本发明属于生物医药
技术领域：
。具体涉及一种奥拉西坦的制备方法。
背景技术：
：奥拉西坦(oxiracetam)，化学名为4-羟基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺，是一种羟基氨基丁酸(gabob)的环状衍生物，为新一代脑代谢改善药，可促进磷酰胆碱和磷酰乙醇胺合成，促进脑代谢，透过血脑屏障对特异性中枢神经道路有刺激作用，改善智力和记忆，临床上主要适用于治疗健忘症、老年性痴呆、血管性痴呆等。其结构式如下：奥拉西坦由意大利史克比切姆于1974合成，并于1987年在意大利上市。国内奥拉西坦自1998年上市以来得到了广泛的应用，胶囊剂、注射剂(小水针)等品种。已公开的制备方法较多，例如，us4824861，jp62026267，us5276164，us4118396，化学工程与装备，2010，(12)：71；四川生理科学杂志，2010，32(3)：108等等。申请号为201410321549.0的中国发明专利公开了一种奥拉西坦化合物及其药物组合物。该发明制得的奥拉西坦化合物使用cu-kα射线测量得到的x-射线粉末衍射在2θ为12.2°、14.4°、18.1°、19.6°、20.0°、21.8°、22.7°、24.6°、25.1°处显示有特征峰。该化合物制备过程中使用了高压设备，并且使用对环境不友好的甲苯作为溶剂进行结晶，工艺比较复杂。申请号为201310328754.5的中国发明专利公开了一种奥拉西坦晶型及其制备方法。该发明以水溶液为溶剂对奥拉西坦进行溶解并浓缩后降温结晶，避免使用了有机溶剂。但该发明在结晶过程中使用了搅拌析晶的方式，由于桨叶对溶液中晶体成核的影响，会造成晶粒过小、结构不稳定等缺陷。因此，研究开发新的奥拉西坦的制备方法，具有重要意义。技术实现要素：基于上述原因，申请人经过多次创造性试验，得到一种新的奥拉西坦的制备方法，该方法以奥拉西坦粗品为原料，采用梯度降温方法以及加入l-谷氨酸的制备方法，得到奥拉西坦，本发明得到的奥拉西坦杂质和含量变化小，稳定性高，具有很好的流动性，可以作为注射剂原料使用。本发明提供的制备方法所针对的奥拉西坦粗品是目前已知的合成方法所制得的奥拉西坦粗品或者市售的或者进口的奥拉西坦粗品，以下统称为奥拉西坦粗品，一般而言，奥拉西坦粗品的纯度低于98％，甚至低于92％。本发明人在仔细分析现有技术的基础上，通过大量创造性筛选实验，发现上述文献以及一般的纯化分离方法难于高产率地获得高纯度的奥拉西坦，而其他各种分离纯化方法以及多种条件参数又可能存在多种多样的组合性和不可预测性。本发明人经过长期认真的研究，经过组合应用特定的方法并优化参数后，意外发现了一种包括如下处理步骤的奥拉西坦的方法。具体而言，本发明提供了：一种奥拉西坦的制备方法：奥拉西坦粗品，在充氮气的水中，加热至溶解后，通过梯度降温，得到的固体，加入有机溶剂，过滤，滤液回收有机溶剂后浓缩，得到奥拉西坦。所述的有机溶剂选自：二氯甲烷、三氯甲烷、氯仿、异丙醇、丙酮。所述的有机溶剂为二氯甲烷与丙酮。所述的有机溶剂为二氯甲烷与丙酮重量比为：1-5:1。所述的有机溶剂为二氯甲烷与丙酮重量比为：1-3:1。所述的奥拉西坦的制备方法：取奥拉西坦粗品，加入注射用水，通入氮气后，加热至68-75℃，奥拉西坦完全溶解，将溶液冷却至35-50℃，加入l-谷氨酸，保持溶液温度35-50℃，静置80-120分钟，将该混悬液的温度冷却至15-25℃，静置50-100分钟后，将该混悬液冷却至5-10℃，静置50-100分钟，然后过滤，过滤后固体加入有机溶剂中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦。一种奥拉西坦的制备方法：取奥拉西坦粗品，加入注射用水，通入氮气后，加热至70℃，奥拉西坦完全溶解，将溶液冷却至45℃，加入l-谷氨酸，保持溶液温度45℃，静置100分钟，将该混悬液的温度冷却至20℃，静置75分钟后，将该混悬液冷却至5-10℃，静置75分钟，然后过滤，过滤后固体加入有机溶剂中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦。所述l-谷氨酸的重量是奥拉西坦重量的0.01-0.03倍。所述的有机溶剂的重量是奥拉西坦重量的1.5-3.5倍。本发明制备方法得到奥拉西坦经过的粉末x射线衍射图中具有以下特征峰为：9.2°±0.1°、16.24°±0.1°、16.63°±0.1°、16.55°±0.1°和18.20°±0.1°。本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果：本发明方法获得的奥拉西坦纯度高，按高效液相色谱法测定奥拉西坦纯度时，发现基本上只有一个色谱峰，奥拉西坦的纯度不低于99.6％。与现有技术相比，本发明的奥拉西坦化合物具有更好的稳定性，具有更好的粉体流动性。具体实施方式以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。本发明中所用的奥拉西坦粗品购自石药集团欧意药业有限公司，购买日期为2017年10月11日，本发明奥拉西坦粗品的含量为96.3％，单个最大杂质0.29，总杂质1.20％。试验例1工艺筛选研究冷热循环试验试验方法：取对比例1～4及实施例2制得的奥拉西坦各1g，加入注射用水10ml，加入磷酸二氢钠0.2g，1～10℃放置2天，再于40℃放置两天为1次循环，循环三次，用hplc测定含量结果如表1所示。对比例1：取奥拉西坦粗品20g，加入50ml注射用水中，加热至70℃，溶解完全，降温至冷却至8℃，静置75分钟，然后过滤，过滤后固体加入有机溶剂中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦。对比例2：取奥拉西坦粗品20g，加入注射用水50ml，通入氮气后，加热至68℃，奥拉西坦完全溶解，将溶液冷却至35℃，保持溶液温度35℃，静置80分钟，将该混悬液的温度冷却至15℃，静置50分钟后，将该混悬液冷却至5℃，静置50分钟，然后过滤，过滤后固体加入丙酮30g中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦。对比例3：取奥拉西坦粗品20g，加入注射用水50ml，通入氮气后，加热至68℃，奥拉西坦完全溶解，将溶液冷却至35℃，保持溶液温度35℃，静置80分钟，将该混悬液的温度冷却至15℃，静置50分钟后，将该混悬液冷却至5℃，静置50分钟，然后过滤，过滤后固体加入二氯甲烷30g中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦。对比例4：取奥拉西坦粗品20g，加入注射用水50ml，通入氮气后，加热至68℃，奥拉西坦完全溶解，将溶液冷却至35℃，保持溶液温度35℃，静置80分钟，将该混悬液的温度冷却至15℃，静置50分钟后，将该混悬液冷却至5℃，静置50分钟，然后过滤，过滤后固体加入二氯甲烷与丙酮的混合物(30g，质量比5:1)中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦。【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2015年版二部附录vd)测定。色谱条件与系统适用性试验用用氰基键合硅胶为填充剂；以甲醇-水溶液(40:60)为流动相；检测波长为210nm。；精密称取奥拉西坦原料药约40mg，置10ml量瓶中，加去离子水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取1.0ml，置100ml量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀，精密量取1.0ml，置10ml量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取对照溶液20μl，注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分峰高为满量程的10％，再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍以上。【有关物质】称取奥拉西坦适量，用流动相(0.01mol/l磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节ph至3.0)制成约1.0mg/ml的溶液作为供试品溶液；精密量取供试品适量，用流动相逐步稀释成0.01mg/ml的溶液，作为对照溶液。在上述确定的色谱条件下，分别精密量取上述溶液各20μl，注入色谱仪，记录色谱图，用主成分自身对照法测定杂质含量。表1冷热循环试验结果试验结论：如上表所示，相对于对比例的方法，采用本发明的方法制备的奥拉西坦经过冷热循环试验后，含量、单个最大杂质以及总杂质变化范围小，而对比例方法得到的奥拉西坦含量显著降低、单个最大杂质以及总杂质显著增加，充分说明本发明制备得到的奥拉西坦具有更好的稳定性，适合药物制剂的制造及长期储存。制备实施例实施例1取奥拉西坦粗品20g，加入注射用水50ml，通入氮气后，加热至68℃，奥拉西坦完全溶解，将溶液冷却至35℃，加入l-谷氨酸0.2g，保持溶液温度35℃，静置80分钟，将该混悬液的温度冷却至15℃，静置50分钟后，将该混悬液冷却至5℃，静置50分钟，然后过滤，过滤后固体加入二氯甲烷与丙酮的混合物(30g，质量比5:1)中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦19.22g。实施例2取奥拉西坦粗品20g，加入注射用水50ml，通入氮气后，加热至70℃，奥拉西坦完全溶解，将溶液冷却至45℃，加入l-谷氨酸0.4g，保持溶液温度45℃，静置100分钟，将该混悬液的温度冷却至20℃，静置75分钟后，将该混悬液冷却至5-10℃，静置75分钟，然后过滤，过滤后固体加入二氯甲烷与丙酮的混合物(60g，质量比3:1)中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦19.27g。实施例3取奥拉西坦粗品20g，加入注射用水50ml，通入氮气后，加热至72℃，奥拉西坦完全溶解，将溶液冷却至40℃，加入l-谷氨酸0.5g，保持溶液温度45℃，静置90分钟，将该混悬液的温度冷却至23℃，静置90分钟后，将该混悬液冷却至8℃，静置75分钟，然后过滤，过滤后固体加入二氯甲烷与丙酮的混合物(50g，质量比1:1)中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦19.21g。实施例4取奥拉西坦粗品20g，加入注射用水50ml，通入氮气后，加热至75℃，奥拉西坦完全溶解，将溶液冷却至50℃，加入l-谷氨酸0.6g，保持溶液温度50℃，静置120分钟，将该混悬液的温度冷却至25℃，静置100分钟后，将该混悬液冷却至10℃，静置100分钟，然后过滤，过滤后固体加入二氯甲烷与丙酮的混合物(70g，重量比2:1)中，过滤，滤液真空浓缩干燥，得到奥拉西坦19.22g。将上述实施例制备方法得到的奥拉西坦，按照中国药典2015年版二部中谷氨酸含量测定方法，未检测到奥拉西坦中含有谷氨酸。上述制备方法中，即使在奥拉西坦沉淀过程中有谷氨酸被裹挟(谷氨酸易溶于水)，但其不溶于二氯甲烷、丙酮、乙醇等有机溶剂，因此，本发明制备方法得到的奥拉西坦中不含有l-谷氨酸。测试例1粉末x-射线衍射取实施例2样品进行粉末x-射线衍射测试方法：使用brukerd8advance粉末x-射线衍射仪，用cukα照射以bragg-brentano反射几何学进行。一般而言，该2θ值在±0.1-0.2°误差范围内是精确的。由于晶体不同的优选定向，相同结晶形式的不同样品的相对峰强度可以显著不同。除了使用轻微压力以获得平滑表面以外，该样品的制备不需要任何特殊处理。使用0.5mm或0.1mm深度和12mm孔直径的单晶硅样品杯。电子管电压和电流分别为40kv和40ma。该x-射线衍射仪装有lynxeye检测器。以3°的检测窗使用可变的散射光。步长为0.02°2θ，步进时间为37秒。在检测过程中，样品以0.5rps旋转。测试结果：使用cukα1辐射获得的奥拉西坦的x-射线粉末衍射图。在5-40°2θ范围内，以反射方式测定衍射图。其特征为在9.2、16.24、16.55、16.63和18.20°(2θ±0.1°)的xrpd反射。测试例2实施例奥拉西坦的粉体流动性测试粉体的流动性无法用单一的特性值来表达，常用休止角表示。休止角指在重力场中，粒子在粉体堆积层的自由斜面上滑动时所受重力和粒子之间摩擦力达到平衡而处于静止状态下测得的最大角。一般认为休止角≤30°时流动性好，休止角≤40°时可以满足生产过程中的流动性需求。使用注入法测定休止角，将粉体从漏斗上方慢慢加入，从漏斗底部漏出的物料在水平面上形成圆锥状堆积体的倾斜角。将本发明实施例1～4制得的奥拉西坦化合物的流动性与市售奥拉西坦进行比较，所得试验结果见表2。表2奥拉西坦样品的休止角测试结果组别休止角(°)实施例129.7实施例228.7实施例331.3实施例430.4对比例41.3试验结论：由表2可知，与市售品奥拉西坦相比，本发明提供的奥拉西坦化合物具有更小的休止角，具有更好的粉体流动性。测试例3粒度分布测试采用malvernmastersizers仪器，通过激光衍射测定得到的奥拉西坦的粒度。表3中给出粒度分布：表3奥拉西坦样品的粒度测试结果组别d10d50d90实施例114μm122μm287μm实施例213μm124μm286μm实施例313μm123μm289μm实施例414μm122μm287μm测试例4稳定性试验对本发明实施例2的奥拉西坦的化学稳定性进行了研究，考察条件为高温(60℃±2℃)、强光照射(4500lx±500lx)，高湿(92.5％，rh)考察指标为含量及有关物质。表4奥拉西坦样品的稳定性试验测试结果试验结论：在强光、高温、高湿条件下从0、5天、10天，有关物质、含量没有改变，说明化学稳定性良好，适合药物制剂的制造及长期储存。当前第1页12