本发明涉及一种血红素铁制备方法，尤其涉及一种从动物血中提取血红素铁的新工艺。
背景技术：
：血红素铁是与血红蛋白或肌红蛋白结合的铁，能以卟啉铁的方式直接被肠粘膜上皮细胞吸收，不受植酸根等抑制因素的影响，且生物利用率高，不会产生任何消化道不适症状，是理想的生态补铁剂，被广泛的应用于食品保健品领域。血红素铁还是分析化学和生化研究的重要试剂，也是制备抗癌特效药——血卟啉衍生物的主要原料，因此血红素铁在医药、食品、化工、化妆品等行业得到广泛应用。血红素铁主要从动物血（猪血、牛血、羊血等）中提取，其制取方法很多，概括起来主要有有机溶剂抽提法、羧甲基纤维素吸附法和酶制取法。有机溶剂抽提法得到的血红素铁纯度高，提取率高，但是需要大量有机溶剂，而且存在有机溶剂污染，环境危害大，工艺复杂，生产成本高等问题；羧甲基纤维素吸附法制取的血红素铁性质稳定，没有有机溶剂污染，但是得到的是血红素铁和羧甲基纤维素的混合物，产品纯度低；酶法制取血红素铁是利用蛋白酶将血红蛋白中的珠蛋白水解成水溶性的氨基酸和多肽，血红素不溶于水，会沉降下来，经过纯化、干燥得到血红素肽。酶法制取血红素铁由于不用有机试剂，是最环保的一种方法，但是目前生产技术不太成熟，产品收得率低、纯度低，限制了它的工业化生产。因此，现有技术方案无论是在血红素铁制取工艺的简易性与可操作性方面还是在产品的纯度与安全性方面都存在不足之处。技术实现要素：本发明要解决的技术问题是提供一种从动物血中提取血红素铁的新工艺，该工艺以丰富的动物血为原料，应用现代生物酶解与生化分离技术，生产出具有高纯度、高铁含量、高收得率的血红素铁，工艺简单，成本低，易于实施。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案来实现的：一种从动物血中提取血红素铁的新工艺，包括以下步骤：（1）血球液制备：采集经抗凝处理的新鲜动物血，离心分离，收集血红细胞，得到血球液；（2）溶血：往血球液中加入其体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血60min，得到溶血液；（3）酶解：调节溶血液ph值至7.5-8.0，加入蛋白酶，在45-55℃温度下酶解2-4h，灭酶，得到酶解液；（4）分离：调整酶解液ph值至4.5-5.5，离心分离，分别收集沉淀和上清夜，上清液经喷雾干燥得到血红蛋白肽粉，沉淀备用；（5）抽提：往步骤（4）所得沉淀中加入其重量5-6倍的酸性丙酮，搅拌30min，6000r/min离心10min，收集上清液；（6）分离：调整步骤（5）所得上清液ph值至5.0，按质量体积比加入1%的醋酸钠，搅拌均匀后静置30min，6000r/min离心10min，收集沉淀；（7）干燥：将步骤（6）所得沉淀，用去离子水以及无水乙醇洗涤，在50℃-60℃下真空干燥，即得血红素铁。上述步骤（1）中所述的离心分离是采用管式离心机连续分离，离心转速大于15000r/min。上述步骤（3）所述的蛋白酶为碱性蛋白酶，酶活力为200000-220000u/ml，蛋白酶的添加量为血球液重量的0.05-0.3%。上述步骤（4）所述的离心分离是采用管式离心机分离，转速4000r/min，离心15min。上述步骤（5）所述的酸性丙酮为3%(v/v)盐酸丙酮溶液。通过实施上述技术方案，本发明具有如下的有益效果：（1））本发明的工艺将酶解法和传统的有机溶剂抽提法结合起来，工艺流程简单，生产效率高，成本低，适合规模化的工业生产。（2）本发明所提取的血红素铁纯度达到90%以上，铁含量达到5%以上，产品收得率高。具体实施方式下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的说明，但是本发明的实施方式并不局限于此实施例表示的范围。实施例1（1）血球液制备：采集经抗凝处理的新鲜猪血1000l，用管式离心机连续离心分离得到440l血球液和560l血浆液，收集血球液，血浆液经喷雾干燥制成血浆蛋白粉；（2）溶血：将血球液泵入反应罐中，加入450l的去离子水，不断搅60min，使血球破碎，搅拌速度为30r/min，制得溶血液890l；（3）酶解：继续搅拌下将溶血液加热升温至50℃，用naoh溶液调节其ph值至8.0，随后添加血球液重量0.1%的蛋白酶，搅拌下保温酶解4h后，85℃灭酶10分钟，得到酶解液；（4）离心：用naoh溶液调整酶解液ph值至4.5，4000r/min离心15分钟，分别收集沉淀和上清夜，上清液经喷雾干燥得到血红蛋白肽粉126公斤；（5）抽提：往步骤（4）所得沉淀中加入其重量5倍的酸性丙酮，搅拌30min，6000r/min离心10min，收集上清液；（6）分离：调整步骤（5）所得上清液ph值至5.0，加入1%的醋酸钠，搅拌均匀后静置30min，6000r/min离心10min，收集沉淀；（7）干燥：将步骤（6）所得沉淀，用去离子水以及无水乙醇洗涤，在50℃-60℃下真空干燥，得到血红素铁5.51公斤。实施例21）血球液制备：采集经抗凝处理的新鲜牦牛血1000l，用管式离心机连续离心分离得到480l血球液和520l血浆液，收集血球液，血浆液经喷雾干燥制成血浆蛋白粉；（2）溶血：将血球液泵入反应罐中，加入500l的去离子水，不断搅60min，使血球破碎，搅拌速度为30r/min，制得溶血液980l；（3）酶解：继续搅拌下将溶血液加热升温至55℃，用naoh溶液调节其ph值至7.5，随后添加血球液重量0.2%的蛋白酶，搅拌下保温酶解3h后，85℃灭酶10分钟，得到酶解液；（4）离心：用naoh溶液调整酶解液ph值至5.5，4000r/min离心15分钟，分别收集沉淀和上清夜，上清液经喷雾干燥得到血红蛋白肽粉135公斤；（5）抽提：往步骤（4）所得沉淀中加入其重量5倍的酸性丙酮，搅拌30min，6000r/min离心10min，收集上清液；（6）分离：调整步骤（5）所得上清液ph值至5.0，加入1%的醋酸钠，搅拌均匀后静置30min，6000r/min离心10min，收集沉淀；（7）干燥：将步骤（6）所得沉淀，用去离子水以及无水乙醇洗涤，在50℃-60℃下真空干燥，得到血红素铁5.73公斤。实施例31）血球液制备：采集经抗凝处理的新鲜鸡血1000l，用管式离心机连续离心分离得到460l血球液和440l血浆液，收集血球液，血浆液经喷雾干燥制成血浆蛋白粉；（2）溶血：将血球液泵入反应罐中，加入450l的去离子水，不断搅60min，使血球破碎，搅拌速度为30r/min，制得溶血液910l；（3）酶解：继续搅拌下将溶血液加热升温至45℃，用naoh溶液调节其ph值至8.0，随后添加血球液重量0.3%的蛋白酶，搅拌下保温酶解2h后，85℃灭酶10分钟，得到酶解液；（4）离心：用naoh溶液调整酶解液ph值至5.0，4000r/min离心15分钟，分别收集沉淀和上清夜，上清液经喷雾干燥得到血红蛋白肽粉122公斤；（5）抽提：往步骤（4）所得沉淀中加入其重量5倍的酸性丙酮，搅拌30min，6000r/min离心10min，收集上清液；（6）分离：调整步骤（5）所得上清液ph值至5.0，加入1%的醋酸钠，搅拌均匀后静置30min，6000r/min离心10min，收集沉淀；（7）干燥：将步骤（6）所得沉淀，用去离子水以及无水乙醇洗涤，在50℃-60℃下真空干燥，得到血红素铁4.78公斤。对上述实施例得到的产品分别进行血红素铁纯度、铁含量和收得率检测。血红素铁收得率=血红素铁的质量（公斤）/所用血球液的质量（公斤）×100%结果见表1：表1：血红素铁纯度、铁含量和收得率组别纯度（%）铁含量（%）收得率（%）实施例190.55.121.25实施例293.75.861.19实施例392.85.541.04当前第1页12