专利名称：一种二氢乌桑巴拉山碱的纯化方法
技术领域：
本发明涉及一种ニ氢乌桑巴拉山碱的纯化方法，特别是涉及ー种应用超临界CO2萃取和高速逆流色谱提取纯化ニ氢乌桑巴拉山碱的方法。
背景技术：
ニ氢乌桑巴拉山碱为咔啉生物碱，分子式C29H3tlN4, mp. 143-145で)，[α ]D+109. 7° (氯仿)。ニ氢乌桑巴拉山碱具有抗恶性疟原虫活性，其IC50为O. 023 μ Μ。ニ氢乌桑巴拉山碱还具有抗菌活性和细胞毒活性，在浓度为100微克时，其对金黄色葡萄球菌、包皮垢分枝杆菌和枯草杆菌的抑菌区直径(mm)分别为6、19、19。经文献检索，尚未发现ニ氢乌桑巴拉山碱的相关提取纯化方法的相关报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是填补该领域的空白，提供一种高纯度ニ氢乌桑巴拉山碱的纯化方法，该方法产品收率高、含量高。为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下
以夾竹桃科植物马克白坚木的树皮为原料，粉碎，加入碱性醇浸润3-8小吋，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，氨化沉淀，沉淀物以石油醚-こ酸こ酷-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，减压干燥即得高含量ニ氢乌桑巴拉山碱。所述的碱性醇为70-99%こ醇，氨水调节pH9_lI。所述超临界CO2萃取条件为萃取温度为40-65°C，萃取压カ为25_40MPa，CO2流量为20-60L/h，萃取时间为l-3h。所述的石油醚-こ酸こ酯-甲醇-水比例为5 :(3-7) (5-12) :3。本发明的积极效果在于
1)方法采用超临界CO2萃取，是ー种环保无污染的方法，提取时间短，效率高，能耗较低，CO2重复利用；
2)方法采用高速逆流色谱分离，是ー种液液萃取方法，没有产品损失，是ー种高效分离方法，制备周期短，试剂可以重复利用，制备量大。下面将结合具体实施方式
进ー步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
取Ikg马克白坚木的树皮，粉碎，加入70%こ醇(氨水调节PH9)浸润3小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，调节萃取温度为40°C，萃取压カ为40MPa，CO2流量为60L/h，萃取3h，在分离釜中收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，氨化收集沉淀物，取石油醚、乙酸こ酷、甲醇、水，按(5 7 12 3)比例混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900r/min，取こ酸こ酯溶解沉淀物注入色谱仪，收集ニ氢乌桑巴拉山碱流分，减压干燥得白色ニ氢乌桑巴拉山碱68mg，高相液相检测，含量98. 3%。实施例2:
取Ikg马克白坚木的树皮，粉碎，加入99%こ醇(氨水调节pHll)浸润8小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，调节萃取温度为65°C，萃取压カ为25MPa，CO2流量为20L/h，萃取lh，在分离釜中收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，氨化收集沉淀物，取石油醚、こ酸こ酷、甲醇、水，按(5 3 5 3)比例混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节950r/min，取こ酸こ酯溶解沉淀物注入色谱仪，收集ニ氢乌桑巴拉山碱流分，减压干燥得白色ニ氢乌桑巴拉山碱39mg，高相液相检测，含量98. 7%。实施例3:·
取Ikg马克白坚木的树皮，粉碎，加入80%こ醇(氨水调节pHIO)浸润5小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，调节萃取温度为55°C，萃取压カ为38MPa，CO2流量为40L/h，萃取2h，在分离釜中收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，氨化收集沉淀物，取石油醚、乙酸こ酷、甲醇、水，按(5 6 7 3)比例混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节850r/min，取こ酸こ酯溶解沉淀物注入色谱仪，收集ニ氢乌桑巴拉山碱流分，减压干燥得白色ニ氢乌桑巴拉山碱85mg，高相液相检测，含量98. 1%。实施例4:
取Ikg马克白坚木的树皮，粉碎，加入85%こ醇(氨水调节pH9)浸润5小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，调节萃取温度为55°C，萃取压カ为33MPa，CO2流量为45L/h，萃取2h，在分离釜中收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，氨化收集沉淀物，取石油醚、乙酸こ酷、甲醇、水，按(5 6 11 3)比例混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节800r/min，取こ酸こ酯溶解沉淀物注入色谱仪，收集ニ氢乌桑巴拉山碱流分，减压干燥得白色ニ氢乌桑巴拉山碱72mg，高相液相检测，含量98. 6%。实施例5:
取Ikg马克白坚木的树皮，粉碎，加入75%こ醇(氨水调节pH9. 5)浸润6小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，调节萃取温度为55°C，萃取压カ为34MPa，CO2流量为44L/h，萃取2. 5h，在分离釜中收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，氨化收集沉淀物，取石油醚、こ酸こ酷、甲醇、7jC，按(5 :4:8 3)比例混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900r/min，取こ酸こ酯溶解沉淀物注入色谱仪，收集ニ氢乌桑巴拉山碱流分，减压干燥得白色ニ氢乌桑巴拉山碱54mg，高相液相检测，含量98. 5%。
权利要求
1.一种二氢乌桑巴拉山碱的纯化方法，其特征在于包括以下步骤以夹竹桃科植物马克白坚木的树皮为原料，粉碎，加入碱性醇浸润3-8小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，氨化沉淀，沉淀物以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，减压干燥即得高含量二氢乌桑巴拉山碱。
2.根据权利要求I所述二氢乌桑巴拉山碱的纯化方法，其特征在于所述的碱性醇为70-99%乙醇，氨水调节pH9-ll。
3.根据权利要求I所述二氢乌桑巴拉山碱的纯化方法，其特征在于所述超临界CO2萃取条件为萃取温度为40-65°C，萃取压力为25-40MPa，CO2流量为20_60L/h，萃取时间为l-3h。
4.根据权利要求I所述二氢乌桑巴拉山碱的纯化方法，其特征在于所述的石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水比例为5 (3-7) (5-12) :3。
全文摘要
本发明提供了一种二氢乌桑巴拉山碱的纯化方法。方法是以夹竹桃科植物马克白坚木的树皮为原料，粉碎，加入碱液浸润3-8小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物，用酸水溶解，过滤，氨化沉淀，沉淀物以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，减压干燥即得高含量二氢乌桑巴拉山碱。该方法适合高含量二氢乌桑巴拉山碱的制备。
文档编号C07D519/00GK102675350SQ20121018456
公开日2012年9月19日 申请日期2012年6月7日 优先权日2012年6月7日
发明者刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司