(1r, 4r, 5s)-4-(2-氯乙基)-1-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3,7-二酮(盐孢菌酰胺a；马里佐米)的制备方法
[0001]
相关申请本技术要求于2019年10月14日提交的美国临时申请号62/914,674的优先权和权益，所述美国临时申请的全部内容通过引用并入本文。
技术领域
[0002]
本发明涉及(1r, 4r, 5s)-4-(2-氯乙基)-1-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3,7-二酮(盐孢菌酰胺a (salinosporamide a)；马里佐米(marizomib))的合成方法。
背景技术：
[0003]
癌症是美国的主要死因。尽管为寻找用于治疗癌症的新方法的巨大努力，但主要的治疗选项仍然是单独或组合的手术、化学疗法和放射疗法。
[0004]
癌症的恶性加强了寻找有力抗肿瘤剂的需要。蛋白酶体抑制剂正在迅速发展为癌症治疗中的有力治疗选项。这类最有希望的药物候选物之一是从细菌热带盐孢菌(salinispora tropica)中分离的马里佐米(盐孢菌酰胺a；mrz)。这种海洋天然产物具有复杂的、高度功能化的γ-内酰胺-β-内酯药效团，这负责其与其靶(20s蛋白酶体的β亚基)的不可逆结合。马里佐米有希望具有针对多发性骨髓瘤(mm)、复发/难治性mm和其它类型的实体瘤的高功效。马里佐米已于2013年被美国食品药品监督管理局(u.s. food and drug administration) (fda)且于2014年被欧洲药品管理局(european medicines agency) (ema)称为针对多发性骨髓瘤的孤儿药，并且在其发现后仅三年就进入了用于治疗多发性骨髓瘤的i期临床试验。该化合物的强生物活性和挑战性结构已推动了学术和工业研究。
[0005]
马里佐米的合成对于生产大量的化合物是不切实际的，并且具有几个缺点。
[0006]
相应地，需要(1r, 4r, 5s)-4-(2-氯乙基)-1-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3,7-二酮(盐孢菌酰胺a；马里佐米；化合物1)的改善的合成路线，其顺应商业生产且是安全和简单的。
技术实现要素：
[0007]
本发明涉及制备(1r, 4r, 5s)-4-(2-氯乙基)-1-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3,7-二酮(盐孢菌酰胺a；马里佐米)的方法：
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(化合物1)。
[0008]
在一个方面，本公开内容提供了用于制备(1r, 4r, 5s)-4-(2-氯乙基)-1-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3,7-二酮(化合物1；马里佐米)的方法： (化合物1)，该方法包括：(a)在有效产生(2r, 3s, 4r)-2-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-3-羟基-4-(2-羟乙基)-3-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸(化合物3)的条件下，处理(2r, 3s, 4r)-2-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-3-羟基-4-(2-羟乙基)-3-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸甲酯(化合物4)： (化合物4)， (化合物3)；(b)在有效产生(1r, 4r, 5s)-1-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-4-(2-羟乙基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3,7-二酮(化合物2)的条件下，处理化合物3： (化合物2)；和(c)在有效产生化合物1的条件下，处理化合物2。
[0009]
在一些实施方案中，在有效产生化合物3的条件下处理化合物4包括用水解剂处理化合物4。在一些实施方案中，在极性非质子溶剂的存在下，用水解剂处理化合物4 (即，水解为化合物3)。在一些实施方案中，极性非质子溶剂是二氯甲烷。在一些实施方案中，水解剂选自三甲基硅醇钾(tms-ok)、双(三丁基锡)氧化物((n-bu3sn)2o)和二甲基铝甲基碲酸酯
(me2al-teme)。在一些实施方案中，水解剂是二甲基铝甲基碲酸酯(me2al-teme)。在一些实施方案中，在二氯甲烷的存在下，用me2al-teme处理化合物4。在一些实施方案中，二甲基铝甲基碲酸酯(me2al-teme)在非极性溶剂中进行制备。在一些实施方案中，非极性溶剂是甲苯。在一些实施方案中，通过用三甲基铝(alme3)处理碲粉来制备二甲基铝甲基碲酸酯(me2al-teme)。在一些实施方案中，水解剂/化合物4的摩尔比在约8:1至约12:1的范围内。在一些实施方案中，水解剂/化合物4的摩尔比为约8:1、约9:1、约10:1、约11:1或约12:1。在一些实施方案中，水解剂/化合物4的摩尔比为约10:1。在一些实施方案中，在有效产生化合物3的条件下处理化合物4包括用me2al-teme处理化合物4，其中me2al-teme/化合物4的摩尔比为约8:1、约9:1、约10:1、约11:1或约12:1。在一些实施方案中，在有效产生化合物3的条件下处理化合物4包括用me2al-teme处理化合物4，其中me2al-teme/化合物4的摩尔比为约10:1。
[0010]
在一些实施方案中，该方法进一步包括在用水解剂处理化合物4之后添加酸。在一些实施方案中，酸是盐酸(hcl)。在一些实施方案中，在约-10℃至约10℃的温度下，用水解剂处理(即，水解)化合物4。在一些实施方案中，在约0℃的温度下，用水解剂处理化合物4。
[0011]
在一些实施方案中，在有效产生化合物3的条件下处理化合物4包括用me2al-teme处理化合物4，其中me2al-teme/化合物4的摩尔比为约10:1，并且其中在约0℃的温度下，用me2al-teme处理化合物4。在一些实施方案中，该方法进一步包括在用me2al-teme处理化合物4之后添加盐酸。
[0012]
在一些实施方案中，在有效产生化合物2的条件下处理化合物3包括用脱水剂处理化合物3。在一些实施方案中，脱水剂是双(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯(bop-cl)。在一些实施方案中，在极性非质子溶剂的存在下，用脱水剂处理化合物3 (即，脱水为化合物2)。在一些实施方案中，在极性非质子溶剂的存在下，用脱水剂处理化合物3。在一些实施方案中，在极性非质子溶剂的存在下，用bop-cl处理化合物3。在一些实施方案中，极性非质子溶剂是二氯甲烷(dcm)。在一些实施方案中，在dcm的存在下，用脱水剂处理化合物3。在一些实施方案中，在dcm的存在下，用bop-cl处理化合物3。在一些实施方案中，在吡啶的存在下，用脱水剂处理化合物3。在一些实施方案中，在吡啶的存在下，用双(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯(bop-cl)处理化合物3。
[0013]
在一些实施方案中，在有效产生化合物1的条件下处理化合物2包括用氯化剂处理化合物2。在一些实施方案中，氯化剂是三苯基膦二氯化物(pph3cl2)。在一些实施方案中，化合物2在极性非质子溶剂的存在下转换为化合物1。在一些实施方案中，极性非质子溶剂是乙腈。在一些实施方案中，在吡啶的存在下，用三苯基膦二氯化物(pph3cl2)处理化合物2。在一些实施方案中，在用三苯基膦二氯化物(pph3cl2)处理化合物2之前，使化合物2在甲苯中共沸干燥。
[0014]
在一些实施方案中，化合物4通过用酸随后用还原剂处理以下化合物进行制备：(2s, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物5a)：
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(化合物5a)，(2s, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((叔丁氧羰基)氧基)((s)-环己-2-烯-1-基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯(化学物5b)： (化合物5b)，(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物5c)： (化合物5c)，和/或(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((叔丁氧羰基)氧基)((s)-环己-2-烯-1-基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯(化学物5d)： (化合物5d)。
[0015]
在一些实施方案中，酸是三氟乙酸。在一些实施方案中，还原剂是金属氢化物络合物。在一些实施方案中，金属氢化物络合物是硼氢化钠。在一些实施方案中，酸是三氟乙酸，并且还原剂是金属氢化物络合物。在一些实施方案中，酸是三氟乙酸，并且还原剂是硼氢化钠。
[0016]
在一些实施方案中，化合物5a、5b、5c和/或5d通过用环己-2-烯-1-基氯化锌(ii)处理以下化合物进行制备：(2s, 3ar, 6s, 6as)-6-甲酰基-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物6a)： (化合物6a)，和/或(2r, 3ar, 6s, 6as)-6-甲酰基-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物6b)：
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(化合物6b)。
[0017]
在一些实施方案中，通过用正丁基锂(n-buli)和氯化锌(ii) (zncl2)处理三丁基(环己-2-烯-1-基)锡烷来制备环己-2-烯-1-基氯化锌(ii)。
[0018]
在一些实施方案中，化合物6a和/或6b通过用氧化剂处理以下化合物进行制备：(2s, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物7a)： (化合物7a)，和/或(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物7b)： (化合物7b)。
[0019]
在一些实施方案中，氧化剂是戴斯-马丁高碘烷(dess-martin periodinane，dmp)。在一些实施方案中，化合物7a和/或化合物7b在极性非质子溶剂的存在下转换为化合物6a和/或化合物6b。在一些实施方案中，极性非质子溶剂是二氯甲烷。在一些实施方案中，戴斯-马丁高碘烷(dmp)/化合物7a和/或7b的摩尔比在约1:1至约3:1的范围内。在一些实施方案中，戴斯-马丁高碘烷(dmp)/化合物7a和/或7b的摩尔比在约1.1:1至约3:1的范围内。在一些实施方案中，戴斯-马丁高碘烷(dmp)/化合物7a和/或7b的摩尔比为约1:1、约2:1或约3:1。在一些实施方案中，戴斯-马丁高碘烷(dmp)/化合物7a和/或7b的摩尔比为约2:1。在一些实施方案中，戴斯-马丁高碘烷(dmp)/化合物7a和/或7b的摩尔比为约2:1，并且化合物7a和/或化合物7b在二氯甲烷的存在下转换为化合物6a和/或化合物6b。
[0020]
在一些实施方案中，化合物7a和/或7b通过用三甲基氰硅烷(tmscn)处理以下化合物，随后为在碱的存在下，用二碳酸二叔丁酯(boc2o)处理进行制备：(2s, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯(化合物8a)： (化合物8a)，和/或(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯(化合物8b)：
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(化合物8b)。
[0021]
在一些实施方案中，碱是4-二甲氨基吡啶(dmap)。在一些实施方案中，在碱的存在下，用二碳酸二叔丁酯(boc2o)处理化合物8a和/或化合物8b之后添加酸。在一些实施方案中，酸是樟脑磺酸(csa)。在一些实施方案中，碱是dmap，并且在用boc2o处理化合物8a和/或化合物8b之后添加csa。
[0022]
在一些实施方案中，化合物8a和/或8b通过用还原剂处理以下化合物进行制备：(2s, 3ar, 6as)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-6h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6,6-二甲酸二甲酯(化合物9a)： (化合物9a)，和/或(2r, 3ar, 6as)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-6h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6,6-二甲酸二甲酯(化合物9b)： (化合物9b)。
[0023]
在一些实施方案中，还原剂是络合金属氢化物。在一些实施方案中，络合金属氢化物是硼氢化钠。在一些实施方案中，在用还原剂处理化合物9a和/或9b之后添加酸。在一些实施方案中，酸是乙酸(acoh)。在一些实施方案中，还原剂是硼氢化钠，并且在用硼氢化钠处理化合物9a和/或9b之后添加acoh。
[0024]
在一个方面，本公开内容提供了(2r, 3s, 4r)-2-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-3-羟基-4-(2-羟乙基)-3-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸甲酯 (化合物4)。
[0025]
在一个方面，本公开内容提供了(2s, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯 (化合物5a)。
[0026]
在一个方面，本公开内容提供了(2s, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((叔丁氧羰基)氧基)((s)-环己-2-烯-1-基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯 (化合物5b)。
[0027]
在一个方面，本公开内容提供了(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯 (化合物 5c)。
[0028]
在一个方面，本公开内容提供了(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((叔丁氧羰基)氧基)((s)-环己-2-烯-1-基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯 (化合物5d)。
[0029]
在一个方面，本公开内容提供了(2s, 3ar, 6s, 6as)-6-甲酰基-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯 (化合物6a)。
[0030]
在一个方面，本公开内容提供了(2r, 3ar, 6s, 6as)-6-甲酰基-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯 (化合物6b)。
[0031]
在一个方面，本公开内容提供了(2s, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯
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(化合物7a)。
[0032]
在一个方面，本公开内容提供了(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯 (化合物7b)。
[0033]
在一个方面，本公开内容提供了(2s, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯 (化合物8a)。
[0034]
在一个方面，本公开内容提供了(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯 (化合物8b)。
[0035]
在一个方面，本公开内容提供了药物组合物，其包含化合物4、化合物5a、化合物5b、化合物5c、化合物5d、化合物6a、化合物6b、化合物7a、化合物7d、化合物8a和/或化合物8b中的任何一种。
具体实施方式
[0036]
本发明涉及(1r, 4r, 5s)-4-(2-氯乙基)-1-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3,7-二酮(化合物1，盐孢菌酰胺a；马里佐米)的制备方法。本发明的方法在下文方案1中进行描绘。如本文阐述的，本文公开的合成途径提供了超过先前公开的途径的改善，包括更少的步骤、更高的产率以及恶臭或危险化学品的避免。
[0037]
方案1：马里佐米的合成
方法改善本公开内容呈现了超过先前报道的合成活动，用于合成马里佐米的众多方法改善。下文更详细地阐述了具体的方法改善。
[0038]
(s)-4-苄基噁唑烷-2-硫酮(化合物16)的合成不希望受理论的束缚，先前报道的(s)-4-苄基噁唑烷-2-硫酮(化合物16)的合成(参见例如，j. org. chem. 2004, 69, 3990-3992)不足以用于多克级合成。例如，先前报道的合成需要放热条件，并且使用恶臭试剂。先前报道的合成还提供了多种副产物，并且需要使用硅胶(sio2)的纯化。
[0039]
本公开内容教导了使用硫代羰基二咪唑来替换如先前报道的二硫化碳。所公开的方法以高纯度提供化合物16，并且在制备过程中避免了潜在的爆炸条件和恶臭。此外，所公开的合成方法以高纯度提供化合物16，而无需经由sio2层析的纯化。此外，所公开的方法允许用绿色溶剂2-甲基-thf替换thf/etoac和总体较小体积的溶剂，而无产率的显著下降(89%)。
[0040]
2-甲氧基-2-甲基-1,3-二氧戊环的合成不希望受理论的束缚，由于低产率(35%)以及即使在双蒸馏后也难以去除的未鉴定杂质，先前报道的2-甲氧基-2-甲基-1,3-二氧戊环的合成(例如，j. am. chem. soc. 1988, 110, 2909)不足以用于大规模(例如，》200 g)制备。
[0041]
与先前公开的合成相比，本文公开的合成条件(例如，酸的选择、温度和反应时间)允许反应的产率和纯度概况的改善。本文公开的合成方法伴随通过真空蒸馏的纯化，以》70%的产率提供原酸酯2-甲氧基-2-甲基-1,3-二氧戊环。
[0042]
(s)-1-(4-苄基-2-硫代噁唑烷-3-基)戊-4-烯-1-酮(化合物15)的合成不希望受理论的束缚，由于所采用的试剂的大量过量以及需要sio2纯化，先前报道的(s)-1-(4-苄基-2-硫代噁唑烷-3-基)戊-4-烯-1-酮(化合物15)的合成(参见例如，org. lett. 2011, 13, 3028
–
3031)不足以用于大规模合成。
[0043]
本公开内容教导了dcc作为偶联剂的替换和偶联剂的当量数的减少。本公开内容以》95%的纯度提供产物化合物15，并且不需要sio2纯化。发现n-酰基噁唑烷硫酮化合物15的进一步纯度增强可以经由结晶来实现。
[0044]
(r)-1-((s)-4-苄基-2-硫代噁唑烷-3-基)-2-(2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)戊-4-烯-1-酮(化合物14)的合成本公开内容教导了这样的结晶条件，其允许以》70%的产率直接分离产物(r)-1-((s)-4-苄基-2-硫代噁唑烷-3-基)-2-(2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)戊-4-烯-1-酮(化合物14)，而无需sio2纯化，与报道相似的产率但使用结晶和sio2层析的组合用于纯化的早期合成途径形成对比。
[0045]
(s)-2-((2-(2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)戊-4-烯-1-基)氨基)丙二酸二甲酯(化合物13)的合成用于该反应产物的硅胶纯化方案中的特定溶剂使得能够分离纯 (s)-2-((2-(2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)戊-4-烯-1-基)氨基)丙二酸二甲酯(化合物13)。相比之下，先前的合成方案(例如，(org. lett. 2011, 13, 3028
–
3031)提供了作为化合物13和化合物16的混合物的化合物13。
[0046]
(3s,4s)-4-烯丙基-1-甲酰基-3-羟基-3-甲基吡咯烷-2,2-二甲酸二甲酯(化合物12)的合成不希望受理论的束缚，与其它溶剂如mtbe相比，从二乙醚中结晶给出更高的回收率。
[0047]
(3as,6as)-2-甲氧基-6a-甲基六氢-6h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6,6-二甲酸二甲酯(化合物11)的合成本公开内容教导了使用四氧化锇和高碘酸钠来提供氧化切割，同时避免先前在早期合成方案中使用的潜在危险的臭氧分解条件(例如，org. lett. 2011, 13, 3028
–
3031)。其它适当的反应条件包括使用锇酸钾作为催化剂。不希望受理论的束缚，发现在低温(例如，0-5℃)下进行氧化步骤给出与室温相比更好的结果。
[0048]
(2s,3ar,6as)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-6h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6,6-二甲酸二甲酯(化合物9a)和(2r,3ar,6as)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-6h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6,6-二甲酸二甲酯(化合物9b)的合成本文公开的合成方案缩短了先前公开的化合物1合成的合成途径，并且防止了如先前所述的双苄酯中间体的制备困难(org. lett. 2011, 13, 3028
–
3031)。例如，先前的合成方案中公开的条件给出了缓慢、不完全的反应，其经常不适合于大规模合成。相应地，本文阐述的且不包含双苄酯基序的某些合成中间体先前并未得到公开。
[0049]
此外，本公开内容教导了马里佐米的合成，其不需要先前报道的某些不必要的保护和脱保护步骤。例如，本公开内容不要求化合物9a或9b的甲酯被保护为苄酯，并且随后脱保护。与先前报道的合成相比，该特征减少了制备马里佐米所需的步骤总数，并且相对于先前报道的合成改善了马里佐米的总体产率。
[0050]
(2s,3ar,6r,6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯(化合物8a)和(2r,3ar,6r,6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯(化合物8b)的合成本文公开的合成通过进行双甲酯(化合物9a)的还原减少了先前公开的合成方案的步骤数目，并且因此避免了双苄酯中间体的制备困难。
[0051]
不希望受理论的束缚，与其相应的β-异构体化合物9b相比，α-异构体化合物9a经历了更快的还原。相应地，在一些实施方案中，化合物9a和化合物9b的混合物在还原之前进行分离。不希望受理论的束缚，化合物9a与化合物9b的分离防止了化合物9a在所有化合物9b已消耗之前过度还原为相应的二醇。不希望受理论的束缚，试剂级乙醇可以用于该反应而不影响产率。
[0052]
(2s,3ar,6s,6as)-6-甲酰基-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物6a)和(2r,3ar,6s,6as)-6-甲酰基-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物6b)的合成如本文阐述的，与公开的合成报道相比，本文公开的合成方案减少了反应所需的戴斯-马丁高碘烷的当量数。反应发现是可重现的。
[0053]
(2r,3s,4r)-2-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-3-羟基-4-(2-羟乙基)
ꢀ‑
3-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸甲酯(化合物4)的合成如本文阐述的，所公开的合成方案包括对已知合成途径的修改，其缩短了化合物1的合成并允许以及时的方式完成合成。
[0054]
(2r,3s,4r)-2-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-3-羟基-4-(2-羟乙基)-3-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸(化合物3)的合成不希望受理论的束缚，发现由于缓慢的过程和杂质概况，先前报道的利用lioh用于水解的合成方法(j. am. chem. soc. 2004, 126, 6230-6231)不适合于按比例放大。相应地，如本文阐述的，进行关于水解条件的靶向试剂筛选，包括tms-ok、(n-bu3sn)2o和(me2al-teme)。不希望受理论的束缚，发现与先前的报道相比，me2al-teme给出了有利的结果。
[0055]
马里佐米(化合物1)的合成不希望受理论的束缚，发现原材料化合物2的共沸干燥和利用干燥箱来称重试剂改善了反应的产率。
[0056]
定义为方便起见，此处收集了在说明书、实施例和所附权利要求中使用的某些术语。
[0057]
如本文使用的，“极性质子溶剂”是包含不稳定的h
+
离子，并且显示出可观的介电常数和极性的溶剂。例如，极性质子溶剂可以包括与氧、氮或氟原子结合的氢原子。极性质子溶剂包括但不限于水、醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇)、甲酸和氨。
[0058]
如本文使用的，“极性非质子溶剂”是缺乏不稳定的h
+
离子，但的确具有可观的介电常数和/或极性的溶剂。极性非质子溶剂包括但不限于乙腈、吡啶、乙酸乙酯、二甲基甲酰胺(dmf)、六甲基磷酰胺(hmpa)、氯仿、二氯甲烷和二甲亚砜(dmso)。
[0059]
如本文使用的，“非极性溶剂”是并未显示出可观的介电常数和/或极性的溶剂。非极性溶剂的实例包括但不限于戊烷、环戊烷、己烷、环己烷、苯、甲苯、1,4-二噁烷、二乙醚和甲基叔丁基醚。
[0060]
如本文使用的，术语“约”指所述量、值或持续时间
±ꢀ
10%或更少的所述量、值或持续时间。在一些实施方案中，“约”指所述量、值或持续时间
±ꢀ
10%、
±ꢀ
8%、
±ꢀ
6%、
±ꢀ
5%、
±ꢀ
4%、
±ꢀ
2%、
±ꢀ
1%或
±ꢀ
0.5%。在其它实施方案中，“约”指所述量、值或持续时间
±ꢀ
10%、
±ꢀ
8%、
±ꢀ
6%、
±ꢀ
5%、
±ꢀ
4%或
±ꢀ
2%。
[0061]
在说明书中，单数形式还包括复数，除非上下文另有明确规定。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解相同的含义。在冲突的情况下，以本技术为准。
[0062]
除非另有说明，否则本文使用的所有百分比和比率都按重量计。
[0063]
本文引用的所有出版物和专利文件都通过引用并入本文，如同每个此类出版物或文件具体地且个别地指示通过引用并入本文。出版物和专利文件的引用并不预期作为任何内容是相关的现有技术的承认，它也不构成关于其内容或日期的任何承认。现在已通过书面说明书描述了本发明，本领域技术人员将认识到本发明可以在各个实施方案中进行实施，并且前面的说明书和下文的实施例用于说明而不是限制随附权利要求的目的。
实施例
[0064]
除非另有说明，否则化学反应通常在氮或氩下运行。中间体和产物通过预填充的硅胶柱进行纯化，所述硅胶柱通过有机溶剂的混合物进行洗脱，所述有机溶剂的混合物例如乙酸乙酯和己烷、丙酮和己烷、甲醇和二氯甲烷。使用cdcl3、丙酮-d6或其它氘代溶剂，在300 (75)或500 (125) mhz光谱仪上记录1h-nmr和
13
c-nmr光谱。化学位移以相对于溶剂信号的(ppm)值报告。偶联常数以赫兹(hz)报告。所有化学试剂和溶剂都直接从商业来源使用，而无需进一步纯化。
[0065]
实施例1：(s)-4-苄基噁唑烷-2-硫酮(化合物16)的制备10 l反应器配备机械搅拌器、热电偶和n2出口。将2-甲基四氢呋喃(4.2 l)装入反应器中，随后为l-苯丙氨醇(212 g)，以给出浆料。将混合物在冰/水浴中冷却15分钟，并且以一份加入硫代羰基二咪唑(1.3当量，324.8 g)。将混合物搅拌1小时，然后去除冷却浴并将混合物进一步搅拌2小时。将反应混合物在冰/水浴中冷却，并且用1m hcl水溶液(1.7 l，三次；850 ml一次)和盐水(850 ml)进行洗涤。有机层在mgso4上进行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩，以给出作为淡黄色胶的产物化合物16 (238.1 g，88%)。
[0066]1h-nmr (500 mhz; cdcl3): δ 7.39 (宽s, 1h), 7.35 (t, j = 7.3 hz, 2h), 7.29 (t, j = 7.3 hz, 1h), 7.18 (d, j = 6.9 hz, 2h), 4.71 (t, j = 8.8 hz, 1h), 4.41 (dd, j = 8.8, 6.3 hz, 1h), 4.29 (m, 1h), 2.96-2.89 (m, 2h)。
[0067]
实施例2：2-甲氧基-2-甲基-1,3-二氧戊环(化合物17)的制备向1 l圆底烧瓶中装入原乙酸三甲酯(423 ml)。在室温下加入乙二醇(1.0当量，185 ml)，随后为琥珀酸(0.012当量，4.7 g)。将混合物搅拌1小时。烧瓶配备蒸馏头，并且将混合物加热，以蒸馏掉在反应过程中产生的甲醇(65-66℃)。将混合物冷却至室温并加入固体nahco
3 (0.03当量，8.4 g)。产物在真空(68-71℃；86-90 mmhg)下蒸馏，以给出作为无色油的化合物17 (280 g，71%)。
[0068]1h nmr (500 mhz; cdcl3): δ 4.09-4.04 (m, 2h), 4.01-3.96 (m, 2h), 3.26 (s, 3h), 1.53 (s, 3h)。
[0069]
实施例3：(s)-1-(4-苄基-2-硫代噁唑烷-3-基)戊-4-烯-1-酮(化合物15)的制备10 l反应器配备机械搅拌器、热电偶和n2出口。装入dcm (1.19 l)，随后为dmap (0.25当量，18.8 g)、edci (1.3当量，153.4 g)和噁唑烷硫酮化合物16 (119 g)。将混合物在冰/水浴中冷却，随后逐滴加入(经过30分钟)戊-4-烯酸(1.05当量，66 ml)。去除冷却浴并将混合物搅拌3小时。加入乙酸乙酯(3.6 l)，并且混合物用1m hcl水溶液(1.2 l，2次)、饱和nahco3水溶液(1.2 l，2次)和盐水(1.2 l)进行洗涤。有机层在na2so4上进行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩，以给出作为浅黄色固体的产物化合物15 (152 g，90%)。
[0070]1h nmr (500 mhz; cdcl3): δ 7.35-7.32 (m, 2h), 7.29 (d, j = 7.3 hz, 1h), 7.22 (d, j = 7.0 hz, 2h), 5.91 (ddt, j = 17.0, 10.4, 6.5 hz, 1h), 5.12 (dq, j = 17.0, 1.6 hz, 1h), 5.05 (dd, j = 10.4, 1.6 hz, 1h), 4.96-4.91 (m, 1h), 4.33 (dd, j = 9.3, 2.5 hz, 1h), 4.31-4.27 (m, 1h), 3.52 (ddd, j = 17.6, 8.0, 6.5 hz, 1h), 3.37 (ddd, j = 17.6, 8.0, 6.9 hz, 1h), 3.28 (dd, j = 13.3, 3.3 hz, 1h), 2.77 (dd, j = 13.3, 10.1 hz, 1h), 2.54-2.45 (m, 2h)。
[0071]
实施例4：(r)-1-((s)-苄基-2-硫代噁唑烷-3-基)-2-(2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)戊-4-烯-1-酮(化合物14)的制备
(342 ml)，并且将混合物搅拌10分钟。用水/冰浴替换干冰/丙酮浴，并且允许混合物达到0℃。以一份加入naoac (58.4 g)，以给出乳状溶液，随后加入2-氨基丙二酸二甲酯盐酸盐(104.6 g)。在5分钟后，将混合物冷却至-20℃，并且以一份加入nabh3cn (21.5 g)。将反应混合物逐渐加温至室温并搅拌过夜。通过加入饱和罗谢尔盐水溶液(1030 ml)来猝灭反应，并且将混合物搅拌4小时。混合物通过硅藻土床(309 g)进行过滤，并且滤饼用etoac (300 ml)进行洗涤。滤液用盐水(1 l)进行洗涤，在na2so
4 (103 g)上进行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩。将粗产物吸附到sio
2 (206 g)上，并且通过快速层析(柱尺寸：sio2；3 kg；流速：900 ml/分钟；cv：4.8 l；溶剂a：二氯甲烷/己烷(3:1)；溶剂b：etoac；梯度0%溶剂b (1 cv)；0至30%溶剂b (经由10 cv)；30%溶剂b (2 cv)；检测器：254 nm，因为产物并非uv活性的(254，220 nm)，在10% etoac后收集所有级分)进行纯化。通过tlc (20% mtbe的dcm/己烷(3:1)溶液)鉴定含有产物的级分。将含有产物的级分合并，并且在旋转蒸发器中蒸发，以给出作为无色胶的产物化合物13 (55 g，65%)。
[0074]1h nmr (500 mhz; cdcl3): δ 5.85-5.77 (m, 1h), 5.06-5.00 (m, 2h), 3.97-3.96 (m, 4h), 3.77 (s, 3h), 3.76 (s, 3h), 2.64 (dd, j = 11.6, 7.1 hz, 1h), 2.56 (dd, j = 11.6, 3.8 hz, 1h), 2.38 (dtd, j = 11.0, 3.8, 1.7 hz, 1h), 1.98-1.88 (m, 2h), 1.29 (s, 3h)。
[0075]
实施例6：(3s, 4s)-4-烯丙基-1-甲酰基-3-羟基-3-甲基吡咯烷-2,2-二甲酸二甲酯(化合物12)的制备通过在45℃下将乙酸酐(39.6 ml)和甲酸(26.4 ml)加热90分钟来制备甲乙酸酐(66 ml)。将酸酐冷却至室温。将中间体化合物13 (66 g)的thf (660 ml)溶液在冰/水浴中冷却，并且以5 ml/分钟的速率加入酸酐(66 ml)。将反应混合物搅拌1小时。加入丙酮(4当量，65 ml)，随后为1m hcl水溶液(660 ml)。将混合物搅拌18-20小时。混合物用etoac (1320 ml)进行萃取。将各层分离，并且水层用na2so
4 (66 g)进行饱和，并且用etoac (660 ml，两次)进行萃取。合并的有机层用饱和nahco3水溶液(198 ml)和盐水(198 ml)进行洗涤，在na2so
4 (132 g)上进行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩，直至残渣为大约(150-300 ml)。加入二乙醚(132 ml)，并且将混合物在-20℃下放置16-20小时。产物通过过滤进行回收，并且用二乙醚(66 ml，3次)进行洗涤并风干，以给出作为白色粉末的产物化合物12 (45.9 g，74%)。
[0076]
报告为非对映异构体的1:1混合物：1h nmr (500 mhz; cd3od): δ 8.19 (d, j = 8.2 hz, 1h), 5.89-5.79 (m, 1h), 5.11 (d, j = 17.1 hz, 1h), 5.03 (d, j = 10.0 hz, 1h), 4.00 (dd, j = 9.7, 7.3 hz, 0.5h), 3.85 (m, 0.5h), 3.84 (s, 1.5h), 3.78 (s, 1.5h), 3.75 (s, 1.5h), 3.71 (s, 1.5h), 3.44 (dd, j = 11.7, 9.8 hz, 0.5h), 3.16 (t, j = 11.0 hz, 0.5h), 2.43-2.27 (m, 2h), 2.19-2.11 (m, 1h), 1.55 (s, 1.5h), 1.42 (s, 1.5h)。
[0077]
实施例7：(3as, 6as)-2-甲氧基-6a-甲基六氢-6h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6,6-二甲
3.91-3.81 (m, j = 13.2 hz, 2h), 3.84 (s, 3h), 3.19 (s, 3h), 2.77 (d, j = 8.3 hz, 1h), 2.43 (d, j = 13.4 hz, 1h), 2.19-2.17 (m, 1h), 1.51 (s, 3h)。
[0085]
实施例10a：(2s, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物7a)的制备化合物8a (2.6 g，10.02 mmol)的无水乙腈(50 ml)溶液在室温下用tms-cn (2.5当量，3.13 ml)进行处理，并且搅拌1小时。该溶液用无水甲苯(50 ml)稀释并且在旋转蒸发器中进行浓缩。将tms中间体溶解于无水乙腈(50 ml)中，并且用boc-酸酐(8当量，17.5 g)和dmap (1当量，1.22 g)进行处理。将所得到的溶液搅拌过夜。混合物用无水meoh (50 ml)稀释并在冰/水浴中冷却10分钟。以一份加入樟脑磺酸(2当量，4.6 g)，并且将混合物在0℃下搅拌3小时。混合物用etoac (300 ml)稀释并用水(100 ml)洗涤。在分离后，用etoac (100 ml，两次)反萃取水层。有机层用饱和nahco3水溶液/盐水的1:1混合物进行洗涤，在mgso4上进行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩。将残渣吸附到sio
2 (10.4 g)上，并且通过快速层析(sio2，220 g，5至70% etoac的己烷溶液)进行纯化。通过tlc (50% etoac的己烷溶液；kmno4染剂)鉴定含有产物的级分。将级分合并，并且在旋转蒸发器中浓缩，以给出作为淡黄色固体的产物化合物7a (3.1 g，86%)。
[0086]1h-nmr (500 mhz; cdcl3): δ 5.03 (dd, j = 5.6, 4.4 hz, 1h), 4.41 (dd, j = 11.9, 5.4 hz, 1h), 4.21 (dd, j = 11.8, 6.4 hz, 1h), 3.77 (s, 3h), 3.32 (s, 3h), 3.04 (d, j = 8.6 hz, 1h), 2.71 (ddd, j = 14.1, 6.0, 1.4 hz, 1h), 2.21 (ddd, j = 13.9, 9.5, 4.3 hz, 1h), 2.01 (t, j = 5.7 hz, 1h), 1.64 (s, 4h), 1.53 (s, 9h)。
[0087]
实施例10b：(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-(羟甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物7b)的制备将中间体化合物8b (5.15 g)溶解于无水thf (100 ml)中，在室温下加入tms-cn (2.5当量，6.2 ml)，并且将混合物搅拌1小时。加入无水甲苯(100 ml)，并且在旋转蒸发器中蒸发挥发物。将otms中间体溶解于无水mecn (100 ml)中，随后加入boc2o (8当量，35.2 g)和dmap (1当量，2.4 g)。将混合物搅拌过夜。加入无水meoh (100 ml)，并且将混合物在冰/水浴中冷却。加入樟脑磺酸(2当量，9.4 g)并将混合物搅拌3小时。加入水(30 ml)，并且在旋转蒸发器中去除大部分有机溶剂。混合物用水(70 ml)稀释并用etoac (200 ml，3次)萃取。合并的有机层用饱和nahco3水溶液(100 ml)和盐水(100 ml)进行洗涤，在mgso4上进
行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩。将粗产物吸附到sio
2 (20 g)上，并且通过快速层析(sio2，220 g，0至70% etoac的己烷溶液)进行纯化。通过tlc (50% etoac的己烷溶液；i2染剂+ uv灯)鉴定含有产物的级分。将级分合并，并且在旋转蒸发器中蒸发，以给出作为淡黄色固体的产物化合物7b (5.6 g，78%)。
[0088]1h-nmr (500 mhz; cdcl3): δ 4.95 (d, j = 4.9 hz, 1h), 4.45 (dd, j = 11.9, 5.6 hz, 1h), 4.15 (dt, j = 10.6, 6.4 hz, 1h), 3.80 (s, 3h), 3.25 (s, 3h), 2.89 (d, j = 7.9 hz, 1h), 2.50 (d, j = 13.2 hz, 1h), 2.21 (ddd, j = 13.2, 8.1, 5.0 hz, 1h), 2.12 (t, j = 5.2 hz, 1h), 1.55 (s, 9h), 1.51 (s, 3h)。
[0089]
实施例11a：(2s, 3ar, 6s, 6as)-6-甲酰基-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物6a)的制备化合物7a (3.0 g，8.35 mmol)的二氯甲烷(334 ml)溶液在室温下用戴斯-马丁高碘烷(2当量，7.08 g)进行处理，并且搅拌4小时。tlc (60% etoac的己烷溶液)显示没有留下残留的原材料。通过添加饱和nahco3水溶液/饱和na2so3水溶液/h2o (1:1:2；240 ml)来猝灭反应。将混合物搅拌大约10分钟，并且使有机层澄清。将各层分离，并且用dcm (100 ml，两次)反萃取水层。合并的有机层用饱和nahco3水溶液/盐水(1:1；100 ml)进行洗涤，在mgso4上进行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩。将残渣吸附到sio2上，并且通过快速层析(sio2，220 g，5至50% etoac的己烷溶液)进行纯化。通过tlc (40% etoac的己烷溶液；kmno4染剂)鉴定含有产物的级分。将级分合并，并且在旋转蒸发器中蒸发，以给出作为无色胶的产物化合物6a (3.0 g，99%)。
[0090]1h-nmr (500 mhz; cdcl3): δ 10.14 (s, 1h), 5.06 (dd, j = 5.3, 4.2 hz, 1h), 3.90 (s, 3h), 3.34 (s, 3h), 3.02 (dd, j = 9.3, 2.4 hz, 1h), 2.69 (ddd, j = 14.0, 5.8, 2.6 hz, 1h), 2.23 (ddd, j = 13.8, 9.5, 4.1 hz, 1h), 1.53 (s, 3h), 1.46 (s, 9h)。
[0091]
实施例11b：(2r, 3ar, 6s, 6as)-6-甲酰基-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物6b)的制备将中间体化合物7b (5.55 g)溶解于dcm (550 ml)中，随后在室温下以一份加入戴斯-马丁高碘烷(2当量，14 g)。将反应混合物搅拌4小时。加入饱和nahco3水溶液/饱和na2so3水溶液/水的混合物(2:1:2，500 ml)，并且将混合物搅拌5-10分钟。将各层分离，并且用dcm (200 ml两次)萃取水层。合并的有机层用盐水(200 ml)进行洗涤，在mgso4上进行干
13.8, 9.0, 4.6 hz, 1h), 2.01-1.92 (m, 2h), 1.80-1.75 (m, 1h), 1.71-1.66 (m, j = 11.3, 5.3 hz, 1h), 1.53 (s, 3h), 1.45 (s, 9h)。
[0096]
实施例12b：(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-5h-呋喃并[2,3-c]吡咯-5,6-二甲酸5-叔丁酯6-甲酯(化合物5c)和(2r, 3ar, 6r, 6as)-6-((s)-((叔丁氧羰基)氧基)((s)-环己-2-烯-1-基)甲基)-2-甲氧基-6a-甲基-4-氧代六氢-2h-呋喃并[2,3-c]吡咯-6-甲酸甲酯(化合物5d)的制备在ar气氛下，将三丁基(环己-2-烯-1-基)锡烷(4.2当量，20.07 g)溶解于无水thf (45 ml)中，并且在丙酮/干冰浴中冷却10分钟。经过10-15分钟逐滴加入nbuli (4当量，20.6 ml的2.5m己烷溶液)，并且将所得到的黄色/混浊溶液搅拌30分钟。经过30分钟加入zncl2溶液(4.4当量，56.6 ml的1m乙醚溶液)，并且将所得到的无色/混浊溶液搅拌30分钟。经过10-15分钟加入醛中间体化合物6b (4.6 g)的无水thf (45 ml)溶液，并且将所得到的白色/混浊混合物在-78℃下搅拌4小时。通过加入饱和nh4cl水溶液(150 ml)，在-78℃下猝灭反应。允许混合物达到室温(15-20分钟)，然后用etoac (300 ml，两次)萃取。合并的有机层用盐水(200 ml)进行洗涤，在mgso4上进行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩。将残渣吸附到sio
2 (30 g)上，并且通过快速层析(sio2，330 g，0至80% etoac的己烷溶液)进行纯化。因为产物在254或220 nm处并非活性的，所以收集了所有级分。通过tlc (80% etoac的己烷溶液，i2染剂/uv)鉴定含有产物的级分。将级分合并，并且在旋转蒸发器中浓缩，以给出作为白色泡沫的产物化合物5c (3.6 g，64%)和作为白色泡沫的化合物5d (2.26 g，40%)。
[0097]
化合物5c：1h nmr (500 mhz; cdcl3): δ 6.04-6.01 (m, 1h), 5.54-5.52 (m, 1h), 4.94 (d, j = 4.8 hz, 1h), 4.26 (d, j = 6.5 hz, 1h), 3.82 (s, 3h), 3.29 (s, 3h), 3.03 (d, j = 7.9 hz, 1h), 2.98 (s, 1h), 2.48 (d, j = 13.2 hz, 1h), 2.20 (ddd, j = 13.1, 8.0, 5.0 hz, 1h), 2.02-2.01 (m, 2h), 1.87-1.81 (m, 2h), 1.78-1.75 (m, 1h), 1.55 (s, 9h), 1.52 (s, 3h)。
[0098]
化合物5d：1h nmr (500 mhz; cdcl3): δ 6.04-5.99 (m, 1h), 5.79-5.76 (m, 1h), 5.53-5.50 (m, 1h), 5.02-5.00 (m, 1h), 4.96 (d, j = 5.2 hz, 1h), 3.83 (s, 3h), 3.20 (s, 3h), 2.74 (d, j = 7.9 hz, 1h), 2.50 (d, j = 13.4 hz, 1h), 2.39-2.36 (m, 1h), 2.21-2.17 (m, 1h), 1.99-1.96 (m, 2h), 1.81-1.77 (m, 1h), 1.74-1.69 (m, 1h), 1.45 (s, 9h), 1.43 (s, 3h)。
[0099]
实施例13a：(2r, 3s, 4r)-2-((s)-((s))-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-3-羟基-4-(2-羟乙基)-3-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸甲酯(化合物4；来自异构体a)的制备
2.87 (m, 1h), 2.23 (s, 1h), 2.06-1.97 (m, 4h), 1.82-1.74 (m, 3h), 1.62 (m, j = 5.6 hz, 2h), 1.59 (s, 3h)。
[0102]
实施例14：(2r, 3s, 4r)-2-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-3-羟基-4-(2-羟乙基)-3-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸(化合物3)的制备碲酸酯试剂的制备：向热风枪干燥的250 ml双颈烧瓶中装入碲粉(67.2 mmol，8.57 g)，并且用氩冲洗。通过注射器加入甲苯(通过将ar鼓泡30分钟进行脱气的30.5 ml)。在室温下逐滴加入alme3溶液(61.09 mmol，30.5 ml的2m甲苯溶液)。将混合物加热至回流6小时。混合物从深灰色浆料变为白色浆料。在冷却至室温后，加入甲苯(15.2 ml)，以制备76.3 ml的0.8m溶液。
[0103]
水解反应：将新鲜制备的碲酸酯浆料在冰/水浴中冷却5分钟。将中间体化合物4 (2 g，6.1 mmol)加入，溶解于通过使ar鼓泡30分钟进行脱气的无水dcm (5 ml + 2.6 ml冲洗)中。在10分钟后去除冷却浴，并且将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物在冰/水浴中冷却10分钟，随后缓慢加入1m hcl水溶液(50 ml)。观察到气体逸出，并且必须缓慢地执行hcl的添加，以防止溢出。在添加完成后，将混合物搅拌30分钟，在此时它变成黑色浆料。通过使用细孔玻璃料漏斗的过滤去除固体。滤饼用meoh (100 ml)进行洗涤，并且滤液在旋转蒸发器中进行浓缩。将残渣分成两等份，并且分别通过反相快速层析(isco c18-反相柱，415 g，溶剂a：h2o (0.1% acoh)；溶剂b：mecn (0.1% acoh))进行纯化。将含有产物的级分合并，并且与mecn共蒸发，以去除大部分水。将混合物冷冻并冻干，以给出作为白色粉末的产物化合物3 (1.6 g，84%)。
[0104]1h nmr (500 mhz; cd3od): δ 5.85-5.80 (m, 3h), 4.03 (d, j = 4.7 hz, 1h), 3.75 (t, j = 6.2 hz, 2h), 2.92 (dd, j = 8.6, 4.5 hz, 1h), 2.30-2.29 (m, 1h), 1.62 (s, 3h), 1.55-1.51 (m, 2h), 2.02-1.95 (m, 2h), 1.89-1.83 (m, 2h), 1.80-1.73 (m, j = 4.8 hz, 3h)。
[0105]
实施例15：(1r, 4r, 5s)-1-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-4-(2-羟乙基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3,7-二酮(化合物2)的制备向250-ml圆底烧瓶中装入中间体化合物3 (910 mg)，并且用氩冲洗5分钟。在室温下经由注射器加入无水dcm (30 ml)，随后加入无水吡啶(3.75 ml)。将所得到的溶液搅拌5分钟，随后在室温下以一份加入bop-cl (2.5当量，1.9 g)。将混合物搅拌16-18小时。将混
合物在冰/水浴中冷却10分钟。加入etoac (150 ml)，并且将混合物搅拌5分钟，随后加入1m柠檬酸水溶液(50 ml)。将各层分离，并且用etoac (100 ml，两次)萃取水层。合并的有机层用盐水(50 ml)进行洗涤，在na2so
4 (5 g)上进行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩。将粗产物溶解于吡啶(大约4 ml)中，并且通过快速层析(sio2，120 g，10-100% etoac的己烷溶液)进行纯化。因为产物在254nm处并非活性的，所以收集了所有级分。通过tlc (etoac；kmno4染剂)鉴定含有产物的级分。将级分合并，并且在旋转蒸发器中蒸发，以给出作为白色粉末的产物化合物2 (430 mg，50%)。
[0106]1h nmr (500 mhz; 丙酮-d6)：δ 8.11-8.08 (m, 1h), 5.97 (d, j = 10.3 hz, 1h), 5.81 (dt, j = 9.9, 2.8 hz, 1h), 4.51-4.49 (m, 1h), 3.97 (q, j = 5.5 hz, 1h), 3.91 (t, j = 8.9 hz, 1h), 3.87-3.75 (m, 2h), 2.86-2.84 (m, 1h), 2.74 (t, j = 6.9 hz, 1h), 2.50-2.48 (m, 1h), 2.04-1.99 (m, 3h), 1.96-1.84 (m, 5h), 1.83-1.78 (m, 1h), 1.56-1.49 (m, 1h), 1.48-1.40 (m, 1h)。
[0107]
实施例16：(1r, 4r, 5s)-4-(2-氯乙基)-1-((s)-((s)-环己-2-烯-1-基)(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3,7-二酮(化合物1；盐孢菌酰胺a；马里佐米)的制备使中间体化合物2 (0.43 g)与甲苯(10 ml，两次)一起共沸干燥。将中间体置于真空下1小时。加入无水吡啶(6 ml)和无水mecn (2 ml)，并且将所得到的溶液在冰/水浴中冷却。pph3cl
2 (4当量，1.8 g)在干燥箱中称重到具有隔膜盖的小瓶内。将pph3cl2溶解于无水mecn (4 ml)中，并且缓慢地加入化合物2的冷却溶液中。去除冷却浴并将混合物搅拌2小时。将反应混合物在冰/水浴中冷却10分钟并加入水(20 ml)。混合物用etoac (50 ml，两次)进行萃取。合并的有机萃取物用盐水(20 ml)进行洗涤，在na2so4上进行干燥，过滤并且在旋转蒸发器中进行浓缩。将粗产物吸附到sio2上，并且通过快速层析(sio2，40 g，5至60% etoac的己烷溶液)进行纯化。因为产物在254 nm处并非活性的，所以收集了所有级分。通过tlc (40% etoac的己烷溶液；kmno4染剂)鉴定含有产物的级分。将级分合并，并且在旋转蒸发器中蒸发，以给出作为白色粉末的产物化合物1 (盐孢菌酰胺a；马里佐米，378 mg，89%)。
[0108]1h nmr (500 mhz; 丙酮-d6)：δ 8.14 (s, 1h), 5.98-5.96 (m, 1h), 5.82 (dt, j = 6.9, 3.2 hz, 1h), 4.52 (d, j = 8.8 hz, 1h), 4.01 (dt, j = 10.8, 7.1 hz, 1h), 3.97-3.91 (m, 2h), 2.77 (dd, j = 7.5, 6.6 hz, 1h), 2.52-2.47 (m, j = 2.9 hz, 1h), 2.22-2.10 (m, j = 7.0 hz, 2h), 2.06-1.99 (m, 3h), 1.89 (s, 3h), 1.83-1.76 (m, 1h), 1.56-1.49 (m, 1h), 1.48-1.39 (m, 1h)。
[0109]
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形式。本公开内容的一个或多个实施方案的细节在上文所附说明书中进行阐述。尽管与本文描述的那些相似或等价的任何方法和材料都可以用于本公开内容的实践或测试中，但目前描述了优选的方法和材料。本公开内容的其它特征、目的和优点根据说明书和权利要求将是显而易见的。在说明书和所附权利要求中，单数形式包括复数指示物，除非上下文另有明确规定。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语都具有与本公开内容所属领域的普通技术人员通常理解相同的含义。本说明书中引用的所有专利和出版物都通过引用并入。