本发明涉及生物材料技术领域,尤其涉及一种蚕丝蛋白的提取方法。
背景技术:
蚕丝是最早被利用的天然蛋白质之一,人类利用蚕丝作为织物的历史已有五千多年.近年来蚕丝因其优异的力学性能和良好的生物相容性使它在生物医药等高额技术领域日益受到重视,丝素蛋白作为手术缝合线、组织工程以及药物缓释材料的报道也日益增多。
目前,蚕丝提取蛋白质过程中脱胶是一个非常重要的过程,但是目前脱胶的效率仍然十分不理想,严重影响蛋白质的纯度。
技术实现要素:
有鉴于此,本发明的目的是提供一种蚕丝蛋白的提取方法,从而解决了上述背景技术中提出的问题。
本发明通过以下技术手段解决上述技术问题:
蚕丝蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步骤,
s1:将蚕丝于碳酸氢钠的沸水中脱胶30-40min。然后放入冷冻冰箱中迅速降温至-10~-15℃;
s2:从冰箱中取出逐渐恢复到室温,然后用大量水洗涤以除尽丝胶,60~65℃烘干;
s3:取干燥好的脱胶蚕丝溶于饱和乙醇溶液中并使用截留分子量为12000~14000da的半透膜于去离子水中透析3d;
s4:透析完全的溶液经离心机离心,取上清液,加入适当的醇类变性剂经过冷冻干燥得到多孔膜;
s5:将多孔膜于乙醇溶液中进行不同程度的后处理,去离子水洗涤后冻干得到蚕丝蛋白的提取物。
进一步,在s1步骤中,碳酸氢钠的质量分数w=0.5%。
进一步,在s4步骤中,离心机转速为6000r/rain。
本发明的有益效果:本发明中的蚕丝蛋白的提取方法工艺简单环保,并且提出的蛋白纯度更高。
具体实施方式
以下将对本发明进行详细说明:
一种蚕丝蛋白的提取方法,制备方法包括以下步骤,
蚕丝蛋白的提取方法,包括以下步骤,
s1:将蚕丝5g于0.5%w的碳酸氢钠的沸水中脱胶30min。然后放入冷冻冰箱中迅速降温至-10~-15℃;
s2:从冰箱中取出逐渐恢复到室温,然后用大量水洗涤以除尽丝胶,60℃烘干;
s3:取干燥好的脱胶蚕丝溶于饱和乙醇溶液中并使用截留分子量为12000~14000da的半透膜于去离子水中透析3d;
s4:透析完全的溶液经离心机离心,转速为6000r/rain,取上清液,加入适当的醇类变性剂经过冷冻干燥得到多孔膜;
s5:将多孔膜于乙醇溶液中进行不同程度的后处理,去离子水洗涤后冻干得到蚕丝蛋白的提取物。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。