一种索玛鲁肽钠盐及其制备方法与应用与流程

1.本技术涉及一种索玛鲁肽钠盐及其制备方法与应用，属于糖尿病药物技术领域。


背景技术：

2.糖尿病是一种全球性疾病，据报道2014年全球共有糖尿病患者4.22 亿人，约占全球人口的8.5％，其中ii型糖尿病占约90％。索玛鲁肽是一种用于治疗ii型糖尿病的人胰高血糖素样肽-1(glp-1)的修饰物，具有 glp-1受体激动作用，在分子结构、生物活性、作用靶点及免疫原性等方面与glp-1相似。
3.索玛鲁肽英文名为semaglutide，其序列为：
4.his
1-aib
2-glu
3-gly
4-thr
5-phe
6-thr
7-ser
8-asp
9-val
10-ser
11-ser
12-tyr
13-leu 14-glu
15-gly
16-gln
17-ala
18-ala
19-lys
20
(peg2-peg2-γ-glu-octadecanedioic)-gl u
21-phe
22-ile
23-ala
24-trp
25-leu
26-val
27-arg
28-gly
29-arg
30-gly
31
。
5.索玛鲁肽是基于利拉鲁肽基本结构而开发的长效剂型。与利拉鲁肽相比，修饰后的索玛鲁肽亲水性更强，能够抑制dpp-4酶的水解，延长胃排空，降低肾脏清除率，延长生物半衰期，促进胰岛细胞再生，长效降低血糖等多种作用，应用前景广泛。
6.目前索玛鲁肽的合成存在如下问题：索玛鲁肽序列中个别氨基酸偶联困难、容易缺失碳末端氨基酸、粗肽纯度低、杂质个数多、分离纯化困难等问题。另外目前报道的索玛鲁肽的三氟乙酸盐、醋酸盐形式的稳定性都比较差，并且多聚物杂质难控制，这些因素都不利于工业化生产。


技术实现要素：

7.根据本技术的一个方面，提供一种索玛鲁肽钠盐，所述索玛鲁肽钠盐中含有适当比例的钠离子，使得最终产品的稳定性较其他盐型有了大大提高。
8.一种索玛鲁肽钠盐，所述索玛鲁肽钠盐中钠离子和索玛鲁肽的摩尔比为1～7∶1。
9.根据本技术的一个方面，提供一种索玛鲁肽钠盐的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
10.将含有索玛鲁肽和钠离子的混合物干燥，得到所述索玛鲁肽钠盐。
11.可选地，所述索玛鲁肽序列为：
12.his
1-aib
2-glu
3-gly
4-thr
5-phe
6-thr
7-ser
8-asp
9-val
10-ser
11-ser
12-tyr
13-leu 14-glu
15-gly
16-gln
17-ala
18-ala
19-lys
20
(peg2-peg2-γ-glu-octadecanedioic)-gl u
21-phe
22-ile
23-ala
24-trp
25-leu
26-val
27-arg
28-gly
29-arg
30-gly
31
。
13.可选地，所述钠离子和所述索玛鲁肽的摩尔比为1～7∶1。
14.可选地，所述混合物通过以下步骤获得：
15.(s1)通过固相合成的方法获得索玛鲁肽粗肽，索玛鲁肽粗肽经过纯化，得到索玛鲁肽湿品；
16.(s2)将所述索玛鲁肽湿品和钠盐溶液混合，得到所述混合物。
17.可选地，所述钠盐溶液中的钠盐包括碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠中的至少一种；
18.可选地，所述钠盐溶液以钠离子计，浓度为0.01～1mol/l。
19.可选地，所述纯化包括以下步骤：
20.索玛鲁肽粗肽利用反相高效液相色谱法纯化后得到索玛鲁肽馏份，调节索玛鲁肽馏份ph值至4～6.5，收集析出物，得到所述索玛鲁肽湿品。
21.可选地，所述索玛鲁肽馏份的纯度达到99％以上，单杂小于0.10％。
22.可选地，所述调节索玛鲁肽馏份ph值的调节剂包括氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钾中的至少一种；
23.所述收集析出物为：离心去除上清液，沉淀用水洗涤，得到所述索玛鲁肽湿品。
24.可选地，所述固相合成的方法包括以下步骤：
25.将r
a-n(gly
31-o rb)rc偶联于氨基树脂，得到氨基酸树脂i，采用保护合成策略，在氨基酸树脂i上，按照索玛鲁肽主链c端至n端肽序，完成第30～20位氨基酸的偶联；在第20位氨基酸lys
20
的侧链氨基上，完成 peg2、peg2、γ-glu、十八烷二酸单叔丁酯的偶联；在第20位氨基酸lys
20
的主链氨基上，完成第19～1位氨基酸的偶联，得到全保护索玛鲁肽肽树脂；全保护索玛鲁肽肽树脂经过裂解，得到所述索玛鲁肽粗肽；
26.其中，所述ra为gly
31
的主链氨基的保护基团，选自氨基保护基团中的任一种；
27.所述rb为gly
31
的主链羧基的保护基团，选自羧基保护基团中的任一种；
28.所述rc为连接于gly
31
的n原子上的连接臂，所述连接臂带有游离羧基；
29.所述r
a-n(gly
31-o rb)rc通过rc的游离羧基与氨基树脂的氨基进行偶联。
30.可选地，所述将r
a-n(gly
31-o rb)rc偶联于氨基树脂包括以下步骤：
31.将含有氨基树脂、r
a-n(gly
31-o rb)rc、缩合剂、溶剂的原料反应，得到所述氨基酸树脂i；
32.可选地，所述缩合剂包括hobt、dic；
33.所述溶剂包括dmf、dcm、nmp、dce；
34.可选地，所述氨基树脂、r
a-n(gly
31-o rb)rc、缩合剂、溶剂的比例为2mmol∶4～12mmol∶4～12mmol∶20～60ml；
35.可选地，所述hobt和dic的比例为1～2mmol∶1mmol。
36.可选地，所述氨基树脂选自am resin、mbha resin、rink amide mbha resin、rink amide am resin中的任一种；
37.所述氨基保护基团选自h、fmoc、boc、dde、ivdde、mtt、mmt、 alloc中的任一种；
38.所述羧基保护基团选自
t
bu、oall、obzl中的任一种；
39.所述保护合成策略选自fmoc策略、boc策略中的至少一种。
40.可选地，所述r
a-n(gly
31-o rb)rc为fmoc-n(gly-o
t
bu)hmb butyricacid。
41.可选地，所述索玛鲁肽钠盐为上述任一项所述的索玛鲁肽钠盐。
42.根据本技术的一个方面，提供上述任一项所述的索玛鲁肽钠盐、根据上述任一项所述的制备方法制备得到的索玛鲁肽钠盐在制备糖尿病药物中的应用。
43.作为一种实施方案，本技术提供了一种新的索玛鲁肽制备及转盐方法，与现有技术相比，本发明具有下述优点：
44.本发明采用修饰后的gly进行首个氨基酸的加载，使用稳定的氨基类树脂为起始
树脂，避免了使用wang resin容易出现缺失羧基端一个或者多个氨基酸的杂质问题和ctc resin不稳定导致的收率低问题，同时改善了树脂缩聚现象，提高了氨基酸的偶联效率，大大提高了粗肽的纯度和收率。
45.本发明直接将纯化收集的索玛鲁肽合格馏份通过调节ph至等电点使多肽析出，从而除去原有的醋酸盐，完全不需要像以往工艺一样进行hplc 上反相色谱柱进行除盐，简化了操作步骤，降低了人工和物料成本。
46.本发明通过将沉淀析出的多肽用钠盐重新溶解直接完成了盐型的转换，从而可以随意的控制样品浓度，大大降低产品的冻干体积，避免了传统工艺中使用hplc柱浓缩或旋蒸浓缩来提高产品的浓度，同时由于减少了浓缩工序使得产品中的多聚物杂质得到很好的控制，大大提高了工艺流程的便利性，为后续规模化生产提供了较大空间。
47.本发明通过将索玛鲁肽转化成钠盐形式，并控制产品结合的钠离子个数和产品ph值在一定的范围内，使得最终产品的稳定性较其他盐型有了大大提高，多聚物杂质含量控制在0.15％以下，较其他工艺有了明显的减小。
48.具体的，本技术所提供的方案包括以下步骤：
49.(1)将树脂载体与fmoc-n(gly
31-o
t
bu)hmb butyric acid偶联得到 fmoc-n(gly
31-o
t
bu)hmb butyriyl-树脂；
50.(2)取步骤(1)所得fmoc-n(gly
31-o
t
bu)hmb butyriyl-树脂，通过固相fmoc合成法，按照索玛鲁肽主链c端至n端的肽序，依次偶联具有 n端fmoc保护的氨基酸至lys
20
，得到 dde-lys
20
(fmoc)-glu
21
(o
t
bu)-phe
22-ile
23-ala
24-trp
25
(boc)-leu
26-val
27-arg
28
( pbf)-gly
29-arg
30
(pbf)-n(gly-o
t
bu)hmb butyriyl-树脂。
51.(3)脱除fmoc依次偶联侧链氨基酸及十八烷二酸单叔丁基酯，得到以下结构：
52.dde-lys
20
(peg2-peg2-γ-glu(o
t
bu)-octadecanedioic(o
t
bu))-glu
21
(o
t
bu)-phe 22-ile
23-ala
24-trp
25
(boc)-leu
26-val
27-arg
28
(pbf)-gly
29-arg
30
(pbf)-n(gly
31-o
t
b u)hmb butyriyl-树脂；
53.(4)脱除dde保护基，依次偶联带有保护基团的剩余氨基酸，完成主链合成，得到全保护索玛鲁肽肽树脂，其中his
1-aib2使用boc-his (trt)-aib-oh，glu
3-gly4和glu
15-gly
16
使用fmoc-glu(o
t
bu)-gly-oh二肽进行连接；
54.(5)全保护肽树脂经裂解液裂解后沉降、离心、烘干即得索玛鲁肽粗肽；
55.(6)索玛鲁肽粗肽经反相高效液相色谱法纯化后得到合格的样品馏份 (合格的样品馏份是指第一次纯化收集馏份)；
56.(7)将(6)的合格馏份再次经反相高效液相色谱法纯化，得到第二次纯化收集馏份，样品纯度达到99％以上，单杂小于0.10％；
57.(8)将第二次纯化收集馏份调节ph至等电点使样品析出，离心去除上清液，下层固体使用纯化水洗涤、离心重复2次，得到无盐的索玛鲁肽湿品；
58.(9)将索玛鲁肽湿品和钠盐溶液混合，然后直接冻干，即得索玛鲁肽钠盐成品。
59.进一步地，步骤(1)中，所述树脂为am resin、mbha resin、rink amide mbha resin、rink amide am resin等；
60.进一步地，步骤(4)中，所述脱除条件为：溶剂a(2-4％盐酸羟胺 /dmf溶液)∶溶剂b(3-8％dipea/dmf溶液)＝1∶1(v/v)反应60min，抽干树脂，过滤去掉保护液，重复上述操作1
次；
61.进一步地，步骤(4)中，dde脱除后树脂洗涤条件为：2-5％dipea/dmf 溶液洗涤、抽干重复2次，然后使用dmf洗涤、抽干重复3次；
62.进一步地，步骤(4)中，boc-his(trt)-aib-oh偶联采用depbt/nmm 偶联试剂；
63.进一步地，步骤(5)中，裂解液为tfa∶tis∶edt∶phoh∶h2o＝90∶2.5∶2.5∶2.5∶2.5；
64.进一步地，步骤(6)中，反相高效液相色谱法纯化的条件为：
65.流动相：a相为teap(ph 6.5)，b相为乙腈；
66.色谱柱：c8反相色谱柱；
67.检测波长：220nm；
68.梯度洗脱条件：洗脱剂为a相与b相的混合液，其中b相的体积百分比在60min内由33％增加到38％，之后保持38％不变。
69.进一步地，步骤(7)中，反相高效液相色谱法纯化的条件为：
70.流动相：a相为0.5％hac/水，b相为乙腈；
71.色谱柱：c8反相色谱柱；
72.检测波长：220nm；
73.梯度洗脱条件：洗脱剂为a相与b相的混合液，其中b相的体积百分比在60min内由30％增加到35％，之后保持35％不变。
74.进一步地，步骤(8)中，调节ph至等电点的试剂为0.05mol/l氢氧化钾水溶液；
75.进一步地，步骤(9)中，索玛鲁肽湿品使用钠盐溶液(如0.05mol/l 碳酸钠)重新溶解；
76.进一步地，步骤(9)中，m(钠离子)∶m(索玛鲁肽)＝1～7，即加入钠离子的摩尔数为索玛鲁肽摩尔数的1倍到7倍之间。
77.由此可以看出，本技术索玛鲁肽的合成方案具有以下特点：
78.本技术采用修饰后的gly进行首个氨基酸的加载，使用稳定的氨基类树脂为起始树脂，避免了使用wang resin容易出现缺失羧基端一个或者多个氨基酸的杂质问题和ctc resin不稳定导致的收率低问题，同时改善了树脂缩聚现象，提高了氨基酸的偶联效率，大大提高了粗肽的纯度和收率。
79.本技术的等电点沉降索玛鲁肽多肽、索玛鲁肽湿品和钠盐溶液混合转盐工艺具有以下特点：
80.1、不过柱，省设备
81.传统工艺中使用hplc换盐浓缩或减压浓缩，需占用生产设备资源，增加了设备的使用和控制流程；
82.本技术利用等电点沉降的原理直接将纯化收集的索玛鲁肽合格馏份通过调节ph至等电点使多肽析出，从而除去原有的醋酸盐，完全不需要像以往工艺一样进行hplc上反相色谱柱进行除盐，只需要使用简易设备(搅拌器和容器)就可以完成操作，大大提高了工艺流程的便利性，简化了操作步骤，降低了人工和物料成本。
83.2、工艺易于控制，操作简单
84.传统工艺使用hplc换盐浓缩，对上样量有一定的限制。上样量过多会导致洗脱不充分，需要使用大量的流动相进行洗脱，增加生产成本和工艺控制难度，同时增加了废液的
产出量；上样量过少会减少批生产量，增加设备的使用频率和控制流程，不便于生产操作。而使用减压浓缩会增加产品稳定性风险，也不便于大规模工业化生产。
85.本技术利用等电点沉降的原理将多肽沉淀析出，之后用钠盐重新溶解直接完成了盐型的转换，从而可以随意的控制样品浓度，大大降低产品的冻干体积，避免了传统工艺中使用hplc柱浓缩或旋蒸浓缩来提高产品的浓度，同时由于减少了浓缩工序使得产品中的多聚物杂质得到很好的控制，大大提高了工艺流程的便利性，工艺易于控制，操作简单，便于大规模工业化生产。
86.3、产品稳定性高，多聚物杂质含量低
87.本技术通过将索玛鲁肽转化成钠盐形式，并控制产品结合的钠离子个数在一定的范围内，使得最终产品的稳定性较其他盐型有了大大提高，多聚物杂质含量控制在0.15％以下，较其他工艺有了明显的减小。
88.本技术中，英文/缩写说明如下：
89.fmoc-n(gly-o
t
bu)hmb butyric acid：4-(2-(((9-芴甲氧羰基)(2-(叔丁氧基)-2-氧乙基)氨基)甲基)-5-甲氧基苯氧基)丁酸；
90.am resin：氨甲基聚苯乙烯交联树脂；
91.mbha resin：聚合物键合型4-甲基二苯甲胺盐酸盐；
92.rink amide mbha resin：4-(2',4'-二甲氧基苯基-芴甲氧羰基-氨甲基)
‑ꢀ
苯氧基乙酰氨基-甲基二苯甲胺树脂；
93.rink amide am resin：4-(2',4'-二甲氧基苯基-fmoc-氨基甲基)苯氧基乙酰胺氨基甲基树脂；
94.wang resin：聚合物键合型聚苄氧基苄醇；
95.ctc resin：2-氯三苯甲基聚苯乙烯交联树脂；
96.his：组氨酸；
97.aib：2-甲基丙氨酸；
98.glu：谷氨酸；
99.gly：甘氨酸；
100.thr：苏氨酸；
101.phe：苯丙氨酸；
102.ser：丝氨酸；
103.asp：天冬氨酸；
104.val：缬氨酸；
105.tyr：酪氨酸；
106.leu：亮氨酸；
107.gln：谷氨酰胺；
108.ala：丙氨酸；
109.lys：赖氨酸；
110.peg2：2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙酸；
111.octadecanedioic：十八烷二酸；
112.ile：异亮氨酸；
113.trp：色氨酸；
114.arg：精氨酸；
115.fmoc：9-芴甲氧羰基；
116.t
bu：叔丁基；
117.dipea：n,n-二异丙基乙胺；
118.dmf：n,n-二甲基甲酰胺；
119.hobt：1-羟基苯并三唑；
120.dic：n,n'-二异丙基碳二亚胺；
121.dcm：二氯甲烷；
122.oxyma：2-肟氰乙酸乙酯；
123.depbt：3-(二乙氧基邻酰氧基)-1,2,3-苯并三嗪-4-酮；
124.pbf：2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基；
125.boc：叔丁氧羰基；
126.dde：1,1-二氯-2,2-双(4-氯苯基)乙烯；
127.trt：三苯甲基；
128.tfa：三氟乙酸；
129.tis：三异丙基硅烷；
130.edt：1,2-乙二硫醇；
131.hplc：高效液相色谱；
132.ibmx：3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤。
133.本技术能产生的有益效果包括：
134.(1)本技术所提供的索玛鲁肽钠盐，具有合理的钠离子含量，使得最终产品的稳定性较其他盐型有了大大提高。
135.(2)本技术所提供的索玛鲁肽钠盐的制备方法，控制产品结合的钠离子个数和/或产品ph值在一定的范围内，使得最终产品的稳定性较其他盐型有了大大提高。
136.(3)本技术所提供的索玛鲁肽钠盐的制备方法，通过将ph值调节至特定范围，将多肽沉淀析出，之后用钠盐溶液重新溶解直接完成了盐型的转换，从而可以随意的控制样品浓度，可以大大降低产品的冻干体积，避免了传统工艺中使用hplc柱浓缩或旋蒸浓缩来提高产品的浓度，同时由于减少了浓缩工序使得产品中的多聚物杂质得到很好的控制，大大提高了工艺流程的便利性，工艺易于控制，操作简单，便于大规模工业化生产。
137.并且，通过调节ph值析出多肽的方法可以有效除去多肽制备、纯化过程中引入的盐类杂质，也有利于终产品的浓度。
138.(4)本技术所提供的索玛鲁肽钠盐的制备方法，所用索玛鲁肽通过采用修饰后的gly进行首个氨基酸的加载，使用稳定的氨基类树脂为起始树脂，避免了使用wang resin容易出现缺失羧基端一个或者多个氨基酸的杂质问题和ctc resin不稳定导致的收率低问题，同时改善了树脂缩聚现象，提高了氨基酸的偶联效率，大大提高了粗肽的纯度和收率，从而提高了最终索玛鲁肽钠盐的纯度。
(
t
bu)-oh、fmoc-thr7(
t
bu)-oh、fmoc-thr5(
t
bu)-phe
6-oh、 fmoc-glu3(
t
bu)-gly
4-oh、boc-his1(trt)-aib
2-oh。得到的产物使用dcm洗涤2次，甲基叔丁基醚洗涤2次，抽干甲基叔丁基醚，真空干燥后得到全保护的索玛鲁肽肽树脂(2mmol，16.8g)。
152.1.2全保护索玛鲁肽肽树脂的裂解
153.称取全保护索玛鲁肽肽树脂(16.8g，2mmol)，加入裂解液(tfa∶ tis∶edt∶h2o体积比＝90∶2.5∶2.5∶2.5，100ml)，控制反应温度25℃，搅拌反应3h。过滤，滤饼树脂用20ml tfa洗涤。合并滤液加入10℃的甲基叔丁基醚(800ml)，搅拌沉降、离心，滤饼加入甲基叔丁基醚(500 ml)打浆、离心；滤饼用相同体积的甲基叔丁基醚重复打浆、离心。滤饼真空干燥，得到索玛鲁肽粗品(8.42g，hplc纯度74.1％)。
154.1.3粗肽纯化和冻干
155.1.3.1粗品溶解
156.8.42g索玛鲁肽粗品用4g/l乙酸铵溶解，0.45um膜过滤。
157.1.3.2纯化
158.采用反相高效制备柱进行粗品纯化，填料为kromasil c8，第一次纯化的流动相a为1％磷酸三乙胺水溶液(ph6.5)，流动相b为纯乙腈，样品纯度达到95％左右。第二次纯化的流动相a为0.5％醋酸/水，流动相b为纯乙腈，样品纯度达到99.5％以上。
159.1.3.3沉淀
160.将二次纯化的索玛鲁肽馏份加入不锈钢沉淀罐，降温至7℃，机械搅拌150转/min，将0.05mol/l氢氧化钾以400ml/min的流速加入沉淀罐，调节溶液ph至等电点，大量白色沉淀析出，离心，沉淀用纯化水洗涤3 次，得到索玛鲁肽湿品。
161.1.3.4换盐冻干
162.索玛鲁肽湿品和0.05mol/l碳酸钠水溶液混合，加入索玛鲁肽摩尔数 6.5倍的钠离子，冻干得到索玛鲁肽钠盐成品2.56g，总收率达到32％左右。
163.索玛鲁肽钠盐的纯度检测
164.经hplc检测，索玛鲁肽钠盐纯度达99.69％，单杂均小于0.10％。检测结果见表1和图1。
165.表1索玛鲁肽钠盐的hplc检测
166.[0167][0168]
索玛鲁肽钠盐的溶解性检测
[0169]
对按照实施例1的方法制备得到的3批索玛鲁肽钠盐进行溶解性检测，测试方法参考2020版中国药典范例，结果见表2。
[0170]
表2索玛鲁肽钠盐的溶解性检测
[0171][0172]
上述结果表明，所得的索玛鲁肽钠盐在水、乙醇和甲醇中的溶解性均十分良好，批间稳定性良好。
[0173]
索玛鲁肽钠盐的多聚物杂质含量检测
[0174]
对按照实施例1的方法制备得到的3批索玛鲁肽钠盐成品，采用通用的sec色谱柱进行多聚物杂质含量检测，同时采购了市售的索马鲁肽注射液进行质量对比，结果见表3。其中，对照品-1为市售索马鲁肽注射液(批号：jp50872)，对照品-2为市售索马鲁肽注射液(批号：jp54343)，均由诺和诺德公司生产。
[0175]
表3多聚物杂质含量检测结果
[0176]
名称多聚物含量/％自制第一批0.11自制第二批0.11自制第三批0.10对照品-10.29对照品-20.58
[0177] 上述结果表明，本发明专利的工艺稳定，索玛鲁肽钠盐中的多聚物杂质含量同市售索马鲁肽注射液相比杂质含量偏低且批次间差别较小，工艺稳定。
[0178]
索玛鲁肽钠盐的稳定性检测
[0179]
索玛鲁肽钠盐成品于2-8℃放置60天，分别在第0天、30天和60天检测样品的纯度和最大单杂含量，结果见表4。其中，醋酸盐对照品和盐酸盐对照品均为相同工艺的自制样品，即，在实施例1的步骤1.3.4中，将 0.05mol/l碳酸钠水溶液分别换成0.3mol/l的醋酸和0.05mol/l的盐酸，其余步骤与实施例1相同。
[0180]
表4索玛鲁肽钠盐的稳定性检测
[0181][0182]
上述结果表明，索玛鲁肽钠盐成品的纯度较高，放置60天产品纯度和最大单杂的含量也基本稳定不变，而醋酸盐/盐酸盐对照品的纯度随着时间的延长逐渐降低，最大单杂含量开始变高，证明索玛鲁肽钠盐成品的稳定性比其他盐类型更好。
[0183]
生物活性测试
[0184]
将按照实施例1的方法制备得到的3批索马鲁肽钠盐成品和对照品(索马鲁肽注射液，诺和诺德，批号：jp50872)通过camp-htrf assay进行体外生物活性检测(利用cisbio公司的camp-gs dynamic kit试剂盒通过glp1r/cre-luc/hek293细胞进行检测，检测方法按照说明书进行)，结果如图表5所示。
[0185]
表5索马鲁肽钠盐的体外生物活性检测
[0186][0187][0188]
上述结果表明，索马鲁肽钠盐成品的体外活性数据同对照品相比具有更优的表现，说明索马鲁肽钠盐具有更好的抗糖尿病的活性。
[0189]
以上所述，仅是本技术的几个实施例，并非对本技术做任何形式的限制，虽然本技术以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限制本技术，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本技术技术方案的范围内，利用上述揭示的技术内容做出些许的变动或修饰均等同于等效实施案例，均属于技术方案范围内。