本发明属于大闸蟹人工养殖技术领域，具体涉及用于大闸蟹养殖净水系统的硝化细菌生物球及其制备方法。
背景技术：
天然湖泊围网养殖或者池塘养殖是目前国内主要的螃蟹养殖方法，应用非常广泛。但这种养殖方法对水体环境的要求较高，比如易受到气候灾害、天敌等影响。并且饲养过程中对螃蟹状态不易追踪，监管难，从而不能很好的保证存活率与螃蟹产品的质量。同时长期的养殖还会对天然水体造成严重污染，包括作为螃蟹食物而投放的人工饲料和激素，螃蟹的残饵粪便或死蟹生成的氨氮、亚硝酸盐与有机废物，为防止螃蟹感染细菌与寄生虫病而投放的抗生素或高锰酸钾等药品，都会引起严重的水质污染，打乱天然水体的生态平衡，造成周边地区长期的难以逆转的生态破坏。
基于这样的现状，开发人工水体养殖螃蟹将是未来螃蟹养殖的一个重要发展趋势。
技术实现要素：
技术问题：提供用于大闸蟹养殖净水系统的反硝化细菌生物球，以解决现有技术人工大闸蟹养殖的水体净化问题。
技术方案：一种用于大闸蟹养殖净水系统的反硝化细菌生物球，该生物球是以细菌纤维素修饰的tio2为载体，在其表面固定化反硝化细菌，所述的反硝化细菌为atcc14581。
其中，所述的细菌纤维素修饰的tio2为载体的制备方法如下：
(1)将纳米二氧化钛浸泡于50～100mm、ph5.0～6.0磷酸缓冲溶液中，超声清洗，再真空冷冻干燥；
(2)将1～100g步骤(1)得到的纳米二氧化钛浸泡在100～5000ml含有1.0％～10％(w/w)细菌纤维素的磷酸缓冲溶液中，10～40℃震荡1～100h，真空抽滤后，用蒸馏水洗涤，得到细菌纤维素改性二氧化钛载体。
其中，所述反硝化细菌的培养方法如下：
(1a)将反硝化细菌atcc14581在斜面培养基上活化；
(2a)将活化的反硝化细菌atcc14581接种到有机碳源脱氮液体培养基中培养，培养条件为：30～37℃，170～200rpm振荡培养24～36h。
步骤(1a)中，所述所述斜面培养基的配方如下：牛肉膏5.0g/l，蛋白胨10.0g/l，nacl5.0g/l，调ph7.2～7.4。
步骤(2a)中，所述有机碳源脱氮液体培养基的配方如下：kh2po40.7g/l，mgso4·7h2o0.5g/l，cacl2·2h2o0.5g/l，(nh4)2so40.5g/l，葡萄糖2.0g/l，naoh调ph7.2～7.4，溶剂为水。
其中，将反硝化细菌atcc14581固定在细菌纤维素修饰的tio2为载体表面的方法如下：将细菌纤维素改性tio2载体加入反硝化细菌atcc14581的培养基中得到在30～37℃，170～200rpm振荡培养1～8h，既得到反硝化细菌生物球。
有益效果：
本发明公开了一种用于大闸蟹养殖净水系统的反硝化细菌生物球，该生物球以细菌纤维素修饰的tio2为载体，并在其表面固定化反硝化细菌atcc14581，利用该生物球净化模拟大闸蟹养殖废水，其氨氮去除率达到63％以上，codcr去除率达到71％，能满足大闸蟹人工养殖水体净化需求，为大闸蟹实现大规模人工养殖奠定基础。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1：反硝化细菌的培养方法。
(1)将反硝化细菌atcc14581在斜面培养基上活化；所述所述斜面培养基的配方如下：牛肉膏5.0g/l，蛋白胨10.0g/l，nacl5.0g/l，调ph7.2～7.4。
(2)将活化的反硝化细菌atcc14581接种到有机碳源脱氮液体培养基中培养，培养条件为：30～37℃，170～200rpm振荡培养24～36h。所述有机碳源脱氮液体培养基的配方如下：kh2po40.7g/l，mgso4·7h2o0.5g/l，cacl2·2h2o0.5g/l，(nh4)2so40.5g/l，葡萄糖2.0g/l，naoh调ph7.2～7.4，溶剂为水。
实施例2：细菌纤维素修饰的tio2为载体的制备方法。
(1)将纳米二氧化钛浸泡于50～100mm、ph5.0～6.0磷酸缓冲溶液中，超声清洗，再真空冷冻干燥；
(2)将1～100g步骤(1)得到的纳米二氧化钛浸泡在100～5000ml含有1.0％～10％(w/w)细菌纤维素的磷酸缓冲溶液中，10～40℃震荡1～100h，真空抽滤后，用蒸馏水洗涤，得到细菌纤维素改性二氧化钛载体。
实施例3：反硝化细菌生物球的制备方法。
将反硝化细菌atcc14581固定在细菌纤维素修饰的tio2为载体表面的方法如下：将细菌纤维素改性tio2载体加入反硝化细菌atcc14581的培养基中得到在30～37℃，170～200rpm振荡培养1～8h，既得到反硝化细菌生物球。
实施例4：反硝化细菌生物球对模拟废水中氨氮的去除效果。
配制以葡萄糖为碳源、硫酸铵为氮源的模拟废水，初始codcr约2000mg/l，氨氮约100mg/l。加入5g反硝化细菌生物球，对照用同重量灭菌水代替，37℃，170rpm振荡培养，定时取样测定氨氮、硝酸氮、亚硝酸氮浓度的变化。结果见表1。
表1在葡萄糖为机碳源条件下对氨氮和codcr的去除
实施例5：反硝化细菌生物球对模拟废水中no2-、no3-的去除效果。
模拟废水培养基：kh2po40.7，mgso4·7h2o0.5，cacl2·2h2o0.5，kno3/nano2按需浓度配制，葡萄糖1.0，naoh调ph7.2～7.4。加入5g反硝化细菌生物球，对照加入5g灭菌水，经过48h检测，废水中no2-去除率达到73％，no3-去除率达到75％，具有较好的去除效果。
实施例6：
将实施例3制备的反硝化细菌生物球用于大闸蟹养殖水处理系统，以没有加入本发明的大闸蟹养殖水处理系统做对照，经过30天的循环周期，结果表面，加入反硝化细菌生物球的大闸蟹养殖水中氨氮-的含量比没有对照低50％～55％，no2-的含量比没有对照低60％～63％，no3-的含量比没有对照低45％～48％。