羰基 Pd 钯TFA:三氟醋酸 MeOH:甲醇 DCMDMF:N，N_ 二甲基甲酰胺Wang resin 王丰对月旨DMAP: 二甲氨基吡啶DIEA:N，N_ 二异丙基乙胺HOBt 羟基苯并三氮唑DCC:N，N-二环己基碳二亚胺HBTU 苯并三氮唑-N，N，N'，N'Z:苯基 Bzl 苄基氯甲烷
_四甲基脲六氟磷酸酯
D-3-Pal 3~(3-pyridinyl)-D-alanyl AC-D-2-Nal :N-Acetyl_3-(2-naphthalenyl)-D-alanyl 为了实现上述的发明目的，本发明采用以下技术方案一种西曲瑞克的制备方法，以Boc氨基酸及王树脂为原料，逐个加入C端氨基酸， 再以10wt%的氨水进行氨解，然后以H2和Pd为脱保护试剂，制得西曲瑞克精品。上述的西曲瑞克的制备方法，具体可以包含以下步骤A.王树脂的酯化以DCC、HOBt和DMAP为酯化试剂，DMF为溶剂，各反应物物质 的量之比为 Boc-D-Ala-0H DCC HOBt = 1 11 1 ；Boc-D-Ala-0H 王树脂=3 7 1 ；DMAP 王树脂=0. 5 1 ；反应后得到 Boc-D-Ala-Wang resin ；B.依次逐个加入C端第二个氨基酸Boc-Pro-OH、C端第三个氨基酸 Boc-Arg(Z)-0H、C端第四个氨基酸Boc-Leu-OH、C端第五个氨基酸Boc-D-Cit-OH、C端第 六个氨基酸Boc-Tyr (Bzl) -OH、C端第七个氨基酸Boc-Ser (Bzl) -OH、C端第八个氨基酸 Boc-D_Cpa-0H、C端第九个氨基酸Boc-D-Phe (4_C1) -0H和C端第十个氨基酸Ac-D-Nal-OH ； 每加入一个C端氨基酸时，同时缩合试剂HBTU、HOBt和DIEA，20 60°C下反应1 4h ；C.以10wt%的氨水进行氨解，然后以HdPPd为脱保护试剂反应24小时，制得西 曲瑞克粗品；D.西曲瑞克粗品以C18制备柱进行经高效液相色谱纯化，得到西曲瑞克精品。本发明具有以下的优点本发明采用的是B0C法合成，西曲瑞克粗品的收率为60 70%，比现有技术的 30%有比较大的提高。本发明选用Wang树脂做载体可以避免最后切割的时候采用HF酸的 剧毒物质，而且在本发明中采用的最小保护原则，能够对原料的选择上也有更多的选择余 地，合成出来的副产物也较少，易于分离纯化。
具体实施例方式实施例11. Boc-D-Ala-ffang resin向带有过滤装置的容器中加入树脂。向所述容器中加入溶剂DMF，浸没树脂，静置 1小时，过滤。DMF溶解Boc-D_Ala-0H、DCC (或DIC)和HOBt，反应30min，过滤。然后将所得 的滤液加入到反应器中，20 60°C下反应3 20h。反应结束后，过滤。然后加入溶剂DMF， 洗涤树脂三遍，过滤。其中树脂为王树脂(Wang resin) 0酯化试剂为DCC、HOBt和DMAP，各 反应物物质的量之比为 Boc-D-Ala-0H DCC HOBt = 1 11 1 ；Boc-D-Ala-0H 树脂 =3 7 1 ；DMAP 树脂=0. 5 1。即得到 Boc-D-Ala-Wang resin。2.帝[J备 Boc-Pro-D-Ala-ffang resin在Boc-D-Ala-Wang resin 中加入体积比为 1 1. 6 1 的 TFA/DCM 溶液，10 30°C下反应10 60min。反应完毕后，过滤。然后加入DMF洗涤树脂，过滤。向反应器中加入C端第二个氨基酸(Boc-Pro-OH)和缩合试剂HBTU、H0Bt和DIEA， 20 60°C下反应1 4h。反应结束后用DMF洗涤树脂，过滤，即得到Boc-Pro-D-Ala-Wang resin。3.帝[J备 Boc-Arg-Pro-D-Ala-ffang resin在Boc-Pro-D-Ala-Wang resin 中加入体积比为 1 1. 6 1 的 TFA/DCM 溶液， 10 30°C下反应10 60min。反应完毕后，过滤。然后加入DMF洗涤树脂，过滤。向反应器中加入C端第三个氨基酸(Boc-Arg (Z) -0H)和缩合试剂HBTU、 HOBt和DIEA，20 60°C下反应1 4h。反应结束后用DMF洗涤树脂，过滤，即得到 Boc-Arg(Z)-Pro-D-Ala-ffang resin。4. Boc-Leu-Arg(Z) -Pro-D-Ala-ffang resin。在Boc-Arg (Z)-Pro-D-Ala-Wang resin 中加入体积比为 1 1. 6 1 的 TFA/DCM 溶液，10 30°C下反应10 60min。反应完毕后，过滤。然后加入DMF洗涤树脂，过滤。向反应器中加入C端第四个氨基酸(Boc-Leu-OH)和缩合试剂HBTU、H0Bt和DIEA，20 60°C下 反应1 4h。反应结束后用DMF洗涤树脂，过滤，即得到Boc-Leu-Arg (Z) -Pro-D-Ala-ffang resin。5. M^ Boc-D-Cit (Z) -Leu-Arg (Z) -Pro-D-Ala-ffang resin在 Boc-Leu-Arg (Z)-Pro-D-Ala-Wang resin 中力口入体积比为 1 1. 6 1 的 TFA/ DCM溶液，10 30°C下反应10 60min。反应完毕后，过滤。然后加入DMF洗涤树脂，过滤。 向反应器中加入C端第五个氨基酸(Boc-D-Cit-OH)和缩合试剂HBTU、HOBt和DIEA，20 60°C下反应1 4h。反应结束后用DMF洗涤树脂，过滤，即得到BoC-D-Cit-Leu-Arg(Z)-Pr o-D-Ala-ffang resin。6. M^ Boc-Tyr (Bzl) -D-Cit-Leu-Arg(Z) -Pro-D-Ala-ffang resin在 Boc-D-Cit-Leu-Arg(Z)-Pro-D-Ala_Wang resin 中力口入体积比为 1 1. 6 1 的TFA/DCM溶液，10 30°C下反应10 60min。反应完毕后，过滤。然后加入DMF洗涤树 脂，过滤。向反应器中加入C端第六个氨基酸(Boc-Tyr (Bzl)-0H)和缩合试剂HBTU、HOBt 和DIEA，20 60°C下反应1 4h。反应结束后用DMF洗涤树脂，过滤，即得到Boc-Tyr (Bz 1)-D-Cit-Leu-Arg (Z)-Pro-D-Ala-ffang resin7.制备 Boc-Ser (Bzl) -Tyr (Bzl) -D-Cit-Leu-Arg(Z) -Pro-D-Ala-ffangresin在 Boc-Leu-Arg (Z)-Pro-D-Ala-Wang resin 中力口入体积比为 1 1. 6 1 的 TFA/ DCM溶液，10 30°C下反应10 60min。反应完毕后，过滤。然后加入DMF洗涤树脂，过滤。 向反应器中加入C端第七个氨基酸(Boc-Ser (Bzl)-0H)和缩合试剂HBTU、HOBt和DIEA， 20 60°C下反应1 4h。反应结束后用DMF洗涤树脂，过滤，即得到Boc-Ser (Bzl)-Tyr (B zl)-D-Cit-Leu-Arg(Z)-Pro-D-Ala-ffang resin8.制备以下树脂Boc-D-Cpa-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Cit-Leu-Arg(Z)-Pro-D-Ala-ffangresin在Boc-Ser (Bzl) -Tyr (Bzl) -D-Cit-Leu-Arg (Z) -Pro-D-Ala-ffang resin 中力口入体 积比为1 1. 6 1的TFA/DCM溶液，10 30°C下反应10 60min。反应完毕后，过滤。然 后加入DMF洗涤树脂，过滤。向反应器中加入C端第八个氨基酸(Boc-D-Cpa-OH)和缩合试 剂HBTU、H0Bt和DIEA，20 60°C下反应1 4h。反应结束后用DMF洗涤树脂，过滤，即得到 中加入体积比为1 1. 6 1的TFA/DCM溶液，10 30°C下反应10 60min。反应完毕后， 过滤。然后加入DMF洗涤树脂，过滤。向反应器中加入C端第七个氨基酸(Boc-Ser (Bzl)-0H) 和缩合试剂HBTU、H0Bt和DIEA，20 60°C下反应1 4h。反应结束后用DMF洗涤树脂，过 滤，艮口得 Boc-D-Cpa-Ser (Bzl) -Tyr (Bzl) -D-Cit-Leu-Arg (Z) -Pro-D-Ala-ffang resin。9.制备 Boc-D-Phe(4-C1)-D-Cpa-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)_D_Cit(-Leu-Arg (Z)-Pro-D-Ala-ffang resin在 Boc-D-Cpa-Ser (Bzl)-Tyr (Bzl)-D-Cit-Leu-Arg (Z)-Pro-D-Ala-ffangres in中加入体积比为1 1. 6 1的TFA/DCM溶液，10 30°C下反应10 60min。反 应完毕后，过滤。然后加入DMF洗涤树脂，过滤。向反应器中加入C端第九个氨基酸 (Boc-D-Phe (4-Cl)-0H)和缩合试剂 HBTU、H0Bt 和 DIEA，20 60°C下反应 1 4h。反应结 束后用DMF洗涤树脂，过滤，即得到Boc-D-Phe(4-C1)-D-Cpa-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Cit-Leu-Arg(Z)-Pro-D-Ala-ffang resin10.制备 Ac-D-Nal-D-Phe(4-C1)-D-Cpa-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)_D_Cit(-Leu-Arg(Z )-Pro-D-Ala-ffang resin在Boc-D-Phe (4-C1)-D-Cpa-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Cit-Leu-Arg(Z)-Pro-D-Ala-ffa ng resin中加入体积比为1 1. 6 1的TFA/DCM溶液，10 30°C下反应10 60min。 反应完毕后，过滤。然后加入DMF洗涤树脂，过滤。向反应器中加入C端第十个氨基酸 (Ac-D-Nal-OH)和缩合试剂HBTU、HOBt和DIEA，20 60°C下反应1 4h。反应结束后用 DMF洗涤树脂，过滤，即得到Ac-D-Nal-D-Phe(4-C1)-D-Cpa-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Cit-Leu-Arg(Z)-Pro-D-A la-ffang resin11.制备西曲瑞克粗品向上述的西曲瑞克-树脂中加入10ml 10%氨水的甲醇溶液，0°C下反应24h。反 应结束后，过滤。然后加入10ml DCM，洗涤树脂三遍，过滤。旋蒸滤液得到保护的西曲瑞克 粗品Ac-D-Nal-D-Phe(4-C1)-D_Cpa_Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)_D_Cit(-Leu-Arg(Z)-Pro_D-Ala-NH2。在粗品中通入为脱保护试剂反应24h。然后过滤，旋蒸滤液得到西曲瑞克 粗品AC-D-2-Nal-D-4-Cl-Phe-D-3-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2粗品的收率为60 70%，比现有技术仅仅30%的收率，有大幅度地成倍地提高。12.制备西曲瑞克精品将西曲瑞克粗品溶于水和甲醇的溶液中，经高效液相色谱纯化得到西曲瑞克精 品。制备条件为C18制备柱，检测波长220nm，流速2ml/min，流动相为TFA/H20溶液和 甲醇，5%甲醇——100%甲醇，30min。以上对本发明所提供的西曲瑞克的制备方法进行了详细介绍，本文中应用了具体 个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明 的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施 方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
权利要求
一种西曲瑞克的制备方法，其特征在于以Boc氨基酸及王树脂为原料，逐个加入C端氨基酸，再以10wt％的氨水进行氨解，然后以H2和Pd为脱保护试剂，制得西曲瑞克精品。
2.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于，包含以下步骤A.王树脂的酯化以DCC、H0Bt和DMAP为酯化试剂，DMF为溶剂，各反应物物质的量之 比为 Boc-D-Ala-OH DCC HOBt = 1 11 1 ；Boc-D-Ala-OH 王树脂=3 7 1 ； DMAP 王树脂=0. 5 1 ；反应后得到 Boc-D-Ala-Wang resin ；B.依次逐个加入C端第二个氨基酸Boc-Pro-OH、C端第三个氨基酸Boc-Arg(Z)-0H、 C端第四个氨基酸Boc-Leu-OH、C端第五个氨基酸Boc-D-Ci t_0H、C端第六个氨基酸 Boc-Tyr (Bzl) -OH、C 端第七个氨基酸 Boc-Ser (Bzl) -OH、C 端第八个氨基酸 Boc-D-Cpa-OH、 C端第九个氨基酸Boc-D-Phe (4-C1) -OH和C端第十个氨基酸Ac-D-Nal-OH ；每加入一个C 端氨基酸时，同时缩合试剂HBTU、HOBt和DIEA，20 60°C下反应1 4h ；C.以10wt%的氨水进行氨解，然后以HdPPd为脱保护试剂反应24小时，制得西曲瑞 克粗品；D.西曲瑞克粗品以C18制备柱进行经高效液相色谱纯化，得到西曲瑞克精品。
全文摘要
本发明公开了一种西曲瑞克的制备方法。该方法以Boc氨基酸及王树脂为原料，逐个加入C端氨基酸，再以10wt％的氨水进行氨解，然后以H2和Pd为脱保护试剂，制得西曲瑞克精品。本发明采用的是BOC法合成，西曲瑞克粗品的收率高达60～70％。本发明选用Wang树脂做载体可以避免最后切割的时候采用HF酸的剧毒物质，而且在本发明中采用的最小保护原则，对原料的选择上也有更多的余地，合成出来的副产物也较少，易于分离纯化。
文档编号C07K7/06GK101863960SQ20091013494
公开日2010年10月20日 申请日期2009年4月15日 优先权日2009年4月15日
发明者廖志, 杨毅跃 申请人:无锡市凯利药业有限公司