专利名称：2-[4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基]-苯甲酸的支链烷基酯，它们的制备方法及其作为 ...的制作方法
技术领域：
本发明涉及2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲烷基〕-苯甲酸的支链烷基酯及其药用盐，它们的制备方法及其作为解痉剂在医药方面的应用。
美国专利2，681，340叙述了2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸酯(式Ⅰ，R1＝低级烷基)可以作为解痉剂，其中作为低级烷基的R1的定义非常有限。在所述的定义中，尽管R1包括低级烷基，但其说明书只叙述了直链甲基、乙基和正-丁基酯的制备方法，而且作为特定的化合物，在权利要求书中仅列举了甲酯和乙酯作为值得选用的化合物。
迄今为止，任何式Ⅰ所示的支链酯均是未知的。
苯吡苯酯(式Ⅱ)是上述美国专利2，681，340所述一系列化合物的一个具有代表性的化合物，可以单独应用或者在解痉制剂中与安乃近联合使用，例如Baralgan(R)。当苯吡苯酯通过静脉给药时，显示出有效的解痉活性。但若口服用药，则其活性显著降低，原因是甲基酯快速代谢成为相应的酸。
口服有效的解痉剂则是非常有利的。
本发明叙述了新的2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸的支链烷基酯，令人惊奇的是它是比苯吡苯酯和美国专利2，681，340所述化合物类更有效的解痉剂，而且还对由酶引起的水解具有更稳定、长期的作用，并且对哺乳动物经肠给药或非经肠胃给药时，代谢更加稳定。这些性能使本发明化合物特别适宜作为口服解痉剂用于医药方面。
本发明涉及由通式Ⅲ代表的化合物及其药用盐，
式中，R4和R5可以相同或不同，R4和R5各自代表C1-C4烷基。
定义为C1-C4烷基的R4、R5和R6各自可以代表甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基，本发明还包括它们所有的外消旋物和旋光异构体。
R4和R5最好各自代表CH3和C2H5，R6最好代表H和CH3。
本发明特别优选的化合物是R4＝R5＝CH3和R6＝H的式Ⅲ化合物。
本发明还涉及通式Ⅲ化合物的制备方法。这些化合物可利用多种方法获得。
例如，可利用已知方法在羧基基团上使式Ⅳ(R＝H)羧酸衍生〔E.Haslam，“有机化学中的保护基团”(J.F.W.McOmieEd.)，183页，Plenum出版社，伦敦(1973)和E.Haslam，“四面体”，1980，第36卷，2409页，及其所引参考文献)，
得到式Ⅳ酚酯，其中R由V表示
式中，R4、R5、R6定义如式Ⅲ中的定义，在碱存在下使式Ⅳ酚酯与带有合适离去基团的2-哌啶子基-乙基衍生物或其盐〔例如2-哌啶子基-乙基卤化物(如2-哌啶子基-乙基氯或2-哌啶子基乙基氯盐酸盐)〕反应，得到本发明的式Ⅲ化合物。
另一种方法是，利用上述所引文献中的已知方法，在缩合剂存在下，用适当的醇直接酯化式Ⅵ酸。
合适的缩合剂例如是浓H2SO4，三氟乙酐和亚硫酰氯。
另一种方法是，利用已知方法(在上述引文中)，用合适的烷基卤处理式Ⅵ酸的羧酸盐，生成式Ⅲ化合物。
上述反应可以在不用溶剂的情况下进行，或在不参与反应的溶剂中或溶剂混合物中进行，溶剂例如有酮类如乙酮、丁-2-酮;N，N-二取代酰胺类如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺;卤代烃如四氯化碳、氯仿、二氯甲烷;醚类如乙醚、二异丙基醚或甲基-叔丁基醚;芳烃类如苯、甲苯或二甲苯;酯类如乙酸乙酯或乙酸丁酯;二甲亚砜或六甲基磷酰三胺。也可使用这些溶剂与水的混合物。若使用相转移催化剂，则合适的催化剂有甲基三辛基氯化铵(例如Aliquat(R)336)或四丁基溴化铵。
另外，在适当的条件下，试剂醇也可用作溶剂。
反应可以在-20℃至所用溶剂的沸点温度下进行。
在式Ⅳ化合物(式中R等于式Ⅴ)转化成式Ⅲ化合物的反应中，可加入碱以便缩短反应时间。碱可以是金属氢氧化合物如氢氧化钠、氧氢化钾、氢氧化钙或氢氧化镁;金属碳酸盐如碳酸钠或碳酸钾;碳酸氢盐如碳酸氢钠或碳酸氢钾;醇化物如甲醇钠或乙醇钠;或有机碱如叔胺，例如三乙胺、N，N-二乙基苯胺或吡啶。
本发明的式Ⅲ化合物可以游离碱的形式存在，或与下述有机或无机酸反应以药用盐的形式存在，这些酸例如有盐酸、硫酸、乙酸、丙二酸、马来酸、酒石酸或柠檬酸。最好是与盐酸反应生成的盐。
本发明化合物具有下述特殊性能1)低的酯酶水解率，2)在位外和体内有效，并具有长效解痉作用，3)对哺乳动物口服给药时提高了生物利用度，这一点可利用以下试验化合物通过试验进行说明试验化合物Ⅰ2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸甲酯盐酸盐(苯吡苯酯)试验化合物Ⅱ2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸异丙酯盐酸盐试验化合物Ⅲ2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸实验1
试验化合物的酶水解率猪肝酯酶(0.5U＝2ug)在PH8.0的40mMTri-Hcl缓冲液中，于37℃预保温5分钟。加入试验化合物(最终浓度1mM)启动反应，反应液终体积为250ul。以不同的时间间隔、通过加入60ul1M乙酸终止酶反应。加入0.4MNaOH使溶液呈碱性(PH10.5)，用2.5ml氯仿快速萃取该碱性溶液(三次)。上层水溶液用双蒸溜水稀释，在290nm处测得吸光度。计算生成的试验化合物Ⅲ(摩尔消光系数＝14，400)的量。结果如表1所示。
表1每ml每mg蛋白质生成的试验化合物Ⅲumol数时间试验化合物(小时)ⅠⅡ0.00.000.000.50.500.052.01.620.103.52.780.10实验2在分离的豚鼠回肠模型中的解痉活性将从新宰杀的雄性或雌性豚鼠(重量范围200-400g)中得到的小肠清洗干净后贮存在台德罗氏溶液中。将一段回肠置于含有37℃台德罗氏溶液的器官浴中并维持回肠的拉力0.5-1.0g。用压缩空气对溶液连续吹风。达到初始平衡后，校准测量收缩量所需的乙酰胆碱次最大剂量。利用连接在该组织上的等张应变仪测定拉力的改变并用纸带式记录仪记录之。
对试验化合物在不同浓度下的解痉活性进行了实验，并从剂量效应曲线上计算IC50值。结果如表2所示。
表2试验化合物基团豚鼠回肠IC50作用时间(ug/ml)(min)Ⅰ -CH31.00 1.5Ⅱ -CH(CH3)20.01＞7.0实验3对麻醉狗的解痉活性方法用戊巴比妥钠(35mg/kg，i.v.)麻醉重量为10-15kg的雄性杂种狗。缓慢静脉内注射戊巴比妥(5mg/kg/h)以维持麻醉状态。插入气管内管以利于自发呼吸。分别插入股动脉和股静脉套管以记录血压和给药。剖腹手术后，分离十二指肠远端的一小部分小肠并插入装满盐水的球囊，接着缝合切口。然后将聚乙烯细套管插入肠系膜动脉以对含有球囊的小肠区注射碳酰胆碱或乙酰胆碱。然后将Statham压力换能器连接在球囊套管上以记录环行肌和纵行肌的收缩量。在4通道Nihon-kohden记录仪上记录所有的参数。在服用标准剂量的碳酰胆碱或乙酰胆碱(0.5-3ug)后记录小肠的收缩量。
十二指肠内给药以3、10和20mg/kg不同的剂量十二指肠内服用试验化合物Ⅰ和Ⅱ，并在不同的时间间隔内评定解痉活性。
通过计算，主动肌引起收缩的下降百分率并参考作用的起始时间和持续时间，评定抗痉挛活性。试验化合物溶解在蒸馏水中，配成1%溶液。结果见表3。
表3对麻醉狗十二指肠内给药后的解痉活性试验化合物剂量抑制起始时间持续时间mg/kg百分比(分钟)(分钟)354735试验化合物Ⅱ10836.57810N.A.N.A.N.A.
试验化合物Ⅰ20632040N.A.-无活性。
静脉内给药以不同的剂量(10，30，100，300和1000mg/kg)静脉注射试验化合物Ⅰ和Ⅱ。在不同的时间间隔评定解痉活性。
通过计算主动肌收缩的下降百分率来评定抗痉挛活性。从剂量效应曲线上计算ID50值。结果见表4。
表4对麻醉狗静脉给药后的解痉活性试验化合物 ID50作用持续时(mg/kg，i.V.)间(分钟)试验化合物Ⅰ0.14010-30试验化合物Ⅱ0.010＞760
实验4方法参考文献J.M.A.ZWagemakers和V.Claassen，“药物研究”(Arzneim-Forsch)，30(Ⅱ)第9期，1517页(1980)。
给禁食18小时小鼠(雄性或雌性，重量范围18-25g)服用炭末悬液(0.2ml/每只动物，10%炭末在阿拉伯树胶中)之前30分钟，用管饲法给小鼠口服剂量为10-100mg/kg的试验化合物Ⅰ和Ⅱ。服用炭末后30分钟，杀死动物并测量炭末在小肠中的向前推进量。试验化合物对炭末移动的抑制活性以相对小肠的长度百分比加以评定。另设10ml/kg盐水组用作对照。结果见表5。
实验5试验化合物Ⅱ(2-〔4-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基-苯甲酸异丙酯)对清醒小狗小肠移动性的作用方法在所有实验中均使用重量为15-20kg的雄性狗(THG动物商业公司Radenbach，HoeBeak(比哥猎狗))。在实验前至少四个星期，给狗装上微型应变力换能器(T1-T3)(2×4mm)，将换能器缝合在下述位置的肠上。换能器的线揽包嵌在套管中，套管载有插头连接外界电源。该不锈钢套管植入到紧靠肋弓低部的腹壁上。每个换能器均联接一个测量电桥。使用HP9385A计算机将信号贮存在机内以备以后数据分析。
T1近接空肠T2远侧空肠T3回肠在实验前18小时，停止对动物进食，可随意饮水。所有试验均在上午8点-9点开始。
测定以下各移动参数以10分钟间隔(mN×10分钟)，浓度曲线下的积分，作为阶段Ⅰ+Ⅱ活性指数药物作用的持续时间(分钟)消化道内内容物移动(interdigestivemigratingcomplex，IMC)的持续时间(分钟)作为阶段Ⅲ活性量度治疗方法试验化合物Ⅱ以0.2和0.5mg/kg剂量静脉给药(i.V)或以0.5mg/kg剂量胃肠内给药(i.g)，化合物溶解在盐水中，体积为1ml/kg(i.V.)或2ml/kg(i.g.)，n＝3-6。对照n＝26。
对照药物是溴丁东茛菪碱，苯吡苯酯。
溴丁东茛菪碱溶解在盐水中，体积为1ml/kg，n＝4-6以0.3和1mg/kg剂量静脉给药。
苯吡苯酯溶解在盐水中，体积为1ml/kg，n＝8，以1mg/kg剂量静脉给药。
统计方法利用图解法确定ID50值。
结果见表6-8，
图1-2。
结果摘要所有这三个化合物都抑制清醒狗小肠的自发移动(表6-7)。
药效次序为试验化合物Ⅱ＞溴丁东茛菪碱＞苯吡苯酯由最大抑制率确定的静脉IC50值为试验化合物Ⅱ220ug/kg溴丁东茛菪碱600ug/kg苯吡苯酯1000ug/kg静脉注射0.5mg/kg试验化合物Ⅱ，其抑制作用可持续约1个小时，而静脉注射1mg/kg溴丁东茛菪碱，其抑制作用只持续30分钟(表6)。
如果胃肠内给药5mg/kg试验化合物Ⅱ，则可测定到阶段Ⅲ活性显著的抑制。(表8，图1、2)
实验6对清醒狗大肠移动性的作用方法在所有实验中均使用重量为15-20kg的雄性狗(THG动物商业公司Rodenbach，HoeBEAK(比哥猎狗))。
在进行实验前至少4个星期，给狗装上微型应变力换能器(T1-T2)(2×4mm)，将其缝合在下述位置的肠上。换能器线揽包嵌在套管中，套管载有插头连接外界电源。该不锈钢套管植入在紧靠肋弓下部的腹壁上。每个换能器均连接一个测量电桥。使用HP9835A计算机将信号贮存在机内以备以后数据分析。
T1从回盲瓣(ileocecalvalve)起离口侧10cm处升结肠、T2从回盲瓣(ileocecalvalve)起离口侧25cm处横结肠。
实验前18小时，停止给动物进食，可随意饮水。所有试验均在上午8点-9点开始。
测定以下各参数周期持续时间(分钟)结肠内容物移动(ColonicmotorComplexCMC)的持续时间(分钟)浓度最大值(Au任意单位)汇集两个记录点(T1-T2)数据。
治疗方法试验化合物Ⅱ以3mg/kg剂量胃肠内给药，溶解在盐水中，体积为2ml/kg，n＝5，对照n＝23。
统计方法为测定显著区别(P＜0.05)，采用非配对t-试验。只有显著差异才注明＊。
结果见表9，图3。
结果摘要试验化合物Ⅱ以4mg/kg剂量胃肠内给药可完全抑制清醒狗CMC的结肠移动性约2小时，以1mg/kg剂量胃肠内给药则没有效果。溴丁东茛菪碱以3和10mg/kg剂量胃肠内给药对清醒狗结肠移动性没有作用。
本发明化合物及其盐具有有效的解痉活性作用，适用于治疗各种类型的痉挛(包括慢性和急性痉挛)。本发明化合物及其盐也可以与其他药理学上有效的物质联合使用，例如可与抗炎药、止痛药、抗忧虑药、CNS抑制剂和其他药理学上适合与解痉剂联合使用的治疗剂联合使用。
本发明化合物及其生理上适用的盐可以口服，非肠道给药(肌内注射、静脉注射、皮下注射)，直肠给药或局部给药，视情况还可选择气雾剂的形式给药。
本发明化合物及其生理上适用的盐可以单独服用，也可以与药学上适当的载体物质组成混合物服用或与载体物质联合服用。对于口服，有效物质可与载体混合并制成通常的服用剂型，例如可制成片剂。硬明胶胶囊，稀醇水或油悬浮剂或溶液剂。合适的载体物质例如有碳酸镁、乳糖、玉米淀粉和硬酯酸镁。各组分可制成干颗粒或湿颗粒的形式。油质载体或溶剂可以是植物油或动物油，例如可以是向日葵油或鳕鱼肝油。
有效化合物可以通过静脉注射给药。为此，通常将本发明化合物或其药用盐(溶解度尽可能大)溶解在一种常用的辅助剂中，该辅助剂也可以用作溶解媒介物或缓冲剂。
静脉给药所需溶剂例如有水;生理氯化钠溶液和稀醇，如乙醇、丙二醇和甘油;还有糖溶液，如葡萄糖溶液和甘露糖醇溶液;以及上述二种或多种溶剂的混合物。
药物制剂最好为单位剂量形式。
下面的实施例详细叙述本发明，但并未限制本发明的范围。
实施例12-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸异丙酯方法1向2-4-羟基-苯甲酰基)-苯甲酸(60g，0.25mol)中加入2-丙醇(1020ml)和浓H2SO4(25ml)反应混合物回流24小时。真空蒸馏除去2-丙醇。将残余物溶解在乙酸乙酯(1000ml)中，冷却并用碳酸氢钠溶液(2×500ml)和水(750ml)洗涤，干燥并浓缩得到70g异丙基酯，为黑色油状物，用二异丙基醚结晶，得到白色晶体，mp.95-97℃。
将异丙基酯(28.4g，0.1mol)、2-哌啶子基乙基氯(23.6g，0.16mol)、无水K2CO3(57g，0.38mol)和无水2-丁酮(1000ml)的混合物回流6小时。在真空下蒸馏除去溶剂，混合物倒入水(800ml)中并用乙酸乙酯(1.1l)萃取。先用1%KOH水溶液，接着用水(2×500ml)洗涤乙酸乙酯层，经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到36g黑色粘稠的油状物。进行快速层析分离(硅胶，CHCl3-EtoAc-CH3OH，74∶20∶6)，得到33g(83%)标题化合物，为粘稠的油状物，在约-6℃下用正戊烷结晶，得到白色晶体，mp.34-35℃。
另一种方法是，将异丙基酯(28.4g，0.1mol)、2-哌啶子基乙基基氯盐酸盐(25.9g，0.14mol)和无水K2CO3(38.7g，0.28mol)的混合物置于含有9.5ml水的2-丁酮(215ml)中回流3小时。按上述方法处理之后，得到34.5g标题化合物，产率87%。
IR(纯品)3000，2950，1720，1670，1600cm-1，NMR(CDCl3)δ7.92-8.02(m，1H)，7.19-7.7(m，5H)6.72-6.92(m，2H)，4.96(h，1H，5.8Hz)，4.12(t，2H，6.5Hz)，2.78(t，2H，6.5Hz)，2.40-2.60(m，4H)，1.40-1.75(m，6H)，1.06(d，6H，5.8Hz)方法Ⅱ将2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸(14.8g，0.04mol)、无水2-丙醇(300ml)和14.8ml浓H2SO4的混合物回流9小时。在真空下蒸馏除去2-丙醇。将碳酸钾水溶液加到冷却的反应混合物中，并用乙醚(3×200ml)萃取。乙醚层经水洗涤，干燥和浓缩后得到10.8g油状物。进行快速层析分离(硅胶，CHCl3-EtoAc-CH3OH，74∶20∶6)，得到6.7g(41%)标题化合物，为粘稠的油状物，其物理性质与实施例1中方法Ⅰ所得产品的性质相同。
方法Ⅲ在-5℃下，将2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸(23.4g，0.07mol)悬浮在2-丙醇(400ml)中。滴加亚硫酰氯(67ml)，滴加时间为30分钟，同时维持温度在-5至-10℃范围内。将澄清的溶液回流4.5小时，然后冷却。真空下蒸馏除去亚硫酰氯和2-丙醇。向反应混合物中加入饱和NaHCO3溶液直至PH值达8，用乙醚(250ml×3)萃取混合物。乙醚层经水(200ml×2)、盐水(200ml×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，浓缩后得到21.4g油状物粗品。进行快速层析分离(硅胶，CHCl3-EtoAc-MeoH)，得到12.1g(46%)标题化合物，为粘稠的油状物，其物理性质与实施例1中方法Ⅰ所得产品相同。
方法Ⅳ将2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸(1.05g，0.003mol)、20mlHMPA和NaoH(0.18g，0.0045mol)在1.5ml水中的溶液混合，并搅拌30分钟，加入2-溴丙烷(1.22ml，0.012mol)反应混合物在室温下搅拌24小时。然后将其倒入水(150ml)中并用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯层用水洗涤几次，经无水Na2SO4干燥并在真空中浓缩，得到1.3g粘稠油状物。进行快速层析分离(硅胶，CHCl3-CH3OH)，得到0.72g(62%)标题化合物，为油状物。其物理性质与实施例1中方法Ⅰ所得产品相同。
方法Ⅴ向2-溴丙烷(0.62g，5mmol)和季铵氯化物366(Aliquat336)(0.22g，0.54mmol)的混合物中加入干燥粉末状的2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸钾盐(2.15g，5.4mmol)。将烧瓶装上CaCl2防护管并振摇15分钟。然后装上回流冷凝器并将反应混合物于60℃(浴温)加热25小时。产物与25%EtoAc-石油醚(25ml)研磨并在中性氧化铝(40g，Ⅰ级)床上过滤，继而用25%EtoAc-石油醚(150ml)洗脱。浓缩合并在一起的滤液，得到1.5g(75%)标题化合物，为无色粘稠的油状物，其物理性质与实施例1中方法Ⅰ所得产品相同。
实施例22-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基〕-苯甲酸异丙酯盐酸盐将5.54g2-〔4-(2-哌啶子基-乙氧基)-苯甲酰基-苯甲酸异丙酯溶解在40ml无水CH2Cl4中。滴加HCl的乙醚溶液直至PH值在2和3之间。在蒸气浴上除去过量的HCl。真空下蒸馏除去溶剂，得到粘稠的棕色残余物，用EtoH-Et2O结晶，过滤收集得到的白色晶体标题化合物，并用2%EtOH-Et2O洗涤。
产率3.31g(58%)熔点110-112℃，C24H30ClNO4计算值C，65.37;H，7.09;N，3.18;Cl，8.04。分析值C，65.62;H，7.13;N，3.16;Cl，8.38。
权利要求
1.式Ⅲ化合物及其药用盐的制备方法，
式中，R4和R5可以相同或不同，它们代表C1-C4烷基，R6代表氢或C1-C4烷基，该方法包括将式Ⅳ化合物用带有合适离去基团的2-哌啶子基乙基衍生物处理，
式中R由式Ⅴ表示
式中R4-R6具有已知的定义。
2.权利要求1所述化合物的制备方法，该方法包括使式Ⅵ化合物用式Ⅷ化合物酯化，
式Ⅶ中R4-R6的定义如权利要求1或2所述。
3.权利要求2所述化合物的制备方法，该方法包括使式Ⅵ酸的羧酸盐与烷基卤反应。
4.权利要求1-3所述式Ⅲ化合物及其药用盐的制备方法，其中R4和R5可以相同或不同，它们代表CH3和C2H5，而R6代表H或CH3。
5.含有至少一个权利要求1所述化合物的药物制剂，此外可以有选择地含有普通的赋形剂和/或辅助剂。
6.权利要求5所述的药物制剂可用于口服。
7.应用权利要求1-4所述化合物作为具有解痉作用的制剂。
8.治疗痉挛的方法，该方法包括服用至少一个权利要求1-4所述的化合物。
9.权利要求7所述的药物制剂的制备方法，该方法包括将至少一个权利要求1-4所述化合物转变成适于服用的剂型，并且可以有选择地加入普通的赋形剂和/或辅助剂。
全文摘要
式III化合物具有解痉作用，式中R
文档编号C07D295/088GK1042146SQ8910803
公开日1990年5月16日 申请日期1989年10月20日 优先权日1988年10月21日
发明者斯瓦特·欠尔-泰姆比, 朱根·布路拜奇, 埃尔户森·诺曼海道海瓦拉, 班斯·拉尔, 那拉彦·苏辛德·普奈卡, 拉马努杰姆·拉吉高帕兰, 理查德·海尔木特·拉扑, 马丁·比凯尔 申请人:赫彻斯特股份公司