用于从FFPE组织切片中提取样品的脱蜡装置的制作方法

文档序号:15712005发布日期:2018-10-19 21:35阅读:357来源:国知局

本实用新型涉及分子生物学技术领域,尤其是涉及一种用于从FFPE组织切片中提取样品的脱蜡装置。



背景技术:

在医学领域中,遗传医学,个性化医学和基因靶向治疗已成为现代医学中有希望的新突破点。为此,需要将来自靶组织(FFPE组织切片中由专业人员确定和标记的需要进一步检测的特定区域)的核酸(DNA和RNA)分离出来,以用于临床医学或生物科学研究中的基因分析。此处的FFPE组织切片意指福尔马林固定石蜡包埋组织切片。

一般公认,从新鲜组织中提取的核酸在核酸质量方面更适合基因分析;然而,使用新鲜组织的主要限制是时间和可获得性,特别是从患者收集内脏器官组织。因此,在多数情况下可利用的组织以穿刺活检或手术中获得的经FFPE处理的组织切片为主。FFPE组织具有在室温下储存几十年仍可抽提其核酸(DNA和RNA)并且可用于基因检测的优点。已有许多报道证实了从FFPE组织中提取DNA和RNA的满意的可用性;提取的核酸常用于PCR、定量PCR、单核苷酸多态性(SNP)分析、SANGER测序和新一代基因测序。在可预见的未来,FFPE组织仍是临床实践中保存组织样品的首选。

FFPE组织中的核酸的提取相对于用新鲜组织更困难,是一个多步骤过程;包括FFPE组织脱蜡、干燥、刮取和核酸的抽提,每一步对于所提取的核酸的质量和产量都是重要的。目前市场上已有许多商业的FFPE组织的核酸提取试剂盒供应,然而对于固定于病理载玻片上的靶组织和面积较小的组织,特别是细小的穿刺活检(其尺寸可以小到几个mm2),却没有高效的方法和设备。人工的FFPE组织切片的核酸提取要有多个人工的步骤:首先要人工脱蜡多次,要在脱蜡罐中翻转,取出组织切片后在空气中自然干燥,在FFPE组织切片上加上核酸提取溶液,使用无菌手术刀片刮取组织并通过移液管收集标本。此人工的方法是目前生物医学实验室中的最常规的方法。很显然的,这些人工操作步骤耗费时间,手工强度大(手指和手腕的频繁运动),特别是当有中等或大数量的样本需要及时处理时困难会更大。此外,当将多个组织切片放置在用于脱蜡罐中时,存在组织交叉污染的风险。激光微分离技术是另一种用于在载玻片上分离FFPE组织的方法,激光微分离的优点是能够精确地分离微小的组织,但与常规手工法相比,应用成本太高,而且更耗时,每一张切片都要20分钟左右,这显然不能满足现实的大量样品处理的需要。此外还有几种市售的“自动的FFPE组织核酸抽提系统”,然而,FFPE组织样本的分离并不是自动化的一部分,要从组织蜡块上切取5-10片组织,用的组织量大,不适合穿刺活检的FFPE组织,而且不能在组织切片上选择性地分离靶组织区。因此上述人工的FFPE组织核酸提取方法仍然是生物医学实验室中最常用的技术。

因此,如何避免人工的FFPE组织切片核酸提取方法的缺点并且保留其优点,获得更好的工作效率,降低工作强度和达到更低的成本是目前本领域技术人员亟需解决的技术问题。



技术实现要素:

本实用新型的目的是提供一种用于从FFPE组织切片中提取样品的脱蜡装置,该脱蜡装置用于FFPE组织切片的脱蜡、排除脱蜡废液以及干燥FFPE组织切片上残留的脱蜡液,避免人工的FFPE组织切片核酸提取方法的缺点并且保留其优点,获得更好的工作效率,降低工作强度和达到更低的成本。

为解决上述的技术问题,本实用新型提供的技术方案为:

一种用于从FFPE组织切片中提取样品的脱蜡装置,包括底座、组织切片托盘、脱蜡液供液组件、振动组件、废液回收组件以及吹气干燥组件;

所述组织切片托盘上开设有若干个用于放置FFPE组织切片的沉槽,且每个所述沉槽中均设置有用于排液的排液孔;

所述脱蜡液供液组件包括用于向所述组织切片托盘上的沉槽中供给脱蜡液的龙头以及滑轨,所述滑轨设置于所述底座上,所述龙头设置于所述滑轨上且可沿所述滑轨往复滑动,所述龙头的出液口位于所述组织切片托盘上的沉槽的上方,所述龙头的进液口用于与脱蜡液的储液装置连通;

所述振动组件包括水平支撑板、振动电机以及若干个弹簧,所述水平支撑板通过若干个所述弹簧固定于所述底座上,若干个所述弹簧均匀地设置于所述水平支撑板的下表面上以用于支撑所述水平支撑板,所述振动电机设置于所述水平支撑板的下表面上;

所述组织切片托盘可拆卸地设置于所述水平支撑板的上表面上;

所述吹气干燥组件包括通风扇以及通风通道,所述通风扇设置于所述底座上,且所述通风通道的进风口与所述通风扇的排风口密封连通,且所述通风通道上设置有若干个出风口,所述通风通道上的若干个出风口与所述组织切片托盘上的若干个沉槽一一对应以向每一个所述沉槽中吹气进行干燥;

所述废液回收组件包括废液收集管道、真空泵以及密闭的废液收集瓶,所述废液收集管道的进液口与每个所述沉槽中的排液孔连通,且所述废液收集管道的出液口与所述废液收集瓶连通,所述真空泵的进气口通过抽气管道与所述废液收集瓶连通。

优选的,所述底座为仅有箱顶敞口且箱顶仅部分敞口的箱子;

所述箱子的且靠近所述箱子的后侧面箱壁的箱顶处设置有用于实现部分敞口的条状盖板,所述滑轨设置于所述条状盖板的上表面上;

所述水平支撑板位于所述箱子的上敞口处,若干个所述弹簧固定于所述箱子的左侧面箱壁以及右侧面箱壁的内壁面上;

所述条状盖板上设置有两长度方向端封堵的通风罩,所述通风罩与所述条状盖板围成的空腔构成通风通道,所述通风罩的横截面为圆弧形,所述条状盖板上开设有两个用于向所述通风罩内进风的进风口,所述通风扇固定于所述条状盖板的下表面上且正对应所述进风口,所述通风罩上设置有若干个出风口;

所述真空泵设置于所述箱子的底面箱壁的内壁面上,且所述废液收集管道为塑料软管。

优选的,所述水平支撑板上设置有嵌置孔,且所述组织切片托盘的下表面上设置有用于嵌置在所述嵌置孔中的凸台。

优选的,还包括遮风檐,所述遮风檐设置于所述通风罩上的出风口的上方以用于遮风。

优选的,还包括用于放置组织样品试管的试管架,所述试管架设置于所述底座上,所述试管架上设置有用于插放组织样品收集管的通孔。

优选的,每个所述沉槽的长度方向上的两端的内槽壁均为沿所述沉槽的长度方向延伸且向槽底倾斜的斜坡结构。

本申请提供了一种用于从FFPE组织切片中提取样品的脱蜡装置,包括底座、组织切片托盘、脱蜡液供液组件、振动组件、废液回收组件以及吹气干燥组件;该脱蜡装置具有脱蜡液供液功能、振动脱蜡功能、回收脱蜡废液功能以及吹气干燥功能,能够对放置于组织切片托盘中的FFPE组织切片依次进行提供脱蜡液浸没、振动脱蜡、回收脱蜡废液以及吹气干燥处理;本申请通过整合人工FFPE组织切片的核酸提取前处理的步骤,避免了人工处理方法的缺点,获得了更好的工作效率,降低了工作强度和达到了更低的成本,避免了脱蜡期间的组织交叉污染,且该脱蜡装置结构简单,使用方便,快速,价格低。

附图说明

图1为本实用新型的实施例提供的一种用于从FFPE组织切片中提取样品的脱蜡装置的立体结构示意图(图1中为了方便看到箱子内部的零部件,将箱子的前侧面箱壁拆掉了);

图2为与图1中的水平支撑板相搭配的组织切片托盘的结构示意图;

图3为图2中的组织切片托盘安装在图1中的脱蜡装置上后的右视剖面视图(沿箱子的纵向中心面剖面,且为了方便看图清楚,图3中将振动电机省略)。

图中:1箱子,2组织切片托盘,3沉槽,5滑轨,6龙头,7排液孔,8通风罩,9出风口,11水平支撑板,12嵌置孔,13振动电机,14弹簧,15通风扇,16凸台,17真空泵,19遮风檐,20条状盖板。

具体实施方式

为使本实用新型实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本实用新型实施例中的附图,对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本实用新型的一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本实用新型保护的范围。

在本实用新型的描述中,需要理解的是,术语“中心”、“轴向”、“径向”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本实用新型和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本实用新型的限制。

参照图1~3,图1为本实用新型的实施例提供的一种用于从FFPE组织切片中提取样品的脱蜡装置的立体结构示意图;图2为与图1中的水平支撑板相搭配的组织切片托盘的结构示意图;图3为图2中的组织切片托盘安装在图1中的脱蜡装置上后的右视剖面视图。

本申请提供了一种用于从FFPE组织切片中提取样品的脱蜡装置,包括底座、组织切片托盘2、脱蜡液供液组件、振动组件、废液回收组件以及吹气干燥组件;

所述组织切片托盘2上开设有若干个用于放置FFPE组织切片的沉槽3,且每个所述沉槽3中均设置有用于排液的排液孔7;

所述脱蜡液供液组件包括用于向所述组织切片托盘2上的沉槽3中供给脱蜡液的龙头6以及滑轨5,所述滑轨5设置于所述底座上,所述龙头6设置于所述滑轨5上且可沿所述滑轨5往复滑动,所述龙头6的出液口位于所述组织切片托盘2上的沉槽3的上方,所述龙头6的进液口用于与脱蜡液的储液装置连通;

所述振动组件包括水平支撑板11、振动电机13以及若干个弹簧14,所述水平支撑板11通过若干个所述弹簧14固定于所述底座上,若干个所述弹簧14均匀地设置于所述水平支撑板11的下表面上以用于支撑所述水平支撑板11,所述振动电机13设置于所述水平支撑板11的下表面上;

所述组织切片托盘2可拆卸地设置于所述水平支撑板11的上表面上;

所述吹气干燥组件包括通风扇15以及通风通道,所述通风扇15设置于所述底座上,且所述通风通道的进风口与所述通风扇15的排风口密封连通,且所述通风通道上设置有若干个出风口9,所述通风通道上的若干个出风口9与所述组织切片托盘2上的若干个沉槽3一一对应以向每一个所述沉槽3中吹气进行干燥;

所述废液回收组件包括废液收集管道、真空泵17以及密闭的废液收集瓶,所述废液收集管道的进液口与每个所述沉槽3中的排液孔7连通,且所述废液收集管道的出液口与所述废液收集瓶连通,所述真空泵17的进气口通过抽气管道与所述废液收集瓶连通。

在本申请中的一个实施例中,所述底座为仅有箱顶敞口且箱顶仅部分敞口的箱子1;

所述箱子1的且靠近所述箱子1的后侧面箱壁的箱顶处设置有用于实现部分敞口的条状盖板20,所述滑轨5设置于所述条状盖板20的上表面上;

所述水平支撑板11位于所述箱子1的上敞口处,若干个所述弹簧14固定于所述箱子1的左侧面箱壁以及右侧面箱壁的内壁面上;

所述条状盖板20上设置有两长度方向端封堵的通风罩8,所述通风罩8与所述条状盖板20围成的空腔构成通风通道,所述通风罩8的横截面为圆弧形,所述条状盖板20上开设有两个用于向所述通风罩8内进风的进风口,所述通风扇15固定于所述条状盖板20的下表面上且正对应所述进风口,所述通风罩8上设置有若干个出风口9;

所述真空泵17设置于所述箱子1的底面箱壁的内壁面上,且所述废液收集管道为塑料软管。

在本申请中的一个实施例中,所述水平支撑板11上设置有嵌置孔12,且所述组织切片托盘2的下表面上设置有用于嵌置在所述嵌置孔12中的凸台16,以在振动时保持组织切片托盘2的位置固定。

在本申请中的一个实施例中,上述脱蜡装置还包括遮风檐19,所述遮风檐19设置于所述通风罩8上的出风口9的上方以用于遮风,以阻挡由出风口9出来的气流向上扩散。

在本申请中的一个实施例中,上述脱蜡装置还包括用于放置组织样品试管的试管架,所述试管架设置于所述底座上,所述试管架上设置有用于插放组织样品收集管的通孔。

在本申请中的一个实施例中,每个所述沉槽3的长度方向上的两端的内槽壁均为沿所述沉槽3的长度方向延伸且向槽底倾斜的斜坡结构,以利于气流干燥时高速气流流通。

本申请还提供了一种用于从FFPE组织切片中提取样品的脱蜡方法,使用上述中的任意一项所述的脱蜡装置,且包括以下步骤:

1)将若干个FFPE组织切片一一对应地放在所述组织切片托盘2上的若干个沉槽3中;

2)通过沿所述滑轨5滑动所述龙头6且开关所述龙头6向步骤1)中得到的所述组织切片托盘2上的沉槽3中供给脱蜡液以将每一个沉槽3中的FFPE组织切片浸没;

3)将步骤2)中得到的所述组织切片托盘2可拆卸地设置于所述水平支撑板11的上表面上,然后开动振动电机13带动所述水平支撑板11及其上的所述组织切片托盘2与脱蜡液振动;

4)振动一定时间后关闭振动电机13,然后开动真空泵17对密闭的废液收集瓶进行抽真空,然后每一个所述沉槽3中的脱蜡废液在真空吸力的作用下流入所述废液收集瓶中;

5)开动所述通风扇15,然后所述通风通道上的若干个出风口9出风以向每一个所述沉槽3中吹气进行干燥,完成后得到脱蜡且干燥后的组织切片。

本申请中,组织切片托盘2放置在该水平支撑板11上,并且是可拆卸地移除的,当完成一批FFPE组织切片时,可以移除该组织切片托盘2,并更换第二批FFPE组织切片的组织切片托盘2。在完成组织样品的制取后,组织切片托盘2要从水平支撑板11上取下以进行清理或放入第二个新的组织切片托盘2。

本申请中,根据实用新型人的经验,通常当FFPE组织切片是未经染色的,10μm厚,5-200mm2面积,从FFPE组织切片中提取的核酸可用于三次以上的PCR或基因测序实验。但不同的组织类型以及FFPE组织切片制作的质量可影响到抽提出的核酸的质和量。当组织切片太薄或太小时,要用多张FFPE组织切片,FFPE组织切片的数量要据切片厚度和大小确定。一般只要是眼睛可见的组织,10μm厚,即使是针头穿刺活检的组织,最多用3-4张FFPE组织切片,提取的核酸就可达到基因检测的需要。

本申请中,至于脱蜡液的选择,二甲苯或Fisher HealthCare的SafeClear II已经通过本申请的测试,其他的脱蜡液待测。

本申请中,组织切片托盘2有多个用于放置FFPE组织切片的沉槽3,每个沉槽3用于放置一个FFPE组织切片,各FFPE组织切片彼此分隔。如果多张不同的组织切片不分开脱蜡,在脱蜡处理期间如有细小的或不可见的组织碎片脱落到脱蜡液中并吸附到其他的FFPE组织切片上,其中的微量核酸就可能被检测时的反应放大出来,造成交叉污染,影响检测结果;而本申请中彼此分隔的FFPE组织切片就不会交叉污染其他的FFPE组织切片。

本申请中,振动电机13为12V直流振动电机13,3100rpm旋转。有四个弹簧14安装在水平支撑板11的下表面上的四个角的位置,弹簧14用于支撑水平支撑板11并可加强水平支撑板11的振动。脱蜡液在高频振动的作用下能够更有效地与FFPE组织切片反应,这样可以加快脱蜡(人工脱蜡罐的方法费工费时,要求做3轮,每3分钟一轮的脱蜡程序,中间需要经常翻转脱蜡罐),通常用本脱蜡装置只需1分钟的振动就可达到满意的脱蜡效果。

本申请中,通风扇15为12V直流离心涡轮风扇。

本申请中未详尽描述的方法和装置均为现有技术,不再赘述。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本实用新型的方法及其核心思想。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本实用新型原理的前提下,还可以对本实用新型进行若干改进和修饰,这些改进和修饰也落入本实用新型权利要求的保护范围内。

对所公开的实施例的上述说明,使本领域专业技术人员能够实现或使用本实用新型。对于这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说是显而易见的,本文所定义的一般原理可以在不脱离本实用新型的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本实用新型将不会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽范围。

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