本发明涉及生物医药领域，具体地说是涉及一种从肝素钠粗品生产肝素钙的方法。
背景技术：
抗血栓药物包括肝素类、非肝素抗血小板凝集药物、酶类及其他四个小亚类，肝素类和酶类基本上以生化药物为主。其中肝素类占有最大的市场份额，生物活性肝素自被发现起在临床应用已有近百年历史，它是预防手术后血栓形成和治疗急性静脉血栓的首选药物。另外，肝素及其衍生物还广泛用于调血脂、抗炎、抗过敏以及免疫调节等，到目前它仍是最重要的生化药物之一，也是我国主要出口创汇药物之一。
在肝素类中又以肝素类药物占主导，低分子肝素钙和低分子肝素钠分别占有整个抗血栓类药物20％和7％的市场份额。由于肝素对ca2+离子的亲和力比对na+离子的亲和力强，在使用肝素钠时，往往会在各个不同的组织，特别是在血管和毛细管等部位引起钙的沉积，尤其是大剂量皮下注射，钙的螯合作用破坏邻近毛细血管的渗透力，因而产生瘀点和血肿现象。
肝素钙，即低分子肝素钙或低分子量肝素钙，其化学名称：硫酸氨基葡聚糖钙。据报道，肝素钠和肝素钙的生物活性是一致的。肝素钙在体内外均能延缓或阻止血液凝固，其抗凝机理复杂，对凝血的各个环节均有作用，包括抑制凝血酶原转变为凝血酶、抑制凝血酶活性、妨碍纤维蛋白原转变为纤维蛋白、防止血小板凝聚。肝素钙还可降低血脂，降低ldl和vldl，升高hdl，改变血液黏滞度，保护血管内皮细胞，预防动脉粥样硬化，促进血液流动，改善冠状动脉循环等作用。由于它是以钙盐形式在体内发挥作用，经皮下注射后，在血液循环中缓慢扩散，不会减少局部细胞间毛细血管的钙胶质，也不改变血管通透性，几乎无肝素钠皮下注射引起局部出血的副作用，适用于预防和治疗血栓-血栓栓塞性疾病以及血栓形成，肝素钙还具有较明显的抗肾素和抗醛固酮活性，因而也可用于人工肾、人工肝和体外循环使用。近年来的研究发现，肝素钙还有调血脂、抗炎、抗补体、抗过敏、免疫调节等多种非抗凝方面的药理作用。
专利cn105218704a提供了一种肝素钙的制备方法，该方法将肝素钠溶解，然后进行树脂吸附、洗涤、洗脱、醇沉、溶解、氧化、过滤、醇沉、溶解过滤、干燥得到肝素钙成品。该工艺在将产品从钠盐转为钙盐时，采用阴离子交换树脂，树脂活化要求高，需要大量用水，操作繁琐、所需生产成本高。
技术实现要素：
本发明为了克服现有技术的上述不足，提供了一种从肝素钠粗品生产肝素钙的方法，本发明采用以粗品肝素钠为原料，通过加入过氧化氢氧化除杂脱色的同时实现转钙，步骤简单，成本低；通过本发明的方法制备肝素钙，产品纯度高、活性高且质量稳定可控。
为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：
本发明提供了一种从肝素钠粗品生产肝素钙的方法，该方法包括以下步骤：
(1)盐解：取粗品肝素钠完全溶解于水中，然后取氯化钠固体溶解在粗品肝素钠水溶液中，用氢氧化钠调节溶液ph至8～9后，盐解15～30分钟后停止反应，加入氯化钙，升温83～90℃保温30min，冷却约60℃后过滤，得到粗品肝素钠盐解液；
(2)沉淀：用盐酸调节步骤(1)的粗品肝素钠盐解液ph至中性，加入乙醇后，混合液静置分层；
(3)溶解：弃去上清液，下层沉淀物加入氯化钙溶液完全溶解；
(4)氧化：用饱和氢氧化钙溶液调节步骤(3)获得的溶液ph至10～11后，室温下加入过氧化氢溶液，氧化20～24小时后停止反应，所述过氧化氢溶液体积为步骤(3)获得的溶液体积的1％～3％；
(5)沉淀：将步骤(4)中料液过滤，滤液用盐酸调节ph至中性，加入乙醇后，混合液静置分层；
(6)溶解：弃去上清液，下层沉淀物加入氯化钙溶液完全溶解；
(7)氧化：用饱和氢氧化钙溶液调节步骤(6)获得的溶液ph至10～11后，室温下加入过氧化氢溶液，氧化20～24小时后停止反应，得到氧化料液，所述过氧化氢溶液体积为步骤(6)获得的溶液体积的1％～3％；
(8)沉淀：将步骤(7)中料液过滤，滤液用盐酸调节ph至中性，加入乙醇后，混合液静置分层；
(9)溶解：弃去上清液，在下层沉淀物中加入纯化水溶解，得到溶解液；
(10)冻干：将步骤(9)得到的溶解液在-50℃～-5℃下冻干，得到肝素钙成品。
进一步地，在所述步骤(1)中，粗品肝素钠与水的质量份数比为1：(10～15)，粗品肝素钠与氯化钠的质量份数比为1:(0.2～0.4)，粗品肝素钠与氯化钙的质量份数比为1:(0.2～0.4)。
进一步地，所述步骤(1)的盐解反应是在40℃～45℃条件下进行的。
进一步地，所述步骤(2)中使用的乙醇体积是步骤(1)的粗品肝素钠盐解液体积的0.8～1.2倍。
进一步地，所述步骤(3)和步骤(6)中使用的氯化钙溶液浓度均为10％～25％，步骤(3)和步骤(6)中加入氯化钙溶液的质量为粗品肝素钠质量的18～22倍。
进一步地，所述步骤(4)和步骤(7)中过氧化氢溶液的浓度为均25％～35％。
进一步地，所述步骤(5)中使用乙醇体积是步骤(4)中所得料液体积的0.8～1.2倍。
进一步地，所述步骤(8)中使用乙醇体积是步骤(7)中所得料液体积的0.8～1.2倍。
本发明的有益效果在于：
与现有技术相比，本发明提供了一种从肝素钠粗品生产肝素钙的方法，本发明采用以粗品肝素钠为原料，通过加入过氧化氢氧化除杂脱色的同时实现转钙，克服了现有技术中阳离子交换树脂的钙钠置换对树脂活化要求高、需要大量用水、操作繁琐、生产成本高的问题。本发明的方法简化了生产步骤，减少杂质的引入，可以得到高纯度、高收率、高活性且质量稳定可控的肝素钙产品，产品质量高于现行的ep药典标准，本工艺操作简便，生产成本低，易于工业化大生产，具有重要应用前景。
附图说明
图1为实施例1的硫曲唑啉吗啉盐合成步骤图；
具体实施方式
展示一下实例来具体说明本发明的某些实施例，且不应解释为限制本发明的范围。对本发明公开的内容可以同时从材料、方法和反应条件进行改进，所有这些改进，均应落入本发明的的精神和范围之内。
实施例1：
本实施例中提供了一种从肝素钠粗品生产肝素钙的方法，该方法包括如下步骤：
1、称取10kg粗品肝素钠加入10倍的纯化水后，在50℃下搅拌2.0小时后溶解；然后在水溶液中加入2kg的氯化钠，用氢氧化钠调节ph至8.0后，升温至43℃，搅拌反应3小时，加入2kg氯化钙，升温85℃，保温30分钟，冷却至60℃，过滤，得到粗品肝素钠盐解液。
2、用盐酸调节步骤1的粗品肝素钠盐解液至ph＝7.0，按料液体积加入0.8倍的乙醇，混合液静置10小时后分层；
3、弃去上清液，下层沉淀物加入180千克的10％的氯化钙溶液溶解；
4、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤3中的溶液使ph至10.0后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为步骤3中的溶液体积的1％，搅拌反应24小时后停止反应；
5、将步骤4中的反应料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入0.8倍的乙醇，混合溶液静置10小时；
6、弃去步骤5中上清液，下层沉淀物加入180千克的25％的氯化钙溶液溶解；
7、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤6中获得溶液ph至10.0后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为料液体积的3％，搅拌反应22小时后停止反应；
8、将步骤7获得的料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入1.0倍的乙醇，静置5小时，弃去上清液，在沉淀中加入纯化水溶解，得到溶解液；
9、将步骤8得到的溶解液放入冻干机冻干，最终得到肝素钙成品4.45kg。
实施例2：
本实施例中提供了一种从肝素钠粗品生产肝素钙的方法，该方法包括如下步骤：
1、称取10kg粗品肝素钠加入10倍的纯化水后，在50℃下搅拌2.0小时后溶解；然后在水溶液中加入2kg的氯化钠，用氢氧化钠调节ph至8.2后，搅拌反应3小时，加入2.0kg氯化钙，升温至83℃，保温反应30分钟，降至60℃，过滤，得到粗品肝素钠盐解液；
2、用盐酸调节步骤1的粗品肝素钠盐解液至ph＝7.0，按料液体积加入0.8倍的乙醇，混合液静置10小时后分层；
3、弃去上清液，下层沉淀物加入18倍的15％的氯化钙溶液溶解；
4、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤3中的溶液使ph至10.0后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为步骤3中的溶液体积的2％，搅拌反应22小时后停止反应。
5、将步骤4中的反应料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入0.8倍的乙醇，混合溶液静置10小时；
6、弃去步骤5中上清液，下层沉淀物加入180千克的20％的氯化钙溶液溶解。
7、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤6中获得溶液ph至10.5后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为料液体积的3％，搅拌反应20小时后停止反应；
8、将步骤7获得的料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入1.0倍的乙醇，静置8小时，弃去上清液，在沉淀中加入纯化水溶解，得到溶解液；
9、将步骤8得到的溶解液放入冻干机冻干，最终得到肝素钙成品4.38kg。
实施例3：
本实施例中提供了一种从肝素钠粗品生产肝素钙的方法，该方法包括如下步骤：
1、称取10kg粗品肝素钠加入12倍的纯化水后，在55℃下搅拌1.5小时后溶解；然后在水溶液中加入3kg的氯化钠，用氢氧化钠调节ph至8.5后，搅拌反应2小时，加入3kg氯化钙，升温至88℃，搅拌反应30分钟，降至60℃，过滤，得到粗品肝素钠盐解液；
2、用盐酸调节步骤1的粗品肝素钠盐解液至ph＝7.0，按料液体积加入1.0倍的乙醇，混合液静置10小时后分层；
3、弃去上清液，下层沉淀物加入200千克的15％的氯化钙溶液溶解；
4、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤3中的溶液使ph至10.5后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为步骤3中的溶液体积的2％，搅拌反应22小时后停止反应。
5、将步骤4中的反应料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入1.0倍的乙醇，混合溶液静置8小时；
6、弃去步骤5中上清液，下层沉淀物加入200千克的15％的氯化钙溶液溶解。
7、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤6中获得溶液ph至10.7后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为料液体积的2％，搅拌反应24小时后停止反应；
8、将步骤7获得的料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入0.8倍的乙醇，静置5小时，弃去上清液，在沉淀中加入纯化水溶解，得到溶解液；
9、将步骤8得到的溶解液放入冻干机冻干，最终得到肝素钙成品4.34kg。
实施例4：
本实施例中提供了一种从肝素钠粗品生产肝素钙的方法，该方法包括如下步骤：
1、称取10kg粗品肝素钠加入15倍的纯化水后，在60℃下搅拌1.5小时后溶解；降温42℃然后在水溶液中加入4kg的氯化钠，用氢氧化钠调节ph至8.7后，保温反应2小时后，加入4kg氯化钙，升温至90℃，保温反应30分钟，降至60℃，过滤，得到粗品肝素钠盐解液；
2、用盐酸调节步骤1的粗品肝素钠盐解液至ph＝7.0，按料液体积加入1.0倍的乙醇，混合液静置8小时后分层；
3、弃去上清液，下层沉淀物加入200千克的20％的氯化钙溶液溶解；
4、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤3中的溶液使ph至11后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为步骤3中的溶液体积的3％，搅拌反应20小时后停止反应。
5、将步骤4中的反应料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入1.2倍的乙醇，混合溶液静置5小时；
6、弃去步骤5中上清液，下层沉淀物加入200千克的15％的氯化钙溶液溶解。
7、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤6中获得溶液ph至10.4后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为料液体积的2％，搅拌反应20小时后停止反应；
8、将步骤7获得的料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入0.8倍的乙醇，静置10小时，弃去上清液，在沉淀中加入纯化水溶解，得到溶解液；
9、将步骤8得到的溶解液放入冻干机冻干，最终得到肝素钙成品4.41kg。
实施例5：
本实施例中提供了一种从肝素钠粗品生产肝素钙的方法，该方法包括如下步骤：
1、称取10kg粗品肝素钠加入15倍的纯化水后，在60℃下搅拌1.0小时后溶解；控温40℃，在水溶液中加入4kg的氯化钠，用氢氧化钠调节ph至9.0后，搅拌反应2.5小时，加入4kg氯化钙，升温85℃，保温反应30分钟，降温60℃，过滤，得到粗品肝素钠盐解液；
2、用盐酸调节步骤1的粗品肝素钠盐解液至ph＝7.0，按料液体积加入1.2倍的乙醇，混合液静置5小时后分层；
3、弃去上清液，下层沉淀物加入220千克的25％的氯化钙溶液溶解；
4、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤3中的溶液使ph至11后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为步骤3中的溶液体积的3％，搅拌反应20小时后停止反应。
5、将步骤4中的反应料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入1.2倍的乙醇，混合溶液静置5小时；
6、弃去步骤5中上清液，下层沉淀物加入220千克的10％的氯化钙溶液溶解。
7、用饱和氢氧化钙溶液调节步骤6中获得溶液ph至11后，室温下加入30％的过氧化氢溶液，体积为料液体积的1％，搅拌反应23小时后停止反应；
8、将步骤7获得的料液过滤，滤液用盐酸调节ph至7.0，按料液体积加入1.2倍的乙醇，静置5小时，弃去上清液，在沉淀中加入纯化水溶解，得到溶解液；
9、将步骤8得到的溶解液放入冻干机冻干，最终得到肝素钙成品4.45kg。
实施例6：产品检测
将实施例1-5制备的肝素钙进行检测，与15版中国药典相比，检测结果如下表：
表1产品检测结果
由上表可知，利用本发明的方法制备的肝素钙产品质量高于现行的ep药典标准。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。