本发明属于有机化学合成技术领域，具体涉及一种四氮唑类ido抑制剂及其制备方法。
背景技术：
吲哚胺-2,3-双加氧酶1(ido-1)是机体内天然存在的免疫调节酶，与同工酶吲哚胺-2,3-双加氧酶2(ido-2)、色氨酸-2,3-双加氧酶(tdo)共同组成ido家族。
人ido1由403个氨基酸残基组成，相对分子量约42000，其基因位于8号染色体，长约15kb，包括10个外显子和9个内含子，为单拷贝基因。ido1广泛分布于肝外组织，主要见于胸腺髓质和次级淋巴器官内，并散布于胎盘、附睾、眼前房及胃肠道黏膜等免疫豁免组织中。ido1在成纤维细胞、b细胞等多种细胞内均有表达，但是表达量最高的细胞为抗原提呈细胞，如树突细胞核巨噬细胞。
色氨酸是人体内含量最低的必须氨基酸，食物中摄取的色氨酸约1％转变为重要神经递质5-羟色胺，约95％进入犬尿氨酸代谢路径。ido家族是kyn代谢路径限速酶，催化色氨酸代谢为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad+)或彻底氧化产生能量。nad+参与atp生成及dna修复等重要的细胞反应。细胞内nad+水平对于维持细胞稳态、功能及存活具有关键作用。人星形胶质细胞内ido介导的kyn通路代谢产物nad+可保护细胞免受h2o2的氧化损伤。
ido1的生理学功能即是通过调节色氨酸及其代谢产物的浓度实现。如：色氨酸耗竭，可(1)抑制致死性免疫排斥反应的发生，(2)抑制细菌、病毒及寄生虫生长，(3)减少蛋白质及5-羟色胺的生物合成，(4)抑制t细胞增殖分化。又如，代谢产生的免疫活性犬尿氨酸可促进免疫反应，维持免疫自稳等.
muller等研究认为ido1通过抑制t细胞和自然杀伤细胞的功能在微环境内形成免疫抑制状态，肿瘤细胞可以利用这种负向的免疫调节来逃避免疫系统的识别与杀伤，进而不断发展与转移。ido1可能通过3种机制参与诱导肿瘤微环境中的免疫耐受。(1)抑slit细胞增殖：ido在抗原提呈细胞尤其是浆细胞样树突细胞内高度表达，导致细胞局部的色氨酸耗竭，诱导t细胞停滞于g1期，从而抑制了t细胞的增殖，下调机体的免疫能力。(2)促进t细胞凋亡：ido依赖性的色氨酸降解导致犬尿氨酸水平的提高，也诱导氧自由基介导的t细胞凋亡。(3)树突细胞ido表达升高，引起局部色氨酸耗竭，进而一方面活化和增强调节t细胞的免疫抑制功能，另一方面抑制效应t细胞的功能，促使机体对肿瘤特异性抗原免疫耐受。
技术实现要素：
本发明解决的技术问题是提供了一种四氮唑类ido抑制剂及其制备方法。
本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种四氮唑类ido抑制剂的结构为：
本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种四氮唑类ido抑制剂的制备方法，其特征在于具体步骤为：把苯基四氮唑和无水氢氧化钡加入n,n-二甲基甲酰胺中，在氮气保护下，缓慢滴加1,3-二氯丙醇，滴加完后室温搅拌反应1h，然后再加入3,4,5-三甲氧基苯胺，缓慢加热至60℃，继续反应至tlc监控原料反应完全，把反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取反应多次，合并有机相，浓缩后得到目标化合物；所诉的苯基四氮唑与无水氢氧化钡与1,3-二氯丙醇与3,4,5-三甲氧基苯胺的投料量摩尔比为1:2:1:1。
本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种四氮唑类ido抑制剂的制备方法，其特征在于具体步骤为：
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
在反应瓶中，把苯基四氮唑15g(0.1mol)和无水氢氧化钡34g(0.2mol)加入n,n-二甲基甲酰胺200ml中，在氮气保护下，缓慢滴加1,3-二氯丙醇13g(0.1mol)，滴加完后室温搅拌反应1h，然后再加入3,4,5-三甲氧基苯胺18g(0.1mol)，缓慢加热至60℃，继续反应至tlc监控原料反应完全，把反应液倒入水中，用乙酸乙酯100ml萃取反应多次，合并有机相，浓缩后得到目标化合物32g；1hnmr(400mhz，dmso-d6)：8.09(d,j＝8.0hz,2h),7.51(dd,j1＝8.0hz,j2＝8.0hz,2h),6.77(d,j＝4.0hz,2h),4.89(dd,j1＝4.0hz,j2＝8.0hz,1h),4.78(dd,j1＝4.0hz,j2＝4.0hz,1h),4.55(s,1h),3.82(s,6h),3.68(s,3h),3.57(d,j＝4.0hz,1h),3.39(t,j1＝8.0hz,j2＝8.0hz,1h)
实施例2
将hela细胞以每孔40000个细胞的数目铺于96孔细胞培养板中，用含10％胎牛血清的rpmi1640培养5-6小时，加入稀释好的待测化合物和终浓度为100ng/mg重组人源干扰素γ激活ido1表达。细胞于富含5％二氧化碳的37℃细胞培养箱中培养20小时后，用5％三氯乙酸终止反应，并于50℃孵育30分钟。细胞培养液经沉淀后，取上清液送lc/ms检测其中的犬尿氨酸含量。根据xlfit5软件进行数据分析，检测到目标化合物ic50为35um。
以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。