细胞筛选器件及细胞筛选试剂盒的制作方法

1.本发明涉及用于筛选细胞的细胞筛选器件及细胞筛选试剂盒。本技术基于2019年9月30日于日本提出申请的日本特愿2019-178992号主张优先权，并将其内容并入本技术中。


背景技术：

2.近年来，特别是在创新药物领域中，细胞分析的对象从细胞群水平细分为单一细胞水平，并使用下述方法：利用细胞筛选器件，在细小的孔内逐一捕获细胞，进而对大量细胞一次性地实施筛选试验，选出具有目标特性的细胞。作为筛选细胞的方法，例如，采用了下述方法等：使被捕获至多个孔内的细胞与分散有针对特定抗体进行结合的捕捉剂等试剂的液体接触，找出分泌了与捕捉剂结合的分泌物的细胞，将其从孔中回收。
3.专利文献1中示出了本发明的申请人等先前提出的细胞筛选器件。该细胞筛选器件具有水平地层叠配置的第一基板及第二基板，在第一基板的表面形成有能将细胞逐一收容的孔，且分别形成有从各孔的底面到达第一基板的背面的连通孔。这些连通孔小至细胞无法穿过的程度。在第二基板形成有接收通过上述连通孔从孔流出的分泌物的蓄积部，在蓄积部使分泌物与试剂反应，确定靶细胞。
4.现有技术文献
5.专利文献
6.专利文献1：国际公开第wo2017/057234a1号小册子


技术实现要素：

7.发明所要解决的课题
8.专利文献1那样的细胞筛选器件中，需要设置试剂导入部以将试剂、分散液等液体供给至蓄积部。例如将试剂导入部设置于器件的端部时，在使用移液器、微量移液器、分液器等器具将试剂、分散液从试剂导入部取出及放入时、器件倾斜使得试剂导入部内的液面下降时等，存在小气泡进入试剂导入通路内的情况。这样的气泡进入后，则存在气泡移动至流路而使细胞载置膜的背面侧被气泡堵塞、阻碍孔与流路之间的流体流动、对筛选造成影响等可能性。
9.用于解决课题的手段
10.本发明的方式[1]的细胞筛选器件具有：底板部；细胞载置部，其设置于上述底板部上，构成细胞载置面；流体注入部，其以与上述细胞载置部分区的方式设置于上述底板部上；多个孔，其形成于上述细胞载置部的上述细胞载置面，并具有能将需要筛选的细胞分别收容的尺寸；流路，其设置于上述底板部与上述细胞载置部之间，流路端部延伸至上述流体注入部；贯通孔，其从上述孔的内底面通向上述流路，具有上述需要筛选的细胞无法通过的内径；盖部，其设置于上述流体注入部，堵塞上述流路端部；和流体注入孔，其设置于上述盖部，通向上述流路，上述盖部中，在上述流路端部的顶面的至少一部分形成有随着接近上述
流体注入孔而呈斜面状或阶梯状上升的排泡面。
[0011]
利用这样的细胞筛选器件，在使用移液器、微量移液器、分液器等器具从流体注入孔将试剂、分散液取出及放入时、器件倾斜使得流路端部内的液面下降时，即使气泡进入流路端部内，由于在盖部的背面侧即流路端部的顶面的至少一部分形成有随着接近流体注入孔而呈斜面状或阶梯状上升的排泡面，气泡也会沿着排泡面朝向流体注出口移动，并从流体注出口排出。因此，气泡不易进入流路，能够减小对筛选造成影响等的可能性。
[0012]
对于方式[2]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]中，上述排泡面形成于上述盖部中的上述流路端部的顶面的整个面。这种情况下，无论气泡在流路端部内的任何位置，气泡都会沿着排泡面朝向流体注出口移动，并从流体注出口排出。
[0013]
对于方式[3]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]中，上述排泡面部分地形成于上述盖部中的上述流路端部的顶面的上述流体注入孔的周围。这种情况下，从流体注入孔进入的气泡沿着形成于流体注入孔的周围的排泡面朝向流体注出口移动，并从流体注出口排出。另外，通过部分地形成排泡面，还具有能够提高细胞筛选器件的设计上的自由度的优点。
[0014]
对于方式[4]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[3]中的任一项中，上述排泡面设计为相对于上述底板部的下表面倾斜5
°
～45
°
的直线状截面或曲线状截面的斜面。这种情况下，由于以上述方式设定倾斜角，因此气泡沿着排泡面的斜面不停留地朝向流体注出口移动，从流体注出口排出的可靠性得到提高。另外，可有效地排出气泡，并且能够将流体注出口处的盖部的突出量抑制得较小。
[0015]
对于方式[5]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[4]中的任一项中，上述底板部形成具有长边和短边的矩形形状，在上述底板部的长度方向的两侧分别形成有上述流体注入部、上述盖部、上述流体注入孔及上述排泡面，在上述两个盖部之间配置有上述细胞载置部。这种情况下，可以实现流体从2个流体注入孔中的一方流向流路、同时使多余部分的流体从另一方的流体注入孔排出等广泛的利用方法，而且，该过程中，气泡沿着排泡面朝向流体注出口移动，并从流体注出口排出，因此可抑制气泡引起的故障。但是，本发明不限于设置2个流体注入孔的构成，根据需要，可仅单侧设置流体注入孔，也可设置3个以上的流体注入孔。
[0016]
对于方式[6]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[5]中的任一项中，上述细胞载置部为膜体，在上述膜体的上表面以多个排列为格子状的方式形成有上述孔，在上述膜体的下表面形成有通向上述孔的各自的内底面的上述贯通孔，设置有支撑上述膜体的周围并且包围上述细胞载置面的框体，在上述底板部设置有用于以可装卸的方式固定上述框体的卡合部。这种情况下，使框体卡合于底板部的卡合部时，可将具有孔的膜体定位至底板部上的正确位置，也能够在筛选后从底板部取下框体。
[0017]
对于方式[7]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[6]中的任一项中，形成有自上述盖部的周缘立起的周壁部，上述盖部和上述周壁部形成为能从上述底板部装卸的外框体。这种情况下，将底板部和外框体以分体的方式预先成型，只要将外框体安装于底板部，就能够对盖部和周壁部进行正确定位，容易组装。另外，使用后可通过从底板部上取下外框体而进行分解，容易维护。
[0018]
对于方式[8]的细胞筛选器件而言，上述方式[6]中，在上述盖部的周缘形成有立
起的周壁部，上述盖部和上述周壁部形成为能从上述底板部装卸的外框体，支撑上述膜体的上述框体以可装卸的方式固定于上述外框体。这种情况下，分别将底板部、外框体及框体以分体的方式预先成型，只要将框体和外框体安装于底板部，就能够对膜体、盖部、周壁部进行正确定位，可提高组装容易度。另外，使用后也可从底板部取下框体和外框体，容易维护。
[0019]
对于方式[9]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[8]中的任一项中，上述底板部形成具有长边和短边的矩形形状，在上述底板部的长度方向的两侧分别形成有上述流体注入部、上述盖部、上述流体注入孔及上述排泡面，在上述二个盖部之间配置有上述细胞载置部，上述盖部、自上述各盖部的周缘立起的周壁部、及包围上述细胞载置部的周围的周壁部形成为能从上述底板部装卸的外框体。这种情况下，分别将底板部和外框体以分体的方式预先成型，只要将外框体安装于底板部，就能对细胞载置部、盖部、周壁部、及二个流体注入孔进行正确定位，可提高组装容易度。另外，使用后可从底板部取下外框体而进行分解，容易维护。
[0020]
对于方式[10]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[9]中的任一项中，在上述盖部形成有自上述流体注入孔立起的筒状的端口。这种情况下，由于流体注入端口呈筒状，将移液器、分液器的尖端伸进流体注入端口的前端，容易取出及放入流体。
[0021]
方式[11]的细胞筛选试剂盒具备：上述方式[1]～[10]中任一项所述的细胞筛选器件；和检测颗粒，其为固定有与需要筛选的细胞的分泌物具有结合性的物质的载体颗粒。根据该细胞筛选试剂盒，在将细胞收入各个孔中的状态下，在孔内使检测颗粒与细胞的分泌物反应，基于源自检测颗粒的发光等进行筛选，并且，在使用移液器、微量移液器、分液器等器具将试剂、分散液从流体注入孔取出及放入时、器件倾斜使得流路端部内的液面下降时，即使气泡进入流路端部内，由于在盖部的背面侧即流路端部的顶面的至少一部分形成有随着接近流体注入孔而呈斜面状或阶梯状上升的排泡面，气泡也会沿着排泡面朝向流体注出口移动，并从流体注出口排出。因此，气泡不易进入流路，对筛选造成影响等的可能性小。
[0022]
发明效果
[0023]
如以上所说明的，根据本发明的细胞筛选器件或细胞筛选试剂盒，在使用器具将试剂、分散液从流体注入孔取出及放入时、器件倾斜使得流路端部内的液面下降时，即使气泡进入流路端部内，由于在盖部的背面侧即流路端部的顶面的至少一部分形成有随着接近流体注入孔而上升的排泡面，气泡也会沿着排泡面从流体注出口排出。因此，起到了气泡不易进入流路、可减小对筛选造成影响等的可能性的效果。
附图说明
[0024]
[图1]为示出本发明的一个实施方式的细胞筛选器件的俯视图。
[0025]
[图2]为同一实施方式的主视图。
[0026]
[图3]为示出同一实施方式的正截面的立体图。
[0027]
[图4]为同一实施方式的中央部的正剖视图。
[0028]
[图5]为同一实施方式的端部的正剖视图。
[0029]
[图6]为同一实施方式的侧剖视图。
[0030]
[图7]为示出同一实施方式的组装方法的立体图。
[0031]
[图8]为示出同一实施方式的细胞载置膜(细胞载置部)和孔的放大立体图。
[0032]
[图9]为示出本发明的另一个实施方式的细胞筛选器件的正截面的立体图。
[0033]
[图10]为本发明的另一个实施方式的细胞筛选器件的排泡面的俯视图。
[0034]
[图11]为本发明的另一个实施方式的细胞筛选器件的排泡面的俯视图。
具体实施方式
[0035]
图1～图6均示出了本发明的一个实施方式的细胞筛选器件1的完成状态，图7示出该细胞筛选器件1的组装方法。该实施方式的细胞筛选器件1具有：底板部2；细胞载置膜(细胞载置部)6，其设置于底板部2上，构成细胞载置面4；一对流体注入部8，其以与细胞载置膜6分区的方式设置于底板部2上；流路10，其设置于底板部2与细胞载置膜6之间，流路端部12延伸至流体注入部8。例如如图8所示，在细胞载置膜6的细胞载置面4形成有：具有能将需要筛选的细胞c分别收容的尺寸的多个孔50、和从孔50的内底面通向流路10的贯通孔52，贯通孔52具有需要筛选的细胞c无法通过的内径。此外，在各盖部14的背面侧即流路端部12的顶面形成有随着接近流体注入孔16a而呈斜面状上升的排泡面17。
[0036]
以下对细胞筛选器件1的结构进行详细说明。该例的底板部2形成为壁厚恒定的细长矩形板状，四个角被倒角成弧形。在底板部2的整周沿着底面的外周缘而形成有一定高度的突条2b。底板部2的形状不限于图示的形状，可以为圆板状、椭圆形、正方形等任何形状，只要可形成水平的流路10，底板部2的壁厚也可不是恒定的。通常，从成型精度、成本方面，期望底板部2用对靶细胞无害的各种塑料形成，根据需要，也可用陶瓷、玻璃、金属等任何材质形成。还可对底板部2的表面实施任何可缓和对细胞的影响的包被。
[0037]
如图3所示，在底板部2的上表面以自底板部2垂直立起的状态一体化形成有卡合壁18，所述卡合壁18以包围中央部的方式形成为俯视时两端呈半圆形的长方形。卡合壁18不限于图示的形状，可以为简单的长方形、圆形、椭圆形等。该例的卡合壁18的高度在整周上是相等的。在卡合壁18可装卸地安装有外框体20，使得外框体20于整周从上方覆盖卡合壁18。
[0038]
外框体20具有：俯视时两端呈半圆形的长方形的周壁部22、和一对相互平行地设置于周壁部22的内周侧的分隔部28，整体一体化形成。外框体20的材质没有限定，通常从成型精度、成本方面，期望用对细胞无害的各种塑料形成，根据需要，也可用陶瓷、玻璃、金属等任何材质形成。在分隔部28与分隔部28之间开放有长方体状的空间，其中配置有细胞载置膜6。
[0039]
外框体20的周壁部22的上端形成为于整周向外侧翻折的截面形状，在该翻折部分的内侧，于整周以一定深度形成有向下开口的宽度较细的卡合槽24。通过将卡合壁18的上端部于整周插入该卡合槽24，用周壁部22的翻折部分弹性地紧固，从而使得外框体20以可装卸的方式固定于卡合壁18。在外框体20的长度方向的两个前端各自形成有水平突出的突起26，通过用指尖抬起这些突起26，卡合壁18从卡合槽24脱离，使得底板部2能够与外框体20分离。
[0040]
被外框体20的周壁部22和各分隔部28包围的半圆形的区域各自形成为流体注入部8。这些流体注入部8中，以连接周壁部22的下端和各分隔部28的下端的方式形成有盖部
14，所述盖部14形成为俯视下呈半圆形且中央朝上方隆起的立体形状。
[0041]
在盖部14与底板部2之间形成有作为流路10的两端的流路端部12，盖部14成为气密性地堵塞流路端部12的结构。通过以此方式形成盖部14，作为流路10的两端的流路端部12被密封，即使在细胞筛选器件1倾斜或摇晃的情况下，也能够防止流体通过流路10及流路端部12而过度地向左右流动。
[0042]
该实施方式中，在各盖部14的大致中央各自形成有一个圆形的流体注入孔16a，与这些流体注入孔16a对应地，自盖部14分别直立地形成有呈圆筒形的流体注入端口16。流体注入端口16周围的盖部14的表面成为流体储留部，如图5所示，从流体注入端口16溢出的流体l得以积累。作为流体储留部，也可在盖部14的上表面的流体注入端口16的周围主动地形成凹部。
[0043]
各盖部14的背面侧即流路端部12的顶面形成有随着接近流体注入孔16a而呈斜面状上升的排泡面17，排泡面17形成为以流体注入孔16a为顶点的圆锥台状。由此，当流路端部12中充满分散液等液体且含有气泡g时，气泡g在浮力下沿着排泡面17顺畅地朝向流体注入孔16a移动，得以从流体注入孔16a排出。
[0044]
由于流体注入孔16a到盖部14的周缘为止的距离并非是恒定的，因此排泡面17与水平面所呈的角度α在流体注入孔16a的周围并不是恒定的，但从气泡g的排出效果的角度出发，优选为5
°
～45
°
，更优选为10
°
～30
°
。若为上述范围，则气泡g不会附着并停留于排泡面17，而是沿着排泡面17滚动或滑动，能够大体可靠地从流体注入孔16a及流体注入端口16排出。另外，当较之上述范围而言排泡面17的倾斜角α过大时，流路端部12的容量变得过大，因此可能会产生试剂的消耗量变多等问题。
[0045]
该实施方式中，由于盖部14的壁厚是大致恒定的，因此盖部14的上表面即流体储留部的上表面也呈圆锥台状倾斜。因此，流体储留部也成为随着远离流体注入端口16而朝向下方倾斜的面，从流体注入端口16溢出的流体集中在远离流体注入端口16的盖部14的周边部，因此能够减小从流体注入端口16再次流入而产生污染的可能性。但是，本发明不限于该构成，也可通过使盖部14的壁厚随着远离流体注入端口16而变厚，使得盖部14的上表面、即流体储留部的上表面呈水平。
[0046]
流体注入端口16在该实施方式中自盖部14立起，但作为代替，也可不在盖部14形成立起的流体注入端口16，而是使流体注入孔16a直接开口。
[0047]
流体注入端口16的上端内周缘于整周将截面形状倒角成弧形而形成为圆环状的倒角部16b。倒角部16b形成为与用于将流体(试剂、分散液)从流体注入端口16注入的移液器、微量移液器、分液器等器具的前端的适配性好的形状，可使器具的尖端气密性地抵接于流体注入端口16。流体注入端口16的形状不限于圆筒形，根据需要可以为方筒状、多边筒状，也可以为仅使流体注入孔16a的周围略微隆起的环状、或如上述那样的简单的开口部。也可将流体注入端口16制成在盖部14的表面凹陷而形成的圆锥状的开口部。
[0048]
在分隔部28的流体注入部8侧的下端，于分隔部28的整个长度形成有距下表面具有一定高度的段部34，在该段部34的上方，分别延上下方向形成有到达分隔部28的上端的两根肋30。通过肋30可提高分隔部28的弯曲强度。另外，在分隔部28各自形成有朝向段部34的下面开口的一定深度的卡合槽32、和与该卡合槽32的细胞载置膜6侧邻接的卡合突条42。
[0049]
如图6所示，在外框体20的周壁部22的直线状延伸的2处也各自形成有朝向周壁部
22的下面开口的一定深度的卡合槽32、和与该卡合槽32的细胞载置膜6侧邻接的卡合突条42。上述直线状延伸的2处的卡合槽32和卡合突条42分别与分隔部28的卡合槽32和卡合突条42相连，俯视时呈矩形形状。
[0050]
被周壁部22的直线状延伸的2处和二个分隔部28包围的四边形空间中，以可装卸的方式收容有俯视时呈矩形形状的方筒状的框体36。在框体36的下端，细胞载置膜6如图8所示那样以使孔50朝上的方式在整个面铺展，框体36的下端与细胞载置膜6于整周无间隙地接合。框体36用具有挠性的塑料等形成，施加向外扩张的力时四个壁向外稍微扩张，对细胞载置膜6施加张力，从而能够防止细胞载置膜6的松弛。
[0051]
细胞载置膜6的厚度没有限定，从形成作为靶标的细胞逐一进入的孔50、且形成供流体从孔50的底流向背面侧的细小的贯通孔52的角度出发，优选为5～100μm左右，更优选设为10～50μm左右。细胞载置膜6可以为2层以上的多层膜。这种情况下，可以上侧的层形成成为孔50的贯通孔，下侧的层中开放成为贯通孔52的贯通孔，将这二个层贴合，形成孔50和贯通孔52。
[0052]
细胞载置膜6的材质没有限定，通常从成型精度、成本方面，期望用对细胞无害的各种塑料形成，根据需要也可用陶瓷、多晶或单晶硅、玻璃等无机化合物、金属等任何材质形成。孔50及贯通孔52也能利用蚀刻加工、光刻等形成。
[0053]
从配合需要捕获的细胞c的平均的形状、提高配置密度的角度出发，孔50的平面形状优选为如图8所示的六边形或圆形，根据需要，也可以为正方形等四边形、其他的多边形、椭圆形等。孔50的大小应根据需要捕获的细胞c的大小而进行选择，没有限定，通常可设为进入孔开口部的圆的最大直径为1～100μm左右、深度为1～100μm左右，以使一个孔50内进入一个细胞c，但2个以上的细胞c难以进入。也可预先准备多种具有孔50的大小不同的细胞载置膜6的框体36，与共通的底板部2及外框体20组合，以构成细胞筛选试剂盒。
[0054]
就细胞c的大小的关系而言，俯视孔50时进入其中的圆的最大直径可以是需要捕获的细胞c的最大直径的0.5～2倍左右的大小，更优选为0.8～1.9倍。孔50的深度可以是需要捕获的细胞c的最大直径的0.5～4倍左右的大小，更优选为0.8～1.9倍。邻接的孔50与孔50之间的最短距离为1～10μm左右时可增大孔50的密度，故而是适宜的，但并不限定为该范围。
[0055]
该例中，在各孔50的底面中央各自形成有二个贯通孔52。以此方式形成多个时不易被堵塞，故而是适宜的，但本发明并不限定于此，可在中央各自形成1个或3个以上，也可在孔50的底面随机或于网格点位置形成多个贯通孔52。贯通孔52的内径没有限定，优选最小内径为10nm～20μm左右的范围，更优选需要捕获至孔50内的细胞c的平均直径的0.5倍以下，以使细胞c无法通过。
[0056]
如图4及图6所示，在框体36的下端部的外周面于整周形成有：通过制成向上翻折的形状而向上方开口的卡合槽44；和向下突出的卡合突条40。卡合槽44的深度及卡合突条40的上下宽度在框体36的整周上是大致恒定的。卡合突条40插入形成于外框体20的下表面的卡合槽32，外框体20的卡合突条42插入框体36的卡合槽44。通过它们的嵌合，在将框体36收容于外框体20的中央空间内的状态下，将框体36固定于外框体20。
[0057]
此时，框体36的下端面抵接于形成于底板部2的间隔件46的上表面，可通过间隔件46的厚度准确地规定细胞载置膜6距底板部2的间隔量、即流路10的厚度。该实施方式中，如
图7所示，在卡合壁18的内侧沿着框体36的下端形状形成有一对俯视时呈u字状的间隔件46，在间隔件46彼此之间形成有缺口47。在将框体36固定于底板部2上的状态下，流体通过这些缺口47从流路10流向各流路端部12。间隔件46也可以不为图示那样的形状，只要以多处抵接于框体36的下表面即可。根据情况，还可以不形成间隔件46，通过与外框体20的卡合来准确地规定框体36距底板部2的高度。
[0058]
在框体36的下端部的内周面于整周形成有具有一定宽度的斜面38，斜面38越朝下方则越向细胞载置膜6一侧探出。通过形成这种斜面38，如图4所示，使用移液器、微量移液器、分液器等器具p从细胞载置膜6的孔50吸取靶细胞时，即使捕获有靶细胞的孔50位于框体36的内周缘近旁的位置，也可容易地进行用器具p吸出细胞。另外，斜面38还起到了增加细胞载置膜6贴合至框体36的面积、提高细胞载置膜6的接合强度的效果，也有助于提高框体36的强度。
[0059]
制造由上述构成形成的细胞筛选器件时，如图7所示，分别形成底板部2、框体36、及外框体20后，首先，将框体36嵌入外框体20的下表面，接着，将外框体20嵌入底板部2的卡合壁18，从而成为图1～图6所示的完成状态。
[0060]
在将框体36嵌入外框体20的下表面的过程中，如图4及图6所示，通过将外框体20的卡合突条42嵌入框体36的卡合槽44，并且将框体36的卡合突条40嵌入外框体20的卡合槽32，从而利用各卡合部的弹性而将两者牢固地固定。同时，对于卡合突条40的内周面和卡合突条42的外周面而言，至少一方成为随着向上方行进而稍微倾向外侧的形状。由此，卡合进行时，框体36的四个边的卡合突条40被外框体20的卡合突条42拉向外侧，框体36的下端部向四周略微扩张，产生拉伸细胞载置膜6的四个边的张力，对细胞载置膜6施加均匀的张力。
[0061]
因此，具有下述优点：即使在框体36为自由状态时细胞载置膜6略微松弛，也可在将框体36固定于外框体20时消除细胞载置膜6的松弛，提高细胞载置膜6的形成有多个孔50的细胞载置面4的平整度，将分散有细胞的分散液填充至细胞载置面4上，通过摇动细胞筛选器件等，使细胞不偏向地流动，由此容易地将细胞逐一捕获至孔50内。
[0062]
使用了本实施方式的细胞筛选试剂盒具备：细胞筛选器件1；珠(检测颗粒)b，其为固定有与需要筛选的细胞的分泌物具有结合性的物质的载体颗粒。细胞筛选试剂盒可制成例如在盒型等外侧容器之中收容有一个或多个细胞筛选器件1、和内侧容器的制品，所述内侧容器以粉末状态或悬浮于分散液的状态封入了作为检测颗粒的大量细小的珠b。
[0063]
结合颗粒的种类没有限定，例如可以为由珠(磁珠、树脂珠等)、水凝胶颗粒(海藻酸钠凝胶、琼脂糖凝胶等)、金属颗粒(金纳米颗粒)等形成的载体颗粒、和附着于载体颗粒并能与由作为靶标的抗体生产细胞分泌的抗体进行结合的捕捉剂。结合颗粒的粒径没有限定，通常颗粒的最大直径优选为100nm～50μm左右，更优选为500nm～30μm左右。
[0064]
进行实际筛选时，使细胞和作为检测颗粒的珠b分散于分散液中并填充至细胞载置膜6上，摇动细胞筛选器件1或将其通过贯通孔52排出至流路10等而使细胞c逐一地进入孔50，并且将大量珠b与各细胞c一同装入孔50，将多余的分散液通过贯通孔52排出至流路10。只要在该状态下使细胞c的分泌物中的抗体与珠b的捕捉剂反应，用荧光标记抗体仅将发生反应的珠b可视化，即能够发现靶细胞。
[0065]
根据由上述构成形成的细胞筛选器件1，由于在盖部14的背面侧即流路端部12的顶面形成有随着接近流体注入孔16a而上升的排泡面17，进入流路端部12内的气泡g沿着排
泡面17上升，并从流体注入端口16排出。由此，可抑制气泡g进入流路10、抵接于细胞载置膜6的背面，贯通孔52及孔50被堵塞，或者流体无法均匀地进出各孔50等筛选上的故障。
[0066]
另外，该实施方式中，具有下述优点：由于排泡面17形成于盖部14中的流路端部12的顶面的整个面，即使气泡g在流路端部12内的任意位置，气泡g也可沿着排泡面17朝向流体注入孔16a移动，并从流体注入端口16排出。
[0067]
其中，本发明并不仅限于形成于整个面的构成，也可在流路端部12的顶面的流体注入孔16a的周围仅部分地形成为例如圆环状。在这种情况下，从流体注入孔16a进入的气泡g在刚侵入后就沿着形成于流体注入孔16a的周围的排泡面朝向流体注出口16a移动并排出，因此也能得到大致充分的排泡效果。另外，由于部分地形成排泡面，可减小盖部14的突出量，因此还具有能够提高细胞筛选器件的设计上的自由度的优点。
[0068]
另外，该实施方式中，用盖部14分别堵塞位于流路10两端的流路端部12，在这些盖部14设置具有与流路10连通的流体注入孔16a的流体注入端口16，从而利用盖部14来抑制流路端部12及流路10内的流体的移动，并且能使流体通过流体注入端口16进出流路10。因此，即使在将细胞c捕获至细胞筛选器件1的孔50、有分散液等流体进入流路10的状态下搬运或倾斜细胞筛选器件1的情况下，流体也不易沿着流路10及流路端部12移动，可抑制所谓的晃动(sloshing)现象。由此，还可抑制分散液的一部分通过贯通孔52流入孔50、使已被捕获至孔50中的细胞c、珠b脱离等的问题。
[0069]
另外，该实施方式中，如图5所示，即使在流体l从流体注入端口16的流体注入孔16a溢出的情况下，流体储留部(盖部14的上表面周边部)也会接收流体l，可抑制再次从流体注入端口16进入流路10内的情况，可减小例如来自外部的污染等的可能性。由于在细胞载置面4与盖部14之间形成有分隔部28，因此即使在流体储留部14中积累有流体的情况下，也可抑制流体流向细胞载置部6。
[0070]
另外，该实施方式中，由于2个流体注入端口16形成于流路10的两端，可以实现为流体从一个流体注入端口16流向流路10、使多余的流体从另一个流体注入端口16排出等广泛的利用方法。
[0071]
另外，该实施方式中，通过使框体36的下端抵接于底板部2的间隔件46，可将细胞载置膜6定位至底板部2上的正确的位置，因此流体在孔50与流路10之间的流动成为所期望的状态，能够实现高精度的筛选。
[0072]
另外，该实施方式中，底板部2和外框体20以分体的方式成型，只要将外框体20安装于底板部2，就可将盖部14和周壁部22配置于底板部2的正确的位置上，因此容易组装细胞筛选器件1。使用后也可从底板部2取下外框体20，容易维护。
[0073]
另外，该实施方式中，分别将底板部2、外框体20及框体36以分体的方式成型，只要将框体36和外框体20安装于底板部2，就能对细胞载置膜6、盖部14、周壁部22进行正确的定位，可提高组装容易度。使用后也可从底板部2取下框体36和外框体20，容易维护。
[0074]
另外，该实施方式中，分别将底板部2和外框体20以分体的方式成型，只要将外框体20安装于底板部2，就能对细胞载置部6、盖部14、周壁部22及二个流体注入端口16进行正确的定位，故而易于组装。
[0075]
另外，该实施方式中，流体注入端口16形成为圆筒状，因此移液器、分液器等的圆锥状尖端可几乎气密性地伸进，容易取出及放入流体。
[0076]
对于该实施方式的细胞筛选试剂盒而言，在将细胞c收入各个孔50的状态下，在孔50内使检测颗粒b与细胞的分泌物反应，基于源自检测颗粒b的发光等进行筛选，并且，在使用移液器、微量移液器、分液器等器具将试剂、分散液从流体注入端口16取出及放入时、器件倾斜使得流路端部12内的液面下降时，即使气泡进入流路端部12内，由于在盖部14的背面侧即流路端部12的顶面形成有排泡面17，气泡也会沿着排泡面17朝向流体注出口16a移动，并从流体注入端口16排出。因此，气泡不易进入流路10，对筛选造成影响等的可能性小。
[0077]
在前文的实施方式中，为在细胞筛选器件1的两端的盖部14设置了排泡面17及流体注入端口16的构成，但也可以如图9所示，为仅在细胞筛选器件1的单侧的盖部14形成排泡面17及流体注入端口16的构成。这种情况下，能仅从一个流体注入端口16取出及放入流体。
[0078]
另外，上述实施方式中，排泡面17形成为光滑的斜面，但也可如图10所示，在盖部14的背面即流路端部12的顶面形成有限制气泡g运动的肋56。图10的例子中，以到达盖部14的周缘部的长度形成有以流体注入孔16a为中心呈放射状延伸的肋56。肋56的截面形状可以为矩形形状，也可以为前端尖锐的三角形。形成了这种肋56的情况下，通过肋56使气泡g的移动方向朝向流体注入孔16a，气泡g顺利地排出，并且由于接近流体注入孔16a时肋56的间隔变窄，因此气泡g被肋56分割成较小的气泡g，也能得到容易从流体注入孔16a排出的效果。肋56也可以不到达盖部14的周缘，也可仅在流体注入孔16a的周围形成。也可形成槽以代替肋56。
[0079]
另外，也可如图11所示，以朝着流体注入孔16a逐渐变高的多个水平阶梯面58形成排泡面17。在这种情况下，气泡g一边依次登上阶梯面58一边向流体注入孔16a行进，然后得以从流体注入端口16排出。期望阶梯面58的宽度充分小，以使气泡g顺利地上升。在形成了这种阶梯面58的情况下，具有即使在细胞筛选器件1倾斜时气泡g也不易移动至流路10侧的优点。
[0080]
以上，对本发明的实施方式进行了说明，但本发明并不限于这些实施方式。在权利要求的范围内，可针对各实施方式相互组合构成、或省略一部分构成，或追加已知的构成。
[0081]
产业上的可利用性
[0082]
根据本发明的细胞筛选器件或细胞筛选试剂盒，在使用器具将流体从流体注入孔取出及放入时、器件倾斜使得流路端部内的液面下降时，即使气泡进入流路端部内，由于在盖部的背面侧即流路端部的顶面的至少一部分形成有随着接近流体注入孔而呈斜面状或阶梯状上升的排泡面，气泡也会沿着排泡面朝向流体注出口移动，并从流体注出口排出。因此，气泡不易进入流路，可减小对筛选造成影响等的可能性，因此，本发明可用于产业。
[0083]
附图标记说明
[0084]
1：细胞筛选器件、2：底板部、4：细胞载置面、6：细胞载置膜(细胞载置部)、8：流体注入部、10：流路、12：流路端部、14：盖部(流体储留部)、16：流体注入端口、16a：开口部、17：排泡面、18：卡合壁、20：外框体、22：周壁部、24：卡合槽、26：突起、28：分隔部、30：肋、32：卡合槽、34：段部、36：框体、36a：壁部、38：斜面、40：卡合突条、42：卡合突条、44：卡合槽、46：间隔件、47：缺口、50：孔、52：贯通孔、56：肋、58：阶梯面、c：细胞、b：珠、l：分散液、g：气泡。