一种用制备液相色谱分离制备顺式格列美脲的方法与流程

本发明属于化学分离制备领域，涉及一种分离制备格列美脲异构体的方法。

背景技术：

格列美脲为我公司和美国jc公司共同开发的二类新药。格列美脲最早由德国hoechstmarionroussel(hmr)公司开发，1995年9月首次在瑞典以商品名amaryl上市，1996年经fda批准进入美国市场，用于治疗节制饮食和从事运动而未能控制的ⅱ型(非胰岛依赖型)糖尿病，它是fda批准的第一个可与胰岛素同时使用的磺酰脲类药物。

格列美脲是目前临床评价最优的磺酰脲类降糖药，具有良好的市场前景。与同类产品相比，具有以下优点：a、由于格列美脲与受体的作用时间较短，使胰岛素分泌时间缩短，因此具有较强的节省胰岛素作用，在一定程度上可克服胰岛细胞的继发性衰竭。b、格列美脲具有高效、长效、用药量少(2～4mg/d)的优点。c、格列美脲具有副作用小、安全性高的优点，在降低血糖的同时，可预防和缓解心脑血管并发症的发生。

为了进一步保证药品质量，防范用药安全，我公司对格列美脲相关杂质进行了研究。顺式格列美脲和反式格列美脲(即格列美脲)只是己环上的对位取代键的方向不同，性质及其相近。由于位阻效应，无法得到高纯度的顺式-对甲基环己基异氰酸酯，因此无法直接制备得到高纯度的顺式格列美脲。宋雅茹等利用高效液相色谱法在一种酰胺型手性固定相上直接分离了格列美脲顺反异构体(《利用酰胺型手性固定相高效液相色谱法对格列美脲顺反异构体的分离和测定》，分析化学(2004)，32(4)，435-438。)但是，其使用的色谱柱为分析级，主要用于分析检测，用于制备时，制备的量为微克级，无法提供可供系统研究的克级制备量。为了提供可供研究量的顺式格列美脲，对其分离制备方法进行了研究。

技术实现要素：

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种分离制备格列美脲异构体的方法，顺式格列美脲和反式格列美脲的结构式分别为：

本发明提供了一种用制备液相色谱分离制备顺式格列美脲的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

(1)使用顺反混合格列美脲加入二氯甲烷溶解，制备浓度30--60mg/ml进样溶液，采用正相色谱分离制备，得到顺式格列美脲的二氯甲烷溶液；

(2)将顺式格列美脲的二氯甲烷溶液减压浓缩，然后使用氮气吹干仪吹干，得到顺式格列美脲。

所述的一种用制备液相色谱分离制备顺式格列美脲的方法，其特征在于：步骤(1)中正相色谱分离制备条件为：

色谱柱：diol5umφ20×250mm(二醇基制备色谱柱)

检测波长：254nm

流动相：二氯甲烷：甲醇：乙酸＝200：1：0.2(体积比)

流速：12ml/min

进样量：0.4ml；

所述的一种用制备液相色谱分离制备顺式格列美脲的方法，其特征在于：步骤(2)中采用低温减压蒸除大部分溶剂，所述的减压浓缩温度为20--30℃；

所述的一种用制备液相色谱分离制备顺式格列美脲的方法，其特征在于：步骤(2)所述的浓缩液中顺式格列美脲的含量约为20—50％；

所述的一种用制备液相色谱分离制备顺式格列美脲的方法，其特征在于：步骤(2)中浓缩液中的溶剂使用氮气吹干仪吹干，所述的吹干气流为高纯氮气。

本发明具有以下有益效果：

本方法分离制备的顺式格列美脲的纯度高，液相含量大于98.0％。本方法采用正相液相制备色谱进行分离，方法简单可靠。采用本方法制备得到可供研究量的顺式格列美脲，为格列美脲原料药的质量、安全、效能研究提供了依据。

附图说明

图1为原料(顺反混合格列美脲)的分析液相色谱图；

图2为分离制备色谱图；

图3、图4、图5为目标物(顺式格列美脲)的纯度检测液相色谱图；

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步描述。

实施例1

(1)称取顺反混合格列美脲1.0g，加25ml二氯甲烷溶解，制备成约40mg/ml的二氯甲烷溶液。

(2)按二氯甲烷:甲醇:乙酸＝200：1：0.2(体积比)的比例配制流动相。

(3)依据步骤(1)中所述正相色谱分离制备条件，采用二醇基制备色谱柱，在制备型液相色谱仪上对原料进行分离，收集目标峰溶液。

(4)将收集的顺式格列美脲的二氯甲烷溶液在30℃下减压浓缩，浓缩至顺式格列美脲的浓度约为35％。

(5)使用氮气吹干仪，采用高纯氮气吹扫浓缩液，直至吹干，得到顺式格列美脲。hplc纯度：99.05％，如图3。

实施例2

(1)称取顺反混合格列美脲1.1g，加20ml二氯甲烷溶解，制备成约55mg/ml的二氯甲烷溶液。

(2)按二氯甲烷:甲醇:乙酸＝200：1：0.2(体积比)的比例配制流动相。

(3)依据步骤(1)中所述正相色谱分离制备条件，采用二醇基制备色谱柱，在制备型液相色谱仪上对原料进行分离，收集目标峰溶液。

(4)将收集的顺式格列美脲的二氯甲烷溶液在30℃下减压浓缩，浓缩至顺式格列美脲的浓度约为50％。

(5)使用氮气吹干仪，采用高纯氮气吹扫浓缩液，直至吹干，得到顺式格列美脲。hplc纯度：98.03％，如图4。

实施例3

(1)称取顺反混合格列美脲1.0g，加30ml二氯甲烷溶解，制备成约33mg/ml的二氯甲烷溶液。

(2)按二氯甲烷:甲醇:乙酸＝200：1：0.2(体积比)的比例配制流动相。

(3)依据步骤(1)中所述正相色谱分离制备条件，采用二醇基制备色谱柱，在制备型液相色谱仪上对原料进行分离，收集目标峰溶液。

(4)将收集的顺式格列美脲的二氯甲烷溶液在25℃下减压浓缩，浓缩至顺式格列美脲的浓度约为20％。

(5)使用氮气吹干仪，采用高纯氮气吹扫浓缩液，直至吹干，得到顺式格列美脲。hplc纯度：99.11％，如图5。

以上结合实施例对本发明进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所做的均等变化与改进等，均应仍属于本发明的专利涵盖范围之内。

技术特征：

技术总结
本发明提供了一种用制备液相色谱分离制备顺式格列美脲的方法，具体包括以下步骤：(1)使用顺反混合格列美脲加入二氯甲烷溶解，制备进样溶液，采用正相色谱分离制备，得到顺式格列美脲的二氯甲烷溶液；(2)将顺式格列美脲的二氯甲烷溶液减压浓缩，然后使用氮气吹干仪吹干，得到顺式格列美脲；本发明提供的方法分离制备的顺式格列美脲的纯度高，方法简单可靠；采用本方法制备得到可供研究量的顺式格列美脲，为格列美脲原料药的质量、安全、效能研究提供了依据。

技术研发人员：刘胜高;郑忠辉;吴辉
受保护的技术使用者：山东新华制药股份有限公司
技术研发日：2019.04.17
技术公布日：2019.06.04