一种穿心莲内酯的提取工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种穿心莲内酯的提取工艺，属于医药【技术领域】，提取工艺包括以下步骤：S1.粉碎：取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径小于20mm的粗粉，备用；S2.浸提：将步骤S1中所得穿心莲粗粉缓慢投入提取罐中进行40～50℃恒温浸提，恒温浸提包括一次浸提、二次浸提和三次浸提；S3.粗制：包括脱色、浓缩和结晶；S4.精制：包括溶解、析晶和干燥。本发明与传统工艺相比，采用该工艺制备的穿心莲内酯得率高、残渣中穿心莲内酯的残余百分量低，产品含量高于98%，该工艺操作简单、所需设备成本低、溶剂使用量低，利于工业化大规模生产。
【专利说明】—种穿心莲内酯的提取工艺
【技术领域】
[0001]本发明属于医药【技术领域】，具体涉及一种穿心莲内酯的提取工艺。
【背景技术】
[0002]穿心莲为爵床科植物穿心莲(Andrographispaniculate (Burm.F.) Nees)的干燥地上部分，初秋茎叶茂盛时采割，晒干。穿心莲又名春莲秋柳，一见喜，榄核莲、苦胆草、金香草、金耳钩、印度草、苦草等。有清热解毒、消炎、消肿止痛作用。主治细菌性痢疾、尿路感染、急性扁桃体炎、肠炎、咽喉炎、肺炎核流行性感冒等，外用可治疗疮疖肿毒、外伤感染等。主产于广东、福建等省，华中、华北、西北等地也有引种。该品种已收载于中华人民共和国2010版药典一部。
[0003]已知穿心莲包含以下化学组成:穿心莲内酯(又名穿心莲乙素，AndrographoIide)、脱氧穿心莲内酯(又名穿心莲甲素，deoxyandrographolide)、新穿心莲内酯(又名穿心莲丁素，deoxydidehydroandrographolide)。此外人们还将这些化合物经结构改造制备成它们的衍生物，例如:穿心莲内酯-(脱羟、脱氢)一>脱水穿心莲内酯-(双琥珀酸酯化、成盐)一>穿琥宁(半K盐)或炎琥宁(K-Na盐)。穿心莲内酯为爵床科植物穿心莲中提取得到的二萜内酯类化合物，是重要穿心莲的主要有效成分之一，具有清热解毒、凉血消肿等功能。是治疗上呼吸道感染、急性菌痢、病毒性感冒等常用中成药穿心莲制剂的主要有效成分。20世纪70年代初，国内开始将穿心莲的茎叶或全草提取后，制成了穿心莲片等普通口服制剂。普通制剂对细菌、病毒虽然具有一定的抑制作用，但因其主要有效成分不溶于水而威 力不足。
[0004]由于穿心莲内酯是从穿心莲中提取的有效成分，单体纯度高，产品质量和药理作用较穿心莲更具有优势。目前SFDA已批准生产穿心莲内酯片剂、胶囊、软胶囊、滴丸等口服剂型。其缺点是穿心莲内酯为二萜类内酯化合物，难溶于水，通常仅能口服给药。针对临床上病毒感染急症的需求，将其结构中引入不同的亲水基团，增强其水溶性制备成注射剂，提高疗效。在我国，自七十年代开始对穿心莲内酯水溶性衍生物进行研究，开发了一系列注射剂，其中最主要产品为穿琥宁和炎琥宁。穿心莲内酯对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。目前，国家食品药品监督管理局批准生产销售的穿心莲内酯制剂主要有片剂、胶囊、滴丸剂等。
[0005]关于穿心莲内酯的制备文献报道较多，传统穿心莲内酯的制备工艺为:穿心莲叶用95%乙醇浸泡，所得乙醇浸泡液用活性炭脱色，脱色液蒸馏回收乙醇后的浓缩液静置得到粗晶品，粗晶加15倍量95%乙醇加热溶解，活性炭脱色，趁热过滤，静置重结晶，得淡黄色重结晶品，再经蒸馏水、氯仿、甲醇洗涤精制，得到穿心莲内酯成品。但传统制备工艺存在工业上提取难度大，收率低，成品中会残留较多的有机物的缺点。
[0006]中国专利CN103483299A公开了一种穿心莲内酯的提取方法，取穿心莲，加入到C02超临界萃取器中进行超临界萃取，将所得超临界萃取物置入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取液经DlOl大孔吸附树脂柱进行洗脱，洗脱液减压、浓缩、干燥后得穿心莲内酯提取物。此方法采用超临界萃取和微波萃取使得含量有很大提高，但由于超临界萃取、微波处置、树脂吸附所需设备昂贵，因此大大提高了生产成本，且难以应用于工业化大规模生产。
【发明内容】
[0007]本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种穿心莲内酯的提取工艺，与传统工艺相比，采用该工艺制备的穿心莲内酯得率高、残渣中穿心莲内酯的残余百分量低，产品含量高于98%，该工艺操作简单、所需设备成本低、溶剂使用量低，利用工业化大规模生产。
[0008]本发明的目的通过以下技术方案来实现:一种穿心莲内酯的提取工艺，它包括以下步骤:S1.粉碎:取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径小于20_的粗粉，备用；
[0009]S2.浸提:将步骤SI中所得穿心莲粗粉分成重量相等的η (η为正整数)份，分别缓慢投入I至η号提取罐中进行恒温浸提，所述恒温浸提包括以下子步骤:
[0010]S21.一次浸提:1至η号提取罐中加入一次浸提原液，40~50°C恒温浸泡6~24h，过滤得一次浸提液；
[0011]所述I号浸提罐中一次浸提原液为乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3~10倍；
[0012]S22.二次浸提:1至η号提取罐中加入二次浸提原液，40~50°C恒温浸泡2~15h，过滤得二次浸提液，所得二次浸提液作为下一提取罐的一次浸提原液； [0013]所述I号提取罐中二次浸提原液为乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的2~5倍；
[0014]S23.三次浸提:1至η号提取罐中加入重量为粗粉重量2~5倍的乙醇，40~50°C恒温浸泡2~10h，过滤得三次浸提液，所得三次浸提液作为下一提取罐的二次浸提原液；
[0015]S3.粗制:
[0016]S31.脱色:收集I至η号提取罐的一次浸提液，混匀后加入3~4%(W/V)活性炭，加热至60~70°C，搅拌浸提液进行吸附脱色，所述吸附脱色时间> 30min，吸附后过滤除去活性炭；
[0017]S32.浓缩:将脱色后的浸提液进行真空减压浓缩，浓缩至相对密度为1.02~1.20g/cm3，得穿心莲内酯浓缩液；其中，所述真空减压浓缩温度为40~60°C、真空度为-0.05 ~-0.09Mpa ；
[0018]S33.析晶:将穿心莲内酯浓缩液在2~10°C下析晶8~20h，过滤，所得固体为穿心连内酷粗品；
[0019]S4.精制:
[0020]S41.溶解:将穿心莲内酯粗品投入精制罐中，按投入重量1: (8~12MW/V)加入60~95%的乙醇，加热搅拌至乙醇微沸，粗品完全溶解；
[0021]S42.析晶:将上述穿心莲内酯粗品溶解液在2~10°C下析晶8~20h后进行抽滤，所得晶体用60~95%的乙醇洗涤2~3次；
[0022]S43.干燥:将步骤S42洗涤过的晶体在真空度< _0.06MP、干燥温度< 60°C的真空环境下干燥，干燥时间为≥2h，即得高纯度穿心莲内酯。
[0023]作为优选方案，步骤S2中所述乙醇浓度> 60%。
[0024]作为优选方案，步骤S2中还包括蒸馏回收乙醇，方法为:将I至η号提取罐中的滤渣进行蒸馏，至乙醇浓度< 40%。
[0025]作为优选方案，步骤S43真空干燥晶体时应翻动晶体，且翻动频率> I次/h。
[0026]本方案中，η为正整数，η的取值可以根据生产的需要确定具体的值，如取10、50、80,100 等。
[0027]本发明具有以下有益效果:
[0028]1.本发明在浸提步骤采用40~50°C恒温浸泡，且采用三次浸提方式，最大程度的使穿心莲内酯溶出，提高了穿心莲内酯的提取率；
[0029]2.本发明在浸提步骤采用“循环”工艺，即前一提取罐的二次浸提液作为下一提取罐的一次浸提原液、前一提取罐的三次浸提液作为下一提取罐的二次浸提液原液循环利用，因此，减少了乙醇的用量，降低了生产成本，有利于工厂化大规模生产。
[0030]3.本发明收集每罐的一次浸提液用于制备穿心莲内酯，由于一次浸提液中穿心莲内酯的含量高，因此提高了产品中穿心莲内酯的含量，采用本发明工艺制备的穿心莲内酯含量可闻达98%以上。
[0031]4.本发明在洗涤穿心莲内酯时采用60~95%乙醇，不使用氯仿、丙酮等有机溶剂，便于“三废”处理、产品安全 、有利于环境保护和操作人员的身体健康。
【具体实施方式】
[0032]下面结合实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述:
[0033]实施例1:一种穿心莲内酯的提取工艺，它包括以下步骤:
[0034]S1.粉碎:取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径为20mm的粗粉，备用；
[0035]S2.浸提:将步骤SI中所得穿心莲粗粉分成重量相等的η (η为正整数)份，分别缓慢投入I至η号提取罐中进行恒温浸提，采用如下循环方式进行恒温浸提:
[0036]I号提取罐:
[0037]S21.一次浸提:加入60%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，40°C恒温浸泡6h，过滤得一次浸提液；
[0038]S22.二次浸提:加入60%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的2倍，40°C恒温浸泡2h，过滤得二次浸提液；
[0039]S23.三次浸提:加入60%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的2倍，40°C恒温浸泡2h，过滤得三次浸提液；
[0040]2号提取罐:
[0041]S21.一次浸提:加入I号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，40°C恒温浸泡6h，过滤得一次浸提液；
[0042]S22.二次浸提:加入I号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，40°C恒温浸泡此，过滤得二次浸提液；
[0043]S23.三次浸提:加入60%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的2倍，40°C恒温浸泡2h，过滤得三次浸提液；
[0044]3号提取罐:
[0045]S21.一次浸提:加入2号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，40°C恒温浸泡2h，过滤得一次浸提液；
[0046]S22.二次浸提:加入2号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，40°C恒温浸泡2h，过滤得二次浸提液；
[0047]S23.三次浸提:加入60%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的2倍，40°C恒温浸泡2h，过滤得三次浸提液；
[0048]以此类推循环至η号提取罐
[0049]η号提取罐:
[0050]S21.一次浸提:加入η-l号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，40°C恒温浸泡2h，过滤得一次浸提液；
[0051 ] S22.二次浸提:加入η-l号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，40°C恒温浸泡2h，过滤得二次浸提液；
[0052]S23.三次浸提:加入60%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的2倍，40°C恒温浸泡2h，过滤得三次浸提液；
[0053]蒸馏回收乙醇:将I至η号提取罐中的滤渣进行蒸馏，至乙醇浓度为40% ；
[0054]S3.粗制:
[0055]S31.脱色:收集I至η号提取罐的一次浸提液，混匀后加入3% (W/V)活性炭，加热至60°C，搅拌浸提液进行吸附脱色，所述吸附脱色时间30min，吸附后过滤除去活性炭；
[0056]S32.浓缩:将脱色后的浸提液进行真空减压浓缩，浓缩至相对密度为1.02g/cm3,得穿心莲内酯浓缩液；其中，所述真空减压浓缩温度为40°C、真空度为-0.05Mpa ；
[0057]S33.析晶:将穿心莲内酯浓缩液在2°C下析晶8h，过滤，所得固体为穿心莲内酯粗品；S4.精制:
[0058]S41.溶解:将穿心莲内酯粗品投入精制罐中，按投入重量1:8 (W/V)加入60%乙醇，加热搅拌至乙醇微沸，粗品完全溶解；
[0059]S42.析晶:将上述穿心莲内酷粗品溶解液在2°C下析晶8h后进行抽滤,所得晶体用60%乙醇洗涤2次；
[0060]S43.干燥:将步骤S42洗涤过的晶体在真空度_0.06MP、干燥温度60°C的真空环境下干燥，干燥时间为2h，真空干燥晶体时应翻动晶体，且翻动频率I次/h，即得高纯度穿心莲内酯。
[0061]实施例2:—种穿心莲内酯的提取工艺，它包括以下步骤:
[0062]S1.粉碎:取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径为18mm的粗粉，备用；
[0063]S2.浸提:将步骤SI中所得穿心莲粗粉分成重量相等的3份，分别缓慢投入I至3号提取罐中进行恒温浸提，采用如下循环方式进行恒温浸提:
[0064]I号提取罐:
[0065]S21.一次浸提:加入80%乙醇,加入量为提取罐中粗粉重量的10倍，50°C恒温浸泡24h，过滤得一次浸提液；
[0066]S22.二次浸提:加入 80%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的5倍，50°C恒温浸泡15h，过滤得二次浸提液；
[0067]S23.三次浸提:加入80%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的5倍，50°C恒温浸泡10h，过滤得三次浸提液；[0068]2号提取罐:
[0069]S21.一次浸提:加入I号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，50°C恒温浸泡24h，过滤得一次浸提液；
[0070]S22.二次浸提:加入I号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，50°C恒温浸泡15h，过滤得二次浸提液；
[0071]S23.三次浸提:加入80%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的5倍，50°C恒温浸泡10h，过滤得三次浸提液；
[0072]3号提取罐:
[0073]S21.一次浸提:加入2号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，50°C恒温浸泡24h，过滤得一次浸提液；
[0074]S22.二次浸提:加入2号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，50°C恒温浸泡15h，过滤得二次浸提液；
[0075]S23.三次浸提:加入80%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的5倍，50°C恒温浸泡10h，过滤得三次浸提液；
[0076]蒸馏回收乙醇: 将I至3号提取罐中的滤渣进行蒸馏，至乙醇浓度为30% ；
[0077]S3.粗制:
[0078]S31.脱色:收集I至3号提取罐的一次浸提液，混匀后加入4% (W/V)活性炭，加热至70°C，搅拌浸提液进行吸附脱色，所述吸附脱色时间60min，吸附后过滤除去活性炭；
[0079]S32.浓缩:将脱色后的浸提液进行真空减压浓缩，浓缩至相对密度为1.20g/cm3,得穿心莲内酯浓缩液；其中，所述真空减压浓缩温度为60°C、真空度为-0.09Mpa ；
[0080]S33.析晶:将穿心莲内酯浓缩液在10°C下析晶20h，过滤，所得固体为穿心莲内酯粗品；S4.精制:
[0081]S41.溶解:将穿心莲内酯粗品投入精制罐中，按投入重量1:12 (W/V)加入95%的乙醇，加热搅拌至乙醇微沸，粗品完全溶解；
[0082]S42.析晶:将上述穿心莲内酷粗品溶解液在10°C下析晶20h后进行抽滤,所得晶体用95%的乙醇洗涤3次；
[0083]S43.干燥:将步骤S42洗涤过的晶体在真空度_0.08MP、干燥温度45°C的真空环境下干燥，干燥时间为2.5h，真空干燥晶体时应翻动晶体，且翻动频率2次/h，即得高纯度芽心连内酷。
[0084]实施例3:—种穿心莲内酯的提取工艺，它包括以下步骤:
[0085]S1.粉碎:取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径为15mm的粗粉，备用；
[0086]S2.浸提:将步骤SI中所得穿心莲粗粉分成重量相等的5份，分别缓慢投入1-5号提取罐中进行恒温浸提，采用如下循环方式进行恒温浸提:
[0087]I号提取罐:
[0088]S21.一次浸提:加入92%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的8倍，45°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0089]S22.二次浸提:加入92%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，45°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0090]S23.三次浸提:加入92%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，45°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0091]2号提取罐:
[0092]S21.一次浸提:加入I号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，45°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；[0093]S22.二次浸提:加入I号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，45°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0094]S23.三次浸提:加入92%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，45°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0095]3号提取罐:
[0096]S21.一次浸提:加入2号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，45°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0097]S22.二次浸提:加入2号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，45°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0098]S23.三次浸提:加入92%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，45°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0099]4号提取罐:
[0100]S21.一次浸提:加入3号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，45°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0101]S22.二次浸提:加入3号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，45°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0102]S23.三次浸提:加入92%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，45°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0103]5号提取罐:
[0104]S21.一次浸提:加入4号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，45°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0105]S22.二次浸提:加入4号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，45°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0106]S23.三次浸提:加入92%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，45°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0107]蒸馏回收乙醇:将I至5号提取罐中的滤渣进行蒸馏，至乙醇浓度为32%。
[0108]S3.粗制:
[0109]S31.脱色:收集I至η号提取罐的一次浸提液，混匀后加入3.5%(W/V)活性炭，加热至64°C，搅拌浸提液进行吸附脱色，所述吸附脱色时间65min，吸附后过滤除去活性炭；
[0110]S32.浓缩:将脱色后的浸提液进行真空减压浓缩，浓缩至相对密度为1.lg/cm3，得穿心莲内酯浓缩液；其中，所述真空减压浓缩温度为50°C、真空度为-0.07Mpa ；
[0111]S33.析晶:将穿心莲内酯浓缩液在5°C下析晶14h，过滤，所得固体为穿心莲内酯粗品；S4.精制:
[0112]S41.溶解:将穿心莲内酯粗品投入精制罐中，按投入重量1:10 (W/V)加入85%的乙醇，加热搅拌至乙醇微沸，粗品完全溶解；[0113]S42.析晶:将上述穿心莲内酯粗品溶解液在6°C下析晶14h后进行抽滤，所得晶体用85%的乙醇洗涤3次；
[0114]S43.干燥:将步骤S42洗涤过的晶体在真空度_0.1MP、干燥温度28°C的真空环境下干燥，干燥时间为3h，真空干燥晶体时应翻动晶体，且翻动频率3次/h，即得高纯度穿心连内酷。
[0115]实施例4:一种穿心莲内酯的提取工艺，它包括以下步骤:
[0116]S1.粉碎:取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径小于20mm的粗粉，备用；
[0117]S2.浸提:将步骤SI中所得穿心莲粗粉分成重量相等的10份，分别缓慢投入I至10号提取罐中进行恒温浸提，所述恒温浸提包括以下子步骤:
[0118]I号提取罐:
[0119]S21.一次浸提:加入78%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的5倍，48°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0120]S22.二次浸提:加入78%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，48°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0121]S23.三次浸提:加入78%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，48°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0122]2号提取罐:
[0123]S21.一次浸提:加入1号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，48°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0124]S22.二次浸提:加入1号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，48°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0125]S23.三次浸提:加入78%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，48°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0126]3-10号提取罐操作步骤中一次浸提和二次浸提加入的一次浸提原液和二次浸提原液分别为2-9号的提取罐中的二次浸提液和三次浸提液，其余操作同2号提取罐；
[0127]蒸馏回收乙醇:将1至10号提取罐中的滤渣进行蒸馏，至乙醇浓度为30% ；
[0128]S3.粗制:
[0129]S31.脱色:收集1至10号提取罐的一次浸提液，混匀后加入3% (W/V)活性炭，加热至68°C，搅拌浸提液进行吸附脱色，所述吸附脱色时间为40min，吸附后过滤除去活性炭;
[0130]S32.浓缩:将脱色后的浸提液进行真空减压浓缩，浓缩至相对密度为1.lg/cm3，得穿心莲内酯浓缩液；其中，所述真空减压浓缩温度为60°C、真空度为-0.08Mpa ；
[0131]S33.析晶:将穿心莲内酯浓缩液在4°C下析晶8h，过滤，所得固体为穿心莲内酯粗品；S4.精制:
[0132]S41.溶解:将穿心莲内酯粗品投入精制罐中，按投入重量1:12 (W/V)加入75%的乙醇，加热搅拌至乙醇微沸，粗品完全溶解；
[0133]S42.析晶:将上述穿心莲内酷粗品溶解液在8°C下析晶14h后进行抽滤,所得晶体用95%的乙醇洗涤3次；
[0134]S43.干燥:将步骤S42洗涤过的晶体在真空度为_0.1MP、干燥温度为50°C的真空环境下干燥，干燥时间为2.5h，真空干燥晶体时应翻动晶体，且翻动频率4次/h，即得高纯度穿心莲内酯。
[0135]实施例5:—种穿心莲内酯的提取工艺，它包括以下步骤:
[0136]S1.粉碎:取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径小于20mm的粗粉，备用；
[0137]S2.浸提:将步骤SI中所得穿心莲粗粉分成重量相等的50份，分别缓慢投入I至50号提取罐中进行恒温浸提，所述恒温浸提包括以下子步骤:
[0138]I号提取罐:
[0139]S21.一次浸提:加入90%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的5倍，40°C恒温浸泡8h，过滤得一次浸提液；
[0140]S22.二次浸提:加入90%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，40°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0141]S23.三次浸提:加入90%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，40°C恒温浸泡6h，过滤得三次浸提液；
[0142]2号提取罐:
[0143]S21.一次浸提 :加入I号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，40°C恒温浸泡8h，过滤得一次浸提液；
[0144]S22.二次浸提:加入I号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，40°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0145]S23.三次浸提:加入90%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，40°C恒温浸泡6h，过滤得三次浸提液；
[0146]3-50号提取罐操作步骤中一次浸提和二次浸提加入的一次浸提原液和二次浸提原液分别为2-49号的提取罐中的二次浸提液和三次浸提液，其余操作同2号提取罐；
[0147]蒸馏回收乙醇:将I至50号提取罐中的滤渣进行蒸馏，至乙醇浓度为25% ；
[0148]S3.粗制:
[0149]S31.脱色:收集I至50号提取罐的一次浸提液，混匀后加入4% (W/V)活性炭，加热至60°C，搅拌浸提液进行吸附脱色，所述吸附脱色时间为40min，吸附后过滤除去活性炭;
[0150]S32.浓缩:将脱色后的浸提液进行真空减压浓缩，浓缩至相对密度为1.lg/cm3，得穿心莲内酯浓缩液；其中，所述真空减压浓缩温度为40°C、真空度为-0.05Mpa ；
[0151]S33.析晶:将穿心莲内酯浓缩液在4°C下析晶16h，过滤，所得固体为穿心莲内酯粗品；S4.精制:
[0152]S41.溶解:将穿心莲内酯粗品投入精制罐中，按投入重量1:9 (W/V)加入75%的乙醇，加热搅拌至乙醇微沸，粗品完全溶解；
[0153]S42.析晶:将上述穿心莲内酯粗品溶解液在2°C下析晶IOh后进行抽滤，所得晶体用70%的乙醇洗涤2次；
[0154]S43.干燥:将步骤S42洗涤过的晶体在真空度为_0.08MP、干燥温度为52°C的真空环境下干燥，干燥时间为3h，真空干燥晶体时应翻动晶体，且翻动频率2次/h，即得高纯度穿心莲内酯。
[0155]实施例6:—种穿心莲内酯的提取工艺，它包括以下步骤:[0156]S1.粉碎:取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径小于20mm的粗粉，备用；
[0157]S2.浸提:将步骤SI中所得穿心莲粗粉分成重量相等的100份，分别缓慢投入I至100号提取罐中进行恒温浸提，所述恒温浸提包括以下子步骤:
[0158]I号提取罐:
[0159]S21.一次浸提:加入80%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的5倍，48°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0160]S22.二次浸提:加入80醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，48°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0161]S23.三次浸提:加入80%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，48°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0162]2号提取罐:
[0163]S21.一次浸提:加入I号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，48°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0164]S22.二次浸提:加入I号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，48°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0165]S23.三次浸提:加 入80%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，48°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0166]3-100号提取罐操作步骤中一次浸提和二次浸提加入的一次浸提原液和二次浸提原液分别为2-99号的提取罐中的二次浸提液和三次浸提液，其余操作同2号提取罐；
[0167]蒸馏回收乙醇:将I至100号提取罐中的滤渣进行蒸馏，至乙醇浓度为30% ；
[0168]S3.粗制:
[0169]S31.脱色:收集I至100号提取罐的一次浸提液，混匀后加入3% (W/V)活性炭，加热至68°C，搅拌浸提液进行吸附脱色，所述吸附脱色时间为40min，吸附后过滤除去活性炭;
[0170]S32.浓缩:将脱色后的浸提液进行真空减压浓缩，浓缩至相对密度为1.lg/cm3，得穿心莲内酯浓缩液；其中，所述真空减压浓缩温度为60°C、真空度为-0.08Mpa ；
[0171]S33.析晶:将穿心莲内酯浓缩液在4°C下析晶8h，过滤，所得固体为穿心莲内酯粗品；S4.精制:
[0172]S41.溶解:将穿心莲内酯粗品投入精制罐中，按投入重量1:12 (W/V)加入75%的乙醇，加热搅拌至乙醇微沸，粗品完全溶解；
[0173]S42.析晶:将上述穿心莲内酷粗品溶解液在8°C下析晶14h后进行抽滤,所得晶体用95%的乙醇洗涤3次；
[0174]S43.干燥:将步骤S42洗涤过的晶体在真空度为_0.1MP、干燥温度为50°C的真空环境下干燥，干燥时间为2.5h，真空干燥晶体时应翻动晶体，且翻动频率3次/h，即得高纯度穿心莲内酯。
[0175]实施例7:—种穿心莲内酯的提取工艺，它包括以下步骤:
[0176]S1.粉碎:取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径小于20mm的粗粉，备用；
[0177]S2.浸提:将步骤SI中所得穿心莲粗粉分成重量相等的80份，分别缓慢投入I至80号提取罐中进行恒温浸提，所述恒温浸提包括以下子步骤:[0178]I号提取罐:
[0179]S21.一次浸提:加入78%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的5倍，48°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0180]S22.二次浸提:加入78%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，48°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0181]S23.三次浸提:加入78%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，48°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0182]2号提取罐:
[0183]S21.一次浸提:加入I号罐的二次浸提液，为一次浸提原液，48°C恒温浸泡15h，过滤得一次浸提液；
[0184]S22.二次浸提:加入I号罐的三次浸提液，为二次浸提原液，48°C恒温浸泡10h，过滤得二次浸提液；
[0185]S23.三次浸提:加入78%乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3倍，48°C恒温浸泡5h，过滤得三次浸提液；
[0186]3-80号提取罐操作步骤中一次浸提和二次浸提加入的一次浸提原液和二次浸提原液分别为2-79号的提取罐中的二次浸提液和三次浸提液，其余操作同2号提取罐；
[0187]蒸馏回收乙醇:将I至80号提取罐中的滤渣进行蒸馏，至乙醇浓度为30% ；
[0188]S3.粗制:
[0189]S31.脱色:收集I至80号提取罐的一次浸提液，混匀后加入4% (W/V)活性炭，加热至70°C，搅拌浸提液进行吸附脱色，所述吸附脱色时间60min，吸附后过滤除去活性炭；
[0190]S32.浓缩:将脱色后的浸提液进行真空减压浓缩，浓缩至相对密度为1.20g/cm3,得穿心莲内酯浓缩液；其中，所述真空减压浓缩温度为60°C、真空度为-0.09Mpa ；
[0191]S33.析晶:将穿心莲内酯浓缩液在10°C下析晶20h，过滤，所得固体为穿心莲内酯粗品；S4.精制:
[0192]S41.溶解:将穿心莲内酯粗品投入精制罐中，按投入重量1:12 (W/V)加入95%的乙醇，加热搅拌至乙醇微沸，粗品完全溶解；
[0193]S42.析晶:将上述穿心莲内酷粗品溶解液在10°C下析晶20h后进行抽滤,所得晶体用95%的乙醇洗涤3次；
[0194]S43.干燥:将步骤S42洗涤过的晶体在真空度_0.08MP、干燥温度45°C的真空环境下干燥，干燥时间为2.5h，真空干燥晶体时应翻动晶体，且翻动频率2次/h，即得高纯度穿心莲内酯。
[0195]实施例8:
[0196]一、不同提取工艺对穿心莲内酯提取率及含量的影响试验数据
[0197]1.本发明方法:取穿心莲叶子9份，每份200kg，分为三个处理组，其余同实施例3 ;
[0198]2.传统浸提工艺:取穿心 莲叶子9份，每份200kg，分为三个处理组，穿心莲叶用95%乙醇浸提三次，三次加入乙醇的量分别为穿心莲叶子重量的6倍、4倍、2倍，浸提时间分别为24h、6h、4h，所得乙醇浸提液用2~4%的活性炭脱色，脱色液蒸馏回收乙醇，得到的浓缩液经静置析晶，过滤得到粗品，粗品加15倍量95%乙醇加热溶解，活性炭脱色，趁热过滤，静置重结晶，得重结晶品，再经蒸馏水、氯仿、甲醇洗涤精制，得到穿心莲内酯成品。
[0199]3.检测方法:
[0200](I)残渣中穿心莲内酯的残余百分量；照2010年版中国药典一部“穿心莲”品种的含量测定项下的高效液相色谱法，测定投料的药材中的穿心莲内酯含量(简称为含量A);将步骤S2残渣用水冲洗一次，减压干燥至水分含量低于5%，同上法测定该残渣中的穿心莲内酯含量(简称为含量B)，以下式计算残渣中穿心莲内酯的残余百分量；残余百分量(％)=[(含量A-含量B)/含量A] X 100%。该残余百分量越低，表明穿心莲内酯提取越完全。
[0201](2)成品穿心莲内酯含量:用高效液相色谱法测定穿心莲内酯的含量，计算穿心莲内酷的提取率。
[0202]高效液相色谱条件如下:
[0203]色谱柱:HypersiIODSC18
[0204]流动相:甲醇:水(60:40 );
[0205]流速:1.0ml/min ；
[0206]柱温:3(TC;
[0207]检测波长:225nm。
[0208]4.实验结果:如表1所示:
[0209]表1:不同提取工艺对穿心莲内酯提取率及含量的影响试验数据
[0210]
【权利要求】
1.一种穿心莲内酯的提取工艺，其特征在于，它包括以下步骤: S1.粉碎:取穿心莲的叶子将其自然晾干，粉碎成粒径小于20_的粗粉，备用； S2.浸提:将步骤S1中所得穿心莲粗粉分成重量相等的η(η为正整数)份，分别缓慢投入1至N号提取罐中进行恒温浸提，所述恒温浸提包括以下子步骤: S21.一次浸提:1至N号提取罐中加入一次浸提原液，40~50°C恒温浸泡6~24h，过滤得一次浸提液； 所述1号浸提罐中一次浸提原液为乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的3~10倍； S22.二次浸提:1至η号提取罐中加入二次浸提原液，40~50°C恒温浸泡2~15h，过滤得二次浸提液，所得二次浸提液作为下一提取罐的一次浸提原液； 所述I号提取罐中二次浸提原液为乙醇，加入量为提取罐中粗粉重量的2~5倍； S23.三次浸提:1至η号提取罐中加入重量为粗粉重量2~5倍的乙醇，40~50°C恒温浸泡2~10h，过滤得三次浸提液，所得三次浸提液作为下一提取罐的二次浸提原液； S3.粗制: S31.脱色:收集I至η号提取罐的一次浸提液，混匀后加入3~4%(W/V)活性炭，加热至60~70°C，搅拌浸提液进行吸附脱色，所述吸附脱色时间> 30min，吸附后过滤除去活性炭； S32.浓缩:将脱色后的浸提液进行真空减压浓缩，浓缩至相对密度为1.02~1.20g/cm3，得穿心莲内酯浓缩液；其中，所述真空减压浓缩温度为40~60°C、真空度为-0.05 ~-0.09Mpa ； S33.析晶:将穿心莲内酯浓缩液在2~10°C下析晶8~20h，过滤，所得固体为穿心莲内酷粗品； S4.精制: S41.溶解:将穿心莲内酯粗品投入精制罐中，按投入重量1:(8~12) (W/V)加入60~95%的乙醇，加热搅拌至乙醇微沸，粗品完全溶解； S42.析晶:将上述穿心莲内酯粗品溶解液在2~10°C下析晶8~20h后进行抽滤，所得晶体用60~95%的乙醇洗涤2~3次； S43.干燥:将步骤S42洗涤过的晶体在真空度<-0.06MP、干燥温度< 60°C的真空环境下干燥，干燥时间为> 2h，即得高纯度穿心莲内酯。
2.如权利要求1所述的一种穿心莲内酯的提取工艺，其特征在于:步骤S2中所述乙醇浓度> 60%ο
3.如权利要求1所述的一种穿心莲内酯的提取工艺，其特征在于:步骤S2中还包括蒸馏回收乙醇，方法为:将I至η号提取罐中的滤渣进行蒸馏，至乙醇浓度< 40%。
4.如权利要求1所述的一种穿心莲内酯的提取工艺，其特征在于:步骤S43真空干燥晶体时应翻动晶体，且翻动频率> I次Λ。
【文档编号】C07D307/60GK103896890SQ201410076514
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2014年3月4日 优先权日:2014年3月4日
【发明者】彭晓华, 曾永辉, 范伟川 申请人:成都通德药业有限公司