乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的制备及应用方法与流程

本发明属于高分子药物载体技术领域，特别是一种乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的制备及应用方法。

背景技术：

水凝胶由于良好的生物相容性、高的水含量以及较高的力学强度，被广泛的应用在医疗领域中可植入组织框架、植入感应器的表面涂层、伤口的敷料以及药物输送的载体等。特别是纳米尺寸的水凝胶粒子(纳米凝胶)由于具有较高的药物负载量，基于增强渗透与保留效应富集到肿瘤组织的能力，以及对环境因素如温度、ph或者氧化还原的响应能力，受到科研工作者的广泛关注。

对于负载药物的纳米凝胶而言，在生理环境下保持药物少释放或零释放，而在肿瘤微环境中高效快速的释放药物，不仅可以降低载药纳米凝胶的对正常组织的毒副作用，还可极大地增强对肿瘤的杀伤效果。为了实现药物的可控释放，可降解的交联剂常被引入到医疗领域中的聚合物网络中。通过肿瘤微环境的刺激响应诱发可降解交联剂的断裂，并进一步造成纳米凝胶的降解，能实现药物的充分释放。在肿瘤中，癌细胞的异常增殖，以及肿瘤血管结构的改变和功能的缺失，导致肿瘤内氧分子消耗和供给的失衡。通常肿瘤组织内氧分子的扩散距离在100～200μm左右，肿瘤内距离有效血管大于此距离的区域通常会出现显著的乏氧情况。一般来说，肿瘤组织内轻度乏氧区域的氧分压低于3％，重度乏氧区域的氧分压低于1％，在某些远离血管的区域氧分压接近0％，显著低于血管动脉(>13％)和血管静脉(>5％)。因此，利用肿瘤组织与正常组织之间氧气浓度的显著性差异，设计一种在正常氧气浓度时保持结构稳定，在肿瘤组织乏氧环境时结构发生断裂的乏氧可降解交联剂，可实现纳米凝胶在正常组织药物的低释放与肿瘤组织药物的快速释放。然而现有技术中，还不具有合成的乏氧可降解交联剂，因此也就无法制得基于乏氧可降解交联剂的纳米凝胶，无法为肿瘤的治疗提供更好的支持。

技术实现要素：

为了克服现有技术中，因不具有合成的乏氧可降解交联剂，进而无法制得基于乏氧可降解交联剂的纳米凝胶，无法为肿瘤的治疗提供更好支持的弊端，本发明提供了一种经简单且快速的方法制得乏氧可降解交联剂，并基于乏氧可降解交联剂制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶，制得的成品负载药物后，应用于肿瘤治疗中，能在血液循环过程中保持高稳定性且具有隐匿的能力，不易被内皮网状系统识别与吞噬，而在到达肿瘤乏氧环境后，纳米凝胶快速地降解并释放负载的药物，从而有效地杀伤肿瘤细胞，为癌症的治疗提供了有力技术支撑的乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的制备及应用方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的制备方法，其特征在于，首先利用酰胺反应制备含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂，其次采用回流沉淀聚合的方法，以磷酰胆碱两性离子单体和偶氮类乏氧可降解引发剂、在有机溶剂反应下得到乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶；所述乏氧可降解交联剂包括偶氮苯基团和两个碳碳双键基团，采用的原料如下，其中以偶氮苯-4,4-二羧酸、甲基丙烯酸或丙烯酸中的一种为原料一，以对二氨基偶氮苯、2-氨基乙基甲基丙烯酸酯、2-氨基乙基丙烯酸酯或烯丙胺盐酸盐中的一种为原料二，以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edc)、n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)或4-二甲氨基吡啶(dmap)中的一种为催化剂，以n,n’-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈、丙酮等中的一种为溶剂，上述原料通过酰胺反应制备方法得到乏氧可降解交联剂；所述乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶，制备的原料如下，磷酰胆碱两性离子单体、交联剂、偶氮类引发剂、有机溶剂，上述原料采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶。

进一步地，所述制备含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂中，原料一优选偶氮苯-4,4-二羧酸，原料二优选2-氨基乙基甲基丙烯酸酯，催化剂优选edc与dmap，溶剂优选n,n’-二甲基甲酰胺。

进一步地，所述制备含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂中，原料一的浓度为5mgml^-1～500mgml^-1，原料二的浓度为5mgml^-1～500mgml^-1，edc的浓度为10mgml^-1～1000mgml^-1，dmap的浓度为0.5mgml^-1～50mgml^-1，n,n’-二甲基甲酰胺的体积为10～1000ml。

进一步地，所述利用酰胺反应制备含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂方法如下，(1)取原料一、原料二、edc和dmap溶解于有机溶剂中，超声3分钟，分散均匀；(2)处理后原料一、原料二加入反应瓶内，将反应瓶置换氮气后在室温下搅拌反应48h，浓缩有机相至40ml，而后将浓缩液分置于4个容量为50ml的离心管中，加水40ml后摇匀离心，倾去上清液而后再加水洗涤沉淀两次；(3)将沉淀物溶于四氢呋喃内并用硫酸钠干燥，然后经硅胶柱层析(二氯甲烷:四氢呋喃＝19:1)得到纯净的棕红色粉末即为含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂。

进一步地，所述采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶中，磷酰胆碱两性离子单体为2-甲基丙烯酰氧基乙氧基磷酰胆碱(mpc)；交联剂为合成的乏氧可降解交联剂。

进一步地，所述采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶中，偶氮类引发剂为偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈和偶氮二异丁酸二甲酯等，优选偶氮二异丁腈；

进一步地，所述采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶中，有机溶剂为乙腈、乙醇和二甲基亚砜等，或者为这几者的混合物，优选乙腈。

进一步地，所述采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶中，mpc的浓度为1mgml^-1～50mgml^-1，乏氧可降解交联剂的浓度为0.2mgml^-1～10mgml^-1，偶氮类引发剂的浓度为0.01mgml^-1～1.0mgml^-1。

进一步地，所述采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶方法如下，(1)取mpc、乏氧可降解交联剂和偶氮类引发剂溶解于有机溶剂中，超声3分钟，分散均匀；(2)通氮气10分钟后升温到100℃，在此温度和氮气氛围下反应1h，冷却后高速离心，除去有机溶剂，加水分散后再离心，水洗过程重复三次，将得到的样品冷冻干燥，即得到乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品。

乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的应用方法，采用乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品作为载体，采用纳米凝胶负载抗肿瘤药物治疗肿瘤，抗肿瘤药物为阿霉素、喜树碱、紫杉醇、多西紫杉醇、顺铂中的一种或多种。

进一步地，所述乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品载药量为3％～30％。

进一步地，所述抗肿瘤药物通过溶胀吸附或者有机溶剂挥发法载入乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品中。

本发明有益效果是：本发明乏氧可降解交联剂合成简单方便，有利于批量化的生产。制备得到的乏氧可降解纳米凝胶具有良好的生物相容性、较长的血液循环时间、良好的免疫相容性。本发明负载抗肿瘤药物的纳米凝胶在生理环境下24小时内释放的药物低于10％，而在肿瘤乏氧环境下24小时内释放的药物超过80％。负载抗肿瘤药物的纳米凝胶在乏氧条件下具有比生理条件下显著增强的人肝癌肿瘤等细胞(smmc-7721)杀伤效果。负载抗肿瘤药物的纳米凝胶经人体尾静脉注射后，可有效的在肿瘤组织富集。负载的化疗药物阿霉素等的纳米凝胶在正常生理组织保持稳定，几乎不释放药物；到达乏氧的肿瘤区域后纳米凝胶迅速解体，快速的释放药物，因此，负载药物的纳米凝胶可选择性的杀伤肿瘤组织而对正常组织几乎没有毒副作用，在抗肿瘤药物领域具有良好的应用价值。本发明为癌症的治疗提供了有力技术支撑。基于上述，本发明具有好的应用前景。

附图说明

图1为本发明乏氧可降解交联剂的核磁氢谱。

图2为本发明乏氧可降解交联剂的质谱。

图3为本发明乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的透射电镜图，比例尺-200(单位：纳米，nm)。

图4为本发明乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的水合粒径分布图。

图5为本发明乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的乏氧降解图。

图6为本发明乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的药物释放图。

图7为本发明空白的乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶对293t细胞的毒性实验图。

图8为本发明载药的乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶对smmc-7721细胞的毒性实验图。

图9载药纳米凝胶在荷hepg2肿瘤小鼠中的富集示意图。

图10载药纳米凝胶对荷hepg2肿瘤小鼠的抑制效果示意图。

图11是乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的制备方法流程框图。

具体实施方式

图11所示，乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的制备方法，首先利用酰胺反应制备含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂，其次采用回流沉淀聚合的方法，以磷酰胆碱两性离子单体和偶氮类乏氧可降解引发剂、在有机溶剂反应下得到乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶；所述乏氧可降解交联剂包括偶氮苯基团和两个碳碳双键基团，采用的原料如下，其中以偶氮苯-4,4-二羧酸、甲基丙烯酸或丙烯酸中的一种为原料一，以对二氨基偶氮苯、2-氨基乙基甲基丙烯酸酯、2-氨基乙基丙烯酸酯或烯丙胺盐酸盐中的一种为原料二，以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edc)、n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)或4-二甲氨基吡啶(dmap)中的一种为催化剂，以n,n’-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈、丙酮等中的一种为溶剂，上述原料通过酰胺反应制备方法得到乏氧可降解交联剂；所述乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶，制备的原料如下，磷酰胆碱两性离子单体、交联剂、偶氮类引发剂、有机溶剂，上述原料采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶。

图11所示，制备含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂中，原料一优选偶氮苯-4,4-二羧酸，原料二优选2-氨基乙基甲基丙烯酸酯，催化剂优选edc与dmap，溶剂优选n,n’-二甲基甲酰胺。制备含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂中，原料一的浓度为5mgml^-1～500mgml^-1，原料二的浓度为5mgml^-1～500mgml^-1，edc的浓度为10mgml^-1～1000mgml^-1，dmap的浓度为0.5mgml^-1～50mgml^-1，n,n’-二甲基甲酰胺的体积为10～1000ml。利用酰胺反应制备含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂方法如下，(1)取原料一、原料二、edc和dmap溶解于有机溶剂中，超声3分钟，分散均匀；(2)处理后原料一、原料二加入反应瓶内，将反应瓶置换氮气后在室温下搅拌反应48h，浓缩有机相至40ml，而后将浓缩液分置于4个容量为50ml的离心管中，加水40ml后摇匀离心，倾去上清液而后再加水洗涤沉淀两次；(3)将沉淀物溶于四氢呋喃内并用硫酸钠干燥，然后经硅胶柱层析(二氯甲烷:四氢呋喃＝19:1)得到纯净的棕红色粉末、即为含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂。

图11所示，采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶中，磷酰胆碱两性离子单体为2-甲基丙烯酰氧基乙氧基磷酰胆碱(mpc)；交联剂为合成的乏氧可降解交联剂；采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶中，偶氮类引发剂为偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈和偶氮二异丁酸二甲酯等，优选偶氮二异丁腈；采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶中，有机溶剂为乙腈、乙醇和二甲基亚砜等，或者为这几者的混合物，优选乙腈。采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶中，mpc的浓度为1mgml^-1～50mgml^-1，乏氧可降解交联剂的浓度为0.2mgml^-1～10mgml^-1，偶氮类引发剂的浓度为0.01mgml^-1～1.0mgml^-1。采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶方法如下，(1)取mpc、乏氧可降解交联剂和偶氮类引发剂溶解于有机溶剂中，超声3分钟，分散均匀；(2)通氮气10分钟后升温到100℃，在此温度和氮气氛围下反应1h，冷却后高速离心，除去有机溶剂，加水分散后再离心，水洗过程重复三次，将得到的样品冷冻干燥，即得到乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品。

乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的应用方法，采用乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品作为载体，采用纳米凝胶负载抗肿瘤药物治疗肿瘤，抗肿瘤药物为阿霉素、喜树碱、紫杉醇、多西紫杉醇、顺铂中的一种或多种。乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品载药量为3％～30％。抗肿瘤药物通过溶胀吸附或者有机溶剂挥发法载入所述乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品中。

图11所示，本发明制备含偶氮苯基团的乏氧可降解交联剂中，实际操作过程如下，先将偶氮苯-4,4-二羧酸(11.4mmol,3.07g)、甲基丙烯酸乙胺盐酸盐(27.3mmol,5.00g)、edc(27.3mmol,5.24g)，dmap(2.85mmol,0.35g)和无水n,n’-二甲基甲酰胺(100ml)加入反应瓶，反应瓶内置换氮气后在室温下搅拌反应48h。然后将搅拌反应后原料浓缩有机相至40ml，而后将浓缩液分置于4个容量为50ml的离心管中，加水40ml后摇匀离心，倾去上清液而后再加水洗涤沉淀两次得到沉淀物。将沉淀物沉淀溶于thf(四氢呋喃)并用硫酸钠干燥，染回经硅胶柱层析(二氯甲烷:thf＝19:1)得到纯净的乏氧可降解交联剂1g成品，产率18％。图1为制备得到的乏氧可降解交联剂成品的核磁氢谱，图2为制备得到的乏氧可降解交联剂的质谱，核磁氢谱和质谱表明乏氧可降解交联剂成功的被制备。

图11所示，本发明采用回流沉淀聚合方法制得乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶中，实际操作过程如下，先取600mgmpc，120mg制得的乏氧可降解交联剂，8mgaibn(偶氮类引发剂)溶于80ml乙腈中，超声分散3分钟后倒入三口烧瓶，在氮气氛围下加热至100℃，反应2小时后停止加热，然后经12000rpm离心分离得到纳米凝胶，加水分散水洗三次，冷冻干燥，得到乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品。图3为制得的纳米凝胶的透射电镜图片，纳米凝胶的直径为115±5nm。图4为制得的纳米凝胶的水合粒径分布，纳米凝胶的水合粒径为168nm，粒径多分散系数为0.06。图5中所示(图5为纳米凝胶在正常环境与乏氧环境中的降解行为图)，将乏氧可降解的磷酰胆碱聚合物纳米凝胶成品(1mgml^-1)置于正常环境或者乏氧环境中(通入氩气)，每隔一定的时间间隔，采用动态光散射仪检测样品散射光强随时间的变化，纳米凝胶的相对浊度为纳米凝胶的实时浊度与初始浊度的比值，纳米凝胶的降解程度与纳米凝胶的相对浊度呈正相关，表明纳米凝胶在正常氧气浓度下保持高度的稳定而在乏氧环境中快速的降解。

本发明乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶的应用方法操作如下，先称取3mg阿霉素，10mg纳米凝胶分散到3ml去离子水中，滴加0.01m的氢氧化钠溶液至体系ph为8-9，加锡箔纸包裹避光，旋转摇匀24小时后，离心分离纳米凝胶，水洗三次除去附着在纳米凝胶表面的阿霉素，即得到负载阿霉素的纳米凝胶。称取0.8mg紫杉醇，溶解于2ml氯仿中，将纳米凝胶以3mgml^-1的浓度溶胀于去离子水中，超声混匀15分钟，旋蒸除去氯仿，48小时后将上述载药凝胶置入超滤管中，12000rpm下20分钟离心水洗三次，收集上清液即得到负载紫杉醇的纳米凝胶。

本发明以ph7.4的pbs缓冲溶液或持续通入氩气的pbs缓冲溶液为释药介质，研究负载药物的纳米凝胶释放行为，具体操作步骤如下：取1mg负载阿霉素的纳米凝胶分散在1ml相应的缓冲溶液中，转移至截留分子量为14000da的透析袋中，然后将透析袋扎紧后置于100ml相应的缓冲溶液中，设置温度为37℃并轻微磁力搅拌。在特定的时间间隔从释放介质中取2ml溶液，同时补加2ml对应的新鲜缓冲溶液。以紫外光谱测定释放介质中的阿霉素含量。图6为载药纳米凝胶在正常环境与乏氧环境中的药物释放行为，表明载药纳米凝胶在正常氧气环境下几乎不释放药物而在乏氧环境下快速地释放药物。

本发明没有负载药物的空白纳米凝胶的毒性实验操作如下：取生长状态处于对数期的hepg2细胞(hepg2细胞是来源于一个15岁白人的肝癌组织)，分别以1×10⁴个/孔的密度接种于96孔培养板孔内，加入200μl培养液，置于37℃、含5％co2、湿度>95％培养箱中培养24h。弃去培养液，加入含不同浓度的纳米凝胶(0、10、50、100、200、500和1000μg/ml)培养液100μl至孔内，每一个浓度设4个复孔，放入培养箱培养24h。培养24h后，弃去培养液，pbs(缓冲液)清洗一遍，每孔加入20μl的mtt(噻唑蓝)溶液(5mgml^-1，溶于pbs7.4中)，继续培养4h。仔细移除每孔中的上清液，并加入150μldmso(二甲基亚砜)溶解紫色的甲臜，避光温和震荡15min后，用酶标仪测定每孔490nm处的吸光度。以不含纳米凝胶培养基的细胞作为阴性对照，实验组测得的吸光度与对照组吸光度之比定义为细胞存活率。图7为空白纳米凝胶对hepg2细胞的毒性图，表明在0～1000μg/ml的浓度范围内空白纳米凝胶对hepg2细胞几乎无毒。

本发明负载药物的载药纳米凝胶的毒性实验操作如下：取生长状态处于对数期的hepg2细胞，分别以1×10⁴个/孔的密度接种于96孔培养板孔内，加入200μl培养液，置于37℃、含5％co2、湿度>95％培养箱中培养24h。弃去培养液，加入负载药物的纳米凝胶至孔内，每一个浓度设4个复孔，放入培养箱，在正常环境和乏氧环境中培养24h。弃去培养液，pbs清洗一遍，每孔加入20μl的mtt溶液(5mgml^-1，溶于pbs7.4中)，继续培养4h。仔细移除每孔中的上清液，并加入150μldmso溶解紫色的甲臜，避光温和震荡15min后，用酶标仪测定每孔490nm处的吸光度。以不含纳米凝胶或负载药物培养基的细胞作为阴性对照，实验组测得的吸光度与对照组吸光度之比定义为细胞存活率。图8为载药纳米凝胶对hepg2细胞的毒性评估，结果表明在乏氧环境中载药纳米凝胶对hepg2细胞具有更强的杀伤效果。

本发明进一步实验中，选取balb/c(白变种实验室老鼠)裸鼠(5-6周，约为20g)，通过皮下注射将含有约2×10⁶个hepg2细胞的生理盐水注射到裸鼠后腿部位，待小鼠瘤体体积约为100mm³大小时，尾静脉注射近红外荧光分子cy5标记的乏氧降解纳米凝胶，在不同的时刻通过小动物活体荧光成像拍摄小鼠肿瘤部位近红外荧光强度的变化；图9是载药纳米凝胶在荷hepg2肿瘤小鼠中的富集图。本发明进一步实验中，选取balb/c裸鼠(5-6周，约为20g)，通过皮下注射将含有约2×10⁶个hepg2细胞的生理盐水注射到裸鼠后腿部位，待小鼠瘤体体积约为100mm³大小时，将荷瘤裸鼠随机分为4组，每组5只，分别为生理盐水组、阿霉素组、载药还原降解纳米凝胶组和载药乏氧降解纳米凝胶组，每组尾静脉注射剂量为2mgdox/kg，对照组注射等体积的生理盐水，14天后将老鼠处死，剥离肿瘤后拍照；图10载药纳米凝胶对荷hepg2肿瘤小鼠的抑制效果图。从图10清楚可见载药还原降解纳米凝胶组的肿瘤抑制效果远低于载药乏氧降解纳米凝胶组，生理盐水组效果低于阿霉素组，阿霉素组低于药还原降解纳米凝胶组，充分表明了本发明基于乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶负载药物后能达到有效的肿瘤抑制及治疗效果。

本发明中，所述的乏氧可降解交联剂分子量为100～1000gmol^-1。纳米凝胶水合粒径在10～1000nm，zeta(电位仪)电位在-5～5mv。纳米凝胶在肿瘤乏氧环境下快速的降解，降解产物的分子量为500gmol^-1-10000gmol^-1。负载抗肿瘤药物的纳米凝胶在生理环境下24小时内释放的药物低于10％，而在肿瘤乏氧环境下24小时内释放的药物超过80％。本发明中，不负载抗肿瘤药物的纳米凝胶在1000μgml^-1的浓度时对人肾上皮细胞(293t)几乎无毒(存活率>90％)。负载抗肿瘤药物的纳米凝胶在乏氧条件下具有比生理条件下显著增强的人肝癌肿瘤细胞(smmc-7721)杀伤效果。与现有技术相比较，本发明乏氧可降解交联剂及乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶具有以下优点：乏氧可降解交联剂在生理环境下保持稳定而在肿瘤乏氧条件下可快速的降解；乏氧可降解交联剂制备简单且快速；乏氧可降解磷酰胆碱聚合物纳米凝胶尺寸均一，在生理环境下保持稳定而在肿瘤乏氧条件下快速降解；载药的纳米凝胶在生理环境下几乎不释放负载的药物而在肿瘤乏氧条件下快速地释放负载的药物；纳米凝胶可以特异性的在肿瘤组织富集。本发明乏氧可降解交联剂合成简单方便，有利于批量化的生产。制备得到的乏氧可降解纳米凝胶具有良好的生物相容性、较长的血液循环时间、良好的免疫相容性。负载抗肿瘤药物的纳米凝胶经人体尾静脉注射后，可有效的在肿瘤组织富集。负载的化疗药物阿霉素等的纳米凝胶在正常生理组织保持稳定，几乎不释放药物；到达乏氧的肿瘤区域后纳米凝胶迅速解体，快速的释放药物，因此，负载药物的纳米凝胶可选择性的杀伤肿瘤组织而对正常组织几乎没有毒副作用，在抗肿瘤药物领域具有良好的应用价值。本发明为癌症的治疗提供了有力技术支撑。

以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征及本发明的优点，，对于本领域技术人员而言，显然本发明限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。