激酶抑制剂的制作方法

1.本发明总体上涉及蛋白激酶抑制剂，特别是布鲁顿酪氨酸激酶(btk)抑制剂、包含它们的药物组合物、用于制备它们的方法以及此类抑制剂用于治疗或预防与激酶功能相关的疾病、障碍和病症的用途。


背景技术：

2.蛋白激酶是真核细胞中一大类细胞内和跨膜信号传导蛋白。这些酶负责将末端(γ)磷酸从atp转移到靶蛋白的特定氨基酸残基。靶蛋白中特定氨基酸残基的磷酸化可以调节它们的活性，从而导致细胞信号传导和代谢的显著变化。蛋白激酶存在于细胞膜、胞质溶胶和细胞器(诸如细胞核)中，并且负责介导多种细胞功能，包括代谢、细胞生长和分化、细胞信号传导、免疫应答调节和细胞死亡。丝氨酸激酶特异性地磷酸化靶蛋白中的丝氨酸或苏氨酸残基。类似地，酪氨酸激酶(包括酪氨酸受体激酶)磷酸化靶蛋白中的酪氨酸残基。酪氨酸激酶家族包括：tec、src、abl、jak、csk、fak、syk、fer、ack和受体酪氨酸激酶亚家族，这些亚家族包括erbb、fgfr、vegfr、ret和eph。受体酪氨酸激酶超家族的亚类i包括erbb受体并且包括四个成员：erbb1(也称为表皮生长因子受体(egfr))、erbb2、erbb3和erbb4。
3.激酶对与健康和疾病相关的关键生物过程发挥控制作用。此外，各种蛋白激酶的异常激活或过度表达与以良性和恶性增殖为特征的多种疾病和病症以及由免疫系统的不适当激活引起的疾病的机制有关。因此，针对所选择的激酶或激酶家族的抑制剂被认为可用于治疗癌症、血管疾病、自身免疫性疾病和炎性病症，包括但不限于：实体瘤、血液恶性肿瘤、血栓、关节炎、移植物抗宿主病、红斑狼疮、牛皮癣、结肠炎、回肠炎、多发性硬化、葡萄膜炎、冠状动脉血管病、系统性硬化、动脉粥样硬化、哮喘、移植排斥、过敏反应、局部缺血、皮肌炎、天疱疮等。
4.tec激酶是主要但非唯一地在造血来源的细胞中表达的非受体酪氨酸激酶家族。tec家族包括tec、布鲁顿酪氨酸激酶(btk)、诱导型t细胞激酶(itk)、静息淋巴细胞激酶(rlk/酪氨酸蛋白激酶txk)和骨髓表达激酶(bmx/etk)。
5.btk在b细胞受体信号传导以及b细胞发育和激活的调节中很重要。人类中编码btk的基因的突变导致x连锁无丙种球蛋白血症，其特征在于免疫功能降低，包括b细胞成熟受损、免疫球蛋白和外周b细胞水平降低和t细胞非依赖性免疫应答减弱。btk被src家族激酶激活并磷酸化plcγ，从而导致对b细胞功能和存活产生影响。另外，btk对于肥大细胞、巨噬细胞和中性粒细胞的细胞功能很重要，表明btk抑制在治疗由这些和相关细胞介导的疾病(包括炎症、骨骼疾病和过敏性疾病)方面是有效的。btk抑制对淋巴瘤细胞的存活也很重要，表明btk的抑制可用于治疗淋巴瘤和其他癌症。因此，btk和相关激酶的抑制剂作为抗炎剂和抗癌剂受到极大关注。btk对于血小板功能和血栓形成也很重要，表明btk选择性抑制剂也可用作抗血栓形成剂。此外，btk是炎性体激活所需的，并且btk的抑制可用于治疗炎性体相关病症，包括：中风、痛风、2型糖尿病、肥胖诱导的胰岛素抵抗、动脉粥样硬化和muckle-wells综合征。此外，btk在hiv感染的t细胞中表达，并且用btk抑制剂治疗使感染的
细胞对凋亡性死亡敏感并导致病毒产生减少。因此，btk抑制剂被认为可用于治疗hiv-aids和其他病毒感染。
6.此外，btk在神经功能中很重要。特异性靶向大脑和cns中的btk有可能显著推进神经系统疾病诸如ms和原发性cns淋巴瘤(pcnsl)的进行性和复发性形式的治疗。
7.pcnsl是一种罕见的脑肿瘤，在美国每年新发病例约1900例，占所有新诊断脑肿瘤的约3％。
8.pcnsl是高度侵袭性的，与cns以外的其他淋巴瘤不同，尽管在一线情况下治疗有所改善，但预后仍然较差。高剂量甲氨蝶呤仍然是治疗的支柱，并且与其他细胞毒性剂组合使用，并且最近还与利妥昔单抗组合使用。从最初的诊断来看，1990年至2000年间，5年生存率从19％提高到30％，但在老年人群(》70岁)中没有提高，因为这些患者中的20％或更多被认为不适合化疗。在～85％的患者中观察到肿瘤消退，而与在一线情况下的治疗方式无关，然而，这些患者中的约一半会在初始治疗后10-18个月内出现复发性疾病，并且大多数复发发生在诊断的前2年内。
9.因此，复发/难治性pcnsl(r/r pcnsl)患者的预后仍然较差，中位生存期为～2个月，无需进一步治疗。由于r/r pcnsl的治疗没有统一的护理标准，因此鼓励参与临床试验。迫切需要新的安全有效的治疗方法。
10.btk参与b细胞抗原受体(bcr)信号传导途径中的信号转导并整合bcr和toll样受体(tlr)信号传导。这些途径中的基因在弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)中经常发生突变，包括cd79b和骨髓分化初级应答88(myd88)。依鲁替尼是第一代不可逆的btk选择性抑制剂，已被批准用于慢性淋巴细胞性白血病/小细胞淋巴细胞性淋巴瘤(cll/sll)、先前治疗的套细胞淋巴瘤(mcl)和边缘区淋巴瘤(mzl)、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白以及先前治疗的慢性移植物抗宿主疾病。在临床研究中，将依鲁替尼的推荐剂量(在cll中为480mg/d或在mcl中为560mg/d)逐步升高至840mg，以在原发性cns淋巴瘤中实现充分的脑暴露。
11.pcnsl中的nf-κb途径的异常激活正在成为更靶向治疗的潜在机制。具体地，涉及card11以及myd88(toll样受体途径)的激活突变。注意到发生在38％(11/29)和50％(7/14)患者之间的myd88的265位亮氨酸到脯氨酸的激活交换是迄今在pcnsl中发现的最常见的突变。此外，cd79b的编码区(b细胞受体信号传导途径的组分)在20％的病例中似乎含有突变，表明b细胞受体和nf-κb途径的失调促成pcnsl的发病机制。这些数据表明，bcr途径突变和btk依赖性与pcnsl特别相关。
12.最近，几项临床研究报告了在pcnsl的治疗中显著的单一药剂临床活性，应答率为70-77％。然而，大多数患者在9个月时停止治疗。尽管据报道依鲁替尼治疗通常具有良好的耐受性和可管理的不良事件，但也有报道称有时会发生致命的真菌感染。值得注意的是，已使用超过560mg至840mg/天的递增剂量来实现较高的脑暴露，并且这些较高剂量可能与依鲁替尼激酶选择性特征介导的脱靶效应相关。最后，高剂量依鲁替尼与高剂量类固醇的组合可能有助于加剧增加的真菌感染。因此，仍然需要由于更大的脑渗透和具有更大激酶选择性的btk失活速率而具有改善的功效和安全性特征的btk抑制剂。
13.仍然需要总体上调节蛋白激酶的化合物，以及调节特定蛋白激酶诸如btk的化合物，以及调节特定蛋白激酶并选择性穿过血/脑屏障的化合物，以用于治疗将受益于这种调节和选择性的疾病、障碍和病症的相关组合物和方法。


技术实现要素：

14.在一个方面，提供了具有式(i)的结构的化合物：
[0015][0016]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中：
[0017]
x是cr1或n；
[0018]
y是cr2或n；
[0019]
r1是h、卤代或c
1-3
烷基；
[0020]
r2是h、卤代或c
1-3
烷基；
[0021]
z是键、c(r3r4)、c(r5r6)-c(r7r8)、c(r9r
10
)-n(r
11
)、n(r
11
)-c(r9r
10
)、o、s或si(r
12r13
)，
[0022]
r3和r4各自独立地是h、卤代或c
1-3
烷基，或者r3和r4与它们所连接的碳一起形成环a：
[0023][0024]
其中环a是任选取代的碳环或任选取代的杂环；
[0025]
r5、r6、r7、r8、r9和r
10
各自独立地是h、卤代或c
1-3
烷基；
[0026]r11
、r
12
和r
13
各自独立地是h或c
1-3
烷基；
[0027]
l是
[0028][0029]
环b是任选取代的碳环或任选取代的杂环；
[0030]
ra是h或c
1-3
烷基；
[0031]
r是c(o)r
14
；并且
[0032]r14
是被0至3个r'取代的c
2-6
烯基或被0至3个r'取代的c
2-6
炔基；
[0033]
r'在每次出现时独立地是卤代、-orb、-nrbrc或任选取代的碳环；并且
[0034]
rb和rc在每次出现时独立地是h、c
1-6
烷基或c
1-6
卤代烷基；
[0035]
条件是如果z是ch2或cf2，则x和y中的至少一者是n。
[0036]
在一个实施方案中，提供了一种药物组合物，该药物组合物包含具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，以及至少一种药学上可接受的赋形
剂。
[0037]
在一个实施方案中，提供了一种调节蛋白激酶的方法，该方法包括使蛋白激酶与有效量的具有式(i)、(i)、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物接触。在一个实施方案中，蛋白激酶是btk。
[0038]
在一个实施方案中，提供了一种用于治疗btk依赖性病症的方法，该方法包括向对其有需要的受试者施用有效量的具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物。
[0039]
在一个实施方案中，提供了具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物在制造药物中的用途。
具体实施方式
[0040]
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与要求保护的主题所属领域的技术人员通常理解的相同含义。应当理解，详细描述仅是示例性和说明性的，而不是对所要求保护的任何主题的限制。在本技术中，除非另外特别说明，否则单数的使用包括复数。必须注意的是，如在说明书中使用的，除非上下文另外清楚地指明，否则单数形式“一个”、“一种”和“该/所述”包括多个指代物。在本技术中，除非另有说明，否则“或”的使用是指“和/或”。此外，术语“包括”以及其他形式诸如“包含”、“含有”和“具有”的使用不是限制性的。
[0041]
尽管可以在单个实施方案的上下文中描述本发明的各种特征，但是也可以单独地或以任何合适的组合来提供这些特征。相反地，尽管为了清楚起见，本发明可以在单独的实施方案的上下文中进行描述，但是本发明也可以在单个实施方案中实施。
[0042]
说明书中对“一些实施方案”，“实施方案”，“一个实施方案”或“其他实施方案”的引用意味着结合这些实施方案描述的特定特征、结构或特性被包括在本发明的至少一些实施方案中，但不一定被包括在本发明的所有实施方案中。
[0043]
如本文所用，范围和量可表示为“约”特定值或范围。约还包括确切的量。因此，“约100μl”意指“约100μl”以及“100μl”。在一些实施方案中，约意指在该值的5％以内。因此，“约100μl”意指95μl-105μl。一般来讲，术语“约”包括预期在实验误差内的量。
[0044]
如本文所用，“烷基”意指直链或支链饱和烃基。“低级烷基”意指具有1至8个碳原子，在一些实施方案中1至6个碳原子，在一些实施方案中1至4个碳原子，以及在一些实施方案中1至2个碳原子的直链或支链烷基。直链低级烷基的示例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基。支链低级烷基的示例包括但不限于异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、新戊基、异戊基和2,2-二甲基丙基。
[0045]“烯基”包括如上定义的直链、支链和环状烷基，不同的是在两个碳原子之间存在至少一个双键。因此，烯基具有2至约20个碳原子，并且通常2至12个碳原子，或者在一些实施方案中，2至8个碳原子。示例包括但不限于-ch＝ch2、-ch＝ch(ch3)、-ch＝c(ch3)2、-c(ch3)＝ch2、-c(ch3)＝ch(ch3)、-c(ch2ch3)＝ch2、-ch＝chch2ch3、-ch＝ch(ch2)2ch3、-ch＝
ch(ch2)3ch3、-ch＝ch(ch2)4ch3、乙烯基、环己烯基、环戊烯基、环己二烯基、丁二烯基、戊二烯基和己二烯基等。
[0046]“炔基”包括直链和支链烷基，不同的是在两个碳原子之间存在至少一个三键。因此，炔基具有2至约20个碳原子，并且通常2至12个碳原子，或者在一些实施方案中，2至8个碳原子。示例包括但不限于-c≡ch、-c≡c(ch3)、-c≡c(ch2ch3)、-ch2c≡ch、-ch2c≡c(ch3)和-ch2c≡c(ch2ch3)等。
[0047]
如本文所用，“亚烷基”意指二价烷基。直链低级亚烷基的示例包括但不限于亚甲基(即，-ch
2-)、亚乙基(即，-ch2ch
2-)、亚丙基(即，-ch2ch2ch
2-)和亚丁基(即，-ch2ch2ch2ch
2-)。如本文所用，“杂亚烷基”是其中一个或多个碳原子被杂原子替代的亚烷基，该杂原子诸如但不限于n、o、s或p。
[0048]“烷氧基”是指通过氧原子连接的如上定义的烷基(即，-o-烷基)。低级烷氧基的示例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、异丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。
[0049]
术语“碳环的”和“碳环”表示其中环原子是碳的环结构。碳环可以是单环或多环。碳环包括饱和环和不饱和环。碳环包括环烷基和芳基。在一些实施方案中，碳环具有3至8个环成员，而在其他实施方案中，环碳原子的数量为4、5、6或7。除非有相反的特别说明，否则碳环可以被多达n个取代基取代，其中n是碳环的大小，例如被烷基、氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫基、烷氧基和卤素基团取代。
[0050]“环烷基”是形成环结构的烷基，其可以是取代的或未取代的。环烷基的示例包含但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。在一些实施方案中，环烷基具有3个到8个环成员，然而在其他实施方案中，环碳原子的数量在3个到5个、3个到6个或3个到7个的范围内。环烷基进一步包含如但不限于降冰片基、金刚烷基、冰片基、莰稀基、异莰稀基和蒈稀基的多环环烷基和如但不限于十氢萘酯等的稠环。环烷基还包括被如上定义的直链或支链烷基取代的环。代表性的取代的环烷基可以是单取代的或取代多于一次的，诸如但不限于2,2-、2,3-、2,4-、2,5-或2,6-二取代的环己基或单、二或三取代的降冰片基或环庚基，其可以被例如氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫基、烷氧基和卤素基团取代。
[0051]“芳基”是不含杂原子的环状芳族烃。因此，芳基包括但不限于苯基、甘菊环基、庚搭烯基、联苯基、引达省基、芴基、菲基、三亚苯基、芘基、并四苯基、基、亚联苯基、蒽基和萘基。在一些实施方案中，芳基在基团的环部分中含有6个到14个碳。术语“芳基(aryl)”和“芳基(aryl groups)”包含稠环，其中至少一个环但不一定所有环是芳香族的，如稠合的芳香族-脂肪族环系统(例如，茚满基、四氢萘基等)。
[0052]“碳环烷基”是指一个或多个氢原子被碳环替代的如上定义的烷基。碳环烷基的示例包括但不限于苄基等。
[0053]
如本文所用，“杂环”或“杂环基”包括含有3个或更多个环成员的芳族和非芳族环化合物(杂环)，其中一个或多个是杂原子，诸如但不限于n、o、s或p。本文所定义的杂环基团可以是杂芳基或包含至少一个环杂原子的部分或完全饱和的环状基团。在一些实施方案中，杂环基团包括3至20个环成员，而其他这样的基团具有3至15个环成员。至少一个环含有杂原子，但多环体系中的每个环不需要含有杂原子。例如，二氧戊环基环和苯并二氧戊环基环体系(亚甲基二氧苯基环体系)均是本文含义内的杂环基团。被指定为c2杂环的杂环基团可以是具有两个碳原子和三个杂原子的5元环、具有两个碳原子和四个杂原子的6元环等。
同样，c4杂环可以是具有一个杂原子的5元环、具有两个杂原子的6元环等。碳原子数加上杂原子数的总和等于环原子的总数。饱和杂环是指不含不饱和碳原子的杂环。
[0054]“杂芳基”是含有5个或更多个环成员的芳族环化合物，其中一个或多个是杂原子，诸如但不限于n、o和s。被指定为c2杂芳基的杂芳基可以是具有两个碳原子和三个杂原子的5元环、具有两个碳原子和四个杂原子的6元环等。同样，c4杂芳基可以是具有一个杂原子的5元环、具有两个杂原子的6元环等。碳原子数加上杂原子数的总和等于环原子的总数。杂芳基包括但不限于诸如吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、吡啶基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、氮杂吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、氮杂苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并吡啶基、异噁唑并吡啶基、噻萘基、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、喹喔啉基和喹唑啉基的基团。术语“杂芳基”包括稠环化合物，诸如其中至少一个环但不一定所有环是芳族的，包括四氢喹啉基、四氢异喹啉基、吲哚基和2,3-二氢吲哚基。
[0055]“杂环烷基”是指一个或多个氢原子被杂环替代的如上定义的烷基。杂环烷基的示例包括但不限于吗啉代乙基等。
[0056]“卤代”或“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
[0057]“卤代烷基”是指一个或多个氢原子被卤素替代的如上定义的烷基。低级卤代烷基的示例包括但不限于-cf3、-ch2cf3等。
[0058]“卤代烷氧基”是指一个或多个氢原子被卤素替代的如上定义的烷氧基。低级卤代烷氧基的示例包括但不限于-ocf3、-och2cf3等。
[0059]“羟基烷基”是指一个或多个氢原子被-oh替代的如上定义的烷基。低级羟烷基的示例包括但不限于-ch2oh、-ch2ch2oh等。
[0060]
如本文所用，术语“任选取代的”是指具有0、1或更多个取代基诸如0-25、0-20、0-10或0至5个取代基的基团(例如，烷基、碳环或杂环)。取代基包括但不限于
–
or
aa
、-nr
aarbb
、-s(o)2r
aa
或-s(o)2or
aa
、卤素、氰基、氧代(＝o)、烷基、卤代烷基、烷氧基、碳环、杂环、碳环烷基或杂环烷基，其中r
aa
和r
bb
各自独立地是h、烷基、卤代烷基、碳环或杂环，或者r
aa
和r
bb
与它们所连接的原子一起形成3-8元碳环或杂环。
[0061]“异构体”在本文中用于涵盖结构的所有手性形式、非对映异构体形式或外消旋形式，除非明确指出特定立体化学或异构形式。此类化合物可以在任何或所有不对称原子处以任何富集程度富集或解析光学异构体，如由图式可显而易见。外消旋混合物和非对映异构体混合物以及单独的光学异构体均可以被合成为基本上不含其对映异构体或非对映异构体配偶体，并且这些均在本公开的某些实施方案的范围内。由手性中心的存在产生的异构体包括一对称为“对映异构体”的不可重叠的异构体。纯化合物的单种对映异构体是旋光性的(即，它们可以旋转平面偏振光的平面并且指定为r或s)。
[0062]“分离的光学异构体”是指已经从相同式的相应光学异构体基本上纯化的化合物。例如，分离的异构体可以是至少约80％、至少80％或至少85％纯的。在其他实施方案中，分离的异构体是至少90重量％纯、至少98重量％纯或至少99重量％纯的。
[0063]“基本上对映异构体纯或非对映异构体纯”是指一种对映异构体相对于另一种对映异构体或非对映异构体的对映异构体或非对映异构体富集水平为至少约80％，更具体地超过80％、85％、90％、95％、98％、99％、99.5％或99.9％。
[0064]
术语“外消旋体”和“外消旋混合物”是指两种对映异构体的等量混合物。外消旋体被标记为“(
±
)”，因为它不是旋光性的(即，不会沿任一方向旋转平面偏振光，因为它的组成对映异构体彼此抵消)。
[0065]“水合物”是与水分子结合存在的化合物。结合可以包含化学计量量的水，如一水合物或二水合物，或者可以包含随机量的水。如本文所用的术语“水合物”是指固体形式；换句话说，水溶液中的化合物尽管可以是水合的，但不是如本文所用的术语的水合物。
[0066]“溶剂化物”类似于水合物，不同之处在于存在除水之外的溶剂。例如，甲醇或乙醇可以形成“醇化物”，其同样可以是化学计量的或非化学计量的。如本文所用的术语“溶剂化物”是指固体形式；换句话说，溶剂溶液中的化合物尽管可以是溶剂化的，但不是如本文所用的术语的溶剂化物。
[0067]“同位素”是指质子数相同但中子数不同的原子，并且式(i)的化合物的同位素包括其中一个或多个原子被该原子的同位素替代的任何这样的化合物。例如，碳12是最常见的碳形式，具有六个质子和六个中子，而碳13具有六个质子和七个中子，并且碳14具有六个质子和八个中子。氢具有两种稳定同位素，氘(一个质子和一个中子)和氚(一个质子和两个中子)。虽然氟具有几种同位素，但氟19的寿命最长。因此，具有式(i)的结构的化合物的同位素包括但不限于式(i)的化合物，其中一个或多个碳12原子被碳13和/或碳14原子替代，其中一个或多个氢原子被氘和/或氚替代，和/或其中一个或多个氟原子被氟19替代。
[0068]“盐”通常是指与抗衡离子结合的呈离子形式的有机化合物，如羧酸或胺。例如，在阴离子形式的酸与阳离子之间形成的盐被称为“酸加成盐”。相反地，在阳离子形式的碱与阴离子之间形成的盐被称为“碱加成盐”。
[0069]
术语“药学上可接受的”是指已经批准用于人类消费并且通常是无毒的药剂。例如，术语“药学上可接受的盐”是指无毒的无机酸或有机酸和/或碱加成盐(参见例如lit等人，salt selection for basic drugs,int.j.pharm.,33,201-217,1986)(以引用方式并入本文)。
[0070]
本公开的化合物的药学上可接受的碱加成盐包括例如金属盐，包括碱金属盐、碱土金属盐和过渡金属盐，例如钙盐、镁盐、钾盐、钠盐和锌盐。药学上可接受的碱加成盐还包括由碱性胺例如n,n'-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(n-甲基葡糖胺)和普鲁卡因制备的有机盐。
[0071]
药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸或有机酸制备。无机酸的示例包含盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸。合适的有机酸可以选自脂族酸、环脂族酸、芳族酸、芳族脂族酸、杂环酸、羧酸和磺酸类的有机酸，其示例包括甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、葡糖醛酸、马来酸、富马酸、丙酮酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、苯乙酸、扁桃酸、马尿酸、丙二酸、草酸、双羟萘酸(帕莫酸)、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、泛酸、三氟甲磺酸、2-羟基乙磺酸、对甲苯磺酸、磺胺酸、环己基氨基磺酸、硬脂酸、海藻酸、β-羟基丁酸、水杨酸、-半乳糖二酸和半乳糖醛酸。
[0072]
尽管药学上不可接受的盐通常不能用作药物，但此类盐可以用作例如本文所述的化合物的合成中的中间体，例如在其通过重结晶的纯化中。
[0073]
在某些实施方案中，本公开提供了一种药物组合物，该药物组合物包含如本文所
述的化合物或其药学上可接受的异构体、外消旋体、水合物、溶剂化物、同位素或盐，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。例如，活性化合物通常与载体混合或由载体稀释或封装在载体中，所述载体可以呈安瓿、胶囊、小药囊、纸或其他容器的形式。当活性化合物与载体混合时，或当载体用作稀释剂时，所述载体可以是充当活性化合物的媒剂、赋形剂或介质的固体、半固体或液体材料。活性化合物可以吸附在粒状固体载体上，例如含在小药囊中。合适载体的一些示例是水、盐溶液、醇、聚乙二醇、聚羟基乙氧基化蓖麻油、花生油、橄榄油、明胶、乳糖、白土、蔗糖、糊精、碳酸镁、糖、环糊精、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石粉、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸或纤维素的低级烷基醚、硅酸、脂肪酸、脂肪酸胺、脂肪酸单甘油酯和甘油二酯、季戊四醇脂肪酸酯、聚氧乙烯、羟甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。类似地，载体或稀释剂可以包含如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯等本领域已知的任何缓释材料，其单独或与蜡混合。
[0074]
如本文所用，术语“药物组合物”是指这样的组合物，含有本文所述的一种或多种化合物或其药学上可接受的异构体、外消旋体、水合物、溶剂化物、同系物或盐，与药学上可接受的载体一起配制，还可以包含其他添加剂，并经政府监管机构批准制造或销售作为治疗哺乳动物疾病的治疗方案的一部分。药物组合物可以配制成例如以单位剂型(例如，片剂、胶囊、囊片、软胶囊或糖浆)口服施用；局部施用(例如，作为霜膏、凝胶、洗剂或软膏)；静脉内施用(例如，作为不含颗粒栓子的无菌溶液和在适于静脉内使用的溶剂体系中)；或以本文所述的任何其他制剂形式。用于选择和制备合适制剂的常规程序和成分描述于例如remington:the science and practice of pharmacy，第21版，gennaro编辑，lippencott williams&wilkins(2005)和出版于2013年的the united states pharmacopeia:the national formulary(usp 36nf31)中。
[0075]
在其他实施方案中，提供了制备具有本文所述的化合物的组合物的方法，这些方法包括将本公开的化合物与药学上可接受的载体或稀释剂一起配制。在一些实施方案中，药学上可接受的载体或稀释剂适于口服施用。在一些此类实施方案中，方法可以进一步包含将组合物调配成片剂或胶囊的步骤。在其他实施方案中，药学上可接受的载体或稀释剂适于肠胃外施用。在一些此类实施方案中，方法进一步包含冻干组合物以形成冻干制剂的步骤。
[0076]
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”是指除所公开的化合物或其药学上可接受的异构体、外消旋体、水合物、溶剂化物、同系物或盐(例如，能够悬浮或溶解活性化合物的载体)之外的并且具有对患者无毒和非炎性的性质的任何成分。赋形剂可以包括例如：抗粘剂、抗氧化剂、粘合剂、包衣、压缩助剂、崩解剂、染料(着色剂)、润肤剂、乳化剂、填充剂(稀释剂)、成膜剂或包衣、调味剂、芳香剂、助流剂(流动增强剂)、润滑剂、防腐剂、印刷油墨、吸附剂、悬浮剂或分散剂、甜味剂或水合水。示例性赋形剂包含但不限于：丁基化羟基甲苯(bht)、碳酸钙、磷酸钙(二元)、硬脂酸钙、交联羧甲基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、交聚维酮、半胱氨酸、乙基纤维素、明胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁、麦芽糖醇、甘露醇、甲硫氨酸、甲基纤维素、对羟基苯甲酸甲酯、微晶纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮、预胶化淀粉、对羟基苯甲酸丙酯、棕榈酸视黄酯、虫胶、二氧化硅、羧甲基纤维素钠、柠檬酸钠、羧基乙酸淀粉钠、山梨糖醇、淀粉(玉米)、硬脂酸、硬脂酸、蔗糖、滑石粉、二氧化钛、维生素a、维生素e、维生素c和木糖醇。
[0077]
调配物可以与不会与活性化合物发生有害反应的辅助试剂混合。此类添加剂可以包含润湿剂、乳化剂和悬浮剂、影响渗透压的盐、缓冲剂和/或着色物质、防腐剂、甜味剂或调味剂。如果期望的话，也可以对组合物进行灭菌。
[0078]
施用途径可以是将本公开的活性化合物有效转运到适当的或期望的作用部位的任何途径，诸如口服、鼻、肺、颊、皮下、皮内、透皮或肠胃外，例如直肠、贮库、皮下、静脉内、尿道内、肌内、鼻内、眼用溶液或软膏，优选口服途径。
[0079]
剂型可以每天施用一次，或每天施用多于一次，如每天两次或三次。另选地，如果处方医师认为合适的话，则剂型的施用频率可以低于每天，诸如每隔一天或每周。给药方案包括例如剂量滴定到对于待治疗的适应症必需或有用的程度，从而使患者的身体适应治疗和/或最小化或避免与治疗相关的不希望的副作用。其他剂型包含延迟或控释形式。合适的剂量方案和/或形式包括例如在physicians’desk reference的最新版本中阐述的那些，该文献以引用方式并入本文。
[0080]
如本文所用，术语“施用”是指通过任何可接受的方式或途径(包括(例如)通过口服、肠胃外(例如静脉内)或局部施用)向受试者提供化合物、包含该化合物的药物组合物。
[0081]
如本文所用，术语“治疗”是指改善疾病或病理状况的体征或症状的干预。如本文所用，关于疾病、病理状况或症状的术语“治疗”也是指治疗的任何可观察到的有益效果。有益效果可以通过例如以下来证明：易感受试者中疾病的临床症状的延迟发作、疾病的一些或所有临床症状的严重程度降低、疾病的进展减慢、疾病复发的次数降低、受试者的整体健康或福祉的改善或者通过本领域众所周知的对特定疾病具有特异性的其他参数来证明。预防性治疗是对未表现出疾病体征或仅表现出早期体征的受试者施用的治疗，目的是降低发生病理的风险。治疗性治疗是在疾病的体征和症状出现后给予受试者的治疗。
[0082]
如本文所用，术语“受试者”是指动物(例如，哺乳动物，诸如人)。待根据本文所述的方法治疗的受试者可以是已被诊断患有增殖性疾病或病症诸如癌症或肿瘤学适应症、自身免疫性疾病或病症、炎性疾病或病症、或血栓栓塞性疾病或病症的受试者，或处于发展该病症的风险中的受试者。在一个实施方案中，自身免疫性疾病是多发性硬化、类风湿性关节炎、牛皮癣、干燥综合征或系统性红斑狼疮。在另一个实施方案中，炎性疾病是荨麻疹。在另一个实施方案中，肿瘤学适应症是原发性cns淋巴瘤。诊断可以通过本领域已知的任何方法或技术进行。本领域技术人员将理解，根据本公开内容要治疗的受试者可以已经接受标准测试，或者可以在未经检查的情况下被鉴定为由于存在一种或多种与疾病或病状相关联的风险因素而有风险。
[0083]
如本文所用，术语“有效量”是指足以在用药剂治疗的受试者中实现期望作用的指定药剂的量。理想地，药剂的有效量是足以抑制或治疗疾病而不在受试者中引起显著毒性的量。药剂的有效量将取决于被治疗的受试者、病痛的严重程度和药物组合物的施用方式。根据本公开，本领域技术人员将理解确定足以在受试者中实现期望效果的所公开的化合物的有效量的方法。
[0084]
如本文所用，术语“调节”是指提高或降低一种或多种蛋白激酶的活性的能力。因此，本发明的化合物可用于通过使蛋白激酶与本文所述的任何一种或多种化合物或组合物接触来调节蛋白激酶的方法中。在一些实施方案中，化合物可以充当一种或多种蛋白激酶的抑制剂。在一些实施方案中，化合物可用于刺激一种或多种蛋白激酶的活性。在其他实施
方案中，本发明的化合物可用于通过施用调节量的如本文所述的化合物来调节需要调节受体的个体中的蛋白激酶的活性。
[0085]
如本文所用，术语“btk介导的”或“btk调节的”或“btk依赖性”疾病或病症意指已知btk或其突变体在其中起作用的任何疾病或其他有害病症。因此，本技术的另一个实施方案涉及治疗已知btk或其突变体在其中起作用的一种或多种疾病或减轻其严重程度。具体而言，本技术涉及一种治疗疾病或病症或减轻其严重程度的方法，该疾病或病症选自增殖性疾病或病症，诸如癌症或肿瘤学适应症、自身免疫性疾病或病症、炎性疾病或病症、或血栓栓塞性疾病或病症，其中所述方法包括向有需要的患者施用式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素、或根据本技术的组合物。在一个实施方案中，自身免疫性疾病或病症是多发性硬化、类风湿性关节炎、牛皮癣、干燥综合征或系统性红斑狼疮。在另一个实施方案中，炎性疾病或病症是荨麻疹。在另一个实施方案中，癌症或肿瘤学适应症是原发性cns淋巴瘤。
[0086]
化合物
[0087]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)的结构的化合物：
[0088][0089]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中：
[0090]
x是cr1或n；
[0091]
y是cr2或n；
[0092]
r1是h、卤代或c
1-3
烷基；
[0093]
r2是h、卤代或c
1-3
烷基；
[0094]
z是键、c(r3r4)、c(r5r6)-c(r7r8)、c(r9r
10
)-n(r
11
)、n(r
11
)-c(r9r
10
)、o、s、si(r
12r13
)，
[0095]
r3和r4各自独立地是h、卤代或c
1-3
烷基，或者r3和r4与它们所连接的碳一起形成环a：
[0096][0097]
其中环a是任选取代的碳环或任选取代的杂环；
[0098]
r5、r6、r7、r8、r9和r
10
各自独立地是h、卤代或c
1-3
烷基；
[0099]r11
、r
12
和r
13
各自独立地是h或c
1-3
烷基；
[0100]
l是
[0101][0102]
环b是任选取代的碳环或任选取代的杂环；
[0103]
ra是h或c
1-3
烷基；
[0104]
r是c(o)r
14
；并且
[0105]r14
是被0至3个r'取代的c
2-6
烯基或被0至3个r'取代的c
2-6
炔基；
[0106]
r'在每次出现时独立地是卤代、-orb、-nrbrc或任选取代的碳环；并且
[0107]
rb和rc在每次出现时独立地是h、c
1-6
烷基或c
1-6
卤代烷基；
[0108]
条件是如果z是ch2或cf2，则x和y中的至少一者是n。
[0109]
在一些实施方案中，x是ch。在一些实施方案中，x是ch并且y是ch。在一些实施方案中，x是ch并且y是n。在一些实施方案中，x是ch并且y是cf。在一些实施方案中，x是ch并且y是c(ch3)。在一些实施方案中，x是n。在一些实施方案中，x是n并且y是ch。在一些实施方案中，x是n并且y是n。在一些实施方案中，x是n并且y是cf。在一些实施方案中，x是n并且y是c(ch3)。
[0110]
在一些实施方案中，y是ch。在一些实施方案中，y是n。在一些实施方案中，y是cf。在一些实施方案中，y是c(ch3)。
[0111]
在一些实施方案中，z是键。在一些实施方案中，z是ch2或cf2。在一些实施方案中，z是ch2或ch
2-ch2。在一些实施方案中，z是ch2。在一些实施方案中，z是cf2。在一些实施方案中，z是ch
2-ch2。在一些实施方案中，z是o、s或si(ch3)2。在一些实施方案中，z是o。在一些实施方案中，z是s。在一些实施方案中，z是si(ch3)2。在一些实施方案中，z是ch
2-n(ch3)。
[0112]
在一些实施方案中，z是c(r3r4)并且r3和r4各自独立地是h。在一个实施方案中，提供了一种具有式(i-a)的结构的化合物：
[0113][0114]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中x、y、l和r如式(i)所述。
[0115]
在一些实施方案中，z是ch
2-ch2。在一个实施方案中，提供了一种具有式(i-b)的结构的化合物：
[0116][0117]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中x、y、l和r如式(i)所述。
[0118]
在一些实施方案中，z是c(r3r4)。在一个实施方案中，r3是h。在另一个实施方案中，r4是h。在一个实施方案中，r3是卤代。在另一个实施方案中，r3是f或cl。在另一个实施方案中，r4是卤代。在另一个实施方案中，r4是f或cl。在一个实施方案中，r3是c
1-3
烷基。在一个实施方案中，r3是-ch3。在另一个实施方案中，r4是c
1-3
烷基。在另一个实施方案中，r4是-ch3。
[0119]
在一个实施方案中，r3和r4各自独立地是卤代。在另一个实施方案中，r3和r4各自独立地是f。在一个实施方案中，r3和r4各自独立地是c
1-3
烷基。在另一个实施方案中，r3和r4各自独立地是-ch3。
[0120]
在另一个实施方案中，r3和r4与它们所连接的碳一起形成环a。在一个实施方案中，提供了一种具有式(i-c)的结构的化合物：
[0121][0122]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中a、x、y、l和r如式(i)所述。
[0123]
在一些实施方案中，提供了一种具有式(i-d)的结构的化合物：
[0124][0125]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中：
[0126]
z是键、o、s、si(ch3)2或ch2n(ch3)；并且
[0127]
x、y、l和r如式(i)所述。
[0128]
在一些实施方案中，提供具有式(i-a-iii-a)、式(i-a-iii-b)或式(i-a-iv)的结构的化合物：
[0129][0130]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l和r如式(i)所述。
[0131]
在一些实施方案中，提供了具有式(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)或(i-b-iv)的结构的化合物：
[0132][0133]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l和r如式(i)所述。
[0134]
在一些实施方案中，提供了具有式(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)或(i-c-iv)的结构的化合物：
[0135][0136]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中a、l和r如式(i)所述。
[0137]
在一些实施方案中，提供了具有式(i)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)或(i-c-iv)的结构的化合物，其中a是任选地含有1或2个选自o、s和n的杂原子代替环碳原子的任选取代的3元、4元、5元或6元碳环。在一些实施方案中，a是取代的3元、4元、5元或6元环烷基环。在一些实施方案中，a是未取代的3元、4元、5元或6元环烷基环。
[0138]
在一些实施方案中，a是
[0139][0140]
在一些实施方案中，提供了具有式(i)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)或(i-c-iv)的结构的化合物，其中a含有1个选自o、s和n的杂原子。在一些实施方案中，a含有1个o原子。在一些实施方案中，a含有1个s原子。在一些实施方案中，a含有1个n原子。在一些实施方案中，a是含有1个选自o、s和n的杂原子的5元环。在一些实施方案中，a是取代的。在一些实施方案中，a是未取代的。在一些实施方案中，a是含有1个选自o、s和n的杂原子的6元环。在一些实施方案中，a是取代的。在一些实施方案中，a是未取代的。在一些实施方案中，a含有2个选自o、s和n的杂原子。在一些实施方案中，两个杂原子是相同的。在一些实施方案中，两个杂原子是不同的。在一些实施方案中，a含有2个n原子。在一些实施方案中，a含有2个o原子。在一些实施方案中，a含有1个n原子和1个o原子。在一些实施方案中，a是含有2个选自o、s和n的杂原子的5元环。在一些实施方案中，a是取代的。在一些实施方案中，a是未取代的。在一些实施方案中，a是含有2个选自o、s和n的杂原子的6元环。在一些实施方案中，a是取代的。在一些实施方案中，a是未取代的。在一些实施方案中，a是含有1或2个n原子的5元环。在一些实施方案中，a是含有1或2个n原子的6元环。在一些实施方案中，a
是含有1或2个o原子的5元环。在一些实施方案中，a是含有1或2个o原子的6元环。在一些实施方案中，a是含有1个n和1个o原子的5元环。在一些实施方案中，a是含有1个n和1个o原子的6元环。
[0141]
在一些实施方案中，提供了具有式(i)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)或(i-c-iv)的结构的化合物，其中a被0至3个独立地选自卤代、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、氧代或nh2的取代基取代。
[0142]
在一些实施方案中，提供了具有式(i)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)或(i-c-iv)的结构的化合物，其中a是
[0143][0144]
在一些实施方案中，提供了具有式(i)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)或(i-c-iv)的结构的化合物，其中a是
[0145][0146]
在一些实施方案中，提供了具有式(i)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)或(i-c-iv)的结构的化合物，其中a是
[0147][0148]
在一些实施方案中，提供了具有式(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)或(i-d-iv)的结构的化合物：
[0149][0150]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中z、l和r如式(i-d)所述。
[0151]
在一些实施方案中，提供了具有式(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)或(i-d-viii)的结构的化合物：
[0152][0153]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l和r如式(i)所述。
[0154]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中环b任选地被0至5个r
15
取代，其中r
15
在每次出现时独立地是-oh、-cn、卤代、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基或c
1-6
卤代烷氧基。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是-oh。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是卤代。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是f。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是cl。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是c
1-3
烷基。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是-ch3。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是c
1-3
卤代烷基。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是-cf3。
[0155]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中环b是任选取代的碳环。在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中环b是任选取代的芳族碳环。在另一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是：
[0156][0157]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是
[0158][0159]
在另一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中环b是任选取代的非芳族碳环。在另一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是
[0160][0161]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是
[0162][0163]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是
[0164][0165]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是
[0166][0167]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中环b是任选取代的杂环。在另一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是
[0168][0169]
在另一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是
[0170][0171]
在另一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是
[0172][0173]
在另一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l是
i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中r是：
[0182][0183]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中r
14
是被0至3个r'取代的c
2-6
炔基。在一个实施方案中，提供了一种式(i)的化合物，其中r
14
是被0个r'取代的c
2-6
炔基。
[0184]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中r
14
是被1-3个r'取代的c
2-6
炔基。在一个实施方案中，至少一个r'是卤代。在一个实施方案中，至少一个r'是-orb。在一个实施方案中，至少一个r'是-oh。在另一个实施方案中，至少一个r'是-nrbrc。在另一个实施方案中，至少r'是-nh2或-n(ch3)2。在另一个实施方案中，至少一个r'是碳环。在另一个实施方案中，至少一个r'是环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
[0185]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中r是：
[0186][0187]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋
体或同位素，其中r是：
[0188][0189]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i)、(i-a)、(i-a-iii-a)、(i-a-iii-b)、(i-a-iv)、(i-b)、(i-b-i)、(i-b-ii)、(i-b-iii-a)、(i-b-iii-b)、(i-b-iv)、(i-c)、(i-c-i)、(i-c-ii)、(i-c-iii-a)、(i-c-iii-b)、(i-c-iv)、(i-d)、(i-d-i)、(i-d-ii)、(i-d-iii-a)、(i-d-iii-b)、(i-d-iv)、(i-d-v)、(i-d-vi)、(i-d-vii)、(i-d-viii)或(i-d-ix)中任一者的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中r是：
[0190][0191]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(i')的结构的化合物：
[0192][0193]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中：
[0194]
x是ch或n；
[0195]
y是ch、n、cf或c(ch3)；
[0196]
条件是x和y不能都是n，
[0197]
z是键、ch2、cf2、ch
2-ch2、o、s、si(ch3)2、-ch
2-n(ch3)-、-n(ch3)-ch
2-或
[0198]
其中a是任选地含有1或2个选自o、s和n的杂原子代替1或2个环碳原子的任选取代的3元、4元、5元或6元碳环，
[0199]
条件是如果z是ch2，则x和y中的至少一者是n；
[0200]
l是
[0201][0202]
r是
[0203][0204]
在一些实施方案中，x是ch。在一些实施方案中，x是ch并且y是ch。在一些实施方案中，x是ch并且y是n。在一些实施方案中，x是ch并且y是cf。在一些实施方案中，x是ch并且y是c(ch3)。在一些实施方案中，x是n。在一些实施方案中，x是n并且y是ch。在一些实施方案中，x是n并且y是n。在一些实施方案中，x是n并且y是cf。在一些实施方案中，x是n并且y是c(ch3)。
[0205]
在一些实施方案中，y是ch。在一些实施方案中，y是n。在一些实施方案中，y是cf。在一些实施方案中，y是c(ch3)。
[0206]
在一些实施方案中，z是键。在一些实施方案中，z是ch2或cf2。在一些实施方案中，z是ch2或ch
2-ch2。在一些实施方案中，z是ch2。在一些实施方案中，z是cf2。在一些实施方案中，z是ch
2-ch2。在一些实施方案中，z是o、s或si(ch3)2。在一些实施方案中，z是o。在一些实施方案中，z是s。在一些实施方案中，z是si(ch3)2。在一些实施方案中，z是ch
2-n(ch3)。在一些实施方案中，z是
[0207][0208]
其中a是任选地含有1或2个选自o、s和n的杂原子代替环碳原子的任选取代的3元、4元、5元或6元碳环。在一些实施方案中，a是取代的3元、4元、5元或6元环烷基环。在一些实施方案中，a是未取代的3元、4元、5元或6元环烷基环。在一些实施方案中，a是
[0209][0210]
在一些实施方案中，a含有1个选自o、s和n的杂原子。在一些实施方案中，a含有1个o原子。在一些实施方案中，a含有1个s原子。在一些实施方案中，a含有1个n原子。在一些实施方案中，a是含有1个选自o、s和n的杂原子的5元环。在一些实施方案中，a是取代的。在一些实施方案中，a是未取代的。在一些实施方案中，a是含有1个选自o、s和n的杂原子的6元环。在一些实施方案中，a是取代的。在一些实施方案中，a是未取代的。在一些实施方案中，a含有2个选自o、s和n的杂原子。在一些实施方案中，两个杂原子是相同的。在一些实施方案中，两个杂原子是不同的。在一些实施方案中，a含有2个n原子。在一些实施方案中，a含有2个o原子。在一些实施方案中，a含有1个n原子和1个o原子。在一些实施方案中，a是含有2个选自o、s和n的杂原子的5元环。在一些实施方案中，a是取代的。在一些实施方案中，a是未取代的。在一些实施方案中，a是含有2个选自o、s和n的杂原子的6元环。在一些实施方案中，a是取代的。在一些实施方案中，a是未取代的。在一些实施方案中，a是含有1或2个n原子的5元环。在一些实施方案中，a是含有1或2个n原子的6元环。在一些实施方案中，a是含有1或2个o原子的5元环。在一些实施方案中，a是含有1或2个o原子的6元环。在一些实施方案中，a是含有1个n和1个o原子的5元环。在一些实施方案中，a是含有1个n和1个o原子的6元环。
[0211]
在一些实施方案中，a是
[0212][0213]
在一些实施方案中，a是
[0214][0215]
在一些实施方案中，a是
[0216][0217]
在一些实施方案中，l是
[0218][0219]
在一些实施方案中，l是
[0220][0221]
在一些实施方案中，l是
[0222][0223]
在一些实施方案中，l是
[0224][0225]
在一些实施方案中，l是
[0226][0227]
在一些实施方案中，r是
[0228][0229]
在一些实施方案中，r是
[0230][0231]
在一些实施方案中，r是
[0232][0233]
在一个实施方案中，提供了一种具有式(ii)的结构的化合物：
[0234][0235]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中：
[0236]
r2是h或c
1-3
烷基；
[0237]
r3和r4各自独立地是h、卤代或c
1-3
烷基；
[0238]
l是
[0239][0240]
环b是任选取代的非芳族碳环或任选取代的杂环；
[0241]
ra是h或c
1-3
烷基；
[0242]
r是c(o)r
14
；并且
[0243]r14
是被0至3个r'取代的c
2-6
烯基或被0至3个r'取代的c
2-6
炔基；
[0244]
r'在每次出现时独立地是卤代、-orb、-nrbrc或任选取代的碳环；并且
[0245]
rb和rc在每次出现时独立地是h、c
1-6
烷基或c
1-6
卤代烷基。
[0246]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r2是h。在一个实施方案中，提供了一种具有式(ii-a)的结构的化合物：
[0247][0248]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l、r、r3和r4如式(ii)所述。
[0249]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r2是c
1-3
烷基。在一个实施方案中，r2是-ch3。
[0250]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r3是h。在另一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r3是卤代。在一个实施方案中，r3是f。在另一个实施方案中，r3是cl。在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r3是c
1-3
烷基。在一个实施方案中，r3是-ch3。
[0251]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r4是h。在另一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r4是卤代。在一个实施方案中，r4是f。在另一个实施方
案中，r4是cl。在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r4是c
1-3
烷基。在一个实施方案中，r4是-ch3。
[0252]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r3是h并且r4是h。在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r3是-ch3并且r4是-ch3。在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r3是f并且r4是f。
[0253]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r2是h，r3是h，并且r4是h。在一个实施方案中，提供了一种具有式(ii-a-i)的结构的化合物：
[0254][0255]
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，其中l和r如式(ii)所述。
[0256]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r2是h，r3是-ch3，并且r4是-ch3。在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r2是h，r3是f，并且r4是f。
[0257]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r2是-ch3，r3是h，并且r4是h。在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r2是-ch3，r3是-ch3，并且r4是-ch3。在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物，其中r2是-ch3，r3是f，并且r4是f。
[0258]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中环b任选地被0至5个r
15
取代，其中r
15
在每次出现时独立地是-oh、-cn、卤代、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基或c
1-6
卤代烷氧基。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是-oh。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是卤代。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是f。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是cl。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是c
1-3
烷基。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是-ch3。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是c
1-3
卤代烷基。在一个实施方案中，r
15
在至少一次出现时是-cf3。
[0259]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中环b是任选取代的非芳族碳环。在另一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中l是
[0260][0261]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中l是
[0262][0263]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中l是
[0264][0265]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中l是
[0266][0267]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中环b是任选取代的杂环。在另一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中l是
[0268][0269]
在另一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中l是
[0270][0271]
在另一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中l是
[0272][0273]
在另一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中l是
[0274][0275]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r
14
是被0至3个r'取代的c
2-6
烯基。在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r
14
是被0个r'取代的c
2-6
烯基。
[0276]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r
14
是被1-3个r'取代的c
2-6
烯基。在一个实施方案中，至少一个r'是卤代。在一个实施方案中，至少一个r'是-orb。在一个实施方案中，至少一个r'是-oh。在另一个实施方案中，至少一个r'是-nrbrc。在另一个实施方案中，至少一个r'是-nh2或-n(ch3)2。
[0277]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r是：
[0278][0279]
在另一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r是：
[0280][0281]
在另一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r是：
[0282][0283]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r
14
是被0至3个r'取代的c
2-6
炔基。在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r
14
是被0个r'取代的c
2-6
炔基。
[0284]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r
14
是被1-3个r'取代的c
2-6
炔基。在一个实施方案中，至少一个r'是卤代。在一个实施方案中，至少一个r'是-orb。在一个实施方案中，至少一个r'是-oh。在另一个实施方案中，至少一个
r'是-nrbrc。在另一个实施方案中，至少一个r'是-nh2或-n(ch3)2。在另一个实施方案中，至少一个r'是碳环。在另一个实施方案中，至少一个r'是环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
[0285]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r是：
[0286][0287]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r是：
[0288][0289]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)、式(ii-a)或式(ii-a-i)的化合物，其中r是：
[0290][0291]
在一个实施方案中，提供了一种具有下表1中所列化合物的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素：
[0292]
表1：式(i)的化合物
[0293]
[0294]
[0295]
[0296]
[0297]
[0298]
[0299]
[0300]
[0301]
[0302]
[0303]
[0304]
[0305]
[0306]
[0307]
[0308]
[0309][0310]
在一些实施方案中是具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物。在一些实施方案中是具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物的药学上可接受的盐。在一些实施方案中是具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物的溶剂化物。在一些实施方案中是具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物的水合物。在一些实施方案中是具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物的异构体。在一些实施方案中是具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物的阻转异构体。在
一些实施方案中是具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物的互变异构体。在一些实施方案中是具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物的外消旋体。在一些实施方案中是具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物的同位素形式。
[0311]
在其他实施方案中，提供了药物组合物，这些药物组合物包含具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物或药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。
[0312]
在其他实施方案中，提供了抑制蛋白激酶的方法，这些方法包括使蛋白激酶与有效量的具有式(i)、(i)、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物接触。在一些实施方案中，蛋白激酶是btk。
[0313]
在一些实施方案中是用于治疗btk依赖性病症的方法，这些方法包括向对其有需要的受试者施用有效量的具有式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的结构的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物。
[0314]
在一些实施方案中，btk依赖性病症是癌症、自身免疫性疾病、炎性疾病或血栓栓塞性疾病。在一些实施方案中，自身免疫性疾病是多发性硬化、类风湿性关节炎、牛皮癣、干燥综合征或系统性红斑狼疮。在一些实施方案中，炎性疾病是荨麻疹。在一些实施方案中，btk依赖性病症是癌症。在一些实施方案中，btk依赖性病症是自身免疫性疾病。在一些实施方案中，btk依赖性病症是炎性疾病。在一些实施方案中，btk依赖性病症是血栓栓塞性疾病。在一些实施方案中，btk依赖性病症是多发性硬化。在一些实施方案中，btk依赖性病症是类风湿性关节炎。在一些实施方案中，btk依赖性病症是牛皮癣。在一些实施方案中，btk依赖性病症是干燥综合征。在一些实施方案中，btk依赖性病症是系统性红斑狼疮。在一些实施方案中，btk依赖性病症是荨麻疹。在一些实施方案中，btk依赖性病症是原发性cns淋巴瘤。
[0315]
在一些实施方案中，公开了式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中任一者或表1的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物在制造药物中的用途。在一些实施方案中，药物用于治疗癌症。在一些实施方案中，药物用于治疗自身免疫性疾病。在一些实施方案中，药物用于治疗炎性疾病。在一些实施方案中，药物用于治疗血栓栓塞性疾病。在一些实施方案中，药物用于治疗多发性硬化。在一些实施方案中，药物用于治疗类风湿性关节炎。在一些实施方案中，药物用于治疗牛皮癣。在一些实施方案中，药物用于治疗干燥综合征。在一些实施方案中，药物用于治疗系统性红斑狼疮。在一些实施方案中，药物用于治疗荨麻疹。在一些实施方案中，btk依赖性病症是原发性cns淋巴瘤。
[0316]
疾病
[0317]
本文描述了治疗有需要的哺乳动物的能够通过抑制btk治疗的疾病的方法，这些方法包括向哺乳动物施用治疗有效量的式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)中的任一者或表1的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、
外消旋体或同位素。在一些实施方案中，疾病或病症是增殖性疾病或病症，诸如癌症或肿瘤学适应症、自身免疫性疾病或病症、炎性疾病或病症、或血栓栓塞性疾病或病症。
[0318]
抑制btk活性可用于治疗过敏性病症和/或自身免疫性疾病和/或炎性疾病，包括但不限于：sle、类风湿性关节炎、多发性血管炎、特发性血小板减少性紫癜(itp)、重症肌无力、过敏性鼻炎、多发性硬化(ms)、移植排斥、i型糖尿病、膜性肾炎、炎性肠病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性甲状腺炎、寒热凝集素疾病、埃文斯综合征、溶血性尿毒症综合征/血栓性血小板减少性紫癜、结节病、干燥综合征、外周神经病(例如格林-巴利综合征)、寻常天疱疮和哮喘。
[0319]
已报道btk在控制某些b细胞癌症中的b细胞存活方面起作用。例如，btk已被证明对于bcr-abl阳性b细胞急性成淋巴细胞性白血病细胞的存活很重要。因此，抑制btk活性可用于治疗b细胞淋巴瘤和白血病。此外，已报道b细胞受体和nf-κb途径的失调促成原发性cns淋巴瘤的发病机制。
[0320]
本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体或同位素可用于治疗上面列出的疾病。在一个实施方案中，提供了一种治疗btk依赖性病症的方法，该方法包括向对其有需要的受试者施用有效量的式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)或表1的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物。在一个实施方案中，提供了一种治疗癌症、自身免疫性疾病或病症、炎性疾病或病症、或血栓栓塞性疾病或病症的方法，该方法包括向对其有需要的受试者施用有效量的式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)或表1的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物。
[0321]
在一个实施方案中，提供了一种治疗自身免疫性疾病或病症的方法，该方法包括向对其有需要的受试者施用有效量的式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)或表1的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物。在一个实施方案中，自身免疫性疾病或病症是多发性硬化、类风湿性关节炎、牛皮癣、干燥综合征或系统性红斑狼疮。
[0322]
在一个实施方案中，提供了一种治疗炎性疾病或病症的方法，该方法包括向对其有需要的受试者施用有效量的式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)或表1的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物。在一个实施方案中，炎性疾病或病症是荨麻疹。
[0323]
在一个实施方案中，提供了一种治疗增殖性疾病或病症的方法，该方法包括向对其有需要的受试者施用有效量的式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)或(ii)或表1的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物。在一个实施方案中，增殖性疾病或病症是癌症或肿瘤学适应症。在另一个实施方案中，癌症或肿瘤学适应症是原发性cns淋巴瘤。
[0324]
在一个实施方案中，提供了上面列出的疾病的治疗，包括向对其有需要的受试者施用有效量的式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)、(ii)、(ii-a)或(ii-a-i)或表1的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、互变异构体、外消旋体、同位素或药物组合物，任选地与皮质类固醇、非皮质类固醇、免疫抑制剂和/或抗炎剂组合。在一个实
施方案中，免疫抑制剂选自干扰素α、干扰素γ、环磷酰胺、他克莫司、麦考酚酸吗乙酯、甲氨蝶呤、氨苯砜、柳氮磺吡啶、硫唑嘌呤、抗cd20剂(诸如利妥昔单抗、奥法木单抗、奥妥珠单抗或维妥珠单抗或它们的生物类似物形式)、抗tnfα剂(诸如依那西普、英夫利昔单抗、戈利木单抗、阿达木单抗或赛妥珠单抗佩戈或它们的生物类似物形式)、针对配体或其受体的抗il6剂(诸如托珠单抗、沙利姆单抗、奥洛珠单抗、艾司利尤单抗或司妥昔单抗)、针对配体或其受体的抗il17剂(诸如苏金单抗、乌司奴单抗、布洛鲁单抗或依奇珠单抗)、针对配体或其受体的抗il1剂(诸如列洛西普、康纳单抗或阿那白滞素)、针对配体或其受体的抗il2剂(诸如巴利昔单抗或达珠单抗)、抗cd2剂诸如阿法西普、抗cd3剂诸如莫罗单抗-cd3、抗cd80/86剂诸如阿巴西普或贝拉西普、抗神经鞘氨醇-1-磷酸受体剂诸如芬戈莫德、抗c5剂诸如依库珠单抗、抗整联蛋白α4剂诸如那他珠单抗、抗α4β7剂诸如维多珠单抗、抗mtor剂诸如西罗莫司或依维莫司、抗钙调神经磷酸酶剂诸如他克莫司，以及抗baff/blys剂(诸如贝利木单抗、vay736或布利斯比莫德)、来氟米特和特立氟胺。优选地，免疫抑制剂是利妥昔单抗、奥法木单抗、奥妥珠单抗或维妥珠单抗或它们的生物类似物形式。
[0325]
阻转异构体
[0326]
许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有旋转平面偏振光的能力。前缀d和l或(+)和(-)用于表示化合物对平面偏振光的旋转符号，其中(-)或1表示化合物是左旋的。前缀为(+)或d的化合物是右旋的。对于给定的化学结构，这些称为立体异构体的化合物是相同的，不同的是它们是彼此的镜像。互为镜像的立体异构体也可称为对映异构体，并且此类异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。对映异构体的50:50混合物称为外消旋混合物或外消旋体。阻转异构体是由于围绕单键的旋转受阻而产生的立体异构体，其中能量差异产生了足够高的旋转屏障以允许分离各个构象异构体。因此，阻转异构体以热控平衡存在，不同于大多数其他类型的手性结构，其中互变需要化学异构化(即断裂共价键)。
[0327]
式(i)、(i')、(i-a)、(i-b)、(i-c)、(i-d)、(ii)、(ii-a)或(ii-a-i)或表1的化合物可作为阻转异构体存在，其可作为分离的单一对映异构体或作为两种对映异构体的外消旋混合物存在，其中混合物可包含等量或不等量的每种对映异构体。
[0328]
阻转异构体热外消旋化的能垒可以通过形成手性轴的一个或多个键的自由旋转的空间位阻来确定。某些联芳基化合物表现出阻转异构，其中围绕缺乏c2对称性的环间键的旋转受到限制。异构化(对映异构化)的自由能垒是环间键相对于旋转的稳定性的量度。取决于电子和空间因素，光和热激发可以促进此类异构体的外消旋化。
[0329]
邻位取代的联苯化合物可表现出这种类型的构象、旋转异构。这种联苯是对映异构体、手性阻转异构体，其中苯环之间的sp2-sp2碳-碳环间键具有足够高的能垒以防止自由旋转，并且其中取代基a≠b和a'≠b'使分子不对称。
[0330][0331]
a:a'、b:b'和/或a:b'、b:a'之间的空间相互作用大到足以使平面构象成为能量最大值。当两种非平面的轴向手性对映异构体的相互转化足够慢使得它们可以彼此分离时，它们就会作为阻转异构体存在。根据一个定义，阻转异构被定义为存在，其中异构体具有至
少1,000秒的半衰期t
1/2
，其在300k处为22.3kcal mol-1
(93.3kj mol-1
)的自由能垒(oki,m.“recent advances in atropisomerism,”topics in stereochemistry,1983,14,1)。上述附图中的粗线和虚线表示由于旋转能垒而在空间上受限的那些部分或分子部分。粗体部分在页面平面上方正交地存在，而虚线部分在页面平面下方正交地存在。分子的“平面”部分(两个所示联苯中的每个联苯中的左环)位于页面平面内。具有轴向手性的化合物(诸如手性联苯环)可以使用构型命名法来描述。阻转异构体通常(但不总是)在芳基-芳基键邻位具有取代基，这些取代基会引起显著的空间排斥，从而阻碍旋转。影响单个阻转异构体的稳定性的因素包括：旋转轴附近的取代基的排斥相互作用(例如空间体积)；芳基-芳基键的长度和刚度；以及是否存在除热之外的途径来诱导旋转。
[0332]
立体化学分配
[0333]
确定联芳基阻转异构体的轴向立体化学可以通过分析沿受阻旋转轴的纽曼投影来完成。邻位取代基根据cahn-ingold-prelog优先级规则分配优先级。从最接近的环中最高优先级的取代基开始，沿着最短的90
°
路径移动至另一个环中最高优先级的取代基(以下方案1中的a至a')，绝对构型被指定为p(加)表示顺时针，而m(减)表示逆时针。在下面的示例中，a具有高于a'的优先级并且b具有高于b'的优先级。
[0334][0335]
关于阻转异构体的综述，包括它们的命名法，参见bringmann等人，“directed synthesis of chiral biaryl compounds”,angew.chem.int.ed.2005,44,5384-5427。已经考虑了用于分配绝对轴向构型的替代方法；参见例如美国专利号8,440,677第8栏和第9栏。
[0336]
一般合成方案
[0337]
具有式(i)以及式(i-a)、(i-b)、(i-c)和(i-d)和表1的结构的化合物可以使用本领域技术人员已知的标准合成技术来合成。
[0338]
为此，本文所描述的反应、过程和合成方法不限于以下实验部分中描述的特定条件，而是旨在作为对本领域技术人员的指导。例如，反应可以在任何合适的溶剂或其他试剂中进行以进行必要的转化。通常，合适的溶剂是质子或非质子溶剂，其在反应进行的温度(即，可以在冷冻至沸腾温度范围内的温度)处基本上不与反应物、中间体或产物反应。给定的反应可以在一种溶剂或多于一种溶剂的混合物中进行。取决于具体的反应，可以采用用于反应后具体后处理的合适的溶剂。
[0339]
除非另有说明，否则采用质谱(ms)、液相色谱-质谱(lcms)、nmr、hplc、蛋白质化学、生物化学、重组dna技术和药理学的常规方法。化合物使用标准有机化学技术例如
march’s advanced organic chemistry，第7版，john wiley and sons,inc.(2013)中描述的那些来制备。可以采用本文所描述的合成转化的替代反应条件，诸如改变溶剂、反应温度、反应时间以及不同的化学试剂和其他反应条件。必要时，可能需要使用适当的保护基团。这种基团的引入和裂解可以使用peter g.m.wuts和theodora w.green,protecting groups in organic synthesis，第4版，wiley-interscience.(2006)中描述的标准方法进行。所有的起始物质和试剂均是可商购获得的或容易制备的。
[0340]
式(i-a-iii)的化合物的制备
[0341][0342]
式(i-a-iii)的化合物根据下文所示的一般方案1制备：
[0343]
方案1
[0344][0345]
当w是h时的式(i-a-iii-a)：
[0346]
可以使用亚硝酸钠的水溶液在酸诸如hcl的存在下将5-溴-2-氯吡啶-3-胺转化为相应的肼，然后添加还原剂诸如氯化亚锡，得到5-溴-2-氯-3-肼基吡啶。肼可以与酮诸如环己酮在酸的存在下反应，形成5-溴-2-氯-3-(2-亚环己基肼基)吡啶，然后可以将其加热，形成4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚。溴吲哚与boc保护的含胺硼酸或环状硼酸酯的钯催化交叉偶联可以提供偶联的氯吡啶加合物，其可以使用氰化和水解的两步程序使用已知条件转化为伯酰胺。脱保护，然后用羧酸或羧酰氯酰化，得到式(i-a-iii-a)的目标化合物。
[0347]
当w是ch3时的式(i-a-iii-b)：
[0348]
可以使用亚硝酸钠的水溶液在酸诸如hcl的存在下将5-溴-2-氯-6-甲基吡啶-3-胺转化为相应的肼，然后添加还原剂诸如氯化亚锡，得到5-溴-2-氯-3-肼基-6-甲基吡啶。肼可以与酮诸如环己酮在酸的存在下反应，形成5-溴-2-氯-3-(2-亚环己基肼基)-6-甲基吡啶，然后可以将其加热，形成4-溴-1-氯-3-甲基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚。溴吲哚与boc保护的含胺硼酸或环状硼酸酯的钯催化交叉偶联可以提供偶联的氯吡啶加合物，其可以使用氰化和水解的两步程序使用已知条件转化为伯酰胺。脱保护，然后用羧酸或羧酰氯酰化，得到式(i-a-iii-b)的目标化合物。
[0349]
式(i-a-iv)的化合物的制备
[0350][0351]
式(i-a-iv)的化合物根据下文所示的一般方案2制备：
[0352]
方案2
[0353][0354]
可以使用亚硝酸钠的水溶液在酸诸如hcl的存在下将5-溴-2-氯吡啶-4-胺转化为相应的肼，然后添加还原剂诸如氯化亚锡，得到5-溴-2-氯-4-肼基吡啶。肼可以与酮诸如环己酮在酸的存在下反应，形成5-溴-2-氯-4-(2-亚环己基肼基)吡啶，然后可以将其加热，形成4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚。吲哚氮的保护可以使用二碳酸二叔丁酯和金属卤素交换然后用氯甲酸甲酯淬灭实现，可以得到所需的酯中间体。氯吲哚与boc保护的含胺硼酸或环状硼酸酯的交叉偶联，然后将甲酯转化为伯酰胺并将boc保护基团脱保护，可以得到倒数第二个中间体胺。用羧酸或羧酰氯酰化，得到式(i-a-iv)的目标化合物。
[0355]
式(i-b-ii)的化合物的制备
[0356][0357]
式(i-b-ii)的化合物根据下文所示的一般方案3和4中的一个制备：
[0358]
方案3
[0359][0360]
可以使用两步程序将4-溴-5-氟-2-硝基苯甲酸转化为相应的肼，通过首先用试剂诸如氯化锡还原硝基，得到相应的苯胺，将其与亚硝酸钠在水中在酸诸如hcl的存在下反应，然后添加还原剂诸如氯化亚锡，得到4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸。肼可以与酮诸如环庚酮在乙酸的存在下反应，形成1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酸。可以使用标准方法将侧接的羧酸基团转化为相应的伯甲酰胺，诸如转化为酰氯，然后用氢氧化铵淬灭。三环溴吲哚与boc保护的含胺硼酸或环状硼酸酯的钯催化的交叉偶联可以提供所需的交叉偶联加合物。脱保护，然后用羧酸或羧酰氯酰化，得到式(i-b-ii)的目标化合物。
[0361]
方案4
[0362][0363]
3-溴-4-氟苯胺可以与碘化试剂诸如n-碘琥珀酰亚胺反应，得到2-碘-4-氟-5-溴苯胺，其可以通过与亚硝酸钠在水中在酸诸如hcl的存在下反应，然后添加还原剂诸如氯化亚锡而转化为相应的肼。肼可以通过在甲醇中搅拌然后在催化量的硫酸的存在下加热以两步方式与酮诸如环庚酮反应，形成三环吲哚中间体。碘取代基可以与氰化锌在钯催化剂的存在下反应，得到1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲腈。三环化合物与boc保护的含胺硼酸或环状硼酸酯的钯催化的交叉偶联可以提供所需的交叉偶联加合物。可以使用标准方法诸如氢化(二甲基亚膦酸-kp)[氢双(二甲基亚膦酸-kp)]铂(ii)将偶联产物转化为相应的伯甲酰胺。使用氢气还原烯烃，然后脱保护，然后用羧酸或羧酰氯酰化，得到式(i-b-ii)的目标化合物。可以使用手性色谱法将外消旋终产物分离成纯单一对映异构体。
[0364]
式(i-c-i)的化合物的制备：
[0365][0366]
式(i-c-i)的化合物根据下文所示的一般方案5和6中的一个制备：
[0367]
方案5
[0368][0369]
2-5-二溴苯肼可以与螺环酮在用于费歇尔吲哚合成的标准条件下反应，得到三环吲哚。吲哚nh可以用boc基团或sem基团保护，并且邻溴基团可以使用n-buli金属化并用二氧化碳淬灭，得到所需的羧酸。然后可以使用强酸诸如tfa或hcl(用于boc保护)或tbaf(用于sem保护)除去boc基团，并且可以使用标准方法将侧接的羧酸基团转化为相应的伯甲酰胺，诸如转化为酰氯，然后用氢氧化铵淬灭。三环溴吲哚与boc保护的含胺硼酸或环状硼酸酯的钯催化的交叉偶联可以提供所需的交叉偶联加合物。脱保护，然后用羧酸或羧酰氯酰化，得到式(i-c-i)的目标化合物。
[0370]
方案6
[0371][0372]
使用亚硝酸钠的水溶液在酸诸如hcl的存在下将5-溴邻氨基苯甲酸转化为相应的肼，然后添加还原剂诸如氯化亚锡。肼可以与螺环酮在酸的存在下反应，形成所需的三环吲哚。溴吲哚与boc保护的含胺硼酸或环状硼酸酯的钯催化交叉偶联可以提供偶联的氯吡啶加合物，其可以使用已知条件转化为伯酰胺。脱保护，并用羧酸或羧酰氯酰化，得到式(i-c-i)的目标化合物。
[0373]
式(i-d)的化合物
[0374][0375]
式(i-d)的化合物根据下文所示的一般方案7制备：
[0376]
方案7
[0377][0378]
上述芳基肼可以与螺环酮在酸的存在下反应，形成所需的三环吲哚。可以使用酰胺键形成的标准条件来实现羧酸向甲酰胺的转化。溴吲哚与boc保护的含胺硼酸或环状硼酸酯的钯催化交叉偶联可以提供偶联的氯吡啶加合物，其可以使用已知条件转化为伯酰胺。脱保护，并用羧酸或羧酰氯酰化，得到式(i-d)的目标化合物。
[0379]
式(i-d-ix)的化合物的制备
[0380][0381]
式(i-d-ix)的化合物根据下文所示的一般方案8制备：
[0382]
方案8
[0383][0384]
3-溴-4-氟苯胺可以与碘化试剂诸如n-碘琥珀酰亚胺反应，得到2-碘-4-氟-5-溴苯胺，其可以通过与亚硝酸钠在水中在酸诸如hcl的存在下反应，然后添加还原剂诸如氯化亚锡而转化为相应的肼。肼可以通过在甲醇中搅拌然后在催化量的硫酸的存在下加热以两步方式与酮诸如环庚酮反应，形成三环吲哚中间体。碘取代基可以与氰化锌在钯催化剂的存在下反应，得到1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲腈。三环化合物与boc保护的含胺硼酸或环状硼酸酯的钯催化的交叉偶联可以提供所需的交叉偶联加合物。可以使用标准方法诸如氢化(二甲基亚膦酸-kp)[氢双(二甲基亚膦酸-kp)]铂(ii)将偶联产物转化为相应的伯甲酰胺。使用氢气还原烯烃，然后再氧化吲哚，然后脱保护，然后用羧酸和酰胺偶联剂酰化，得到式(i-d-ix)的目标化合物。可以使用手性色谱法将外消旋终产物分离成纯单一对映异构体。
[0385]
实施例
[0386]
提供以下实施例仅用于说明目的，而不是限制本文提供的权利要求的范围。虽然本文已经示出并描述了本发明的优选实施方案，但是对于本领域技术人员来说显而易见的是，这些实施方案仅作为示例提供。在不偏离本发明的情况下，本领域技术人员现在将想到许多变化、改变和替代。应理解的是，本文所述的本发明实施方案的各种替代方案可用于实施本发明。这意味着以下权利要求书限定本发明的范围并且因此涵盖这些权利要求及其等
效物范围内的方法和结构。
[0387]
实施例1-1
[0388]
4-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺(化合物1-1)的制备
[0389][0390]
步骤1：5-溴-2-氯-3-肼基吡啶的制备
[0391]
在0℃处将亚硝酸钠(6.65g，96.41mmol)在水(70ml)中的溶液滴加到5-溴-2-氯-吡啶-3-胺(20.0g，96.4mmol)在盐酸(70ml，36-38％)中的搅拌混合物中。在该温度处搅拌30分钟后，在0℃处将混合物滴加到氯化亚锡二水合物(43.51g，192.81mmol)在盐酸(50ml，36-38％)中的溶液中。将反应混合物在20℃处搅拌1小时，然后过滤。将分离的固体用盐酸(50ml，36％-38％)洗涤并溶解在meoh(100ml)中。将所得溶液用饱和碳酸氢钠水溶液中和并用乙酸乙酯(3
×
300ml)萃取。将合并的有机层用盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩，得到5-溴-2-氯-3-肼基吡啶(16.00g，70％)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值
(c5h5brcln3)＝221.94、223.94、225.94；实测值：221.95、223.95、225.95。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ7.66(d,j＝2.3hz,1h),7.59(d,j＝2.3hz,1h),7.20(s,1h),4.33(s,2h)
[0392]
步骤2：5-溴-2-氯-3-(2-亚环己基肼基)吡啶的制备
[0393]
在20℃处向5-溴-2-氯-3-肼基吡啶(16.0g，71.9mmol)和环己酮(8.47g，86.3mmol)在甲醇(200ml)中的搅拌溶液中添加乙酸(2ml，34.97mmol)。将反应混合物在20℃处搅拌12小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(400ml)淬灭并用乙酸乙酯(3
×
300ml)萃取。将合并的有机层用盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(10％)洗脱，得到5-溴-2-氯-3-(2-亚环己基肼基)吡啶(20.0g，92％)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
11h13
brcln3)＝302.00、304.00、306.00；实测值：302.10、304.10、306.10。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.47(s,1h),7.88(d,j＝2.3hz,1h),7.78(d,j＝2.3hz,1h),2.43(t,j＝5.8hz,2h),2.32(t,j＝5.9hz,2h),1.71-1.47(m,6h)。
[0394]
步骤3：4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚的制备
[0395]
将5-溴-2-氯-3-(2-亚环己基肼基)吡啶(20.00g，66.09mmol)的二乙二醇(150ml)溶液在250℃处加热30分钟。将冷却的反应混合物用水(300ml)淬灭并用乙酸乙酯(3
×
200ml)萃取。将合并的有机层用盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(23％)洗脱，得到4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚(8.50g，43％)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
11h10
brcln2)＝284.97、286.97、287.97；实测值：284.95、286.95、288.95。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.92(s,1h),7.91(s,1h),2.92(t,j＝6.0hz,2h),2.76(t,j＝5.7hz,2h),1.88-1.75(m,4h)。
[0396]
步骤4：5-(1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯的制备
[0397]
将4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚(2.00g，7.00mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(2.60g，8.40mmol)、磷酸钾(4.46g，21.01mmol)和pd(dppf)cl2(512mg，0.70mmol)在水(5ml)和thf(20ml)中的混合物脱气并用氮气(
×
5)回填。将反应混合物在60℃处在氮气气氛下加热12小时。将冷却的混合物用水(100ml)稀释并用乙酸乙酯(3
×
60ml)萃取。将合并的有机层用盐水(150ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(22％)洗脱，得到5-(1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(850mg，31％)，为白色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
21h26
cln3o2)＝388.17、390.17；实测值：388.25、390.25。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.63(s,1h),7.59(s,1h),5.84-5.75(m,1h),4.09-3.99(m,2h),3.52(t,j＝5.9hz,2h),2.77(t,j＝5.9hz,2h),2.62(t,j＝5.3hz,2h),2.31-2.22(m,2h),1.86-1.70(m,4h),1.42(s,9h)。
[0398]
步骤5：5-(1-氰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯的制备
[0399]
将5-(1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(850mg，2.19mmol)、氰化锌(257mg，2.19mmol)和四(三苯基膦)钯(253mg，0.22mmol)在dmf(10ml)中的混合物脱气并用氮气(
×
5)回填。将反应混合物在100℃处在氮
气气氛下加热1小时。将冷却的反应混合物用水(50ml)稀释并用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2
×
50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(24％)洗脱，得到5-(1-氰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(550mg，65％)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
22h26
n4o2)＝379.21；实测值＝379.30。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ12.20(s,1h),7.98(s,1h),5.89-5.81(m,1h),4.09-3.99(m,2h),3.53(t,j＝5.7hz,2h),2.80(t,j＝6.0hz,2h),2.63(t,j＝6.2hz,2h),2.32-2.24(m,2h),1.90-1.68(m,4h),1.42(s,9h)
[0400]
步骤6：5-(1-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯的制备
[0401]
在20℃处将过氧化氢(1.65g，14.53mmol，30％)添加到5-(1-氰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(550mg，1.45mmol)和碳酸钾(602mg，4.36mmol)在dmso(10ml)中的搅拌混合物中。将反应混合物在60℃处加热0.5小时。将冷却的反应混合物通过添加水(50ml)淬灭并用乙酸乙酯(3
×
40ml)萃取。将合并的有机层用na2s2o3水溶液(2
×
30ml)和盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩，得到5-(1-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，85％)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
22h28
n4o3)＝397.22；实测值＝397.30。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.24(s,1h),8.13(s,1h),7.85(s,1h),7.59(s,1h),5.86-5.77(m,1h),4.15-4.05(m,2h),3.54(t,j＝5.8hz,2h),2.81(t,j＝5.9hz,2h),2.64(t,j＝5.3hz,2h),2.31-2.25(m,2h),1.88-1.69(m,4h),1.42(s,9h)。
[0402]
步骤7：3-(1-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
[0403]
将5-(1-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，0.88mmol)和10％碳载钯(100mg)在甲醇(10ml)中的混合物在20℃处在氢气(2atm-3atm)下搅拌48小时。将混合物过滤，并将滤液真空浓缩，得到3-(1-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(330mg，粗物质)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
22h30
n4o3)＝399.23；实测值＝399.30。
[0404]
步骤8：4-(哌啶-3-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺盐酸盐的制备
[0405]
将3-(1-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(330mg，0.83mmol)和hcl(4m)在1,4-二噁烷(5ml)中的混合物在20℃处搅拌1小时。真空浓缩所得混合物，得到4-(3-哌啶基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺盐酸盐(360mg，粗物质)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
17h22
n4o)＝299.18；实测值＝299.15。
[0406]
步骤9：4-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺(化合物1-1)的制备
[0407]
在-78℃处向4-(3-哌啶基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺盐酸盐(360mg，粗物质)和n,n-二异丙基乙胺(1.39g，10.75mmol)在thf(10ml)中的搅拌混合物中滴加丙烯酰氯(97.31mg，1.08mmol)。将反应混合物在-78℃处搅拌1小时。将混合物用水(20ml)淬灭并用乙酸乙酯(3
×
15ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经硫酸钠
干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc(柱：xselect csh obd柱30
×
150mm 5μm；流动相a：水(0.1％fa)，流动相b：乙腈；流速：60ml/min；梯度：在7分钟内17％b至39％b；220nm)纯化，得到4-(1-丙-2-烯酰基-3-哌啶基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺(54.2mg)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
20h24
n4o2)＝353.19；实测值＝353.15。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.14(s,1h),8.07(s,1h),8.03(s,1h),7.54(s,1h),6.95-6.75(m,1h),6.19-6.04(m,1h),5.74-5.59(m,1h),4.65-4.54(m,1h),4.20-4.09(m,1h),3.32-3.07(m,2h),2.99-2.73(m,5h),2.05-1.91(m,2h),1.86-1.72(m,5h),1.63-1.42(m,1h)。
[0408]
实施例2-1
[0409]
4-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺(化合物2-1)的制备
[0410][0411]
步骤1：5-(1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯的制备
[0412]
将4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚(3.10g，10.86mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(4.68g，13.0mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)(794mg，1.09mmol)和磷酸钾(6.91g，32.5mmol)在thf(25ml)和水(2ml)中的混合物脱气并用氮气(
×
5)回填。将反应混合物在60℃处在氮气气氛下加热过夜。将冷却的混合物用水(100ml)稀释并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(50ml)和盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至20％)洗脱，得到5-(1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(4.5g，97％)，为灰白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.69(s,1h),7.59(s,1h),7.30-7.21(m,2h),7.12-7.06(m,1h),4.67-4.46(m,2h),3.43(t,j＝6.2hz,2h),2.92-2.64(m,2h),2.40-2.24(m,2h),1.90-1.78(m,2h),1.77-1.65(m,2h),1.60-1.46(m,2h),1.39(s,9h)。
[0413]
步骤2：5-(1-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,4-二
氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯的制备
[0414]
将5-(1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(4.50g，10.27mmol)、氰化锌(664mg，5.65mmol)和四(三苯基膦)钯(1.19g，1.03mmol)在dmf(35ml)中的混合物脱气并用氮气(
×
5)回填。将反应混合物在120℃处在氮气气氛下加热48小时。将冷却的混合物用水(200ml)稀释并用乙酸乙酯(80ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(50ml
×
3)和盐水(80ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至45％)洗脱，得到5-(1-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(670mg，15％)，为黄色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.30(s,1h),8.19(s,1h),7.86(s,1h),7.63(s,1h),7.34-7.23(m,2h),7.18-7.09(m,1h),4.71-4.48(m,2h),3.45(t,j＝6.0hz,2h),2.80(t,j＝6.9hz,2h),2.34(t,j＝6.0hz,2h),1.94-1.83(m,2h),1.78-1.66(m,2h),1.59-1.48(m,2h),1.41(s,9h)。
[0415]
步骤3：4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺盐酸盐的制备
[0416]
将5-(1-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-4-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(330mg，739μmol)和氯化氢(4m的二噁烷溶液，15ml)的混合物在20℃处搅拌2小时。将混合物真空蒸发至干，得到4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺盐酸盐(256mg，粗物质)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
21h22
n4o)＝347.18；实测值＝347.30。
[0417]
步骤4：4-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺(化合物2-1)的制备
[0418]
在0℃处向4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺盐酸盐(256mg，粗物质)和碳酸氢钠(562mg，6.69mmol)在thf(10ml)和水(2ml)中的搅拌混合物中添加丙烯酰氯(61mg，0.67mmol)。将反应混合物在0℃处搅拌1小时。将混合物用水(50ml)稀释并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(30ml
×
2)和盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc(柱：xbridge prep obd c18柱，30
×
150mm5μm；流动相a：水(10mmol/l nh4hco3+0.1％nh3.h2o)，流动相b：乙腈；流速：60ml/min；梯度：在7分钟内25％b至60％b；220nm)纯化，得到4-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺(57.4mg，22％)，为灰白色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
24h24
n4o2)＝401.19；实测值＝401.30。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.29(s,1h),8.18(d,j＝2.9hz,1h),7.85(s,h),7.62(d,j＝3.1hz,1h),7.35-7.25(m,2h),7.18-7.09(m,1h),7.00-6.71(m,1h),6.14(dd,j＝16.8,2.7hz,1h),5.78-5.62(m,1h),4.95-4.66(m,2h),3.79-3.49(m,2h),2.78(t,j＝6.3hz,2h),2.48-2.29(m,2h),1.97-1.79(m,2h),1.77-1.62(m,2h),1.60-1.44(m,2h)。
[0419]
实施例2-2至2-10
[0420]
表2中的化合物2-2至2-10以与实施例1和2中所述的化合物1-1和2-1类似的方式制备。
[0421]
表2：化合物2-2至2-10
[0422]
[0423]
[0424][0425]
实施例3-1
[0426]
1-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4-甲酰胺(化合物3-1)的制备
[0427][0428]
步骤1：5-溴-2-氯-4-肼基吡啶的制备
[0429]
在0℃处向5-溴-2-氯-吡啶-4-胺(20.00g，96.41mmol)在40％h2so4(150ml)中的溶液中滴加亚硝酸钠(7.98g，115.69mmol)在水(8ml)中的溶液。在0℃处搅拌2小时后，在0℃
处将所得混合物添加到氯化亚锡二水合物(43.51g，192.81mmol)在40％h2so4(150ml)中的搅拌溶液中并在该温度处搅拌1小时。将反应混合物用氢氧化铵碱化并用二氯甲烷和甲醇(9:1，1l
×
5)萃取。将合并的有机层用水(1l
×
2)和盐水(1l)洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩，得到5-溴-2-氯-4-吡嗪基吡啶(12.60g)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.00(s,1h),7.80(s,1h),6.94(s,1h),4.45(s,2h)。
[0430]
步骤2：5-溴-2-氯-4-(2-亚环己基肼基)吡啶的制备
[0431]
在20℃处向5-溴-2-氯-4-吡嗪基吡啶(8.00g，35.96mmol)和环己酮(5.29g，53.94mmol)在甲醇(50ml)中的悬浮液中添加乙酸(216mg，3.60mmol)。将反应混合物在该温度处搅拌2小时。将所得混合物过滤，将分离的固体用甲醇(10ml)洗涤并减压干燥，得到5-溴-2-氯-4-(2-亚环己基肼基)吡啶(7.50g)，为白色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.73(s,1h),8.22(s,1h),7.15(s,1h),2.42(t,j＝5.6hz,2h),2.33(t,j＝5.8hz,2h),1.67-1.58(m,6h)。
[0432]
步骤3：4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚的制备
[0433]
将5-溴-2-氯-4-(2-亚环己基肼基)吡啶(6.50g，21.48mmol)的三甘醇(20ml)溶液在300℃处搅拌30分钟。将冷却的混合物用乙酸乙酯(300ml)稀释，用水(100ml
×
2)和盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至11％)洗脱，得到4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚(1.00g)，为棕色固体。1h nmr(dmso-d6)δ11.89(s,1h),7.99(s,1h),2.88(t,j＝4.9hz,2h),2.74(t,j＝4.6hz,2h),1.87-1.74(m,4h)。
[0434]
步骤4：4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-5-甲酸叔丁酯的制备
[0435]
在20℃处向4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚(1.00g，3.50mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中添加n,n-二甲基-4-氨基吡啶(43mg，0.35mmol)和三乙胺(710mg，7.02mmol)，然后添加二碳酸二叔丁酯(1.15g，5.27mmol)。将反应混合物在20℃处搅拌0.5小时，用二氯甲烷(100ml)稀释并用水(50ml
×
2)和盐水(50ml)洗涤。将有机层经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至9％)洗脱，得到4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-5-甲酸叔丁酯(1.12g)，为浅黄色固体。1h nmr(dmso-d6)δ8.23(s,1h),2.86(t,j＝6.1hz,2h),2.77(t,j＝6.2hz,2h),1.88-1.72(m,4h),1.62(s,9h)。
[0436]
步骤5：4-甲基1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4,5-二甲酸5-(叔丁酯)的制备
[0437]
在-78℃处在氮气气氛下向4-溴-1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-5-甲酸叔丁酯(1.12g，2.90mmol)和tmeda(371mg，3.19mmol)在thf(15ml)中的搅拌混合物中添加nbuli(1.28ml，2.5m的己烷溶液，3.20mmol)。在-78℃处搅拌1小时后，滴加氯甲酸甲酯(411mg，4.35mmol)。将反应混合物在-78℃处搅拌1小时，用饱和氯化铵水溶液(100ml)淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(50ml
×
2)和盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至15％)洗脱，得到4-甲基1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4,5-二甲酸5-(叔丁酯)(780mg)，为浅黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.32(s,1h),3.83(s,3h),2.94-2.83(m,4h),1.89-1.73(m,4h),1.57(s,9h)。
[0438]
步骤6：4-甲基1-(2-(叔丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4,5-二甲酸5-(叔丁酯)的制备
[0439]
将4-甲基1-氯-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4,5-二甲酸5-(叔丁酯)(200mg，0.55mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(217mg，0.60mmol)、磷酸钾(349mg，1.64mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)-二茂铁]二氯钯(ii)(40mg，0.05mmol)在thf(5ml)和水(0.5ml)中的混合物脱气并用氮气(
×
5)回填。将反应混合物在60℃处在氮气气氛下加热12小时。将冷却的混合物用水(50ml)稀释并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(100ml)和盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至20％)洗脱，得到4-甲基1-(2-(叔丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4,5-二甲酸5-(叔丁基)(290mg，94％)，为白色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.56(s,1h),7.32-7.28(m,2h),7.14-7.08(m,1h),4.67-4.52(m,2h),3.86(s,3h),3.55-3.37(m,2h),2.91-2.79(m,2h),2.47-2.37(m,1h),2.29-2.15(m,1h),1.79-1.70(m,4h),1.59(s,9h),1.56-1.43(m,2h),1.41(s,9h)。
[0440]
步骤7：5-(4-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-1-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯的制备
[0441]
将4-甲基1-(2-(叔丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4,5-二甲酸5-(叔丁酯)(290mg，0.52mmol)和氨(10ml，7.0m的甲醇溶液)的混合物在密封管中在100℃处加热36小时。将冷却的反应混合物真空浓缩，并将分离的残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至50％)洗脱，得到5-(4-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-1-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(170mg，74％)，为灰白色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.23(s,1h),8.66(s,1h),8.15(s,1h),7.50(s,1h),7.33-7.22(m,2h),7.12-7.05(m,1h),4.67-4.51(m,2h),3.52-3.37(m,2h),2.80-2.67(m,2h),2.48-2.40(m,1h),2.32-2.18(m,1h),2.02-1.86(m,1h),1.83-1.65(m,3h),1.60-1.47(m,2h),1.41(s,9h)。
[0442]
步骤8：1-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4-甲酰胺盐酸盐的制备
[0443]
将5-(4-氨基甲酰基-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-1-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-丁酯(170mg，0.38mmol)和氯化氢(4m的二噁烷溶液，5ml)的混合物在20℃处搅拌2小时。将反应混合物真空浓缩，得到1-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4-甲酰胺盐酸盐(200mg，粗物质)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
21h22
n4o)347.18，实测值：347.15。
[0444]
步骤9：1-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4-甲酰胺(化合物3-1)的制备
[0445]
在-78℃处向1-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4-甲酰胺盐酸盐(200mg，粗物质)和n-乙基-n-异丙基-丙-2-胺(675mg，5.22mmol)在thf(8ml)中的搅拌混合物中滴加丙烯酰氯(47mg，0.52mmol)。将反应混合物在-78℃处搅拌1小时。将混合物用饱和氯化铵水溶液(50ml)淬灭并用乙酸乙酯(80ml
×
2)萃取。将合并的有机层用水(100ml
×
2)和盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过
制备型hplc(柱：xbridge prep obd c18柱，30x150mm 5μm；流动相a：水(10mmol/l nh4hco3+0.1％nh3.h2o)，流动相b：乙腈；流速：60ml/min；梯度：在7分钟内25％b至45％b；220nm)纯化，得到1-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6,7,8,9-四氢-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4-甲酰胺(11mg)，为灰白色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
24h24
n4o2)＝401.19；实测值＝401.30。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.23(s,1h),8.65(s,1h),8.15(s,1h),7.50(s,1h),7.33-7.25(m,2h),7.15-7.06(m,1h),6.99-6.73(m,1h),6.14(d,j＝16.7hz,1h),5.77-5.62(m,1h),4.93-4.70(m,2h),3.79-3.45(m,2h),2.84-2.67(m,2h),2.66-2.57(m,1h),2.37-2.16(m,1h),2.03-1.87(m,1h),1.85-1.63(m,3h),1.61-1.39(m,2h)。
[0446]
实施例3-2、3-3和3-4
[0447]
表3中的化合物3-2、3-3和3-4以与实施例3中所述的化合物3-1类似的方式制备。
[0448]
表3：化合物3-2、3-3和3-4
[0449][0450]
实施例4-1
[0451]
(s)-1-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(化合物4-1)的制备
[0452][0453]
步骤1：2-氨基-4-溴-5-氟苯甲酸的制备
[0454]
向4-溴-5-氟-2-硝基苯甲酸(20.0g，75.76mmol)在18％hcl水溶液(140ml)中的溶液中添加sncl2.2h2o(51.0g，226mmol)。将反应混合物在90℃处搅拌3小时。过滤反应混合物，将滤饼用水洗涤并真空干燥，得到所需产物2-氨基-4-溴-5-氟苯甲酸(17.0g，96％收率)，为白色固体。c7h5brfno
2+
[m+h]
+
m/z的lcms(esi)计算值232.95，实测值234.0。
[0455]
步骤2：4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸的制备
[0456]
在0℃处向2-氨基-4-溴-5-氟苯甲酸(17.0g，72.6mmol)在36％hcl水溶液(120ml)中的溶液中滴加nano2(6.6g，95.7mmol)在水(50ml)中的溶液。将混合物在0℃处搅拌0.5小时，然后在0℃处添加sncl2·
2h2o(45g，199.4mmol)在18％hcl(水溶液)(40ml)中的溶液。将混合物在0℃处搅拌0.5小时，并将滤饼用水洗涤并真空干燥，得到所需产物4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸(12.3g，69％收率)，为浅棕色固体。c7h6brfn2o
2+
[m+h]
+
m/z的lcms(esi)计算值＝247.96；实测值＝249.0。
[0457]
步骤3：1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酸的制备
[0458]
向4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸(8.0g，32.13mmol)在乙酸(100ml)中的溶液中添加环庚酮(4.0g，35.71mmol)。将反应在130℃处搅拌16小时。真空除去乙酸，并将水(50ml)添加到残余物中并在室温处搅拌0.5小时。将混合物过滤，并将滤饼真空干燥，得到所需产物1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酸(5.0g，48％收率)，为棕色固体。c
14h13
brfno
2+
[m+h]
+
m/z的lcms(esi)计算值＝325.01；实测值＝326.0。
[0459]
步骤4：1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺的制备
[0460]
在0℃处将草酰氯(2.6ml，30.80mmol)滴加到1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚
并[b]吲哚-4-甲酸(5.0g，15.33mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液中。添加dmf(0.1ml)并将混合物在0℃处再搅拌0.5小时。然后在0℃处将反应混合物滴加到氢氧化铵溶液(25％-28％；20ml)中，并将溶液在0℃处搅拌0.5小时。然后将溶液用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过combiflash纯化(在25分钟内从100％石油醚到50％乙酸乙酯/石油醚，25ml/min)，得到所需产物1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢-环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(610mg)，为黄色固体。c
14h14
brfn2o[m+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值＝324.03；实测值＝325.0。
[0461]
步骤5：(s)-(1-(4-氨基甲酰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢-环庚并[b]吲哚-1-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0462]
向1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(200mg，0.62mmol)在二噁烷(2ml)中的溶液中添加(s)-哌啶-3-基氨基甲酸叔丁酯(148mg，0.74mmol)、binap(80mg，0.13mmol)，pd2(dba)3(56mg，0.06mmol)和cs2co3(240mg，0.73mmol)。将反应混合物在120℃处在n2下搅拌16小时。将反应混合物过滤，浓缩，并将所得残余物通过combiflash纯化(在25分钟内从100％石油醚到80％乙酸乙酯/石油醚，25ml/min)，得到所需产物(s)-(1-(4-氨基甲酰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-1-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg，29％收率)，为黄色固体。c
24h33
fn4o3[m+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值444.25，实测值445.2。
[0463]
步骤6：(s)-1-(3-氨基哌啶-1-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺的制备
[0464]
向(s)-(1-(4-氨基甲酰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-1-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.16mmol)在dcm(2ml)中的溶液中添加tfa(2ml)。将反应溶液在室温处搅拌1小时，然后真空蒸发，得到所需产物(s)-1-(3-氨基哌啶-1-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺9(60mg，100％收率)，为黄色固体。c
19h25
fn4o
+
[m+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值＝344.20，实测值＝345.2。
[0465]
步骤7：(s)-1-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(化合物4-1)的制备
[0466]
将(s)-1-(3-氨基哌啶-1-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢-环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(60mg，0.135mmol)和diea(0.24ml，1.4mmol)在dmf(0.5ml)中的溶液添加到丁-2-炔酸(11.3mg，0.14mmol)和hatu(56mg，0.15mmol)在dmf(0.5ml)中的溶液中。将反应溶液在室温处搅拌1小时，然后通过制备型hplc(色谱柱：kromasil-c18 100
×
21.2mm 5um；流动相acn-h2o(0.05％nh3)，梯度：45-55)纯化，得到(s)-1-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(15.5mg)，为白色固体。c
23h27
fn4o
2+
[m+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值＝411.22；实测值＝412.2。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.61(s,1h),8.46(d,j＝8.0hz,1h),7.88(br s,1h),7.35(d,j＝14.4hz,1h),7.29(br s,1h),3.82(s,1h),3.12-3.10(m,3h),2.80-2.79(m,5h),1.90(s,3h),1.84-1.74(m,3h),1.70-1.54(m,7h)。
[0467]
实施例4-2至4-4
[0468]
表4中所示的化合物4-2至4-4以与上面针对化合物4-1所述类似的方式制备。
[0469]
表4：化合物4-2至4-6
[0470][0471]
实施例5-1和5-2
[0472]
2-氟-1-[2-(丙-2-烯酰基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-基]-5h,6h,7h,8h,-9h,10h-环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(化合物5-1和5-2)的制备
[0473][0474]
步骤1：5-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉2的制备
[0475]
将5-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(5.0g，16.0mmol)在hcl/二噁烷(50ml)中的溶液在25℃处搅拌1小时。将混合物浓缩，得到5-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(3.17g，收率89％)，为白色固体，将其不经任何纯化直接使用。c9h
11
brn
+
[m+h]
+
m/z的lcms(esi)计算值212.0，实测值212.1。
[0476]
步骤2：1-(5-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基)丙-2-烯-1-酮3的制备
[0477]
在-78℃处向5-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(3.10g，14.62mmol)在thf(20ml)中的溶液中滴加丙-2-烯酰氯(1.33g，14.62mmol)和diea(5.67g，43.86mmol)。将反应混合物在-78℃处搅拌1小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭并用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(80ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶(洗脱剂：meoh/dcm＝0％-5％)纯化，得到1-(5-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基)丙-2-烯-1-酮(3.17g，收率77％)，为浅黄色油状物。c
12h13
brno
+
[m+h]
+
m/z的lcms(esi)计算值266.0，实测值266.1。
[0478]
步骤3：1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基]丙-2-烯-1-酮的制备
[0479]
向1-(5-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基)丙-2-烯-1-酮(3.17g，11.90mmol)在二噁烷(10ml)中的溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(4.53g，17.85mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)-二茂铁]二氯化钯(ii)(870mg，1.19mmol)和乙酸钾(3.50g，35.7mmol)，然后将混合物在微波下在100℃处搅拌2小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭，用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取，用盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空蒸发。将粗产物通过反向快速柱(acn/h2o＝0％-95％)纯化，得到1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基]丙-2-烯-1-酮(2.01g)，为浅黄色固体。c
18h25
bno
3+
[m+h]
+
m/z的lcms(esi)计算值314.2，实测值314.2。
[0480]
步骤4：2-氟-1-[2-(丙-2-烯酰基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-基]-5h,6h,7h,8h,9h,10h-环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺的制备
[0481]
向1-溴-2-氟-5h,6h,7h,8h,9h,10h-环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(279mg，0.86mmol)
和n-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]丙-2-烯酰胺(270mg，0.86mmol)在1,4-二噁烷(10ml)和水(1ml)中的溶液中添加碳酸钾(178.3mg，1.29mmol)和[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(ii)(63mg，0.086mmol)。将混合物在80℃处在氮气气氛下在微波下搅拌2小时。将混合物浓缩，通过硅胶柱(乙酸乙酯/石油醚从0％至60％)纯化，得到粗产物，然后通过制备型hplc(流动相：乙腈-水(0.05％nh3))进一步纯化，得到2-氟-1-[2-(丙-2-烯酰基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-基]-5h,6h,7h,8h,9h,10h-环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(58mg)。然后通过超临界流体色谱法(sfc)分离阻转异构体(流动相：co2/meoh(0.2％nh3.h2o)＝52/48)，得到：
[0482]
(i)化合物5-1(峰a)，tr＝2.535min(19.5mg)，为浅黄色固体；1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.40(d,j＝10.4hz,1h),7.36-7.23(m,2h),7.19-7.09(m,1h),6.92-6.73(m,1h),6.26-6.22(m,1h),5.84-5.70(m,1h),4.90-4.88(m,2h),3.78-3.71(m,2h),2.97-2.76(m,2h),2.55-2.49(m,2h),2.04-1.98(m,2h),1.71-1.67(m,4h),1.34-1.29(m,2h)。c
26h26
fn3o
2+
[m+h]+m/z的lcms(esi)计算值＝431.20，实测值＝432.2。
[0483]
(ii)化合物5-2(峰b)，tr＝3.053min(19.4mg)，为浅黄色固体。1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.40(d,j＝10.4hz,1h),7.35-7.23(m,2h),7.15-7.13(m,1h),6.91-6.75(m,1h),6.26-6.22(m,1h),5.82-5.70(m,1h),4.90-4.88(m,2h),3.78-3.71(m,2h),2.88-2.86(m,2h),2.61-2.45(m,2h),2.04-1.98(m,2h),1.74-1.69(m,4h),1.34-1.30(m,2h)。
[0484]c26h26
fn3o
2+
[m+h]+m/z的lcms(esi)计算值＝431.20；实测值＝432.2。
[0485]
实施例5-3至5-4
[0486]
表5中所示的化合物5-3至5-4以与实施例5中所述类似的方式制备。
[0487]
表5：化合物5-3至5-4
[0488][0489]
实施例5-5、5-6、5-7
[0490]
外消旋-1-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(化合物5-5)、(s)-1-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(化合物5-6)和(r)-1-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(化合物5-7)的制备
[0491][0492]
步骤1：5-溴-4-氟-2-碘苯胺
[0493]
在25℃处向3-溴-4-氟苯胺(100.0g，526.3mmol)在乙酸(500ml)中的溶液中分批添加n-碘琥珀酰亚胺(124.3g，552.5mmol)。将反应混合物在25℃处搅拌2小时。真空浓缩混合物。将残余物用饱和碳酸钠水溶液(500ml)稀释并用乙酸乙酯(500ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(500ml)和盐水(500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物用乙酸乙酯和石油醚的混合溶剂(300ml，1:4，v/v)研磨并过滤。将固体用乙酸乙酯和石油醚的混合溶剂(50ml
×
2，1:4，v/v)洗涤并减压干燥，得到5-溴-4-氟-2-碘苯胺(88.6g，53％)，为淡蓝色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ7.55(d,j＝8.1hz,1h),6.98(d,j＝6.3hz,1h),5.27(brs,2h)。
[0494]
步骤2：(5-溴-4-氟-2-碘苯基)肼盐酸盐
[0495]
在0℃处向5-溴-4-氟-2-碘苯胺(88.6g，280.5mmol)在浓盐酸(443ml)中的搅拌悬浮液中滴加亚硝酸钠(23.22g，337.0mmol)在水(90ml)中的溶液。在0℃处搅拌1小时后，在0℃处将所得混合物滴加到氯化亚锡二水合物(126.61g，561.1mmol)在浓盐酸(295ml)中的溶液中并在该温度处搅拌1小时。通过过滤收集沉淀，用浓盐酸(150ml
×
5)和乙酸乙酯(300ml)洗涤，减压干燥，得到(5-溴-4-氟-2-碘苯基)肼盐酸盐(100.3g，粗物质)，为浅黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.23(brs,3h),7.89(d,j＝8.0hz,1h),7.82(brs,1h),7.31-7.22(m,1h)。
[0496]
步骤3：1-(5-溴-4-氟-2-碘苯基)-2-亚环庚基肼
[0497]
在20℃处向(5-溴-4-氟-2-碘苯基)肼盐酸盐(80.0g，217.6mmol)在甲醇(400ml)中的溶液中添加环庚酮(24.40g，217.6mmol)。将反应混合物在20℃处搅拌1小时。通过过滤收集沉淀，减压干燥，得到1-(5-溴-4-氟-2-碘苯基)-2-亚环庚基肼(72.0g，78％)，为灰白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.77(d,j＝8.0hz,1h),7.44(d,j＝6.8hz,1h),7.39(brs,1h),2.50-2.44(m,4h),1.80-1.67(m,2h),1.64-1.48(m,6h)。
[0498]
步骤4：1-溴-2-氟-4-碘-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚
[0499]
将1-(5-溴-4-氟-2-碘苯基)-2-亚环庚基肼(72.0g，169.4mmol)和浓硫酸(18ml)在甲醇(360ml)中的混合物在80℃处搅拌16小时。减压除去甲醇。将残余物用饱和碳酸钠水溶液碱化直至ph＝10，并用乙酸乙酯(600ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(500ml
×
2)和盐水(500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。真空浓缩滤液，得到1-溴-2-氟-4-碘-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚(43.0g，80％纯度，50％)，为棕色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.95(s,1h),7.37(d,j＝8.7hz,1h),3.23-3.15(m,2h),2.94-2.85(m,2h),1.89-1.76(m,2h),1.72-1.58(m,4h)。
[0500]
步骤5：1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲腈
[0501]
将1-溴-2-氟-4-碘-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚(43.0g，80％纯度，84.3mmol)、氰化锌(4.95g，42.2mmol)和四(三苯基膦)钯(9.74g，8.4mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(215ml)中的混合物脱气并用氮气回填三次。将反应混合物在氮气下在90℃处搅拌2小时。将冷却的反应混合物用水(1l)稀释并用乙酸乙酯(800ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(500ml
×
3)和盐水(800ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用乙腈(100ml)研磨并过滤。将固体用乙腈(30ml
×
2)洗涤并减压干燥，得到1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲腈(25.5g，94％)，为浅黄色固体。esi-ms[m-h]-计算值(c
14h12
brfn2)305.02、307.02，实测值304.95、306.95。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.99(s,1h),7.58(d,j＝9.0hz,1h),3.24-3.17(m,2h),2.91-2.85(m,2h),1.87-1.78(m,2h),1.70-1.61(m,4h)。
[0502]
步骤6：5-(4-氰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-1-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯
[0503]
将1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲腈(25.0g，81.4mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(30.2g，97.7mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)(5.96g，8.1mmol)和磷酸钾(51.8g，244.2mmol)在四氢呋喃(125ml)和水(31ml)中的混合物脱气并用氮气回填三次并在60℃处在氮气气氛下搅拌2小时。将冷却的混合物用水(600ml)稀释并用乙酸乙酯(500ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(500ml
×
2)和盐水(500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到5-(4-氰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-1-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(45g，粗物质)，为棕色固体，将其不经纯化而直接用于下一步骤。esi-ms[m+h-tbu]
+
计算值(c
24h28
fn3o2)354.22，实测值：354.05。
[0504]
步骤7：5-(4-氨基甲酰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-1-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯
[0505]
向5-(4-氰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-1-基)-3,6-二氢-吡啶-1(2h)-甲酸盐(45g，粗物质)在乙醇(100ml)、四氢呋喃(100ml)和水(100ml)中的混合物中添加parkin催化剂(2.0g，4.68mmol)。将反应混合物在90℃处搅拌16小时。将冷却的混合物用水(500ml)稀释并用乙酸乙酯(500ml
×
3)萃取。将合并的有机层用水(500ml
×
2)和盐水(500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至60％)洗脱，得到5-(4-氨基甲酰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-1-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(20.0g，57％，经两个步骤)，为浅黄色固
六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(2.55g，43％)，为灰白色固体；rt2：8.2min，得到假定的(r)-1-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(2.63g，44％)，为灰白色固体。
[0514]
化合物5-6
[0515]
esi-ms[m+h]
+
计算值(c
22h26
fn3o2)384.20，实测值：384.20。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.75(s,1h),8.00(s,1h),7.49-7.31(m,2h),6.93-6.72(m,1h),6.18-6.02(m,1h),5.73-5.56(m,1h),4.67-4.42(m,1h),4.27-4.05(m,1h),3.63-3.41(m,1.5h),3.19-3.02(m,1h),3.00-2.79(m,4h),2.70-2.62(m,0.5h),2.21-2.02(m,1h),2.01-1.87(m,1h),1.86-1.61(m,7h),1.57-1.37(m,1h)。
[0516]
化合物5-7
[0517]
esi-ms[m+h]
+
计算值(c
22h26
fn3o2)384.20，实测值：384.20。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.74(s,1h),8.00(s,1h),7.47-7.33(m,2h),6.93-6.72(m,1h),6.18-6.03(m,1h),5.75-5.55(m,1h),4.64-4.44(m,1h),4.22-4.04(m,1h),3.64-3.39(m,1.5h),3.19-3.01(m,1h),3.00-2.79(m,4h),2.70-2.62(m,0.5h),2.23-2.02(m,1h),2.01-1.87(m,1h),1.86-1.59(m,7h),1.58-1.37(m,1h)。
[0518]
实施例5-8和5-9
[0519]
制备：
[0520]
(s)-1-(5-(丁-2-炔酰氨基)环己-1-烯-1-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(化合物5-8)和
[0521]
(s)-1-(3-(丁-2-炔酰氨基)环己-1-烯-1-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(化合物5-9)。
[0522][0523]
步骤1：制备n-[3-(4-氰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢-环庚并[b]吲哚-1-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯
[0524][0525]
在氮气气氛下，向1-溴-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲腈(300mg，976μmol)、n-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(473.55mg，1.47mmol)和k3po4(621.95mg，2.93mmol)在1,4-二噁烷(6ml)和水(2ml)中的混合物中添加1,1-双(二苯基膦基)-二茂铁二氯钯(ii)(71.46mg，97.67μmol)。将反应混合物抽空并用氮气气氛吹扫三次并在90℃处搅拌2小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭，用乙酸乙酯(20ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到n-[3-(4-氰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢-环庚并[b]吲哚-1-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(600mg，粗物质)，为棕色固体。
[0526]
步骤2：(s)-1-(3-氨基环己-1-烯-1-基)-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺盐酸盐的制备
[0527][0528]
向n-[(1s)-3-(4-氰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-1-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(600mg，1.42mmol)在etoh(6ml)和水(2ml)中的混合物中添加parkin催化剂(30.26mg，70.83μmol)。将反应混合物在90℃处搅拌12小时。将反应混合物冷却并用水(50ml)淬灭，用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％-60％)洗脱，得到n-[(1s)-3-(4-氨基甲酰基-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-1-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(480mg)，将其溶解在4m hcl(4.30ml)中，在20℃处搅拌2小时。将反应溶剂减压浓缩，得到1-[(5s)-5-氨基环己烯-1-基]-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺hcl盐(480mg)，为黄色固体。
[0529]
步骤3：1-[(5s)-5-(丁-2-炔酰基氨基)环己烯-1-基]-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺和1-[(3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己烯-1-基]-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺的制备
[0530][0531]
向1-[(5s)-5-氨基环己-1-基]-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(200mg，585μmol)和丁-2-炔酸(59.10mg，702.94μmol)在dmf(5ml)中的溶液中添加hatu(311.83mg，820μmol)，然后添加dipea(227.12mg，1.76mmol，306.09μl)。将反应在20℃处搅拌2小时。然后用水(15ml)淬灭，用etoac(20ml
×
3)萃取。将有机萃取物用盐水(40ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过制备型手性sfc在以下流动条件下纯化：柱：greensep basic，30*150mm5um；流动相a：co2，流动相b：meoh(0.1％2m nh
3-meoh)；流速：60ml/min；梯度：30％b；254nm。
[0532]
化合物5-8
[0533]
rt1：(5.10min)1-[(5s)-5-(丁-2-炔酰基氨基)环己烯-1-基]-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(48.6mg)，为浅黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.71(d,j＝5.2hz,1h),8.56(dd,j＝13.6,7.6hz,1h),7.99(s,1h),7.43-7.35(m,2h),5.61(d,j＝10.0hz,1h),4.03-3.93(m,1h),2.95
–
2.64(m,4h),2.38
–
2.17(m,4h),1.94(s,3h),1.90-1.75(m,3h),1.67
–
1.47(m,5h)。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
24h26
fn3o2)408.20，实测值：408.20。
[0534]
化合物5-9
[0535]
rt2：(5.60min)1-[(3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己烯-1-基]-2-氟-5,6,7,8,9,10-六氢环庚并[b]吲哚-4-甲酰胺(6.6mg)，为浅黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.71(d,j＝3.2hz,1h),8.72(dd,j＝10.2,3.6hz,1h),7.99(s,1h),7.42-7.37(m,2h),5.46(d,j＝17.2hz,1h),4.49-4.38(m,1h),2.96
–
2.71(m,4h),2.30
–
2.02(m,2h),1.96-1.51(m,13h)。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
24h26
fn3o2)408.20，实测值：408.20。
[0536]
实施例6-1
[0537]
5-溴-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,2'-[1,3]二氧杂环戊烷]-8-甲酸(化合物6-1)的制备
7,8-二氢-5h-咔唑]-1'-甲酸(1.50g，3.11mmol，71.4％收率)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.43-7.31(m,2h),5.78(s,2h),4.09(s,4h),3.33(br t,j＝3.7hz,4h),3.01(br t,j＝6.0hz,2h),2.08(br t,j＝6.3hz,2h),0.81(t,j＝8.0hz,2h),0.00(s,9h)
[0545]
步骤4：4'-溴螺[1,3-二氧杂环戊烷-2,6'-5,7,8,9-四氢咔唑]-1'-甲酸
[0546]
将tbaf(1m，11.4ml，5.00当量)添加到4'-溴-9'-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)螺[1,3-二氧杂环戊烷-2,6'-7,8-二氢-5h-咔唑]-1'-甲酸(1.10g，2.28mmol，1.00当量)在thf(100ml)中的溶液中并在80℃处搅拌混合物4天。将混合物浓缩，添加水(30ml)，通过过滤除去固体，添加乙腈(5ml)并将混合物在25℃处搅拌1小时。过滤该悬浮液并将分离的固体用dcm洗涤并干燥，得到4'-溴螺[1,3-二氧杂环戊烷-2,6'-5,7,8,9-四氢咔唑]-1'-甲酸(400mg，1.14mmol，49.8％收率，100％纯度)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.10(br s,1h),11.04(s,1h),7.49(d,j＝8.2hz,1h),7.19(d,j＝7.9hz,1h),4.02-3.88(m,4h),3.15(s,2h),2.86(br t,j＝6.3hz,2h),1.90(t,j＝6.5hz,2h)。
[0547]
步骤5：4'-溴螺[1,3-二氧杂环戊烷-2,6'-5,7,8,9-四氢咔唑]-1'-甲酰胺
[0548]
向4'-溴螺[1,3-二氧杂环戊烷-2,6'-5,7,8,9-四氢咔唑]-1'-甲酸(0.60mmol)、氯化铵(137mg，2.56mmol)在dma(2ml)中的混合物中添加hatu(269.38mg，708.46μmol)，并将混合物在室温处继续搅拌30分钟。将混合物用etoac和水稀释，分离有机层，并用etoac萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过硅胶色谱法使用5％-60％etoac/庚烷的梯度进行纯化，得到9-溴-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺，为灰白色固体，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。
[0549]
步骤6：4'-(1-丙-2-烯酰基-3,6-二氢-2h-吡啶-5-基)螺[1,3-二氧杂环戊烷-2,6'-5,7,8,9-四氢咔唑]-1'-甲酰胺
[0550]
向4'-溴螺[1,3-二氧杂环戊烷-2,6'-5,7,8,9-四氢咔唑]-1'-甲酰胺(70mg，199.32μmol)在thf(1ml)、甲醇(0.5ml)和水(0.5ml)中的溶液中添加1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-基]丙-2-烯-1-酮(62.9mg，0.24mmol)、pdcl2(dppf)(66.2mg，0.091mmol)和na2co3(144mg，1.358mmol)。将反应混合物在微波中在70℃处加热1小时。将混合物冷却至室温并用etoac和水稀释。分离有机层，并将水层用etoac再萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并减压浓缩。通过反相色谱法，使用10％-95％mecn/水w/0.10％甲酸的梯度纯化所得残余物。将类似级分合并并在冷冻干燥器上冷冻干燥，得到4'-(1-丙-2-烯酰基-3,6-二氢-2h-吡啶-5-基)螺[1,3-二氧杂环戊烷-2,6'-5,7,8,9-四氢-咔唑]-1'-甲酰胺(34.7mg)，为灰白色固体。1h nmr(dmso-d6)δ:10.85(s,1h),7.98(br s,1h),7.55(d,j＝7.7hz,1h),7.30(br s,1h),6.71-7.00(m,2h),6.07-6.21(m,1h),5.60-5.78(m,2h),4.27(br d,j＝12.0hz,2h),3.90(s,4h),3.66-3.79(m,2h),2.87(br t,j＝1.0hz,2h),2.73(br s,2h),2.30(br d,j＝15.7hz,2h),1.89(br t,j＝6.3hz,2h)。
[0551]
实施例6-2和6-3
[0552]
制备：
[0553]
(s)-5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺(化合物6-2)；和
[0554]
(r)-5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺(化合物6-3)。
[0555][0556]
步骤1：8-亚甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷
[0557][0558]
在0℃处将叔丁醇钾(499ml，499mmol，1m的thf溶液)滴加到甲基三苯基溴化鏻(178g，499.43mmol)在thf(450ml)中的混合物中。在该温度处搅拌1后，在0℃处添加1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-酮(26g，166.48mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌3小时。将反应混合物倒入饱和氯化铵水溶液(500ml)中并用乙醚(300ml
×
4)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(400ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(11％)洗脱，得到8-亚甲基-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸烷(18.0g)，为无色油状物。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ4.67(s,2h),3.96(s,4h),2.28(t,j＝6.8hz,4h),1.70(t,j＝6.8hz,4h)。
[0559]
步骤2：7,10-二氧杂二螺[2.2.46.23]十二烷
[0560][0561]
在氮气下在25℃处向8-亚甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(47.0g，305mmol)和二碘甲烷(278g，1.04mol)在二氯甲烷(500ml)中的搅拌溶液中滴加二乙基锌(1.0m正己烷，518.14ml)。添加后，将反应混合物在25℃处搅拌16小时。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(1l)淬灭并用二氯甲烷(600ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(800ml)洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至9％)洗脱，得到所需化合物(49.5g)，为无色油状物。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ3.93(s,4h),1.66(t,j＝6.4hz,4h),1.39(t,j＝6.0hz,4h),0.25(s,4h)。
[0562]
步骤3：1-(5-溴-4-氟-2-碘苯基)-2-(螺[2.5]辛烷-6-亚基)肼
[0563][0564]
向(5-溴-4-氟-2-碘苯基)肼盐酸盐(60.0g，163.32mmol)在甲醇(500ml)中的溶液中添加7,10-二氧杂二螺[2.2.46.23]十二烷(30.22g，179.65mmol)和乙酸(29.42g，489.95mmol)。将反应混合物在室温处搅拌2小时。真空浓缩反应混合物。将残余物用乙酸乙酯洗涤，过滤并减压干燥，得到1-(5-溴-4-氟-2-碘苯基)-2-(螺[2.5]辛-6-亚基)肼(66.0g)，为白色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ7.75(d,j＝8.1hz,1h),7.45(d,j＝6.6hz,1h),2.50-2.26(m,4h),1.64-1.41(m,4h),0.38(s,4h)。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
14h15
brfin2)436.94、438.94，实测值：436.95、438.95。
[0565]
步骤4：5-溴-6-氟-8-碘-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]
[0566][0567]
向1-(5-溴-4-氟-2-碘苯基)-2-(螺[2.5]辛-6-亚基)肼(66.0g，151.0mmol)在甲醇(600ml)中的混合物中添加浓硫酸(12ml)。将反应混合物在80℃处加热2小时。真空浓缩冷却的反应混合物。将残余物用饱和碳酸氢钠水溶液稀释并用乙酸乙酯(300ml
×
4)萃取。将合并的有机层用水(400ml)和盐水(400ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至15％)洗脱，得到5-溴-6-氟-8-碘-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷](27.0g)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.03(s,1h),7.36(d,j＝8.8hz,1h),2.82(s,2h),2.77(t,j＝6.4hz,2h),1.56(t,j＝6.4hz,2h),0.46-0.34(m,4h)。esi-ms[m-h]-计算值(c
14h12
brfin)417.92、419.92，实测值：417.80、419.80。
[0568]
步骤5：5-溴-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲腈
[0569][0570]
向5-溴-6-氟-8-碘-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷](26.6g，63.32mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(250ml)中的溶液中添加氰化锌(15.37g，31.66mmol)和四(三苯基膦)钯(7.32g，6.33mmol)。将混合物脱气并用氮气回填五次并在90℃处搅拌2小时。将冷却的混合物用水(600ml)稀释并用乙酸乙酯(400ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(400ml)和盐水(400ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至30％)洗脱，得到5-溴-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙
烷]-8-甲腈(18.0g)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.01(s,1h),7.53(d,j＝9.2hz,1h),2.80(s,2h),2.76(t,j＝6.4hz,2h),1.57(t,j＝6.0hz,2h),0.46-0.33(m,4h)。esi-ms[m-h]-计算值(c
15h12
brfn2)317.02、319.02，实测值317.10、319.10。
[0571]
步骤6：5-(8-氰基-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯
[0572][0573]
将5-溴-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲腈(17.5g，54.83mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(20.34g，65.80mmol)、磷酸钾(34.92g，164.49mmol)和pd(dppf)cl2(4.01g，5.48mmol)在四氢呋喃(200ml)和水(50ml)中的混合物脱气并用氮气回填五次。将反应混合物在氮气下在60℃处搅拌2小时。将冷却的反应混合物用水(300ml)稀释并用乙酸乙酯(300ml
×
3)萃取。将合并的有机层用盐水(300ml)洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩，得到5-(8-氰基-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(40.0g，粗物质)，为棕色固体。esi-ms[m-h]-计算值(c
25h28
fn3o2)420.22，实测值：420.20。
[0574]
步骤7：5-(8-氨基甲酰基-6-氟-1,2,4,9-四氢螺-[咔唑-3,1'-环丙烷]-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯
[0575][0576]
向5-(8-氰基-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(40.0g，粗物质)在乙醇(100ml)、水(100ml)和四氢呋喃(100ml)中的混合物中添加parkin催化剂(2.33g，5.46mmol)。将反应混合物在90℃处加热2小时。将冷却的反应混合物用水(400ml)稀释并用乙酸乙酯(300ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(50％)洗脱，得到5-(8-氨基甲酰基-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(22.0g，91％，经两个步骤)，为黄色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
25h30
fn3o3)440.23，实测值：440.20。
[0577]
步骤8：3-(8-氨基甲酰基-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0578][0579]
将5-(8-氨基甲酰基-6-氟-1,2,4,9-四氢螺-[咔唑-3,1'-环丙烷]-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-甲酸叔丁酯(18.0g，40.95mmol)和10％碳载钯(18.0g)在乙醇(150ml)和四氢呋喃(150ml)中的混合物在氢气(10atm)下在25℃处搅拌5天。过滤反应混合物。真空浓缩滤液。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用四氢呋喃/石油醚(15％)洗脱，得到3-(8-氨基甲酰基-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(12.0g)，为白色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.83(s,1h),7.99(s,1h),7.51-7.30(m,2h),4.20-3.84(m,2h),3.30-3.20(m,1h),2.90-2.60(m,5h),2.12-1.82(m,2h),1.71-1.48(m,3h),1.39(s,9h),1.30-0.92(m,2h),0.52-0.26(m,4h)。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
25h32
fn3o3)442.24，实测值：442.20。
[0580]
步骤9：6-氟-5-(哌啶-3-基)-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺2,2,2-三氟乙酸盐
[0581][0582]
向3-(8-氨基甲酰基-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(12.0g，27.18mmol)在二氯甲烷(120ml)中的溶液中添加三氟乙酸(20ml)。将反应混合物在25℃处搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，得到6-氟-5-(哌啶-3-基)-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(12.3g，粗物质)，为棕色油状物。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
20h24
fn3o)342.19，实测值：342.20。
[0583]
步骤10：5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺
[0584][0585]
向7-氟-8-(哌啶-3-基)-1,2,3,4-四氢环戊二烯并[b]吲哚-5-甲酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(12g，粗物质)在四氢呋喃(100ml)和水(25ml)中的混合物中添加碳酸氢钠(22.13g，
263.48mmol)。搅拌10分钟后，在0℃处添加丙烯酰氯(2.86g，31.62mmol)。将反应混合物在0℃处搅拌1小时。将反应混合物用水(300ml)稀释并用乙酸乙酯(300ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过制备型flash在以下流动条件下纯化：柱：xb c18 50x250mm，10μm；流动相a：水(10mmol/l nh4hco3)，流动相b：乙腈；流速：100ml/min；梯度：在40分钟内30％b至55％b；254nm；rt：27.0min，得到5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺(5.4g，52％，经两个步骤)，为灰白色固体。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
23h26
fn3o2)396.20，实测值：396.25。
[0586]
步骤11：(s)-5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢-螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺(化合物6-2)和(r)-5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺(化合物6-3)
[0587][0588]
将5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺(5.4g)通过制备型sfc在以下条件下分离：柱：chiralpak ad-h sfc，5
×
25cm，5μm；流动相a：co2，流动相b：iproh(0.5％2m nh
3-meoh)；流速：180ml/min；梯度：50％b；220nm：
[0589]
rt1：3.32min：
[0590]
化合物6-2(s)-5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺(2.4g，92％纯)，以及
[0591]
rt2：5.42min
[0592]
化合物6-3(r)-5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺(2.24g，41％)，为浅黄色固体。
[0593]1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.84(s,1h),8.01(s,1h),7.53-7.35(m,2h),6.89-6.79(m,1h),6.20-6.01(m,1h),5.77-5.52(m,1h),4.52(t,j＝12.0hz,1h),4.20-4.00(m,1h),3.61-3.40(m,0.5h),3.32-2.90(m,2h),2.88-2.53(m,4.5h),2.20-2.00(m,1h),2.00-1.71(m,2h),1.67-1.34(m,3h),0.49-0.23(m,4h)。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
23h26
fn3o2)396.20，实测值：396.35。
[0594]
将化合物6-2通过制备型手性sfc在以下条件下进一步纯化：柱：daicel dcpak p4vp，20mm
×
250mm，5μm；流动相a：co2，流动相b：meoh(0.1％2m nh
3-meoh)；流速：50ml/min；梯度：25％b；254nm；rt：4.22min，得到(s)-5-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-6-氟-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酰胺(1.99g，37％)，为浅黄色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.84(s,1h),8.01(s,1h),7.53-7.35(m,2h),6.89-6.79(m,1h),6.20-6.01(m,1h),5.77-5.52(m,1h),4.52(t,j＝12.9hz,1h),4.20-4.00(m,1h),3.61-3.40(m,0.5h),3.32-2.90(m,2h),2.88-2.53(m,4.5h),2.20-2.00(m,1h),2.00-1.71(m,2h),1.67-1.34(m,3h),0.50-0.25(m,4h)。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
23h26
fn3o2)396.20，实测值：396.35。
[0595]
实施例7-1
[0596]
4-(1-丙-2-烯酰基-3,6-二氢-2h-吡啶-5-基)螺[5,7,8,9-四氢-咔唑-6,1'-环丙烷]-1-甲酰胺(化合物7-1)的制备。
[0597][0598]
步骤1：4-溴-2-肼基苯甲酸
[0599]
在0℃处将亚硝酸钠(9.58g，138mmol，1.20当量)在水(～1mol/l)中的溶液滴加到2-氨基-4-溴苯甲酸(25.0g，115mmol，1.00当量)在hcl(12m，385ml，40.0当量)中的悬浮液中，并将混合物在0℃处搅拌1小时。然后在0℃处滴加sncl2.2h2o(78.3g，347mmol，3.00当量)在hcl(12m)(～2mol/l)中的溶液，并将混合物在0℃-10℃处搅拌16小时。将混合物过滤并冷冻干燥，得到黄色固体。将二氯甲烷(200ml)和乙腈(300ml)添加到固体中，并将所得混合物在20℃处搅拌2小时，然后过滤。将分离的固体用乙腈洗涤，然后干燥，得到4-溴-2-肼基苯甲酸盐酸盐(15.0g，56.0mmol)，为白色固体。
[0600]
步骤2：5-溴-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酸
[0601]
将4-溴-2-肼基苯甲酸盐酸盐与螺环酮在zncl2的存在下在异丙醇或乙醚中如下偶联：将zncl2(1.50当量)的ipa(20ml)或dme(30ml)溶液添加到4-溴-2-肼基苯甲酸盐酸盐(500mg，1.00当量)和环酮(1.05当量)的悬浮液中，并将混合物在90℃处在n2下搅拌1～7天。通过蒸发除去溶剂，得到油状物，将其通过制备型hplc纯化。
[0602]
步骤3：4-溴螺[5,7,8,9-四氢咔唑-6,1'-环丙烷]-1-甲酰胺
[0603]
向4-溴螺[5,7,8,9-四氢咔唑-6,1'-环丙烷]-1-甲酸(100mg，312.32μmol)、氯化铵(66.83mg，1.25mmol)在dma(1ml)中的混合物中添加hatu(131.32mg，345.38μmol)，将混合物在室温处继续搅拌30分钟。将混合物用etoac和水稀释，分离有机层，并将水层用etoac再萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过硅胶色谱法使用5％-60％etoac/庚烷的梯度纯化，得到4-溴螺[5,7,8,9-四氢咔唑-6,1'-环丙烷]-1-甲酰胺(80.5mg)，为白色固体。
[0604]
步骤4：4-(1-丙-2-烯酰基-3,6-二氢-2h-吡啶-5-基)螺[5,7,8,9-四氢咔唑-6,1'-环丙烷]-1-甲酰胺(化合物6-1)
[0605]
向4-溴螺[5,7,8,9-四氢咔唑-6,1'-环丙烷]-1-甲酰胺(75mg，234.97μmol)在thf
(1ml)、甲醇(0.5ml)和水(0.5ml)中的溶液中添加1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-基]丙-2-烯-1-酮(74.19mg，281.96μmol)、pdcl2(dppf)(66.2mg，0.091mmol)和na2co3(144mg，1.358mmol)。将反应混合物在约70℃处加热16小时。将混合物冷却至室温并用etoac和水稀释。分离有机层，并将水层用etoac再萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并减压浓缩。通过反相色谱法，使用10％-95％mecn/水w/0.10％甲酸的梯度纯化所得残余物。将类似级分合并并在冷冻干燥器上冷冻干燥，得到4-(1-丙-2-烯酰基-3,6-二氢-2h-吡啶-5-基)螺[5,7,8,9-四氢咔唑-6,1'-环丙烷]-1-甲酰胺(42mg)，为浅黄色固体。1h nmr(dmso-d6)δ:10.80(s,1h),7.96(br s,1h),7.53(d,j＝7.7hz,1h),7.29(br s,1h),6.69-6.96(m,2h),6.13(br d,j＝16.5hz,1h),5.60-5.76(m,2h),4.23(br d,j＝12.2hz,2h),3.62-3.79(m,2h),2.80(br t,j＝5.0hz,2h),2.42(br d,j＝6.3hz,2h),2.18-2.35(m,2h),1.56(br t,j＝6.0hz,2h),0.22-0.43(m,4h)。
[0606]
表6中所示的三环吲哚使用与实施例6或7中所述类似的方法制备。
[0607]
表6：三环吲哚
[0608]
[0609][0610]
由表6中所示的中间体制备如表7中所示的式(i-c-i)的化合物7-2至7-9。
[0611]
表7：化合物7-2至7-9
[0612]
[0613][0614]
根据类似的程序，制备如表8中所示的式(i-c-ii)的化合物7-10至7-25。
[0615]
表8：化合物7-10至7-25
[0616]
[0617]
[0618]
[0619][0620]
根据类似的程序，制备如表9中所示的式(i-c-iii)的化合物7-26至7-29。
[0621]
表9：化合物7-26至7-29
[0622][0623]
[0624]
实施例8-1
[0625]
9-(1-丙烯酰基-1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-1,3,4,5-四氢-噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺(化合物8-1)的制备
[0626][0627]
步骤1：1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-基]丙-2-烯-1-酮
[0628]
在0℃处向5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(2.0g，9.57mmol)在thf(20ml):水(5ml)中的溶液中添加nahco3(3.21g，38.26mmol，1.49ml)，将混合物搅拌5分钟。向其中添加丙-2-烯酰氯(952.30mg，10.52mmol，857.93μl)并使反应在0℃处继续15分钟。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和nahco3(水溶液)、盐水洗涤，经na2so4干燥并减压浓缩，得到1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-基]丙-2-烯-1-酮(700mg)，为白色固体。
[0629]
步骤2：5-溴-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酸
[0630]
将zncl2(1.50当量)的ipa(20ml)或dme(30ml)溶液添加到4-溴-2-肼基苯甲酸盐酸盐(500mg，1.00当量)和噻喃(1.05当量)的悬浮液中，并将混合物在90℃处在n2下搅拌7天。通过蒸发除去溶剂，得到油状物，将其通过制备型hplc纯化。1h nmr(400mhz,dmso-d6)d 13.1(s,1h),11.1(s,1h),7.51(d,j＝8.4hz,2h),7.21(d,j＝8.4hz,2h),4.13(s,2h),3.00(m,2h),2.90(m,2h)。
[0631]
步骤3：5-溴-1,2,4,9-四氢螺[咔唑-3,1'-环丙烷]-8-甲酸
[0632]
向9-溴-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺(200mg，640.65μmol)、氯化铵(137.08mg，2.56mmol)在dma(2ml)中的混合物中添加hatu(269.38mg，708.46μmol)，并使混合物在室温处继续搅拌30分钟。将混合物用etoac和水稀释，分离有机层，并用etoac萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过硅胶色谱法使用5％-60％etoac/庚烷的梯度进行纯化，得到9-溴-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺，为灰白色固体，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。
[0633]
步骤4：9-(1-丙-2-烯酰基-3,6-二氢-2h-吡啶-5-基)-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺(化合物8-1)
[0634]
向9-溴-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺(100mg，321.34μmol)在thf(1ml)、甲醇(0.5ml)和水(0.5ml)中的溶液中添加1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-基]丙-2-烯-1-酮(101.47mg，385.61μmol)、pdcl2(dppf)(66.2mg，0.091mmol)和na2co3(144mg，1.358mmol)。将反应混合物在70℃处加热16小时。将混合物冷却至室温并用etoac和水稀释。分离有机层，并将水层用etoac再萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并减压浓缩。通过反相色谱法，使用10％-95％mecn/水w/0.10％甲酸的梯度纯化所得残余物。将类似级分合并并在冷冻干燥器上冷冻干燥，得到9-(1-丙-2-烯酰基-3,6-二氢-2h-吡啶-5-基)-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺(35.9mg)，为灰白色固体。1h nmr(dmso-d6)δ:10.95(s,1h),8.00(br s,1h),7.58(d,j＝7.7hz,1h),7.33(br s,1h),6.73-6.99(m,2h),6.04-6.23(m,1h),5.60-5.82(m,2h),4.22-4.38(m,2h),3.64-3.84(m,4h),3.02(br d,j＝5.0hz,2h),2.81-2.96(m,2h),2.31(br d,j＝14.5hz,2h)。
[0635]
实施例9
[0636]
9-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-8-氟-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺2-氧化物(化合物9-1和9-2)的制备
[0637]
b]吲哚-6-甲酸2-氧化物(120mg，粗物质)，为白色固体。c
12
h9brfno3s
+
[m+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值344.95，实测值345.9。
[0651]
步骤7：9-溴-8-氟-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺2-氧化物
[0652]
向9-溴-8-氟-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酸2-氧化物(120mg，0.35mmol)在dmf(2ml)中的溶液中添加氯化铵(56.16mg，1.05mmol)和diea(135mg，1.05mmol)，将反应混合物在室温处搅拌1小时。lcms显示反应完成。将混合物用水(10ml)稀释，用ea(3
×
10ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型tlc(dcm/meoh＝10:1)纯化，得到所需产物9-溴-8-氟-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺2-氧化物(30mg，25％两步收率)，为无色油状物。c
12h10
brfn2o2s
+
[m+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值343.96，实测值345.0。
[0653]
步骤8：5-(6-氨基甲酰基-8-氟-2-氧-1,3,4,5-四氢-噻喃并[4,3-b]吲哚-9-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯
[0654]
向配备有搅拌棒的10ml微波管中添加9-溴-8-氟-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺2-氧化物(20mg，0.06mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯10(41mg，0.115mmol)、pd(dppf)cl2(5mg，0.0057mmol)、碳酸钠(18mg，0.174mmol)，然后添加二噁烷(2ml)。将该管抽真空，用n2再填充并加盖，然后在微波下在搅拌下加热至80℃持续2小时。然后过滤反应混合物，用meoh(5ml)洗涤残余物。浓缩合并的滤液。将残余物通过制备型tlc(dcm/meoh＝10:1)纯化，得到5-(6-氨基甲酰基-8-氟-2-氧化-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-9-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(25mg，86％收率)，为无色油状物。c
26h28
fn3o4s
+
[m-boc+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值497.18，实测值398.2。
[0655]
步骤9：8-氟-9-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-1,3,4,5-四氢-噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺2-氧化物
[0656]
向5-(6-氨基甲酰基-8-氟-2-氧化-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-9-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(20mg，0.04mmol)在dcm(2ml)中的溶液中添加tfa(0.5ml)，将反应混合物在室温处搅拌1小时。lcms显示反应完成。浓缩反应混合物，得到粗产物8-氟-9-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺-2-氧化物(16mg，粗物质)，为红色油状物。c
21h20
fn3o2s
+
[m+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值397.13，实测值398.2。
[0657]
步骤10：9-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-8-氟-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺2-氧化物(化合物9-1和9-2)
[0658]
向8-氟-9-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-1,3,4,5-四氢噻喃并[4,3-b]吲哚-6-甲酰胺2-氧化物(16mg，粗物质)在thf(3ml)中的溶液中添加diea(26mg，0.2mmol)，然后在-70℃处缓慢添加丙烯酰氯(4mg，0.04mmol)，将反应混合物在-70℃处搅拌1小时。lcms显示反应完成。将反应混合物在室温处小心浓缩。将残余物通过制备型hplc(流动相：0.1％fa/acn/h2o)纯化，得到所需产物(峰a；1.8mg，10％两步收率)，为白色固体和(峰b；1.3mg，7％两步收率)，为白色固体。
[0659]
峰a：
[0660]1h nmr(400mhz,dmso)δ11.29(s,1h),8.13(s,1h),7.62(d,j＝10.4hz,1h),7.55
(s,1h),7.36-7.34(m,2h),7.14-7.12(m,1h),6.80-6.74(m,1h),6.14-6.10(m,1h),5.73-5.65(m,1h),4.88-4.69(m,2h),3.70(br s,2h),3.23-3.14(m,4h),2.99-2.90(m,2h),2.88-2.31(m,2h)。
[0661]c24h32
n6o2s
+
[m+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值451.14，实测值452.1。
[0662]
峰b：
[0663]1h nmr(400mhz,dmso)δ11.28(s,1h),8.12(s,1h),7.61(d,j＝10.8hz,1h),7.54(s,1h),7.36-7.30(m,2h),7.13-7.10(m,1h),6.79-6.72(m,1h),6.13-6.08(m,1h),5.72-5.62(m,1h),4.87-4.69(m,2h),3.81-3.60(m,2h),3.17-3.11(m,3h),2.94(br s,1h),2.42-2.30(m,2h)。
[0664]c24h32
n6o2s
+
[m+h]
+
m/z的hrms(esi)计算值451.14，实测值452.1。
[0665]
表10中所示的化合物9-3至9-8以与针对实施例9所述类似的方式制备。
[0666]
表10：化合物9-3至9-8
[0667]
[0668][0669]
实施例10-1和10-2
[0670]
制备：
[0671]
(r)-8-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]-吲哚-5-甲酰胺(化合物10-1)；和
[0672]
(s)-8-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊二烯并[b]吲哚-5-甲酰胺(化合物10-2)。
[0673][0674]
步骤1.(5-溴-4-氟-2-碘-苯基)肼
[0675][0676]
将亚硝酸钠水溶液(3m，129ml)滴加到5-溴-4-氟-2-碘苯胺(102g，323mmol)在37％hcl水溶液(500ml)中的冷悬浮液中，将其在-10℃处在nacl冰浴上以使得温度不超过0℃的速率搅拌。将所得悬浮液在0℃处搅拌1小时，然后用sncl2.h2o(7m，138ml)在37％hcl水溶液中的溶液处理。将温度升高至10℃并将混合物在冰浴中搅拌1小时。通过真空过滤收集所得沉淀，用浓hcl(3
×
100ml)和etoac(3
×
500ml)洗涤，然后用etoac洗涤直至滤液洗涤物为无色。将所得固体减压干燥过夜，得到(5-溴-4-氟-2-碘-苯基)肼(96.8g)，为灰白色固体。
[0677]
步骤2. 8-溴-7-氟-5-碘-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚
[0678][0679]
在室温处向(5-溴-4-氟-2-碘-苯基)肼(96.65g，263.1mmol)和环戊酮(23.24g，276.2mmol，24.5ml)在甲醇(450ml)中的混合物中添加催化量(2.5体积％)的硫酸(25.80g，263.08mmol，11.25ml)。该反应略微放热并将混合物在室温处搅拌30分钟。通过lc/ms观察到中间体5-溴-n-(亚环戊基氨基)-4-氟-2-碘-苯胺，但未分离。将反应混合物在80℃处加热16小时，然后冷却并减压除去甲醇。将残余物用饱和碳酸氢钠水溶液处理并用乙酸乙酯(3
×
)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用2％乙酸乙酯/庚烷洗脱顶部点，然后用5％乙酸乙酯/庚烷洗脱产物。将产物级分合并并减压浓缩，得到8-溴-7-氟-5-碘-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚(50.7g)，为灰白色固体。将不纯的级分合并并减压浓缩。将所得残余物通过硅胶色谱法纯化，使用2％-10％etoac/庚烷的梯度，得到8-溴-7-氟-5-碘-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚(9.78g)，为灰白色固体。
[0680]
步骤3. 8-溴-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲腈
吡啶-1-甲酸叔丁酯(11g，28.84mmol)和无水碳酸钾(11.96g，86.51mmol)在dmso(110ml)中的搅拌混合物中添加过氧化氢(14.01g，144.19mmol，12.74ml，35％纯度)。该反应放热，10分钟后发生剧烈的气体形成。将反应混合物在室温处搅拌2小时，然后通过添加水淬灭并用乙酸乙酯(3
×
)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。向所得残余物中添加水，并通过真空过滤收集所得沉淀，得到5-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.06g)，为浅棕色固体。
[0689]
步骤6. 3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0690][0691]
将5-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，10.01mmol)和10％碳载钯(1.07g，10.01mmol)在乙醇(30ml)和四氢呋喃(30ml)中的混合物在50℃处在氢气(2atm-3atm)下搅拌12小时。将混合物过滤，将滤液真空浓缩，得到3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,3a,4,8b-六氢环戊二烯并[b]吲哚-8-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.8g，粗物质)，为黄色固体。在25℃处向粗化合物(3.8g，9.42mmol)的thf(40ml)溶液中添加mno2(8.19g，94.18mmol)。将反应混合物在60℃处搅拌2小时。完成后，将冷却的混合物过滤，将滤液真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％至50％)洗脱，得到3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.4g，粗物质)，为黄色固体。在70℃处将固体溶解在thf(20ml)中，然后添加石油醚(30ml)并搅拌1小时。通过过滤收集沉淀的固体，用石油醚(30ml
×
2)洗涤并真空干燥，得到3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(800mg)，为黄色固体。
[0692]
步骤7. 7-氟-8-(3-哌啶基)-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺
[0693][0694]
向3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.6g，11.46mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液中添加三氟乙酸(10ml)。将反应混合物在25℃处搅拌1小时。将所得混合物真空浓缩，得到7-氟-8-(3-哌啶基)-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(7.2g，粗物质)，为棕色油状物。
[0695]
步骤8. 7-氟-8-(1-丙-2-烯酰基-3-哌啶基)-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺
4.02(m,1h),3.69-3.43(m,0.5h),3.25-2.93(m,2h),2.92-2.58(m,4.5h),2.48-2.33(m,2h),2.22-1.98(m,1h),1.97-1.70(m,2h),1.63-1.34(m,1h)。
[0705]
实施例10-3和10-4
[0706]
制备：
[0707]
8-[(3s)-3-(丁-2-炔酰氨基)环己烯-1-基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(化合物10-3)；和
[0708]
8-[(5s)-5-(丁-2-炔酰氨基)环己烯-1-基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(化合物10-4)。
[0709][0710]
步骤1：[(5s)-5-(叔丁氧基羰基氨基)环己烯-1-基]三氟-甲磺酸酯
[0711][0712]
将n-[(1s)-3-氧代环己基]氨基甲酸叔丁酯(5g，23.44mmol)和1,1,1-三氟-n-苯基-n-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(10.89g，30.48mmol)在thf(50ml)中的溶液抽空并用氮气气氛冲洗三次。在-70℃处在氮气氛下将双(三甲基甲硅烷基)氨基钠(2m，25.79ml)滴加到溶液中，并将反应混合物在-50℃处搅拌2小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠(50ml)淬灭，用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液，得到粗产物，将其通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％-7％)洗脱，得到[(5s)-5-(叔丁氧基-羰基氨基)环己烯-1-基]三氟甲磺酸酯(3.2g)，为白色固体。
[0713]
步骤2：n-[(1s)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯
[0714][0715]
在氮气气氛下向[(5s)-5-(叔丁氧基羰基氨基)环己烯-1-基]三氟甲磺酸酯(3.2g，9.27mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(2.59g，10.19mmol)和koac(2.73g，27.80mmol，1.74ml)在二噁烷
(30ml)中的混合物中添加1,1-双(二苯基膦基)二茂铁二氯-钯(ii)(756mg，926μmol)。将反应混合物抽空并用n2气氛吹扫三次，然后在100℃处搅拌2小时。将反应混合物冷却并用水(50ml)淬灭，用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取并将合并的有机萃取物用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液，得到粗产物，将其通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％-15％)洗脱，得到n-[(1s)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(2.2g，6.81mmol，73.45％收率)，为无色油状物。
[0716]
步骤3：n-[(1s)-3-(5-氰基-7-氟-1,2,3,4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-8-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯
[0717][0718]
在氮气气氛下向8-溴-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲腈(1g，3.58mmol)、n-[(1s)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.39g，4.30mmol)和k3po4(2.28g，10.75mmol)在thf(8ml)和水(2ml)中的混合物中添加1,1双(二苯基膦基)二茂铁二氯钯(ii)(262mg，358μmol)。将反应混合物抽空并用氮气吹扫三次，然后在70℃处搅拌8小时。将反应混合物用水(30ml)淬灭，用乙酸乙酯(20ml
×
3)萃取，并将合并的有机萃取物用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过使用硅胶的柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％-20％)洗脱，得到所需的n-[(1s)-3-(5-氰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1g)，为黄色固体。
[0719]
步骤4：n-[(1s)-3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-8-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯
[0720][0721]
向n-[(1s)-3-(5-氰基-7-氟-1,2,3,4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-8-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.0g，2.53mmol)在乙醇(30ml)和水(8ml)中的混合物中添加parkin催化剂(54.0mg，126μmol)。将反应混合物在90℃处搅拌12小时。将反应混合物冷却并用水(50ml)淬灭并用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油
醚(0％-60％)洗脱，得到n-[(1s)-3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-8-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(860mg)，为黄色固体。
[0722]
步骤5：8-[(5s)-5-氨基环己-1-基]-7-氟-1,2,3,4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-5-甲酰胺盐酸盐
[0723][0724]
将n-[(1s)-3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊二烯并[b]吲哚-8-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，483μmol)和hcl(4m的二噁烷溶液，1.91ml)的溶液在20℃处搅拌2小时。真空浓缩反应混合物，得到8-[(5s)-5-氨基环己-1-基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(180mg)，为黄色固体，其不经进一步纯化即直接使用。
[0725]
步骤6：8-[(3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己烯-1-基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]-吲哚-5-甲酰胺和8-[(5s)-5-(丁-2-炔酰基氨基)环己烯-1-基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊二烯并[b]吲哚-5-甲酰胺
[0726][0727]
向来自上述步骤c的胺(150mg，428μmol)和丁-2-炔酸(43.2mg，514μmol)在dmf(5ml)中的溶液中添加hatu(228mg，600μmol)，然后添加dipea(166mg，1.29mmol，224μl)。将反应溶液在20℃处搅拌2小时。将反应用水(15ml)淬灭，用乙酸乙酯(20ml
×
3)萃取并将有机相用盐水(40ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物使用制备型手性sfc在以下流动条件下纯化：柱：greensep basic，30*150mm 5um；流动相a：co2，流动相b：ipa(0.5％2m nh
3-meoh)；流速：60ml/min；梯度：40％b；254nm，得到：
[0728]
化合物10-4 rt1：(1.98min)
[0729]
8-[(5s)-5-(丁-2-炔酰基氨基)环己烯-1-基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊二烯并[b]吲哚-5-甲酰胺(34.1mg)，为浅黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.92(s,1h),8.54(d,j＝7.6hz,1h),8.00(s,1h),7.44-7.40(m,2h),5.68(s,1h),4.00-3.88(m,1h),2.80(t,j＝7.2hz,2h),2.66(t,j＝7.2hz,2h),2.41-2.26(m,6h),1.95(s,3h),1.88-1.84(m,1h),1.57-1.54(m,1h)。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
22h12
fn3o2)380.17，实测值：380.10；以及
[0730]
化合物10-3rt2：(3.23min)
[0731]
8-[(3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己烯-1-基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊二烯并
[b]吲哚-5-甲酰胺(12.2mg)，为浅黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.93(s,1h),8.71(d,j＝8.0hz,1h),8.00(s,1h),7.44-7.40(m,2h),5.52(s,1h),4.50-4.44(m,1h),2.80(t,j＝7.2hz,2h),2.69(t,j＝7.2hz,2h),2.43-2.32(m,3h),2.19-2.12(m,1h),1.95(s,3h),1.91-1.83(m,2h),1.74-1.53(m,2h)。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
22h12
fn3o2)380.17，实测值：380.15。
[0732]
实施例10-5和10-6
[0733]
制备：
[0734]
8-[(1s,3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(化合物10-5)；和
[0735]
8-[(1r,3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己基]-7-氟-1,2,3,4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-5-甲酰胺(化合物10-6)。
[0736][0737]
步骤1. 8-[(3s)-3-氨基环己基]-7-氟-1,2,3,4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-5-甲酰胺
[0738][0739]
向n-[(1s)-3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊二烯并[b]吲哚-8-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(960mg，2.32mmol)在thf(10ml)和乙醇(10ml)中的溶液中添加10％pd/c(900mg，845μmol)，并将反应混合物在50℃处在氢气气氛(20psi)下搅拌16。将反应冷却至室温并通过硅藻土过滤。用thf洗涤滤饼，浓缩滤液，得到粗产物。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％-40％)洗脱，得到n-[(1s)-3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,3a,4,8b-六氢环戊并[b]吲哚-8-基)环己基]氨基甲酸叔丁酯(700mg，1.68mmol)，为黄色固体，将其再悬浮于thf(8ml)中并用mno2(1.46g，16.7mmol)处理。将反应混合物在60℃处搅拌3小时，然后冷却至室温并通过硅藻土过滤。用thf洗涤滤饼，浓缩滤液，得到粗产物。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％-40％)洗脱，得到n-[(1s)-3-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)环己基]氨基甲酸叔丁酯(255mg)，为黄色固体。然后将该物质溶解在4.0m hcl的二噁烷溶液(10ml)中，将反应混合物在25℃处搅拌2小时。将混合物减压蒸发至干，得到8-[(3s)-3-氨基环己基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(230mg)，为黄色固体，其不经进一步纯化而用
于下一反应。
[0740]
步骤2. 8-[(1r,3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己基]-7-氟-1,2,3,4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-5-甲酰胺和8-[(1s,3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺
[0741][0742]
向8-[(3s)-3-氨基环己基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(169.34mg，536.93μmol)、丁-2-炔酸(54.17mg，644.32μmol)和hatu(265mg，698μmol)在dmf(15ml)中的溶液中添加dipea(347mg，2.68mmol，467μl)。将反应混合物在25℃处搅拌2小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭并用etoac(50ml
×
3)萃取。合并有机萃取物，用盐水(40ml
×
3)洗涤，经无水硫酸钠干燥，真空蒸发，得到粗产物。将残余物通过制备型hplc在以下条件下纯化：柱：kinetex evo c18 column，30*150，5um；流动相a：水(50mm nh4hco3)，流动相b：acn；流速：25ml/min；梯度：在12分钟内40b至50b；254nm。
[0743]
化合物10-5
[0744]
rt2：(8.97min)，得到假定的8-[(1s,3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(23.8mg)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.91(s,1h),8.51(d,j＝6.4hz,1h),7.97(bs,1h),7.38(d,j＝12.8hz,2h),3.71(m,1h),3.05(m,1h),2.96-2.92(m,2h),2.80(t,j＝7.0hz,2h),2.54-2.40(m,2h),1.91-1.75(m,4h),1.70-1.63(m,2h),1.55-1.44(m,2h)。esi-ms[m+h]
+
＝382.35。
[0745]
化合物10-6
[0746]
rt1：(8.13min)，假定的8-[(1r,3s)-3-(丁-2-炔酰基氨基)环己基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(43.5mg)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.88(s,1h),8.66(d,j＝6.4hz,1h),7.95(bs,1h),7.36(d,j＝12.8hz,2h),4.06(m,1h),2.96-2.92(m,2h),2.80(t,j＝7.0hz,2h),2.54-2.40(m,2h),1.91-1.75(m,4h),1.70-1.63(m,2h),1.55-1.48(m,2h)。esi-ms[m+h]
+
＝382.35。
[0747]
实施例10-7
[0748]
8-[(3s)-3-[丁-2-炔酰基(甲基)氨基]-1-哌啶基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(化合物10-7)的制备。
[0749][0750]
步骤1.n-[(3s)-1-(5-氰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)-3-哌啶基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯
[0751][0752]
向8-溴-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲腈(400mg，1.43mmol)和n-甲基-n-[(3s)-3-哌啶基]氨基甲酸叔丁酯(368.55mg，1.72mmol)在二噁烷(8ml)中的混合物中添加三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(131.24mg，143.31μmol)、二环己基-[2-(2,6-二异丙氧基苯基)苯基]磷烷(133.75mg，286.63μmol)和碳酸铯(1.40g，4.30mmol)。将反应混合物抽空并用氮气气氛吹扫三次并在100℃处搅拌16小时。将反应混合物冷却并用水(10ml)淬灭，用乙酸乙酯(15ml
×
3)萃取并将合并的有机萃取物用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到n-[(3s)-1-(5-氰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)-3-哌啶基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(600mg，粗物质)，为棕色固体。
[0753]
步骤2. 7-氟-8-[(3s)-3-(甲基氨基)-1-哌啶基]-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺盐酸盐
[0754][0755]
向n-[(3s)-1-(5-氰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-8-基)-3-哌啶基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(600mg，1.45mmol)在etoh(10ml)和h2o(3ml)中的混合物中添加parkin催化剂(62.14mg，145.45μmol)。将反应混合物在90℃处搅拌2小时。将反应混合物冷却并用水(30ml)淬灭并用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(0％-40％)洗脱，得到300mg n-[(3s)-1-(5-氨基甲酰基-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并
[b]吲哚-8-基)-3-哌啶基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体，将其用4ml 4m hcl/二噁烷覆盖并在20℃处搅拌2小时。真空浓缩反应混合物，得到7-氟-8-[(3s)-3-(甲基氨基)-1-哌啶基]-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(260mg)，为黄色固体，其不经进一步纯化即直接使用。
[0756]
步骤3. 8-[(3s)-3-[丁-2-炔酰基(甲基)氨基]-1-哌啶基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(化合物10-7)
[0757][0758]
向丁-2-炔酸(79mg，944μmol)在dmf(5ml)中的溶液中添加hatu(418mg，1.10mmol)，然后添加dipea(305mg，2.36mmol，411μl)。将反应溶液在20℃处搅拌2小时。将反应用水(15ml)淬灭，用etoac(20ml
×
3)萃取。将有机萃取物用盐水(40ml)洗涤，经无水na2so4干燥并过滤。将滤液减压浓缩并通过制备型hplc在以下流动条件下纯化：柱：x-select csh obd column 30*150mm 5um；流动相a：水(10mm/nh4hco3+0.1％nh4oh)，流动相b：acn；流速：60ml/min；梯度：在7分钟内37b至57b；220nm，得到8-[(3s)-3-[丁-2-炔酰基(甲基)氨基]-哌啶-1-基]-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺(70.9mg)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.87(d,j＝9.2hz,1h),7.91(s,1h),7.45
–
7.39(m,1h),7.30(s,1h),4.567
–
4.38(m,1h),3.25
–
3.06(m,5h),3.00
–
2.92(m,2h),2.88-2.78(m,4h),2.47-2.38(m,2h),2.02(d,j＝6.8hz,3h),1.87-1.65(m,4h)。esi-ms[m+h]
+
计算值(c
22h25
fn4o2)397.20，实测值：397.15。
[0759]
实施例10-8和10-9
[0760]
化合物10-8 8-((3s,5s)-3-(丁-2-炔酰氨基)-5-氟哌啶-1-基)-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺和10-9 8-((3s,5r)-3-(丁-2-炔酰氨基)-5-氟哌啶-1-基)-7-氟-1,2,3,4-四氢环戊并[b]吲哚-5-甲酰胺以与上文所述类似的方式使用表11中指定的胺制备。
[0761]
表11：化合物10-8和10-9
[0762][0763]
实施例11
[0764]
确定针对btk的活性的测定
[0765]
以所需浓度制备化合物(测试或对照)在dmso中的溶液，并使用tecan evo200在384pp板中通过3倍稀释连续稀释至11个浓度。使用echo550将20nl原液转移至384板。dmso用作载体对照。
[0766]
制备两种单独的溶液—含有mgcl2(10mm)、brij-35(0.01％)、dtt(2mm)、bsa(0.05％)、egta(1mm)、hepe(ph7.5)(50mm)、flpeptide(6um)和atp(4mm)的atp溶液；以及含有mgcl2(10mm)、brij-35(0.01％)、dtt(2mm)、bsa(0.05％)、egta(1mm)、hepe(ph7.5)(50mm)和btk(2.67nm)的btk溶液。(btk获自carna；flpeptide2获自perkinelmer并且依鲁替尼获自selleck)。向每个孔中添加5μl atp溶液，然后添加15μl btk溶液以引发反应。(注意每个孔的最终体积为20μl，含有mgcl2(10mm)、brij-35(0.01％)、dtt(2mm)、bsa(0.05％)，egta(1mm)、hepe(ph7.5)(50mm)、flpeptide(1.5um)、atp(1mm)和btk(2nm))。
[0767]
将板在室温处温育90分钟，然后添加终止缓冲液(75μl，含有0.5m edta)以终止反应。使用ez读板器分析来自每个孔的样品。根据以下公式使用读取转化率(cr)计算剩余活性％：
[0768][0769]
使用xlfit(公式201)通过浮动底部和顶部计算ic50。
[0770]
本发明化合物的btk ic
50
值提供于下表12中。关于btk活性，表7列出了如下活性：
[0771]“a”表示小于10nm的ic
50
；
[0772]“b”表示10nm至小于100nm的ic
50
；并且
[0773]“c”表示100nm或更大的ic50。
[0774]
实施例12
[0775]
确定ramos b细胞中的btk活性的测定
[0776]
在测定前一天，将ramos b细胞接种于接种培养基(含有1％fbs和1
×
青霉素-链霉素的rpmi1640培养基)中。在测定当天，按照flirp钙6测定试剂盒的手册制备2x染料溶液：用测定缓冲液(20mm hepes的1x hbss溶液，ph7.4)稀释染料；添加丙磺舒至5mm的最终浓度；剧烈涡旋1分钟-2分钟。通过离心收集细胞，将沉淀重悬于接种培养基中。计数后，将细胞以3
×
106个/ml的密度重悬于接种培养基中。向细胞悬浮液中添加等体积的2x染料溶液。然后将细胞以20μl/孔接种到384孔聚-d-赖氨酸包被的板中。将板以1000rpm离心3分钟，然后在37℃处温育2小时，然后在25℃再温育15分钟。在稀释缓冲液(20mm hepes和0.1％bsa的1x hbss溶液，ph7.4)中以3x浓度制备化合物。通过使用echo 550(labcyte)将连续稀释的化合物从源板转移至384孔化合物板。向化合物板中添加20μl/孔化合物稀释缓冲液，并在板振荡器上混合2分钟。在稀释缓冲液中制备4x ec80的抗igm(jackson immunoresearch)并以20μl/孔添加到新的384孔化合物板中。在25℃处在黑暗中温育60分钟后；将细胞板，含有4x ec
80
的抗igm的化合物板和flipr末端置于flipr(分子装置)中。通过flipr将10μl/孔的4x ec
80
抗igm转移到细胞板中。以1秒间隔读板160秒。
[0777]
本发明的代表性化合物的ic
50
值提供于下表12中。关于ramos活性，表12列出了如下活性：
[0778]“a”表示小于10nm的ic
50
；
[0779]“b”表示10nm至小于100nm的ic
50
；并且
[0780]“c”表示100nm或更大的ic
50
。
[0781]
表12：代表性化合物的活性
[0782][0783][0784]
实施例13
[0785]
大组激酶分析
[0786]
大组激酶分析在assayquant technologies,inc.260cedar hill street,marlborough,ma 01752使用csox-sensor平台以1μm测试制品浓度和1mm atp浓度(www.assayquant.com)进行。反应在corning半面积96孔白色平圆底聚苯乙烯nbs微孔板(目录号3642)中在使用光学透明的粘合剂膜(topseala-plus板密封膜，perkinelmer)密封后进行，该膜用辊或桨施加以消除蒸发和所产生的漂移。标准总反应体
积为50μl。所有实验均在30℃处运行以控制环境温度的波动。以动力学模式从顶部读取板(每1分钟读取一次读数)，用滤光片监测荧光强度，分别使用ex360nm和em 485nm以及40nm和20nm带宽，增益为80。使用graphpad prism gene data screener软件进行数据分析。
[0787]
来自大组激酶筛选的结果示于下表中。化合物5-6、6-2和10-2具有高度选择性，并展示出对所测定的288种激酶中的靶激酶(btk)的最大抑制。
[0788]
表13：激酶组活性
[0789]
[0790]
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[0796][0797]
实施例14
[0798]
在向雌性c57bl/6小鼠单次口服施用测试化合物后1小时测定血浆和总脑浓度。
[0799]
测试制品制备
[0800]
将适当量的测试制品溶解在10％二甲基乙酰胺(dma)/90％(20％羟丙基-β-环糊精(hp-β-cd)w/v)的水溶液中，以获得1mg/ml的最终浓度用于口服给药。根据需要使用超声处理、涡旋和均化。三只7-9周龄(20克-30克)的雌性c57bl/6小鼠通过管饲法给药10mg/kg的测试制品溶液。
[0801]
样品收集和处理
[0802][0803]
样品分析
[0804]
使用lc-ms/ms分析血浆和脑样品中测试化合物的浓度(适当地使用所有样品的血浆和脑匀浆标准曲线)。脑-血浆比大于0.2的化合物被认为是脑渗透物。已知的btk抑制剂列于表14中以供参考。
[0805]
表14：小鼠脑与血浆比
[0806]
化合物编号平均值[血浆]，ng/ml平均值[脑]，ng/g比率2-4163390.245-41840.225-642160.406-278180.247-2109430.3910-2191720.37阿卡替尼(acalabrutinib)12040.04依伏替尼(evobrutinib)177110.06布瑞替尼(branebrutinib)6823150.002依鲁替尼306150.001
[0807]
实施例15
[0808]
在向雄性wistar han大鼠单次口服施用测试化合物后1小时测定血浆和总脑浓度。
[0809]
测试制品制备
[0810]
将适当量的测试制品溶解在10％二甲基乙酰胺(dma)/90％(20％羟丙基-β-环糊精(hp-β-cd)w/v)的水溶液中，以获得1mg/ml的最终浓度用于口服给药。根据需要使用超声处理、涡旋和均化。三只6-8周龄(200克-300克)的雄性wistar han大鼠通过管饲法给药10mg/kg的测试制品溶液。
[0811]
给药和样品收集
[0812]
在1小时时，收集血液和全脑。通过心脏穿刺将血液收集到含有edta钾的试管中并保持在冰上直到收集血浆。通过在4℃处以4000
×
g离心五分钟获得血浆。放血后，用约20ml盐水经心脏灌注动物，收集脑并立即冷冻。将血浆和脑储存在-75
±
15℃处直至分析。
[0813]
血浆和脑样品的lc-ms/ms分析
[0814]
通过用50％乙腈水溶液稀释分析物的储备溶液来获得所需系列浓度的工作溶液。将5μl工作溶液(2g/ml、5g/ml、10g/ml、50g/ml、100g/ml、500g/ml、1000g/ml、5000g/ml、10000ng/ml)添加到50μl的雄性空白wistar han大鼠血浆、脑匀浆中，以在55μl的总体积中达到0.2ng/ml～1000ng/ml(0.2ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、500ng/ml、1000ng/ml)的校准标准。制备血浆、脑匀浆0.5ng/ml、1ng/ml、50ng/ml和800ng/ml的四种质量控制样品，与用于校准曲线的那些样品无关。这些qc样品在分析当天以与校准标准品相同的方式制备。
[0815]
将55μl标准品、55μl qc样品和55μl未知样品(50μl血浆、脑匀浆和5μl空白溶液)分别添加到200μl含乙腈的is混合物中用于沉淀蛋白质。然后将样品涡旋30秒。在4℃处，以4700rpm离心15分钟后，将上清液用水稀释3倍。将10μl稀释的上清液注入lc/ms/ms系统进行定量分析。
[0816]
所选化合物的结果示于下表15中。脑-血浆比大于0.2的化合物被认为是脑渗透物。
[0817]
表15：大鼠脑与血浆比
[0818]
化合物编号平均值[血浆]，ng/ml平均值[脑]，ng/ml比率5-6196840.436-23951080.2810-24211160.29
[0819]
可以组合上述各种实施方案来提供另外的实施方案。在本说明书中引用和/或在申请数据表中列出的所有美国专利、美国专利申请公开、美国专利申请、外国专利、外国专利申请和非专利公开以引用方式整体并入本文，其程度如同每个单独的公开、专利或专利申请被具体地和单独地指明以引用方式并入。如果需要，可以修改实施方案的各个方面以采用各专利、申请和出版物的概念来提供进一步的实施方案。
[0820]
本技术要求2020年4月10日提交的美国临时申请号63/008,531和2021年1月27日提交的美国临时申请号63/142,411的优先权，这些申请的全部内容以引用方式并入本文。
[0821]
鉴于上文的详细说明，可以对这些实施方案作出这些和其他改变。一般来说，在随后的权利要求中，使用的术语不应解释成将权利要求书限制在本说明书和权利要求书中披露的具体实施方案中，而应解释成包括所有可能的实施方案以及这类权利要求书赋予的等效物的全部范围。因此，权利要求并不受本公开内容所限定。