本发明属于生物技术领域，具体涉及一种连续制备氨基酸菌种的方法。
背景技术：
目前氨基酸发酵接种方式一般都采用分批接种，即每个批次的使用一批种子，不同批次之间的种子存在差异，这就影响了氨基酸发酵的结果。接种方式大都采用种子摇瓶在火焰保护下倒入种子罐，存在操作复杂和易染菌的问题。
技术实现要素：
基于此对接种方式进行改进，本发明提供一种连续制备氨基酸菌种的方法。提高接种效率，维持菌种的稳定性，减轻准备菌种带来的工作量，同时避免了以往接种方式中操作复杂及存在染菌的风险。
本发明通过以下技术方案来实现的：
连续制备氨基酸菌种的方法包括以下装置：种子培养的不锈钢罐、不锈钢移种管道、快速连接头等。方法如下：种子培养在不锈钢罐（种子罐）中进行，维持恒定温度、ph、风量，通过连续流加无菌培养基保持种子od在0.1-0.2之间（10倍、600nm），培养体积维持在1/2体积。根据氨基酸种子特性，通过连续不断地向种子罐中加入无菌培养基，控制培养基的流加速率，通过控制培养条件，维持菌种的生长活性，同时保持罐内液位。一级种子罐接种时采用压力差将种子液从不锈钢培养罐中压入到发酵一级种子罐中，每个一级种子罐对应一条接种管道，种子罐的移种管道与发酵一级种子罐接种口通过快速连接头进行卡套式快速连接，并通过蒸汽进行管道灭菌，待调节发酵一级种子罐的ph和降压后，进行移种。移种时根据移种量，固定移种时间，切换不同罐之间可以实现连续移种。移种结束后，对结束后的一级罐所对应的移种管道进行蒸汽保护，移种管道末端蒸汽一直蒸汽小排保护。
本发明的有益效果在于：采用此种方式可以提高接种效率，维持菌种的稳定性，减轻准备菌种带来的工作量，同时避免了以往接种方式中操作复杂及存在染菌的风险。
具体实施方式
实施例1:
本实施例用于说明本发明提供的连续接种的方法。20l不锈钢罐作为培养种子的罐，相关配套设施与一般的不锈钢发酵罐相同，此罐培养基采用氨基酸已知的常规培养基，蒸汽自动灭菌，同时准备流加已经连消灭好的无菌培养基，流加培养基与底料培养基相同，采用摇瓶压差接种；接种后在恒定温度、ph、风量条件下开始培养，培养体积维持在10l，当od达到0.1时（10倍、600nm），开始流加培养基，流加速度与排料速度尽量控制在一致，使od稳定在0.1-0.2内（10倍、600nm），保证菌体的活力不衰退。
实施例2:
本实施例一级种子罐有6个，其中一个移种时，种子罐的移种管道与发酵一级种子罐接种口通过快速连接头进行卡套式快速连接，并通过蒸汽进行管道灭菌，灭菌时间30-40min，优选30min，使用一级种子罐中无菌空气对移种管道进行降温，调节发酵一级种子罐的ph和降压后，进行移种。在种子罐一定的排料速度下，根据移种量，移种固定时间5小时，每小时移种量300ml，切换移种到另一个提前准备好的一级种子罐，可实现不同一级罐的接种，6个一级罐依次循环接种。对已经移种结束后的一级罐，将该一级种子罐对应的快速连接头取下，对发酵一级种子罐的接种口进行蒸汽保护，关闭种子罐移种阀门，对移种管道进行蒸汽保护，移种管道末端蒸汽一直蒸汽小排保护。该连续接种的方法提高接种效率，维持菌种的稳定性，减轻准备菌种带来的工作量，同时避免了以往接种方式中操作复杂及存在染菌的风险。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其效物界定。