一种高效获取单细胞悬液的工具的制作方法

本实用新型涉及医学生物技术领域，尤其涉及一种高效获取单细胞悬液的工具。

背景技术：

对生物医学科研人员来说，高活性的细胞在体内体外实验以及临床转化应用中必不可少，根据具体实验需要，通常需要从各种样本中制备单细胞悬液。流式细胞分析或磁珠分选等医学检测和研究等都同样需要去除样本中的组织碎片和细胞团，从而获得单细胞悬液。

对于如何从酶消化后组织块悬液中分离单一细胞悬液，现有的方法大多是利用一定孔径的筛网依靠重力过滤细胞悬液，而重力过滤法会有较多的细胞黏着并残留在滤网上，使得单细胞提取液所需时间长，造成原代细胞活性降低，且单细胞悬液的获取率也不高，因此影响胎盘羊膜来源的羊膜间充质干细胞和华通氏胶来源的脐带间充质干细胞的原代细胞无菌提取和纯化。

技术实现要素：

本实用新型的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，如：现有的方法大多是利用一定孔径的筛网依靠重力过滤细胞悬液，而重力过滤法会有较多的细胞黏着并残留在滤网上，使得单细胞提取液所需时间长，造成原代细胞活性降低，且单细胞悬液的获取率也不高，因此影响胎盘羊膜来源的羊膜间充质干细胞和华通氏胶来源的脐带间充质干细胞的原代细胞无菌提取和纯化。

为了实现上述目的，本实用新型采用了如下技术方案：

一种高效获取单细胞悬液的工具，包括工具本体，所述工具本体内设有空腔，所述空腔内设有尼龙滤网，所述工具本体的两端内壁均设有螺纹端，所述工具本体的外侧壁上设有两个抽气孔，其中一个所述抽气孔位于尼龙滤网的上方，另一个所述抽气孔位于尼龙滤网的下方，所述工具本体的外侧壁上固定连接有连通抽气孔的抽气管，所述抽气孔靠近空腔一端的内侧壁上设有螺纹槽，所述螺纹槽内设有滤膜，所述螺纹槽内螺纹连接有螺纹管套，所述抽气管远离工具本体的一端上设有螺纹，所述抽气管上螺纹连接有管件，所述管件远离抽气管的一端上设有凹槽，所述凹槽上套设有连接管。

优选的，所述螺纹端设有橡胶垫环，所述螺纹槽螺纹可与常规离心管对接。

优选的，所述尼龙滤网的横截面为圆形，所述尼龙滤网内固定于空腔的中间部位，所述尼龙滤网将空腔分隔成两个容纳腔。

优选的，所述滤膜和螺纹管套之间夹设有垫圈，所述螺纹管套远离垫圈的一端上设有防滑条纹。

优选的，所述工具本体由透明聚丙烯材质制成，所述滤膜由聚偏二氟乙烯膜材质制成。

优选的，所述连接管采用pu钢丝软管。

本实用新型的有益效果是：

1、与传统的滤网在重力的作用下过滤单细胞悬液方法相比，此工具本体可以有效的缩短单细胞悬液提取所需的时间，从而有效的提高原代细胞的活性。

2、本工具本体采用的负压抽取法能够较全面的将尼龙滤网上以及未消化组织块上附着的细胞液滴最大化的过滤到下方的离心管内，从而提高单细胞悬液的获取率。

3、该工具本体在操作时，工具本体内部容纳腔与离心管形成为一个相对密闭空间，与外界相通的抽气孔部位设有0.22或0.3μm滤膜隔开，能够有效控制操作失误等所造成的微生物污染。

总之，该工具本体特别适用于临床级干细胞的提取，能够快速方便有效的获取高生物学活性的单细胞悬液，从而保证原代脐带或羊膜间充质干细胞质量。

附图说明

图1为本实用新型提出的一种高效获取单细胞悬液的工具的正面结构示意图；

图2为本实用新型提出的一种高效获取单细胞悬液的工具的内部结构示意图；

图3为图2中a结构的放大图。

图中：1工具本体、2空腔、3尼龙滤网、4螺纹端、5橡胶垫环、6抽气孔、7抽气管、8螺纹槽、9滤膜、10垫圈、11螺纹管套、12管件、13凹槽、14连接管。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。

在本实用新型的描述中，需要理解的是，术语“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。

参照图1-3，一种高效获取单细胞悬液的工具，包括工具本体1，工具本体1内设有空腔2，空腔2内设有尼龙滤网3，尼龙滤网3可分为40、70或100μm孔径多个规格，尼龙滤网3的横截面为圆形，尼龙滤网3内固定于空腔2的中间部位，尼龙滤网3将空腔2分隔成两个容纳腔，借助尼龙滤网3来完成单细胞悬液的无菌提取和纯化，工具本体1的两端内壁均设有螺纹端4，用于与常规使用的15ml、50ml或175ml的falcon^tm离心管螺纹匹配，可通过旋转与离心管严密对接，保证离心管内部液体不会溢出，使容纳腔和离心管形成一个整体，内部整体处于相对密闭状态。

螺纹端4设有橡胶垫环5，当工具本体1借助其两端的螺纹端4与离心管严密对接时，橡胶垫环5能够确保工具本体1与离心管之间连接的密封性，从而防止获取单细胞悬液的过程中因外部微生物进入而出现污染，工具本体1的外侧壁上设有两个抽气孔6，其中一个抽气孔6位于尼龙滤网3的上方，另一个抽气孔6位于尼龙滤网3的下方，工具本体1的外侧壁上固定连接有连通抽气孔6的抽气管7。

抽气管7可以与细胞房的废液抽吸泵的管道匹配，保证工具本体1使用时下方的抽气功能，且两个抽气管7可以随机使用，兼具上方进气或下方抽气的功能，抽气孔6靠近空腔2一端的内侧壁上设有螺纹槽8，螺纹槽8内设有滤膜9，工具本体1由透明聚丙烯材质制成，滤膜9由聚偏二氟乙烯膜材质制成，滤膜9位于抽气孔6内部，孔径为0.22或0.3μm，用于隔离容纳腔与外部环境，可以保证该工具本体1的两个容纳腔和离心管内部的悬液处于无菌状态，防止外部微生物进入内部污染悬液，同时能防止在使用过程中液体的溢出。

螺纹槽8内螺纹连接有螺纹管套11，滤膜9和螺纹管套11之间夹设有垫圈10，螺纹管套11远离垫圈10的一端上设有防滑条纹，滤膜9便于安装和更换，垫圈10能够避免拧动安装螺纹管套11时螺纹管套11与滤膜9之间因直接接触所产生的磨损，抽气管7远离工具本体1的一端上设有螺纹，抽气管7上螺纹连接有管件12，管件12远离抽气管7的一端上设有凹槽13，凹槽13上套设有连接管14，连接管14采用pu钢丝软管，在细胞房废液抽吸泵的负压抽吸作用下不容易变形瘪下去。

本实用新型中，使用者使用该装置时，以羊膜或脐带间充质干细胞单细胞悬液提取为例，在无菌环境下，选取15ml、50ml或175ml的falcon^tm空离心管，按照酶消化法进行脐带间充质干细胞或羊膜间充质干细胞进行原代提取操作，即使用胰酶或胶原酶依据方案按照步骤在离心管中完全消化脐带华通氏胶碎片或胎盘羊膜片；

选取对应规格无菌的工具本体1，将该工具本体1的螺纹端4与装有消化悬液离心管的螺纹对齐，旋转拧紧，再将该工具本体1的另一螺纹端4与另一空离心管螺纹对齐，旋转拧紧，空离心管位于下方，装有消化液的离心管位于上方，脐带华通氏胶碎片或胎盘羊膜片消化液即进入工具本体1内部空腔2的上方容纳腔，将抽吸泵的管道与空离心管对应的下方的抽气孔6链接，启动抽气泵缓慢抽气，上方离心管内部的单细胞悬液即在下容纳腔的负压作用下流动到下方的空离心管中，借助尼龙滤网3，完成目的单细胞悬液的无菌提取、纯化，该工具本体1特别适用于临床级干细胞的提取，能够快速方便有效的获取高生物学活性的单细胞悬液，从而保证原代脐带或羊膜间充质干细胞质量。

以上所述，仅为本实用新型较佳的具体实施方式，但本实用新型的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本实用新型揭露的技术范围内，根据本实用新型的技术方案及其实用新型构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本实用新型的保护范围之内。