吡咯并喹啉醌单钠盐、其制备方法及组合物与流程

1.本发明涉及吡咯并喹啉醌单钠盐技术领域，具体而言，涉及一种吡咯并喹啉醌单钠盐、其制备方法及组合物。


背景技术：

2.吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone，pqq)是一种新型氧化还原酶的辅酶，于20世纪70年代末在甲基营养菌中被发现，它的化学名称为4,5-二氢-4,5-二氧代-1h-吡咯并[2,3-f]喹啉-2,7,9-三羧酸。pqq在生物体内具有多种生理活性，例如作为各种醌酶的辅酶参与电子的传递、参与dna损伤修复的信号转导、刺激神经生长因子生成、抗黑色素生成、清除自由基保护机体、防治肝损伤等。
[0003]
虽然pqq广泛存在于动植物体内，但动物自身不能合成，通过肠道微生物合成和外源摄入是动物组织中pqq的主要来源。被动物摄入后，pqq在小肠被吸收，经肾脏排出，fda的研究表明pqq可以长期摄入。三菱气体化学公司的pqq二钠盐已成为美国、加拿大等国家官方承认的膳食组成成分或保健食品。美国sigma-aldrich公司正在开发吡咯喹啉醌的药物用途，如用于治疗心绞痛、心脏保护剂、头发生长兴奋剂和缺血性中风的治疗。
[0004]
但是目前市场上存在的pqq晶型均存在溶解度较低的缺点，不利于将pqq制成口服制剂，从而限制了pqq的应用。


技术实现要素：

[0005]
本发明的主要目的在于提供一种吡咯并喹啉醌单钠盐、其制备方法及组合物，以解决现有技术中吡咯并喹啉醌单钠盐的溶解性较差的问题。
[0006]
为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种吡咯并喹啉醌单钠盐，该吡咯并喹啉醌单钠盐的衍射图谱至少在以下2θ角度具有特征峰：7.86
°±
0.2
°
、10.81
°±
0.2
°
、11.10
°±
0.2
°
、15.10
°±
0.2
°
、15.72
°±
0.2
°
、18.03
°±
0.2
°
、18.30
°±
0.2
°
、21.43
°±
0.2
°
、22.27
°±
0.2
°
、23.61
°±
0.2
°
、25.43
°±
0.2
°
、27.73
°±
0.2
°
、28.43
°±
0.2
°
、28.76
°±
0.2
°
、34.72
°±
0.2
°
以及36.27
°±
0.2
°
。
[0007]
进一步地，上述衍射图谱如图1所示。
[0008]
根据本发明的另一方面，提供了一种前述的吡咯并喹啉醌单钠盐的制备方法，该制备方法包括：将吡咯并喹啉醌单钠盐原料在ph值为2～4的溶液中进行转晶，得到含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系。
[0009]
进一步地，上述溶液的溶剂为水、或者水和有机溶剂的混合溶剂，优选混合溶剂中的有机溶剂和水的体积比为1:9～9:1，优选有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃中的任意一种或多种。
[0010]
进一步地，上述溶液为酸溶液，优选酸溶液选自盐酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、乳酸和柠檬酸中的任意一种或多种。
[0011]
进一步地，上述转晶的温度为10～60℃。
[0012]
进一步地，上述转晶的过程包括：转晶在搅拌下进行，优选搅拌的转速为20～500r/min，优选搅拌的时间为6～24h。
[0013]
进一步地，上述吡咯并喹啉醌单钠盐原料与溶液的用量比为1g：2～1000ml。
[0014]
进一步地，上述制备方法还包括：对含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行固液分离，得到吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，优选固液分离为过滤；对吡咯并喹啉醌单钠盐结晶进行干燥，优选干燥的温度为0～60℃，优选干燥的温度为20～30℃。
[0015]
根据本发明的又一方面，提供了一种组合物，组合物为药物组合物或食品组合物，组合物包括吡咯并喹啉醌单钠盐，该吡咯并喹啉醌单钠盐为上述的吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0016]
由于物质的结构决定物质的性质，晶体的结构直接影响物质的性质。具有本技术特征衍射峰的吡咯并喹啉醌单钠盐由于其特殊的晶体结构，使其在水中具有优良的溶解性，从而便于将其制成口服制剂，因此可以广泛的应用。
附图说明
[0017]
构成本技术的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：
[0018]
图1示出了根据本发明的实施例1得到的pqq单钠盐的x-射线粉末衍射(xrd)图谱；
[0019]
图2示出了根据本发明的实施例1得到的pqq单钠盐的热重分析(tga)图；
[0020]
图3示出了根据本发明的实施例1得到的pqq单钠盐的差示扫描量热分析(dsc)图；
[0021]
图4示出了根据本发明的实施例1得到的pqq单钠盐的na含量检测时的工作曲线图；
[0022]
图5示出了根据本发明的实施例1得到的pqq单钠盐的na含量检测时的含量图谱；
[0023]
图6示出了根据本发明的对比例1得到的pqq单钠盐的x-射线粉末衍射(xrd)图谱；以及
[0024]
图7示出了根据本发明的对比例2得到的pqq单钠盐的x-射线粉末衍射(xrd)图谱。
具体实施方式
[0025]
需要说明的是，在不冲突的情况下，本技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。
[0026]
如背景技术所分析的，现有技术中存在吡咯并喹啉醌单钠盐的溶解性较差的问题，为解决该问题，本发明提供了一种吡咯并喹啉醌单钠盐、其制备方法及组合物。
[0027]
在本技术的一种典型的实施方式中，提供了一种吡咯并喹啉醌单钠盐，该吡咯并喹啉醌单钠盐的衍射图谱至少在以下2θ角度具有特征峰：7.86
°±
0.2
°
、10.81
°±
0.2
°
、11.10
°±
0.2
°
、15.10
°±
0.2
°
、15.72
°±
0.2
°
、18.03
°±
0.2
°
、18.30
°±
0.2
°
、21.43
°±
0.2
°
、22.27
°±
0.2
°
、23.61
°±
0.2
°
、25.43
°±
0.2
°
、27.73
°±
0.2
°
、28.43
°±
0.2
°
、28.76
°±
0.2
°
、34.72
°±
0.2
°
以及36.27
°±
0.2
°
。
[0028]
晶体的结构直接影响物质的性质。具有本技术特征衍射峰的吡咯并喹啉醌单钠盐由于其特殊的晶体结构，使其在水中具有优良的溶解性，从而便于将其制成口服制剂，因此可以得到广泛的应用。
[0029]
在一些实施例中，优选上述衍射图谱如图1所示，具有图1所示衍射图谱的吡咯并
喹啉醌单钠盐，其结晶度更高，因此具有更好的溶解性、较高的稳定性及良好的抗氧化活性。
[0030]
在本技术的另一种典型的实施方式中，提供了一种前述的吡咯并喹啉醌单钠盐的制备方法，该制备方法包括：将吡咯并喹啉醌单钠盐原料在ph值为2～4的溶液中进行转晶，得到含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系。
[0031]
在上述酸性的溶液中吡咯并喹啉醌单钠盐原料的原子能够进行重新组合排列，转化为具有前述特征峰所限定的吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系。该转晶过程简单，转晶率较高。
[0032]
上述吡咯并喹啉醌单钠盐原料可以采用现有技术中的常规方法制备得到，例如通过发酵法(公告号为cn 101228963b的中国专利)和有机化学合成法(j.am.chem.soc.,1981,103,5599～5600)等制备转化得到。且所制备得到的吡咯并喹啉醌单钠盐原料可以是结晶也或是非晶质的。
[0033]
为提高上述吡咯并喹啉醌单钠盐原料在溶液中的分散性，从而有利于提高其转晶效率，优选溶液的溶剂为水、或者水和有机溶剂的混合溶剂，优选混合溶剂中的有机溶剂和水的体积比1:9～9:1，优选有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃中的任意一种或多种。控制混合溶剂中的有机溶剂和水的体积比为1:9～9:1更有利于转晶的进行。
[0034]
在本技术的一种实施例中，上述溶液为酸溶液，优选酸溶液选自盐酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、乳酸和柠檬酸中的任意一种或多种。
[0035]
选择溶液为上述的酸溶液，可以通过直接控制酸溶液的浓度，同时达到对转晶所需介质及其ph的控制，从而节省了步骤，提高了效率。
[0036]
温度会影响晶体的转晶效率，优选上述转晶的温度为10～60℃，有利于尽可能地、尽快地将吡咯并喹啉醌单钠盐原料转化为吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0037]
在本技术的一种实施例中，上述转晶的过程包括：转晶在搅拌下进行，优选搅拌的转速为20～500r/min，优选搅拌的时间为6～24h。从而提高吡咯并喹啉醌单钠盐原料的分散性，进而有利于控制晶粒大小及其均匀性。
[0038]
吡咯并喹啉醌单钠盐原料的浓度会影响转晶的进程，优选上述吡咯并喹啉醌单钠盐原料与溶液的用量比为1g：2～1000ml，可以避免吡咯并喹啉醌单钠盐原料的浓度太低或太高导致转晶的效率太低。
[0039]
在一些实施例中，为了便于转晶得到的含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的保存，上述制备方法还包括：对含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行固液分离，得到吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，优选固液分离为过滤；对吡咯并喹啉醌单钠盐结晶进行干燥，干燥的温度为0～60℃，优选干燥的温度为20～30℃。优选在上述的温度范围内对吡咯并喹啉醌单钠盐结晶进行干燥，既有利于降低能耗，又有利于降低干燥吡咯并喹啉醌单钠盐结晶过程中吡咯并喹啉醌单钠盐变质的风险。当然，当溶剂全部为水时，pqq的用量需大于其溶解度。
[0040]
在本技术的又一种典型的实施方式中，提供了一种组合物，该组合物为药物组合物或食品组合物，组合物包括吡咯并喹啉醌单钠盐，该吡咯并喹啉醌单钠盐为上述的吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0041]
本技术的吡咯并喹啉醌单钠盐在水中具有优良的溶解性，从而便于将其作为药物
组合物或食品组合物中的一种组分，进而将其广泛应用于药物和食品中。
[0042]
以下将结合具体实施例和对比例，对本技术的有益效果进行说明。
[0043]
实施例1
[0044]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料(非晶系)，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0045]
取30.18mg上述吡咯并喹啉醌单钠盐样品，并加入到1l水溶液中稀释，通过离子色谱法检测得溶液中钠离子浓度为1.6218mg/l。因此，按照公式计算所得该吡咯并喹啉醌单钠盐的晶型中的na含量为6.4％，换算得到na：pqq＝0.98:1，表明该晶型为单钠盐，该吡咯并喹啉醌单钠盐的x-射线粉末衍射图谱、热重分析图、差示扫描量热分析图、na含量检测时的工作曲线图、以及na含量检测时的含量图谱依次为图1至图5。
[0046]
实施例2
[0047]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为2，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0048]
实施例3
[0049]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为4，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0050]
实施例4
[0051]
在100ml水中滴加柠檬酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0052]
实施例5
[0053]
在50ml水和50ml异丙醇的混合溶剂中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0054]
实施例6
[0055]
在10ml水和90ml异丙醇的混合溶剂中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0056]
实施例7
[0057]
在90ml水和10ml异丙醇的混合溶剂中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0058]
实施例8
[0059]
在5ml水和95ml异丙醇的混合溶剂中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0060]
实施例9
[0061]
在50ml水和50ml乙腈的混合溶剂中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0062]
实施例10
[0063]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，10℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0064]
实施例11
[0065]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，60℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0066]
实施例12
[0067]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，5℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0068]
实施例13
[0069]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，70℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0070]
实施例14
[0071]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌6h进行转晶，搅拌转速为20r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0072]
实施例15
[0073]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌24h进行转晶，搅拌转速为500r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0074]
实施例16
[0075]
在50ml水和50ml异丙醇中滴加浓盐酸至ph为3，加入0.2g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0076]
实施例17
[0077]
在50ml水和50ml异丙醇中滴加浓盐酸至ph为3，加入0.1g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0078]
实施例18
[0079]
在50ml水和50ml异丙醇中滴加浓盐酸至ph为3，加入0.05g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0080]
实施例19
[0081]
在2ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入3g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到的吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0082]
实施例20
[0083]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在30℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0084]
实施例21
[0085]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在0℃减压干燥，得到同例1吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0086]
实施例22
[0087]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为3，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单
钠盐结晶用水洗涤后在60℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌单钠盐。
[0088]
对比例1
[0089]
根据专利申请(cn109311873a)实施例1的方法制备pqq单钠盐晶体：将2g nacl、7ml浓盐酸与1l水混合，在40ml该溶液中混合0.6g pqq二钠盐晶体，在37℃搅拌3小时，离心分离，用2-丙醇清洗、干燥，得到pqq单钠盐晶体。检测所得晶体的x-射线粉末衍射谱图与专利申请(cn109311873a)中的结晶1一致，其xrd图如图6所示。
[0090]
对比例2
[0091]
根据专利申请(cn109311873a)实施例7的方法制备pqq单钠盐晶体：将2g吡咯并喹啉醌二钠加入到含有25ml乙醇、22.5ml水的混合液中。向其中加入2n盐酸2.5ml，在室温下搅拌1小时。将该悬浊液加热至50℃，过滤得到pqq单钠盐结晶。检测所得晶体的x-射线粉末衍射谱图与专利申请(cn109311873a)中的结晶2一致，其xrd图如图7所示。
[0092]
对比例3
[0093]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为1，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌钠盐混合物。
[0094]
对比例4
[0095]
在100ml水中滴加浓盐酸至ph为5，加入2.0g吡咯并喹啉醌(pqq)单钠盐原料，25℃搅拌12h进行转晶，搅拌转速为200r/min，得含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系，将该含吡咯并喹啉醌单钠盐结晶的体系进行过滤，得吡咯并喹啉醌单钠盐结晶，将吡咯并喹啉醌单钠盐结晶用水洗涤后在20℃减压干燥，得到吡咯并喹啉醌钠盐混合物。
[0096]
用于本发明的分析条件如下：
[0097]
pqq分析：
[0098]
仪器：agilent technologies 1260infinity；
[0099]
色谱柱：zorbax，sb-c18，高效液相色谱；
[0100]
柱温：25℃；
[0101]
检测波长：249nm；
[0102]
洗脱液：四丁基溴化铵+磷酸二氢钾+水+乙腈；
[0103]
洗脱速度：1ml/min；
[0104]
na结构分析：
[0105]
仪器：polymetron 9245；
[0106]
色谱柱：dionextmionpactmcs17；
[0107]
流动相：6mm甲基磺酸溶液；
[0108]
流速：0.25ml/min；
[0109]
柱温：30℃；
[0110]
热重分析：
[0111]
仪器型号：tga q500
[0112]
差示扫描量热分析：
[0113]
仪器型号：dsc q2000；
[0114]
方法：10℃/min至250℃，不密封盘；
[0115]
xrd分析：
[0116]
仪器型号：d8advance；
[0117]
靶：cu-kα(40kv，40ma)；
[0118]
样品到检测器距离：30cm；
[0119]
扫描范围：3
°
～40
°
(2θ值)；
[0120]
扫描步径：0.1s。
[0121]
hplc测定上述实施例1至22、对比例1至4中所得pqq晶体盐的纯度，根据na离子分析得出该晶体所含的pqq与na的物质量比pqq:na，根据xrd特征峰测试上述pqq晶体盐原料晶型的转化率，并将测试结果列于表1。
[0122]
表1
[0123]
[0124][0125]
表1的数据表明实施例1至22得到均全部得到高纯度的单钠盐晶体，且为单一晶体，对比例1至4均未得到本技术的单钠盐晶体。
[0126]
将上述实施例1、实施例3、实施例6、实施例13、实施例15、实施例17、对比例1、对比例2得到的pqq晶体盐在水中的溶解度(常温)列于表2。
[0127]
表2
[0128]
实施/对比例溶解度/mg/ml实施例12.8实施例32.8实施例62.7实施例132.8实施例152.8实施例172.8对比例11.5对比例20.8
[0129]
由表2中数据可知，在溶解度方面，本技术的pqq单钠盐晶体较专利申请(cn109311873a)中公开的两个pqq单钠盐结晶有明显提升，同时，远远高于专利(cn107163040b)中的三种pqq单钠盐水中的溶解度(0.87g/kg、0.25g/kg、0.18g/kg)。
[0130]
同一原料药的不同晶型在外观、溶解度、熔点、溶出、生物有效性方面可能会有显著不同，从而影响了药剂尤其是口服片剂的稳定性、生物利用度及疗效。本发明的pqq单钠盐结晶与现有技术已有的单钠盐结晶相比，其溶解度有较大提高，在制成口服片剂方面有明显优势。
[0131]
将上述实施例1、实施例3、实施例6、实施例13、实施例15、实施例17、对比例1、对比例2得到的pqq晶体盐的吸湿性(常温)列于表3。
[0132]
表3
[0133][0134][0135]
由表3中数据可知，本技术的pqq单钠盐晶型基本无吸湿性，不易与外界发生物质交换，稳定性良好，适于作为原料药长期存储。
[0136]
将实施例1、实施例3、实施例6、实施例13、实施例15、实施例17、对比例1、对比例2
得到的pqq晶体盐直接用于试验，使用水溶性维生素e(teolox)作为对照。
[0137]
清除羟自由基(
·
oh)的抗氧化活性试验：使用直径为1mm的标准石英毛细管进行，
·
oh产生体系采用h2o2(0.1％，v/v)及fe
2+
(0.25mm)的fenton反应进行，反应体系总体积50μl。pqq晶体盐对
·
oh的清除实验使用电子自旋共振波谱仪(esr)测定及自旋捕集(dmpo)技术。
[0138]
试验时，在
·
oh产生体系中分别加入实施例1、实施例3、实施例6、实施例13、实施例15、实施例17、对比例1、对比例2的pqq钠盐和trolox各0.1mg，测定其esr波谱的强度变化，根据其esr信号强度衰减率(％)比较其清除能力。
[0139]
具体实验参数：中心磁场3385g；微波功率20mw；扫场宽度200g；调制频率25hz；调制幅度1.0mt；操作温度25℃；dmpo(0.8m)作为自旋捕集剂，使用德国bruker esp300型esr仪，对pqq清除
·
oh的抗氧化活性进行评价，并将测试结果列于表4。
[0140]
表4
[0141]
实施/对比例esr信号强度衰减率/％实施例184实施例384实施例683实施例1383实施例1584实施例1783对比例152对比例233
[0142]
由表4结果可知，本技术的pqq单钠盐对
·
oh有更强的清除能力，即相较于其它单钠盐晶型有优异的抗氧化活性。
[0143]
综上，本技术的pqq单钠盐晶型相比现有技术的pqq单钠盐具有更高的溶解性，较高的稳定性及良好的抗氧化活性，在医药食品领域有良好的应用前景。
[0144]
从以上的描述中，可以看出，本发明上述的实施例实现了如下技术效果：
[0145]
由于物质的结构决定物质的性质，晶体的结构直接影响物质的性质。具有本技术特征衍射峰的吡咯并喹啉醌单钠盐由于其特殊的晶体结构，使其在水中具有优良的溶解性，从而便于将其制成口服制剂，因此可以广泛的应用。
[0146]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。