技术特征：
1.一种与人tau特异性结合的抗体，其包含成熟重链可变区，所述成熟重链可变区包含分别包括seq id no:8、9和10的cdr h1、h2和h3，不同的是位置h28能够被n或t占据，h54能够被n或d占据，h56能够被d或e占据，并且位置h58能够被v或i占据；以及成熟轻链可变区，所述成熟轻链可变区包含分别包括seq id no:12、13和14的cdr l1、l2和l3，不同的是位置l24能够被k或r占据，其中以下位置中的至少一个位置被如所指定的氨基酸占据：h1被q占据，h5被q占据，h11被l占据，h20被l占据，h23被t占据，h38被k占据，h75被s占据，h56被e占据，h58被i占据，l10被t占据，l17被e占据，l24被r占据，l37被q占据，l83被l占据，l86被h占据，l100被a或q占据，l106被l占据。2.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h1包括seq id no:8或seq id no:86，cdr
‑
h2包括seq id no:9、seq id no:87、seq id no:88或seq id no:92，cdr
‑
h3包括seq id no:10，cdr
‑
l1包括seq id no:12或seq id no:89，cdr
‑
l2包括seq id no:13，并且cdr
‑
l3包括seq id no:14。3.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h1包括seq id no:8或seq id no:86，cdr
‑
h2包括seq id no:9、seq id no:87或seq id no:88，cdr
‑
h3包括seq id no:10，cdr
‑
l1包括seq id no:12或seq id no:89，cdr
‑
l2包括seq id no:13，并且cdr
‑
l3包括seq id no:14。4.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h1包括seq id no:86，cdr
‑
h2包括seq id no:92，cdr
‑
h3包括seq id no:10，cdr
‑
l1包括seq id no:12或seq id no:89，cdr
‑
l2包括seq id no:13，并且cdr
‑
l3包括seq id no:14。5.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h1具有包括seq id no:86的氨基酸序列。6.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h2具有包括seq id no:87的氨基酸序列。7.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h2具有包括seq id no:88的氨基酸序列。8.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h2具有包括seq id no:92的氨基酸序列。9.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
l1具有包括seq id no:89的氨基酸序列。10.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h1具有包括seq id no:86的氨基酸序列并且cdr
‑
h2具有包括seq id no:87的氨基酸序列。11.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h1具有包括seq id no:86的氨基酸序列并且cdr
‑
h2具有包括seq id no:88的氨基酸序列。12.如权利要求1所述的抗体，其中cdr
‑
h1具有包括seq id no:86的氨基酸序列并且cdr
‑
h2具有包括seq id no:92的氨基酸序列。13.如前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体是人源化抗体、饰面抗体或嵌合抗体。14.如权利要求1至13中任一项所述的人源化抗体，其包含具有与seq id no:76至80和seq id no:90至91中的任一者至少95％同一的氨基酸序列的人源化成熟重链可变区和具有与seq id no:83至85中的任一者至少90％同一的氨基酸序列的人源化成熟轻链可变区。15.如权利要求1至13中任一项所述的人源化抗体，其包含具有与seq id no:76至80中的任一者至少95％同一的氨基酸序列的人源化成熟重链可变区和具有与seq id no:83至85中的任一者至少90％同一的氨基酸序列的人源化成熟轻链可变区。16.如权利要求1至13中任一项所述的人源化抗体，其包含具有与seq id no:90至91中的任一者至少95％同一的氨基酸序列的人源化成熟重链可变区和具有与seq id no:83至
85中的任一者至少90％同一的氨基酸序列的人源化成熟轻链可变区。17.如权利要求14至16中任一项所述的人源化抗体，其中vh区中的以下位置中的至少一个位置被如所指定的氨基酸占据：h93被s占据以及h94被t占据。18.如权利要求17所述的人源化抗体，所提供的位置h93和h94分别被s和t占据。19.如权利要求17所述的人源化抗体，其中所述vh区中的位置h91被f占据。20.如权利要求17所述的人源化抗体，其中所述vh区中的以下位置中的至少一个位置被如所指定的氨基酸占据：h1被e占据，h5被v占据，h11被v占据，h20被i占据，h23被k占据，h38被r占据，h42被g占据，h43被k占据，h66被r占据，h75被t占据，h76被d占据，h81被e占据，h108被l占据，h109被v占据。21.如权利要求20所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h1、h5、h11、h20、h23、h38、h42、h43、h66、h75、h76、h81、h108和h109分别被e、v、v、i、k、r、g、k、r、t、d、e、l和v占据。22.如权利要求20所述的人源化抗体，其中所述vh区中的以下位置中的至少一个位置被如所指定的氨基酸占据：h17被t占据，h80被m占据，h83被r占据。23.如权利要求22所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h17、h80和h83分别被t、m和r占据。24.如权利要求22所述的人源化抗体，其中所述vh区中的位置h58被i占据。25.如权利要求24所述的人源化抗体，其中所述vh区中的以下位置中的至少一个位置被如所指定的氨基酸占据：h28被t占据，h67被v占据。26.如权利要求25所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h28和h67分别被t和v占据。27.如权利要求22所述的人源化抗体，其中所述vh区中的以下位置中的至少一个位置被如所指定的氨基酸占据：h54被d占据，h56被e占据。28.如权利要求27所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h54和h56分别被d和e占据。29.如权利要求14至16中任一项所述的人源化抗体，其中所述vh区中的以下位置中的至少一个位置被如所指定的氨基酸占据：h1被q或e占据，h5被q或v占据，h11被l或v占据，h17被s或t占据，h20被l或i占据，h23被t或k占据，h28被n或t占据，h38被k或r占据，h42被e或g占据，h43被q或k占据，h54被n或d占据，h56被d或e占据，h58被v或i占据，h66被k或r占据，h67被a或v占据，h75被s或t占据，h76被n或d占据，h80被l或m占据，h81被q或e占据，h83被t或r占据，h91被f或y占据，h93被s占据，h94被t占据，h108被t或l占据，h109被l或v占据。30.如权利要求29所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h91、h93和h94分别被f、s和t占据。31.如权利要求29所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h1、h5、h11、h20、h23、h38、h42、h43、h66、h75、h76、h81、h91、h93、h94、h108和h109分别被e、v、v、i、k、r、g、k、r、t、d、e、f、s、t、l和v占据。32.如权利要求29所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h1、h5、h11、h17、h20、h23、h38、h42、h43、h58、h66、h75、h76、h80、h81、h83、h93、h94、h108和h109分别被e、v、v、t、i、k、r、g、k、i、r、t、d、m、e、r、s、t、l和v占据。
33.如权利要求29所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h1、h5、h11、h17、h20、h23、h28、h38、h42、h43、h58、h66、h67、h75、h76、h80、h81、h83、h93、h94、h108和h109分别被e、v、v、t、i、k、t、r、g、k、i、r、v、t、d、m、e、r、s、t、l和v占据。34.如权利要求29所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h1、h5、h11、h17、h20、h23、h28、h38、h42、h43、h54、h56、h58、h66、h67、h75、h76、h80、h81、h83、h93、h94、h108和h109分别被e、v、v、t、i、k、t、r、g、k、d、e、i、r、v、t、d、m、e、r、s、t、l和v占据。35.如权利要求29所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h1、h5、h11、h17、h20、h23、h28、h38、h42、h43、h54、h56、h66、h67、h75、h76、h80、h81、h83、h91、h93、h94、h108和h109分别被e、v、v、t、i、k、t、r、g、k、d、e、r、v、t、d、m、e、r、f、s、t、l和v占据。36.如权利要求29所述的人源化抗体，所述vh区中的所提供的位置h1、h5、h11、h17、h20、h23、h28、h38、h42、h43、h54、h56、h66、h67、h75、h76、h80、h81、h83、h93、h94、h108和h109分别被e、v、v、t、i、k、t、r、g、k、d、e、r、v、t、d、m、e、r、s、t、l和v占据。37.如权利要求14至16中任一项所述的人源化抗体，其中所述vl区中的以下位置中的至少一个位置被如所指定的氨基酸占据：l7被s占据，l10被s占据，l15被l占据，l83被v占据，l86被y占据，并且l106被i占据。38.如权利要求37所述的人源化抗体，所提供的位置l7、l10、l15、l83、l86和l106分别被s、s、l、v、y和y占据。39.如权利要求14至16中任一项所述的人源化抗体，其中所述vl区中的以下位置中的至少一个位置被如所指定的氨基酸占据：l7为t或s，l10为t或s，l15为i或l，l17为q或e，l24为k或r，l37为l或q，l45为k或r，l83为l或v，l86为h或y，l100为a或q，l106为l或i。40.如权利要求39所述的人源化抗体，所述vl区中的所提供的位置l7、l10、l15、l83、l86和l106分别被s、s、l、v、y和i占据。41.如权利要求39所述的人源化抗体，所述vl区中的所提供的位置l7、l10、l15、l17、l24、l37、l45、l83、l86、l100和l106分别被s、s、l、e、r、q、r、v、y、q和i占据。42.如权利要求14所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:76至80和seq id no:90至91中的任一者的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83至85中的任一者的氨基酸序列。43.如权利要求15所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:76至80中的任一者的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83至85中的任一者的氨基酸序列。44.如权利要求16所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:90至91中的任一者的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83至85中的任一者的氨基酸序列。45.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:76的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83的氨基酸序列。46.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:76的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:84的氨基酸序列。47.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:76的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:85的氨基酸序列。
48.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:77的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83的氨基酸序列。49.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:77的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:84的氨基酸序列。50.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:77的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:85的氨基酸序列。51.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:78的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83的氨基酸序列。52.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:78的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:84的氨基酸序列。53.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:78的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:85的氨基酸序列。54.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:79的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83的氨基酸序列。55.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:79的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:84的氨基酸序列。56.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:79的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:85的氨基酸序列。57.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:80的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83的氨基酸序列。58.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:80的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:84的氨基酸序列。59.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:80的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:85的氨基酸序列。60.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:90的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83的氨基酸序列。61.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:90的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:84的氨基酸序列。62.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:90的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:85的氨基酸序列。63.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:91的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:83的氨基酸序列。64.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:91的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:84的氨基酸序列。65.如权利要求42所述的人源化抗体，其中所述成熟重链可变区具有seq id no:91的氨基酸序列，并且所述成熟轻链可变区具有seq id no:85的氨基酸序列。66.如权利要求1
‑
13中任一项所述的抗体，其中所述抗体是嵌合抗体。67.如权利要求1
‑
13中任一项所述的抗体，其中所述抗体是饰面抗体。68.如权利要求1
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67中任一项所述的抗体，其为完整抗体。
no:104的序列。92.如权利要求90所述的载体，其中所述重链恒定区由seq id no:105的序列编码，并且所述轻链恒定区由seq id no:106的序列编码。93.如权利要求89所述的载体，其中所述抗体是scfv。94.如权利要求89所述的载体，其中所述抗体是fab片段。95.如权利要求89所述的载体，其中所述一种或多种调节序列包括启动子、增强子、核糖体结合位点和转录终止信号中的一者或多者。96.如权利要求89所述的载体，其中所述核酸还编码与所述成熟重链可变区和所述成熟轻链可变区融合的信号肽。97.如权利要求89所述的载体，其中所述核酸经密码子优化成在宿主细胞中表达。98.如权利要求89所述的载体，其中所述一种或多种调节序列包括真核启动子。99.如权利要求89所述的载体，其中所述核酸还编码可选择的基因。100.一种重组表达载体，其包含权利要求85所述的核酸。101.一种利用权利要求100所述的重组表达载体转化的宿主细胞。102.一种宿主细胞，其包含如权利要求89所述的核酸。103.一种使抗体在哺乳动物细胞中表达的方法，其包括将根据权利要求89所述的核酸并入到转基因动物的基因组中，由此使所述抗体表达。104.第一载体和第二载体，所述第一载体和所述第二载体分别包含编码成熟重链可变区和成熟轻链可变区的核酸，所述核酸各自与一种或多种调节序列可操作地连接，以实现如权利要求1至83中任一项所述的抗体在哺乳动物细胞中的表达。105.如权利要求104所述的载体，其中所述核酸分别还编码与所述成熟重链可变区融合的重链恒定区以及与所述成熟轻链可变区融合的轻链恒定区。106.如权利要求105所述的载体，其中所述重链恒定区具有seq id no:103的序列，所述seq id no:103的序列具有或不具有所述c
‑
末端赖氨酸；并且所述轻链恒定区具有seq id no:104的序列。107.如权利要求105所述的载体，其中所述重链恒定区由seq id no:105的序列编码，并且所述轻链恒定区由seq id no:106的序列编码。108.一种宿主细胞，其包含权利要求104所述的核酸。109.一种使抗体在哺乳动物细胞中表达的方法，其包括将根据权利要求104所述的核酸并入到转基因动物的基因组中，由此使所述抗体表达。110.一种将小鼠抗体人源化的方法，所述方法包括：(a)选择一种或多种受体抗体；(b)鉴定所述小鼠抗体的待保留的氨基酸残基；(c)合成编码包含小鼠抗体重链的cdr的人源化重链的核酸和编码包含小鼠抗体轻链的cdr的人源化轻链的核酸；以及(d)使所述核酸在宿主细胞中表达以产生人源化抗体；其中所述小鼠抗体是3d6，其中3d6的特征在于seq id no:7的成熟重链可变区和seq id no:11的成熟轻链可变区。111.一种产生人源化、嵌合或饰面抗体的方法，所述方法包括：
(a)对用编码所述抗体的重链和轻链的核酸转化的细胞进行培养，以使所述细胞分泌所述抗体；以及(b)从细胞培养基中纯化出所述抗体；其中所述抗体是3d6的人源化、嵌合，或饰面形式。112.一种制备产生人源化、嵌合或饰面抗体的细胞系的方法，所述方法包括：(a)将编码抗体的重链和轻链的载体以及可选择的标志物引入到细胞中；(b)使所述细胞在一定条件下增殖以选择所述载体的拷贝数增加的细胞；(c)从所选细胞中分离出单个细胞；以及(d)对由基于抗体的产量选择的单个细胞克隆的细胞建库；其中所述抗体是3d6的人源化、嵌合，或饰面形式。113.如权利要求112所述的方法，其还包括使所述细胞在选择性条件下增殖并且筛选以至少100mg/l/106个细胞/24小时的量天然地表达和分泌所述抗体的细胞系。114.一种抑制或减少罹患tau介导的淀粉样变性或有罹患tau介导的淀粉样变性风险的受试者中的tau聚集的方法，其包括向所述受试者施用权利要求1
‑
84中任一项所述的抗体的有效方案，从而抑制或减少所述受试者中的tau聚集。115.如权利要求114所述的方法，其中所述抗体是3d6的人源化型式。116.一种在受试者中治疗tau相关疾病或实现tau相关疾病的预防的方法，其包括施用如权利要求1
‑
84中任一项所限定的抗体的有效方案，从而治疗所述疾病或实现所述疾病的预防。117.如权利要求116所述的方法，其中所述tau相关疾病是阿尔茨海默病、唐氏综合征、轻度认知障碍、原发性年龄相关性tau蛋白病、脑炎后帕金森病、创伤后痴呆或拳击员痴呆、皮克氏病、c型尼曼
‑
皮克病、核上性麻痹、额颞痴呆、额颞叶变性、嗜银颗粒病、球状胶质tau蛋白病、关岛肌萎缩性侧索硬化/帕金森痴呆复征、皮质基底节变性(cbd)、路易体痴呆、阿尔茨海默病的路易体变异(lbvad)、慢性创伤性脑病(cte)、球状胶质tau蛋白病(ggt)，或进行性核上麻痹(psp)。118.如权利要求117所述的方法，其中所述tau相关疾病是阿尔茨海默病。119.如权利要求118所述的方法，其中所述患者是apoe4携带者。120.一种减少tau的异常传播的方法，其包括施用如权利要求1
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84中任一项所限定的抗体的有效方案，并且从而减少tau的传播。121.一种诱导tau的吞噬的方法，其包括施用如权利要求1
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84中任一项所限定的抗体的有效方案，并且从而诱导tau的吞噬。122.一种抑制tau聚集或沉积的方法，其包括施用如权利要求1
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84中任一项所限定的抗体的有效方案，从而抑制tau聚集或沉积。123.一种抑制tau缠结的形成的方法，其包括施用如权利要求1
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84中任一项所限定的抗体的有效方案。124.一种在罹患与tau聚集或沉积相关联的疾病或有罹患所述疾病风险的受试者中检测tau蛋白沉积物的方法，其包括向受试者施用如权利要求1
‑
84中任一项所限定的抗体，以及检测所述受试者中与tau结合的抗体。125.如权利要求124所述的方法，其中所述与tau聚集或沉积相关联的疾病是阿尔茨海
默病、唐氏综合征、轻度认知障碍、原发性年龄相关性tau蛋白病、脑炎后帕金森病、创伤后痴呆或拳击员痴呆、皮克氏病、c型尼曼
‑
皮克病、核上性麻痹、额颞痴呆、额颞叶变性、嗜银颗粒病、球状胶质tau蛋白病、关岛肌萎缩性侧索硬化/帕金森痴呆复征、皮质基底节变性(cbd)、路易体痴呆、阿尔茨海默病的路易体变异(lbvad)、慢性创伤性脑病(cte)、球状胶质tau蛋白病(ggt)，或进行性核上麻痹(psp)。126.如权利要求124所述的方法，其中所述抗体通过静脉内注射施用到所述受试者的身体内。127.如权利要求124所述的方法，其中所述抗体通过颅内注射或通过钻取穿透所述受试者的颅骨的孔而直接施用于所述受试者的脑部。128.如权利要求124所述的方法，其中所述抗体被标记。129.如权利要求128所述的方法，其中所述抗体用荧光标记、顺磁性标记或放射性标记进行了标记。130.如权利要求129所述的方法，其中所述放射性标记使用正电子发射断层摄影术(pet)或单光子发射计算机断层摄影术(spect)来检测。131.一种在正接受与tau聚集或沉积相关联的疾病的治疗的受试者中测量治疗功效的方法，其包括：(a)在通过向受试者施用如权利要求1
‑
84中任一项所限定的抗体进行治疗之前测量所述受试者中tau蛋白沉积物的第一水平，并且检测所述受试者中与tau结合的抗体的第一量，(b)向所述受试者施用所述治疗，(c)在通过向受试者施用所述抗体进行治疗之后测量所述受试者中tau蛋白沉积物的第二水平，并且检测所述受试者中与tau结合的抗体，其中tau蛋白沉积物的水平降低表明对治疗有积极应答。132.一种在正接受与tau聚集或沉积相关联的疾病的治疗的受试者中测量治疗功效的方法，其包括：(a)在通过向受试者施用如权利要求1
‑
84中任一项所限定的抗体进行治疗之前测量所述受试者中tau蛋白沉积物的第一水平，并且检测所述受试者中与tau结合的抗体的第一量，(b)向所述受试者施用所述治疗，(c)在通过向受试者施用所述抗体进行治疗之后测量所述受试者中tau蛋白沉积物的第二水平，并且检测所述受试者中与tau结合的抗体的第二量，其中tau蛋白沉积物的水平没有变化或tau蛋白沉积物的少量增加表明对治疗有积极应答。
技术总结
本发明提供了特异性地结合tau的抗体。所述抗体抑制或延迟与tau相关联的病理和相关联的症状恶化。的症状恶化。的症状恶化。
技术研发人员：塔洛陈
受保护的技术使用者：普罗塞纳生物科学有限公司
技术研发日：2019.11.08
技术公布日：2021/9/27