本发明涉及真菌检测领域，尤其涉及一种披碱草茎秆中内生真菌检测方法。
背景技术：
披碱草，拉丁学名：elymusdahuricusturcz.禾本科、披碱草属的多年生草本植物，秆疏丛，直立，基部膝曲。叶鞘光滑无毛；茎秆扁平，稀可内卷，上面粗糙，下面光滑，有时呈粉绿色，穗状花序直立，较紧密，穗轴边缘具小纤毛，小穗绿色，成熟后变为草黄色，颖披针形或线状披针形，外稃披针形，全部密生短小糙毛，先端延伸成芒，芒粗糙，成熟后向外展开；内稃与外稃等长，先端截平，脊上具纤毛，至基部渐不明显，脊间被稀少短毛。
目前，已经在披碱草中发现内生真菌，但对其茎秆还没有具体的内生真菌检测方法。
技术实现要素：
发明目的：针对现有技术的不足与缺陷，本发明提供一种检测准确性高、操作简单、对茎表皮和茎髓分别进行内生真菌检测的披碱草茎秆中内生真菌检测方法。
技术方案：本发明所述的披碱草茎秆中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，
(1)将披碱草植株的茎秆完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色茎秆部分；
(2)将步骤(1)获得的茎秆部分放入70％酒精溶液中清洗19至42秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗7至10秒，使用清水清洗2次后晾干待用；
(3)将步骤(2)获得的茎秆剪成0.8至2.2厘米的小段，并将边缘剪除，留取茎秆中间小块；
(4)将步骤(3)获得的茎秆小块放入染色剂溶液中浸泡18至26小时；
(5)将步骤(4)获得的茎秆小块放入玻璃皿中，将茎秆表皮与茎髓分离；
(6)将盖玻片分别放置在茎秆表皮和茎髓上，挤压2至4次，将茎秆表皮压平，使茎髓均匀铺开；
(7)对步骤(6)获得的披碱草茎秆样品进行检测并获得检测结果。
其中，所述的步骤(3)通过高温消毒后的剪刀对茎秆进行剪切。
其中，所述的步骤(5)中的玻璃皿为直径9.5厘米的玻璃皿。
其中，所述的步骤(6)中的盖玻片为边长1.6厘米的正方形盖玻片。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有以下显著优点：本发明披碱草茎秆中内生真菌检测方法的检测准确性高、操作简单、对茎表皮和茎髓分别进行内生真菌检测。
具体实施方式
实施例1：
本实施例的披碱草茎秆中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，
(1)将披碱草植株的茎秆完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色茎秆部分；
(2)将步骤(1)获得的茎秆部分放入70％酒精溶液中清洗20秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗8秒，使用清水清洗2次后晾干待用；
(3)将步骤(2)获得的茎秆使用通过高温消毒后的剪刀剪成1厘米的小段，并将边缘剪除，留取茎秆中间小块；
(4)将步骤(3)获得的茎秆小块放入染色剂溶液中浸泡20小时；
(5)将步骤(4)获得的茎秆小块放入直径9.5厘米的玻璃皿中，将茎秆表皮与茎髓分离；
(6)将边长1.6厘米的正方形盖玻片分别放置在茎秆表皮和茎髓上，挤压2次，将茎秆表皮压平，使茎髓均匀铺开；
(7)对步骤(6)获得的披碱草茎秆样品进行检测并获得检测结果。
实施例2：
本实施例的披碱草茎秆中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，
(1)将披碱草植株的茎秆完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色茎秆部分；
(2)将步骤(1)获得的茎秆部分放入70％酒精溶液中清洗40秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗10秒，使用清水清洗2次后晾干待用；
(3)将步骤(2)获得的茎秆通过高温消毒后的剪刀剪成2厘米的小段，并将边缘剪除，留取茎秆中间小块；
(4)将步骤(3)获得的茎秆小块放入染色剂溶液中浸泡25小时；
(5)将步骤(4)获得的茎秆小块放入直径9.5厘米的玻璃皿中，将茎秆表皮与茎髓分离；
(6)将边长1.6厘米的正方形盖玻片分别放置在茎秆表皮和茎髓上，挤压3次，将茎秆表皮压平，使茎髓均匀铺开；
(7)对步骤(6)获得的披碱草茎秆样品进行检测并获得检测结果。
实施例3：
披碱草茎秆中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，
(1)将披碱草植株的茎秆完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色茎秆部分；
(2)将步骤(1)获得的茎秆部分放入70％酒精溶液中清洗30秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗9秒，使用清水清洗2次后晾干待用；
(3)将步骤(2)获得的茎秆通过高温消毒后的剪刀剪成1.5厘米的小段，并将边缘剪除，留取茎秆中间小块；
(4)将步骤(3)获得的茎秆小块放入染色剂溶液中浸泡22小时；
(5)将步骤(4)获得的茎秆小块放入直径9.5厘米的玻璃皿中，将茎秆表皮与茎髓分离；
(6)将边长1.6厘米的正方形盖玻片分别放置在茎秆表皮和茎髓上，挤压2次，将茎秆表皮压平，使茎髓均匀铺开；
(7)对步骤(6)获得的披碱草茎秆样品进行检测并获得检测结果。