基于有机溶剂法从微藻中提取蛋白质的工艺的制作方法

文档序号:25650642发布日期:2021-06-29 20:14阅读:139来源:国知局
20min。
15.与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:基于有机溶剂法从微藻中提取蛋白质的工艺,通过在微藻上清液中添加有机溶剂,使得微藻中的蛋白质容易聚集快速沉淀,便于后续提取蛋白质更加方便、快捷,同时通过设置特定的水温、时间,使得微藻制备过程中的蛋白质量和品质高,也使得微藻增加了附加值,从而提高了微藻的经济效益,操作简单,时间短,具有良好的使用前景。
具体实施方式
16.为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解,下面结合具体实施方式,进一步阐述本发明。
17.实施例1
18.提取时,对微藻进行表面处理,先将微藻进行清洗干净,而后烘干进行搅碎,在通过40目的筛网进行过滤,得到干净的微藻粉末;而后酶解处理,先将得到的干净的微藻粉末放在搅拌器中,而后加入适量的水搅拌均匀,加入水的质量是微藻粉末质量的10倍,静置60min,温度设置在35℃,获得微藻粉液,再将微藻粉液中添加复合酶,复合酶选用的是纤维解酶,复合酶加入的量为微藻粉末质量的5%%,搅拌下反应60min,搅拌速度为55r/min,得到微藻酶解液;再进行固液分离,将得到微藻酶解液的放入微波灭酶机中进行灭酶,微波灭酶机的温度设置在80℃,灭酶时间为3min,而后调节ph值至5.5,然后通过离心机离心,离心的条件为离心机转速900r/min,时长为10min,使得上清液与沉淀物分离后取上清液,得到微藻上清液;最后制得蛋白质粉,将得到微藻上清液加入乙醇进行搅拌,使其混合均匀,温度控制在10℃,然后通过离心机离心得沉淀物,离心的条件为离心机转速950r/min,时长为12min,再将取得沉淀物放置在真空干燥机内进行干燥,温度设置在45℃,将水分含量蒸发到12%以下,干燥后即可有机溶剂法从微藻中提取蛋白质的工艺;
19.将制得微藻蛋白质粉末经吸收光谱进行检测,经检测,该微藻蛋白质中蛋白纯度a560/a280为1.5,该微藻蛋白质粉末在575nm处有微藻蛋白的特征荧光发射峰,与标准荧光发射峰相同,由此可以说明,微藻蛋白质粉末中的微藻蛋白纯度高并具有活性。
20.实施例2
21.提取时,对微藻进行表面处理,先将微藻进行清洗干净,而后烘干进行搅碎,在通过400-500目的筛网进行过滤,得到干净的微藻粉末;而后酶解处理,先将得到的干净的微藻粉末放在搅拌器中,而后加入适量的水搅拌均匀,加入水的质量是微藻粉末质量的12倍,静置75min,温度设置在50℃,获得微藻粉液,再将微藻粉液中添加复合酶,复合酶选用的是蛋白水解酶,复合酶加入的量为微藻粉末质量的11%,搅拌下反应80min,搅拌速度为60r/min,得到微藻酶解液;其次进行固液分离,将得到微藻酶解液的放入微波灭酶机中进行灭酶,微波灭酶机的温度设置在85℃,灭酶时间为5min,而后调节ph值至6,然后通过离心机离心,离心的条件为离心机转速980r/min,时长为15min,使得上清液与沉淀物分离后取上清液,得到微藻上清液;最后制得蛋白质粉,将得到微藻上清液加入乙醇进行搅拌,使其混合均匀,温度控制在15℃,然后通过离心机离心得沉淀物,离心的条件为离心机转速950r/min,时长为18min,再将取得沉淀物放置在真空干燥机内进行干燥,温度设置在55℃,将水分含量蒸发到12%以下,干燥后即可有机溶剂法从微藻中提取蛋白质的工艺;
22.将制得微藻蛋白质粉末经吸收光谱进行检测,经检测,该微藻蛋白质中蛋白纯度a560/a280为1.3,该微藻蛋白质粉末在575nm处有微藻蛋白的特征荧光发射峰,与标准荧光发射峰相同,由此可以说明,微藻蛋白质粉末中的微藻蛋白纯度高并具有活性。
23.以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
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