本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一种超声波辅助糖析萃取富含油脂和黄酮的植物种子的方法。
背景技术：
现有技术中对植物种子中的黄酮提取一般采用超声波辅助萃取法、传统溶剂萃取法和盐析萃取法；但现有技术中对富含油脂和黄酮的植物种子提取均为单一提取，不仅浪费资源，提高成本，且降低了植物种子综合利用率；因此寻找一种高效、经济、且同时提取富含油脂和黄酮的植物种子的方法已成为技术研究的重点。
技术实现要素：
为了解决以上技术问题，本发明提供了一种超声波辅助糖析萃取富含油脂和黄酮的植物种子的方法。
本发明具体技术方案如下：
本发明提供了一种超声波辅助糖析萃取富含油脂和黄酮的植物种子的方法，该方法包括以下步骤：
a.超声波辅助糖析萃取：将植物种子粉碎后，与有机溶剂、糖和双蒸水混合均匀制得混合液，将混合液进行超声波处理，静置，混合液分为上相和下相；
b.回收油脂：将步骤a制得的上相减压浓缩，制得油脂；
c.回收黄酮：取步骤a制得的下相与无水乙醇混合后，低温静置、离心，得到上清液和沉淀，将上清液减压蒸馏后，制得黄酮。
本发明的方法适用于所有含有油脂和黄酮的植物种子，如文冠果种子、辣木种子、油茶种子、草莓籽、牡丹种子等；优选地，步骤a将植物种子粉碎至过16-80目筛。
进一步地，步骤a所述的有机溶剂的加入量为萃取体系质量的20-40％；所述的糖的加入量为萃取体系质量的15-30％；所述的粉碎的植物种子加入量为萃取体系质量的2-8％。
萃取体系由有机相、水相和糖组成，萃取体系质量指的是有机相、水相和糖的总重量。
进一步地，步骤a所述的超声波处理的条件为：超声波功率为100-600w，超声波频率为25-50khz，超声工作时间为1-4s，间隙为2-8s，提取温度为25-40℃，提取时间为3-15min。
进一步地，步骤a所述的有机溶剂为叔丁醇、正丁醇、正辛醇、正己醇中的一种。
进一步地，步骤a所述的糖类为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、木糖、果糖、海藻糖中的一种。
进一步地，步骤中c所述的下相与无水乙醇的体积比为1:3-5。
进一步地，步骤c所述的低温静置、离心具体操作如下：在4℃条件下静置3-5h，以5000-8000r/min的速度离心5-10min。
与现有技术相比，本发明所提供的超声波辅助糖析萃取技术具有以下优势：1)现有技术的提取时间为0.5-2d，而本发明的方法将提取时间缩短至5-8h，提高提取效率；2)采用的糖类来源丰富、环境友好，成本低且糖是中性化合物，不会改变溶液ph和影响目标物质生物活性；3)分相时间短，收率高；4)设备投资费用较低，操作简单；5)处理量大、能耗低，同时对富含油脂和黄酮的植物种子进行提取，提高了综合利用率，降低了成本；6)有机溶剂和糖均可循环利用。
具体实施方式
实施例1
本实施例提供了一种超声波辅助糖析萃取琉璃苣中油脂和黄酮的方法，该方法包括以下步骤：
a.超声波辅助糖析萃取：称取4克粉碎后的琉璃苣，分别加入34克叔丁醇、22克麦芽糖和30克双蒸水混合均匀制得混合液，将混合液在超声波功率为100w，超声波频率25khz，超声工作1s，间隙2s，提取温度为30℃，时间为10min，静置，混合液分为上相和下相；
b.回收油脂：将步骤a制得的上相减压浓缩，制得油脂；
c.回收黄酮：将步骤a制得的下相加入120克无水乙醇，在3℃条件下静置3小时，在5000r/min速度下离心8min，得到上清液和沉淀，将上清液减压蒸馏后，制得黄酮。
实施例2
实施例提供了一种超声波辅助糖析萃取黑豆中油脂和黄酮的方法，该方法包括以下步骤：
a.超声波辅助糖析萃取：称取8克粉碎后的黑豆，分别加入40克叔丁醇、30克麦芽糖和30克双蒸水混合均匀制得混合液，将混合液在超声波功率为450w，超声波频率40khz，超声工作3s，间隙5s，提取温度为25℃，时间为15min，静置，混合液分为上相和下相；
b.回收油脂：将步骤a制得的上相减压浓缩，制得油脂；
c.回收黄酮：将步骤a制得的下相加入135克无水乙醇，在5℃条件下静置2小时，在6000r/min速度下离心10min，得到上清液和沉淀，将上清液减压蒸馏后，制得黄酮。
实施例3
本实施例提供了一种超声波辅助糖析萃取葵花籽中油脂和黄酮的方法，该方法包括以下步骤：
a.超声波辅助糖析萃取：称取2克粉碎后的葵花籽，分别加入20克叔丁醇、15克麦芽糖和65克双蒸水混合均匀制得混合液，将混合液在超声波功率为600w，超声波频率50khz，超声工作4s，间隙8s，提取温度为40℃，时间为3min，静置，混合液分为上相和下相；
b.回收油脂：将步骤a制得的上相减压浓缩，制得油脂；
c.回收黄酮：将步骤a制得的下相加入145克无水乙醇，在4℃条件下静置1小时，在8000r/min速度下离心5min，得到上清液和沉淀，将上清液减压蒸馏后，制得黄酮。
对照例1
本对照例使用索氏提取法和传统乙醇回流法提取琉璃苣种子中油脂和黄酮，索氏提取法具体包括以下步骤：
称取5克粉碎后琉璃苣种子，加入200ml正己烷，80℃提取条件下8h后，减压蒸馏分离正己烷得到油脂；将提取后琉璃苣种子加入111ml体积分数为80％乙醇，65℃回流提取2h，减压浓缩，得琉璃苣黄酮。
对照例2
本对照例使用索氏提取法和传统乙醇回流法提取黑豆中油脂和黄酮，索氏提取法具体包括以下步骤：
称取5克粉碎后黑豆，加入200ml正己烷，80℃提取条件下8h后，减压蒸馏分离正己烷得到油脂；将提取后黑豆加入111ml体积分数为80％乙醇，65℃回流提取2h，减压浓缩，得黑豆黄酮。
对照例3
本对照例使用索氏提取法和传统乙醇回流法提取葵花籽中油脂和黄酮，索氏提取法具体包括以下步骤：
称取5克粉碎后葵花籽，加入200ml正己烷，80℃提取条件下8h后，减压蒸馏分离正己烷得到油脂；将提取后葵花籽加入111ml体积分数为80％乙醇，65℃回流提取2h，减压浓缩，得葵花籽苣黄酮。
试验例1
取采用实施例1-3和对照例1-3的方法分别萃取琉璃苣、黑豆和葵花籽中的油脂、黄酮，分别测定琉璃苣、黑豆和葵花籽中的油脂得率、黄酮得率和黄酮纯度，油脂得率的测定方法如下：分别称取制得的油脂的质量和加入植物种子粉末的质量，并用以下公式进行计算，油脂得率(％)＝油脂质量(g)/植物种子粉末质量(g)；黄酮得率的测定方法如下：以芦丁为标准品，采用硝酸铝显色法测定黄酮含量，黄酮得率(mg/g)＝黄酮含量(mg)/植物种子粉末质量(g)；黄酮纯度的测定方法如下：将获得的黄酮采用无水乙醇溶解后用硝酸铝显色法测其含量，黄酮纯度(％)＝100％×黄酮含量(mg)/黄酮质量(mg)；测试结果如表1。
表1.各组油脂得率、黄酮得率和黄酮纯度结果
由表1可知，由本发明的方法萃取制得的油脂得率、黄酮的得率和黄酮的纯度相对于对照例1-3的方法均有显著提高。
综上，仅为本发明之较佳实施例，不以此限定本发明的保护范围，凡依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆为本发明专利涵盖的范围之内。