KRASG12C抑制剂及其用途

kras g12c抑制剂及其用途
1.相关申请的交叉引用本技术要求于2019年5月20日提交的美国临时申请第62/850289号的权益，该申请通过引用以其整体并入本文。


背景技术：

2.已知 kras中的突变是致癌的，并且在胰腺癌、肺癌、结直肠癌、胆囊癌、甲状腺癌和胆管癌中很常见。kras中甘氨酸12突变为半胱氨酸是非小细胞肺癌和结直肠癌中相对常见的基因型。该突变提供了一种针对突变型kras的选择性共价抑制策略，并免除了野生型kras，从而提供了针对癌细胞的特异性。存在对开发新的用于治疗kras g12c介导的癌症（即完全或部分由kras g12c突变介导的癌症）的kras g12c抑制剂的需求。本发明的化合物和组合物提供了用于选择性抑制kras g12c和用于治疗癌症、特别是那些由kras g12c突变介导的癌症的手段。
3.概述在某些实施方案中，本发明涉及具有下述结构的化合物：(a) 式i的结构：或其药学上可接受的盐，其中：*是季碳原子；a是4-12元的饱和或部分饱和的单环、桥连或螺环的环，其被一个r
8b
和一个r
8c
取代；b是5-7元的饱和或部分饱和的环烷基或杂环基；c是任选被一个或多个r4取代的芳基或杂芳基；x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；
y1是y
1a
和y2是y
2a
；或y1是*—y
1b
—y
1c
和y2是y
2a
；或y1是y
1a
和y2是*—y
2b
—y
2c
；或y1是*—y
1dy1e
和y2是y
2a
；或y1是y
1a
和y2是*—y
2dy2e
；或y1是*y
1a
—y
1b
—y
1c
和y2是键；或y1是键和y2是*y
2a
—y
2b
—y
2c
；y
1a
和y
2a
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1b
、y
1c
、y
2b
和y
2c
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1d
、y
1e
、y
2d
和y
2e
各自独立地是c(r3)或n；条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1b
和y
2a
两者都不能是杂原子，和条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，和条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；条件是y
1d
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
2d
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子；和条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4在每种情况下独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8b
是h、c
1-c3烷基-cn或c
1-c3烷基-och3；r
8c
是h或c
1-c4烷基；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r
8e
是h、氰基、c
1-c3烷基、羟基烷基、杂烷基、c
1-c3烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、(ch2)mn(r3)2、n(r3)2、c(o)n(r3)2、n(h)c(o)c
1-c3烷基、ch2n(h)c(o)c
1-c3烷基、杂芳基或杂环基；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；m在每次出现时独立地是1、2或3；n是0、1、2或3；和p是0或1；或(b) 式ia的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：*是季碳原子；b是5-7元的饱和或部分饱和的环烷基或杂环基；x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y1是y
1a
和y2是y
2a
；或y1是*—y
1b
—y
1c
和y2是y
2a
；或y1是y
1a
和y2是*—y
2b
—y
2c
；或y1是*—y
1dy1e
和y2是y
2a
,；或y1是y
1a
和y2是*—y
2dy2e
；或y1是*y
1a
—y
1b
—y
1c
和y2是键；或y1是键和y2是*y
2a
—y
2b
—y
2c
；y
1a
和y
2a
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1b
、y
1c
、y
2b
和y
2c
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1d
、y
1e
、y
2d
和y
2e
各自独立地是c(r3)或n；条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1b
和y
2a
两者都不能是杂原子，并且条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，并且条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；条件是y
1d
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
2d
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是杂原子，并且条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子；和条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；
r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8b
是h、c
1-c3烷基-cn或c
1-c3烷基-och3；r
8c
是h或c
1-c4烷基；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r
8e
是h、氰基、c
1-c3烷基、羟基烷基、杂烷基、c
1-c3烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、(ch2)mn(r3)2、n(r3)2、c(o)n(r3)2、n(h)c(o)c
1-c3烷基、ch2n(h)c(o)c
1-c3烷基、杂芳基或杂环基；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；m在每次出现时独立地是1、2或3；和n是0、1、2或3；或(c) 式ii的结构：或其药学上可接受的盐，其中：x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1a
和y
2a
各自独立地是(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2，条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；
r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；和m，在存在时，为1；或(d) 式iii的结构：或其药学上可接受的盐，其中：b是5-7元的饱和或部分饱和的环烷基或杂环基；x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；是满足所有化合价的单键或双键；y
1a
是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；当是单键时，y
2b
和y
2c
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，并且条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；或当是双键时，y
2b
和y
2c
各自独立地是c(r3)或n，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、
r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；和m在每次出现时独立地是1、2或3；或(e) 式iv的结构：或其药学上可接受的盐，其中：x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1b
和y
1c
各自独立地是(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=ch2，并且进一步的条件是
y1b
和y
1c
两者都不能是c=o；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；
r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；和m，在存在时，为1；或(f) 式v的结构：或其药学上可接受的盐，其中：x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1a
、y
1b
和y
1c
各自独立地是(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是c=ch2，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=ch2，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是c=o，并且进一步的条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=o；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、
杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；和m，在存在时，为1。
4.在其他实施方案中，本发明涉及在有需要的对象中治疗癌症的方法，包括向所述对象施用有效量的本文公开的化合物。
5.发明详述定义除非本文另有定义，否则本技术中使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。通常，与本文所述的化学、细胞和组织培养、分子生物学、细胞和癌症生物学、免疫学、微生物学、药理学、遗传学以及蛋白质和核酸化学相关的命名和技术是众所周知和本领域常用的那些。
6.除非另有说明，否则本公开的方法和技术通常根据本领域公知的常规方法以及如在本说明书通篇引用和讨论的各种一般性和更具体的参考文献中所描述的进行。参见，例如，motulsky,
ꢀ“
intuitive biostatistics”, oxford university press, inc. (1995)；lodish等人,
ꢀ“
molecular cell biology, 第4版”, w. h. freeman & co., new york (2000)；griffiths等人,
ꢀ“
introduction to genetic analysis, 第7版”, w. h. freeman & co., n.y. (1999)；和gilbert等人,
ꢀ“
developmental biology, 第6版”, sinauer associates, inc., sunderland, ma (2000)。
7.除非本文另有定义，否则本文使用的化学术语根据本领域的常规用法来使用，如the mcgraw-hill dictionary of chemical terms”, parker s., ed., mcgraw-hill, san francisco, c.a. (1985)中所例示的。
8.本技术中提及的上述所有以及任何其他出版物、专利和公开的专利申请均通过引用具体并入本文。如有冲突，以本说明书，包括其具体定义为准。
[0009]“患者”、“对象”或“个体”互换使用，并且是指人类或非人类动物。这些术语包括哺乳动物，如人类、灵长类、家畜动物（包括牛、猪等）、伴侣动物（例如犬科动物、猫科动物等）和啮齿动物（例如小鼠和大鼠）。
[0010]“治疗”病症或患者是指采取措施以获得有益的或期望的结果，包括临床结果。如本文所用，并且如本领域所熟知的，“治疗”是用于获得有益的或期望的结果（包括临床结果）的途径。有益的或期望的临床结果可以包括，但不限于，减轻或改善一种或多种症状或病症、缩减疾病程度、稳定（即不恶化）疾病状态、防止疾病传播、延迟或减缓疾病进展、改善或减轻疾病状态、和缓解（无论是部分还是全部），无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”还可以意味着与未接受治疗的预期生存期相比延长生存期。
[0011]
术语“预防”是本领域公认的，并且当与诸如局部复发（例如疼痛）的病症、诸如癌症的疾病、诸如心力衰竭的综合征复合体或任何其他医学病症相关使用时，是本领域众所周知的，并且包括施用组合物，其相对于未接受所述组合物的对象降低对象中病况（medical condition）的症状发生频率或延迟其发作。因此，癌症的预防包括，例如，相对于未治疗的对照人群减少接受预防性治疗的患者人群中可检测到的癌性生长的数量，和/或相对于未治疗的人群延迟在受治疗人群中可检测到的癌性生长的出现，例如通过统计学和/或临床显著量。
[0012]
可以使用本领域技术人员已知的多种方法中的一种来向对象“施用”或“施用”物质、化合物或药剂。例如，化合物或药剂可以静脉内、经动脉、皮内、肌肉内、腹腔内、皮下、经眼、舌下、经口服（通过摄入）、鼻内（通过吸入）、脊柱内、脑内和经皮（通过吸收、例如，通过皮肤导管）施用。化合物或药剂也可通过可再充电的或可生物降解的聚合物装置或其他装置（例如贴片和泵）或提供化合物或药剂的延长、缓慢或受控释放的制剂适宜地引入。施用也可以例如一次性地、多次和/或经过一个或多个延长的时期地进行。
[0013]
给对象施用物质、化合物或药剂的适当方法也将取决于例如对象的年龄和/或身体状况以及化合物或药剂的化学和生物性质（例如溶解度、消化率、生物利用度、稳定性和毒性）。在一些实施方案中，通过口服施用化合物或药剂，例如通过摄取施用至对象。在一些实施方案中，口服施用的化合物或药剂在延长释放或缓慢释放的制剂中，或者使用用于这种缓慢或延长释放的装置来施用。
[0014]
术语“烷氧基”是指连接有氧的烷基（优选低级烷基）。代表性的烷氧基包括甲氧基、三氟甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基等。
[0015]
如本文所用，术语“烯基”是指包含至少一个双键的脂族基团；并旨在包括“未取代的烯基”和“取代的烯基”两者，后者是指具有替代烯基的一个或多个碳原子上的氢的取代基的烯基基团。这样的取代基可出现在包括或不包括在一个或多个双键中的一个或多个碳上。此外，这样的取代基包括所有考虑用于烷基的那些取代基，如下文所讨论的，除了稳定性禁止的以外。例如，考虑烯基被一个或多个烷基、碳环基、芳基、杂环基或杂芳基基团取代。
[0016]“烷基”或“烷烃”是完全饱和的直链或支链的非芳族烃。通常，直链或支链的烷基具有1至约6个，优选1至约3个碳原子，除非另有定义。直链或支链的烷基的实例包括，但不限于，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、戊基和辛基。c1–
c6直链或支链的烷基也称为“低级烷基”。
[0017]
此外，在整个说明书、实施例和权利要求中使用的术语“烷基”（或“低级烷基”）旨在包括“未取代的烷基”和“取代的烷基”两者，后者是指具有替代烃主链的一个或多个碳上的氢的取代基的烷基基团。如果没有另外说明，这样的取代基可以包括，例如，卤素（例如氟）、羟基、氧代、羰基（如羧基、烷氧羰基、甲酰基或酰基）、硫代羰基（如硫酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯）、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、次膦酸酯、氨基、酰胺基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸酯、磺酸酯、氨磺酰基、亚磺酰氨基、磺酰基、杂环基、芳烷基或芳族或杂芳族基团。在优选的实施方案中，取代烷基上的取代基选自c1–
c6烷基、c3–
c6环烷基、卤素、羰基、氰基或羟基。在更优选的实施方案中，取代烷基上的取代基选自氟、羰基、氰基或羟基。本领域技术人员将理解，如果合适，烃链上被取代的基团本身可以被取代。例如，取代烷基的取代基可包括下列基团的取代和未取代的形式：氨基、叠氮基、亚氨基、酰胺基、磷酰基（包括膦酸酯和次膦酸酯）、磺酰基（包括硫酸酯、亚磺酰氨基、氨磺酰基和磺酸酯）和甲硅烷基，以及醚、烷硫基、羰基（包括酮、醛、羧酸酯和酯）、-cf3、-cn等。示例性的取代烷基如下文所述。环烷基可以进一步被烷基、烯基、烷氧基、烷硫基、氨基烷基、羰基取代的烷基、-cf3、-cn等取代。
[0018]
术语“c
x
–cy”，当与化学基团，如烷基或烷氧基结合使用时，意在包括在链中含有x至y个碳的基团。例如，术语“c
x
–cy
烷基”是指取代或未取代的饱和烃基，包括在链中含有x至
y个碳的直链烷基和支链烷基，包括卤代烷基。优选的卤代烷基包括三氟甲基、二氟甲基、2,2,2-三氟乙基和五氟乙基。c0烷基表示氢，其中该基团位于末端位置，如果在内部，则为键。
[0019]
如本文所用，术语“烷基氨基”是指被至少一个烷基取代的氨基。
[0020]
如本文所用，术语“烷硫基”是指被烷基取代的硫醇基团并且可以由通式烷基s-代表。
[0021]
如本文所用，术语“炔基”是指包含至少一个三键的脂族基团，并旨在包括“未取代的炔基”和“取代的炔基”两者，后者是指具有替代在炔基的一个或多个碳上的氢的取代基的炔基基团。这样是取代基可出现在包括或不包括在一个或多个三键中的一个或多个碳上。此外，这样的取代基包括所有考虑用于烷基的取代基，如上文所讨论的，除了稳定性禁止的以外。例如，考虑炔基被一个或多个烷基、碳环基、芳基、杂环基或杂芳基取代。
[0022]
如本文所用，术语“酰胺”是指基团其中每个ra独立地代表氢、烃基、芳基、杂芳基、酰基或烷氧基，或两个ra与它们所连接的n原子一起构成在环结构中具有3至8个原子的杂环。
[0023]
术语“胺”和“氨基”是本领域公认的，并且指的是未取代的和取代的胺二者及其盐，例如，可以通过如下代表的基团或其中每个ra独立地代表氢或烃基，或两个ra与它们所连接的n原子一起构成在环结构中具有4至8个原子的杂环。
[0024]
如本文所用，术语“氨基烷基”是指被氨基取代的烷基。
[0025]
如本文所用，术语“芳烷基”是指被芳基取代的烷基。
[0026]
如本文所用，术语“芳基”包括取代或未取代的单环芳族基团，其中环上的每个原子是碳。优选地，所述环是6至10元环，更优选6元环。术语“芳基”还包括具有两个或更多个环的多环体系，其中两个或更多个碳是两个相邻环共有的，其中至少一个环是芳族的，例如，其他环可以是环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基。芳基包括苯、萘、菲、苯胺等。
[0027]
术语“碳环”是指饱和或不饱和的环，其中环上的每个原子都是碳。术语碳环包括芳族碳环和非芳族碳环两者。非芳族碳环包括环烷基环和环烯基环两者。“碳环”包括5-7元单环和8-12元双环。双环碳环的每个环可以选自饱和环、不饱和环和芳族环。碳环包括在两个环之间共享一个、两个或三个或更多个原子的双环分子。碳环包括在两个环之间共享一个、两个或三个或更多个原子的双环分子。术语“稠合碳环”是指双环碳环，其中每个环与另一个环共享两个相邻的原子。稠合碳环的每个环可以选自饱和环、不饱和环和芳族环。在示例性实施方案中，芳族环例如苯基可以稠合至饱和或不饱和环例如环己烷、环戊烷或环己烯。在价态允许的情况下，饱和、不饱和和芳族双环的任何组合都包括在碳环的定义中。示例性的“碳环”包括环戊烷、环己烷、双环[2.2.1]庚烷、1,5-环辛二烯、1,2,3,4-四氢萘、双
环[4.2.0]辛-3-烯、萘和金刚烷。示例性的稠合碳环包括十氢化萘、萘、1,2,3,4-四氢萘、双环[4.2.0]辛烷、4,5,6,7-四氢-1h-茚和双环[4.1.0]庚-3-烯。“碳环”可以在能够带有氢原子的任何一个或多个位置处被取代。
[0028]“环烷基”基团是完全饱和的环状烃。“环烷基”包括单环和双环的环。通常，除非另有定义，单环环烷基具有3至约10个碳原子、3至8个碳原子或更通常3至6个碳原子。双环环烷基的第二个环可以选自饱和环、不饱和环和芳族环。环烷基包括在两个环之间共享一个、两个或三个或更多个原子的双环分子(例如稠合双环化合物、桥连双环化合物和螺环化合物)。
[0029]“环烯基”基团是含有一个或多个双键的环状烃。
[0030]
术语“桥连双环化合物”是指其中两个环共享三个或更多个原子的双环分子，通过包含至少一个原子的桥将两个桥头原子隔开。例如，降冰片烷，也已知为双环[2.2.1]庚烷，可以被认为是一对环戊烷环，每个环共享其五个碳原子中的三个。
[0031]
如本文所用，术语“醚”是指通过氧与另一个烃基连接的烃基。因此，烃基的醚取代基可以是烃基-o-。醚可以是对称的或不对称的。醚的实例包括，但不限于，杂环-o-杂环和芳基-o-杂环。醚包括“烷氧基烷基”基团，其可由通式烷基-o-烷基代表。
[0032]
如本文所用，术语“卤代”和“卤素”意指卤素并且包括氯代、氟代、溴代和碘代。
[0033]
如本文所用，术语“杂烷基”是指碳原子和至少一个杂原子的饱和或不饱和链，例如，其中没有两个杂原子是相邻的。
[0034]
如本文所用，术语“烃基”是指通过不具有=o或=s取代基的碳原子键合的基团，并且通常具有至少一个碳-氢键和主要为碳的主链，但是可以任选地包括杂原子。因此，对于本技术的目的而言，基团如甲基、乙氧基乙基、2-吡啶基和三氟甲基被认为是烃基，但取代基如乙酰基（其在连接碳上具有 =o 取代基）和乙氧基（通过氧，而不是碳连接）不是。烃基包括，但不限于，芳基、杂芳基、碳环、杂环基、烷基及其组合。
[0035]
术语“稠合双环化合物”是指其中两个环共享两个相邻原子的双环分子。换言之，所述环共享一个共价键，即所谓的桥头原子是直接相连的（例如，α-侧柏烯（thujene）和十氢化萘）。例如，在稠合环烷基中，每个环与另一个环共享两个相邻原子，并且所述稠合双环环烷基的第二个环可以选自饱和环、不饱和环和芳族环。
[0036]
如本文所用，术语“羟基烷基”是指被羟基取代的烷基。
[0037]
术语“杂芳基（heteroaryl）”和“杂芳基（hetaryl）”包括取代或未取代的芳族单环结构，优选5至7元环，更优选5至6元环，其环结构包括至少一个杂原子，优选一至四个杂原子，更优选一或两个杂原子。术语“杂芳基（heteroaryl）”和“杂芳基（hetaryl）”还包括具有两个或更多个环的多环体系，其中两个或更多个碳是两个相邻环共有的，其中至少一个环是杂芳族的，例如，其他环可以是环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基。杂芳基包括，例如，吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶、喹啉、喹喔啉、萘啶等。
[0038]
如本文所用，术语“杂原子”意指除碳或氢之外的任何元素的原子。优选的杂原子是氮、氧和硫。
[0039]
术语“杂环基”、“杂环”和“杂环的”是指取代或未取代的非芳族环结构，优选3至10元环，优选3至7元环，更优选5至6元环，在一些情况下，最优选5元环，在其他情况下，最优选
6元环，所述环结构包括至少一个杂原子，优选一至四个杂原子，更优选一或二个杂原子。术语“杂环基”和“杂环的”还包括具有两个或更多个环的多环体系，其中两个或更多个碳是两个相邻环共有的，其中至少一个环是杂环的，例如，其他环可以是环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基。杂环基包括，例如，哌啶、哌嗪、吡咯烷、四氢吡喃、四氢呋喃、吗啉、内酯、内酰胺、噁唑啉、咪唑啉等。
[0040]
术语“多环基”、“多环”和“多环的”是指两个或更多个环（例如，环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基），其中两个或多个原子是两个相邻环共有的，例如，所述环是“稠合的环”。多环的每个环可以是取代的或未取代的。在某些实施方案中，多环的每个环在环中含有3至10个、优选5至7个原子。
[0041]
术语“螺环化合物”是指一种双环分子，其中两个环只有一个单独的共有原子，即螺原子。
[0042]
术语“取代的”是指具有替代主链的一个或多个碳上的氢的取代基或替代主链的一个或多个氮上的氢的取代基的基团。应当理解，“取代”或“被取代（substituted with）”包括这样的隐含条件，即这种取代与取代原子和取代基允许的化合价一致，并且所述取代产生稳定的化合物，例如，其不会自发地经历转化，如通过重排、环化、消除等。取代可以是一个或多个，并且对于合适的有机化合物可以是相同或不同的。
[0043]“保护基团”是指一组原子，当连接到分子中的反应性官能团时，掩蔽、降低或阻止所述官能团的反应性。通常，可以在合成过程期间根据需要选择性地去除保护基团。保护基团的实例可以在greene和wuts, protective groups in organic chemistry, 第3版, 1999, john wiley & sons, ny和harrison等人, compendium of synthetic organic methods, 第1-8卷, 1971-1996, john wiley & sons, ny中找到。代表性的氮保护基团包括，但不限于，甲酰基、乙酰基、三氟乙酰基、苄基、苄氧羰基（“cbz”）、叔丁氧基羰基（“boc”）、三甲基甲硅烷基（“tms”）、2-三甲基甲硅烷基-乙磺酰基（“tes”）、三苯甲基和取代的三苯甲基、烯丙氧羰基、9-芴基甲氧羰基（“fmoc”）、硝基藜芦氧羰基（“nvoc”）等。代表性的羟基保护基团包括，但不限于，其中羟基被酰化（酯化）或烷基化的那些，如苄基和三苯甲基醚，以及烷基醚、四氢吡喃基醚、三烷基甲硅烷基醚（例如tms或tips基团）、二醇醚，如乙二醇和丙二醇衍生物和烯丙基醚。
[0044]
短语“药学上可接受的”是本领域公认的。在某些实施方案中，所述术语包括组合物、赋形剂、佐剂、聚合物和其他材料和/或剂型，其在合理的医学判断范围内适合用于与人和动物的组织接触而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的收益/风险比相称。
[0045]“药学上可接受的盐”或“盐”在本文中用于指适合于患者的治疗或与患者的治疗相容的酸加成盐或碱加成盐。
[0046]
如本文所用，术语“药学上可接受的酸加成盐”意指本文公开的任何碱化合物的任何无毒有机或无机盐。形成合适盐的示例性无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸，以及金属盐，如正磷酸一氢钠和硫酸氢钾。形成合适盐的示例性有机酸包括一元、二元和三元羧酸，如乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸和水杨酸，以及磺酸，如对甲苯磺酸和甲磺酸。可以形成单酸盐或二酸盐，并且这样的盐可以以水合、溶剂化或基本上无水的形式存在。通常，本
文公开的化合物的酸加成盐更易溶于水和各种亲水性有机溶剂中，并且与它们的游离碱形式相比通常表现出更高的熔点。合适的盐的选择是本领域技术人员已知的。其他非药学上可接受的盐，例如草酸盐，可以用于例如分离供实验室使用的本发明化合物，或用于随后转化为药学上可接受的酸加成盐。
[0047]
如本文所用，术语“药学上可接受的碱加成盐”意指本发明的任何酸化合物的任何无毒有机或无机碱加成盐，或其任何中间体。形成合适盐的示例性无机碱包括氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化镁或氢氧化钡。形成合适盐的示例性有机碱包括脂族、脂环族或芳族有机胺，如甲胺、三甲胺和甲基吡啶或氨。合适的盐的选择是本领域技术人员已知的。
[0048]
可用于本公开的方法和组合物中的许多化合物在其结构中具有至少一个立体中心。该立体中心可以以r或s构型存在，以与 pure appl. chem. (1976), 45, 11
–
30中描述的规则一致地使用所述r和s符号。本公开考虑所有立体异构形式，如化合物的对映异构和非对映异构形式、盐、前药或其混合物（包括立体异构体的所有可能的混合物）。参见，例如，wo 01/062726。
[0049]
此外，某些含有烯基的化合物可以以z (zusammen)或e (entgegen) 异构体形式存在。在每种情况下，本公开包括混合物和单独的个别异构体两者。
[0050]
一些化合物也可以以互变异构形式存在。这些形式，尽管在本文所述的式中未明确指出，但旨在包括在本公开的范围内。
[0051]“前药”或“药学上可接受的前药”是指在施用后在宿主中代谢(例如水解或氧化)以形成本公开的化合物（例如，本发明的化合物）的化合物。前药的典型实例包括在活性化合物的功能部分上具有生物不稳定或可裂解（保护）基团的化合物。前药包括可被氧化、还原、胺化、脱氨基、羟基化、脱羟基、水解、脱水解、烷基化、脱烷基、酰化、脱酰基、磷酰化或脱磷酰化以产生活性化合物的化合物。使用酯或氨基磷酸酯作为生物不稳定的或可裂解的（保护）基团的前药的实例公开于美国专利6,875,751、7,585,851和7,964,580中，其公开内容通过引用并入本文。本公开的前药被代谢以产生本发明的化合物或其药学上可接受的盐。本公开在其范围内包括本文所述化合物的前药。选择和制备合适的前药的常规程序描述于，例如，“design of prodrugs
”ꢀ
ed. h. bundgaard, elsevier, 1985中。
[0052]
实施例化合物在某些实施方案中，本发明涉及具有式i结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：*是季碳原子；a是4-12元的饱和或部分饱和的单环、桥连或螺环的环，其被一个r
8b
和一个r
8c
取代；b是5-7元的饱和或部分饱和的环烷基或杂环基；c是任选被一个或多个r4取代的芳基或杂芳基；x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y1是y
1a
和y2是y
2a
；或y1是*—y
1b
—y
1c
和y2是y
2a
；或y1是y
1a
和y2是*—y
2b
—y
2c
；或y1是*—y
1dy1e
和y2是y
2a
；或y1是y
1a
和y2是*—y
2dy2e
；或y1是*y
1a
—y
1b
—y
1c
和y2是键；或y1是键和y2是*y
2a
—y
2b
—y
2c
；y
1a
和y
2a
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1b
、y
1c
、y
2b
和y
2c
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1d
、y
1e
、y
2d
和y
2e
各自独立地是c(r3)或n；条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1b
和y
2a
两者都不能是杂原子，和条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，和条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；条件是y
1d
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
2d
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子；和条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4在每种情况下独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3；r8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8b
是h、c
1-c3烷基-cn或c
1-c3烷基-och3；r
8c
是h或c
1-c4烷基；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r
8e
是h、氰基、c
1-c3烷基、羟基烷基、杂烷基、c
1-c3烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、(ch2)mn(r3)2、n(r3)2、c(o)n(r3)2、n(h)c(o)c
1-c3烷基、ch2n(h)c(o)c
1-c3烷基、杂芳基或杂环基；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；m在每次出现时独立地是1、2或3；n是0、1、2或3；和p是0或1。
[0053]
在某些这样的这样的实施方案中，本发明涉及具有式i结构的化合物或其药学上可接受的盐，其中：y1是y
1a
和y2是y
2a
，条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子，并且进一步的条件是当y1是y
1a
和y2是y
2a
时，y
1a
或y
2a
都不能是键；或y1是*—y
1b
—y
1c
和y2是y
2a
，条件是y
1b
和y
2a
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是键，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=o，并且进一步的条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=ch2；或y1是y
1a
和y2是*—y
2b
—y
2c
，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是键，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=o，并且进一步的条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=ch2；或y1是*—y
1dy1e
和y2是y
2a
，条件是y
1d
和y
2a
两者都不能是杂原子；或y1是y
1a
和y2是*—y
2dy2e
，条件是y
1a
和y
2d
两者都不能是杂原子；或y1是*y
1a
—y
1b
—y
1c
和y2是键，条件是y
1a
、y
1b
和y
1c 都不能是键，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是c=o，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=o，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是c=ch2，并且进一步的条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=ch2；或y1是键和y2是*y
2a
—y
2b
—y
2c
，条件是y
2a
、y
2b
和y
2c 都不能是键，条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子，条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是c=o，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=o，条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是c=ch2，并且进一步的条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=ch2。
[0054]
在某些实施方案中，n是0。
[0055]
在某些实施方案中，p是1。
[0056]
在某些实施方案中，b是5元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。在另外的实施方案中，b是6元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。
[0057]
在某些实施方案中，n是0，p是1，和b是5元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。在某些实施方案中，n是0，p是1，和b是6元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。
[0058]
在优选实施方案中，a是6元饱和或部分饱和的单环、桥连或螺环的环，其被一个r
8b
和一个r
8c
取代。在更优选的实施方案中，a是6元杂环基。在甚至更优选的实施方案中，a是哌嗪基。
[0059]
在某些实施方案中，式i的化合物具有式ia的结构：或其药学上可接受的盐，其中：*是季碳原子；b是5-7元的饱和或部分饱和的环烷基或杂环基；x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y1是y
1a
和y2是y
2a
；或y1是*—y
1b
—y
1c
和y2是y
2a
；或y1是y
1a
和y2是*—y
2b
—y
2c
；或y1是*—y
1dy1e
和y2是y
2a
；或y1是y
1a
和y2是*—y
2dy2e
；或y1是*y
1a
—y
1b
—y
1c
和y2是键；或y1是键和y2是*y
2a
—y
2b
—y
2c
；y
1a
和y
2a
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1b
、y
1c
、y
2b
和y
2c
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1d
、y
1e
、y
2d
和y
2e
各自独立地是c(r3)或n；条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1b
和y
2a
两者都不能是杂原子，和条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子；
条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，和条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；条件是y
1d
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
2d
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是杂原子，和条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子；和条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8b
是h、c
1-c3烷基-cn或c
1-c3烷基-och3；r
8c
是h或c
1-c4烷基；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r
8e
是h、氰基、c
1-c3烷基、羟基烷基、杂烷基、c
1-c3烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、(ch2)mn(r3)2、n(r3)2、c(o)n(r3)2、n(h)c(o)c
1-c3烷基、ch2n(h)c(o)c
1-c3烷基、杂芳基或杂环基；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；m在每次出现时独立地是1、2或3；和n是0、1、2或3。
[0060]
在某些这样的实施方案中，式i的化合物具有式ia的结构或其药学上可接受的盐， 其中：y1是y
1a
和y2是y
2a
，条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子，并且进一步的条件是当y1是y
1a
和y2是y
2a
时，y
1a
或y
2a
都不能是键；或y1是*—y
1b
—y
1c
和y2是y
2a
，条件是y
1b
和y
2a
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是键，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=o，并且进一步的条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=ch2；或y1是y
1a
和y2是*—y
2b
—y
2c
，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是键，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=o并且进一步的条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=ch2；或y1是*—y
1dy1e
和y2是y
2a
，条件是y
1d
和y
2a
两者都不能是杂原子；或y1是y
1a
和y2是*—y
2dy2e
，条件是y
1a
和y
2d
两者都不能是杂原子；或y1是*y
1a
—y
1b
—y
1c
和y2是键，条件是y
1a
、y
1b
和y
1c 都不能是键，条件是y
1a
和y
1b
两者
都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是c=o，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=o，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是c=ch2，并且进一步的条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=ch2；或y1是键和y2是*y
2a
—y
2b
—y
2c
，条件是y
2a
、y
2b
和y
2c 都不能是键，条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子，条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是c=o，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=o，条件是y
2a
和y
2b
两者都不能是c=ch2并且进一步的条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=ch2。
[0061]
在某些实施方案中，n是0。
[0062]
在某些实施方案中，b是5元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。在另外的实施方案中，b是6元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。
[0063]
在某些实施方案中，n是0，和b是5元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。在另外的实施方案中，n是0，和b是6元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。
[0064]
在另外的实施方案中，式ia的化合物具有式ib的结构：或其药学上可接受的盐。
[0065]
在又一些实施方案中，式ia的化合物具有式ic的结构：或其药学上可接受的盐。
[0066]
在特定实施方案中，式ia的化合物具有式id的结构：
或其药学上可接受的盐。
[0067]
在另外的实施方案中，本发明涉及式i、ia、ib、ic或id的化合物或其药学上可接受的盐，其中：*是季碳原子；x1是c=o或c(r1)(r2)；y1是y
1a
和y2是y
2a
；或y1是*—y
1b
—y
1c
和y2是y
2a
；或y1是y
1a
和y2是*—y
2b
—y
2c
；或y1是*—y
1dy1e
和y2是y
2a
；或y1是y
1a
和y2是*—y
2dy2e
；y
1a
和y
2a
各自独立地是c(r
11
)2、o、n(r3)或s；y
1b
、y
1c
、y
2b
和y
2c
各自独立地是c(r
11
)2、o、n(r3)或s；y
1d
、y
1e
、y
2d
和y
2e
各自独立地是c(r3)或n；条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1b
和y
2a
两者都不能是杂原子，并且进一步的条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，并且进一步的条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；条件是y
1d
和y
2a
两者都不能是杂原子；条件是y
1a
和y
2d
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或ch3；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、f、cl、ch3或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c3烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c3烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基
和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；和r
11
在每次出现时独立地是h, f, cl、ch3或och3。
[0068]
在某些实施方案中，式i的化合物具有式ii的结构：或其药学上可接受的盐，其中：x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1a
和y
2a
各自独立地是(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2，条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；和m，在存在时，为1。
[0069]
在某些实施方案中，r
8d
是h或卤素(如f)。在另外的实施方案中，r
8d
是h或f。
[0070]
在特定实施方案中，式ii的化合物具有式iia的结构：
或其药学上可接受的盐。
[0071]
在另外的实施方案中，式ii的化合物具有式iib的结构：或其药学上可接受的盐。
[0072]
在另外的实施方案中，本发明涉及式ii、iia或iib的化合物或其药学上可接受的盐，其中：x1是c=o或c(r1)(r2)；y
1a
和y
2a
各自独立地是c(r
11
)2、o、n(r3)或s，条件是y
1a
和y
2a
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3是h或ch3；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、f、cl、ch3或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；和r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、ch3或och3。
[0073]
在某些实施方案中，式i的化合物具有式iii的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：b是5-7元的饱和或部分饱和的环烷基或杂环基；x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；是满足所有化合价的单键或双键；y
1a
是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；当是单键时，y
2b
和y
2c
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，和条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；或当是双键时，y
2b
和y
2c
各自独立地是c(r3)或n，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；和m在每次出现时独立地是1、2或3。
[0074]
在某些这样的实施方案中，r
8d
是h或卤素(如f)。
[0075]
在其他这样的实施方案中，式i的化合物具有式iii的结构或其药学上可接受的盐， 其中：
当是单键时，y
2b
和y
2c
各自独立地是键、(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是键，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子，条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=o，并且进一步的条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是c=ch2；或当是双键时，y
2b
和y
2c
各自独立地是c(r3)或n，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子。
[0076]
在特定实施方案中，式iii的化合物具有式iiia的结构：或其药学上可接受的盐。在一些这样的实施方案中，b是6元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。
[0077]
或者，式iii的化合物具有式iiib的结构：或其药学上可接受的盐。在一些这样的实施方案中，b是6元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。
[0078]
或者，式iii的化合物具有式iiic的结构：
或其药学上可接受的盐。在一些这样的实施方案中，b是6元饱和或部分饱和的环烷基或杂环基。
[0079]
在另外的实施方案中，本发明涉及式iii、iiia、iiib或iiic的化合物或其药学上可接受的盐，其中：x1是c=o或c(r1)(r2)；y
1a
是c(r
11
)2、o、n(r3)或s；是满足所有化合价的单键或双键；当是单键时，y
2b
和y
2c
各自独立地是c(r
11
)2、o、n(r3)或s，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，并且进一步的条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；或当是双键时，y
2b
和y
2c
各自独立地是c(r3)或n，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或ch3；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、f、cl、ch3或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；和r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、ch3或och3。
[0080]
在某些实施方案中，式i的化合物具有式iv的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1b
和y
1c
各自独立地是(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=ch2，并且进一步的条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=o；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；和m，在存在时，为1。
[0081]
在某些实施方案中，r
8d
是h或卤素(如f)。
[0082]
在特定实施方案中，式iv的化合物具有式iva的结构：
或其药学上可接受的盐。
[0083]
或者，式iv的化合物具有式ivb的结构：或其药学上可接受的盐。
[0084]
或者，式iv的化合物具有式ivc的结构：
或其药学上可接受的盐。
[0085]
在某些实施方案中，式i的化合物具有式v的结构：或其药学上可接受的盐，其中：x1是c=o或c(r1)(r2)；x2是键、c(r3)2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2；y
1a
、y
1b
和y
1c
各自独立地是(c(r
11
)2)m、c=ch2、c=o、o、n(r3)、s、s(o)或s(o)2，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是杂原子，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是杂原子，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是c=ch2，条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=ch2，条件是y
1a
和y
1b
两者都不能是c=o，并且进一步的条件是y
1b
和y
1c
两者都不能是c=o；z1、z2、z3和z4各自独立地是c或n；r1和r2各自独立地是h或f；r3在每次出现时独立地是h或c
1-c4烷基；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、oh、f、cl、br、n(r3)2、cf3、ch3、ocfh2或och3，或每个r4、r5、r6和r7在各自所连接的z为n时不存在；r
8a
是h、c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基或杂芳基，其中每个c
1-c4烷基、环烷基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r9取代；r
8d
是h、氰基、卤素、c
1-c3烷基、卤代烷基、杂烷基、羟基烷基或c(o)n(r3)2；r9在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、c
1-c6烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基，其中每个环烷基、杂环基、芳基和杂芳基可以任选地被一个或多个r
10
取代；r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基；r
11
在每次出现时独立地是h、f、cl、c
1-c3烷基或och3；和m，在存在时，为1。
[0086]
在某些实施方案中，r
8d
是h或卤素(如f)。
[0087]
在特定实施方案中，式v的化合物具有式va的结构：或其药学上可接受的盐。
[0088]
或者，式v的化合物具有式vb的结构：或其药学上可接受的盐。
[0089]
或者，式v的化合物具有式vc的结构：或其药学上可接受的盐。
[0090]
在一些实施方案中，本发明涉及本文所述的任何化合物或其药学上可接受的盐，其中：r
8a
是被一个r9取代的c
1-c3烷基；r9是环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，并且环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被一个或多个r
10
取代；和r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基。
[0091]
在一些实施方案中，本发明涉及式id、iia、iiia、iiib或iiic的化合物或其药学上可接受的盐，其中：r
8a
是被一个r9取代的c
1-c3烷基；r9是环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，并且环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被一个或多个r
10
取代；和r
10
在每次出现时独立地是卤素、羟基、c
1-c3烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基或羟基烷基。
[0092]
在一些方面中，c
1-c3烷基是亚甲基。当r
8d
、r
8e
、r9或r
11
是c
1-c3烷基时，各自独立地可以是亚甲基。
[0093]
在一些方面中，r8是c
1-c3烷基，和c
1-c3烷基是亚甲基。
[0094]
在一些方面中，r9是被一个r
10
取代的杂环基，和r
10
是甲基。
[0095]
在一些方面中，杂环基是吡咯烷并且吡咯烷的n原子是甲基取代的。
[0096]
在一些实施方案中，本发明涉及式iia或iib的化合物或其药学上可接受的盐，其中：x1是c=o或c(r1)(r2)；y
1a
是ch2；y
2a
是c(r
11
)2、o、n(r3)或s；z1、z2、z3和z
4 各自是c；r1和r2是h；r3是h或ch3；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、f、cl、ch3或och3；和r
11
在每次出现时独立地是h、ch3或och3。
[0097]
在一些方面中，y
2a
是c(r
11
)2，和r
11
在一次出现时是h并且在另一次出现时是h、ch3或och3。
[0098]
在另外的方面中，y
2a
是o。
[0099]
在进一步的方面中，y
2a
是n(r3)和r3是h。
[0100]
在又进一步的方面中，y
2a
是s。
[0101]
在一些实施方案中，本发明涉及式iiia、iiib或iiic的化合物或其药学上可接受的盐，其中：是单键；x1是c=o或c(r1)(r2)；y
1a
是c(r
11
)2、o、n(r3)或s；y2b
和y
2c
各自独立地是c(r
11
)2、o、n(r3)或s，条件是y
1a
和y
2b
两者都不能是杂原子，并且进一步的条件是y
2b
和y
2c
两者都不能是杂原子；z1、z2、z3和z4各自独立地是c；r1和r2是h；r3在每次出现时独立地是h或ch3；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、f、cl、ch3或och3；和r
11
在每次出现时独立地是h、ch3或och3。
[0102]
在一些方面中，y
1a
是c(r
11
)2，和r
11
在一次出现时是h并且在另一次出现时是h、ch3或och3。
[0103]
在一些方面中，y
1a
是o。
[0104]
在一些方面中，y
1a
是n(r3)。
[0105]
在一些方面中，y
1a
是s。
[0106]
在另外的方面中，y
2b
是c(r
11
)2，和y
2c
是o、n(r3)或s。
[0107]
在一些方面中，y
2b
是c(r
11
)2，和r
11
在一次出现时是h并且在另一次出现时是h、ch3或och3。
[0108]
在进一步的方面中，y
2c
是o。
[0109]
在进一步的方面中，y
2c
是n(r3)。
[0110]
在进一步的方面中，y
2c
是s。
[0111]
在另外的方面中，y
2b
是o、n(r3)或s，和y
2c
是c(r
11
)2。
[0112]
在一些方面中，y
2c
是c(r
11
)2，和r
11
在一次出现时是h并且在另一次出现时是h、ch3或och3。
[0113]
在进一步的方面中，y
2b
是o。
[0114]
在进一步的方面中，y
2b
是n(r3)。
[0115]
在进一步的方面中，y
2b
是s。
[0116]
在另外的实施方案中，本发明涉及式iiia、iiib或iiic(如iiia)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：b是6元饱和环烷基或杂环基；x1是c(r1)(r2)；是单键；y
1a
是(c(r
11
)2)m；y
2b
是(c(r
11
)2)m；y
2c
是(c(r
11
)2)
m 或n(r3)；z1、z2、z3和z4各自是c；r1和r2各自独立地是h；r3在每次出现时独立地是c
1-c4烷基；r4、r5、r6和r7各自独立地是h、f或ch3；r
11
在每次出现时独立地是h；和m在每次出现时独立地是1。
[0117]
在进一步的方面中，所述化合物具有约1000 m-1
s-1
或更大的krasg12c k
obs
/[i]。
[0118]
在再进一步的方面中，所述化合物对表5的耐药细胞系具有大于1000 nm的平均ic
50
。
[0119]
在再进一步的方面中，所述化合物对表5的药物敏感细胞系具有约1000 nm或更低的平均ic
50
。
[0120]
在一些实施方案中，本发明涉及式i、ii、iia、iii、iiia或iiib的化合物或其药学上可接受的盐，其中x1是c=o或c(r1)(r2)，r1和r2是h，和z1、z2、z3和z4各自是c。
[0121]
在一些实施方案中，本发明涉及式id、iia、iib、iiia、iiib或iiic的化合物或其药学上可接受的盐，其中x1是c=o或c(r1)(r2)，r1和r2是h，和z1、z2、z3和z4各自是c。
[0122]
在另外的实施方案中，本发明涉及式i、ia、ib、ic、id、ii、iia、iib、iii、iiia、iiib、iiic、iv、iva、ivb、ivc、v、va、vb或vc的化合物或其药学上可接受的盐，其中x1是c=o或c(r1)(r2)，r1和r2是h，和z1、z2、z3和z
4 各自是c。
[0123]
在一些实施方案中，本发明涉及式i、ia、ib、ic、iii、iiia、iiib或iiic的化合物或其药学上可接受的盐，其中b是5或6元的环烷基。
[0124]
在一些实施方案中，本发明涉及式i、ia、ib、ic、iii、iiia、iiib或iiic的化合物或其药学上可接受的盐，其中b是5或6元的杂环基。在一些方面中，所述5或6元的杂环基选自四氢呋喃基、四氢噻吩基、环丁砜基、吡咯烷基、四氢吡喃基、1,4-二噁烷基、哌啶基、哌嗪基、硫代吗啉基、二氧化硫代吗啉基、吗啉基、1,4-二噻烷基、噻烷基、内酰胺基和内酯基。
[0125]
在一些实施方案中，x2是o。
[0126]
在另外的实施方案中，当r3是c
1-c4烷基时，c
1-c4烷基是甲基或乙基。
[0127]
在一些实施方案中，本发明涉及式i、ia、ib、ic、ii、iii、iv或v的化合物或其药学上可接受的盐，其中r
8d
是f。在一些方面中，本发明涉及式i、ia或ib的化合物或其药学上可接受的盐，其中r
8b
是c
1-c3烷基-cn。在进一步的方面中，本发明涉及式i或ia的化合物或其药学上可接受的盐，其中r
8c
是h和r
8e
是h。
[0128]
在另外的实施方案中，本发明涉及式i、ia、ib、ic、id、ii、iia、iib、iii、iiia、iiib、iiic、iv、iva、ivb、ivc、v、va、vb或vc的化合物或其药学上可接受的盐，其中r
11
是c
1-c3烷基。在进一步的方面中，c
1-c3烷基是甲基或乙基。
[0129]
在一些实施方案中，本发明涉及式i、ia、ib、ic、id、iii、iiia、iiib或iiic的化合物或其药学上可接受的盐，其中m在每次出现时是1。
[0130]
在一些实施方案中，本发明涉及式i或ia的化合物或其药学上可接受的盐，其中r
8d
是h、f、甲基、乙基、och3、ch2oh或ch2och3，和r
8e
是h、甲基、乙基、f、cf3、cf2h或ch2f。
[0131]
在另外的实施方案中，本发明涉及式ib、ic、ii、iii、iv或v的化合物或其药学上可接受的盐，其中r
8d
是h、f、甲基、乙基、och3、ch2oh或ch2och3。
[0132]
在一些方面中，本发明涉及具有选自表1的结构的式i的化合物或其药学上可接受的盐。
[0133]
在特别的方面中，所述化合物选自化合物1至化合物50，或其药学上可接受的盐。
[0134]
在特别的方面中，所述化合物选自化合物1至化合物33，或其药学上可接受的盐。
[0135]
在另外的方面中，所述化合物选自化合物7、9、11、13、14、17、21、22、25、26、27、29、30、31、33、35、36、42、44、46、47、50、51、55、58、63、70、71、73、77、87、88、91、93、95、96、98、99和100，或其药学上可接受的盐。
[0136]
在进一步的方面中，所述化合物选自化合物7、9、11、13、17、21、22、25、26、30、31、33、35、36、42、44、46、47、50、51、55、58、63、70、71、73、77、87、88、91、93、95、96、98、99和100，或其药学上可接受的盐。
[0137]
在一些方面中，本发明涉及具有选自表2的结构的式i的化合物或其药学上可接受的盐。
[0138]
在另外的方面中，本发明涉及具有选自下述结构的式i的化合物或其药学上可接受的盐：
。
[0139]
在另外的方面中，本发明涉及具有选自下述结构的式i的化合物或其药学上可接受的盐：
。
[0140]
在一些方面中，本发明涉及具有选自下述结构的式iiia的化合物或其药学上可接受的盐：
。
[0141]
在某些实施方案中，本发明涉及包含本文所述的任何化合物和药学上可接受的稀释剂或赋形剂的药物组合物。
[0142]
治疗/使用的实施例方法本文所述的化合物是kras g12c的抑制剂，并因此可用于治疗其中基础的病理学（至少部分）是由kras g12c介导的疾病。这样的疾病包括癌症和存在转录、细胞增殖、细胞凋亡或分化的障碍的其他疾病。
[0143]
在某些实施方案中，在有需要的对象中治疗癌症的方法包括向所述对象施用有效量的本文所述的任何化合物或其药学上可接受的盐。例如，癌症可以选自癌（例如，子宫内膜癌、膀胱癌、乳腺癌、结肠癌（例如结直肠癌，如结肠腺癌和结肠腺瘤））、肉瘤（例如，肉瘤如卡波西氏瘤、骨肉瘤、间充质来源的肿瘤（例如纤维肉瘤或横纹肌肉瘤））、肾、表皮、肝、肺（例如，腺癌、小细胞肺癌和非小细胞肺癌）、食道、胆囊、卵巢、胰腺（例如，外分泌胰腺癌）、胃、子宫颈、甲状腺、鼻、头颈、前列腺和皮肤（例如鳞状细胞癌）、人类乳腺癌（例如原发性乳腺肿瘤、淋巴结阴性乳腺癌、乳腺浸润性导管腺癌、非子宫内膜样乳腺癌）、家族性黑色素瘤和黑色素瘤。可以用本发明的化合物治疗的癌症的其他实例包括淋巴谱系的造血肿瘤（例如白血病、急性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、b细胞淋巴瘤（如弥漫性大b细胞淋巴瘤）、t细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和伯克特淋巴瘤），和髓系造血肿瘤，例如急性和慢性髓性白血病、骨髓增生异常综合征和早幼粒细胞性白血病。其他癌症包括中枢或外周神经系统肿瘤，例如星形细胞瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤或神经鞘瘤；精原细胞瘤；畸胎瘤；着色性干皮病；视网膜母细胞瘤；角化棘皮瘤；和甲状腺滤泡癌。
[0144]
在特定实施方案中，所治疗的癌症选自胰腺癌、胆囊癌、甲状腺癌、结直肠癌、肺癌（包括非小细胞肺癌）、胆囊癌和胆管癌。
[0145]
在其他特定实施方案中，所治疗的癌症选自胰腺癌、结直肠癌和肺癌（包括非小细胞肺癌）。
[0146]
在一些方面中，对象是哺乳动物，例如人类。
[0147]
本文进一步公开了抑制细胞中kras g12c的方法，包括使所述细胞与本文所述的任何化合物或其药学上可接受的盐接触，从而抑制所述细胞中的kras g12c酶。例如，所述细胞是癌细胞。在优选的实施方案中，细胞的增殖被抑制或细胞死亡被诱导。
[0148]
本文进一步公开了在对象中治疗通过抑制 kras g12c 可治疗的疾病的方法，包括向公认需要这样的治疗的对象施用有效量的本文所述的任何化合物和/或其药学上可接受的盐。通过抑制 kras g12c 可治疗的疾病包括，例如，癌症。其他示例性疾病包括胰腺
癌、胆囊、甲状腺癌、结直肠癌、肺癌（包括非小细胞肺癌）、胆囊癌和胆管癌。
[0149]
治疗方法包括向有需要的对象施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐。个体实施方案包括通过向有需要的对象施用有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐来治疗任何一种上述病症或疾病的方法。
[0150]
某些实施方案包括在对象中调节kras g12c活性的方法，包括向所述对象施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐。另外的实施方案提供了在有需要的对象中治疗由kras g12c介导的病症或疾病的方法，包括向所述对象施用有效量的式i、ia、ib、ic、id、ii、iia、iib、iii、iiia、iiib、iiic、iv、iva、ivb、ivc、v、va、vb或vc的化合物或其药学上可接受的盐。本发明的其他实施方案提供在需要其治疗的对象中治疗由kras g12c介导的病症或疾病的方法，包括施用有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐，其中所述病症或者疾病选自具有激活kras活性的遗传畸变的癌。这些包括但不限于癌症。
[0151]
本方法还提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗由kras g12c介导的病症或疾病的用途。
[0152]
在一些实施方案中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗由kras g12c介导的病症或疾病。
[0153]
本方法的又一些其他实施方案提供了用作药物的根据式 i、ia、ib、ic、id、ii、iia、iib、iii、iiia、iiib、iiic、iv、iva、ivb、ivc、v、va、vb或vc的化合物或其药学上可接受的盐。
[0154]
本方法的再一些其他实施方案包括式i、ia、ib、ic、id、ii、iia、iib、iii、iiia、iiib、iiic、iv、iva、ivb、ivc、v、va、vb或vc的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗由kras g12c介导的病症或疾病的药物中的用途。
[0155]
实施例化合物对kras g12c的预测亲和力实施例共价kras g12c抑制剂mrtx1257：是本领域已知有效和选择性的，并且已经显示出具有所需的药代动力学性质。mrtx1257 也已表明在癌症的异种移植模型中具有所需的功效。
[0156]
使用在计算机程序moe版本2019.0101（molecular operating environment, chemical computing group, montreal, ca）中实施的共价对接协议，将化合物共价对接到 kras g12c蛋白的修改版本中（pdb登录代码6n2k）。受体几何构造通过在mrtx1257存在下最小化6n2k的结合位点残基而产生。为共价对接到该修饰受体的每个化合物计算估计的结合亲和力（以任意单位），其中负值越多，估计的预测亲和力相应越高。参见表 1。mrtx1257在该受体中的预测结合亲和力为-10.7148。
[0157]
使用schr
ö
dinger计算化学套件(v. 2020-1, schr
ö
dinger, llc, new york, ny)中的covdock共价对接模块将特别感兴趣的化合物共价对接到已公布的kras g12c晶体结构中（pdb登录代码6n2k）。提供了预测的对接分数和估计的结合亲和力（“mmgbsa”和“covdock”）（以任意单位），其中负值越多，预测亲和力相应越大。参见表2。
[0158]
实施例化合物本发明的具体实施方案包括表1中列出的那些化合物。对每个化合物公开了识别号（“化合物”）、化学结构（“结构”）和对kras g12c的预测结合亲和力（以任意单位，au）（“分数”）。
[0159]
本发明的另外的具体实施方案包括表2中列出的那些化合物。对每个化合物公开了识别号（“化合物”）、化学结构（“结构”）和来自两种不同的方法（“mmgbsa”和“covdock”）的对kras g12c的预测结合亲和力（以任意单位，au）（“分数”）。
[0160]
本发明的具体实施方案包括表3中列出的那些化合物。对每个化合物公开了识别号（“化合物”）、化学结构（“结构”）和用于合成该化合物的实施例方法（“方法”）。
[0161]
通过引用并入在此提及的所有出版物和专利均通过引用以其整体并入本文，就好像每个单独的出版物或专利被具体地和单独地指示为通过引用并入一样。如有冲突，以本技术（包括本文的任何定义）为准。
[0162]
等效对象虽然已经讨论了本发明的特定实施方案，但上述说明是说明性的而非限制性的。在阅读本说明书和下面的权利要求书后，本发明的许多变化对于本领域技术人员来说将变得显而易见。本发明的全部范围应通过参考权利要求及其等效对象的全部范围、说明书以及这些变化来确定。
[0163]
示例合成方案本文公开的化合物可以经多种具体方法合成。概述具体合成路线的实施例和下面的通用方案意在为普通的合成化学家提供指导，在普通本领域技术人员的技能和判断范围内，他们将很容易理解溶剂、浓度、试剂、保护基团、合成步骤的顺序、时间、温度等可以根据需要修改。
[0164]
实施例1：合成四氢萘、四氢喹啉和色烷官能化的化合物制备中间体1-1将起始材料，2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉 (1.288 g, 6.34 mmol)溶解在四氢呋喃(25 ml)中并转移到二异丙基氨基锂(7.3 mmoles，四氢呋喃/己烷中的0.5 m溶液，由二异丙基胺/n-buli新鲜制备)的冷(-78℃)溶液中。120分钟后，经套管快速添加四氯二溴
乙烷(2.68 g, 76.30 mmol)在四氢呋喃(15ml)中的溶液。
[0165]
在恒温15分钟后，通过添加饱和氯化铵水溶液(50ml)淬灭反应并用二氯甲烷(100ml)稀释。将混合物转移到分液漏斗中。分离有机相并经碳酸钾干燥，过滤并浓缩到硅胶上。所得固体通过快速色谱(0-20% etoac/己烷)纯化，得到中间体1-1，8-溴-2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉 (412.3 mg, 23%产率)，为白色固体。
[0166]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 5.24 (td, j = 3.3, 2.6, 1.3 hz, 1h), 3.05
–
2.94 (m, 1h), 2.71 (ddd, j = 18.2, 11.3, 6.7 hz, 1h), 2.48
–
2.36 (m, 1h), 2.32
–
2.20 (m, 1h), 2.17 (dtd, j = 14.6, 2.6, 1.4 hz, 1h), 2.09
–
2.00 (m, 1h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 280.9 amu。
[0167]
制备中间体1-2在氮气气氛下，向含有 8-溴-2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉 (52.3 mg, 0.186 mmol)和硝酸银（i） (47.6 mg, 0.28 mmol)的小瓶中添加乙腈（2 ml）。将反应温热至50℃并搅拌 8 小时，此时 tlc 分析表明起始材料已消耗。添加硅胶并真空除去溶剂，得到白色粉末。通过快速色谱(0-30% etoac/己烷)纯化，得到中间体1-2，2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉-8-基硝酸酯，为白色固体。
[0168]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 6.00 (dd, j = 5.7, 4.6 hz, 1h), 2.93
ꢀ–ꢀ
2.81 (m, 1h), 2.72 (ddd, j = 18.1, 7.7, 6.2 hz, 1h), 2.34
ꢀ–ꢀ
1.92 (m, 4h)ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 264.0 amu。
[0169]
制备中间体1-3将2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉-8-基硝酸酯在甲苯（0.025 m）中的溶液用三乙胺（50% vol/vol）处理。将反应在环境温度搅拌90分钟并浓缩到硅胶上。用示差折光检测（0-50% 己烷/etoac）进行快速色谱。合并产物级分并浓缩，得到中间体1-3，2,4-二氯-6,7-二氢喹唑啉-8(5h)-酮，为白色固体。
[0170]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 1
h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 3.05 (t, j = 6.2 hz, 2h), 2.91
–
2.76 (m, 2h), 2.38
–
2.16 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 217.0 amu。
[0171]
制备中间体1-4
[0172]
制备中间体1-5
[0173]
制备四氢萘官能化的化合物
[0174]
在r或s 构型中可以选择用于 tsuji 步骤的催化剂，以在四元立体中心产生对映体富集的产物。如本领域普通技术人员所理解的，可以以多种方式转化环外烯烃以产生该化合物的类似物。
[0175]
用该合成路线获得的化合物包括但不限于如下的那些化合物：其中 x 是h、cl、f、oh、ch3或och3，r在每次出现时且如果存在的话，独立地是cl、f、ch3或och3，并且n是0、1或2。x和r的其他取代基对于本领域技术人员来说将是显而易见的，特别是在该合成的第一步中使用的商购可得的分子中发现的那些取代基。
[0176]
此外，使用本领域普通技术人员已知的程序可以将用该合成路线获得的化合物中的环己酮的酮转化为c(h)oh、ch2、och3、c(h)f或cf2。
[0177]
制备四氢喹啉官能化的化合物
[0178]
在r或s 构型中可以选择用于 tsuji 步骤的催化剂，以在四元立体中心产生对映体富集的产物。四氢喹啉中的胺可以使用对于本领域普通技术人员而言容易地显而易见的程序被任选取代的烷基取代。
[0179]
用该合成路线获得的化合物包括但不限于如下的那些化合物：其中 x是h、cl、f、ch3或och3，r在每次出现时且当存在时独立地是cl、f、ch3或och3，并且 n 为0、1或2。x和r的其他取代基对于本领域技术人员来说将是显而易见的，特别是在该合成的第一步中使用的商购可得的分子中发现的那些取代基。
[0180]
此外，使用本领域普通技术人员已知的程序可以将用该合成路线获得的化合物中的环己酮的酮转化为c(h)oh、ch2、och3、c(h)f或cf2。
[0181]
制备色烷官能化的化合物
[0182]
在r或s 构型中可以选择用于 tsuji 步骤的催化剂，以在四元立体中心产生对映体富集的产物。
[0183]
用该合成路线获得的化合物包括但不限于如下的那些化合物：其中x是h、cl、f、ch3或och3，r在每次出现时且当存在时独立地是cl、f、ch3或och3，并且n是0、1或2。x和r的其他取代基对于本领域技术人员来说将是显而易见的，特别是在该合成的第一步中使用的商购可得的分子中发现的那些取代基。
[0184]
此外，使用本领域普通技术人员已知的程序，可以将用该合成路线获得的化合物中的环己酮的酮转化为c(h)oh、ch2、och3、c(h)f或cf2。
[0185]
制备硫代色烷官能化的化合物
[0186]
在r或s 构型中可以选择用于 tsuji 步骤的催化剂，以在四元立体中心产生对映体富集的产物。
[0187]
用该合成路线获得的化合物包括但不限于的如下那些化合物：其中x是h、cl、f、ch3或och3，r在每次出现时且当存在时独立地是cl、f、ch3或och3，并且n是0、1或2。x和r的其他取代基对于本领域技术人员来说将是显而易见的，特别是在该合成的第一步中使用的商购可得的分子中发现的那些取代基。
[0188]
此外，使用本领域普通技术人员已知的程序可以将用该合成路线获得的化合物中的酮转化为c(h)oh、ch2、och3、c(h)f或cf2。
[0189]
制备苯并吗啉官能化的化合物
[0190]
用该合成路线获得的化合物包括，但不限于如下的那些化合物：其中r在每次出现时且当存在时独立地是cl、f、ch3或och3，并且n是0、1或2。r的其他取代基对于本领域技术人员来说将是显而易见的, 特别是在该合成的第一步中使用的商购可得的分子中发现的那些取代基。
[0191]
此外，可以使用对于本领域普通技术人员而言容易地显而易见的程序将吗啉中的胺用任选取代的烷基取代。此外，使用本领域普通技术人员已知的程序可以将用该合成路线获得的化合物中的酮转化为c(h)oh、ch2、och3、c(h)f或cf2。
[0192]
实施例2：合成茚满官能化的化合物
[0193]
该合成产生外消旋混合物，并且本领域普通技术人员可以容易地实现采用优化条件使用手性hplc或sfc色谱分离对映异构体。
[0194]
用该合成路线获得的化合物包括但不限于如下的那些化合物：其中x是h、cl、f、ch3或och3，r在每次出现时且当存在时独立地是cl、f、ch3或och3，并且n是0、1或2。x和r的其他取代基对于本领域技术人员来说将是显而易见的，特别是在该合成的第一步中使用的商购可得的分子中发现的那些取代基。
[0195]
此外，使用本领域普通技术人员已知的程序可以将用该合成路线获得的化合物中的环己酮的酮转化为c(h)oh、ch2、och3、c(h)f或cf2。
[0196]
实施例3：合成香豆满官能化的化合物该合成产生外消旋混合物，并且本领域普通技术人员可以容易地实现在优化条件下使用手性hplc或sfc色谱分离对映异构体。
[0197]
用该合成路线获得的化合物包括但不限于如下的那些化合物：其中x是h、cl、f、ch3或och3，r在每次出现时且当存在时独立地是cl、f、ch3或och3，并且n是0、1或2。x和r的其他取代基对于本领域技术人员来说将是显而易见的，特别是在该合成的第一步中使用的商购可得的分子中发现的那些取代基。
[0198]
此外，使用本领域普通技术人员已知的程序可以将用该合成路线获得的化合物中的环己酮的酮转化为c(h)oh、ch2、och3、c(h)f或cf2。
[0199]
实施例4：合成化合物c-1至c-8、c-15和c-16合成2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉将5,6,7,8-四氢喹唑啉-2,4-二酚（750g，4.51mol）在pocl3（3.30kg，21.5mol）中的溶液在110℃搅拌4小时。tlc（二氯甲烷/甲醇 = 10/1）表明 5,6,7,8-四氢喹唑啉-2,4-二酚已完全消耗。tlc (石油醚/乙酸乙酯= 3/1, r
f = 0.66)表明形成了一个新点。将反应混合物冷却至15℃，然后用乙酸乙酯(2000ml)稀释。有机相用冰水(6000ml)淬灭并用nahco3固体调节至ph＝8，然后用乙酸乙酯(2000ml*2)萃取。合并的有机层经na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗产物。残余物通过快速硅胶色谱(sio2, 石油醚/乙酸乙酯= 1\0至1\1)纯化，得到 2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉 (230 g, 1.11 mol, 25%产率)，为白色固体。
[0200]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 2.95
ꢀ‑ꢀ
2.80 (m, 2h), 2.75
ꢀ‑ꢀ
2.65 (m, 2h), 1.90
ꢀ‑ꢀ
1.84 (m, 4h) ppmlc/ms: [m+h]
+ m/z = 203.4 amu。
[0201]
中间体1-1的替代合成在-70℃，向2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉 (150 g, 664 mmol)在thf（600ml）中的溶液中添加lda（2m，499ml）。将混合物在-70℃搅拌30分钟。在-70至-40℃下，将混合物添加到四氯二溴乙烷(325 g, 997 mmol, 120 ml)在thf(2.80l)中的溶液中，并在-40℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。在0℃搅拌下将混合物倒入饱和nh4cl溶液(8.00l)中，然后在0℃搅拌30分钟。混合物用乙酸乙酯(5.00l*3)萃取。合并的有机层经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱(sio2, 石油醚/乙酸乙酯= 500/ 1至20/ 1)纯化，得到中间体1-1, 8-溴-2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉 (182 g, 512 mmol, 26%产率)，为灰白色固体。
[0202]
lc/ms: [m+h]
+ m/z = 282.9 amu。
[0203]
合成中间体4-1
在25℃，向 8-溴-2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉 (90.0 g, 253 mmol)在二噁烷(1200 ml)和h2o (1000 ml)中的溶液中添加caco
3 (76.1 g, 760 mmol)，并将反应在130℃搅拌48小时。lcms 显示剩余35%的中间体 1-1并且检测到 47%的所需质量。向反应中添加乙酸乙酯(3000ml)，并搅拌10分钟。过滤反应物，并将滤液用盐水(2000ml*2)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱(sio2, 石油醚/乙酸乙酯= 20/ 1至5/ 1)纯化，得到中间体4-1, 2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉-8-醇 (60.0 g, 268 mmol, 53%产率)，为黄色油。
[0204]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 4.67
ꢀ‑ꢀ
4.61 (m, 1h), 3.87 (d, j = 2.4 hz, 1h), 2.80
ꢀ‑ꢀ
2.65 (m, 2h), 2.24
ꢀ‑ꢀ
2.16 (m, 1h), 2.11
ꢀ‑ꢀ
2.02 (m, 1h), 1.87
ꢀ‑ꢀ
1.72 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 218.8 amu。
[0205]
中间体1-3的替代合成在25℃，向2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉-8-醇(50.0 g, 223 mmol)在dcm (1000 ml)中的溶液中添加 dmp (142 g, 335 mmol)，并将反应在25℃搅拌 1 小时。lcms显示反应完成。向混合物添加水(500 ml)，通过逐渐添加nahco3溶液调节至约ph = 9，并用dcm (300 ml * 2)萃取。合并的有机相用na2so3溶液(1000ml * 2)、盐水(1000ml * 2)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱(sio2, 石油醚/乙酸乙酯= 20/ 1至2/ 1)纯化，得到中间体1-3, 2,4-二氯-6,7-二氢喹唑啉-8(5h)-酮 (26.0 g, 119 mmol, 53%产率)，为黄色固体。
[0206]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 3.05 (t, j = 6.0 hz, 2h), 2.84 (t, j = 6.4 hz, 2h), 2.31
ꢀ‑ꢀ
2.24 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 217.0 amu。
[0207]
合成中间体4-2
向2,4-二氯-6,7-二氢喹唑啉-8(5h)-酮 (2.00 g, 9.21 mmol)在dcm (37 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加三乙胺(6.4 ml, 46.01 mmol)，接着是(s)-2-(哌嗪-2-基)乙腈
·
2hcl (1.49 g, 9.21 mmol)。所得溶液在0℃搅拌2小时。观察到起始材料消耗后，添加二碳酸二叔丁酯(4.02 g, 18.43 mmol)并将反应加热至40℃并搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至室温并用h2o (50 ml)稀释并用dcm (40 ml * 3)萃取。合并的有机萃取物经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。使用柱色谱（0
→
10% 的在dcm中的meoh）纯化粗产物，得到中间体4-2, (s)-4-(2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.01 g, 7.41 mmol, 80%产率)，为黄色固体。
[0208]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 4.59 (td, j = 7.2, 6.8, 3.3 hz, 1h), 4.13 (dt, j = 14.0, 2.3 hz, 1h), 4.05 (s, 1h), 4.03
ꢀ–ꢀ
3.94 (m, 1h), 3.42 (dd, j = 13.9, 4.0 hz, 1h), 3.26 (s, 1h), 3.17 (td, j = 12.1, 3.4 hz, 1h), 2.89
ꢀ–ꢀ
2.80 (m, 2h), 2.80
ꢀ–ꢀ
2.71 (m, 3h), 2.71
ꢀ–ꢀ
2.60 (m, 1h), 2.21
ꢀ–ꢀ
2.02 (m, 2h), 1.49 (s, 9h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 406.1/408.1 amu。
[0209]
合成化合物c-1
向含有(s)-4-(2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300 mg, 0.74 mmol)和在thf (7.2 ml)中的 1,2-双(溴甲基)苯(195 mg, 0.74 mmol)的小瓶添加叔丁醇钾(183 mg, 1.63 mmol)。将反应在室温搅拌过夜。完成后，添加饱和nh4cl (15 ml, aq.)并用dcm (10 ml * 3)萃取混合物。合并的有机物用na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物使用快速柱色谱在硅胶上纯化（20
→
100%的在己烷中的etoac），得到(s)-4-(2'-氯-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(151 mg, 0.30 mmol, 40%产率)，为橙色油。
[0210]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 7.38 (dd, j = 7.4, 1.4 hz, 1h), 7.28 (td, j = 7.5, 1.3 hz, 1h), 7.20 (t, j = 7.4 hz, 1h), 7.12 (d, j = 7.4 hz, 1h), 4.05 (s, 1h), 3.56 (dddd, j = 15.7, 9.6, 6.4, 2.6 hz, 4h), 3.50
ꢀ–ꢀ
3.40 (m, 2h), 3.35 (ddd, j = 12.5, 7.2, 2.9 hz, 2h), 3.22 (dd, j = 15.9, 7.2 hz, 1h), 2.85 (ddd, j = 16.9, 11.8, 5.5 hz, 1h), 2.76 (dd, j = 12.8, 7.5 hz, 1h), 2.57 (dd, j = 16.3, 1.8 hz, 2h), 2.02
ꢀ–ꢀ
1.93 (m, 1h), 1.64
ꢀ–ꢀ
1.49 (m, 2h), 1.47 (s, 9h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 508.2/510.2 amu。
[0211]
向含有nah (14 mg, 0.35 mmol, 60%矿物油分散体)的冷却(0℃)的小瓶中添加thf (0.5 ml)，然后添加(s)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇 (90
ꢀµ
l, 0.74 mmol)。将混合物搅拌 45 分钟，此时添加为在thf(1ml)中的溶液形式的(s)-4-(2'-氯-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(75 mg, 0.15 mmol)。将混合物温热至室温并搅拌3小时。完成后，将反应用饱和nh4cl (5 ml, aq.)淬灭，并将混合物用dcm (10 ml * 3)萃取。合并的有机物用na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-(2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0212]
lcms: [m+h]
+ m/z = 587.3 amu。
[0213]
向含有在dcm (0.5 ml)中的粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-(2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(30 mg, 0.05 mmol, est.)的小瓶中逐滴添加 h3po
4 (20
ꢀµ
l, 0.33 mmol)。将反应在室温搅拌3小时，此时添加h2o (1 ml)并通过缓慢添加2 m naoh溶液(aq.)使溶液呈碱性。一旦呈碱性，混合物用dcm(2ml
×
3)萃取，合并的有机物用na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗品2-((s)-4-(2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0214]
lcms: [m+h]
+ m/z = 487.3 amu。
[0215]
向含有粗品2-((s)-4-(2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)(25 mg, 0.05 mmol, est.)在dcm (0.6 ml)中的冷却(0℃)的溶液添加三乙胺(70
ꢀµ
l, 0.51 mmol)，然后添加丙-2-烯酰氯(1.02 ml, 0.20 mmol)在dcm中的0.2 m溶液。将混合物温热至室温并搅拌1.5小时，此时将溶液浓缩，加入dmso中，过滤并使用制备型hplc纯化 (c18, 20
→
50%的在h2o + 0.25% tfa中的mecn)。将含有所需产物的合并级分冻干以产生化合物c-1, 2-((s)-1-丙烯酰-4-(2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (4.4 mg, 1.12 mmol, 20%产率, 经 3 个步骤)，为浅棕色固体。
[0216]1h nmr (400 mhz, dmso-d6, tfa盐) δ 10.39 (bs, 1h), 7.28
ꢀ–ꢀ
7.11 (m, 4h), 6.87 (s, 1h), 6.61 (bs, 3h), 6.20 (dd, j = 16.7, 2.3 hz, 1h), 5.79 (dd, j = 10.4, 2.3 hz, 1h), 4.66 (ddd, j = 12.8, 9.1, 2.7 hz, 1h), 4.49 (ddd, j = 13.0, 6.4, 2.6 hz, 1h), 4.17
ꢀ–ꢀ
3.97 (m, 2h), 3.76 (bs, 2h), 3.45
ꢀ–ꢀ
3.06 (m, 8h), 3.06
ꢀ–ꢀ
2.86 (m, 5h), 2.30
ꢀ–ꢀ
1.92 (m, 4h), 1.92
ꢀ–ꢀ
1.75 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 541.3 amu。
[0217]
合成化合物c-2
将1-溴-2,3-双(溴甲基)苯(127 mg, 0.37 mmol)和中间体4-2 (150 mg, 0.37 mmol)溶解在无水thf (7.4 ml)中并用 kotbu (124 mg, 1.11 mmol)处理。将混合物搅拌 9 小时，然后在etoac和h2o 之间分配，收集有机相并用盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(10
→
30%的在己烷中的etoac)，得到(2s)-4-(4-溴-2'-氯-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(39.2 mg, 18%产率)为淡黄色薄膜。
[0218]
lcms: [m+h]
+ m/z = 586.1/588.1 amu (1:1)。
[0219]
将1-甲基-l-脯氨醇 (21.78 mg, 0.19 mmol)溶解在无水thf (400
ꢀµ
l)中，并用nah (4.5 mg, 0.11 mmol)处理，将混合物陈化30分钟，然后添加到(2s)-4-(4-溴-2'-氯-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(22.2 mg, 0.04 mmol)的干燥残余物中。将混合物搅拌24小时，然后在etoac和1:1盐水:1m naoh之间分配。收集有机相并用盐水洗涤，经k2co3干燥，浓缩，并通过在硅胶上的快速柱色谱纯化(2
→
3% 的在dcm + 1% et3n中的meoh)，得到(2s)-4-(4-溴-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(20.2 mg, 80%产率)为淡黄色薄膜。
[0220]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3, 主要非对映异构体) δ 7.60
ꢀ–ꢀ
7.57 (m, 1h), 7.46 (dt, j = 7.6, 1.2 hz, 1h), 7.20
ꢀ–ꢀ
7.10 (m, 1h), 4.58 (d, j = 4.4 hz, 1h), 4.35 (ddd, j = 21.3, 10.9, 5.0 hz, 1h), 4.16 (dt, j = 11.0, 6.1 hz, 1h), 4.07
ꢀ–ꢀ
3.84 (m, 2h), 3.24 (dd, j = 13.6, 3.9 hz, 1h), 3.09
ꢀ–ꢀ
2.96 (m, 4h), 2.96
ꢀ–ꢀ
2.74 (m, 7h), 2.69
ꢀ–ꢀ
2.51 (m, 2h), 2.41 (s, 3h), 2.31
ꢀ–ꢀ
2.22 (m, 1h), 2.05
ꢀ–ꢀ
1.90 (m, 3h), 1.79
ꢀ–ꢀ
1.64 (m, 3h), 1.46 (d, j = 2.8 hz, 9h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 619.2/621.2 amu (1:1)。
[0221]
将(2s)-4-(4-溴-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯用 hcl（4n，在二噁烷中，500
ꢀµ
l)）处理，混合物被在室温 (rt) 陈化 20 分钟，然后浓缩。残余物用无水dcm (300
ꢀµ
l)和ipr2etn (53
ꢀµ
l, 0.30 mmol)处理，并在室温搅拌24小时，然后冷却至0℃，并用丙烯酸酐(4.2
ꢀµ
l, 0.04 mmol)处理。15 分钟后，将混合物浓缩并通过制备型hplc纯化（c18，10
→
70%的在h2o +0.25% tfa中的acn），得到化合物c-2, 2-((2s)-1-丙烯酰-4-(4-溴-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-1,3,5',8'-四氢-6'h-螺[茚-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (2.8 mg, 15%产率)，为无色薄膜。
[0222]1h nmr (500 mhz, cdcl3) δ 7.57 (dt, j = 8.1, 1.4 hz, 1h), 7.35 (dt, j = 7.4, 1.4 hz, 1h), 7.09 (t, j = 7.7 hz, 1h), 6.44 (dt, j = 17.3, 1.5 hz, 1h), 6.16 (ddd, j = 17.3, 10.4, 1.5 hz, 1h), 5.86 (dt, j = 10.4, 1.5 hz, 1h), 4.34 (td, j = 4.8, 1.5 hz, 2h), 4.24 (s, 1h), 3.78 (td, j = 4.9, 1.5 hz, 4h), 3.64 (td, j = 5.9, 1.5 hz, 2h), 3.33
ꢀ–ꢀ
2.47 (m, 10h), 2.17
ꢀ–ꢀ
2.00 (m, 2h), 2.00
ꢀ–ꢀ
1.52 (m, 9h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 619.2/621.2 amu (1:1)。
[0223]
合成化合物c-3
1.36 mmol)溶解在无水 thf (6.8 ml)中，然后冷却至-78℃并用lihmds, 1.0 m在thf中 (1.77 ml, 1.77 mmol)、然后用氰基甲酸烯丙酯(269
ꢀµ
l, 2.04 mmol)处理。将混合物搅拌1小时，然后用饱和nh4cl淬灭并在饱和nh4cl和etoac之间分配。收集有机相并用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
50%的在己烷中的 etoac)，得到4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯(436.8 mg, 0.969 mmol, 71%产率)，为浅黄色泡沫(rf = 0.29 (7:3 己烷:etoac + 1% acoh))。
[0226]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 11.91 (s, 1h), 5.96 (ddt, j = 17.3, 10.4, 5.7 hz, 1h), 5.36 (dq, j = 17.2, 1.5 hz, 1h), 5.28 (dq, j = 10.5, 1.3 hz, 1h), 4.73 (dt, j = 5.7, 1.4 hz, 2h), 3.59
ꢀ–ꢀ
3.49 (m, 4h), 3.45
ꢀ–ꢀ
3.37 (m, 4h), 2.70
ꢀ–ꢀ
2.60 (m, 2h), 2.55 (td, j = 7.7, 2.1 hz, 2h), 1.46 (s, 9h) ppm
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ 171.02, 165.69, 161.53, 158.62, 156.49, 154.74, 131.65, 118.97, 116.99, 102.24, 80.42, 65.87, 47.97, 43.14 (br), 28.47, 23.54, 20.11 ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 451.1 amu。
[0227]
将4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯(50 mg, 0.110 mmol)和1-(溴甲基)-2-硝基-苯(29 mg, 0.13 mmol)溶解在无水甲苯(550
ꢀµ
l)中，并用叔戊醇钾，1.7 m在甲苯中(78 ul, 0.13 mmol)处理。将混合物温热至65℃并搅拌 24 小时，然后添加叔戊醇钾，1.7 m在甲苯中（65
ꢀµ
l，0.11 mmol）和1-(溴甲基)-2-硝基-苯(24 mg, 0.11 mmol)，并将反应再搅拌 24 小时。将混合物在etoac和h2o之间分配，收集有机相并用盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
40%的在己烷中的 me2co)，得到4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-7-(2-硝基苄基)-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯(33.7 mg, 0.0575 mmol, 52%产率)，为黄色薄膜。
[0228]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 7.85 (dd, j = 8.1, 1.4 hz, 1h), 7.48 (ddd, j = 8.7, 7.2, 1.5 hz, 1h), 7.42 (dd, j = 7.8, 1.7 hz, 1h), 7.37 (ddd, j = 8.2, 7.1, 1.7 hz, 1h), 5.77 (ddt, j = 17.2, 10.4, 5.7 hz, 1h), 5.21 (dq, j = 12.5, 1.4 hz, 1h), 5.17 (dq, j = 5.8, 1.2 hz, 1h), 4.60 (ddt, j = 13.2, 5.9, 1.3 hz, 1h), 4.53 (ddt, j = 13.1, 5.7, 1.4 hz, 1h), 4.00 (d, j = 14.1 hz, 1h), 3.68 (d, j = 14.2 hz, 1h), 3.62
ꢀ–ꢀ
3.51 (m, 4h), 3.51
ꢀ–ꢀ
3.32 (m, 4h), 2.81 (ddd, j = 17.1, 11.1, 4.4 hz, 1h), 2.61 (dt, j = 17.0, 4.3 hz, 1h), 2.48 (dt, j = 13.7, 4.2 hz, 1h), 1.84 (ddd, j = 13.7, 11.1, 4.4 hz, 1h), 1.46 (s, 9h) ppm
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ 190.91, 169.86, 167.09, 159.38, 154.63, 150.62, 133.96, 133.00, 130.95, 130.72, 128.40, 124.99, 122.28, 119.58, 80.59, 66.72, 59.23, 48.02, 43.45, 34.82, 30.24, 28.45, 23.38 ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 586.2 amu。
[0229]
将4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-7-(2-硝基苄基)-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯(8.4 mg, 0.014 mmol)溶解在meoh (500
ꢀµ
l)中并冷却至0℃，添
加nabh
4 (50
ꢀµ
l, 20mg/ml, 0.029 mmol)作为meoh中的储备溶液。将混合物搅拌 5 分钟，用 acoh (150
ꢀµ
l) 淬灭，浓缩，然后从chcl3中共蒸发，得到粗品4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-羟基-7-(2-硝基苄基)-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯，其未经纯化即继续使用。
[0230]1h nmr (400 mhz, cdcl3, 主要非对映异构体) δ 7.83 (dd, j = 8.1, 1.5 hz, 1h), 7.56
ꢀ–ꢀ
7.45 (m, 2h), 7.45
ꢀ–ꢀ
7.30 (m, 1h), 5.81 (ddt, j = 17.4, 10.4, 5.9 hz, 1h), 5.32
ꢀ–ꢀ
5.19 (m, 2h), 4.68
ꢀ–ꢀ
4.48 (m, 2h), 4.45
ꢀ–ꢀ
4.37 (m, 1h), 3.77 (d, j = 14.4 hz, 1h), 3.68
ꢀ–ꢀ
3.30 (m, 10h), 2.55
ꢀ–ꢀ
2.41 (m, 2h), 2.29
ꢀ–ꢀ
2.14 (m, 1h), 1.75
ꢀ–ꢀ
1.60 (m, 1h), 1.46 (d, j = 2.3 hz, 9h) ppm
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ 176.76, 173.07, 166.23, 165.61, 157.89, 154.82, 151.05, 133.37, 132.68, 131.52, 128.25, 124.89, 119.21, 113.75, 80.48, 71.77, 65.98, 51.10, 47.89, 34.34, 28.51, 25.61, 22.86, 21.04 ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 588.2/590.2 amu (3:1)。
[0231]
将粗品4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-羟基-7-(2-硝基苄基)-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯(14.1 mg, 0.020 mmol, est.)溶解在etoh (335
ꢀµ
l)和h2o (84
ꢀµ
l)中，并用铁粉(13.4 mg, 0.240 mmol)和acoh (6.8
ꢀµ
l, 0.120 mmol)处理。将混合物温热至65℃持续30 分钟，然后冷却，用 etoac 稀释，通过硅胶薄垫过滤并浓缩得到4-(2-氯-8-羟基-2'-氧代-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(11.1 mg, 22.2
ꢀµ
mol, 93%产率)，为淡黄色薄膜（rf = 0.37（主要的），0.53（次要的）（7:3 etoac:己烷））。
[0232]
lcms: [m+h]
+ m/z = 500.2/502.2 amu。
[0233]
将1-甲基-l-脯氨醇 (12 mg, 0.10 mmol)溶解在无水thf (470
ꢀµ
l)中并用kotbu, 1.7 m在thf中(47
ꢀµ
l, 0.08 mmol)处理，并将混合物搅拌5分钟。将该溶液添加到4-(2-氯-8-羟基-2'-氧代-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10 mg, 0.020 mmol)的干燥残余物中。1小时后，将反应用1m naoh稀释并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩得到粗品4-(8-羟基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-2'-氧代-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(13.2 mg, 》100%产率)，为棕色薄膜，其未经纯化而用于下一步。
[0234]
lcms: [m+h]
+ m/z = 579.3 amu。
[0235]
将粗品4-(8-羟基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-2'-氧代-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(13.2 mg, 0.020 mmol, est.) 溶解在dcm (460
ꢀµ
l)中并用戴斯马丁氧化剂(19.2 mg, 0.050 mmol)处理。30分钟后，将反应用iproh(2滴)淬灭，搅拌10分钟，并浓缩。将残余物溶解在94:6 chcl3:meoh + 1% et3n中，通过硅胶短柱过滤，用94:6 chcl3:meoh + 1% et3n洗脱得到粗品4-(2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-2',8-二氧代-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(13.2 mg, 100%产率)，为浅棕色油状残余物，其未经纯化而用于下一步。
[0236]
lcms: [m+h]
+ m/z = 577.3/579.3 amu (3:1)
将粗品4-(2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-2',8-二氧代-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(13.2 mg, 0.020 mmol, est.)用 tfa (50
ꢀµ
l) 处理 20 分钟，然后浓缩并从dcm共蒸发一次并在真空下进一步干燥。将残余物溶解在无水 mecn (200
ꢀµ
l)中并用ipr2etn (12
ꢀµ
l, 0.070 mmol)和丙烯酸酐 (1.3
ꢀµ
l, 0.010 mmol)处理。1 小时后，将混合物浓缩，重新溶解在acn:h2o (1:1)中，并通过制备型hplc纯化(c18, 5
→
70%的在h2o + 0.25% tfa中的acn)，得到化合物c-3, 4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-1',4',5,6-四氢-2'h,8h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-2',8-二酮 (2.04 mg, 3.8
ꢀµ
mol, 17%产率)，为淡黄色薄膜。
[0237]1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ 7.91 (d, j = 3.9 hz, 1h), 7.25
ꢀ–ꢀ
7.19 (m, 1h), 7.12
ꢀ–ꢀ
7.03 (m, 1h), 6.85
ꢀ–ꢀ
6.77 (m, 1h), 6.58 (ddd, j = 16.8, 10.5, 1.1 hz, 1h), 6.34 (dt, j = 16.8, 1.9 hz, 1h), 5.77 (dt, j = 10.5, 1.9 hz, 1h), 4.82
ꢀ–ꢀ
4.68 (m, 1h), 3.99
ꢀ–ꢀ
3.54 (m, 7h), 3.10 (s, 3h), 2.93 (d, j = 29.4 hz, 1h), 2.73 (dd, j = 26.6, 16.0 hz, 2h), 2.44
ꢀ–ꢀ
2.25 (m, 2h), 2.25
ꢀ–ꢀ
2.02 (m, 2h), 1.90 (t, j = 11.6 hz, 1h), 1.71
ꢀ–ꢀ
1.51 (m, 1h), 1.50
ꢀ–ꢀ
1.37 (m, 1h), 0.96
ꢀ–ꢀ
0.78 (m, 6h) ppmlctof: [m+h]
+ m/z = 531.2715 amu (c
29h25
n6o
4+ 的计算值= 531.2714)。
[0238]
合成化合物c-4
mg, 0.090 mmol)处理。1.5小时后，将混合物溶解在h3po4水溶液中并用et2o洗涤(2次)，然后用k2co3碱化并用etoac反萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到粗品(2s)-2-(氰基甲基)-4-(2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-2',8-二氧代-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(33.7 mg, 87%产率)，为琥珀色残余物，其未经纯化即继续使用。
[0249]
lcms: [m+h]
+ m/z = 616.3 amu。
[0250]
将粗品(2s)-2-(氰基甲基)-4-(2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-2',8-二氧代-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(27.4 mg, 0.040 mmol, est.)用在二噁烷中的4n hcl (200
ꢀµ
l)处理。35 分钟后，将混合物浓缩并从 meoh共蒸发，然后重新悬浮在无水mecn (445
ꢀµ
l)中并用 ipr2etn (39
ꢀµ
l, 0.22 mmol)和丙烯酸酐(6.2
ꢀµ
l, 0.050 mmol)处理。35 分钟后，将反应浓缩，在acn/h2o中重构，并通过制备型hplc纯化(c18, 5
→
70%的在h2o + 0.25% tfa中的acn)，得到化合物c-4, 2-((2s)-1-丙烯酰-4-(2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-2',8-二氧代-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-2-基)乙腈 (2.4 mg, 10%产率)，为白色薄膜。
[0251]1h nmr (400 mhz, cdcl3, 非对映异构体的混合物) δ 7.86 (d, j = 5.3 hz, 1h), 7.18
ꢀ–ꢀ
7.07 (m, 2h), 7.02
ꢀ–ꢀ
6.90 (m, 1h), 6.72 (d, j = 7.7 hz, 1h), 6.50 (dd, j = 16.7, 11.2 hz, 1h), 6.31 (dd, j = 16.8, 2.0 hz, 1h), 5.76 (dd, j = 10.5, 1.9 hz, 1h), 4.45 (d, j = 11.0 hz, 1h), 4.27 (dd, j = 10.7, 5.8 hz, 1h), 3.97 (dd, j = 13.9, 2.4 hz, 1h), 3.92
ꢀ–ꢀ
3.77 (m, 2h), 3.27
ꢀ–ꢀ
3.08 (m, 2h), 2.93
ꢀ–ꢀ
2.56 (m, 6h), 2.48 (s, 3h), 2.35
ꢀ–ꢀ
2.18 (m, 2h), 2.09
ꢀ–ꢀ
1.94 (m, 1h), 1.87
ꢀ–ꢀ
1.71 (m, 4h), 0.87
ꢀ–ꢀ
0.74 (m, 4h) ppmlctof: [m+h]
+ m/z = 570.2814 amu (c
31h36
n7o4的计算值为570.2823 amu)。
[0252]
合成化合物c-5
向(s)-4-(2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.0 g, 2.5 mmol)在thf (25 ml)中的冷却(-78℃) 的溶液中逐滴添加lihmds (3.2 ml, 3.2 mmol, 1 m在thf中)。将反应搅拌5分钟，然后添加氰基甲酸烯丙酯(0.39 ml, 3.7 mmol)。将混合物搅拌2小时，之后使用饱和nh4cl (50 ml, aq.)淬灭反应，并温热至室温。使用dcm萃取混合物，合并的有机物用na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物使用快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15% 在己烷中的etoac)，得到4-((s)-4-(叔丁氧基羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯(547 mg, 1.12 mmol, 45%产率)，为浅黄色固体。
[0253]
lcms: [m+h]
+ m/z = 490.2 amu。
[0254]
向含有4-((s)-4-(叔丁氧基羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯(233 mg, 0.48 mmol)和在mecn (4.8 ml)中的1-溴-2-(溴甲基)苯(0.16 ml, 1.2 mmol)的小瓶中添加na2co
3 (141 mg, 1.9 mmol)和nai (143 mg, 0.96 mmol)。将混合物加热至60℃并搅拌过夜。完成后，将混合物冷却至室温，通过棉塞过滤，用 dcm 冲洗，真空浓缩，并使用快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
70% 的在己烷中的etoac)，得到7-(2-溴苄基)-4-((s)-4-(叔丁氧基羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯(217 mg, 0.33 mmol, 69%产率)，为白色固体。
[0255]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 7.51 (dd, j = 7.9, 1.2 hz, 1h), 7.24 (ddd, j = 7.8, 4.0, 1.8 hz, 1h), 7.16 (td, j = 7.5, 1.3 hz, 1h), 7.05 (td, j = 7.7, 1.8 hz, 1h), 5.82 (dddt, j = 17.2, 10.4, 6.8, 5.7 hz, 1h), 5.31
ꢀ–ꢀ
5.15 (m, 2h), 4.69
ꢀ–ꢀ
4.47 (m, 3h), 4.22
ꢀ–ꢀ
3.88 (m, 2h), 3.81
ꢀ–ꢀ
3.45 (m, 3h), 3.30
ꢀ–ꢀ
3.14 (m, 1h), 3.10
ꢀ–ꢀ
2.54 (m, 6h), 1.97
ꢀ–ꢀ
1.80 (m, 1h), 1.76
ꢀ–ꢀ
1.54 (m, 1h), 1.48 (d, j = 4.2 hz, 10h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 658.1/660.1 amu。
[0256]
向含有7-(2-溴苄基)-4-((s)-4-(叔丁氧基羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-7-甲酸烯丙酯(219 mg, 0.33 mmol)的烘干小瓶中添加pd2(dba)
3 (15 mg, 0.02 mmol)和(r)-p-(cf3)
3-t-buphox (39 mg, 0.07 mmol)，然后是甲苯(11 ml)。顶部空间用氩气吹扫并且将小瓶加盖。将混合物在室温搅拌 30 分钟，然后温热至40℃并搅拌过夜。完成后，将混合物冷却，用dcm(5ml)稀释，并通过硅藻土塞过滤，将其用更多dcm(20ml)洗涤。真空除去溶剂并使用快速柱色谱在硅胶上纯化粗产物(0
→
50%的在己烷中的etoac)，得到(s)-4-((r)-7-烯丙基-7-(2-溴苄基)-2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(183 mg, 0.30 mmol, 92%产率)，为灰白色固体。
[0257]
lcms: [m+h]
+ m/z = 614.2/616.2 amu。
[0258]
向含有 nah (24 mg, 0.60 mmol, 60%矿物油分散体)的冷却(0℃)的小瓶中添加 thf（1 ml），然后添加(s)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇 (142
ꢀµ
l, 1.20 mmol)。将混合物搅拌 45 分钟，此时添加为在thf (1.4 ml)中的溶液形式的(s)-4-((r)-7-烯丙基-7-(2-溴苄基)-2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(147 mg, 0.24 mmol)。将混合物温热至室温并搅拌3小时。完成后，将反应用饱和nh4cl (10 ml, aq.)淬灭，并将混合物用dcm (10 ml * 3)萃取。合并的有机物用na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗品(s)-4-((r)-7-烯丙基-7-(2-溴苄基)-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0259]
lcms: [m+h]
+ m/z = 693.2 amu。
[0260]
向含有粗品(s)-4-((r)-7-烯丙基-7-(2-溴苄基)-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8-氧代-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(99 mg, 0.14 mmol, est.)的烘干小瓶中添加k2co
3 (40 mg, 0.29 mmol)，然后是pph
3 (8 mg, 0.03 mmol)，最后是pd(oac)
2 (3 mg, 0.01 mmol)。顶部空间用氩气吹扫，添加mecn (4 ml)，并将小瓶加盖。将混合物温热至80℃并搅拌过夜。完成后，将混合物冷却，用dcm(5ml)稀释，并通过硅藻土塞过滤，将其用更多dcm(20ml)洗涤。真空除去溶剂，且粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-4-亚甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0261]
lcms: [m+h]
+ m/z = 613.3 amu。
[0262]
向含有在dcm (0.2 ml)中的粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-4-亚甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑
0.007 mmol)。将小瓶密封并使用气球置于氢气气氛下。将反应剧烈搅拌过夜。完成后，反应混合物用dcm(2ml)稀释并通过硅藻土塞过滤，用更多dcm(10ml)洗涤。真空除去溶剂，且粗品 (2s)-2-(氰基甲基)-4-((2r)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯未经进一步纯化而用于下一步。
[0267]
lcms: [m+h]
+ m/z = 615.3 amu。
[0268]
向含有在dcm (0.7 ml)中的粗品 (2s)-2-(氰基甲基)-4-((2r)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(20 mg, 0.03 mmol, est.)的小瓶中逐滴添加h3po
4 (20
ꢀµ
l, 0.33 mmol)。将反应在室温搅拌2小时，此时添加h2o (2 ml)并通过缓慢添加2 m naoh溶液(aq.)使溶液呈碱性。一旦呈碱性，混合物用dcm (2 ml * 3)萃取，合并的有机物用na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗品2-((2s)-4-((2r)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0269]
lcms: [m+h]
+ m/z = 515.3 amu。
[0270]
向粗品2-((2s)-4-((2r)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (17 mg, 0.03 mmol, est.)在dcm (0.4 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加n,n-二异丙基乙胺(57
ꢀµ
l, 0.33 mmol)，然后添加丙烯酸酐(20
ꢀµ
l, 0.17 mmol)。将混合物温热至室温并搅拌 2小时，此时将溶液真空浓缩，加入 dmso中，过滤并使用制备型hplc纯化(c18, 20
→
60% 的在h2o +.25% tfa中的mecn)。将含有所需产物的合并的级分冻干，得到化合物c-6, 2-((2s)-1-丙烯酰-4-((2r)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (2.6 mg, 0.005 mmol, 14%产率，经过5 个步骤)，为蓬松的白色固体和位于苄基甲基中心的差向异构体混合物。
[0271]
产物混合物的1h nmr与报告的差向异构体的诊断峰一致lcms: [m+h]
+ m/z = 569.3 amu。
[0272]
合成化合物c-7
dmso-d6, tfa盐)δ 10.31 (s, 1h), 7.37
ꢀ–ꢀ
7.17 (m, 4h), 6.96
ꢀ–ꢀ
6.76 (m, 1h), 6.19 (dd, j = 16.7, 2.3 hz, 1h), 5.88 (d, j = 1.7 hz, 1h), 5.79 (dd, j = 10.3, 2.3 hz, 1h), 4.95 (s, 1h), 4.78 (s, 1h), 4.66 (dd, j = 13.0, 2.8 hz, 1h), 4.51 (dd, j = 12.9, 6.4 hz, 1h), 3.84
ꢀ–ꢀ
3.73 (m, 1h), 3.57 (dd, j = 11.7, 5.9 hz, 1h), 2.96 (d, j = 4.5 hz, 3h), 2.06 (d, j = 1.5 hz, 3h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 567.3 amu。
[0276]
合成化合物c-15向粗品2-((s)-4-((s)-4-亚甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (35 mg, 0.07 mmol, est.)在dcm (1.4 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加n,n-二异丙基乙胺(120
ꢀµ
l, 0.68 mmol)，然后添加2-氟丙烯酸酐(55 mg, 0.34 mmol)。将混合物温热至室温并搅拌 2小时，此时将溶液真空浓缩，加入dmso中，过滤并使用制备型hplc 纯化(c18, 25
→
65%的在h2o +.25% tfa中的mecn)。将含有所需产物的合并级分冻干，得到化合物c-15, 2-((s)-1-(2-氟丙烯酰)-4-((s)-4-亚甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (13.6 mg, 0.023 mmol, 34%产率, 经过4个步骤)，为蓬松的白色固体并为外型和内型烯烃异构体的混合物。
[0277]1h nmr；报道的内烯烃: (400 mhz, 乙腈-d3, tfa盐) δ 12.18 (bs, 1h), 7.41
ꢀ–ꢀ
7.19 (m, 4h), 5.85 (t, j = 1.5 hz, 1h), 5.37
ꢀ–ꢀ
5.14 (m, 2h), 4.84 (bs, 1h), 4.68 (dd, j = 14.3, 1.2hz, 1h), 4.53 (dd, j = 14.3, 5.9 hz, 1h), 4.24 (dt, j = 14.1, 2.3 hz, 1h), 4.19
ꢀ–ꢀ
4.03 (m, 2h), 3.72
ꢀ–ꢀ
3.50 (m, 2h), 3.43 (dd, j = 14.0, 3.7 hz, 1h), 3.35 (d, j = 15.8 hz, 1h), 3.32
ꢀ–ꢀ
3.18 (m, 1h), 3.18
ꢀ–ꢀ
3.06 (m, 1h), 3.03
ꢀ–ꢀ
2.70 (m, 8h), 2.34
ꢀ–ꢀ
2.21 (m, 1h), 2.15
ꢀ–ꢀ
1.98 (m, 5h), 1.91
ꢀ–ꢀ
1.75 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 585.3 amu。
[0278]
合成化合物c-8
向含有在乙醇(3.5 ml)中的粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-4-亚甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(84 mg, 0.14 mmol, est.)的小瓶中添加10% 碳载钯 (29 mg, 0.03 mmol)。将小瓶密封并使用气球放置在氢气气氛下。将反应剧烈搅拌过夜。完成后，反应混合物用dcm(5ml)稀释并通过硅藻土塞过滤，用更多dcm (20 ml)洗涤。真空除去溶剂，粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯未经进一步纯化而用于下一步。
[0279]
lcms: [m+h]
+ m/z = 615.3 amu。
[0280]
来自前一步的粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯和由随后的步骤 2 产生的粗产物采用为合成化合物c-6详述的程序和试剂继续使用。对于最后一步，将含有所需产物的合并的级分冻干，得到化合物c-8, 2-((s)-1-丙烯酰-4-((s)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (4.7 mg, 0.008 mmol, 12%产率，经过5 个步骤)，为蓬松的灰白色固体并且为在苄基甲基中心的差向异构体的混合物。
[0281]1h nmr, 报告复合混合物的诊断峰(41h中的18h)：(400 mhz, dmso-d6, tfa盐) δ 10.37 (宽的 d, j = 68.4 hz, 1h), 7.47
ꢀ–ꢀ
6.99 (m, 4h), 6.97
ꢀ–ꢀ
6.76 (m, 1h), 6.20 (d, j = 16.6 hz, 1h), 5.79 (d, j = 10.5 hz, 1h), 4.94 (bs, 1h), 4.78 (bs, 1h), 4.65 (ddd, j = 21.7, 13.0, 2.7 hz, 1h), 4.49 (td, j = 13.1, 6.3 hz, 1h), 2.95 (dd, j = 21.2, 4.6 hz, 3h), 1.31 (dd, j = 10.8, 6.7 hz, 3h) ppm
lcms: [m+h]
+ m/z = 569.3 amu。
[0282]
合成化合物c-16向粗品2-((s)-4-((s)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (35 mg, 0.07 mmol, est.)在dcm(1.4 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加n,n-二异丙基乙胺(120
ꢀµ
l, 0.68 mmol)，然后添加2-氟丙烯酸酐(55 mg, 0.34 mmol)。将混合物温热至室温并搅拌 2小时，此时将溶液真空浓缩，加入dmso中，过滤，并使用制备型hplc 纯化(c18, 25
→
65%的在h2o +.25% tfa中的mecn)。将含有所需产物的合并级分冻干，得到化合物c-16, 2-((2s)-1-(2-氟丙烯酰)-4-((2s)-4-甲基-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-8'-氧代-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (6.3 mg, 0.010 mmol, 16%产率，经过5 个步骤)，为蓬松的白色固体并且为在苄基甲基中心的差向异构体的混合物。
[0283]1h nmr 报告为在甲基中心的差向异构体的混合物 (400 mhz, 乙腈-d3, tfa盐) δ 12.26 (bs,1h), 7.45
ꢀ–ꢀ
6.97 (m, 4h), 5.42
ꢀ–ꢀ
5.06 (m, 2h), 4.83 (bs, 1h), 4.66 (ddd, j = 16.1, 14.3, 1.2 hz, 1h), 4.51 (dt, j = 14.2, 6.2 hz, 1h), 4.41
ꢀ–ꢀ
3.79 (m, 6h), 3.79
ꢀ–ꢀ
3.30 (m, 5h), 3.30
ꢀ–ꢀ
2.56 (m, 11h), 2.44
ꢀ–ꢀ
2.15 (m, 2h), 2.15
ꢀ–ꢀ
1.98 (m, 2h), 1.88
ꢀ–ꢀ
1.76 (m, 1h), 1.35 (dd, j = 11.1, 6.8 hz, 3h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z= 587.3 amu。
[0284]
实施例5：合成化合物c-9至c-14合成中间体5-1
将nah (2.74 g, 68 mmol)悬浮在无水 thf (45 ml)中并冷却至0℃。添加四氢萘-1-酮 (3.64 ml, 27 mmol)并将混合物温热至室温，用碳酸二烯丙酯(5.89 ml, 41 mmol)处理。将混合物搅拌12小时，然后通过添加饱和nh4cl小心地淬灭，然后用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤并浓缩。残余物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15% 的在己烷中的etoac)，得到1-羟基-3,4-二氢萘-2-甲酸烯丙酯(6.211 g, 26.97 mmol, 99%产率)，为无色油。
[0285]
lctof: [m+h]
+ m/z = 231.1019 amu。
[0286]
将1-羟基-3,4-二氢萘-2-甲酸烯丙酯(2.98g, 13 mmol)和4-溴丁酸乙酯(2.78 ml, 19 mmol)溶解在无水dmf (39.8 ml)中并用k2co
3 (3.58 g, 26 mmol)处理，将混合物在50℃搅拌 4 小时。将混合物倒入h2o中并用etoac萃取(3次)，合并的萃取物依次用稀释的na2s2o3、盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩。残余物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
25% 的在己烷中的etoac)，得到2-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-甲酸烯丙酯(3.27 g, 9.49 mmol, 73%产率)。
[0287]1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ 8.00 (dd, j = 7.9, 1.5 hz, 1h), 7.43 (td, j = 7.5, 1.5 hz, 1h), 7.30
ꢀ–ꢀ
7.24 (m, 1h), 7.18 (d, j = 7.8 hz, 1h), 5.77 (ddt, j = 17.2, 10.8, 5.5 hz, 1h), 5.16
ꢀ–ꢀ
5.07 (m, 2h), 4.55 (ddt, j = 5.6, 3.2, 1.5 hz, 2h), 4.07 (qd, j = 7.1, 1.8 hz, 2h), 3.04 (ddd, j = 17.5, 9.5, 4.8 hz, 1h), 2.92 (dt, j = 17.5, 5.3 hz, 1h), 2.56 (ddd, j = 13.7, 5.7, 4.6 hz, 1h), 2.34
ꢀ–ꢀ
2.27 (m, 2h), 2.16 (ddd, j = 13.9, 9.6, 4.9 hz, 1h), 2.03
ꢀ–ꢀ
1.84 (m, 2h), 1.79
ꢀ–ꢀ
1.59 (m, 2h), 1.25
ꢀ–ꢀ
1.16 (m, 3h) ppm
lcms: [m+h]
+ m/z = 345.1 amu。
[0288]
在使用前将无水甲苯用n2鼓泡 20 分钟。将(r)-p-(cf3)
3-t-buphox (449 mg, 0.76 mmol)和pd2(dba)
3 (261 mg, 0.28 mmol)装入火焰干燥的250 ml 圆底烧瓶中，然后抽真空并用n2回填（3 次）。添加甲苯(80ml)并将混合物在室温搅拌30分钟。单独地，将2-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-甲酸烯丙酯(3.27 g, 9.5 mmol) 溶解在甲苯(40 ml)中并鼓泡20分钟，然后添加到催化剂混合物中并继续搅拌15小时。将反应暴露于空气并用少量硅胶修正并搅拌 5 分钟，然后通过硅胶薄垫过滤，用 8:2 己烷:etoac冲洗。将滤液浓缩并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15% 的在己烷中的etoac)，得到(r)-4-(2-烯丙基-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸乙酯(2.91 g, 9.69 mmol, 》100%产率)，为黄色油。
[0289]1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ 7.89 (dd, j = 7.8, 1.6 hz, 1h), 7.31 (td, j = 7.5, 1.5 hz, 1h), 7.18
ꢀ–ꢀ
7.11 (m, 1h), 7.07 (dd, j = 7.7, 0.9 hz, 1h), 5.69
ꢀ–ꢀ
5.57 (m, 1h), 4.96
ꢀ–ꢀ
4.89 (m, 2h), 3.95 (q, j = 7.1 hz, 2h), 2.84 (t, j = 6.4 hz, 2h), 2.35 (ddt, j = 13.9, 7.1, 1.3 hz, 1h), 2.22
ꢀ–ꢀ
2.16 (m, 1h), 2.13 (t, j = 7.1 hz, 2h), 1.91 (t, j = 6.4 hz, 2h), 1.64
ꢀ–ꢀ
1.36 (m, 4h), 1.07 (t, j = 7.2 hz, 3h) ppm
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ 201.12, 173.41, 143.17, 134.00, 133.17, 131.84, 128.75, 128.06, 126.70, 118.25, 60.31, 47.66, 39.10, 34.70, 33.76, 30.79, 25.10, 19.44, 14.28 ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 301.2 amu。
[0290]
将(r)-4-(2-烯丙基-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸乙酯(2.85 g, 9.5 mmol)溶解在mecn (14 ml)和etoac (14 ml)中，然后用 h2o (21 ml)、naio
4 (10.15g, 48 mmol)和rucl3·
xh2o (43 mg, 0.21 mmol)处理并在室温剧烈搅拌。90 分钟后，添加第二批naio
4 (2 g)。再过 30 分钟后，将混合物倒入0.5 m nahso4中并用 etoac 萃取（3 次）。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅藻土过滤并浓缩。残余物在meoh (48 ml)中重构，并在0℃用socl
2 (8.3 ml, 114 mmol)逐滴处理。将混合物温热至室温并搅拌 7小时，然后用h2o淬灭，搅拌15分钟，然后倒入h2o中并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用饱和nahco3、盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩。残余物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
30%的在己烷中的etoac)，得到(r)-4-(2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(2.34 g, 7.36 mmol, 78%产率)。
[0291]1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ 8.03 (dd, j = 7.9, 1.7 hz, 1h), 7.44 (td, j = 7.5, 1.5 hz, 1h), 7.31
ꢀ–ꢀ
7.26 (m, 1h), 7.23
ꢀ–ꢀ
7.16 (m, 1h), 3.62 (s, 3h), 3.60 (s, 3h), 3.13
ꢀ–ꢀ
3.02 (m, 1h), 3.01
ꢀ–ꢀ
2.83 (m, 2h), 2.51 (d, j = 15.9 hz, 1h), 2.42 (ddd, j = 13.7, 11.6, 5.1 hz, 1h), 2.31
ꢀ–ꢀ
2.22 (m, 2h), 2.09
ꢀ–ꢀ
2.02 (m, 1h), 1.78
ꢀ–ꢀ
1.65 (m, 2h), 1.61
ꢀ–ꢀ
1.51 (m, 2h) ppm
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ 200.15, 173.59, 172.07, 142.92, 133.37, 131.36, 128.79, 128.23, 126.81, 51.60, 46.83, 39.46, 34.13, 33.34, 30.60, 25.04, 19.46 ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 319.1 amu。
[0292]
将(r)-4-(2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(2.34 g, 7.4 mmol)溶解在etoac (35 ml)中并用hclo4, 60% (120 ul, 1.1 mmol)处理。在n2气氛下添加pd/c, 10重量% (湿的) (460 mg)，然后向容器中充入h2(4次)并在室温剧烈搅拌12小时。将混合物通过硅藻土过滤，浓缩，进一步真空干燥，然后加入meoh (30 ml)中并在0℃用socl
2 (5 ml, 68.92 mmol)处理，温热至室温并搅拌1小时。将混合物浓缩并将残余物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(5
→
35%的在己烷中的etoac)，得到(s)-4-(2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(1.96 g, 6.44 mmol, 88%产率)，为无色油。
[0293]
lc/ms, esi [m+h]
+ = 305.1 m/z。
[0294]
将 naome (7.73 ml, 7.7 mmol)在无水甲苯(40 ml)中的混合物温热至100℃，并经大约60分钟的时间段逐滴添加(s)-4-(2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(1.96 g, 6.4 mmol)在甲苯(25 ml)中的溶液。在混合物冷却至室温并倒入饱和nh4cl中且用etoac萃取(3次)后继续加热4.5小时。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤，并浓缩得到粗品(s)-3-羟基-3',4'-二氢-1'h-螺[环己烷-1,2'-萘]-3-烯-4-甲酸甲酯(1.78 g, 》100%产率)，为淡黄色油状物，其未经进一步纯化即用于下一步。
[0295]1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ 12.12 (s, 1h), 7.22
ꢀ–ꢀ
6.99 (m, 4h), 3.80
ꢀ–ꢀ
3.75 (m, 3h), 2.83 (t, j = 6.8 hz, 2h), 2.72
ꢀ–ꢀ
2.62 (m, 1h), 2.56 (d, j = 16.3 hz, 1h), 2.44
ꢀ–ꢀ
2.23 (m, 3h), 2.22
ꢀ–ꢀ
2.08 (m, 1h), 1.79
ꢀ–ꢀ
1.36 (m, 4h) ppm
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ 172.98, 171.00, 135.75, 135.08, 129.79, 128.87, 125.88, 125.86, 96.77, 51.56, 40.09, 39.84, 33.12, 32.09, 31.73, 25.73, 19.41 ppmlcms: [m+na]
+ m/z = 295.1 amu。
[0296]
将粗品(s)-3-羟基-3',4'-二氢-1'h-螺[环己烷-1,2'-萘]-3-烯-4-甲酸甲酯(485.7 mg, 1.8 mmol, est.)溶解在无水 mecn (8.9 ml)中并用硫脲 (163 mg, 2.1 mmol)和dbu (399
ꢀµ
l, 2.7 mmol)处理，将混合物温热至80℃保持18 小时，然后冷却并浓缩至约1 ml，然后稀释到h2o中。通过过滤收集所得固体，然后再溶解在etoh(3.6ml)中并用1m naoh (1.96 ml, 2.0 mmol)然后是mei (122.1 ul, 2.0 mmol)处理。将混合物在室温剧烈搅拌 45 分钟，然后添加另外的1m naoh (500
ꢀµ
l)和mei (40
ꢀµ
l)，12 小时后将混合物倒入 nah2po4水溶液中并用chcl3萃取（3 次）。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，用 0.05体积meoh 修正，通过硅胶薄垫过滤，用95:5 chcl3:meoh冲洗并浓缩，得到粗品(r)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚(495 mg,1.58 mmol, 89%产率)，为白色固体，其未经进一步纯化即用于下一步。
[0297]
lcms: [m+h]
+ m/z = 313.1 amu。
[0298]
将粗品(r)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚(495 mg, 1.6 mmol, est.)悬浮在无水dcm (3.2 ml)中并用ipr2etn (552
ꢀµ
l, 3.2 mmol)处理，将混合物冷却至0℃，然后逐滴添加三氟甲磺酸酐, 1m在dcm中(2.38 ml, 2.4 mmol)。移除冷却浴并将混合物在室温搅拌2小时。混合物用 2 体积己烷稀释，并通过硅胶
薄垫过滤，用 9:1 己烷:etoac 冲洗。将残余物溶解在dcm:己烷中，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15%的 在己烷中的etoac)，得到中间体5-1, (r)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基三氟甲磺酸酯(480 mg, 1.08 mmol, 68.1%产率)，为淡黄色透明玻璃(vitreous glass)。
[0299]
lcms: [m+h]
+ m/z = 445.1 amu。
[0300]
合成中间体5-2将中间体5-1, (r)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基三氟甲磺酸酯(160 mg, 0.36 mmol)溶解在无水 dmf (1 ml)中并用ipr2etn (0.19 ml, 1.1 mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(74 mg, 0.40 mmol)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。将混合物倒入饱和nahco3中，并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化( 5
→
40% 的在己烷中的etoac)，得到(r)-4-(2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(162.8 mg, 0.339 mmol, 94%产率)，为白色泡沫。
[0301]
lcms: [m+h]
+ m/z = 481.3 amu。
[0302]
将(r)-4-(2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(162.8 mg, 0.34 mmol)溶解在dcm中，冷却至0℃，并用mcpba (101 mg, 0.44 mmol)处理。将混合物搅拌 30 分钟，然后用 et2o (rf = 0.47 (et2o))稀释，用
半饱和nahco
3 (3 次)、盐水洗涤，然后经na2so4干燥并浓缩，得到粗品4-((2r)-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(169.6 mg, 0.342 mmol, 100%产率)，为白色泡沫，其未经进一步纯化而用于下一步。
[0303]
lcms: [m+h]
+ m/z = 497.3 amu。
[0304]
将 1-甲基-l-脯氨醇 (79 mg, 0.68 mmol)溶解在无水thf (2 ml)中，并用kotbu, 1.7m在thf中(400
ꢀµ
l, 0.68 mmol)处理。将混合物陈化 5 分钟，然后在0℃添加到粗品4-((2r)-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(169.6 mg, 0.34 mmol, est.)在无水 thf (1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，然后倒入k2co3水溶液中并用et2o萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩，得到粗品4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(187.3 mg, 0.342 mmol, 100%产率)，为白色泡沫，其未经进一步纯化而用于下一步。
[0305]
lcms: [m+h]
+ m/z = 548.4 amu。
[0306]
在室温，将粗品4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(187 mg, 0.34 mmol, est.)用在二噁烷中的4n hcl (2.5 ml, 10 mmol) 处理1小时。将混合物浓缩然后溶解在1n hcl中并用et2o洗涤(2次)。醚洗液用1n hcl萃取一次，合并的水溶液用k2co3碱化并用etoac反萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经k2co3干燥，过滤并浓缩，得到中间体5-2, (r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4'-(哌嗪-1-基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉] (155.4 mg, 0.347 mmol, 》100%产率)，为透明玻璃，其未经进一步纯化而用于下一步。
[0307]
lcms: [m+h]
+ m/z = 448.3 amu。
[0308]
合成化合物c-9将中间体5-2, (r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4'-(哌嗪-1-基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉] (77.7 mg, 0.17 mmol)溶解在中无水mecn (1.5 ml)中，用丙烯酸酐(30
ꢀµ
l, 0.26 mmol)处理并在室温搅拌30 分钟。将混合物用0.25% tfa水溶液稀释并通过制备型hplc纯化(c18, 10
→
70% 的在h2o + 0.25% tfa中的acn)，得到化合物c-9, 1-(4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮 (62.4 mg, 0.124 mmol, 72%产率)，为白色泡沫。
[0309]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 12.48 (s, 1h), 7.17
ꢀ–ꢀ
7.01 (m, 4h), 6.75
ꢀ–ꢀ
6.65 (m, 1h), 6.21 (dt, j = 16.9, 1.9 hz, 1h), 5.73 (dt, j = 10.5, 1.8 hz, 1h), 4.77 (dd, j = 12.5, 4.6 hz, 1h), 4.69 (dd, j = 12.5, 3.2 hz, 1h), 4.06
ꢀ–ꢀ
3.90 (m, 4h), 3.82
ꢀ–ꢀ
3.61 (m, 6h), 3.18
ꢀ–ꢀ
3.05 (m, 1h), 2.91 (s, 3h), 2.85 (q, j = 6.6 hz, 2h), 2.81
ꢀ–ꢀ
2.59 (m, 6h), 2.36
ꢀ–ꢀ
2.23 (m, 1h), 2.21
ꢀ–ꢀ
1.91 (m, 3h), 1.86
ꢀ–ꢀ
1.75 (m, 1h), 1.75
ꢀ–ꢀ
1.53 (m, 3h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 502.3 amu。
[0310]
合成化合物c-10将2-氟丙烯酸 (164.6 mg, 1.83 mmol)悬浮在无水dcm (2.7 ml)中并冷却至0
℃，然后用dcc (189 mg, 0.910 mmol)处理。将混合物搅拌3小时，然后通过硅藻土过滤并浓缩，得到2-氟丙烯酸酐(139 mg, 0.860 mmol, 47%产率)，为棕色固体，其未经纯化而使用。
[0311]
将中间体5-2, (r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4'-(哌嗪-1-基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉] (77.7 mg, 0.17 mmol)溶解在无水mecn (1.5 ml)中，用 2-氟丙烯酸酐(48 mg, 0.30 mmol)处理，并在室温搅拌 1 小时，然后用 0.25% tfa 水溶液稀释并通过制备型hplc纯化(c18, 10
→
50% 的在h2o + 0.25% tfa中的acn)，得到化合物c-10, 2-氟-1-(4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮 (63 mg, 0.12 mmol, 70%产率)，为白色泡沫。
[0312]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 12.44 (s, 1h), 7.21
ꢀ–ꢀ
6.87 (m, 4h), 5.27 (q, j = 3.8 hz, 1h), 5.19 (dd, j = 25.4, 3.8 hz, 1h), 4.77 (dd, j = 12.5, 4.4 hz, 1h), 4.68 (dd, j = 12.5, 3.2 hz, 1h), 4.13
ꢀ–ꢀ
3.85 (m, 4h), 3.81
ꢀ–ꢀ
3.49 (m, 6h), 3.11 (d, j = 5.1 hz, 1h), 2.94
ꢀ–ꢀ
2.59 (m, 10h), 2.37
ꢀ–ꢀ
2.26 (m, 1h), 1.96 (s, 4h), 1.87
ꢀ–ꢀ
1.54 (m, 4h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 520.2 amu。
[0313]
合成中间体5-3
3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(178.4 mg, 0.3176 mmol, 97%产率) ，其未经纯化即继续使用。
[0318]
lcms: [m+h]
+ m/z = 562.4 amu。
[0319]
将粗品(s)-3-甲基-4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(178.4 mg, 0.318 mmol, est.)用在二噁烷中的4n hcl(2.5 ml)处理，并在室温陈化。50分钟后，将混合物溶解在1n hcl中并用et2o洗涤(2次)。醚洗液用1n hcl反萃取一次，合并的水溶液用k2co3碱化并用etoac 反萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经k2co3干燥，过滤并浓缩，得到中间体5-3, (r)-4'-((s)-2-甲基哌嗪-1-基)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉] (136.2 mg, 0.295 mmol, 93%产率)，为透明玻璃, 其未经纯化即继续使用。
[0320]
lcms: [m+h]
+ m/z = 462.3 amu。
[0321]
合成化合物c-11将中间体5-3, (r)-4'-((s)-2-甲基哌嗪-1-基)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉](68.1 mg, 0.15 mmol est.)溶解在无水mecn (750
ꢀµ
l)中并用丙烯酸酐(25.5
ꢀµ
l, 0.22 mmol)处理。10 分钟后，将混合物用0.25% tfa水溶液稀释，并通过制备型hplc纯化(c18, 10
→
55%的在h2o + 0.25% tfa中的acn)，得到化合物c-11, 1-((s)-3-甲基-4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮 (61.1 mg, 0.119 mmol, 80%产率)，为白色泡沫。
[0322]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 11.56
ꢀ–ꢀ
10.71 (m, 1h), 6.34
ꢀ–ꢀ
6.00 (m, 4h), 5.85
ꢀ–ꢀ
5.68 (m, 1h), 5.27 (d, j = 16.8 hz, 1h), 4.78 (d, j = 10.1 hz, 1h), 4.04
ꢀ–ꢀ
3.64 (m, 3h), 3.54
ꢀ–ꢀ
3.25 (m, 2h), 3.21
ꢀ–ꢀ
2.38 (m, 5h), 2.30
ꢀ–ꢀ
1.60 (m, 13h), 1.47
ꢀ–ꢀ
0.52 (m, 8h), 0.37 (d, j = 4.3 hz, 3h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 516.3 amu。
[0323]
合成化合物c-12将中间体5-3, (r)-4'-((s)-2-甲基哌嗪-1-基)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉](68.1 mg, 0.148 mmol, est.)溶解在无水mecn (750
ꢀµ
l)中并用2-氟丙烯酸酐(35.9 mg, 0.22 mmol)处理。10 分钟后，将混合物用0.25% tfa水溶液稀释，并通过制备型hplc纯化，得到化合物c-12, 2-氟-1-((s)-3-甲基-4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮 (52.4 mg, 0.0982 mmol, 67%产率)，为白色泡沫。
[0324]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 12.63 (s, 1h), 7.16
ꢀ–ꢀ
7.03 (m, 4h), 5.32
ꢀ–ꢀ
5.25 (m, 1h), 5.19 (dd, j = 22.7, 3.9 hz, 1h), 4.78 (dd, j = 12.4, 4.8 hz, 1h), 4.68 (dd, j = 12.3, 3.2 hz, 1h), 4.37 (dt, j = 13.8, 3.2 hz, 1h), 4.29
ꢀ–ꢀ
4.00 (m, 2h), 3.78
ꢀ–ꢀ
3.63 (m, 2h), 3.55 (ddd, j = 14.2, 11.7, 3.4 hz, 1h), 3.10 (d, j = 9.4 hz, 1h), 2.91 (s, 3h), 2.90
ꢀ–ꢀ
2.67 (m, 5h), 2.67
ꢀ–ꢀ
2.56 (m, 4h), 2.35
ꢀ–ꢀ
2.23 (m, 1h), 2.18
ꢀ–ꢀ
1.92 (m, 5h), 1.89
ꢀ–ꢀ
1.78 (m, 1h), 1.78
ꢀ–ꢀ
1.60 (m, 2h), 1.52 (ddd, j = 13.7, 8.4, 5.4 hz, 1h), 1.34 (d, j = 6.7 hz, 3h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 534.3 amu。
[0325]
合成中间体5-4将中间体5-1, (r)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基三氟甲磺酸酯(160 mg, 0.36 mmol)溶解在无水dmf (1 ml)中并用ipr2etn (188
ꢀµ
l, 1.1 mmol)和2-[(2s)-哌嗪-2-基]乙腈二盐酸盐(78 mg, 0.40 mmol)处理，并在室温搅拌20 分钟，然后用boc2o (118 mg, 0.54 mmol)处理并搅拌16小时。将混合物倒入饱和nahco3中并用etoac萃取(3次)，将合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤并浓缩。残余物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(5
→
40%的在己烷中的etoac)，得到(s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(223 mg, 0.429 mmol, 》100%产率)，为白色泡沫。
[0326]
lcms: [m+h]
+ m/z = 520.3 amu。
[0327]
将(s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,
7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(223 mg, 0.43 mmol)溶解在dcm中，冷却至0℃，并用mcpba (128 mg, 0.56 mmol)处理。将混合物搅拌20 分钟，然后用et2o稀释，并用半饱和nahco
3 (3次)、盐水洗涤，然后经na2so4干燥并浓缩，得到粗品(2s)-2-(氰基甲基)-4-((2r)-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(225.9 mg, 0.4217 mmol, 98%产率)，为白色泡沫，其未经纯化即继续使用。
[0328]
lcms: [m+h]
+ m/z = 536.3 amu。
[0329]
将1-甲基-l-脯氨醇 (97 mg, 0.84 mmol)溶解在无水thf (2.5ml)中并用kotbu, 1.7m在thf中(496
ꢀµ
l, 0.84 mmol)处理。将混合物陈化5 分钟，然后在0℃添加到粗品(2s)-2-(氰基甲基)-4-((2r)-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(226 mg, 0.42 mmol, est.)在无水thf (1.5 ml)中的溶液中，将混合物搅拌30 分钟，然后倒入k2co
3 水溶液中并用et2o萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩，得到粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(230 mg, 0.392 mmol, 93.0%产率)，为油状残余物，其未经进一步纯化即继续使用。
[0330]
lcms: [m+h]
+ m/z = 587.4 amu。
[0331]
将粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(230 mg, 0.39 mmol)用在二噁烷中的4n hcl(3 ml, 12 mmol)处理并在室温陈化1小时。浓缩混合物，然后在1n hcl和et2o之间分配，收集水相，并用et2o再洗涤一次。醚洗液用1n hcl反萃取一次，将合并的水相用k2co3碱化并用etoac反萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经k2co3干燥，过滤并浓缩，得到中间体5-4, 2-((s)-4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (171 mg, 0.351 mmol, 89 %产率)，为油状残余物，其未经纯化即继续使用。
[0332]
lcms: [m+h]
+ m/z = 487.3 amu。
[0333]
合成化合物c-13将中间体5-4, 2-((s)-4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (85.4 mg, 0.18 mmol)溶解在无水mecn (1.5 ml)中并用丙烯酸酐(30
ꢀµ
l, 0.26 mmol)处理。将混合物搅拌20 分钟，然后用0.25%的在h2o中的tfa稀释，过滤，并通过制备型hplc纯化(c18, 5
→
55%的在h2o+0.25%tfa中的acn)，得到化合物c-13, 2-((s)-1-丙烯酰-4-((r)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (26.9 mg, 0.0498 mmol, 28%产率)。
[0334]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 10.44 (d, j = 126.7 hz, 1h), 7.15
ꢀ–ꢀ
7.02 (m, 4h), 6.71 (s, 1h), 6.31
ꢀ–ꢀ
6.20 (m, 1h), 5.78 (dd, j = 10.5, 2.1 hz, 1h), 4.84
ꢀ–ꢀ
4.64 (m, 2h), 4.64
ꢀ–ꢀ
4.50 (m, 1h), 4.39 (s, 1h), 4.11
ꢀ–ꢀ
3.90 (m, 1h), 3.78
ꢀ–ꢀ
3.65 (m, 2h), 3.63
ꢀ–ꢀ
3.46 (m, 2h), 3.15
ꢀ–ꢀ
3.04 (m, 1h), 2.91 (s, 3h), 2.89
ꢀ–ꢀ
2.62 (m, 11h), 2.37
ꢀ–ꢀ
2.23 (m, 1h), 2.14
ꢀ–ꢀ
1.94 (m, 4h), 1.87
ꢀ–ꢀ
1.76 (m, 1h), 1.76
ꢀ–ꢀ
1.54 (m, 3h) ppm
7.1, 5.1, 1.9 hz, 1h), 7.29 (td, j = 7.5, 1.1 hz, 1h), 7.19 (ddd, j = 10.9, 8.3, 1.1 hz, 1h), 6.84 (dd, j = 15.6, 1.3 hz, 1h) ppm。
[0339]
将(e)-4-(2-氟苯基)-4-氧代丁-2-烯酸 (6.97 g, 36 mmol)溶解在乙酸(105 ml)中并用pd/c, 10重量% (湿的) (1.2 g, 3.6 mmol)处理。将容器抽真空并回填h
2 ，然后加热至90℃保持2小时。将混合物冷却，通过硅藻土过滤，浓缩，并从甲苯共蒸发一次，然后进一步真空干燥，得到粗品4-(2-氟苯基)丁酸 (6.40 g, 35.1 mmol, 98%产率)。rf = 0.39 (7:3 己烷:etoac + 2% acoh)，其未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0340]1h nmr (500 mhz, 氯仿-d) δ 11.59 (s, 1h), 7.18 (q, j = 6.3, 5.2 hz, 2h), 7.10
ꢀ–ꢀ
6.98 (m, 2h), 2.73 (t, j = 7.6 hz, 2h), 2.41 (t, j = 7.5 hz, 2h), 1.99 (q, j = 7.5 hz, 2h) ppm。
[0341]
将粗品4-(2-氟苯基)丁酸 (6.2 g, 34 mmol)用伊顿试剂 (34 ml)处理并将混合物温热至50℃保持1小时。将混合物冷却至室温并倒入冰水中，用dcm萃取(3次)。合并的萃取物用饱和nahco3、盐水洗涤，然后经na2so4干燥，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15% 的在己烷中的etoac)，得到5-氟-3,4-二氢萘-1(2h)-酮 (4.403 g, 26.8 mmol, 79%产率)。
[0342]1h nmr (500 mhz, cdcl3) δ 7.84 (dd, j = 7.7, 1.2 hz, 1h), 7.32
ꢀ–ꢀ
7.23 (m, 2h), 7.21 (dd, j = 8.1, 1.3 hz, 1h), 2.96 (t, j = 6.2 hz, 2h), 2.67 (dd, j = 7.4, 5.7 hz, 2h), 2.16 (p, j = 6.4 hz, 2h) ppm。
[0343]
将5-氟-3,4-二氢萘-1(2h)-酮 (4.40 g, 27 mmol)溶解在无水thf (45 ml)中并冷却至0℃，然后用nah (2.68 g, 67 mmol)处理。使混合物温热至室温，添加碳酸二烯丙酯(5.77 ml, 40 mmol)并连续搅拌21小时。在冰浴中冷却反应并通过逐滴添加饱和nh4cl淬灭，然后用h2o稀释，并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15%的在己烷中的etoac)，得到5-氟-1-羟基-3,4-二氢萘-2-甲酸烯丙酯(6.04 g, 24.3 mmol, 91%产率)，为浅黄色油。
[0344]1h nmr (400 mhz, cdcl3, 主要互变异构体) δ 12.38 (s, 1h), 7.61 (dd, j = 7.8, 1.4 hz, 1h), 7.30
ꢀ–ꢀ
7.20 (m, 1h), 7.09 (ddd, j = 9.3, 8.3, 1.2 hz, 1h), 5.99 (ddq, j = 17.1, 10.5, 5.7 hz, 1h), 5.43
ꢀ–ꢀ
5.33 (m, 1h), 5.29 (dt, j = 10.4, 1.3 hz, 1h), 4.74 (dt, j = 5.5, 1.4 hz, 2h), 2.85 (t, j = 8.0 hz, 2h), 2.61 (t, j = 7.6 hz, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 249.1 amu。
[0345]
将5-氟-1-羟基-3,4-二氢萘-2-甲酸烯丙酯(3.97 g, 16 mmol)溶解在无水dmf (48 ml)中并用4-溴丁酸乙酯(3.4 ml, 24 mmol)、ki (2.65 g, 16 mmol)和k2co
3 (4.42 g, 32 mmol)处理，将混合物加热至50℃保持3小时。将混合物倒入h2o中并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用稀释的na2s2o3、盐水洗涤，然后经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(5
→
30%的在己烷中的etoac)，得到中间体6-1, 2-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-5-氟-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-甲酸烯丙酯(4.601 g, 12.7 mmol, 79.4%产率)，为无色油。
[0346]
lcms: [m+h]
+ m/z = 363.1 amu。
[0347]
合成中间体6-2
在n2气氛下，将pd2(dba)
3 (174 mg, 0.19 mmol)和(s)-p-(cf3)
3-t-buphox (300 mg, 0.51 mmol)悬浮在无水、脱气的mtbe (40 ml)中。将混合物温热至25℃并搅拌45 分钟。单独地，将中间体6-1, 2-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-5-氟-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-甲酸烯丙酯(2.3 g, 6.4 mmol)溶解在mtbe (40ml)中，并鼓泡20 分钟，然后添加到催化剂混合物中。16 小时后，将反应暴露于空气并用0.3体积己烷和少量硅胶进行修正。将混合物搅拌10 分钟，然后通过硅胶薄垫过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15%的在己烷中的 etoac)，得到(s)-4-(2-烯丙基-5-氟-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸乙酯(1.954 g, 6.14 mmol, 97%产率)，为浅黄色粘性油。
[0348]
lcms: [m+h]
+ m/z = 319.1 amu。
[0349]
将(s)-4-(2-烯丙基-5-氟-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸乙酯(1.95g, 6.1 mmol)溶解在etoac (12 ml)和mecn (12 ml)中，用h2o (19 ml)、naio
4 (6.56 g, 31 mmol)和rucl3·
xh2o (28.0 mg, 0.14 mmol)处理, 并在室温剧烈搅拌混合物2小时。然后将混合物用0.5m nahso4和etoac稀释，搅拌5 分钟，然后通过硅藻土过滤。收集有机相并用etoac萃取水相2次以上。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，并通过硅藻土过滤，浓缩，并进一步真空干燥。将油状残余物溶解在meoh (35 ml)中，冷却至0℃，并用socl
2 (4.3 ml, 59 mmol)逐滴处理。移除冷却浴并将混合物在室温搅拌2小时，然后浓缩。残余物加入et2o中并用nahco3(2次)、盐水洗涤，然后经na2so4干燥并浓缩，得到粗品 (s)-4-(5-氟-2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(2.05 g, 99%产率)为粘性油，
其未经进一步纯化而用于下一步。
[0350]
lcms: [m+h]
+ m/z = 337.1 amu。
[0351]
将粗品 (s)-4-(5-氟-2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(2.05 g, 6.1 mmol, est.)溶解在etoac (31 ml)中并用pd/c, 10重量% (410 mg, 6.1 mmol)和hclo4, 60% (100
ꢀµ
l, 0.91 mmol)处理，并且向该容器充入 h2。将混合物剧烈搅拌12小时，然后通过硅藻土过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(5
→
40%的在己烷中的 etoac)，得到 (r)-4-(5-氟-2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(1.349 g, 69%产率)，为无色油。
[0352]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 7.11
ꢀ–ꢀ
7.01 (m, 1h), 6.87
ꢀ–ꢀ
6.78 (m, 2h), 3.66 (s, 3h), 3.65 (s, 3h), 2.85
ꢀ–ꢀ
2.71 (m, 3h), 2.70
ꢀ–ꢀ
2.63 (m, 1h), 2.37 (d, j = 14.2 hz, 1h), 2.32
ꢀ–ꢀ
2.26 (m, 3h), 1.82
ꢀ–ꢀ
1.64 (m, 4h), 1.54
ꢀ–ꢀ
1.32 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 323.2 amu。
[0353]
将nah (39.5 mg, 1.0 mmol)悬浮在无水甲苯(1.5ml)中并用meoh (8.3 ul, 0.21 mmol)处理，搅拌混合物直至气体逸出停止。逐滴添加(r)-4-(5-氟-2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(265 mg, 0.82 mmol)在无水甲苯(2 ml)中的溶液，并将混合物温热至70℃。50 分钟后，添加第二批nah (20 mg)和meoh (8.3
ꢀµ
l, 0.206 mmol)，并维持搅拌另外6小时。将混合物冷却至室温并倒入饱和nh4cl中，用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15%的在己烷中的etoac)，得到 (1r)-5'-氟-3-氧代-3',4'-二氢-1'h-螺[环己烷-1,2'-萘]-4-甲酸甲酯(188 mg, 0.648 mmol, 79%产率)，为无色、玻璃状油。
[0354]
lcms: [m+h]
+ m/z = 291.1 amu。
[0355]
将 (1r)-5'-氟-3-氧代-3',4'-二氢-1'h-螺[环己烷-1,2'-萘]-4-甲酸甲酯(188 mg, 0.65 mmol)溶解在无水mecn (3.2 ml)中并用硫脲 (59.2 mg, 0.78 mmol)和dbu (145
ꢀµ
l, 0.97 mmol)处理，并将混合物加热至80℃保持11.5小时。将混合物冷却并浓缩至大约500
ꢀµ
l总体积，然后用 nah2po
4 水溶液稀释，并通过离心收集所得固体。
[0356]
lcms: [m+h]
+ m/z = 317.1 amu。
[0357]
将仍然湿的材料悬浮在etoh (2 ml)中，用1m naoh (712
ꢀµ
l, 0.71 mmol)处理，并用mei (48
ꢀµ
l, 0.78 mmol)处理，并在室温剧烈搅拌7小时。将混合物倒入nah2po
4 水溶液中并用chcl
3 萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
10%的在ch2cl2中的meoh)，得到(r)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚(131.9 mg, 0.399 mmol, 62%产率)，为白色固体。
[0358]
lcms: [m+h]
+ m/z = 331.1 amu。
[0359]
将(r)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚(132 mg, 0.40 mmol)悬浮在无水dcm (1 ml)中，并用新鲜蒸馏的ipr2etn (139
ꢀµ
l, 0.80 mmol)处理，然后将混合物冷却至0℃，并逐滴添加三氟甲磺酸酐，1m在dcm中(599
ꢀµ
l, 0.60 mmol)。移除冷却浴并将混合物在室温搅拌2.5小时。然后将混合物用2体积己烷稀释，并通
过硅胶短柱过滤，用 9:1 己烷:etoac 冲洗并浓缩。残余物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15% 的在己烷中的etoac)，得到中间体6-2, (r)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基三氟甲磺酸酯(132.7 mg, 0.287 mmol, 71.9%产率)，为无色残余物。
[0360]
lcms: [m+h]
+ m/z = 463.1 amu。
[0361]
合成中间体6-3将中间体6-2, (r)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基三氟甲磺酸酯(66.4 mg, 0.14 mmol)溶解在无水dmf (410
ꢀµ
l)中并用ipr2etn (75
ꢀµ
l, 0.43 mmol)和2-[(2s)-哌嗪-2-基]乙腈二盐酸盐(31.3 mg, 0.16 mmol)处理，并在室温搅拌混合物。15 分钟后，添加boc2o (50
ꢀµ
l, 0.22 mmol)并继续搅拌16小时。混合物用etoac稀释，并用饱和nh4cl、盐水洗涤，然后经na2so4干燥，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
30%的在己烷中的etoac)，得到 (s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(154.8 mg, 》100%产率)，为白色泡沫，其未经进一步纯化而继续使用。
(m, 1h), 1.78
ꢀ–ꢀ
1.54 (m, 4h) ppm
19
f nmr (376 mhz, 乙腈-d3) δ
ꢀ‑
119.81 (dd, j = 10.1, 5.9 hz) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 559.3 amu。
[0370]
合成化合物c-18将中间体6-3, 2-((s)-4-((r)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (27.4 mg, 0.054 mmol)溶解在mecn (400
ꢀµ
l)中并用2-氟丙烯酸酐(13 mg, 0.081 mmol) 处理。30 分钟后，将混合物用0.25% tfa水溶液稀释，并通过制备型hplc纯化 (c18 10
→
60% 的在h2o+0.25%tfa中的acn) ，得到化合物c-18, 2-((s)-4-((r)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈 (25.3 mg, 0.0439 mmol, 81%产率)，为无色薄膜。
[0371]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 10.69 (s, 1h), 7.21
ꢀ–ꢀ
7.11 (m, 1h), 6.92 (td, j = 8.6, 1.5 hz, 2h), 5.38
ꢀ–ꢀ
5.22 (m, 2h), 4.80 (dd, j = 12.3, 5.1 hz, 1h), 4.73 (dd, j = 12.3, 3.2 hz, 1h), 4.62 (dt, j = 14.3, 2.3 hz, 1h), 4.44 (d, j = 8.8 hz, 1h), 3.79
ꢀ–ꢀ
3.67 (m, 2h), 3.59 (d, j = 13.1 hz, 1h), 3.44 (d, j = 24.8 hz, 2h), 3.18
ꢀ–ꢀ
3.05 (m, 1h), 2.95 (s, 3h), 2.92
ꢀ–ꢀ
2.64 (m, 11h), 2.38
ꢀ–ꢀ
2.26 (m, 1h), 2.19
ꢀ–ꢀ
1.92 (m, 4h), 1.92
ꢀ–ꢀ
1.81 (m, 1h), 1.80
ꢀ–ꢀ
1.65 (m, 2h), 1.65
ꢀ–ꢀ
1.54 (m, 1h) ppm
19
f nmr (376 mhz, 乙腈-d3) δ
ꢀ‑
107.54,
ꢀ‑
119.80 (dd, j = 10.1, 5.9 hz) ppmlcms: [m+h]
+ m/z= 577.3 amu。
[0372]
合成中间体6-4将(3r)-3-(羟甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.16 g, 10 mmol)溶解在dcm (32 ml)中，冷却至0℃，并用et3n (1.67 ml, 12 mmol)和boc2o (2.52 ml, 11 mmol) 处理。移除冷却浴并将混合物在室温搅拌2.5小时。然后用0.5m nahso4、盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(15
→
60% 的在己烷中的etoac)，得到 (r)-2-(羟甲基)哌嗪-1,4-二甲酸二-叔丁酯(2.828 g, 8.94 mmol, 90%产率)，为白色固体。
[0373]
lcms: [m+na]
+ m/z = 339.2 amu。
[0374] 将(r)-2-(羟甲基)哌嗪-1,4-二甲酸二-叔丁酯(297 mg, 0.94 mmol)溶解在无水thf (1.9 ml)中并用mei (234
ꢀµ
l, 3.8 mmol) 处理。将混合物冷却至0℃，添加 nah (45.06 mg, 1.1 mmol)，并且使混合物温热至室温。90 分钟后，将混合物倒入饱和nh4cl中并用etoac萃取(2次)。合并的萃取物用稀释的na2s2o3、盐水洗涤, 经na2so4干燥，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(5
→
60%的在己烷中的etoac) ，得到 (r)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1,4-二甲酸二-叔丁酯(203.1 mg, 0.615 mmol, 66%产率)，为无色油，其静置时结晶。
[0375]1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ 4.12 (d, j = 19.8 hz, 1h), 3.99 (dt, j = 13.6, 2.0 hz, 1h), 3.95
ꢀ–ꢀ
3.81 (m, 1h), 3.73 (d, j = 12.3 hz, 1h), 3.26 (d, j = 7.5 hz, 2h), 3.23 (s, 3h), 2.82 (dt, j = 13.2, 4.6 hz, 2h), 2.77
ꢀ–ꢀ
2.60 (m, 1h), 1.35 (s, 18h) ppm
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ 154.77 (2), 79.95, 79.73, 69.02, 58.87, 50.04, 43.44, 42.46, 39.27, 28.25, 28.23 ppmlcms: [m+na]
+ m/z = 353.2 amu。
[0376]
在室温，将(r)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1,4-二甲酸二-叔丁酯(203.1 mg, 0.62 mmol)用在二噁烷中的4n hcl (2 ml) 处理90 分钟。得到凝胶状固体，将其悬浮在et2o中，过滤，并真空干燥，得到中间体6-4, (r)-2-(甲氧基甲基)哌嗪二盐酸盐(105.3 mg, 0.519 mmol, 84%产率)，为白色、吸湿性固体。
[0377]1h nmr (600 mhz, d2o) δ 3.91
ꢀ–ꢀ
3.86 (m, 1h), 3.81
ꢀ–ꢀ
3.72 (m, 5h), 3.72
ꢀ–ꢀ
3.68 (m, 1h), 3.56
ꢀ–ꢀ
3.47 (m, 1h), 3.45
ꢀ–ꢀ
3.43 (m, 3h), 3.43
ꢀ–ꢀ
3.37 (m, 1h) pp,合成中间体6-5
将中间体6-2, (r)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基三氟甲磺酸酯(66.4 mg, 0.14 mmol)溶解在无水dmf (410
ꢀµ
l)中并用ipr2etn (75
ꢀµ
l, 0.43 mmol)和中间体6-4, (r)-2-(甲氧基甲基)哌嗪二盐酸盐(35 mg, 0.17 mmol) 处理，并在室温搅拌混合物。90 分钟后，添加boc2o (49
ꢀµ
l, 0.21 mmol)，并继续搅拌2小时。然后将混合物用etoac稀释并用饱和nh4cl、盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
30% 的在己烷中的etoac) ，得到 (r)-4-((r)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(84.3 mg, 》100%产率)，为白色泡沫。
[0378]
lcms: [m+h]
+ m/z = 543.3 amu。
[0379]
将(r)-4-((r)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(84.3 mg, 0.16 mmol)溶解在dcm(520
ꢀµ
l)中，冷却至0℃，并用mcpba (46.5 mg, 0.20 mmol) 处理。40 分钟后，混合物用et2o稀释，并用半饱和nahco
3 (2次)、盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩，得到粗品 (2r)-4-((2r)-5-氟-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(87.8 mg, 》100%产率)，为白色泡沫。粗产物未经进一步纯化而继续使用。
[0380]
lcms: [m+h]
+ m/z = 559.3 amu。
[0381]
将1-甲基-l-脯氨醇 (36 mg, 0.31 mmol)溶解在thf (1 ml)中并用kotbu, 1.7m在thf中(183
ꢀµ
l, 0.31 mmol) 处理。将混合物搅拌5 分钟，然后在0℃添加到粗品 (2r)-4-((2r)-5-氟-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(86.8 mg, 0.16 mmol, est.)在无水thf (500
ꢀµ
l)中的溶液中。50 分钟后，将混合物倒入k2co3水溶液中并用etoac萃取(3次)。合并的萃取
83%产率)，为无色薄膜。
[0388]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 10.49 (s, 1h), 7.17 (td, j = 8.0, 5.9 hz, 1h), 6.93 (td, j = 8.6, 1.7 hz, 2h), 5.29 (q, j = 3.9 hz, 1h), 5.20 (dd, j = 24.2, 3.9 hz, 1h), 4.81 (dd, j = 12.3, 4.5 hz, 1h), 4.73
ꢀ–ꢀ
4.64 (m, 2h), 4.57 (d, j = 9.8 hz, 2h), 3.82
ꢀ–ꢀ
3.66 (m, 2h), 3.63
ꢀ–ꢀ
3.35 (m, 5h), 3.33 (s, 3h), 3.20
ꢀ–ꢀ
3.08 (m, 1h), 2.94 (s, 3h), 2.90
ꢀ–ꢀ
2.62 (m, 8h), 2.40
ꢀ–ꢀ
2.26 (m, 1h), 2.20
ꢀ–ꢀ
1.94 (m, 4h), 1.91
ꢀ–ꢀ
1.72 (m, 2h), 1.72
ꢀ–ꢀ
1.63 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 582.3 amu。
[0389]
合成化合物c-21将中间体6-5, (r)-5-氟-4'-((r)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉] (6.53 mg, 0.013 mmol)溶解在无水mecn (85
ꢀµ
l)中并用反式-4-二甲基氨基巴豆酸盐酸盐 (4.2 mg, 0.026 mmol)、edc
•
hcl (4.9 mg, 0.026 mmol)和ipr2etn (4.5
ꢀµ
l, 0.026 mmol) 处理。15 分钟后， 将混合物用0.25% tfa水溶液稀释，并通过制备型hplc纯化 (c18, 10
→
55%的在h2o+0.25%tfa中的 acn) ，得到化合物c-21, (e)-4-(二甲基氨基)-1-((r)-4-((r)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮 (7.3 mg, 0.0118 mmol, 92%产率)，为淡黄色薄膜。
[0390]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 10.38 (s, 1h), 7.05 (td, j = 8.0, 5.9 hz, 1h), 6.86
ꢀ–ꢀ
6.77 (m, 2h), 6.71 (d, j = 14.7 hz, 1h), 6.60 (dt, j = 15.3, 6.8 hz, 1h), 4.69 (dd, j = 12.5, 4.5 hz, 1h), 4.62
ꢀ–ꢀ
4.22 (m, 4h), 3.70 (d, j = 6.5 hz, 2h), 3.67
ꢀ–ꢀ
3.57 (m, 2h), 3.47 (d, j = 13.3 hz, 1h), 3.33 (d, j = 30.6 hz, 3h), 3.23
ꢀ–ꢀ
3.18 (m, 3h), 3.07
ꢀ–ꢀ
2.98 (m, 1h), 2.82 (s, 3h), 2.79
ꢀ–ꢀ
2.47 (m, 15h), 2.25
ꢀ–ꢀ
2.14 (m, 1h), 2.07
ꢀ–ꢀ
1.81 (m, 4h), 1.76
ꢀ–ꢀ
1.61 (m, 2h), 1.59
ꢀ–ꢀ
1.51 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 582.3 amu。
[0391]
实施例7：合成化合物c-22和c-23合成中间体7-1
27.74 ppm。
[0395]
将1-(叔丁基) 2-氧代-3,4-二氢喹啉-1,3(2h)-二甲酸3-烯丙酯(3.45 g, 10 mmol)溶解在无水dmf (20 ml)中并用4-溴丁酸乙酯(2.23 ml, 16 mmol)、ki (1.73 g, 10.4 mmol)和k2co
3 (4.3 g, 31 mmol) 处理，并在室温搅拌混合物。23小时后，混合物用h2o 稀释，并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤并浓缩。残余物通过快速柱色谱在硅胶上纯化 (0
→
40%的在己烷中的etoac) ，得到中间体7-1, 3-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-2-氧代-3,4-二氢喹啉-1,3(2h)-二甲酸3-烯丙基1-(叔丁基) 酯(4.36 g, 9.79 mmol, 94%产率)，为无色油。
[0396]
lcms: [m+2h-boc]
+ m/z = 346.1 amu。
[0397]
合成中间体7-2向含有中间体7-1, 3-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-2-氧代-3,4-二氢喹啉-1,3(2h)-二甲酸3-烯丙基1-(叔丁基) 酯(2.22 mg, 5.0 mmol)的烘干的烧瓶中添加pd2(dba)
3 (228 mg, 0.25 mmol)和(r)-p-(cf3)
3-t-buphox (590 mg, 1.0 mmol)，然后添加thf (50 ml)。顶部空间用氩气吹扫并且烧瓶装有冷凝器。在室温搅拌混合物30 分钟，然后温热至50℃并搅拌过夜。完成后，将混合物冷却，用dcm (50 ml) 稀释，并通过硅藻土塞过滤，将其用更多
dcm (100 ml) 洗涤。真空除去溶剂，并将混合物使用快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
60%的在己烷中的etoac) ，得到 (s)-3-烯丙基-3-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-2-氧代-3,4-二氢喹啉-1(2h)-甲酸叔丁酯(1.78 mg, 4.43 mmol, 89%产率)，为灰白色固体。
[0398]
lcms: [m+h]
+ m/z = 402.2 amu。
[0399]
向(s)-3-烯丙基-3-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-2-氧代-3,4-二氢喹啉-1(2h)-甲酸叔丁酯(1.78 g, 4.4 mmol)在mecn (7.2 ml)和etoac (7.2 ml)中的溶液中添加 h2o (9.5 ml)，然后添加naio
4 (3.8 g, 17 mmol)，最后添加rucl3·
xh2o (28 mg, 0.13 mmol)。混合物在室温剧烈搅拌20分钟，此时添加另外2当量的naio4。再过 20 分钟后，添加另外 1 当量的naio4并将反应搅拌最后 1 小时。完成后，将反应混合物冷却至室温并倒入na2s2o3的半饱和溶液(30ml)中。混合物使用etoac (30 ml * 3)萃取，合并的有机物使用na2so4干燥，过滤并浓缩，得到粗品酸，其未经进一步纯化而使用。
[0400]
lcms: [m+h]
+ m/z= 420.2 amu。
[0401]
将粗品酸加入meoh (45 ml)中并冷却至0℃。向所述冷却的溶液中逐滴添加socl
2 (3.9 ml, 53 mmol)，将反应温热至室温并搅拌过夜。完成后，缓慢添加h2o (100 ml)，然后用etoac (60 ml * 3) 萃取。合并的有机物使用na2so4干燥，过滤，并浓缩而获得粗品 (r)-4-(3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-3-基)丁酸甲酯，其未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0402]
lcms: [m+h]
+ m/z = 320.1 amu。
[0403]
向粗品 (r)-4-(3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-3-基)丁酸甲酯(1.42 g, 4.43 mmol, est.)在thf (45 ml)中的溶液中添加bh3·
thf (13.3 ml, 13 mmol, 1 m在thf中)。将反应加热至50℃并搅拌过夜。完成后，缓慢逐滴添加1 m hcl以淬灭反应直到不再观察到气泡为止。在搅拌另外20分钟后，使用 2 m naoh 使水溶液呈碱性。用dcm (100 ml * 3) 萃取混合物，合并的有机物使用na2so4干燥，过滤, 并真空浓缩，得到粗品(r)-4-(3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-基)丁酸甲酯，其未经进一步纯化而使用。
[0404]
lcms: [m+h]
+ m/z = 306.1 amu。
[0405]
向粗品(r)-4-(3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-基)丁酸甲酯(1.35 g, 4.4 mmol, est.)在chcl3/meoh (2:1, 45 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加acoh (2.5 ml, 44 mmol)，然后添加甲醛溶液(1.8 ml, 22 mmol, 37%在h2o中)。将混合物搅拌1小时，然后添加nabh(oac)
3 (1.88 g, 8.9 mmol)并将混合物温热至室温。搅拌另外4小时后，将反应用半饱和nahco
3 (100 ml) 淬灭并使用dcm (60 ml * 3) 萃取。合并的有机物经na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。将混合物使用快速柱色谱在硅胶上纯化(10
→
80%的在己烷中的etoac) ，得到 (r)-4-(3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-3-基)丁酸甲酯(270 mg, 0.94 mmol, 75%产率)，为浅黄色泡沫。
[0406]1h nmr (400 mhz, 氯仿-d) δ 7.09 (ddd, j = 8.2, 7.3, 1.7 hz, 1h), 6.95 (dd, j = 7.3, 1.1 hz, 1h), 6.68
ꢀ–ꢀ
6.52 (m, 2h), 3.66 (s, 3h), 3.65 (s, 3h), 3.14 (dd, j = 11.5, 1.7 hz, 1h), 3.00 (d, j = 11.5, 1h), 2.90 (s, 3h), 2.78
ꢀ–ꢀ
2.58 (m, 2h), 2.41 (d, j = 14.7 hz, 1h), 2.37
ꢀ–ꢀ
2.23 (m, 3h), 1.78
ꢀ–ꢀ
1.64 (m, 2h), 1.55
ꢀ–ꢀ
1.33 (m, 2h) ppm
lcms: [m+h]
+ m/z = 320.1 amu。
[0407]
向(r)-4-(3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-3-基)丁酸甲酯(398 mg, 1.3 mmol)在thf (12.5 ml)中的冷却(-78℃)的溶液中添加lda (1.38 ml, 2.5 mmol, 1.8 m在己烷中)。将混合物温热至室温并搅拌 2小时。然后用饱和nh4cl (30 ml) 淬灭反应并用dcm (20 ml * 3) 萃取。合并的有机物经na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。将混合物使用快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
40%的在己烷中的etoac)，得到 (1r)-1'-甲基-3-氧代-1',4'-二氢-2'h-螺[环己烷-1,3'-喹啉]-4-甲酸甲酯(270 mg, 0.94 mmol, 75%产率)，为浅黄色-泡沫。
[0408]
lcms: [m+h]
+ m/z = 288.1 amu。
[0409]
向含有 (1r)-1'-甲基-3-氧代-1',4'-二氢-2'h-螺[环己烷-1,3'-喹啉]-4-甲酸甲酯(135 mg, 0.47 mmol)在mecn (2.4 ml)中的溶液的小瓶中添加硫脲 (43 mg, 0.56 mmol)，然后添加dbu (105
ꢀµ
l, 0.70 mmol)。将小瓶密封并将反应搅拌过夜。完成后，将混合物冷却至室温，倒入饱和nahco
3 (10 ml)中，并用dcm (3 x 10 ml) 萃取。合并的有机物经na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。粗品(r)-2-巯基-1'-甲基-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-酚未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0410]
lcms: [m+h]
+ m/z = 314.1 amu。
[0411]
向含有粗品(r)-2-巯基-1'-甲基-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-酚(147 mg, 0.47 mmol, est.)的小瓶中添加etoh (1.7 ml)，然后添加1m naoh (0.52 ml, 0.52 mmol, aq.)。一旦底物完全溶解，添加mei (33
ꢀµ
l, 0.52 mmol)。反应搅拌1小时，然后添加饱和nahco
3 (10 ml)并用dcm (10 ml * 3) 萃取混合物。合并的有机物经na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。粗品(r)-1'-甲基-2-(甲硫基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-酚未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0412]
lcms: [m+h]
+ m/z = 328.1 amu。
[0413]
向粗品(r)-1'-甲基-2-(甲硫基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-酚(83 mg, 0.25 mmol)在dcm (1 ml)中的溶液中添加n,n-二异丙基乙胺(88
ꢀµ
l, 0.51 mmol)。搅拌5分钟后，将混合物冷却至0℃，并添加三氟甲磺酸酐 (380
ꢀµ
l, 0.38 mmol, 1m在dcm中)。将反应搅拌2小时，然后添加己烷(2 ml)，并使混合物通过硅胶塞，用30%的在己烷中的 etoac (20 ml) 冲洗。将合并的有机物真空浓缩，中间体7-2,(r)-1'-甲基-2-(甲硫基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基三氟甲磺酸酯未经进一步纯化即用于后续反应中。
[0414]
lcms: [m+h]
+ m/z = 460.1 amu。
[0415]
合成中间体7-3
向中间体7-2,(r)-1'-甲基-2-(甲硫基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基三氟甲磺酸酯(126 g, 0.27 mmol)在dcm (3 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加三乙胺(191
ꢀµ
l, 1.4 mmol)，然后添加(s)-2-(哌嗪-2-基)乙腈
·
2hcl (79 mg, 0.49 mmol)。将所得溶液温热至室温并搅拌6小时。观察到起始材料消耗后，添加二碳酸二叔丁酯(240 mg, 1.1 mmol)，将反应加热至40℃并搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，倒入饱和nahco
3 (15 ml, aq.)中并用dcm (10 ml * 3) 萃取。合并的有机萃取物经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。混合物使用柱色谱纯化(10
→
80%的在己烷中的etoac) ，得到 (s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-1'-甲基-2-(甲硫基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(119 mg, 0.22 mmol, 81%产率)，为白色泡沫。
[0416]
lcms: [m+h]
+ m/z = 535.2 amu。
[0417]
向(s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-1'-甲基-2-(甲硫基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(119 mg, 0.22 mmol)在dcm (2.2 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加mcpba (154 mg, 0.66 mmol)。将混合物搅拌30 分钟，然后添加半饱和nahco
3 (5 ml, aq.) ，并用dcm (5 ml * 3) 萃取混合物。合并的有机物用na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。粗品(7r)-4-((s)-4-(叔丁氧基羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-1'-甲基-2-(甲基磺酰基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]1'-氧化物未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0418]
lcms: [m+h]
+ m/z = 583.2 amu。
[0419]
向含有nah (26 mg, 0.68 mmol, 60%矿物油分散体)的冷却(0℃)的小瓶中添加thf (1 ml)，然后添加(s)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇 (132
ꢀµ
l, 1.11 mmol)。将混合物搅拌45 分钟，此时添加为在thf (1.2 ml)中的溶液形式的粗品(7r)-4-((s)-4-(叔丁氧基羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-1'-甲基-2-(甲基磺酰基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹
2.34
ꢀ–ꢀ
2.23 (m, 1h), 2.15
ꢀ–ꢀ
1.96 (m, 3h), 1.69
ꢀ–ꢀ
1.54 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 556.3 amu。
[0427]
合成化合物c-23向粗品2-((s)-4-((r)-1'-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-2-基)乙腈 (57 mg, 0.11 mmol, 粗的est.)在dcm (2.3 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加n,n-二异丙基乙胺(200
ꢀµ
l, 1.1 mmol)，然后添加2-氟丙烯酸酐(55 mg, 0.34 mmol)。将混合物温热至室温并搅拌 2小时，此时将溶液真空浓缩，加入 dmso中，过滤并使用制备型hplc 纯化 (c18, 20
→
60%的在h2o +. 25% tfa中的mecn)。将含有所需产物的合并级分冻干，得到化合物c-23, 2-((s)-1-(2-氟丙烯酰)-4-((r)-1'-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-1',4',5,8-四氢-2'h,6h-螺[喹唑啉-7,3'-喹啉]-4-基)哌嗪-2-基)乙腈 (10.5 mg, 0.018 mmol, 16%产率，经过5 个步骤)，为蓬松的灰白色固体。
[0428]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3, tfa盐) δ 10.65 (s, 1h), 7.07 (ddd, j = 8.2, 7.3, 1.6 hz, 1h), 6.93 (dd, j = 7.4, 1.6 hz, 1h), 6.67 (dd, j = 8.3, 1.1 hz, 1h), 6.60 (td, j = 7.3, 1.1 hz, 1h), 5.42
ꢀ–ꢀ
5.09 (m, 2h), 4.84 (bs, 1h), 4.70 (qd, j = 12.4, 4.2 hz, 2h), 4.47 (d, j = 14.1 hz, 1h), 4.32 (d, j = 12.1 hz, 1h), 3.87 (bs, 4h), 3.76
ꢀ–ꢀ
3.61 (m, 2h), 3.52 (d, j = 14.1 hz, 1h), 3.43
ꢀ–ꢀ
3.30 (m, 1h), 3.16
ꢀ–ꢀ
2.98 (m, 3h), 2.98
ꢀ–ꢀ
2.80 (m, 7h), 2.80
ꢀ–ꢀ
2.50 (m, 6h), 2.37
ꢀ–ꢀ
2.22 (m, 1h), 2.18
ꢀ–ꢀ
1.96 (m, 2h), 1.70
ꢀ–ꢀ
1.55 (m, 2h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 574.3 amu。
[0429]
实施例8：合成化合物c-24至c-30合成中间体8-1
己烷:et2o)。
[0432]
lcms: [m+h]
+ m/z = 337.1 amu。
[0433]
将 (r)-4-(5-氟-2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(1.64 g, 4.9 mmol)溶解在etoac (25 ml)中并用pd/c, 10重量% (320 mg)和hclo4, 60% (80
ꢀµ
l, 0.52 mmol) 处理，并且向容器中充入h2。11小时后，将混合物通过硅藻土过滤并浓缩。残余物加入meoh (28 ml)中并在0℃用socl
2 (2.0 ml, 28 mmol) 逐滴处理。移除冷却浴将混合物搅拌2小时，然后浓缩，用h2o稀释，并用et2o萃取(3次)。合并的萃取物用饱和nahco3、盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤，并浓缩，得到 (s)-4-(5-氟-2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(1.69 g, 5.24 mmol, 93%产率)。rf = 0.43 (8:2 己烷:etoac)。
[0434]
lcms: [m+h]
+ m/z = 322.2 amu。
[0435]
将nah (251.64 mg, 6.3 mmol)悬浮在无水甲苯(20 ml)中并用meoh (53
ꢀµ
l, 1.3 mmol) 处理。搅拌混合物直至气体逸出停止，然后添加 (s)-4-(5-氟-2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(1.69 g, 5.2 mmol)在甲苯(10 ml)中的溶液并将混合物加热至70℃。4小时后，将混合物倒入饱和nh4cl中并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到粗品 (1s)-5'-氟-3-氧代-3',4'-二氢-1'h-螺[环己烷-1,2'-萘]-4-甲酸甲酯(1.16g, 76%产率)，为浅黄色油，其未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0436]1h nmr (600 mhz, 氯仿-d) δ 12.12 (d, j = 1.2 hz, 1h), 7.09
ꢀ–ꢀ
7.04 (m, 1h), 6.86
ꢀ–ꢀ
6.81 (m, 2h), 3.79
ꢀ–ꢀ
3.75 (m, 3h), 2.77 (t, j = 6.9 hz, 2h), 2.67 (dd, j = 16.4, 0.9 hz, 1h), 2.56 (d, j = 16.2 hz, 1h), 2.36
ꢀ–ꢀ
2.26 (m, 2h), 2.19 (dq, j = 18.2, 1.5 hz, 1h), 2.12 (dq, j = 18.2, 1.4 hz, 1h), 1.72 (dtt, j = 13.5, 6.7, 1.2 hz, 1h), 1.63 (dtd, j = 13.5, 6.7, 1.2 hz, 1h), 1.59
ꢀ–ꢀ
1.52 (m, 1h), 1.51
ꢀ–ꢀ
1.43 (m, 1h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 291.1 amu。
[0437]
将粗品 (1s)-5'-氟-3-氧代-3',4'-二氢-1'h-螺[环己烷-1,2'-萘]-4-甲酸甲酯(488 mg, 1.7 mmol)溶解在无水mecn (8.4 ml)中并用硫脲 (154 mg, 2.0 mmol)和dbu (376
ꢀµ
l, 2.5 mmol) 处理，并将混合物加热至80℃。3小时后，将混合物冷却至室温，浓缩至大约1 ml，并用nah2po4水溶液稀释。通过过滤收集所得沉淀，将仍然湿的材料悬浮在etoh (8.4 ml)中，用1m naoh (1.85 ml, 1.9 mmol)和mei (126
ꢀµ
l, 2.0 mmol) 处理，并在室温剧烈搅拌混合物19小时。将混合物倒入nah2po4水溶液中并用chcl
3 萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
10%的在ch2cl2中的meoh) (rf = 0.37 (95:5 chcl3:meoh)) ，得到(s)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚(403.8 mg,1.22 mmol, 72.7%产率)，为白色固体。
[0438]
lcms: [m+h]
+ m/z = 331.1 amu。
[0439]
将(s)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚(229 mg, 0.69 mmol)悬浮在无水dcm (1.7 ml)中并用新鲜蒸馏的ipr2etn (241
ꢀµ
l, 1.4 mmol) 处理，然后将混合物冷却至0℃，并逐滴添加三氟甲磺酸酐, 1m在dcm中(1040
ꢀµ
l, 1.0 mmol)。移除冷却浴并将混合物在室温搅拌1小时，然后用2体积己烷稀释，并通过硅胶
喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(167.8 mg, 》100%产率)，为白色泡沫。
[0442]
lcms: [m+h]
+ m/z = 538.3 amu。
[0443]
将 (s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(133.1 mg, 0.25 mmol)溶解在dcm (825
ꢀµ
l)中，冷却至0℃，并用mcpba (62.7 mg, 0.27 mmol) 处理。20 分钟后，混合物用et2o稀释，并依次用半饱和nahco
3 (2次)、盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到粗品 (2s)-2-(氰基甲基)-4-((2s)-5-氟-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯，其未经进一步纯化继续使用。
[0444]
lcms: [m+h]
+ m/z = 554.3 amu将1-甲基-l-脯氨醇 (57 mg, 0.50 mmol)溶解在无水thf (1.5 ml)中，并用kotbu, 1.7m在thf中 (291
ꢀµ
l, 0.50 mmol) 处理，将混合物搅拌5 分钟，然后在0℃添加到粗品 (2s)-2-(氰基甲基)-4-((2s)-5-氟-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(137.1 mg, 0.25 mmol)在无水thf (1 ml)中的溶液中。30 分钟后，将混合物倒入k2co3水溶液中并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在碱性氧化铝上纯化(0
→
100%的在己烷中的et2o，然后是100% etoac)，得到 (s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(113.5 mg, 0.188 mmol, 76%产率)，为浅黄色泡沫。
[0445]
lcms: [m+h]
+ m/z = 605.4 amu。
[0446]
在室温，将 (s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(113.5 mg, 0.19 mmol)用在二噁烷中的4n hcl (2 ml)处理30 分钟。然后浓缩该混合物，溶解在1n hcl中，并用et2o洗涤(2次)，将合并的醚洗液用 1n hcl 萃取一次。合并的水相用k2co3碱化并用etoac反萃取(3次)，合并的萃取物经k2co3干燥，过滤并浓缩，得到中间体8-2, 2-((s)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (86.5 mg, 0.171 mmol, 91%产率)。
[0447]
lcms: [m+h]
+ m/z = 504.4 amu。
[0448]
合成化合物c-24在0℃，将中间体8-2, 2-((s)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (21.6 mg, 0.043 mmol)溶解在无水mecn (400
ꢀµ
l)中并用丙烯酸酐(7.4
ꢀµ
l, 0.064 mmol) 处理，然后温热至室温。10 分钟后，将混合物用0.25% tfa水溶液稀释，并通过制备型hplc纯化 (c18 10
→
60%的在h2o+0.25%tfa中的acn)，得到化合物c-24, 2-((s)-1-丙烯酰-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (7.6 mg, 32%产率)，为无色薄膜。
[0449]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 10.74 (s, 1h), 7.14 (td, j = 8.1, 5.9 hz, 1h), 6.90 (dd, j = 9.7, 7.4 hz, 2h), 6.72 (s, 1h), 6.25 (dd, j = 16.7, 2.1 hz, 1h), 5.77 (dd, j = 10.6, 2.1 hz, 1h), 4.80
ꢀ–ꢀ
4.64 (m, 2h), 4.51 (dt, j = 14.1, 2.4 hz, 1h), 4.42
ꢀ–ꢀ
4.25 (m, 1h), 3.96 (d, j = 24.6 hz, 1h), 3.77
ꢀ–ꢀ
3.62 (m, 2h), 3.63
ꢀ–ꢀ
3.40 (m, 2h), 3.14
ꢀ–ꢀ
3.02 (m, 1h), 2.91 (s, 3h), 2.88
ꢀ–ꢀ
2.60 (m, 11h), 2.35
ꢀ–ꢀ
2.23 (m, 1h), 2.16
ꢀ–ꢀ
1.91 (m, 4h), 1.88
ꢀ–ꢀ
1.78 (m, 1h), 1.76
ꢀ–ꢀ
1.63 (m, 2h), 1.57 (dt, j = 12.7, 6.2 hz, 1h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 559.3 amu。
[0450]
合成化合物c-25在室温，将中间体8-2, 2-((s)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (21.6 mg, 0.043 mmol)溶解在无水mecn (400
ꢀµ
l)中并用2-氟丙烯酸酐 (10.4 mg, 0.0643 mmol) 处理。25 分钟后，将混合物用0.25% tfa水溶液稀释，并通过制备型hplc纯化 (c18 10
→
60%的在h2o+0.25%tfa中的acn)，得到化合物c-25, 2-((s)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈 (20.1 mg, 0.0349 mmol, 81%产率)。
[0451]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 9.90 (s, 1h), 6.15 (td, j = 8.1, 5.9 hz, 1h), 5.97
ꢀ–ꢀ
5.87 (m, 2h), 4.38
ꢀ–ꢀ
4.18 (m, 2h), 3.86 (s, 1h), 3.77 (dd, j = 12.3, 5.7 hz, 1h), 3.70 (dd, j = 12.3, 3.4 hz, 1h), 3.56 (dt, j = 14.2, 2.3 hz, 1h), 3.38 (d, j = 9.8 hz, 1h), 3.11 (s, 1h), 2.79
ꢀ–ꢀ
2.65 (m, 2h), 2.60
ꢀ–ꢀ
2.50 (m, 1h), 2.48
ꢀ–ꢀ
2.31 (m, 1h), 2.17
ꢀ–ꢀ
2.04 (m, 1h), 1.94 (s, 3h), 1.92
ꢀ–ꢀ
1.85 (m, 2h), 1.85
ꢀ–ꢀ
1.75 (m, 3h), 1.74
ꢀ–ꢀ
1.61 (m, 5h), 1.38
ꢀ–ꢀ
1.25 (m, 1h), 1.18
ꢀ–ꢀ
0.90 (m, 4h), 0.90
ꢀ–ꢀ
0.79 (m, 1h), 0.71 (dq, j = 20.4, 6.6 hz, 2h), 0.60 (dt, j = 13.1, 6.1 hz, 1h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 577.3 amu。
[0452]
合成化合物c-26将中间体8-2, 2-((s)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (21.6 mg, 0.043 mmol)溶解在无水mecn (400
ꢀµ
l)中并用ipr2etn (14.9
ꢀµ
l, 0.086 mmol)、反式-4-二甲基氨基巴豆酸盐酸盐 (14.2 mg, 0.086 mmol)和edc
•
hcl (16.4 mg, 0.086 mmol) 处理，并在室温搅拌混合物。16 小时后，将混合物用0.25% tfa水溶液稀释，并通过制备型hplc纯化 (c18 10
→
60%的在h2o+0.25%tfa 中的acn) ，得到化合物c-26, 2-((s)-1-((e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (20.5 mg, 0.0333 mmol, 78%产率)，为浅棕色着色的薄膜。
[0453]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 12.13 (s, 1h), 10.63 (s, 1h), 7.14 (td, j = 8.2, 5.9 hz, 1h), 6.94
ꢀ–ꢀ
6.85 (m, 2h), 6.79
ꢀ–ꢀ
6.69 (m, 1h), 4.82
ꢀ–ꢀ
4.64 (m, 2h), 4.60
ꢀ–ꢀ
4.28 (m, 2h), 4.12
ꢀ–ꢀ
3.94 (m, 1h), 3.81 (d, j = 6.2 hz, 2h), 3.77
ꢀ–ꢀ
3.31 (m, 5h), 3.20
ꢀ–ꢀ
3.01 (m, 2h), 2.92 (s, 3h), 2.87
ꢀ–ꢀ
2.60 (m, 16h), 2.35
ꢀ–ꢀ
2.23 (m, 1h), 2.16
ꢀ–ꢀ
1.90 (m, 4h), 1.88
ꢀ–ꢀ
1.77 (m, 1h), 1.71 (dt, j = 13.4, 7.0 hz, 2h), 1.59 (s, 1h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 616.4 amu。
[0454]
合成中间体8-3
将中间体8-1, (s)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基三氟甲磺酸酯(114.5 mg, 0.25 mmol)溶解在无水dmf (710
ꢀµ
l)中并用ipr2etn (129
ꢀµ
l, 0.74 mmol)和中间体6-4的二盐酸盐：(2r)-2-(甲氧基甲基)哌嗪二盐酸盐(60.3 mg, 0.30 mmol)处理，并将混合物在室温搅拌30 分钟。然后添加boc2o (85
ꢀµ
l, 0.37 mmol)并继续搅拌16小时。混合物用etoac稀释，并用半饱和nahco
3 (2次)、盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤并浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
30%的在己烷中的etoac)，得到 (r)-4-((s)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(148.1 mg, 》100%产率)，为白色泡沫。
[0455]
lcms: [m+h]
+ m/z = 543.3 amu。
[0456]
将 (r)-4-((s)-5-氟-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(134.4 mg, 0.25 mmol)溶解在dcm(825
ꢀµ
l)中，冷却至0℃，并用mcpba (62.7 mg, 0.27 mmol)处理。20 分钟后，混合物用et2o稀
释，并用半饱和nahco
3 (2次)、盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩，得到粗品 (2r)-4-((2s)-5-氟-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150.1 mg, 》100%产率)，为白色泡沫，其未经纯化而用于下一步。
[0457]
lcms: [m+h]
+ m/z = 559.3 amu。
[0458]
将1-甲基-l-脯氨醇 (57.0 mg, 0.50 mmol)溶解在无水thf (1.5ml)中并用kotbu，1.7m在thf中(291.29 μl, 0.50 mmol)处理。将混合物搅拌5 分钟，然后在0℃添加到粗品 (2r)-4-((2s)-5-氟-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(138.3 mg, 0.25 mmol, est.)在无水thf (1 ml)中的溶液中。1小时后，将混合物倒入k2co
3 水溶液中并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到粗品 (r)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(165.9 mg, 》100%产率)，为淡黄色泡沫, 其未经纯化用于后续步骤。rf = 0.45 (95:5 chcl3:meoh + 2% et3n)。
[0459]
lcms: [m+h]
+ m/z = 605.4 amu。
[0460]
在室温，将粗品 (r)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(165.9 mg, 0.27 mmol)用在二噁烷中的4n hcl(2 ml)处理30 分钟。将混合物溶解在1n hcl中并用et2o洗涤(2次)，合并的醚层用 1n hcl 萃取一次。合并的水相用k2co3碱化并用etoac反萃取(3次)，合并的萃取物经k2co3干燥，过滤并浓缩，得到中间体8-3, (s)-5-氟-4'-((r)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉] (123.9 mg, 0.243 mmol, 89%产率)。
[0461]
lcms: [m+h]
+ m/z = 510.3 amu。
[0462]
合成化合物c-27将中间体8-3, (s)-5-氟-4'-((r)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉](31.0 mg, 0.061 mmol)溶解在mecn (610
ꢀµ
l)中并用丙烯酸酐(10.5
ꢀµ
l, 0.091 mmol)处理。1小时后，将混合物用0.25% tfa水溶液稀释，并通过制备型hplc纯化(c18, 10
→
55%的在h2o+0.25%tfa中的acn)，得到化合物c-27, 1-((r)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮 (29.2 mg, 0.0502 mmol, 83%产率)，为无色薄膜。
[0463]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 10.59 (s, 1h), 7.05 (td, j = 8.0, 5.9 hz, 1h), 6.86
ꢀ–ꢀ
6.76 (m, 2h), 6.62 (t, j = 13.2 hz, 1h), 6.12 (dd, j = 16.8, 2.2 hz, 1h), 5.62 (dd, j = 10.6, 2.2 hz, 1h), 4.74
ꢀ–ꢀ
4.61 (m, 1h), 4.62
ꢀ–ꢀ
4.46 (m, 2h), 4.37 (s, 2h), 3.70
ꢀ–ꢀ
3.53 (m, 2h), 3.46 (dd, j = 13.9, 4.0 hz, 2h), 3.32 (d, j = 28.1 hz, 3h), 3.18 (s, 3h), 3.01 (dt, j = 12.1, 8.3 hz, 1h), 2.82 (s, 3h), 2.76
ꢀ–ꢀ
2.49 (m, 8h), 2.20 (ddd, j = 12.6, 8.3, 5.4 hz, 1h), 2.11
ꢀ–ꢀ
1.81 (m, 4h), 1.76 (dt, j = 12.5, 6.5 hz, 1h), 1.70
ꢀ–ꢀ
1.55 (m, 2h), 1.49
ꢀ–ꢀ
1.40 (m, 1h) ppm
lcms: [m+h]
+ m/z = 582.3 amu。
[0464]
合成化合物c-28将中间体8-3, (s)-5-氟-4'-((r)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉](31.0 mg, 0.061 mmol)溶解在mecn (610
ꢀµ
l)中并用2-氟丙烯酸酐(14.8 mg, 0.091 mmol)处理。90 分钟后，将混合物用0.25% tfa水溶液稀释，并通过制备型hplc纯化(c18, 10
→
55%的在h2o+0.25%tfa中的acn)，得到化合物c-28, 2-氟-1-((r)-4-((s)-5-氟-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮 (29.2 mg, 0.0502 mmol, 83%产率)，为无色薄膜。
[0465]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3) δ 10.72 (s, 1h), 7.05 (td, j = 8.0, 5.9 hz, 1h), 6.85
ꢀ–ꢀ
6.76 (m, 2h), 5.20
ꢀ–ꢀ
5.03 (m, 2h), 4.69 (dd, j = 12.3, 5.3 hz, 1h), 4.61
ꢀ–ꢀ
4.35 (m, 4h), 3.70
ꢀ–ꢀ
3.54 (m, 2h), 3.47
ꢀ–ꢀ
3.31 (m, 3h), 3.30
ꢀ–ꢀ
3.20 (m, 2h), 3.18 (s, 3h), 3.00 (dt, j = 11.7, 8.4 hz, 1h), 2.83 (s, 3h), 2.75
ꢀ–ꢀ
2.48 (m, 8h), 2.27
ꢀ–ꢀ
2.17 (m, 1h), 2.07
ꢀ–ꢀ
1.81 (m, 4h), 1.80
ꢀ–ꢀ
1.68 (m, 1h), 1.68
ꢀ–ꢀ
1.51 (m, 2h), 1.45 (ddd, j = 13.2, 7.9, 5.1 hz, 1h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 582.3 amu。
[0466]
实施例9：合成化合物c-29和c-30合成中间体9-1在n
2 气氛下，将(s)-p-(cf3)
3-t-buphox (368 mg, 0.62 mmol)和pd2(dba)
3 (214 mg, 0.23 mmol)溶解在脱气的无水甲苯(68 ml)中，并将混合物在室温搅拌30 分钟。单独地，将2-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-甲酸烯丙酯(2.68 g, 7.8 mmol)溶解在甲苯(30 ml)中，并用n2鼓泡20 分钟，然后添加到催化剂混合物中。13小时后，
将反应温热至40℃。在另外24小时后，将混合物冷却，暴露于空气，用少量硅胶进行修正并搅拌10 分钟，然后通过硅胶薄垫过滤。将滤液浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
10%的在己烷中的 etoac)，得到 (s)-4-(2-烯丙基-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸乙酯(2.39 g, 》100%产率)，为黄色油。
[0467]1h nmr与 r 对映异构体的相匹配。
[0468]
lcms: [m+h]
+ m/z = 301.2 amu。
[0469]
将(s)-4-(2-烯丙基-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸乙酯(1.76 g, 5.9 mmol)溶解在etoac (12 ml)和mecn (12 ml)中，然后用h2o (18 ml)、rucl3·
xh2o (27 mg, 0.13 mmol)和naio
4 (5 g, 23 mmol)处理，并在室温剧烈搅拌混合物。1小时后，添加naio
4 (1.25 g, 5.9 mmol)。90 分钟后，将混合物倒入0.5m nahso4中并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅藻土过滤并浓缩。残余物溶解在甲醇 (35 ml)中，冷却至0℃，并逐滴添加socl
2 (5.3 ml, 73 mmol)。在室温搅拌混合物90 分钟，用h2o (10 ml)进行修正并搅拌15 分钟，然后倒入h2o中并用et2o萃取(3次)。合并的萃取物用nahco
3 (3次)、盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
30%的在己烷中的etoac)，得到 (s)-4-(2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(1.22 g, 3.84 mmol, 66%产率)，为浅黄色油。
[0470]1h nmr与 r 对映异构体的相匹配。
[0471]
lcms: [m+h]
+ m/z = 319.1 amu。
[0472]
将 (s)-4-(2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(1.22 g, 3.8 mmol)溶解在etoac (10 ml)中并用pd/c, 10重量% (湿的) (240 mg)和hclo
4 (62
ꢀµ
l, 0.57 mmol)处理，并且向该容器充入 h2。17小时后，将反应混合物通过硅藻土过滤并浓缩。残余物加入meoh (10 ml)中，冷却至0℃，并用socl
2 (1.5 ml, 19 mmol)处理，然后温热至室温。1.5小时后，浓缩混合物，用h2o稀释，并用et2o萃取(3次)。合并的萃取物用饱和nahco3、盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶垫过滤并浓缩。残余物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
30%的在己烷中的etoac)，得到(r)-4-(2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(1.02 g, 3.36 mmol, 88%产率)。
[0473]1h nmr与s对映异构体的相匹配。
[0474]
lcms: [m+h]
+ m/z = 305.2 amu。
[0475]
向 (r)-4-(2-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丁酸甲酯(287 mg, 0.94 mmol)在thf(9.5 ml)中的冷却(-78℃)的溶液中添加lda (0.79 ml, 1.42 mmol, 1.8 m在己烷中)。将混合物温热至室温并搅拌 2小时。然后用饱和nh4cl (20 ml)淬灭反应并用dcm (15 ml * 3)萃取。合并的有机物经na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。粗品(1r)-3-氧代-3',4'-二氢-1'h-螺[环己烷-1,2'-萘]-4-甲酸甲酯未经进一步纯化而用于下一步。
[0476]
lcms: [m+h]
+ m/z = 273.1 amu。
[0477]
向含有粗品(1r)-3-氧代-3',4'-二氢-1'h-螺[环己烷-1,2'-萘]-4-甲酸甲酯(257 mg, 0.94 mmol, est.)在mecn (4.7 ml)中的溶液的小瓶中添加硫脲 (86 mg, 1.13 mmol)，然后添加dbu (211
ꢀµ
l, 1.41 mmol)。将小瓶密封并将反应搅拌过夜。完成后，将混合物冷却至室温，倒入饱和nahco
3 (15 ml)中，并用dcm(15 ml * 3)萃取。合并的有机物经
na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。粗品(s)-2'-巯基-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0478]
lcms: [m+h]
+ m/z = 299.1 amu。
[0479]
向含有粗品(s)-2'-巯基-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚(281 mg, 0.94 mmol, est.)的小瓶中添加etoh (4 ml)，然后添加1m naoh (1.05 ml, 1.05 mmol, aq.)。一旦底物完全溶解，添加mei (65
ꢀµ
l, 1.04 mmol)。将反应搅拌1 h，然后添加饱和nahco
3 (15 ml)，并用dcm (15 ml * 3)萃取混合物。合并的有机物经na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。粗品(s)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0480]
lcms: [m+h]
+ m/z = 313.1 amu。
[0481]
向粗品(s)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-酚(90 mg, 0.29 mmol, est.)在dcm(1.2 ml)中的溶液中添加n,n-二异丙基乙胺(100
ꢀµ
l, 0.58 mmol)。搅拌5分钟后，将混合物冷却至0℃，并添加三氟甲磺酸酐 (432
ꢀµ
l, 0.43 mmol, 1m在dcm中)。将反应搅拌2小时，然后添加己烷(2.4 ml)并使混合物通过硅胶塞，用30%的在己烷中的etoac (20 ml)冲洗。合并的有机物真空浓缩，得到中间体9-1, (s)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基三氟甲磺酸酯，其未经进一步纯化而用于后续反应中。
[0482]
lcms: [m+h]
+ m/z = 445.1 amu。
[0483]
合成中间体9-22
向中间体9-1, (s)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基三氟甲磺酸酯(128 g, 0.29 mmol)在dcm(3.2 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加三乙胺(201
ꢀµ
l, 1.44 mmol)，然后添加(s)-2-(哌嗪-2-基)乙腈
·
2hcl (84 mg, 0.52 mmol)。将所得溶液温热至室温并搅拌5小时。观察到起始材料消耗后，添加二碳酸二叔丁酯(252 mg, 1.16 mmol)，将反应加热至40℃并搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温并倒入饱和nahco
3 (15 ml, aq.)中，用dcm (10 ml * 3)萃取。合并的有机萃取物经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。混合物使用柱色谱纯化(0
→
50%的在己烷中的etoac)，得到(s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150 mg, 0.29 mmol, 定量的)，为白色泡沫。
[0484]
lcms: [m+h]
+ m/z = 520.2 amu。
[0485]
向(s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-2'-(甲硫基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150 mg, 0.29 mmol)在dcm(2.9 ml)中的冷却(0℃) 的溶液中添加mcpba (73 mg, 0.32 mmol)。将混合物搅拌30 分钟，然后添加半饱和nahco
3 (10 ml, aq.)并用dcm (10 ml * 3)萃取混合物。合并的有机物用na2so4干燥，过滤，并真空浓缩。粗品 (2s)-2-(氰基甲基)-4-((2s)-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯未经进一步纯化而用于下一步骤。
[0486]
lcms: [m+h]
+ m/z = 536.2 amu。
[0487]
向含有nah (35 mg, 0.86 mmol, 60%矿物油分散体)的冷却(0℃)的小瓶中添加thf (1 ml)，然后添加(s)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇 (171
ꢀµ
l, 1.44 mmol)。将混合物搅拌45 分钟，此时添加为在thf(3 ml)中的溶液形式的粗品 (2s)-2-(氰基甲基)-4-((2s)-2'-(甲基亚磺酰基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(159 mg, 0.29 mmol, est.)。将混合物温热至室温并搅拌 3小时。完成后，反应用饱和nh4cl (10 ml, aq.)淬灭，并用dcm (10 ml * 3)萃取混合物。合并的有机物用na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯，其未经进一步纯化而用于后续步骤。
[0488]
lcms: [m+h]
+ m/z = 587.3 amu。
[0489]
向含有在dcm(4.8 ml)中的粗品(s)-2-(氰基甲基)-4-((s)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(141 mg, 0.24 mmol, est.)的小瓶中逐滴添加h3po
4 (147
ꢀµ
l, 2.4 mmol)。在室温搅拌反应2小时，此时添加h2o (10 ml)，并通过缓慢添加2 m naoh溶液(aq.)使溶液呈碱性。一旦呈碱性，用dcm (10 ml * 3)萃取混合物，合并的有机物用na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到中间体9-2, 2-((s)-4-((s)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈，其未经进一步纯化即用于后续反应中。
[0490]
lcms: [m+h]
+ m/z = 487.3 amu。
[0491]
合成化合物c-29向中间体9-2, 2-((s)-4-((s)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',
8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (61 mg, 0.13 mmol, est.)在dcm(2.5 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加n,n-二异丙基乙胺(220
ꢀµ
l, 1.25 mmol)，然后添加丙烯酸酐(47
ꢀµ
l, 0.38 mmol)。将混合物温热至室温并搅拌 2小时，此时将溶液真空浓缩，加入dmso中，过滤并使用制备型hplc 纯化(c18, 20
→
60%的在h2o +.25% tfa中的mecn)。将含有所需产物的合并级分冻干，得到化合物c-29, 2-((s)-1-丙烯酰-4-((s)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (11.7 mg, 0.022 mmol, 17%产率，经过5 个步骤)，为蓬松的灰白色固体。
[0492]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3, tfa盐) δ 10.64 (s, 1h), 7.24
ꢀ–ꢀ
6.91 (m, 4h), 6.87
ꢀ–ꢀ
6.59 (m, 1h), 6.25 (d, j = 16.9 hz, 1h), 5.77 (d, j = 10.6 hz, 1h), 5.39
ꢀ–ꢀ
4.17 (m, 10h), 4.17
ꢀ–ꢀ
3.84 (m, 1h), 3.78
ꢀ–ꢀ
3.63 (m, 2h), 3.63
ꢀ–ꢀ
3.39 (m, 2h), 3.18
ꢀ–ꢀ
3.03 (m, 1h), 3.03
ꢀ–ꢀ
2.43 (m, 10h), 2.43
ꢀ–ꢀ
2.22 (m, 1h), 2.22
ꢀ–ꢀ
1.98 (m, 2h), 1.85
ꢀ–ꢀ
1.50 (m, 4h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 541.3 amu。
[0493]
合成c-30向中间体9-2, 2-((s)-4-((s)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (61 mg, 0.13 mmol, est.)在dcm(2.5 ml)中的冷却(0℃)的溶液中添加n,n-二异丙基乙胺(220
ꢀµ
l, 1.26 mmol)，然后添加2-氟丙烯酸酐(31 mg, 0.19 mmol)。将混合物温热至室温并搅拌 2小时，此时将溶液真空浓缩，加入dmso中，过滤并使用制备型hplc 纯化(c18, 10
→
55%的在h2o + .25% tfa中的mecn)。将含有所需产物的合并级分冻干，得到化合物c-30, 2-((s)-1-(2-氟丙烯酰)-4-((s)-2'-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-3,4,5',8'-四氢-1h,6'h-螺[萘-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌嗪-2-基)乙腈 (16.2 mg, 0.029 mmol, 23%产率，经过5 个步骤)，为蓬松的灰白色固体。
[0494]1h nmr (400 mhz, 乙腈-d3, tfa盐) δ 10.88 (s, 1h), 7.21
ꢀ–ꢀ
6.94 (m, 4h), 6.13
ꢀ–ꢀ
5.11 (m, 5h), 4.97
ꢀ–ꢀ
4.61 (m, 3h), 4.50 (d, j = 14.2 hz, 1h), 4.35 (d, j = 12.0 hz, 1h), 4.08 (s, 1h), 3.78
ꢀ–ꢀ
3.61 (m, 2h), 3.59
ꢀ–ꢀ
3.25 (m, 3h), 3.14
ꢀ–ꢀ
2.98 (m, 1h), 2.92 (s, 3h), 2.90
ꢀ–ꢀ
2.81 (m, 3h), 2.77 (d, j = 16.4 hz, 1h), 2.72
ꢀ–ꢀ
2.57 (m, 4h), 2.37
ꢀ–ꢀ
2.18 (m, 1h), 2.16
ꢀ–ꢀ
1.96 (m, 2h), 1.87
ꢀ–ꢀ
1.49 (m, 4h) ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 559.3 amu。
[0495]
实施例10：合成化合物c-31和c-32合成中间体10-1
用tfoh (24
ꢀµ
l, 0.27 mmol)处理1-羟基-3,4-二氢萘-2-甲酸烯丙酯(207 mg, 0.90 mmol)和丙烯酸乙酯(115
ꢀµ
l, 1.1 mmol)的混合物，并在室温搅拌。2小时后，将混合物倒入饱和nahco3中并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(0
→
15%的在己烷中的etoac)，得到 2-(3-乙氧基-3-氧代丙基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢萘-2-甲酸烯丙酯(255.1 mg, 86%产
49.85, 41.89, 40.41, 37.67, 37.59, 37.16, 36.97, 34.52, 32.25, 26.59, 26.13 ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 259.1 amu。
[0505]
将(1r)-4-氧代-3',4'-二氢-1'h-螺[环戊烷-1,2'-萘]-3-甲酸甲酯(88.3 mg, 0.34 mmol)溶解在无水mecn (1.7 ml)中并用硫脲 (31.2 mg, 0.41 mmol)和dbu (76.5
ꢀµ
l, 0.51 mmol)处理，并将混合物温热至70℃。48小时后，将混合物冷却至室温并浓缩。残余物用0.2m nah2po
4 处理，并通过离心收集所得固体。将仍然湿的粗品分离物悬浮在etoh (690
ꢀµ
l)和1m naoh (375
ꢀµ
l, 0.38 mmol)中并用mei (24
ꢀµ
l, 0.39 mmol)处理，将混合物超声溶解，然后在室温陈化。30 分钟后，混合物用0.1m nah2po4稀释，并用chcl
3 萃取(3次)。合并的萃取物经na2so4干燥，用0.05体积meoh进行修正，并通过硅胶薄垫过滤，用95:5 chcl3:meoh冲洗并浓缩，得到(r)-2-(甲硫基)-3',4',5,7-四氢-1'h-螺[环戊二烯并[d]嘧啶-6,2'-萘]-4-酚(95.2 mg, 93.3%产率)，为白色固体。
[0506]
lcms: [m+h]
+ m/z = 299.1 amu。
[0507]
将(r)-2-(甲硫基)-3',4',5,7-四氢-1'h-螺[环戊二烯并[d]嘧啶-6,2'-萘]-4-酚(95.2 mg, 0.32 mmol)悬浮在无水dcm (640
ꢀµ
l)中并用ipr2etn (111
ꢀµ
l, 0.64 mmol)处理。将混合物冷却至0℃并逐滴添加三氟甲磺酸酐，1m在dcm中(479
ꢀµ
l, 0.48 mmol)，然后移除冷却浴。45 分钟后，混合物用己烷稀释，并通过硅胶吸管柱过滤，用 9:1 己烷:etoac 冲洗并浓缩，得到(r)-2-(甲硫基)-3',4',5,7-四氢-1'h-螺[环戊二烯并[d]嘧啶-6,2'-萘]-4-基三氟甲磺酸酯(90.7 mg, 66%产率)。
[0508]
lcms: [m+h]
+ m/z = 431.1 amu。
[0509]
将(r)-2-(甲硫基)-3',4',5,7-四氢-1'h-螺[环戊二烯并[d]嘧啶-6,2'-萘]-4-基三氟甲磺酸酯(90.7 mg, 0.21 mmol)溶解在无水dmf (420
ꢀµ
l)中并用2-[(2s)-哌嗪-2-基]乙腈二盐酸盐(45.9 mg, 0.23 mmol)和ipr2etn (110
ꢀµ
l, 0.63 mmol)处理。30 分钟后，添加boc2o (77.2 mg, 0.35 mmol)，并将混合物搅拌过夜。将混合物倒入饱和nahco3中并用etoac萃取(3次)。合并的萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，通过硅胶薄垫过滤，浓缩，并通过快速柱色谱在硅胶上纯化(5
→
40%的在己烷中的etoac)。将具有所需产物的级分合并，得到 (s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-2-(甲硫基)-3',4',5,7-四氢-1'h-螺[环戊二烯并[d]嘧啶-6,2'-萘]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(92.3 mg, 87%产率)，为白色泡沫。
[0510]
lcms: [m+h]
+ m/z = 506.2 amu。
[0511]
将(s)-2-(氰基甲基)-4-((r)-2-(甲硫基)-3',4',5,7-四氢-1'h-螺[环戊二烯并[d]嘧啶-6,2'-萘]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(92.3 mg, 0.18 mmol)溶解在dcm(910
ꢀµ
l)中，冷却至0℃，并用mcpba (54.6 mg, 0.24 mmol)处理。将混合物搅拌30 分钟，然后用et2o稀释，并用半饱和nahco
3 (3次)、盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩，得到粗品(2s)-2-(氰基甲基)-4-((6r)-2-(甲基亚磺酰基)-3',4',5,7-四氢-1'h-螺[环戊二烯并[d]嘧啶-6,2'-萘]-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(169.6 mg, 0.342 mmol, 100%产率)，为白色泡沫。粗产物未经进一步纯化继续使用。
[0512]
lcms: [m+h]
+ m/z = 522.2 amu。
[0513]
将1-甲基-l-脯氨醇 (39.25 mg, 0.34 mmol)溶解在无水thf (500
ꢀµ
l)中并用kotbu, 1.7m在thf中(200
ꢀµ
l, 0.34 mmol)处理。将混合物陈化5 分钟，然后在0℃添加到
1h), 4.08 (d, j = 16.0 hz, 1h), 3.72 (tdd, j = 10.3, 7.8, 4.3 hz, 2h), 3.54
ꢀ–ꢀ
3.31 (m, 3h), 3.16
ꢀ–ꢀ
2.69 (m, 15h), 2.37
ꢀ–ꢀ
2.24 (m, 1h), 2.15
ꢀ–ꢀ
1.86 (m, 4h) ppm
19
f nmr (376 mhz, cd3cn) δ
ꢀ‑
107.56 ppmlcms: [m+h]
+ m/z = 545.3 amu。
[0521]
实施例11：合成螺-四氢萘和螺-茚满化合物制备官能化螺-四氢萘化合物
螺环中心的个体立体异构体可以通过上述反应顺序的催化和/或立体选择性变体来制备，或者可以通过手性色谱或其他常规技术从外消旋形式拆分。
[0522]
通过该合成路线获得的化合物包括，但不限于下述的那些化合物：其中x为h、f、ch3或och3；r，在每次出现时且当存在时，独立地是oh、f、cl、br、n(r)2、cf3、ch3、ocf3、ocf2h、ocfh2或och3；和n是0、1或2。x和r的其他取代基对于本领域技术人员来说将是容易地显而易见的，特别是在该合成的第一步中使用的商购可得的分子中发现的那些取代基。
[0523]
此外，杂环和/或杂芳基类似物可以通过改变上文详述的通用合成顺序来制备，例如详述合成中间体5-1、6-2和7-2，特别是合成中间体6-1的那些。
[0524]
制备官能化螺-茚满化合物茚满化合物
螺环中心的个体立体异构体可以通过上述反应顺序的催化和/或立体选择性变体来制备，或者可以通过手性色谱或其他常规技术从外消旋形式拆分。
[0525]
通过该合成路线获得的化合物包括，但不限于下述的那些化合物：其中x为h、f、ch3或och3；r，在每次出现时且当存在时，独立地是oh、f、cl、br、n(r)2、cf3、ch3、ocf3、ocf2h、ocfh2或och3；和n是0、1或2。x和r的其他取代基对于本领域技术人员来说将是容易地显而易见的，特别是在该合成的第一步中使用的商购可得的分子中发现的那些取代基。
[0526]
此外，杂环和/或杂芳基类似物可以通过改变上文详述的通用合成顺序来制备，例如详述合成中间体5-1、6-2和7-2，特别是合成中间体6-1的那些。
[0527]
生物实验kras g12c 动力学修饰测定 如 patricelli 等人(cancer discov. 2016, 6 (3), 316)所述，使用 hplc-ms 测定测定试验化合物对 his
6-标记的krasg12c (2-185)蛋白（在本节下文中，“krasg12c”）的反应性。krasg12c (1
µ
m)在22℃与终浓度为10
ꢀµ
m的试验化合物在含有 20 mm hepes、150 mm nacl、1 mm mgcl2、1 mm dtt、ph 7.5和最终 dmso 浓度为2体积%的缓冲液中培养。在0、1、3、5和30 分钟取出等分试样，通过稀释到 0.1 体积的6.2% 甲酸淬灭，并使用配备有waters lct premier xe的water acquity通过 hplc-ms 进行分析。使用 maxent对质谱进行解卷积，并通过比率测量来测量抑制剂掺入的程度。伪一阶速率常数k
obs
/[i] (m-1
•
s-1
)由通过非线性最小二乘法拟合到一阶速率方程确定的速率计算：。
[0528]
细胞系生长迟缓测定将细胞以每孔 1,000-5,000 个细胞的密度接种在48 孔组织培养板中。在24 小时休息期后，以10
ꢀµ
m、1 μm、0.4 μm、0.08 μm、0.016 μm和0.0032 μm的化合物处理细胞。一组细胞用其中准备了化合物的载体处理并用作对照。在处理之前，对细胞进行计数，并将该计数用作计算生长抑制的基线。将细胞在化合物存在下培养6天，并在第 6 天计数。所有细胞计数均使用synentec cellavista平板成像仪进行。生长抑制计算为化合物存在时与化合物不存在时细胞群体倍增的比率。如果处理导致细胞从基线净损失，则死亡率百分比定义为与接种后未处理的孔的第 1 天的计数相比，在经处理的孔中的细胞数量的减少。使用用于windows 9.2 版 (sas institute, inc.)的sas中的proc nlin 函数，通过将曲线拟合到来自每个剂量响应测定的数据点来计算每种化合物的ic
50
值。
[0529]
敏感和耐受组的指定和平均 ic
50
值的计算人类癌细胞系基于其生长是否被amg-510（即 4-((s)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1h)-酮)或mrtx-849(即 2-((s)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈）（数据未显示；见表5）阻滞而被分组为对kras g12c抑制“敏感的”或“耐受的”。询问这些敏感和耐受组对每种化合物的响应，并使用上文所述相同技术计算每个细胞系的ic
50
。敏感和耐受组的平均 ic
50 计算为该组的算术平均值。参见表 4。“a”代表1
ꢀµ
m或更小的ic
50
，“b”代表大于 1
ꢀµ
m的 ic
50 ，“c”代表大于 5
ꢀµ
m 的ic
50
。
[0530]
caco-2 测定（p
app a至b）使用 caco-2 细胞通透性测定估计化合物的双向人类肠道通透性程度。将caco-2 细胞接种到 96 孔板中的聚乙烯膜上。每 4 至5 天更新生长培养基，直到细胞形成融合的细胞单层。ph 7.4的具有10 mm hepes的hbss被用作转运缓冲液。以 2 μm 双向测试化合物，一式两份。地高辛、纳多洛尔和美托洛尔被列为标准品。地高辛一式两份以 10 μm 进行双向测试，而纳多洛尔和美托洛尔一式两份在a 至b 方向上以 2 μm 进行测试。对于所有实验，将最终 dmso 浓度调整至小于 1%。在饱和湿度，将板在co
2 温育箱中在37℃用5% co
2 温育 2 小时。温育后，将所有孔与含有内标的乙腈混合，并将板以 4,000 rpm 离心 10 分钟。从每个孔收集 100
ꢀµ
l 上清液并用 100
ꢀµ
l 蒸馏水稀释，用于 lc/ms/ms 分析。使用分析物与内标的峰面积比，通过 lc/ms/ms 对起始溶液、供体溶液和受体溶液中试验和对照化合物的浓度进行定量。
[0531]
表观渗透系数 p
app (cm/s) 使用以下等式计算：其中dcr/dt是接收室中化合物的累积浓度，其为时间的函数 (
µ
m/s)；vr是接收室中的溶液体积（在顶侧(apical side) 0.075 ml，在基底侧(basolateral side) 0.25 ml）；a是传输表面积，其对于单层面积而言为0.0804 cm2；和c0是供体室中的初始浓度 (
µ
m)。
[0532]
流出比率使用以下等式计算：流出比率 = p
app (ba) / p
app (ab)。
[0533]
回收百分比使用以下等式计算：% 回收 = 100 x [(v
r x cr) + (v
d x cd)] / (v
d x c0),其中 vd是供体室中的体积，其在顶侧为0.075 ml，和在基底侧为0.25 ml；和cd和c
r 分别是供体室和受体室中传输化合物的最终浓度。
[0534]
化合物代谢稳定性的测量在人、小鼠和大鼠的肝细胞中测定了化合物的代谢稳定性。在williams 培养基e中将化合物从 10 mm 储备溶液稀释至5
ꢀµ
m。将 10
ꢀµ
l的每种化合物等分到 96 孔板的孔中，并通过将 40
ꢀµ
l的625,000 个细胞/ml悬浮液等分到每个孔中来开始反应。将板在37℃用 5% co2温育。在每个相应的时间点，通过用 以1:3 含有内标 (is)的acn 淬灭来停止反应。将板以 500 rpm振荡 10 分钟，然后以 3,220 x g 离心 20 分钟。将上清液转移到另一个含有稀释溶液的96 孔板中。通过lc/ms/ms分析上清液。
[0535]
温育后化合物的剩余百分比使用以下等式计算：使用以下等式计算化合物半衰期和cl
int
：
[0536]
抑制剂的活性引导的选择性使用体外数据的组合识别具有所需性质的kras g12c抑制剂的亚类。
[0537]
特别地，来自上文所述测定（例如，细胞系生长延迟测定、kras 动力学修饰测定、caco-2 测定（p
app a 至b）、化合物代谢稳定性的测量以及敏感和耐受组的指定和平均ic 50 值的计算）的结果用于选择具有在式（iiia）的亚类中定义的结构和功能特征的化合物。
[0538]
特别地，如上文所述，在敏感和耐受细胞系中检查的化合物的所需性质是对表 5的药物敏感细胞系具有约 1 μm或更低的平均 ic
50
和对表5的耐药细胞系具有大于 1
ꢀµ
m的平均 ic
50
。
[0539]
本领域技术人员会容易地认识到另外的体外测定（例如，cyp 酶抑制、herg抑制、化合物溶解度、靶标特异性分析）的结果以及体内测定（例如啮齿动物异种移植研究、啮齿动物药代动力学和单剂量饱和度研究、啮齿动物最大耐受剂量研究和口服生物利用度）的结果可用于识别 kras g12c抑制剂的其他亚类，或缩窄使用其他结果确定的亚类，例如，式 (iiia)的亚类。