一种伊立替康-Y的制备方法与流程

本发明涉及药物化学技术领域，具体涉及一种伊立替康-y的制备方法。

背景技术：

伊立替康(irinotecan,cpt-11)是由日本与欧美共同研制开发的喜树碱衍生物。1987年在日本开始ⅰ期临床试验。为了明确其治疗实体瘤的价值，在全球范围内开展了大量的研究，大规模ⅲ期临床试验表明，它是治疗转移性结直肠癌的有效药物，对氟尿嘧啶耐药病例仍有效。日本第一制药公司于1994年7月首次在日本上市,安万特和法玛西亚公司(现为辉瑞公司)开发的盐酸伊立替康注射液分别于1995年5月和1996年6月获fda批准上市。目前该药已获得美国和欧盟的共同批准，在全球100多个国家上市，它是美国fda40多年来继氟尿嘧啶以后再次批准用于转移性结直肠癌一线治疗的化疗药。

伊立替康的化学名称为(+)-(4s)-4，11-二乙基-4-羟基-9-[(4-哌啶基哌啶)羰基]-1h-吡喃并[3，4：6，7]吲哚嗪[1，2b]喹啉-3，14-(4h，12h)-二酮，其结构如式ⅱ所示：

在伊立替康的降解过程中，会产生一种杂质：伊立替康-y，其结构如式(ⅰ)所示：

该杂质不是各国药典规定的已知杂质，制备方法未见报道。为了更好的控制伊立替康的质量，必须对该杂质进行研究，因此制备该杂质作为对照品很有必要。

本发明在充分分析伊立替康的降解途径和该杂质的可能结构的基础上，制定了合理的反应路线，并成功制备出纯度较高的伊立替康-y用于伊立替康的质量研究，该方法简单易行，制备产品纯度高，不需进一步纯化，即能够很好的用于伊立替康的杂质研究。

技术实现要素：

本发明提供了一种伊立替康-y的制备方法，该化合物结构如式(ⅰ)所示：

伊立替康-y为伊立替康的一个杂质，鉴于该杂质的制备方法未见报道，本发明意在提供一种纯度高的制备方法，用于该杂质的制备和伊立替康的杂质研究。

为实现上述目的，本发明采用的实施方案如下：

步骤a：反应容器中加入碱、水和有机溶剂混合均匀，加入伊立替康混合均匀，加热搅拌2～10小时，冷却至室温；

步骤b：加入酸性溶液调节ph至ph2～5；

步骤c：过滤，浓缩干燥，加有机溶剂溶解，离心，取上清液进行中压ods柱色谱分离，收集流份共9瓶(记作ods-1～9)，其中ods5为伊立替康杂质y，将该流份浓缩干燥，即得伊立替康-y的干燥纯品。

其中步骤a所述碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化锂中任意一种，优选氢氧化钠或氢氧化钾。

其中步骤a所述碱的用量为1g伊立替康加入0.0025～0.025mol，优选0.005～0.01mol。

其中步骤a所述有机溶剂占溶剂总体积比为30～90％，优选70～90％。

其中步骤a所述有机溶剂为n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、乙腈、甲醇、乙醇中任意一种，优选甲醇或乙醇。

其中步骤a所述加热温度为40～100℃，优选60～80℃。

其中步骤a所述搅拌时间优选2～4小时。

其中步骤b所述酸为盐酸、磷酸、醋酸或柠檬酸中任意一种，优选盐酸或醋酸。

其中步骤b所述酸的浓度范围为0.05～0.5mol·l^-1，优选0.1～0.2mol·l^-1。

其中步骤b所述ph优选3～4。

其中步骤c所述有机溶剂为n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、乙腈、甲醇、乙醇中任意一种，优选甲醇或乙醇。

其中步骤c所述浓缩干燥为蒸馏干燥或减压干燥。

由于采用上述技术方案，本发明中制备的伊立替康-y收率较高，纯度高，含量可达到90％以上，不需进一步纯化，即能够很好的用于伊立替康的杂质研究。

附图说明

图1伊立替康-y色谱图。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明作进一步的说明，但并不意味着以任何方式对本发明进行限制。

本发明所用伊立替康为连云港杰瑞药业有限公司生产，所用试剂为常规试剂。层析柱购自上海申越实验器材有限公司；质谱系统为waters公司acquity型超高效液相色谱系统，waters公司xevotqms质谱检测器，acquitypda检测器，masslynx工作站；brukeravanceⅲ-500型核磁共振谱仪。

实施例1

步骤a：反应瓶中加入氢氧化钠400mg、水25ml和甲醇25ml混合均匀，加入伊立替康1.0g混合均匀，置80℃油浴中，反应搅拌2小时，反应液冷却至室温。

步骤b：室温下，在反应液中加入0.1mol·l^-1盐酸溶液调节ph至3.0；

步骤c：过滤，滤液减压浓缩干燥，加甲醇溶解，离心，取上清液进行中压ods柱色谱分离，收集流份共9瓶(记作ods-1～9)，其中ods5为伊立替康-y，将该流份减压浓缩干燥，即得伊立替康-y的干燥纯品627mg，收率63％。

化合物的分析验证：

对所收集流份ods5进行化合物分析，结果表明其为伊立替康-y。

由质谱数据显示化合物的正离子为m/z619(m+h)，负离子为m/z617(m-h)，推测分子量为618，同伊立替康-y。

样品的紫外光谱表明结构中存在共轭体系及羰基，与伊立替康-y化学结构相吻合。样品的红外光谱表明分子中存在羟基、羰基、胺基、酰胺等功能团，证明了样品与伊立替康-y同质。

样品的氢谱表明，各组谱峰的积分面积总和显示为38，表明共有38个质子，所以该氢谱的积分值与伊立替康-y分子的质子数吻合。碳谱等实验结果表明，我们所研制的样品为伊立替康-y。

伊立替康-y：淡黄色固体粉末，易溶于氯仿、丙酮、甲醇和二甲基亚砜。

ms：[m+h]⁺m/z619，[m-h]^-m/z617，其分子式为c33h38n4o8，分子量618。

¹hnmr(499mhz,dmso)δ12.065(br-s,1h),9.365(s,1h),8.155(d,1h),7.990(d,1h),7.721(dd,1h),6.799(s,1h),6.364(br-s,1h),5.347(s,2h),4.414-4.437(m,1h),4.204-4.228(m,1h),3.436-3.591(m,3h),3.093-3.185(m,3h),2.965-3.027(m,3h),2.108-2.128(m,2h),1.670-1.887(m,9h),1.416-1.470(m,1h),1.288(t,3h),0.855(t,3h).

¹³cnmr(126mhz,dmso)δ172.97,169.18,159.23,152.81,150.73,149.61,148.23,147.69,144.45,131.58,127.45,127.27,126.15,119.84,117.50,115.72,103.89,72.24,65.42,62.52,49.48,43.18,42.78,30.76,26.09,25.76,23.13,23.08,21.67,15.48,7.92.

以下实施例中分析同上。

实施例2

步骤a：反应瓶中加入氢氧化钾560mg、水10ml和乙醇40ml混合均匀，加入伊立替康1.0g混合均匀，置60℃油浴中，反应搅拌4小时，反应液冷却至室温。

步骤b：室温下，在反应液中加入0.2mol·l^-1盐酸溶液调节ph至4.0；

步骤c：过滤，滤液减压浓缩干燥，加乙醇溶解，离心，取上清液进行中压ods柱色谱分离，收集流份共9瓶(记作ods-1～9)，其中ods5为伊立替康-y，将该流份蒸馏干燥，即得伊立替康-y的干燥纯品568mg，收率57％。

实施例3

步骤a：反应瓶中加入碳酸钠2.65g、水25ml和乙腈25ml混合均匀，加入伊立替康1.0g混合均匀，置40℃油浴中，反应搅拌10小时，反应液冷却至室温。

步骤b：室温下，在反应液中加入0.5mol·l^-1醋酸溶液调节ph至2.0；

步骤c：过滤，滤液减压浓缩干燥，加乙腈溶解，离心，取上清液进行中压ods柱色谱分离，收集流份共9瓶(记作ods-1～9)，其中ods5为伊立替康-y，将该流份减压浓缩干燥，即得伊立替康-y的干燥纯品592mg，收率59％。

实施例4

步骤a：反应瓶中加入碳酸钾345mg、水35ml和n,n-二甲基甲酰胺15ml混合均匀，加入伊立替康1.0g混合均匀，置100℃油浴中，反应搅拌2小时，反应液冷却至室温。

步骤b：室温下，在反应液中加入0.05mol·l^-1盐酸溶液调节ph至5.0；

步骤c：过滤，滤液减压浓缩干燥，加n,n-二甲基甲酰胺溶解，离心，取上清液进行中压ods柱色谱分离，收集流份共9瓶(记作ods-1～9)，其中ods5为伊立替康-y，将该流份减压浓缩干燥，即得伊立替康-y的干燥纯品553mg，收率55％。

实施例5

步骤a：反应瓶中加入氢氧化钾280mg、水10ml和甲醇40ml混合均匀，加入伊立替康1.0g混合均匀，置70℃油浴中，反应搅拌3小时，反应液冷却至室温。

步骤b：室温下，在反应液中加入0.1mol·l^-1盐酸溶液调节ph至3.0；

步骤c：过滤，滤液减压浓缩干燥，加甲醇溶解，离心，取上清液进行中压ods柱色谱分离，收集流份共9瓶(记作ods-1～9)，其中ods5为伊立替康-y，将该流份减压浓缩干燥，即得伊立替康-y的干燥纯品620mg，收率62％。

实施例6

步骤a：反应瓶中加入氢氧化钠200mg、水5ml和乙醇45ml混合均匀，加入伊立替康1.0g混合均匀，置60℃油浴中，反应搅拌4小时，反应液冷却至室温。

步骤b：室温下，在反应液中加入0.1mol·l^-1盐酸溶液调节ph至4.0；

步骤c：过滤，滤液减压浓缩干燥，加乙醇溶解，离心，取上清液进行中压ods柱色谱分离，收集流份共9瓶(记作ods-1～9)，其中ods5为伊立替康-y，将该流份减压浓缩干燥，即得伊立替康-y的干燥纯品652mg，收率65％。

对比例1

步骤a：反应瓶中加入氢氧化钠200mg、水50ml混合均匀，加入伊立替康1.0g混合均匀，置60℃油浴中，反应搅拌4小时，反应液冷却至室温。

步骤b：室温下，在反应液中加入0.1mol·l^-1盐酸溶液调节ph至4.0；

步骤c：过滤，滤液减压浓缩干燥，加甲醇溶解，离心，取上清液进行中压ods柱色谱分离，收集流份共9瓶(记作ods-1～9)，其中ods5为伊立替康-y，将该流份减压浓缩干燥，即得伊立替康-y的干燥纯品52mg，收率5％。

对比例2

步骤a：反应瓶中加入氢氧化钠2.0g、水15ml和乙醇35ml混合均匀，加入伊立替康1.0g混合均匀，置60℃油浴中，反应搅拌4小时，反应液冷却至室温。

步骤b：室温下，在反应液中加入0.1mol·l^-1盐酸溶液调节ph至4.0；

步骤c：过滤，滤液减压浓缩干燥，加甲醇溶解，离心，取上清液进行中压ods柱色谱分离，收集流份共9瓶(记作ods-1～9)，其中ods5为伊立替康-y，将该流份减压浓缩干燥，即得伊立替康-y的干燥纯品116mg，收率12％。

伊立替康-y含量测定结果见图1。

各实施例中伊立替康-y含量测定结果如下：