一种在普通载玻片上接种细胞的固定装置的制作方法

本实用新型属于医学科研用品技术领域，具体涉及一种在普通载玻片上接种细胞的固定装置。

背景技术：

细胞爬片就是将玻片浸在细胞培养基内，让细胞在玻片上生长，然后将细胞固定，用于下一步的组织学，免疫组织化学，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等实验研究。目前市场上根据所售玻片直径为8mm/14mm/20mm/25mm，分别适用于48孔细胞培养板/24孔细胞培养板/12孔细胞培养板/6孔细胞培养板。随着基础医学和生命科学尤其是基因和蛋白质组学等领域的进步，要求对细胞样本进行分析和观察的技术指标不断增多，这就需要经常将细胞爬片置于载玻片上进行显微镜观察和分析。

目前市场所售玻片多根据细胞培养板的孔径大小来设计，其直径往往较培养板内径稍小以便于置入和取出。在爬片上培养细胞过程中我们发现，爬片中心部位细胞数较周缘显著减少，细胞分布不均匀，究其原因是由于爬片本身有厚度，而在爬片上接种细胞后细胞会自然沉淀贴壁，以至于细胞多沉淀至培养板与爬片之间的小缝隙，继而出现爬片周缘细胞多，中心细胞少的现象，并且传统细胞爬片制作的时间长，爬片质量普遍偏低。从培养板内取出爬片时我们需要运用特殊的镊子，并且爬片菲薄透明，极其容易破碎和丢失。在实验研究中，一块爬片往往只能接种一种细胞进行一种研究分析，若实验细胞种类多，所需研究指标多，往往需要大量的细胞爬片，工作量极大。另外，在显微镜下观察细胞和拍照时，我们还需要将爬片上长有细胞的一面朝上置于载玻片上，再在爬片上盖上盖玻片。这样爬片在载玻片上极易滑动，并且在高倍镜下观察细胞时光线需透过载波片才能投射到爬片上，使清晰度减低影响拍照，甚至影响激光共聚焦的拍摄。因此，寻求一种制作简单，便于拍照观察的高通量细胞爬片是科研工作者急需解决的问题。

技术实现要素：

本实用新型旨在克服传统细胞爬片易破碎、易丢失、制作复杂、细胞分布不均、实验内容单一、不便于拍照观察等问题，提供一种在普通载玻片上接种细胞的固定装置。

为了达到上述目的，本实用新型提供的技术方案为：

所述在普通载玻片上接种细胞的固定装置包括设有载玻片置入区（2）的载玻片基座和与载玻片基座分体的细胞限定装置；所述载玻片基座两侧设有基座力臂（3），所述基座力臂（3）上设有基座卡扣（4）；所述细胞限定装置包括横板（7）和设于横板（7）两端且与横板（7）活动连接的与基座卡扣（4）匹配的横板卡扣（6），所述横板（7）上设有细胞限定器（8），所述细胞限定器（8）上端设有加样孔（9）、下端设有细胞限定孔（10）。

优选地，所述载玻片基座上设有横杆（1）。

优选地，所述活动连接为铰接。

更优选地，所述横板卡扣（6）通过活动轴（5）与横板（7）铰接。

优选地，所述细胞限定孔（10）上环设有硅胶环（11）。

下面对本实用新型作进一步说明：

本实用新型所述在普通载玻片接种细胞的固定装置包括载玻片基座和细胞限定装置。所述载玻片基座、细胞限定装置中的横板及卡扣均由棕色聚丙烯（PP）制成，细胞限定装置中的细胞限定器由无色透明的聚丙烯（PP）制成。所述载玻片基座两边设有两个竖行力臂，力臂顶端外侧设有卡扣。细胞限定装置的卡扣与载玻片基座卡扣相互匹配以牢靠固定。细胞限定器的细胞限定孔上环设有硅胶环，可以将细胞限定器与载玻片之间严格密封。细胞限定器上端设有加样孔，孔上无需加盖密封。

在具体实施中，所述基座竖行力臂高度为4cm，其中载玻片表面至基座底部高度为5mm，基座内载玻片平台设计大小为3cmX8cm矩形，正好匹配各种品牌载玻片大小。基座底部为空，中间设有2根横杆将底部三等分，以便于支撑载玻片和观察细胞。细胞限定装置的横板厚度为3mm，横板距离载玻片上表面高度为35mm。细胞限定器中的高度为43mm，其中横板上方为5mm，经横板区域为3mm，横板下方为35mm，忽略硅胶环的厚度，以便适应不同厚度载玻片时均能够严格密封。细胞限定器的上方加样孔内径为8mm，以适应普通200ul的tip头进行换液加干预处理，下方限定孔内径为15mm，以尽可能接种一定数量的细胞。细胞限定装置上的卡扣与基座卡扣相互交错匹配，牢靠固定，同时方便组装与拆卸。细胞限定器在横板上的分布根据载玻片本身特性设计（标记区和观察区），在横板一侧6cm长区域内根据细胞限定器限定孔孔径投影至横板上的大小将其在横行板上三等分均分分布。

本实用新型与现有技术相比的优点在于：

本实用新型是一种将细胞直接接种在载玻片上的固定装置，节省了制作细胞爬片的步骤，接种后的细胞一天即可用于实验研究，而且避免了原有普通爬片易破碎、不易夹取、易丢失等问题。本实用新型能够将细胞直接接种在载玻片上，所得细胞爬片上细胞分布均匀，不会出现原有爬片周缘细胞多，中心细胞少等问题。本实用新型细胞限定器设计为圆台形，极大程度避免了细胞被污染的可能，同时极大程度节省了细胞。本实用新型设计有三个细胞限定孔，各孔之间互不影响，可同时接种三种不同细胞，分做三种不同实验研究，同时装置本身提供一种限定，可以大大节省实验所需试剂（固定液、抗体、染料）。本实用新型由聚丙烯（PP）制成，可耐深低温冷冻、耐高温高压消毒、耐酸碱腐蚀，对实验研究结果不会造成任何影响，同时该装置可以反复消毒利用，无需像原有制作爬片时用到细胞培养板，这也大大的节约了实验耗材，节约了实验成本。用本实用新型制作的细胞爬片质量更高，背景干净，适用于任何显微镜，且拍照质量极高。

总之，本实用新型提供了一种将细胞直接接种在载玻片上的固定装置，节省了制作细胞爬片的步骤，而且避免了原有普通爬片易破碎、不易夹取、易丢失等问题。本实用新型能够将细胞直接接种在载玻片上，所得细胞爬片上细胞分布均匀，不会出现原有爬片周缘细胞多，中心细胞少等问题。本实用新型细胞限定器设计为圆台形，极大程度避免了细胞被污染的可能，同时极大程度节省了细胞。本实用新型设计有三个细胞限定孔，各孔之间互不影响，可同时接种三种不同细胞，分做三种不同实验研究，同时装置本身提供一种限定，可以大大节省实验所需试剂（固定液、抗体、染料）。本实用新型由聚丙烯（PP）制成，可耐深低温冷冻、耐高温高压消毒、耐酸碱腐蚀，对实验研究结果不会造成任何影响，同时该装置可以反复消毒利用，无需像原有制作爬片时用到细胞培养板，这也大大的节约了实验耗材，节约了实验成本。

附图说明

图1为本实用新型固定装置的结构示意图；

图2为本实用新型固定装置中细胞限定装置的俯视图；

图3为本实用新型固定装置中基座的俯视图。

图中：1、横杆，2、载玻片置入区，3、基座力臂，4、基座卡扣，5、活动轴，6、横板卡扣，7、横板，8、细胞限定器，9、加样孔，10、细胞限定孔，11、硅胶环。

具体实施方式

参见图1至图3，所述在普通载玻片上接种细胞的固定装置包括设有载玻片置入区2的载玻片基座和与载玻片基座分体的细胞限定装置；所述载玻片基座两侧设有基座力臂3，所述基座力臂3上设有基座卡扣4；所述细胞限定装置包括横板7和设于横板7两端且与横板7通过活动轴5铰接的与基座卡扣4匹配的横板卡扣6，所述横板7上设有细胞限定器8，所述细胞限定器8上端设有加样孔9、下端设有细胞限定孔10。

其中，所述载玻片基座上设有横杆1。所述细胞限定孔10上环设有硅胶环11。

所述在普通载玻片上接种细胞的固定装置的使用方法为：使用前将载玻片基座和细胞限定装置放置在高压蒸汽灭菌锅内消毒灭菌，将硅胶环置于75%酒精内浸泡消毒2小时，将普通载玻片用75%酒精擦拭表面。然后将消毒后的硅胶环安装在细胞限定装置的细胞限定孔上，再所有物件置于无菌操作台内用紫外线消毒灭菌30分钟。然后将消毒好的载玻片置于基座内，将细胞限定装置安装在载玻片上，将基座卡扣和横板卡扣卡紧，接着就可以通过加样孔向本实用新型内接种细胞。待接种的细胞贴壁后，即可在倒置显微镜下通过基座下方孔观察载玻片上细胞生长状况并拍照。同时可以通过加样孔向细胞限定器内加干预或更换培养液，后续细胞固定、染色、孵化一抗和二抗等实验过程均无需拆卸细胞限定装置，多个限定孔内的细胞及实验内容均互不影响，直至最后细胞透明或封片时拆除细胞限定器，再予以封片并观察拍照。使用本实用新型制作的细胞爬片可以最大限度的节约细胞、时间、耗材和试剂，所制作的细胞爬片质量有保证而且方便拍照。