作为用于治疗α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)的α-1-抗胰蛋白酶调节剂的吡咯并[2,3-f]吲唑和2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-五烯衍生物的制作方法

作为用于治疗
α-1抗胰蛋白酶缺乏症(aatd)的
α-1-抗胰蛋白酶调节剂的吡咯并[2,3-f]吲唑和2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-五烯衍生物
[0001]
本技术要求2020年4月3日提交的美国临时申请号63/004,636的优先权益，所述申请的内容以引用方式整体并入本文。
[0002]
本公开提供了能够调节α-1抗胰蛋白酶(aat)活性的化合物和通过施用一种或多种此类化合物来治疗α-1抗胰蛋白酶缺乏症(aatd)的方法。
[0003]
aatd是特征在于aat的低循环水平的遗传疾病。虽然存在aatd治疗方法，但目前还没有治愈方法。aat主要在肝细胞中产生并分泌到血液中，但它也由其他细胞类型产生，包括肺上皮细胞和某些白细胞。aat抑制炎症细胞分泌的若干种丝氨酸蛋白酶(最显著的是中性粒细胞弹性蛋白酶[ne]、蛋白酶3和组织蛋白酶g)，从而保护器官诸如肺免受蛋白酶诱导的损伤，特别是在炎症期间。
[0004]
最常见的与aatd相关的突变包括编码aat蛋白的serpina1基因中的谷氨酸被赖氨酸取代(e342k)。这种突变被称为z突变或z等位基因，导致翻译的蛋白质错误折叠，因此不会分泌到血液中，并且可以在生成细胞内聚合。因此，对于z等位基因(pizz)纯合的个体中的循环aat水平显著降低；仅大约15％的突变体z-aat蛋白正确折叠并由细胞分泌。z突变的另一个后果是分泌的z-aat与野生型蛋白相比具有降低的活性，为正常抗蛋白酶活性的40％至80％(美国胸科协会/欧洲呼吸协会，am j respir crit care med.2003；168(7):818-900；和ogushi等人j clin invest.1987；80(5):1366-74)。
[0005]
肝细胞内聚合的z-aat蛋白的积聚导致功能获得性细胞毒性，这可导致12％患者在以后的生活中发生肝硬化或肝癌以及新生儿肝病。这种积聚可能会自发消退，但对少数儿童来说是致命的。循环aat的缺乏导致蛋白酶活性不受调节，随着时间的推移降解肺组织，从而导致一种慢性阻塞性肺病(copd)的形式，即肺气肿。这种影响在pizz个体中是严重的，并且通常在中年表现出来，从而导致生活质量下降和寿命缩短(平均68岁)(tanash等人int j chron obstruct pulm dis.2016；11:1663-9)。所述影响在吸烟的pizz个体身上更明显，导致寿命进一步缩短(58岁)。(piitulainen和tanash,copd2015；12(1):36-41)。pizz个体占患有临床相关aatd肺病的患者的大多数。因此，需要用于aatd的额外有效治疗。
[0006]
较温和形式的aatd与sz基因型有关，其中z等位基因与s等位基因结合。s等位基因与循环aat水平的降低有关，但不会引起肝细胞的细胞毒性。结果是临床上显著的肺病，而不是肝病。(fregonese和stolk,orphanet j rare dis.2008；33:16)。与zz基因型一样，sz基因型受试者的循环aat缺乏导致蛋白酶活性不受调节，随着时间的推移降解肺组织，并可导致肺气肿，特别是在吸烟者中。
[0007]
对于患有或表现出发展明显肺部或肝脏疾病的迹象的aat缺陷个体，目前的护理标准是强化疗法或蛋白质替代疗法。强化疗法包括施用从汇集的供体血浆中纯化的人aat蛋白浓缩物，以增强缺失的aat。尽管已显示输注血浆蛋白能提高存活率或减慢肺气肿进展速度，但在具有挑战性的状况下，例如在活动性肺部感染期间，强化疗法通常是不够的。类似地，尽管蛋白质替代疗法在减慢疾病进展方面显示出前景，但增强疗法并不能恢复患者
aat的正常生理调节，并且其疗效难以证明。此外，强化疗法需要每周进行治疗随访，并且强化疗法不能解决由z等位基因的毒性功能获得性驱动的肝脏疾病。因此，持续需要新的且更有效的aatd治疗。
[0008]
本公开的一个方面提供了可用于治疗aatd的式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐。例如，式i化合物、其互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐可以描绘为：
[0009][0010]
其氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
[0011]
z1选自crz和n；
[0012]rz
选自氢和卤素；
[0013]
r1选自5元至6元芳环和5元至6元杂芳环，其各自被0-2个ra基团取代；
[0014]
每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6卤代烷氧基；
[0015]
r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和4元至6元杂环基，其各自被0-1个rb基团取代；
[0016]
每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和氰基；
[0017]
r3选自c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基和4元至6元杂环基，其各自被0-3个rc基团取代；
[0018]
每个rc独立地选自ry、羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中所述c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且
[0019]ry
是
[0020]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基，和c
1-c6烷氧基，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0021]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和5元至6元杂环基的，其各自被0-1个rb基团取代；每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0022]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0023]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，
每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环氨基和5元至6元杂环基，其各自被0-1个rb基团取代；每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0024]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0025]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和5至6元杂环基的，其各自被0-1个rb基团取代；每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0026]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和5至6元杂环基的，其各自被0-1个rb基团取代；每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0027]
式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐是aat活性调节剂。在一些实施方案中，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐当在aat功能测定中测试时，具有3.0μm或更小的ec
50
。在一些实施方案中，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐当在aat功能测定中测试时，具有小于1.16μm的ec
50
。
[0028]
在一些实施方案中，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐当在z-aat弹性蛋白酶活性测定中测试时，具有3.0μm或更小的ic
50
。在一些实施方案中，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐当在z-aat弹性蛋白酶活性测定中测试时，具有小于1.16μm的ic
50
。
[0029]
在一些实施方案中，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐当在aat功能测定中测试时具有3.0μm或更小的ec
50
，并且当在z-aat弹性蛋白酶活性测定中测试时具有3.0μm或更小的
ic
50
。在一些实施方案中，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐当在aat功能测定中测试时具有小于1.16μm的ec
50
，并且当在z-aat弹性蛋白酶活性测定中测试时具有3.0μm或更高的ic
50
。在一些实施方案中，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐当在aat功能测定中测试时具有3.0μm或更小的ec
50
，并且当在z-aat弹性蛋白酶活性测定中测试时具有小于1.16μm的ic
50
。在一些实施方案中，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐当在aat功能测定中测试时具有小于1.16μm的ec
50
，并且当在z-aat弹性蛋白酶活性测定中测试时具有小于1.16μm的ic
50
。
[0030]
在本公开的一个方面，提供了式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐，用于治疗aatd。在一些实施方案中，式i化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，式i化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348；式i化合物选自化合物1-46和化合物74-96；式i化合物选自化合物1-46；或者式i化合物选自化合物74-96)、这些化合物的互变异构体，这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，用于治疗aatd。在本公开的一些实施方案中，本公开的化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348；化合物选自化合物1-46和化合物74-96；化合物选自化合物1-46；或者化合物选自化合物74-96)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，用于治疗aatd。
[0031]
在一些实施方案中，本公开提供了药物组合物，其包含至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，药物组合物可以包含选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。这些组合物可还包含至少一种额外活性药物成分和/或至少一种载体。这些组合物可还包含至少一种额外活性药物成分。这些组合物可还包含至少一种载体。这些组合物可还包含至少一种额外活性药物成分和至少一种载体。这些组合物可还包含至少一种额外活性药物成分或至少一种载体。
[0032]
本公开的另一方面提供了治疗aatd的方法，其包括向有需要的受试者施用至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，或者包含至少一种此类化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐的药物组合物。在一些实施方案中，所述方法包括施用选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，需要治疗的受试者携带zz突变。在一些实施方案中，需要治疗的受试者携带sz突变。
[0033]
在一些实施方案中，治疗方法包括将至少一种额外活性剂与至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐以同一药物组合物的形式，或者以单独组合物的形式向有需要的受试者施用。在一些实施方案中，方法包括以同一药物组合物或以单独组合物施用选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐与至少一种额外活性剂。在一些实施方案中，需要治疗的受试者携带zz突变。在一些实施方案中，需要治疗的受试者携带sz突变。
[0034]
在一些实施方案中，治疗方法包括将至少一种额外活性剂与至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐以同一药物组合物的形式，或者以单独组合物的形式向有需要的受试者施用，其中额外活性剂是来自健康人供体血浆的α-1抗胰蛋白酶蛋白(aat)。在一些实施方案中，方法包括以同一药物组合物或以单独组合物施用选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐与至少一种额外活性剂，其中所述额外活性剂是来自健康人供体血浆的α-1抗胰蛋白酶蛋白(aat)。
[0035]
在一些实施方案中，治疗方法包括将至少一种额外活性剂与至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐以同一药物组合物的形式，或者以单独组合物的形式向有需要的受试者施用，其中所
述额外活性剂是重组aat。在一些实施方案中，方法包括以同一药物组合物或以单独组合物施用选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐与至少一种额外活性剂，其中所述额外活性剂是重组aat。
[0036]
还提供了调节aat的方法，其包括向有需要的受试者施用至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)的化合物、以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，或者包含至少一种化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐的药物组合物。在一些实施方案中，调节aat的方法包括施用至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，或包含至少一种此类化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐的药物组合物。
[0037]
本公开的一个方面提供了式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐，用于治疗。在一些实施方案中，本公开提供了化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0038]
本公开的一个方面提供了药物组合物，其包含式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物、互变异构体或氘化衍生物的药学上可接受的盐，用于治疗。在一些实施方案中，本公开提供了药物组合物，其包含化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，其用于疗法。
具体实施方式
[0039]
i.定义
[0040]
如本文所用，术语“aat”意指α-1抗胰蛋白酶或其突变，包括但不限于aat基因突变，诸如z突变。如本文所用，“z-aat”意指具有z突变的aat突变体。
[0041]
如本文所用，“突变”可以是指serpina1基因(编码aat的基因)中的突变或基因序列改变对aat蛋白的影响。“serpina1基因突变”是指serpina1基因的突变，而“aat蛋白突变”是指导致aat蛋白氨基酸序列改变的突变。一般来说，遗传缺陷或突变或基因中的核苷酸改变导致从该基因翻译的aat蛋白中的突变。
[0042]
如本文所用，对于特定基因突变为“纯合”的患者在每个等位基因上具有相同的突变。
[0043]
如本文所用，具有pizz基因型的患者是aat蛋白中对于z突变为纯合的患者。
[0044]
如本文所用，术语“aatd”意指α-1抗胰蛋白酶缺乏症，这是特征在于低aat循环水平的遗传病症。
[0045]
术语“化合物”，当指本公开的化合物时，是指具有相同化学结构的分子的集合，除非另外指明为立体异构体的集合(例如，外消旋体的集合、顺式/反式立体异构体的集合或(e)和(z)立体异构体的集合)，除了在分子的组成原子之间可能存在同位素差异。因此，本领域技术人员将清楚，由含有指定氘原子的特定化学结构表示的化合物也将含有较少量的在该结构中一个或多个指定氘位置具有氢原子的同位素体。此类同位素体在本公开的化合物中的相对量将取决于许多因素，包括用于制备化合物的试剂的同位素纯度和用于制备化合物的各个合成步骤中同位素的掺入效率。然而，如上所述，此类同位素体全部的相对量将少于化合物的49.9％。在其他实施方案中，此类同位素体全部的相对量将为化合物的小于47.5％、小于40％、小于32.5％、小于25％、小于17.5％、小于10％、小于5％、小于3％、小于1％或小于0.5％。
[0046]
本公开的化合物可以任选地被一个或多个取代基取代。应当理解，短语“任选地被取代”与短语“取代或未取代的”可互换使用。通常，术语“取代的”，无论前面是否有术语“任选地”，都是指用特定取代基的基团置换给定结构中的氢基团。除非另外指示，否则“任选地被取代”的基团可在该基团的每个可取代位置处具有取代基，并且当任何给定结构中的多于一个位置可以被选自指定基团的多于一个取代基取代时，在每个位置处的取代基可以相同或不同。本公开所设想的取代基的组合是导致形成稳定或化学上可行的化合物的取代基的组合。
[0047]
术语“同位素体”是指化学结构仅在其同位素组成上不同于本公开的特定化合物的物质。另外，除非另有说明，否则本文描绘的结构还意指包括仅在存在一个或多个同位素富集的原子的情况下不同的化合物。例如，除了用氘或氚置换氢，或用
13
c或
14
c置换碳之外，具有本发明结构的化合物也在本公开的范围内。
[0048]
除非另有指示，否则本文描绘的结构也意味着包括该结构的所有异构体形式，例如外消旋混合物、顺式/反式异构体、几何(或构象)异构体，例如(z)和(e)双键异构体以及(z)和(e)构象异构体。因此，本发明化合物的几何和构象混合物在本公开的范围内。除非另有说明，否则本公开的化合物的所有互变异构形式都在本公开的范围内。
[0049]
如本文所用，术语“互变异构体”是指一种化合物的两种或多种异构体中的一种，
它们一起以平衡状态存在，并且容易通过原子或基团在分子内迁移而互换。
[0050]“立体异构体”指对映异构体和非对映异构体两者。
[0051]
如本文所使用，“氘化衍生物”是指具有与参考化合物相同的化学结构但一个或多个氢原子被氘原子(“d”)置换的化合物。将认识到，根据合成中使用的化学材料的来源，在合成的化合物中存在天然同位素丰度的一些变化。尽管有这种变化，但天然丰富的稳定氢同位素的浓度与本文所述的氘化衍生物的稳定同位素取代度相比是很小的且无关紧要的。因此，除非另有说明，否则当提及本公开的化合物的“氘化衍生物”时，至少一个氢被远高于其天然同位素丰度(通常为约0.015％)的氘取代。在一些实施方案中，本公开的氘化衍生物对于每个氘原子具有至少3500(在每个指定氘处52.5％氘掺入)、至少4500(67.5％氘掺入)、至少5000(75％氘掺入)、至少5500(82.5％氘掺入)、至少6000(90％氘掺入)、至少6333.3(95％氘掺入、至少6466.7(97％氘掺入或至少6600(99％氘掺入)的同位素富集因子。
[0052]
如本文所使用，术语“同位素富集因子”意指指定同位素之同位素丰度与天然丰度之间的比率。
[0053]
如本文所用，术语“烷基”意指直链(即直链或无支链)或支链、取代或未取代的烃链，其是完全饱和的或可含有一个或多个饱和单元，但不是完全芳族的。除非另有说明，否则烷基含有1-12个烷基碳原子。在一些实施方案中，烷基含有1-10个脂肪族碳原子。在其他实施方案中，烷基含有1-8个脂肪族碳原子。在其他实施方案中，烷基含有1-6个烷基碳原子，在其他实施方案中，烷基含有1-4个烷基碳原子，并且在其他实施方案中，烷基含有1-3个烷基碳原子和1-2个烷基碳原子。
[0054]
如本文所用，术语“杂烷基”是指其中一个或两个碳原子独立地被氧、硫、氮、磷或硅中的一个或多个取代的脂族基团。杂烷基可以是取代的或未取代的、支链的或无支链的。
[0055]
如本文所用，术语“烯基”意指含有一个或多个碳碳双键的直链(即直链或无支链)、支链、取代或未取代的烃链。
[0056]
如本文所用，术语“亚烷基”是指二价烷基。“亚烷基链”是聚亚甲基，例如-(ch2)
n-，其中n是正整数，例如1至6范围内的整数、1至4范围内的整数、1至3范围内的整数或整数1、2或3。
[0057]
术语“环烷基”、“环状烷基”、“碳环基”和“碳环”是指稠合、螺环或桥接的单环c
3-9
烃或稠合、螺环或桥接的双环或三环c
8-14
烃，其是完全饱和的或含有一个或多个不饱和单元，但不是完全芳族的，其中所述双环系统中的任何单个环具有3-9个成员。通常，环烷基是完全饱和的，而碳环基可以含有一个或多个不饱和单元，但不是芳族的。在一些实施方案中，环烷基或碳环基团含有3至12个碳原子。在一些实施方案中，环烷基或碳环基团含有3至8个碳原子。在一些实施方案中，环烷基或碳环基团含有3至6个碳原子。
[0058]
如本文所用，术语“杂环(heterocycle)”、“杂环基”或“杂环(heterocyclic)”是指稠合、螺环或桥接的非芳族的单环、双环或三环系统，其中一个或多个环成员是杂原子。在一些实施方案中，“杂环(heterocycle)”、“杂环基”或“杂环(heterocyclic)”基团具有3至14个环成员，其中一个或多个环成员是独立地选自氧、硫、氮、磷或硅的杂原子，并且系统中的每个环含有3至9个环成员。在一些实施方案中，杂环基含有3至12个环成员原子。在一些实施方案中，杂环基含有3至8个环成员原子。在一些实施方案中，杂环基含有3至6个环成员
原子。
[0059]
术语“杂原子”意指氧、硫、氮、磷或硅中的一或多者(包括氮、硫、磷或硅的任何氧化形式；任何碱性氮的季铵化形式；或杂环的可取代氮，例如n(如3,4-二氢-2h-吡咯基中)、nh(如吡咯烷基中)或nr
+
(如n-取代的吡咯烷基中))。
[0060]
如本文所用，术语“烷氧基”是指如前定义的烷基，其中烷基的一个碳分别被氧(“烷氧基”)原子置换，条件是氧原子连接在两个碳原子之间。“环状烷氧基”是指含有至少一个烷氧基但不是芳族的单环、稠合、螺环、双环、桥接双环、三环或桥接三环烃。环状烷氧基的非限制性实例包括四氢吡喃基、四氢呋喃基、氧杂环丁烷基、8-氧杂双环[3.2.1]辛烷基和氧杂环庚烷基。
[0061]
术语“卤代烷基”和“卤代烷氧基”意指被一个或多个卤素原子取代的烷基或烷氧基，视情况而定。术语“卤素”或意指f、cl、br或i。在一些实施方案中，卤素选自f、cl和br。卤代烷基的实例包括-chf2、-ch2f、-cf3、-cf
2-和全卤代烷基，诸如-cf2cf3。
[0062]
如本文所用，“＝o”是指氧代基团。
[0063]
如本文所用，“氰基”或“腈”基团是指-c≡n。
[0064]
如本文所用，“羟基”是指-oh。
[0065]
如本文所用，“芳香基团”或“芳香环”是指含有共轭平面环系统的化学基团，所述系统具有由[4n+2]p轨道电子组成的离域π电子轨道，其中n是0至6的整数。芳基的非限制性实例包括芳基和杂芳基。
[0066]
术语“芳基”是指具有总共5至14个环成员的单环、双环和三环系统，其中所述系统中至少一个环是芳族的，并且其中所述系统中每个环含有3至7个环成员。在一些实施方案中，芳基含有6或10个碳原子。芳基的非限制性实例是苯环。
[0067]
术语“杂芳基”是指具有总共5至10个环成员的单环、双环和三环系统，其中所述系统中至少一个环是芳族的，所述系统中至少一个环含有一个或多个杂原子，并且其中所述系统中每个环含有3至7个环成员。在一些实施方案中，杂芳基含有6或10个环原子。
[0068]
含氮基团如胺基的有用保护基的实例包括例如氨基甲酸叔丁酯(boc)、苄基(bn)、四氢吡喃基(thp)、氨基甲酸9-芴基甲酯(fmoc)、氨基甲酸苄酯(cbz)、乙酰胺、三氟乙酰胺、三苯基甲胺、亚苄基胺和对甲苯磺酰胺。添加(通常称为“保护”的过程)和去除(通常称为“去保护”的过程)此类胺保护基团的方法为本领域熟知的，并且可以在例如p.j.kocienski,protecting groups,thieme,1994中获得，其以引用的方式整体并入本文，并且在greene和wuts,protective groups in organic synthesis,第3版(john wiley&sons,new york,1999)中获得。
[0069]
可用于本公开的合适溶剂的实例包括但不限于水、甲醇(meoh)、乙醇(etoh)、二氯甲烷或“二氯甲烷”(ch2cl2)、甲苯、乙腈(mecn)、二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基亚砜(dmso)、乙酸甲酯(meoac)、乙酸乙酯(etoac)、庚烷、乙酸异丙酯(ipac)、乙酸叔丁酯(t-buoac)、异丙醇(ipa)、四氢呋喃(thf)、2-甲基四氢呋喃(2-me thf)、甲基乙基酮(mek)、叔丁醇、乙醚(et2o)、甲基叔丁基醚(mtbe)、1,4-二噁烷和n-甲基吡咯烷酮(nmp)。
[0070]
可用于本公开的合适碱的实例包括但不限于1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)、叔丁醇钾(kotbu)、碳酸钾(k2co3)、n-甲基吗啉(nmm)、三乙胺(et3n；tea)、二异丙基乙胺(i-pr2etn；dipea)、吡啶、氢氧化钾(koh)、氢氧化钠(naoh)、氢氧化锂(lioh)和甲醇
钠(naome；naoch3)。
[0071]
本公开包括本文公开的化合物的药学上可接受的盐。化合物的盐在酸与化合物的碱性基团如氨基官能团，或碱与化合物的酸性基团如羧基官能团之间形成。
[0072]
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内适合与人类和其他哺乳动物的组织接触，而没有过度的毒性、刺激、过敏反应等，并且与合理的益处/风险比相称的组分。“药学上可接受的盐”意指在施用于接受者时能够直接或间接提供本公开的化合物的任何无毒盐。合适的药学上可接受的盐是例如s.m.berge等人j.pharmaceutical sciences,1977,66,1-19中所公开的那些盐。
[0073]
通常用于形成药学上可接受的盐的酸包括无机酸，例如二硫化氢、盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸和磷酸，以及有机酸，例如对甲苯磺酸、水杨酸、酒石酸、二酒石酸、抗坏血酸、马来酸、苯磺酸、富马酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、甲酸、谷氨酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、乳酸、草酸、对溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、柠檬酸、苯甲酸和乙酸，以及相关无机酸和有机酸。因此，此类药学上可接受的盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、癸酸盐、庚酸盐、丙酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己炔-1,6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、对苯二酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、β-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙烷磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸盐和其他盐。在一些实施方案中，药学上可接受的酸加成盐包括与无机酸诸如盐酸和氢溴酸形成的那些盐，以及与有机酸诸如马来酸形成的那些盐。
[0074]
衍生自适当碱的药学上可接受的盐包括碱金属、碱土金属、铵和n
+
(c
1-4
烷基)4盐。本公开还设想本文公开的化合物的任何碱性含氮基团的季铵化。碱金属和碱土金属盐的合适非限制性实例包括钠、锂、钾、钙和镁。药学上可接受的盐的其他非限制性实例包括铵、季铵以及使用抗衡离子诸如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低碳数烷基磺酸根和芳基磺酸根形成的胺阳离子。药学上可接受的盐的其他合适的非限制性实例包括苯磺酸盐和葡糖胺盐。
[0075]
术语“患者”和“受试者”可互换使用并且指包括人的动物。
[0076]
术语“有效剂量”、“有效量”、“治疗有效剂量”和“治疗有效量”在本文中可互换使用，并且是指产生施用化合物所期望的效果(例如，改善aatd或aatd症状、减轻aatd或aatd症状的严重性和/或降低aatd或aatd症状的发作率或发病率)的化合物的量。有效剂量的确切量将取决于治疗目的，并且将由本领域技术人员使用已知技术确定(参见例如lloyd(1999)the art,science and technology of pharmaceutical compounding)。
[0077]
如本文所用，术语“治疗(treatment)”及其同源词(例如“治疗(treat/treating)”)是指改善受试者的aatd或其症状、延迟受试者的aatd或其症状的发作、或减轻受试者的aatd或其症状的严重性。如本文所用，“治疗”及其同源词包括但不限于：改善肝脏和/或脾脏功能、减轻黄疸、改善肺功能、减轻肺部疾病和/或肺部恶化(例如肺气肿)、减轻皮肤疾病(例如坏死性脂膜炎)、增加儿童生长、改善食欲和减轻疲劳。可以根据本领域已知
或随后开发的方法和技术容易地评估这些症状中任一者的改善或其严重程度的减轻。
[0078]
当与组合物或剂型的成分的剂量、量或重量百分比结合使用时，术语“约”和“大约”包括包括本领域的普通技术人员认为可提供与自指定剂量、量或重量百分比所获得的药理学作用等效的药理学作用的指定剂量、量或重量百分比的值、或该剂量、量或重量百分比的范围。通常，术语“约”是指给定值的高达10％、高达5％或高达2％的变化。
[0079]
式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐中的任一种或多种可以每日一次、每日两次或每日三次地施用，以用于治疗aatd。在一些实施方案中，任何一种或多种化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，任何一种或多种化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348；任何一种或多种化合物选自化合物1-46和化合物74-96；任何一种或多种化合物选自化合物1-46；或任何一种或多种化合物选自化合物74-96)、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐每天施用一次。在一些实施方案中，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐每天施用一次。在一些实施方案中，至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐每天施用两次。在一些实施方案中，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐每天施用两次。在一些实施方案中，至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐每天施用三次。在一些实施方案中，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐每天施用三次。
[0080]
式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐中的任一种或多种可以与aat强化疗法或aat替代疗法组合施用，以用于治疗aatd。在一些实施方案中，任何一种或多种化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，任何一种或多种化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348；任何一种或多种化合物选自化合物1-46和化合物74-96；任何一种或多种化合物选自化合物1-46；或任何一种或多种化合物选自化合物74-96)、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0081]
如本文所用，“aat强化疗法”是指使用来自健康人供体血浆的α-1抗胰蛋白酶蛋白(aat)来增强(增加)在血液中循环的α-1抗胰蛋白酶水平。“aat替代疗法”是指施用重组aat。
[0082]
在一些实施方案中，10mg至1,500mg、100mg至1,800mg、100mg至500mg、200mg至600mg、200mg至800mg、400mg至2,000mg、400mg至2,500mg或400mg至600mg的式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ib的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物或互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐每天一次、每天两次或每天三次地施用。在一些实施方案中，10mg至1,500mg、100mg至1,800mg、100mg至500mg、200mg至600mg、200mg至800mg、400mg至2,000mg或400mg至600mg的选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)每天一次、每天两次或每天三次地施用。
[0083]
本领域普通技术人员将认识到，当公开化合物的量时，化合物的药学上可接受的盐形式的相关量是等效于所述化合物的游离碱浓度的量。应注意，所公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物和药学上可接受的盐的量是基于参考化合物的游离碱形式。例如，“10mg的至少一种选自式(ia)或式(ib)化合物的化合物及其药学上可接受的盐”包括10mg的式(ia)或式(ib)化合物和等效于10mg式(ia)或式(ib)化合物的浓度的式(ia)或式(ib)化合物的药学上可接受的盐。
[0084]
如本文所用，术语“环境条件”意指室温、露天条件和不受控制的湿度条件。
[0085]
应当理解，本文提及的使用一种或多种化合物(例如式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物的药学上可接受的盐)的治疗方法(例如治疗aatd的方法)也应解释为对以下的提及：-一种或多种化合物(例如，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及这些化合物的药学上可接受的盐)，用于治疗例如aatd的方法中；和/或-一种或多种化合物(例如，式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)，以及这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构
体的氘化衍生物以及这些化合物的药学上可接受的盐)在制造用于治疗例如aatd的药物中的用途。
[0086]
示例实施方案1：
[0087]
本公开的一些非限制性实施方案包括：
[0088]
1.一种式i化合物：
[0089][0090]
其互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
[0091]
z1选自crz和n；
[0092]rz
选自氢和卤素；
[0093]
r1选自5元至6元芳环和5元至6元杂芳环，其各自被0-2个ra基团取代；
[0094]
每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；
[0095]
r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和5元至6元杂环基，其各自被0-1个rb基团取代；
[0096]
每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；
[0097]
r3选自c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基和4元至6元杂环基，其各自被0-3个rc基团取代；并且
[0098]
每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中所述c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基。
[0099]
2.根据实施方案1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1是任选地被卤素和/或c
1-c6烷氧基取代的c6芳基。
[0100]
3.根据实施方案1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1是任选地被卤素和c
1-c6烷氧基取代的c6杂芳基。
[0101]
4.根据实施方案2或实施方案3所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1是被0-2个氟原子取代的c6杂芳基。
[0102]
5.根据实施方案2或实施方案3所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1是被ome和/或氟取代的c6杂芳基。
[0103]
6.根据实施方案1至5中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1选自：
[0104][0105]
7.根据实施方案1至5中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1选自：
[0106][0107]
8.根据实施方案1至7中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2是任选地被氰基和/或c
1-c6烷氧基取代的c
2-c6支链烷基。
[0108]
9.根据实施方案8所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2是被ome取代的c
2-c6支链烷基。
[0109]
10.根据实施方案1至7中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2是c6杂环基。
[0110]
11.根据实施方案10所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中c6杂环基中的杂原子是氧。
[0111]
12.根据实施方案1至7中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2选自：
[0112][0113]
13.根据实施方案1至12中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3是直链或支链的c
2-c6烷基，并且每个rc独立地选自羟基、甲氧基和羧酸。
[0114]
14.根据实施方案1至12中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3是c
3-c7环烷基，并且rc选自c
1-c6烷基、羟基、甲氧基和羧酸。
[0115]
15.根据实施方案1至11中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3是4至6元杂环基，并且rc选自羟基、甲氧基、羧酸和任选地被0-2个独立选自氧代、羟基和羧酸的基团取代的c
1-c6烷基。
[0116]
16.根据实施方案1至12中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3选自:
[0117][0118]
并且其中r3是具有0-2个选自甲基、ome、氟和羟基的rc基团。
[0119]
17.根据实施方案1至12中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3选自:
[0120][0121]
18.根据实施方案1至12中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3选自：
[0122][0123]
19.根据实施方案1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中
[0124]
r1选自：
[0125][0126]
r2选自：
[0127][0128]
并且r3选自:
[0129][0130]
其中r3被0-2个选自甲基、ome、氟和羟基的rc基团取代。
[0131]
20.根据实施方案1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或可药用盐，其中所述化合物选自式ia、ib、ic或id的化合物：
[0132][0133]
及其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0134]
21.一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物及其氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0135]
22.一种药物组合物，其包含根据实施方案1-21中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
[0136]
23.一种治疗α-1抗胰蛋白酶缺乏症的方法，其包括向有需要的患者施用根据实施方案1-21中任一项所述的化合物、衍生物或盐，或根据实施方案22所述的药物组合物。
[0137]
23.根据实施方案23所述的方法，其中所述患者在α-1抗胰蛋白酶中具有z突变。
[0138]
24.根据实施方案23所述的方法，其中所述患者在α-1抗胰蛋白酶中具有sz突变。
[0139]
25.根据实施方案23所述的方法，其中所述患者对于在α-1抗胰蛋白酶中的z突变是纯合的。
[0140]
26.一种调节α-1抗胰蛋白酶活性的方法，其包括使所述α-1-抗胰蛋白酶与根据实施方案1-21中任一项所述的化合物、衍生物或盐或根据实施方案22所述的药物组合物接触。
[0141]
为避免疑问，结合式i’描述的特征也可以与结合式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig描
述的特征结合。
[0142]
示例实施方案2：
[0143]
本公开的一些非限制性实施方案/条款包括：
[0144]
1.一种式i化合物：
[0145][0146]
其互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
[0147]
z1选自crz和n；
[0148]rz
选自氢和卤素；
[0149]
r1选自5元至6元芳环和5元至6元杂芳环，其各自被0-2个ra基团取代；
[0150]
每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6卤代烷氧基；
[0151]
r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和4元至6元杂环基，其各自被0-1个rb基团取代；
[0152]
每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和氰基；
[0153]
r3选自c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基和4至6元杂环基，其各自被0-3个rc基团取代；
[0154]
每个rc独立地选自ry、羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中所述c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且
[0155]ry
是
[0156]
2.根据条款1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基。
[0157]
3.根据条款1或条款2所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和5元至6元杂环基，其各自被0-1个rb基团取代。
[0158]
4.根据条款1至3中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基。
[0159]
5.根据条款1至4中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中所述c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基。
[0160]
6.根据条款1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中：
[0161]
z1选自crz和n；
[0162]rz
选自氢和卤素；
[0163]
r1选自5元至6元芳环和5元至6元杂芳环，其各自被0-2个ra基团取代；
[0164]
每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；
[0165]
r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和5元至6元杂环基，其各自被0-1个rb基团取代；
[0166]
每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；
[0167]
r3选自c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基和4元至6元杂环基，其各自被0-3个rc基团取代；并且
[0168]
每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中所述c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基。
[0169]
7.根据条款1至6中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1是任选地被卤素和/或c
1-c6烷氧基取代的c6芳基。
[0170]
8.根据条款1至6中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1是任选地被卤素和c
1-c6烷氧基取代的c6杂芳基。
[0171]
9.根据条款1至6或8中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1是被0-2个氟原子取代的c6杂芳基。
[0172]
10.根据条款1至6或8中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1是被ome和/或氟取代的c6杂芳基。
[0173]
11.根据条款1或条款3至5中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1选自：
[0174][0175]
12.根据条款1至6中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1选自：
[0176][0177]
13.根据条款1或条款3至5中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1选自：
[0178][0179]
14.根据条款1或条款3至5中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1选自：
[0180][0181]
15.根据条款1至6中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r1选自：
[0182][0183]
16.根据条款1至15中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2是任选地被氰基或c
1-c6烷氧基取代的c
2-c6支链烷基。
[0184]
17.根据条款16所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2是被ome取代的c
2-c6支链烷基。
[0185]
18.根据条款1至15中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2是c6杂环基。
[0186]
19.根据条款18所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中c6杂环基中的杂原子是氧。
[0187]
20.根据条款1、2或5所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2是任选地被c
1-c6烷氧基或c
1-c6烷基取代的c4杂环基。
[0188]
21.根据条款20所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中c4杂环基中的杂原子是氧。
[0189]
22.根据条款1、2或5所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2是任选地被c
1-c6烷氧基或c
1-c6烷基取代的c4环烷基。
[0190]
23.根据条款1、2或5所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2选自：
[0191][0192]
24.根据条款1、2或5所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2选自：
[0193][0194]
25.根据条款1至15中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r2选自：
[0195][0196]
26.根据条款1至25中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3是直链或支链的c
2-c6烷基，并且每个rc独立地选自羟基、甲氧基和羧酸。
[0197]
27.根据条款1至25中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3是c
3-c7环烷基，并且rc选自c
1-c6烷基、羟基、甲氧基和羧酸。
[0198]
28.根据条款1至25中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3是4至6元杂环基，并且rc选自羟基、甲氧基、羧酸和任选地被0-2个独立选自氧代、羟基和羧酸的基团取代的c
1-c6烷基。
[0199]
29.根据条款1至25中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3选自：
[0200][0201]
并且其中r3是具有0-2个选自甲基、ome、氟和羟基的rc基团。
[0202]
30.根据条款1至25中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3选自：
[0203][0204]
31.根据条款1至25中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3选自：
[0205][0206]
32.根据条款1至4或7至25中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3选自：
[0207][0208]
33.根据条款1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中：
[0209]
r1选自：
[0210][0211]
r2选自：
[0212][0213]
并且r3选自:
[0214][0214]
其中r3被0-2个选自甲基、ome、氟和羟基的rc基团取代。
[0215]
34.根据条款1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中：
[0216]
r1选自：
[0217][0218]
r2选自：
[0219][0220]
并且r3选自:
[0221][0222]
其中r3被0-2个选自甲基、ome、氟和羟基的rc基团取代。
[0223]
35.根据条款1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式ia、ib、ic、id、ie或if的化合物：
[0224][0225][0226]
及其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0227]
36.根据条款1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式ia、ib、ic或id的化合物：
[0228][0229]
及其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0230]
37.一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物及其氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0231]
38.一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物及其氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0232]
39.一种药物组合物，其包含根据条款1-38中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
[0233]
40.一种治疗α-1抗胰蛋白酶缺乏症的方法，其包括向有需要的患者施用根据条款1-38中任一项所述的化合物、衍生物或盐，或根据条款39所述的药物组合物。
[0234]
41.根据条款40所述的方法，其中所述患者在α-1抗胰蛋白酶中具有z突变。
[0235]
42.根据条款40所述的方法，其中所述患者在α-1抗胰蛋白酶中具有sz突变。
[0236]
43.根据条款40所述的方法，其中所述患者对于在α-1抗胰蛋白酶中的z突变是纯合的。
[0237]
44.一种调节α-1抗胰蛋白酶活性的方法，其包括使所述α-1-抗胰蛋白酶与根据条款1-38中任一项所述的化合物、衍生物或盐或根据条款39所述的药物组合物接触。
[0238]
ii.化合物和组合物
[0239]
在一些实施方案中，式i化合物：
[0240][0241]
其氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
[0242]
z1选自crz和n；
[0243]rz
选自氢和卤素；
[0244]
r1选自5元至6元芳环和5元至6元杂芳环，其各自被0-2个ra基团取代；
[0245]
每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基和c
1-c6卤代烷氧基；
[0246]
r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和4元至6元杂环基，其各自被0-1个rb基团取代；
[0247]
每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和氰基；
[0248]
r3选自c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基和4至6元杂环基，其各自被0-3个rc基团取代；
[0249]
每个rc独立地选自ry、羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中所述c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且
[0250]ry
是
[0251]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基，和c
1-c6烷氧基，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0252]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和5元至6元杂环基的，其各自被0-1个rb基团取代；每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0253]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0254]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和5至6元杂环基的，其各自被0-1个rb基团取代；每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0255]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环氨基和5元至6元杂环基，其各自被0-1个rb基团取代；每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0256]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；rc当存在时选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且所有其他变量如式i中所定义。
[0257]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r2选自c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基和5至6元杂环基的，其各自被0-1个rb基团取代；每个rb独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷氧基和氰基；rc当存在时选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧
酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且所有其他变量如式i中所定义并且所有其他变量如式i中所定义。
[0258]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1是任选地被卤素和/或c
1-c6烷氧基取代的c6芳基，并且所有其他变量如式i中所定义。在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1是被1-2个氟原子取代的c6芳基，并且所有其他变量如式i中所定义。在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1是被氟原子和氯原子取代的c6芳基，并且所有其他变量如式i中所定义。在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1是被氟原子和羟基取代的c6芳基，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0259]
在一些实施方案中，r1是被1-2个氟原子取代的c6杂芳基，并且所有其他变量如式i中所定义。在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1是任选地被卤素和c
1-c6烷氧基取代的c6杂芳基，并且所有其他变量如式i中所定义。在一些实施方案中，r1是被1-2个氟原子取代的c6杂芳基，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0260]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1选自
[0261][0261]
并且所有其他变量如式i中所定义。
[0262]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1选自
[0263]
并且所有其他变量如式i中所定义
[0264]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1选自
[0265]
并且所有其他变量如式i中所定义。
[0266]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1选自
[0267]
并且所有其他变量如式i中所定义。
[0268]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r2是任选地被氰基和/或c
1-c6烷氧基取代的c
2-c6支链烷基，并且所有其他变量如式i中所定义。在一些实施方案中，r2是被ome取代的c
2-c6支链烷基，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0269]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r2是c6杂环，并且所有其他变量如式i中所定义。在一些实施方案中，r2是c6杂环，并且杂原子是氧，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0270]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r2选自选自并且所有其他变量如式i中所定义。
[0271]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r2选自并且所有其他变量如式i中所定义。
[0272]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r2选自并且所有其他变量如式i中所定义。
[0273]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r3是被0-3个rc基团取代的直链或支链c
2-c6烷基，并且每个rc独立地选自羟基、甲氧基和羧酸，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0274]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r3是被ry取代的直链或支链c
2-c6烷基，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0275]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受
的盐中，r3是被ry取代的c
3-c7环烷基(例如c6环烷基)，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0276]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r3是被0-3个rc基团取代的4-6元杂环基，每个rc独立地选自羟基、甲氧基、羧酸和c
1-c6烷基，并且c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，并且所有其他变量如式i中所定义。
[0277]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r3选自并且所有其他变量如式i中所定义。
[0278]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r3选自
[0279][0280]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r3选自
[0281][0282]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r3选自
[0283][0284]
在本发明的一些实施方案中，式i化合物选自化合物1-46(如下表a所示)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0285]
表a：示例性式i化合物
[0286]
[0287]
[0288]
[0289]
[0290][0291]
在本公开的一些实施方案中，式i化合物选自化合物47-73(如下表b所示)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0292]
表b：额外示例性式i化合物
[0293]
[0294]
[0295][0296]
在本公开的一些实施方案中，式i化合物选自化合物74-96(如下表c所示)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0297]
表c：额外示例性式i化合物
[0298]
[0299]
[0300][0301]
在本公开的一些实施方案中，式i化合物选自化合物1-46和74-96、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0302]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1选自：
[0303][0304]
r2选自：
[0305][0306]
并且r3选自:
[0307][0307]
其中r3被0-2个选自甲基、ome、氟和羟基的rc基团取代，并且
[0308]
所有其他变量如式i中所定义。
[0309]
在一些实施方案中，在本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，r1选自：
[0310][0311]
r2选自：
[0312][0313]
并且r3选自:
[0314]
其中r3被0-2个选自甲基、ome、氟和羟基的rc基团取代，并且
[0315]
所有其他变量如式i中所定义。
[0316]
在一些实施方案中，本公开的化合物选自式ia化合物：
[0317][0318]
其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中z1、r1和r3如式i中所定义。
[0319]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基，并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0320]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0321]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0322]
在一些实施方案中，式ia化合物选自化合物ia-1-348(如表d所示)、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0323]
表d：示例性式ia化合物
[0324]
[0325]
[0326]
[0327]
[0328]
[0329]
[0330]
[0331]
[0332]
[0333]
[0334]
[0335]
[0336]
[0337]
[0338]
[0339]
[0340]
[0341]
[0342]
[0343]
[0344]
[0345]
[0346][0347]
在一些实施方案中，本公开的化合物选自式ib化合物：
[0348][0349]
其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中z1、r1和r3如式i中所定义。
[0350]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基，并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0351]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0352]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0353]
在一些实施方案中，式ia化合物选自化合物ib-1-ib-348(如下表e所示)、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0354]
表e：示例性式ib化合物
[0355]
[0356]
[0357]
[0358]
[0359]
[0360]
[0361]
[0362]
[0363]
[0364]
[0365]
[0366]
[0367]
[0368]
[0369]
[0370]
[0371]
[0372]
[0373]
[0374]
[0375]
[0376]
[0377][0378]
在一些实施方案中，本公开的化合物选自式ic化合物：
[0379][0380]
其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中z1、r1和r3如式i中所定义。
[0381]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基，并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0382]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0383]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0384]
在一些实施方案中，式ia化合物选自化合物ic-1-348(如下表f所示)、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0385]
表f：示例性式ic化合物
[0386]
[0387]
[0388]
[0389]
[0390]
[0391]
[0392]
[0393]
[0394]
[0395]
[0396]
[0397]
[0398]
[0399]
[0400]
[0401]
[0402]
[0403]
[0404]
[0405]
[0406]
[0407]
[0408][0409]
在一些实施方案中，本公开的化合物选自式id化合物：
[0410][0411]
其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中z1、r1和r3如式i中所定义。
[0412]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基，并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0413]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0414]
在一些实施方案中，在化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐中，每个ra独立地选自卤素、羟基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基；每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；并且z1、r1和r3如式i中所定义。
[0415]
在一些实施方案中，式ia化合物选自化合物id-1-348(如下表g所示)、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐：
[0416]
表g：示例性式id化合物
[0417]
[0418]
[0419]
[0420]
[0421]
[0422]
[0423]
[0424]
[0425]
[0426]
[0427]
[0428]
[0429]
[0430]
[0431]
[0432]
[0433]
[0434]
[0435]
[0436]
[0437]
[0438]
[0439][0440]
在一些实施方案中，本公开的化合物选自式ie化合物：
[0441][0442]
其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中z1、r1和r3如式i中所定义。
[0443]
在一些实施方案中，本公开的化合物选自式if化合物：
[0444][0445]
其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中z1、r1和r3如式i中所定义。
[0446]
在一些实施方案中，本公开的化合物选自式ig化合物：
[0447][0448]
其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上
可接受的盐，其中：
[0449]
y1选自c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基和4-6元杂环基，其各自被ry和0-2个rc基团取代；
[0450]
每个rc独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷基和羧酸基团，其中所述c
1-c6烷基被0-2个独立地选自氧代、羟基和羧酸的基团取代，或者两个rc基团一起形成3元至6元环烷基；
[0451]ry
是并且
[0452]
z1、r1和r2如式i中所定义。
[0453]
本公开的一些实施方案包括化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的衍生物或式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的衍生物或化合物或其互变异构体。
[0454]
在一些实施方案中，衍生物是硅衍生物，其中选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)或者式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)中的至少一个碳原子已被硅置换。
[0455]
在一些实施方案中，衍生物是硼衍生物，其中选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)或者式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)或其互变异构体中的至少一个碳原子被硼置换。
[0456]
在其他实施方案中，衍生物是磷酸酯衍生物，其中选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)或者式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)或其互变异构体中的至少一个碳原子被磷置换。
[0457]
由于硅、硼和磷的一般特性与碳的一般性特性相似，因此用硅、硼或磷置换碳可产生具有与含碳的原始化合物相似的生物活性的化合物。
[0458]
在一些实施方案中，衍生物是硅衍生物，其中选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)或者式i、ia、ib、ic、id、ie、ig或if的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)及其互变异构体中的一个碳原子已被硅置换。在其他实施方案中，
两个碳原子被硅置换。被硅置换的碳可以是非芳香族碳。在一些实施方案中，叔丁基部分的季碳原子可以被硅置换。
[0459]
在一些实施方案中，本公开的硅衍生物可以包含一个或多个被氘置换的氢原子。例如，叔丁基部分的一个或多个氢(其中碳已被硅置换)可以被氘置换。在其他实施方案中，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；选自化合物1-46的化合物；或者选自化合物74-96的化合物)或者式i、ia、ib、ic、id、ie、ig或if的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)及其互变异构体的硅衍生物可以具有并入到杂环中的硅。
[0460]
本公开的另一方面提供了药物组合物，其包含选自根据式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig中任一者的化合物(例如，根据式i、ia、ib、ic或id中任一者的化合物)以及化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348；化合物1-46和化合物74-96；化合物1-46；或化合物74-96)的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，药物组合物包含至少一种选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，至少一种选自式i、ia、ib、ic和id的化合物)以及化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348；化合物1-46和化合物74-96；化合物1-46；或化合物74-96)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0461]
药物组合物可以还包含至少一种药学上可接受的载体。在一些实施方案中，至少一种药学上可接受的载体选自药学上可接受的媒介物和药学上可接受的佐剂。在一些实施方案中，至少一种药学上可接受的选自药学上可接受的填充剂、崩解剂、表面活性剂、粘合剂、润滑剂。
[0462]
还应当理解，本公开的药物组合物可以用于组合疗法中；也就是说，本文所述的药物组合物可以还包含至少一种其他活性剂。或者，包含至少一种式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，至少一种式i、ia、ib、ic或id的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐的药物组合物可以作为单独的组合物在包含至少一种额外活性剂的组合物同时、之前或之后施用。在一些实施方案中，包含至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐的药物组合物可以作为单独的组合物在包含至少一种额外活性剂的组合物同时、之前或之后施用。
[0463]
在一些实施方案中，将式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)、该化合物的互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐与至少一种额外活性剂组合，以同时、分别或依次用于治疗aatd。在一些实施方案中，当同时使用时，式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)、该化合物的互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐以及至少一种额外活性剂处于单独的药物组合物中。在一些实施方案中，当同时使用时，式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)、该化合物的互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐以及至少一种额外活性剂一起处于同一药物组合物中。在一些实施方案中，化合物是选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0464]
在一些实施方案中，提供了式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)、该化合物的互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐，用于治疗aatd的方法中，其中所述方法包括共同施用所述化合物和额外活性剂。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂在同一药物组合物中共同施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂在单独的药物组合物中共同施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂同时共同施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂依次共同施用。在一些实施方案中，化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0465]
在一些实施方案中，提供了式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)、该化合物的互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐与额外活性剂的组合，用于治疗aatd的方法中。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂在同一药物组合物中共同施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂在单独的药物组合物中共同施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂同时共同施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂依次共同施用。在一些实施方案中，化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0466]
在一些实施方案中，提供了额外活性剂用于治疗aatd的方法中，其中所述方法包括共同施用额外活性剂和式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)、该化合物的互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂在同一药物组合物中共同施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂在单独的药物组合物中共同施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂同时共同施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂依次共同施用。在一些实施方案中，化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0467]
在一些实施方案中，提供了式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)、该化合物的互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐，用于治疗aatd的方法中，其中所述化合物被制备用于与额外活性剂组合施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于在同一药物组合物中施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于在单独的药物组合物中施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于同时施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于连续共同施用。在一些实施方案中，化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0468]
在一些实施方案中，提供了式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合物)、该化合物的互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐与额外活性剂的组合，用于治疗aatd的方法中。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于在同一药物组合物中施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于在单独的药物组合物中施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于同时施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于连续共同施用。在一些实施方案中，化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0469]
在一些实施方案中，提供了额外活性剂用于治疗aatd的方法中，其中所述额外活性剂被制备用于与式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic或id的化合
物)、该化合物的互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐组合施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于在同一药物组合物中施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于在单独的药物组合物中施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于同时施用。在一些实施方案中，化合物和额外活性剂被制备用于连续共同施用。在一些实施方案中，化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。
[0470]
在一些实施方案中，额外活性剂选自来自健康人供体血浆的α-1抗胰蛋白酶蛋白(aat)和重组aat。在一些实施方案中，额外活性剂是来自健康人供体血浆的α-1抗胰蛋白酶蛋白(aat)。在一些实施方案中，额外活性剂是来自健康人供体血浆的α-1抗胰蛋白酶蛋白(aat)。
[0471]
如上所述，本文公开的药物组合物可以任选地还包含至少一种药学上可接受的载体。至少一种药学上可接受的载体可选自佐剂和媒介物。如本文所使用，至少一种药学上可接受的载体包括适合于所需的特定剂型的任何和所有溶剂、稀释剂、其他液体媒介物、分散助剂、悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、固体粘合剂和润滑剂。remington:the science and practice of pharmacy,第21版,2005,d.b.troy编辑,lippincott williams&wilkins,philadelphia和encyclopedia of pharmaceutical technology,j.swarbrick和j.c.boylan编辑,1988-1999,marcel dekker,new york公开用于配制药物组合物的各种载体和用于制备其的已知技术。除非任何常规载体与本公开的化合物不相容，诸如通过产生任何不合需要的生物作用或另外以有害方式与药物组合物的任何其他组分相互作用，否则预期其使用在本公开的范围内。合适的药学上可接受的载体的非限制性实例包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸和山梨酸钾)、饱和植物脂肪酸偏甘油酯混合物、水盐和电解质(诸如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠和锌盐)、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯，、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、羊毛脂、糖(诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖)、淀粉(诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉)、纤维素和其衍生物(诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素)、粉状黄蓍胶、麦芽、明胶、滑石、赋形剂(诸如可可脂和栓剂蜡)、油类(诸如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、二醇类(诸如丙二醇和聚乙二醇)、酯类(诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯)、琼脂、缓冲剂(诸如氢氧化镁和氢氧化铝)、海藻酸、无热原质水、等渗盐水、林格氏溶液(ringer's solution)、乙醇、磷酸盐缓冲液、无毒相容润滑剂(诸如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁)、着色剂、脱模剂、包覆剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、防腐剂和抗氧化剂。
[0472]
在本公开的另一方面，本文所述的化合物和药物组合物用于治疗aatd。在一些实施方案中，需要用本公开的化合物和组合物治疗的受试者携带zz突变。在一些实施方案中，需要用本公开的化合物和组合物治疗的受试者携带sz突变。
[0473]
在一些实施方案中，本公开的方法包括向有需要的患者施用选自式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物(例如，式i、ia、ib、ic和id的化合物)中的任一者的化合物、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，式(i)化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348(例如，式(i)化合物选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348；式(i)化合物选自化合物1-46和化合物74-96；式(i)化合物选自化合物1-46；或者式(i)化合物选自化合物74-96)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述有需要的患者在α-1抗胰蛋白酶基因中具有z突变。在一些实施方案中，所述有需要的患者对于在α-1抗胰蛋白酶基因中的z突变是纯合的。
[0474]
本公开的另一方面提供了调节α-1抗胰蛋白酶活性的方法，其包括将所述α-1-抗胰蛋白酶与至少一种式i、ia、ib、ic、id、ie、if或ig的化合物(例如，至少一种式i、ia、ib、ic或id的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐接触的步骤。在一些实施方案中，调节α-1抗胰蛋白酶活性的方法包括将所述α-1-抗胰蛋白酶与至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物(例如，至少一种选自化合物1-46、化合物47-73、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348的化合物；至少一种选自化合物1-46和化合物74-96的化合物；至少一种选自化合物1-46的化合物；或者至少一种选自化合物74-96的化合物)、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐接触的步骤。
[0475]
在一些实施方案中，调节α-1抗胰蛋白酶活性的方法在体内进行。在一些实施方案中，调节α-1抗胰蛋白酶活性的方法离体进行，并且所述α-1-抗胰蛋白酶来自从人类受试者获得的生物样品。在一些实施方案中，调节aat的方法在体外进行，并且所述α-1-抗胰蛋白酶来自从人类受试者获得的生物样品。在一些实施方案中，生物样品是血液样品。在一些实施方案中，生物样品是取自肝活检物的样品。
[0476]
iii.化合物的制备
[0477]
本文公开的所有属、亚属和特定化合物式都被认为是本公开的一部分。
[0478]
a.式i化合物
[0479]
本公开的化合物可以根据标准化学实践或如本文所述来制备。贯穿以下合成方案中并在用于制备式i、ia、ib、ic、id、ie、if和ig的化合物以及化合物1-46、化合物47-73、化合物74-96、化合物ia-1-348、化合物ib-1-348、化合物ic-1-348和化合物id-1-348、这些化合物的互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐的描述中，使用以下缩写：
[0480]
缩写
[0481]
aq.＝水溶液
[0482]
brettphos pd g4＝二环己基-[3,6-二甲氧基-2-[2,4,6-三(丙-2-基)苯基]苯基]磷烷；甲磺酸；n-甲基-2-苯基苯胺；钯
[0483]
cam＝钼酸铈铵
[0484]
dcm＝二氯甲烷
[0485]
dce＝1,2-二氯乙烷
[0486]
dipea＝n,n-异丙基乙胺或n-乙基-n-异丙基-丙-2-胺
[0487]
dma＝二甲基乙酰胺
[0488]
dmap＝二甲氨基吡啶
[0489]
dme＝二甲氧基乙烷
[0490]
dmf＝二甲基甲酰胺
[0491]
dmso＝二甲基亚砜
[0492]
etoh＝乙醇
[0493]
etoac＝乙酸乙酯
[0494]
hatu＝[二甲基氨基(三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)
[0495]
meoh＝甲醇
[0496]
mp-tmt清除树脂＝大孔聚苯乙烯结合的三巯基三嗪，其为2,4,6-三巯基三嗪(tmt)的树脂结合等效物。
[0497]
mtbe＝甲基叔丁基醚
[0498]
nmm＝n-甲基吗啉
[0499]
nmp＝n-甲基吡咯烷
[0500]
pd(dppf)2cl2＝[1,1
′‑
双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)
[0501]
pdcl2＝二氯化钯(ii)
[0502]
pdcl2(pph3)2＝双(三苯基膦)二氯化钯(ii)
[0503]
sfc＝超临界流体色谱法
[0504]
sphos pd g3＝(2-二环己基膦基-2
′
,6
′‑
二甲氧基联苯)[2-(2
′‑
氨基-1,1
′‑
联苯)]甲磺酸钯(ii)
[0505]
tea＝三乙胺
[0506]
tbaf＝四丁基氟化铵
[0507]
tbuxphos pd g1＝氯[2-(二-叔丁基膦基)-2
′
,4
′
,6
′‑
三异丙基-1,1
′‑
联苯基][2-(2-氨乙基)苯基]钯(ii)或t-buxphos氯化钯(ii)苯乙胺
[0508]
tbuxphos pd g3＝[(2-二-叔丁基膦-2
′
,4
′
,6
′‑
三异丙基-1,1
′‑
联苯)-2-(2
′‑
氨基-1,1
′‑
联苯)]甲磺酸钯(ii)
[0509]
tbuxphos pd g4＝二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷；二氯甲烷；甲磺酸酯；n-甲基-2-苯基苯胺钯(ii)
[0510]
tfa＝三氟乙酸
[0511]
thf＝四氢呋喃
[0512]
xphos pd g1＝(2-二环己基膦基-2
′
,4
′
,6
′‑
三异丙基-1,1
′‑
联苯)[2-(2-氨乙基)苯基)]氯化钯(ii)或(xphos)氯化钯(ii)苯乙胺
[0513]
实施例
[0514]
为了更全面地理解本文所述的公开内容，阐述了以下实施例。应理解，这些实施例
仅用于说明性目的，并且不应解释为以任何方式限制本公开。
[0515]
实施例1：化合物的合成
[0516]
5-(4-氟苯基)-6-异丙基吡咯并[2,3-f]吲唑-1(5h)-甲酸苄酯(s1)
[0517][0518]
步骤1：5-氯-6-(3-甲基丁-1-炔-1-基)-1h-吲唑(c3)
[0519]
在氮气下向6-溴-5-氯-1h-吲唑c1(10.4g,44.9mmol)、3-甲基丁-1-炔c2(10.7ml,104.6mmol)和cui(497mg,2.6mmol)于et3n(100ml)和1,4-二噁烷(100ml)中的溶液中添加pd(pph3)2cl2(1.7g,2.4mmol)。将反应在90℃下加热过夜。添加meoh和并且将混合物浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)纯化，得到产物5-氯-6-(3-甲基丁-1-炔-1-基)-1h-吲唑(7.0g,71％)。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ10.17(s,1h),8.02(d,j＝1.1hz,1h),7.80(d,j＝0.7hz,1h),7.62(t,j＝0.9hz,1h),2.88(h,j＝6.9hz,1h),1.34(d,j＝6.9hz,6h)。lcms m/z 219.04[m+h]+。
[0520]
步骤2：n-(4-氟苯基)-6-(3-甲基丁-1-炔-1-基)-1h-吲唑-5-胺(c5)
[0521]
将5-氯-6-(3-甲基丁-1-炔基)-1h-吲唑c3(744mg,3.3mmol)、4-氟苯胺c4(600mg,5.4mmol)、naotbu(1.3g,13.0mmol)和brettphos pd g4催化剂(79mg,0.09mmol)于t-buoh(11ml)的混合物用氮气吹扫并在120℃下搅拌18小时。将混合物用dcm(75ml)稀释并用50％
nahco3饱和水溶液(40ml)洗涤。通过使其穿过相分离器来干燥有机层并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)纯化，得到n-(4-氟苯基)-6-(3-甲基丁-1-炔-1-基)-1h-吲唑-5-胺(812mg,80％)。lcms m/z 294.3[m+h]+；连同作为微量组分的环状c14(4.6:1)。将混合物按原样使用。
[0522]
步骤3：5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1,5-二氢吡咯并[2,3-f]吲唑(c6)
[0523]
将n-(4-氟苯基)-6-(3-甲基丁-1-炔基)-1h-吲唑-5-胺c5(812mg,2.7mmol)于dmso(3.5ml)中的溶液在密封管中在150℃下加热90分钟。添加50％nahco3饱和水溶液(25ml)并将混合物用etoac(2x100ml)萃取，用na2so4干燥，过滤并浓缩，以得到5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1,5-二氢吡咯并[2,3-f]吲唑(778mg,92％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ12.59(s,1h),7.96(d,j＝1.0hz,1h),7.57-7.41(m,5h),7.15(t,j＝1.0hz,1h),6.48(d,j＝0.8hz,1h),2.98-2.84(m,1h),1.18(d,j＝6.8hz,6h)。lcms m/z 294.3[m+h]+。
[0524]
步骤4：5-(4-氟苯基)-6-异丙基吡咯并[2,3-f]吲唑-1(5h)-甲酸苄酯(s1)
[0525]
在冰浴中时向5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑c6(14.6g,49.1mmol)于thf(288ml)中的悬浮液中添加kotbu(7.2g,64.2mmol)，并搅拌30分钟。然后添加cbzcl(21.5ml的3m,64.5mmol)并在冰浴中时将混合物再搅拌1小时。添加水(300ml)，将混合物搅拌5分钟并分配在etoac(400ml)与水(100ml)之间。将有机相用盐水洗涤(400ml)，用mgso4干燥并浓缩。将mtbe(40ml)添加到残余物中并过滤浆液，将其用mtbe洗涤并干燥，以得到5-(4-氟苯基)-6-异丙基吡咯并[2,3-f]吲唑-1(5h)-甲酸苄酯(17.04g,80％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.39-8.33(m,1h),8.29-8.23(m,1h),7.62-7.36(m,9h),7.36-7.31(m,1h),6.68-6.61(m,1h),5.55-5.49(m,2h),2.94(m,1h),1.20(dd,j＝6.8,1.7hz,6h)。lcms m/z 428.25[m+1]
+
。
[0526]
1-(苯磺酰基)-6-溴-n-(4-氟苯基)吲唑-5-胺(s2)
[0527][0528]
步骤1：1-(苯磺酰基)-6-溴-5-硝基-吲唑(c8)
[0529]
在室温下向6-溴-5-硝基-1h-吲唑c7(103g,425.6mmol)和四丁基硫酸氢铵(7.24g,21.32mmol)于thf(1l)中的溶液中添加naoh(38.97g,974.3mmol)并将反应搅拌60
分钟。将反应混合物冷却至0℃，在25分钟内滴加苯磺酰氯(63ml,493.7mmol)，同时将内部温度保持低于10℃并将反应在0-10℃下搅拌20分钟，并且然后在室温下搅拌一小时。将混合物冷却至0℃并添加hcl水溶液(1.0m,600ml)以形成沉淀物。将混合物在室温下搅拌36小时，并通过过滤回收固体并用水(100ml)冲洗(收成1)。将滤液ph调节至8-9，用etoac(250ml)萃取，并将有机层用mgso4干燥并浓缩(收成2)。将收成合并，以得到1-(苯磺酰基)-6-溴-5-硝基-吲唑(154.64g,95％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.65-8.61(m,1h),8.28(d,j＝0.9hz,1h),8.24(s,1h),8.07-8.01(m,2h),7.70-7.63(m,1h),7.58-7.51(m,2h)。esi-ms m/z计算值380.9419，实测值382.03[m+1]
+
。
[0530]
步骤2：1-(苯磺酰基)-6-溴-5-硝基-吲唑(c9)
[0531]
将1-(苯磺酰基)-6-溴-5-硝基-吲唑c8(6.97g,18.24mmol)和nh4cl(490mg,9.16mmol)于etoh(65ml)、水(20ml)和thf(40ml)中的溶液加热至回流。然后在30分钟内分批添加铁(4.2g,75.21mmol)，并将反应再加热回流30分钟。通过垫过滤混合物，将其用etoac和2-methf洗涤。将混合物浓缩。通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-100％etoac)纯化，产生产物1-(苯磺酰基)-6-溴-吲唑-5-胺(6.22g,97％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.28-8.21(m,1h),8.11(d,j＝0.9hz,1h),7.94-7.86(m,2h),7.67-7.58(m,1h),7.55-7.47(m,2h),7.08(s,1h)。lcms m/z 351.88[m+1]
+
。
[0532]
步骤3：1-(苯磺酰基)-6-溴-n-(4-氟苯基)吲唑-5-胺(s2)
[0533]
向装载有分子筛(24.2g，在230℃下在真空下干燥18小时并在使用前60分钟在干燥氮气氛围下冷却至室温)的烧瓶中添加干燥的1-(苯磺酰基)-6-溴-吲唑-5-胺c9(20.5g,58.2mmol)、(4-氟苯基)硼酸c10(16.7g,119.1mmol)和乙酸铜(ii)(21.7g,119.2mmol)。然后，添加无水dcm(310ml)并且将浆液在氮气氛围下搅拌25分钟。将反应冷却至0℃，滴加et3n(41ml,294.2mmol)并将氧气吹扫通过浆液15分钟。将反应在室温下在氧气氛围下搅拌18小时。添加dcm(160ml)并将混合物冷却至0℃。添加6％nh4oh水溶液(250ml)并通过垫过滤粗制混合物，将其用dcm(250ml)洗涤。将有机层用6％nh4oh水溶液(2x250ml)和nh4cl饱和水溶液(2x400ml)洗涤。将水层用dcm(250ml)萃取并将合并的有机相用盐水(300ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。将混合物浓缩至干并添加thf(100ml)。添加庚烷，直到形成白色沉淀物(约300ml)。将所得浆液部分浓缩并通过过滤分离固体。将固体用mtbe:庚烷(25:75)(100ml)冲洗，然后用庚烷(100ml)冲洗。通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-30％etoac，含有10％二氯甲烷)纯化，得到1-(苯磺酰基)-6-溴-n-(4-氟苯基)吲唑-5-胺(24.13g,93％)。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ8.45(d,j＝0.9hz,1h),8.00-7.92(m,3h),7.63-7.54(m,1h),7.52-7.43(m,2h),7.19-7.10(m,3h),7.10-7.00(m,2h),6.01(s,1h)。lcms m/z 446.07[m+1]
+
。
[0534]
1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s3)
[0535][0536]
步骤1：n-(3,4-二氟苯基)-6-(3-甲基丁-1-炔基)-1h-吲唑-5-胺
[0537]
5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(c12)
[0538]
在氮气氛围下向5-氯-6-(3-甲基丁-1-炔基)-1h-吲唑c3(10g,45.73mmol)、3,4-二氟苯胺c11(8.27g,64.06mmol)和naotbu(10.33g,107.5mmol)于methf(120ml)中的悬浮液中添加tbuxphos pd g3(2.308mmol)并将反应在90℃下加热。将混合物冷却至室温，添加etoac(150ml)并添加nh4cl饱和水溶液，随后添加hcl水溶液(10ml的6m,60.00mmol)，以将ph调节至3。将有机相浓缩，以得到混合物开放和关闭的c12。将残余物悬浮于acoh(10.5ml,184.6mmol)中并在65℃下加热4小时。将混合物冷却至室温，依次用盐水和hcl 1n水溶液洗涤，干燥并浓缩。通过硅胶色谱法(于dcm/庚烷中的0至70％etoac)纯化，得到呈黄色固体的5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(12g,84％)1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ12.60(s,1h),7.97(s,1h),7.82-7.60(m,2h),7.55(s,1h),7.45-7.31(m,1h),7.24(s,1h),6.49(s,1h),2.96(p,j＝6.7hz,1h),1.18(d,j＝6.8hz,6h)。
[0539]
步骤2：1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s3)
[0540]
在冰浴中时在氮气氛围下向5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑c12(5g,16.06mmol)于thf(50ml)中的溶液中添加kotbu(2.3g,20.50mmol)。将反应搅拌10分钟并滴加2,2-二甲基丙酰氯(3ml,24.38mmol)。将反应搅拌30分钟，移除浴并将反应再搅拌30分钟。添加nh4cl饱和水溶液(100ml)，将混合物用etoac(3x)萃取。将有机相合并，用盐水洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至40％etoac)纯化，得到呈白色固体的1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(5.0g,79％)。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ8.67(s,1h),8.06(s,1h),7.40(q,j＝8.7hz,1h),7.33-7.12(m,3h),6.57(s,1h),2.97(dt,j＝13.5,6.5hz,1h),1.60(s,9h),1.28(s,6h)。esi-ms m/z计算值395.1809，实测值396.19[m+1]
+
。
[0541]
1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲
基-丙-1-酮(s4)
[0542][0543]
步骤1：溴-5-碘-2-甲基-苯胺(c14)
[0544]
在-10℃与-20℃之间向5-碘-2-甲基-苯胺c13(750g,3.218mol)于dmf(7.5l)中的溶液中滴加nbs(575g,3.231mol)于dmf(1.5l)中的溶液并将反应搅拌30分钟。将水添加到混合物(20l)中，过滤沉淀物，将其用水洗涤并干燥，以得到呈灰白色固体的4-溴-5-碘-2-甲基-苯胺(925.1g,91％)。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ7.27(q,j＝0.8hz,1h),7.17(s,1h),3.62(s,2h),2.11(dd,j＝0.8,0.4hz,3h)。esi-ms m/z计算值310.88065，实测值311.9[m+1]
+
。
[0545]
步骤2：5-溴-6-碘-1h-吲唑(c15)
[0546]
向4-溴-5-碘-2-甲基-苯胺c14(26.08g,81.80mmol)于acoh(400ml)中的溶液中添加亚硝酸异戊酯(14.3ml,106.4mmol)并将反应在室温下搅拌2小时。将反应在50℃下加热2h并在70℃下加热30分钟。将混合物用冰冷却并过滤沉淀物，将其洗涤并干燥，以得到5-溴-6-碘-1h-吲唑(24.89g,94％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.26(s,1h),8.22(s,1h),8.19(s,1h),8.05(s,1h)。esi-ms m/z计算值321.86026，实测值325.21[m+1]
+
。
[0547]
步骤3：5-溴-6-碘-吲唑-1-甲酸苄酯(c16)
[0548]
在5分钟内向5-溴-6-碘-1h-吲唑c15(40g,123.9mmol)于thf(500ml)中的溶液中添加kotbu(16.9g,150.6mmol)并将反应搅拌20分钟。然后，在20分钟内添加cbzcl(46.7ml的3m,140.1mmol)并将反应在室温下搅拌14小时。将混合物倒入到水(1.2l)中，过滤沉淀
丙-1-酮(s5)
[0556][0557]
在0℃时向1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s3(400mg,0.9666mmol)于dcm(3.9ml)中的溶液中分批添加nis(298mg,1.258mmol)并将反应在室温下搅拌1小时。将混合物用na2so31m水溶液洗涤，使其穿过相分离器并浓缩，以得到1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-碘-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(557mg，定量)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.43(d,j＝0.8hz,1h),8.37(d,j＝1.0hz,1h),7.85(ddd,j＝10.3,7.2,2.5hz,1h),7.79-7.70(m,1h),7.44(d,j＝8.1hz,1h),7.35(d,j＝1.0hz,1h),3.06(q,j＝7.2hz,1h),1.52(s,9h),1.36(dd,j＝7.2,4.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值521.0776，实测值522.01[m+1]
+
。
[0558]
1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-7-碘-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s6)
[0559][0560]
在0℃时向1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s4(400mg,0.8138mmol)于dcm(3.3ml)中的溶液中分批添加1-碘吡咯烷-2,5-二酮(251mg,1.060mmol)并将反应在室温下搅拌1小时。将混合物用na2so
3 1m水溶液洗涤，使其穿过相分离器并浓缩，以得到1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-7-碘-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(531mg,定量)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.43(d,j＝0.8hz,1h),8.37-8.35(m,1h),7.50(dd,j＝11.3,8.5hz,1h),7.36(dd,j＝7.8,2.5hz,1h),7.34(d,j＝0.9hz,1h),7.13-7.08(m,1h),3.85(s,3h),3.15-3.05(m,1h),1.52(s,9h),1.38(dd,j＝9.4,7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值533.09753，实测值534.02[m+1]
+
。
[0561]
1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s7)
[0562][0563]
步骤1：5-氯-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑(c21)
[0564]
向6-溴-5-氯-1h-吲唑c1(5g,20.09mmol)、4-乙炔基四氢吡喃c20(5g,45.39mmol)和cui(229mg,1.202mmol)于et3n(44ml)和1,4-二噁烷(44ml)中的氮气吹扫的溶液中添加pd(pph3)2cl2(745mg,1.061mmol)并将反应在90℃下加热18小时。添加甲醇并将混合物浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至50％etoac)纯化，得到5-氯-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑(3.428g,63％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ13.31(s,1h),8.07(t,j＝1.2hz,1h),7.96(t,j＝0.7hz,1h),7.71(t,j＝0.8hz,1h),3.91-3.79(m,2h),3.57-3.44(m,2h),3.07-2.94(m,1h),1.95-1.82(m,2h),1.72-1.57(m,2h)。esi-ms m/z计算值260.07166，实测值261.17[m+1]
+
。
[0565]
步骤2：n-(3,4-二氟苯基)-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑-5-胺(c22)
[0566]
在氮气下向5-氯-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑c21(4.5g,17.26mmol)、3,4-二氟苯胺c11(3.6g,27.88mmol)和naotbu(6.9g,71.80mmol)于t-buoh(65ml)中的混合物中添加brettphos pd g4(443mg,0.4812mmol)并将反应在120℃下加热。将混合物冷却至0℃，添加水和dcm并将ph用hcl(11.8ml的6m,70.80mmol)调节并将混合物用dcm(2x)萃取。将合并的有机相用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)
纯化，得到开放和闭合c23(3.4:1)的混合物。将混合物按原样用于下一步骤中。n-(3,4-二氟苯基)-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑-5-胺(5.76g,90％)。esi-ms m/z计算值353.13397，实测值354.46[m+1]
+
。
[0567]
步骤3：5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(c23)
[0568]
将n-(3,4-二氟苯基)-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑-5-胺c22(5.76g,16.30mmol)于t-buoh(119ml)中的溶液在85℃下加热18小时。将混合物浓缩，以得到5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(5.76g,100％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ9.86(s,1h),8.04(s,1h),7.58(t,j＝1.1hz,1h),7.46-7.33(m,1h),7.29-7.22(m,1h),7.20-7.14(m,1h),6.51-6.48(m,1h),4.10-3.89(m,2h),3.38(td,j＝11.8,2.3hz,2h),2.82(tt,j＝11.6,3.9hz,1h),1.93-1.69(m,4h)。
[0569]
步骤4：1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(c24)
[0570]
在0℃时向5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑c23(1.01g,2.858mmol)于thf(32ml)中的溶液中添加kotbu(702.9mg,6.264mmol)。将反应搅拌5分钟，滴加2,2-二甲基丙酰氯(1.4ml,11.38mmol)并将反应在0℃下再搅拌1小时20分钟。添加水和dcm，将有机相回收并浓缩。通过硅胶色谱法(于dcm中的0至5％etoac)纯化，得到1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(1.1109g,87％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.51(s,1h),8.39(d,j＝0.8hz,1h),7.83(ddd,j＝11.2,7.2,2.6hz,1h),7.72(dt,j＝10.6,8.8hz,1h),7.46-7.40(m,2h),6.71(d,j＝0.8hz,1h),3.86(dt,j＝11.4,3.1hz,2h),3.32-3.22(m,2h),2.92(td,j＝10.0,4.9hz,1h),1.78-1.66(m,4h),1.51(s,9h)。19f nmr(376mhz,dmso-d6)δ-135.25(d,j＝22.9hz),-137.86(d,j＝23.1hz)。esi-ms m/z计算值437.1915，实测值438.39[m+1]
+
。
[0571]
步骤5：1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s7)
[0572]
在0℃时在30分钟内向1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮c24(4.95g,11.31mmol)于dcm(135ml)中的溶液中分批添加nis(2.6g,11.56mmol)并将反应在室温下搅拌18小时。将混合物浓缩并通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至20％etoac)纯化，得到1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(4.8g,68％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.41(d,j＝19.7hz,2h),7.86(t,j＝9.0hz,1h),7.75(q,j＝9.4hz,1h),7.45(s,1h),7.37(s,1h),3.91(d,j＝11.6hz,2h),2.94(t,j＝12.4hz,1h),2.31(d,j＝13.1hz,2h),1.68(s,1h),1.52(s,9h)。esi-ms m/z计算值563.08813，实测值564.04[m+1]
+
。
[0573]
1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s8)
[0574][0575]
步骤1：5-溴-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑(c26)
[0576]
向5-溴-6-碘-1h-吲唑c15(5g,14.71mmol)于dmf(25ml)和et3n(25ml,179.4mmol)中的溶液中添加cui(170mg,0.8926mmol)、csf(4.47g,29.43mmol)和水(530μl,29.42mmol)，随后添加三甲基((四氢-2h-吡喃-4-基)乙炔基)硅烷c25(3.35g,18.37mmol)。然后，在氮气氛围下添加pd(pph3)2cl2(310mg,0.4417mmol)并将反应在80℃下加热18小时。将混合物冷却并蒸发，以移除et3n。添加水(80ml)并将混合物用etoac(70ml 2x)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷/dcm 3:1中的0至90％etoac)纯化，得到5-溴-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑(3.3g,74％)1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ10.40(s,1h),8.02(dd,j＝3.5,0.9hz,2h),7.65(t,j＝0.9hz,1h),4.04(ddd,j＝11.6,6.5,3.5hz,2h),3.65(ddd,j＝11.3,7.7,3.2hz,2h),3.00(tt,j＝8.0,4.2hz,1h),2.06-1.92(m,2h),1.85(dtd,j＝13.4,7.7,3.5hz,2h)。esi-ms m/z计算值304.02112，实测值305.31[m+1]
+
；303.31[m-1]-。
[0577]
步骤2：n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑-5-胺(c27)
[0578]
在氮气下向5-溴-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑c26(2.95g,9.667mmol)、4-氟-3-甲氧基-苯胺c18(2.0g,14.17mmol)和naotbu(1.6g,16.65mmol)于t-buoh(49.3ml)中的混合物中添加tbuxphos pd g1(238mg,0.3466mmol)并将反应加热至70℃持续1小时。添加水和dcm。使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)纯化，以得到n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑-5-胺(1.5g,42％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.90(d,j＝1.1hz,1h),7.59(s,1h),7.47(d,j＝0.8hz,1h),6.92(dd,j＝11.3,8.7hz,1h),6.71(dd,j＝7.5,2.6hz,1h),6.52-6.45(m,1h),3.84(ddd,j＝11.6,5.8,3.6hz,2h),3.80(s,3h),3.56-3.48(m,2h),2.96-2.88(m,1h),1.90-1.83(m,2h),1.70-1.60(m,2h)。esi-ms m/z计算值365.15396，实测值366.14[m+1]
+
。
[0579]
步骤3：5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(c28)
[0580]
将n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(2-四氢吡喃-4-基乙炔基)-1h-吲唑-5-胺c27(1.5g,4.105mmol)溶解于dmso(6.3ml)中的溶液在150℃下加热90分钟。添加50％nahco3饱和水溶液，将混合物用etoac(2x)萃取，用na2so4干燥并浓缩，以得到5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(750mg,46％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.60(s,1h),7.97(t,j＝1.3hz,1h),7.55(t,j＝1.1hz,1h),7.45(dd,j＝11.4,8.6hz,1h),7.29(dd,j＝7.8,2.5hz,1h),7.25(s,1h),7.04(ddd,j＝8.5,4.0,2.5hz,1h),6.50(s,1h),3.87(s,4h),3.86-3.83(m,1h),3.31-3.24(m,2h),2.94-2.84(m,1h),1.79-1.65(m,4h)。esi-ms m/z计算值365.15396，实测值366.14[m+1]
+
。
[0581]
步骤4：1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(c29)
[0582]
在0℃时向5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑c28(750mg,1.907mmol)于thf(15.5ml)中的溶液中添加kotbu(473mg,4.215mmol)并使其搅拌5分钟。滴加2,2-二甲基丙酰氯(910μl,7.396mmol)并将反应在0℃下搅拌1小时。将混合物浓缩并通过硅胶色谱法(于dcm中的0至100％etoac)纯化，得到1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(730mg,71％)1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.51(s,1h),8.39(s,1h),7.48(dd,j＝11.3,8.5hz,1h),7.42(s,1h),7.34(dd,j＝7.8,2.4hz,1h),7.13-7.05(m,1h),6.70(s,1h),3.88(s,3h),3.88-3.82(m,2h),3.32-3.22(m,2h),2.99-2.87(m,1h),1.82-1.66(m,4h),1.52(s,9h)。esi-ms m/z计算值449.21146，实测值450.23[m+1]
+
。
[0583]
步骤5：1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s8)
[0584]
在0℃时向1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮c29(730mg,1.346mmol)于dcm(6.2ml)中的溶液中分批添加nis(416mg,1.757mmol)并将反应在室温下搅拌1小时。将混合物用na2so
3 1m水溶液洗涤，使其穿过相分离器并浓缩，以得到1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-4-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(728mg,85％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.44(s,1h),8.39(s,1h),7.51(dd,j＝11.3,8.5hz,1h),7.39-7.34(m,2h),7.15-7.08(m,1h),3.98-3.81(m,5h),3.33-3.19(m,2h),3.05-2.91(m,1h),2.43-2.25(m,2h),1.77-1.60
(m,2h),1.52(s,9h)。esi-ms m/z计算值575.1081，实测值575.15[m+1]
+
。
[0585]
1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s9)
[0586][0587]
步骤1：5-溴-6-(2-四氢吡喃-3-基乙炔基)-1h-吲唑(c31)
[0588]
在氮气下向5-溴-6-碘-1h-吲唑c15(6.4g,19.82mmol)和3-乙炔基四氢吡喃c30(2.75g,24.97mmol)于1,4-二噁烷(50ml)和et3n(50ml)中的溶液中添加cui(409mg,2.148mmol)和pd(pph3)2cl2(762mg,1.086mmol)并将反应在65℃下加热18小时。将混合物浓缩，添加水(250ml)和dcm(250ml)。收集有机相，并将水相用dcm(100ml,2x)萃取。将合并的有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至40％etoac)纯化，得到5-溴-6-(2-四氢吡喃-3-基乙炔基)-1h-吲唑(3.649g,57％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.31(s,1h),8.13(s,1h),8.07(t,j＝1.2hz,1h),7.70(d,j＝0.8hz,1h),3.90(ddd,j＝10.9,4.0,1.4hz,1h),3.76-3.69(m,1h),3.47(ddd,j＝10.9,9.0,2.3hz,2h),2.84(td,j＝8.7,4.2hz,1h),2.11-2.03(m,1h),1.71(dtt,j＝12.8,9.7,3.7hz,2h),1.60-1.50(m,1h)。esi-ms m/z计算值304.02112，实测值304.99[m+1]
+
。
[0589]
步骤2：n-(3,4-二氟苯基)-6-(2-四氢吡喃-3-基乙炔基)-1h-吲唑-5-胺(c32)
[0590]
在氮气下向5-溴-6-(2-四氢吡喃-3-基乙炔基)-1h-吲唑c31(3.6g,11.21mmol)和naotbu(3.16g,32.88mmol)和3,4-二氟苯胺c11(2.2ml,22.19mmol)于t-buoh(56ml)中的混合物中添加tbuxphos pd g4(496mg,0.5552mmol)，并将反应在65℃下加热1小时。将混合物冷却至室温并浓缩。将残余物分配于dcm(250ml)与水(250ml)之间，将有机相用na2so4干燥并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至40％etoac)纯化，得到呈淡棕褐色固体的n-(3,4-二氟苯基)-6-(2-四氢吡喃-3-基乙炔基)-1h-吲唑-5-胺(2.769g,68％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.18-12.97(m,1h),8.00(t,j＝1.3hz,1h),7.70(s,1h),7.59(s,1h),7.55(s,1h),7.20(dt,j＝10.7,9.2hz,1h),6.73(ddd,j＝13.3,7.1,2.8hz,1h),6.64-6.57(m,1h),3.76-3.65(m,2h),3.34-3.29(m,1h),3.20(dd,j＝11.0,8.8hz,1h),2.67(tt,j＝8.8,4.0hz,1h),1.96-1.85(m,1h),1.55(tdt,j＝8.4,5.4,3.3hz,1h),1.51-1.38(m,2h)。esi-ms m/z计算值353.13397，实测值354.12[m+1]
+
。
[0591]
步骤3：5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-3-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(c33)
[0592]
将n-(3,4-二氟苯基)-6-(2-四氢吡喃-3-基乙炔基)-1h-吲唑-5-胺c32(2.75g,7.573mmol)和氯化钯(ii)(5mg,0.02820mmol)于dmso(40ml)中的溶液在150℃下加热50分钟。将混合物冷却至室温，添加水(200ml)并将混合物用mtbe(3x250 ml)萃取。将合并的有机相用盐水(500ml)洗涤，用na2so4干燥，并浓缩，以得到呈淡灰色固体的5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-3-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(2.129g,75％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.64(s,1h),7.98(t,j＝1.3hz,1h),7.83-7.66(m,2h),7.57(t,j＝1.1hz,1h),7.43-7.34(m,1h),7.25(d,j＝1.1hz,1h),6.55(d,j＝0.8hz,1h),3.90-3.66(m,2h),3.42-3.31(m,2h),2.80(ddt,j＝10.7,7.6,3.8hz,1h),2.06-1.97(m,1h),1.74(qd,j＝12.1,3.9hz,1h),1.65-1.59(m,1h),1.56-1.42(m,1h)。esi-ms m/z计算值353.13397，实测值354.08[m+1]
+
。
[0593]
步骤4：1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(c34)
[0594]
在0℃时向5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-3-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑c33(2.123g,5.655mmol)于thf(30ml)中的溶液中添加kotbu(822mg,7.325mmol)并将混合物搅拌5分钟。滴加2,2-二甲基丙酰氯(840μl,6.827mmol)，并在0℃下搅拌15分钟。将混合物浓缩，将残余物分配于水(150ml)与dcm(150ml)之间。使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至25％etoac)纯化，得到呈黄色固体的1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(2.294g,92％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.52(d,j＝0.9hz,1h),8.39(d,j＝0.8hz,1h),7.84(s,1h),7.74(dt,j＝10.5,8.9hz,1h),7.42(d,j＝1.1hz,2h),6.74(d,j＝0.8hz,1h),3.83(dd,j＝19.9,11.0hz,2h),3.46-3.34(m,2h),2.83(ddd,j＝14.4,10.4,3.8hz,1h),2.06-1.99(m,1h),1.77(qd,j＝12.2,3.9hz,1h),1.68-1.56(m,2h),1.51(s,9h)。esi-ms m/z计算值437.1915，实测值438.17[m+1]
+
。
[0595]
步骤5：1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s9)
[0596]
向1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮c34(2.29g,5.183mmol)于dcm(26ml)中的溶液中缓慢添加nis(1.313g,5.836mmol)并将反应在室温下搅拌1小时。将混合物浓缩并通过硅胶色谱法(于庚烷中的0
至25％etoac)纯化，得到呈黄色固体的1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(2.724g,92％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.44(d,j＝0.8hz,1h),8.39(d,j＝0.9hz,1h),7.93-7.82(m,1h),7.77(dtd,j＝11.2,8.9,2.5hz,1h),7.52-7.41(m,1h),7.38(dd,j＝2.9,0.9hz,1h),3.99-3.79(m,3h),2.95-2.84(m,1h),2.41-2.35(m,1h),2.00-1.89(m,1h),1.70-1.59(m,1h),1.56-1.44(m,11h)。esi-ms m/z计算值563.08813，实测值564.04[m+1]
+
。
[0597]
1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s10)
[0598][0599]
步骤1：5-氯-6-(2-四氢吡喃-3-基乙炔基)-1h-吲唑(c35)
[0600]
在氮气下向帕尔瓶中6-溴-5-氯-1h-吲唑c1(15g,64.80mmol)于et3n(110ml)和1,4-二噁烷(110ml)中的溶液中依次添加pd(pph3)2cl2(1.37g,1.952mmol)、cui(741mg,3.891mmol)和3-乙炔基四氢吡喃c30(11.5g,104.4mmol)。将瓶密封并将反应在110℃下加热2小时。将混合物冷却至0℃，过滤，同时用mtbe洗涤，将滤液回收并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至90％etoac)纯化，得到5-氯-6-(2-四氢吡喃-3-基乙炔基)-1h-吲唑(12g,71％)1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ10.17(s,1h),8.02(s,1h),7.80(s,1h),7.63(s,1h),4.07(dd,j＝11.0,2.9hz,1h),3.90(dd,j＝11.3,3.3hz,1h),3.63-3.47(m,2h),2.88(td,j＝
9.3,4.6hz,1h),2.19(d,j＝9.0hz,1h),1.73(dtd,j＝24.1,10.0,4.7hz,3h)。esi-ms m/z计算值260.07166，实测值261.08[m+1]
+
；259.08[m-1]-。
[0601]
步骤2：5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-3-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(c36)
[0602]
在氮气下向5-氯-6-(2-四氢吡喃-3-基乙炔基)-1h-吲唑c35(5.6g,21.48mmol)、4-氟-3-甲氧基-苯胺c18(4.9g,34.72mmol)、tbuxphos(365mg,0.8595mmol)和naotbu(4.95g,51.51mmol)于methf(60ml)中的悬浮液中添加tbuxphos pd g4(960mg,1.075mmol)并将反应加热至90℃持续18小时。将混合物冷却，添加nh4cl饱和水溶液、etoac和hcl水溶液(4.8ml的6m,28.80mmol)。将有机相回收并将水相用etoac萃取。将合并的有机相干燥并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至90％etoac)纯化，得到开放和闭合的混合物。将材料溶解于dmso(15ml)并加热至160℃持续50分钟。将混合物冷却，添加水，过滤沉淀物，同时用水和庚烷洗涤。通过硅胶色谱法(0至90％etoac)纯化固体，得到5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-3-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(4.3g,55％)。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ9.88(s,1h),8.06(s,1h),7.59(s,1h),7.36-7.22(m,2h),6.96(d,j＝7.2hz,2h),6.51(s,1h),3.91(s,5h),3.56-3.39(m,2h),2.93(ddd,j＝14.3,10.5,3.8hz,1h),2.08(s,1h),1.90-1.55(m,3h)。esi-ms m/z计算值365.15396，实测值366.21[m+1]
+
；364.21[m-1]-。
[0603]
步骤3：1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(c37)
[0604]
在0℃下向5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-3-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑c36(1.99g,5.446mmol)于thf(30ml)中的溶液中添加kotbu(798mg,7.112mmol)并将反应搅拌5分钟。滴加2,2-二甲基丙酰氯(810μl,6.583mmol)并在0℃时将反应搅拌30分钟。将混合物浓缩，并将残余物分配于水(150ml)与dcm(150ml)之间。使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至35％etoac)纯化，得到呈黄色固体的1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(2.015g,81％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.51(d,j＝1.0hz,1h),8.39(d,j＝0.8hz,1h),7.49(dd,j＝11.3,8.5hz,1h),7.41(s,1h),7.39-7.29(m,1h),7.09(s,1h),6.72(s,1h),3.94-3.77(m,5h),3.39(td,j＝11.4,2.6hz,2h),2.92-2.78(m,1h),2.11-1.94(m,1h),1.87-1.70(m,1h),1.68-1.44(m,11h)。esi-ms m/z计算值449.21146，实测值450.19[m+1]
+
。
[0605]
步骤4：1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s10)
[0606]
向1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮c37(2g,4.395mmol)于dcm(25ml)中的溶液中缓慢添加nis(1.075g,4.778mmol)并将反应在室温下搅拌1小时。将混合物浓缩并通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至35％etoac)纯化，得到呈黄色固体的1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-7-碘-6-四氢吡喃-3-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(2.323g,90％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.44(d,j＝0.8hz,1h),8.39(d,j＝0.9hz,1h),7.52(ddd,j＝11.3,8.5,1.8hz,1h),7.43-7.35(m,2h),7.13(dddd,j＝14.7,8.5,3.9,2.4hz,1h),4.03-3.79(m,6h),3.38-3.28(m,1h),3.03-2.88(m,1h),2.46-2.32(m,1h),2.04-1.88(m,1h),1.70-1.60(m,1h),1.52(s,10h)。esi-ms m/z计算值575.1081，实测值576.05[m+1]
+
。
[0607]
1-[10-(3,4-二氟苯基)-12-碘-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s11)
[0608][0609]
步骤1：6-氯-n-(3,4-二氟苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺(c39)
[0610]
在氮气下时向5-溴-6-氯-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶e c38(3.04g,10.46mmol)和kotbu(3.44g,30.66mmol)和3,4-二氟苯胺c11(2.1ml,21.18mmol)于t-buoh(50ml)中的悬浮液中一次性添加tbuxphos pd g4(990mg,1.108mmol)并将反应在50℃下加热3小时。将混合物浓缩，添加水(100ml)混溶dcm(100ml)，并使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至40％etoac)纯化，得到6-氯-n-(3,4-二氟苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺(1.277g,42％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.75(s,1h),8.18(s,1h),8.10(d,j＝1.2hz,1h),7.96(s,1h),7.23(dt,j＝10.7,9.1hz,1h),6.79(ddd,j＝13.2,6.8,2.7hz,1h),6.60(d,j＝9.3hz,1h)。esi-ms m/z计算值280.03275，实测值280.97[m+1]
+
。
[0611]
步骤2：10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯(c40)
[0612]
在氮气下向6-氯-n-(3,4-二氟苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺c39(650mg,2.316mmol)于et3n(5.8ml)和1,4-二噁烷(5.8ml)中的溶液中添加cui(46mg,0.2415mmol)和pd(pph3)2cl2(97mg,0.1382mmol)，随后添加3-甲基丁-1-炔c2(340mg,4.991mmol)。将反
应在80℃下加热48小时。将混合物浓缩，添加水(25ml)混溶dcm(25ml)，并使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0-80％etoac)纯化，得到10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯(483mg,66％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.11(s,1h),8.03(d,j＝1.4hz,1h),7.84(ddd,j＝11.2,7.2,2.6hz,1h),7.77-7.66(m,2h),7.44(dddd,j＝8.5,4.1,2.6,1.5hz,1h),6.55(d,j＝0.8hz,1h),3.06-2.92(m,1h),1.22(d,j＝6.8hz,6h)。esi-ms m/z计算值312.11865，实测值313.41[m+1]
+
。
[0613]
步骤3：1-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(c41)
[0614]
在0℃时在氮气下向10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯c40(700mg,2.129mmol)于thf(14ml)中的溶液中添加kotbu(315mg,2.807mmol)。将反应物简单搅拌，滴加2,2-二甲基丙酰氯(300μl,2.438mmol)。并将反应在0℃下搅拌45分钟。将混合物倒入到水(400ml)中，过滤沉淀物，同时用水洗涤并干燥，以得到1-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(860mg,99％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.36(s,1h),7.92-7.84(m,2h),7.74(dt,j＝10.6,8.8hz,1h),7.47(dq,j＝8.4,3.8,2.9hz,1h),6.72(d,j＝0.8hz,1h),3.03(h,j＝6.7hz,1h),1.50(s,9h),1.23(d,j＝6.8hz,6h)。esi-ms m/z计算值396.17618，实测值397.23[m+1]
+
。
[0615]
步骤4：1-[10-(3,4-二氟苯基)-12-碘-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s11)
[0616]
向1-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(860mg,2.103mmol)c41于dcm(16ml)中的溶液中一次性添加nis(635mg,2.822mmol)并将反应在室温下搅拌18小时。添加na2s2o3(1m)水溶液，使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至30％etoac)纯化，得到1-[10-(3,4-二氟苯基)-12-碘-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(655mg,59％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.39(s,1h),7.89(ddd,j＝11.1,7.2,2.6hz,1h),7.81(s,1h),7.75(dt,j＝10.5,8.8hz,1h),7.51-7.43(m,1h),3.12(h,j＝7.0hz,1h),1.52(s,9h),1.39(dd,j＝7.1,3.4hz,6h)。esi-ms m/z计算值522.0728，实测值523.04[m+1]
+
。
[0617]
1-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-12-碘-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s12)
[0618][0619]
步骤1：6-氯-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺(c42)
[0620]
在氮气下向5-溴-6-氯-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶c38(2.22g,8.538mmol)、4-氟-3-甲氧基-苯胺c18(2.03g,14.38mmol)和kotbu(2.82g,25.13mmol)于t-buoh(40ml)中的悬浮液中一次性添加tbuxphos pd g4(702mg,0.7858mmol)并将反应在50℃下加热1小时。将混合物浓缩，添加水(100ml)和etoac(100ml)，将混合物用etoac(3x100 ml)萃取，并将合并的有机相用na2so4干燥，并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至60％etoac)纯化，随后通过反相c18色谱法(于具有0.2％甲酸的水中0至100％乙腈)纯化，得到6-氯-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺(1.347g,52％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.66(s,1h),8.09-8.04(m,2h),7.64(s,1h),7.02(dd,j＝11.4,8.7hz,1h),6.73(dd,j＝7.6,2.6hz,1h),6.37(ddd,j＝8.7,3.6,2.6hz,1h),3.76(s,3h)。esi-ms m/z计算值292.0527，实测值292.98[m+1]
+
。
[0621]
步骤2：10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯(c43)
[0622]
在氮气下时向6-氯-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺c43(1.3g,4.368mmol)于tea(15ml)和1,4-二噁烷(15ml)中的溶液中cui(88mg,0.4621mmol)和pd(pph3)2cl2(169mg,0.2408mmol)，随后添加3-甲基丁-1-炔c2(900μl,8.800mmol)。将反应
在80℃下加热18小时，并然后在室温下搅拌24小时。将混合物浓缩，添加水(100ml)混溶dcm(100ml)，并使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)纯化，得到10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯(1.052g,71％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.06(s,1h),8.02(d,j＝1.3hz,1h),7.69(d,j＝0.7hz,1h),7.46(dd,j＝11.4,8.5hz,1h),7.35(dd,j＝7.8,2.5hz,1h),7.08(ddd,j＝8.5,3.9,2.5hz,1h),6.53(d,j＝0.8hz,1h),3.88(s,3h),3.08-2.97(m,1h),1.23(d,j＝6.8hz,6h)。esi-ms m/z计算值324.13864，实测值325.51[m+1]
+
。
[0623]
步骤3：1-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(c44)
[0624]
在氮气下并在0℃时向10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯c43(1.05g,3.075mmol)于thf(21ml)中的溶液中添加kotbu(481mg,4.287mmol)。将反应简单搅拌，滴加2,2-二甲基丙酰氯(430μl,3.495mmol)。将反应在0℃下搅拌20分钟。将混合物倒入到水(400ml)中，过滤，同时用水洗涤并干燥，以得到1-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(1.215g,95％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.35(s,1h),7.84(d,j＝0.8hz,1h),7.48(dd,j＝11.3,8.5hz,1h),7.39(dd,j＝7.8,2.5hz,1h),7.11(ddd,j＝8.5,4.0,2.5hz,1h),6.70(d,j＝0.7hz,1h),3.88(s,3h),3.05(h,j＝7.0hz,1h),1.50(s,9h),1.28-1.19(m,6h)。esi-ms m/z计算值408.19617，实测值409.24[m+1]
+
。
[0625]
步骤4：1-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-12-碘-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s12)
[0626]
向1-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮c44(1.19g,2.856mmol)于dcm(30ml)中的溶液中添加nis(867mg,3.854mmol)并将反应在室温下搅拌18小时。添加na2s2o3饱和水溶液，使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至40％etoac)纯化，得到1-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-12-碘-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-4-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(1.236g,80％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.39(s,1h),7.78(s,1h),7.50(dd,j＝11.3,8.5hz,1h),7.41(dd,j＝7.8,2.5hz,1h),7.14(ddd,j＝8.5,3.9,2.5hz,1h),3.86(s,3h),3.17(h,j＝7.1hz,1h),1.52(s,9h),1.41(dd,j＝9.2,7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值534.0928，实测值535.42[m+1]
+
。
[0627]
6-溴-n-(4-氟苯基)-1h-吲唑-5-胺(s13)
[0628][0629]
将6-溴-1h-吲唑-5-胺c45(2000mg,9.4mmol)、1-氟-4-碘-苯c46(1.6ml,
13.9mmol)、naotbu(3.9g,40mmol)和tbuxphos pd g4(432mg,0.48mmol)t-buoh(50ml)的溶液脱气并用氮气吹扫。将混合物在室温下搅拌5小时。混合物用乙酸乙酯稀释，用50％饱和碳酸氢钠洗涤，然后用盐水洗涤。将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-100％etoac)得到产物(1.8g,62％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.06(s,1h),7.99(s,1h),7.89(s,1h),7.59(s,1h),7.48(d,j＝1.7hz,1h),7.09-6.88(m,2h),6.80(dd,j＝8.1,4.7hz,2h)。lcms m/z 305.9[m+h]+。
[0630]
6-溴-n-(3,4-二氟苯基)-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺(s14)
[0631][0632]
步骤1：6-溴-5-硝基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(c48)
[0633]
向6-溴-5-硝基-1h-吲唑c7(19g,78.50mmol)和3,4-二氢-2h-吡喃c47(15ml,164.4mmol)于dcm(250ml)中的悬浮液中添加4-甲基苯磺酸水合物(1.407g,7.397mmol)并将反应在室温下搅拌15小时。将混合物倒入到nahco3饱和水溶液(200ml)中。将水相用dcm(2x)萃取，将有机层合并，用mgso4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至40％etoac)纯化，以得到呈白色固体的6-溴-5-硝基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(25.6g,100％)。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ8.28(d,j＝0.4hz,1h),8.07(d,j＝1.0hz,1h),7.93(dd,j＝1.0,0.4hz,1h),5.66(dd,j＝8.9,2.6hz,1h),3.94(dd,j＝11.8,4.1hz,1h),3.77-3.61(m,1h),2.53-2.30(m,1h),2.18-1.95(m,2h),1.81-1.55(m,3h)。
[0634]
步骤2：6-溴-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺(c49)
[0635]
向6-溴-5-硝基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑c48(25.0g,76.65mmol)于etoh(500ml)和水(50ml)中的悬浮液中添加铁(21g,376.0mmol)和nh4cl(32g,598.2mmol)并将反应在回流下搅拌1小时。将混合物过滤，将残余物用1:1meoh/dcm(600ml)洗涤。将滤液蒸发，将残余物悬浮于水(500ml)中，在室温下搅拌15小时，过滤，用水洗涤并干燥，以得到呈浅棕色粉末的6-溴-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺(23g,97％)。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ7.81(d,j＝8.3hz,2h),7.06(s,1h),5.62(d,j＝9.2hz,1h),4.03(m,2h),3.74(m,1h),2.71-2.30(m,1h),2.25-1.92(m,2h),1.96-1.37(m,4h)。esi-ms m/z计算值295.032，实测值295.97[m+1]
+
。
[0636]
步骤3：6-溴-n-(3,4-二氟苯基)-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺(s14)
[0637]
在氮气氛围下向6-溴-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺c49(3g,10.13mmol)、1,2-二氟-4-碘-苯c50(2.70g,11.25mmol)和naotbu(2.00g,20.81mmol)于thf(45ml)中的悬浮液中添加xantphos pd g3(960mg,1.012mmol)并将反应在70℃下加热18小时。通过垫过滤混合物，将所述垫用dcm洗涤。将混合物浓缩并且硅胶色谱法(于dcm中的0至2％meoh)得到呈黄色固体的6-溴-n-(3,4-二氟苯基)-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺(3060mg,73％)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ7.91(d,j＝0.9hz,1h),7.89(d,j＝0.9hz,1h),7.50(s,1h),7.07(dt,j＝10.1,8.8hz,1h),6.85(ddd,j＝12.1,6.8,2.8hz,1h),6.75-6.67(m,1h),5.78(s,1h),5.65(dd,j＝9.3,2.7hz,1h),4.08-3.97(m,1h),3.86-3.69(m,1h),2.52(m,1h),2.22-2.05(m,2h),1.85-1.62(m,3h)。esi-ms m/z计算值407.0445，实测值408.06[m+1]
+
。
[0638]
6-溴-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺(s15)
[0639][0640]
向6-溴-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺c49(22.10g,74.62mmol)于dcm(300ml)中的溶液中依次添加(4-氟-3-甲氧基-苯基)硼酸c51(40.25g,236.8mmol)、et3n(35ml,251.1mmol)和15g的3a筛以及cu(oac)2(28.13g,227.6mmol)并将反应在室温下搅拌五天。将反应倒入到nh4oh水溶液(500ml)中。通过塞过滤混合物，将其用dcm(200ml)洗涤。将有机层分离，用nh4cl饱和水溶液洗涤，用mgso4干燥，过滤，并浓缩。将残余物溶解于dcm中，经由硅胶塞过滤，用dcm中的10％etoac洗脱并将滤液浓缩。重复经由硅胶塞过滤并将滤液浓缩，以得到呈淡棕色油状物的6-溴-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺(6.0g,19％)。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ7.95-7.75(m,2h),7.41(s,1h),7.01(dd,j＝11.0,8.6hz,1h),6.71(dd,j＝7.4,2.6hz,1h),6.60(ddd,j＝8.7,3.6,2.6hz,1h),5.77(s,1h),5.64(dd,j＝9.3,2.6hz,1h),4.07-3.96(m,1h),3.84(s,3h),3.75(ddd,j＝11.4,9.8,3.2hz,1h),2.64-2.38(m,1h),2.23-2.06(m,2h),1.86-1.63(m,3h)ppm.esi-ms m/z计算值419.06445，实测值420.01[m+1]
+
。
[0641]
6-溴-n-(2-甲氧基-4-吡啶基)-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺(s16)
[0642]
113.46ppm.esi-ms m/z计算值339.85083，实测值340.72[m+1]
+
。
[0650]
步骤3：6-溴-7-氟-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吲唑-5-胺(s17)
[0651]
在氮气氛围下向6-溴-7-氟-5-碘-1h-吲唑c55(6g,17.60mmol)、4-氟-3-甲氧基-苯胺c18(3.48g,24.66mmol)和naotbu(3.05g,31.74mmol)于1,4-二噁烷(70ml)中的混合物中添加xantphos pd g3(1.01g,1.065mmol)并将反应加热至90℃持续6小时。将混合物冷却至室温并添加etoac(120ml)和nh4cl水溶液，随后添加hcl 6n水溶液以将ph调节至2。将有机层用hcl1n水溶液洗涤，用mgso4干燥并浓缩。将dcm添加到残余物中并将混合物过滤，以回收呈固体的产物。滤液仍含有所需产物并通过硅胶色谱法(于dcm/庚烷(1:1)中的0至50％etoac)纯化。合并的材料得到6-溴-7-氟-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吲唑-5-胺(3.5g,56％)1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ13.64(s,1h),8.12-8.04(m,1h),7.54(s,1h),7.44(s,1h),7.01(dd,j＝11.4,8.7hz,1h),6.73(dd,j＝7.7,2.5hz,1h),6.36(dt,j＝8.6,3.1hz,1h),3.75(s,3h)。esi-ms m/z计算值352.99753，实测值353.97[m+1]
+
；351.97[m-1]-。
[0652]
化合物1
[0653]
3-[3-氯-5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸
[0654][0655]
步骤1：5-(4-氟苯基)-6-异丙基-7-[(e)-3-甲氧基-3-氧代-丙-1-烯基]吡咯并[2,3-f]吲唑-1-甲酸苄酯(c57)
[0656]
向5-(4-氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-甲酸苄酯s1(15.65g,36.14mmol)于dcm(205ml)中的溶液中添加3,3-二甲氧基丙酸甲酯c56(5.63ml,39.71mmol)，随后添加tfa(18ml,233.6mmol)。将反应在50℃下加热18小时。添加dcm，将混合物用nahco3饱和水溶液洗涤。将有机相用mgso4干燥，经由小硅胶塞(于dcm中的5％etoac)过滤并将滤液浓缩。通过硅胶色谱法(于dcm中的0至5％etoac)纯化，得到5-(4-氟苯基)-6-异丙基-7-[(e)-3-甲氧基-3-氧代-丙-1-烯基]吡咯并[2,3-f]吲唑-1-甲酸苄酯(15.2g,
81％)1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.58(s,1h),8.42(d,j＝0.7hz,1h),8.19(d,j＝15.8hz,1h),7.69-7.37(m,9h),7.32(d,j＝0.9hz,1h),6.39(d,j＝15.9hz,1h),5.55(s,2h),3.16(p,j＝7.1hz,1h),1.35(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值511.19073，实测值512.27[m+1]
+
。
[0657]
步骤2：3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸甲酯(c58)
[0658]
在氮气下向5-(4-氟苯基)-6-异丙基-7-[(e)-3-甲氧基-3-氧代-丙-1-烯基]吡咯并[2,3-f]吲唑-1-甲酸苄酯c57(15.2g,29.40mmol)于meoh(272ml)和etoac(272ml)中的溶液中添加pd/c(10％，湿润，degussa,1.9g,1.785mmol)。将反应用氢气吹扫并在室温下搅拌18小时。通过塞过滤混合物，用meoh和etoac洗涤，并将滤液浓缩，以得到3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸甲酯(11.11g,94％)1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ12.61(s,1h),7.95(s,1h),7.54-7.39(m,5h),7.01(d,j＝1.1hz,1h),3.65(s,3h),3.16(dd,j＝9.4,6.6hz,2h),3.01(p,j＝7.2hz,1h),2.71-2.62(m,2h),1.25(d,j＝7.2hz,6h)。9:1的所需产物与过度还原的dp。esi-ms m/z计算值379.16962，实测值380.18[m+1]
+
。
[0659]
步骤3：3-[3-氯-5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸甲酯和3-[3-氯-5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸(s1)
[0660]
在冰浴中时向3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸酯c58(73mg,0.1918mmol)和naoh(14mg,0.3500mmol)于dmf(516μl)中的混合物中滴加ncs(29mg,0.2172mmol)于dmf(516μl)中的溶液并将反应在0℃下搅拌20分钟。然后，添加lioh(385μl 2.5m,0.9625mmol)，随后添加thf(1ml)和甲醇(1ml)，并将反应在室温下搅拌4小时。将混合物浓缩并通过反相c18色谱法(于具有0.2％甲酸的水中的10至100％乙腈)纯化，得到3-[3-氯-5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸(22.1mg,26％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.83(s,1h),12.23(s,1h),7.55(d,j＝1.2hz,1h),7.53-7.42(m,4h),6.81-6.76(m,1h),3.13(dd,j＝9.4,6.6hz,2h),3.02(p,j＝7.2hz,1h),2.62-2.54(m,2h),1.25(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值399.115，实测值400.18[m+1]
+
。
[0661]
化合物2
[0662]
3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,2-二甲基-丙酸
[0663][0664]
步骤1：3-[1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-(1-羟基-1-甲基-乙基)吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,2-二甲基-丙酸甲酯(c60)
[0665]
在氮气下，向1-(苯磺酰基)-6-溴-n-(4-氟苯基)吲唑-5-胺s2(125mg,0.2801mmol)和6-羟基-2,2,6-三甲基-庚-4-炔酸甲酯c59(84mg,0.4237mmol)的混合物中添加cy2men(153μl,0.7143mmol)和1,4-二噁烷(1.9ml)。然后，添加pd(t-bu3p)2(15mg,0.02935mmol)。将容器密封并将反应加热至80℃持续18小时。将混合物浓缩并通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)纯化，以得到3-[1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-(1-羟基-1-甲基-乙基)吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,2-二甲基-丙酸甲酯(82.6mg,50％)esi-ms m/z计算值563.189，实测值564.47[m+1]
+
。
[0666]
步骤2：3-[1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,2-二甲基-丙酸甲酯(c61)
[0667]
向3-[1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-(1-羟基-1-甲基-乙基)吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,2-二甲基-丙酸甲酯(81mg,0.1372mmol)c60和nai(170mg,1.134mmol)于dcm(1.7ml)中的悬浮液中添加tmscl(145μl,1.142mmol)并将反应在室温下搅拌18小时。添加dcm(9ml)，将混合物用硫代硫酸钠0.5m水溶液(10ml)洗涤。使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)纯化，得到3-[1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,2-二甲基-丙酸甲酯(47mg,60％)1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.42(d,j＝0.8hz,1h),8.13-8.08(m,1h),7.86-7.79(m,2h),7.67-7.60(m,1h),7.56-7.49(m,4h),7.43(t,j＝8.7hz,2h),6.97(d,j＝0.9hz,1h),3.65(s,3h),3.48-3.35(m,1h),3.16(s,2h),1.29(s,6h),1.07(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值547.1941，实测值548.36[m+1]
+
。
[0668]
步骤3：3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,2-二甲基-丙酸(2)
[0669]
向3-[1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,2-二甲基-丙酸甲酯c61(46mg,0.08086mmol)和哌啶(81μl,0.8191mmol)于thf(1ml)和meoh(1ml)中的溶液中添加naoh水溶液(400μl的2m,0.8000mmol)并将反应在65℃下搅拌2小时。将混合物浓缩并通过反相hplc(方法：c18 waters sunfire柱(30x150mm,5微米).梯度：于具有0.2％甲酸的水中的乙腈)纯化，以得到3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,2-二甲基-丙酸(18.3mg,56％)1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ12.55(s,1h),12.27(s,1h),7.92(d,j＝0.9hz,1h),7.57-7.37(m,5h),6.80(d,j＝1.0hz,1h),3.49-3.36(m,1h),3.05(s,2h),1.22(s,6h),1.07(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值393.18524，实测值394.33[m+1]
+
。
[0670]
化合物3
[0671]
(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-羟基-丙酸
[0672][0673]
步骤1：(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-羟基-丙酸甲酯(c63)
[0674]
向1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s3(700mg,1.692mmol)和yb(otf)3(524mg,0.8448mmol)于dce(2.3ml)中的溶液中添加(2r)-环氧乙烷-2-甲酸甲酯c62(444μl,5.071mmol)并将溶液在110℃下搅拌18小时。添加额外量的yb(otf)3(524mg,0.8448mmol)和(2r)-环氧乙烷-2-甲酸甲酯c62(444μl,5.071mmol)并将反应再搅拌3小时。添加nahco3水溶液和dcm。使有机相穿过相分离器并浓
缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至60％etoac)纯化，得到(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-羟基-丙酸酯(180mg,20％)。esi-ms m/z计算值497.21262，实测值498.2[m+1]
+
。
[0675]
步骤2：(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-羟基-丙酸(3)
[0676]
向(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-羟基-丙酸酯c62(17mg,0.03417mmol)于thf(499μl)和meoh(216μl)中的溶液中添加naoh水溶液(211μl的1m,0.2110mmol)并将反应在50℃下加热1小时。将混合物浓缩并通过反相hplc(方法：c18 waters sunfire柱(30x150mm,5微米).梯度：于具有0.2％甲酸的水中的乙腈)纯化，得到(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-羟基-丙酸(2.6mg,18％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.94(s,1h),7.67(s,1h),7.51(q,j＝9.0hz,1h),7.44-7.34(m,1h),7.29-7.20(m,1h),7.04(s,1h),4.48(dd,j＝8.5,4.4hz,1h),3.41(dd,j＝14.6,4.4hz,1h),3.27-3.14(m,2h),1.30(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值399.13943，实测值400.11[m+1]
+
。
[0677]
化合物4和5
[0678]
化合物4和5(表1)根据对于化合物3所述的方法在两个步骤中由中间体s3和适当的环氧化物制备。对方法的任何修改在表1中标识。
[0679]
表1.化合物4和5的制备方法、结构、生物化学数据
[0680][0681]
[0682]
化合物6
[0683]
(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲氧基-丙酸
[0684][0685]
步骤1：(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲氧基-丙酸甲酯(c64)
[0686]
向(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-羟基-丙酸甲酯c63(57mg,0.1146mmol)于乙腈(573μl)中的溶液中添加ag2o(11.1μl,0.3421mmol)，随后添加碘甲烷(14.2μl,0.2281mmol)并将反应在室温下搅拌1小时。然后，将反应加热至50℃并再搅拌4小时。添加水和dcm，并使有机相穿过相分离器并浓缩。通过反相hplc(方法：c18 waters sunfire柱(30x150mm,5微米).梯度：于具有0.2％甲酸的水中的乙腈)纯化，得到(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲氧基-丙酸甲酯(6.3mg,7％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.57(s,1h),8.14(s,1h),7.53(q,j＝9.3hz,1h),7.48-7.40(m,1h),7.30-7.23(m,1h),7.12(s,1h),4.17(dd,j＝7.5,5.4hz,1h),3.74(s,3h),3.39-3.32(m,4h),3.28-3.21(m,1h),1.57(s,9h),1.29(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值511.22827，实测值512.24[m+1]
+
。
[0687]
步骤2：(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲氧基-丙酸(6)
[0688]
向(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲氧基-丙酸甲酯c64(5mg,0.007967mmol)于thf(146μl)和meoh(63.5μl)中的溶液中添加naoh水溶液(60.3μl的1m,0.06030mmol)并将反应在50℃下加热1小时。将
混合物浓缩，添加水和dcm，并将混合物用hcl水溶液中和。使有机相穿过相分离器并浓缩。通过反相(方法：c18waters sunfire柱(30x150mm,5微米).梯度：于具有0.2％甲酸的水中的乙腈)纯化，得到(2r)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲氧基-丙酸(1.5mg,43％)。esi-ms m/z计算值413.1551，实测值414.15[m+1]
+
。
[0689]
化合物7
[0690]
(2s)-3-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲氧基-丙酸
[0691][0692]
化合物7根据获得c66的程序通过用(2s)-环氧乙烷-2-甲酸甲酯c65使s3烷基化，随后根据获得化合物6的程序来甲基化和皂化来制备。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.02(s,1h),7.66(s,1h),7.51(q,j＝9.2hz,1h),7.40(q,j＝9.5,8.4hz,1h),7.25(t,j＝10.9hz,1h),7.08(s,1h),4.10(dd,j＝8.4,4.5hz,1h),3.33(d,j＝4.7hz,1h),3.30(s,3h),3.28-3.18(m,2h),1.30(t,j＝7.6hz,6h)。esi-ms m/z计算值413.1551，实测值414.12[m+1]
+
。
[0693]
化合物8
[0694]
3-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲基-丙酸
[0695][0696]
步骤1：3-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲基-丙酸乙酯(c69)
[0697]
向1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s4(500mg,1.131mmol)于dcm(5.7ml)中的溶液中添加2-甲基-3-氧代-丙酸乙酯c68(300mg,2.305mmol)，随后添加tfa(525μl,6.814mmol)。5分钟后，添加et3sih(545μl,3.412mmol)并将反应在50℃下搅拌18小时。将混合物冷却，添加dcm(10ml)并将混合物用nahco3饱和水溶液(10ml)洗涤。使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)纯化，得到3-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲基-丙酸乙酯(420mg,71％)。esi-ms m/z计算值521.269，实测值522.37[m+1]
+
。
[0698]
步骤2：3-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲基-丙酸(8)
[0699]
向3-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲基-丙酸乙酯c69(82mg,0.1565mmol)于thf(1.3ml)和meoh(1.3ml)中的溶液中添加naoh水溶液(420μl的2m,0.8400mmol)并将反应在50℃下搅拌2小时。将混合物浓缩并通过反相c18色谱法(梯度：于水、0.2％甲酸中的10-100％乙腈)纯化，得到3-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2-甲基-丙酸(52.2mg,78％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.58(s,1h),12.26(s,1h),7.95(d,j＝1.0hz,1h),7.50(s,1h),7.44(dd,j＝11.4,8.5hz,1h),7.23(dt,j＝8.1,2.6hz,1h),7.04-6.94(m,2h),3.84(s,3h),3.28-3.12(m,2h),2.91-2.75(m,2h),1.28-1.19(m,6h),1.16(dd,j＝6.7,1.9hz,3h)。esi-ms m/z计算值409.18018，实测值410.22[m+1]
+
。
[0700]
化合物9
[0701]
1-[[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]甲基]环丙烷羧酸
[0702][0703]
通过对于化合物8所述的方法在两个步骤中由中间体s4和1-甲酰基环丙烷-1-甲酸甲酯制备化合物9。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.57(s,1h),12.31(s,1h),7.94(d,j＝0.9hz,1h),7.47-7.39(m,2h),7.25(dd,j＝7.9,2.5hz,1h),7.03-6.96(m,2h),3.85(s,3h),3.44(s,2h),3.14(p,j＝7.2hz,1h),1.20(dd,j＝7.2,1.9hz,6h),1.09-0.98(m,2h),0.72-0.62(m,2h)。[1]lcms m/z 422.28[1][m+h+]
[0704]
化合物10
[0705]
3-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸
[0706][0707]
步骤1：(e)-3-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙-2-烯酸甲酯(c70)
[0708]
向1-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s4(342mg,0.7733mmol)于dcm(4ml)中的溶液中添加3,3-二甲氧基丙酸甲酯c56
(113μl,0.7970mmol)，随后添加tfa(359μl,4.660mmol)并将反应在50℃下加热2小时。将混合物冷却至室温，添加dcm(10ml)，并将混合物用nahco3饱和水溶液(10ml)洗涤。使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)纯化，得到(e)-3-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙-2-烯酸甲酯(240mg,63％)。esi-ms m/z计算值491.22205，实测值492.31[m+1]
+
。
[0709]
步骤2：3-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸甲酯(c71)
[0710]
向(e)-3-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙-2-烯酸甲酯c70(240mg,0.4848mmol)于meoh(8ml)和etoac(8ml)中的溶液中添加pd/c(10％，湿润，degussa,40mg,0.03759mmol)。将反应用氢气吹扫并在室温下搅拌6小时。通过塞过滤混合物，用meoh和etoac洗涤,并浓缩，以得到3-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸酯(243mg,100％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.49-8.43(m,1h),8.38(d,j＝0.7hz,1h),7.47(dd,j＝11.4,8.5hz,1h),7.31-7.24(m,2h),7.06-7.00(m,1h),3.86(s,3h),3.67(s,3h),3.23-3.14(m,2h),3.08(p,j＝7.1hz,1h),2.72-2.62(m,2h),1.52(s,9h),1.29(t,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值493.23767，实测值494.33[m+1]
+
。
[0711]
步骤3：3-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸(10)
[0712]
向3-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸甲酯c71(240mg,0.4775mmol)于thf(4ml)和meoh(4ml)中的溶液中添加naoh水溶液(1.3ml的2m,2.600mmol)并将反应在50℃下加热2小时。将混合物浓缩，并通过反相c18色谱法(于水、0.2％甲酸中的10至100％乙腈)纯化，得到3-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸20(163.6mg,84％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.60(s,1h),12.27(s,1h),7.96(d,j＝1.0hz,1h),7.50-7.47(m,1h),7.44(dd,j＝11.4,8.5hz,1h),7.22(dd,j＝7.8,2.5hz,1h),7.09(d,j＝1.1hz,1h),7.02-6.94(m,1h),3.85(s,3h),3.17-3.08(m,2h),3.03(p,j＝7.1hz,1h),2.61-2.54(m,2h),1.28(t,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值395.16452，实测值396.27[m+1]
+
。
[0713]
化合物11
[0714]
4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]四氢呋喃-2-甲酸
[0715][0716]
步骤1：4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,3-二氢呋喃-2-甲酸甲酯(c73)
[0717]
在氮气下将1-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s3(1000mg,2.529mmol)、yb(otf)3(81mg,0.1306mmol)和4-氧代四氢呋喃-2-甲酸甲酯c72(1.8g,12.49mmol)于dce(4.5ml)中的混合物在110℃下加热18小时。添加水和dcm，使有机相穿过相分离器。通过反相c18色谱法(于水、0.1％tfa中的乙腈)纯化，随后通过硅胶色谱法(于庚烷中的etoac)纯化，得到4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,3-二氢呋喃-2-甲酸甲酯(93mg,7％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.44(d,j＝1.0hz,1h),8.16(d,j＝0.8hz,1h),7.61-7.49(m,1h),7.50-7.39(m,1h),7.33-7.23(m,1h),7.19(d,j＝1.0hz,1h),6.54(t,j＝2.1hz,1h),5.30(dd,j＝11.2,6.2hz,1h),3.90(s,3h),3.43(d,j＝13.0hz,1h),3.12(td,j＝15.3,14.3,6.8hz,2h),1.56(s,9h),1.30(dd,j＝7.7,3.7hz,8h)。esi-ms m/z计算值521.2126，实测值522.19[m+1]
+
。
[0718]
步骤2：4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]四氢呋喃-2-甲酸甲酯(c74)
[0719]
在氮气下向4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,3-二氢呋喃-2-甲酸甲酯c73(110mg,0.2109mmol)于meoh(8.5ml)中的溶液中添加pd(oh)2/c(100mg,0.7121mmol)。将反应用氮气吹扫并在室温下搅拌2小时。将混合物过滤，用dcm洗涤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的etoac)纯化，以得到立体化学未知的一种异构体4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]四氢呋喃-2-甲酸甲酯(89mg,73％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.69(d,j＝
1.0hz,1h),8.14(d,j＝0.8hz,1h),7.54(dt,j＝10.4,8.8hz,1h),7.42(ddt,j＝10.5,6.8,3.3hz,1h),7.29-7.14(m,2h),4.79(t,j＝8.2hz,1h),4.43(t,j＝8.4hz,1h),4.18-4.06(m,1h),4.02(s,3h),3.08(q,j＝7.2hz,1h),2.87-2.50(m,2h),1.38(ddd,j＝6.8,4.5,1.8hz,6h)。esi-ms m/z计算值523.2283，实测值524.26[m+1]
+
。
[0720]
步骤3：4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]四氢呋喃-2-甲酸(11)
[0721]
向4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]四氢呋喃-2-甲酸甲酯c74(7mg,0.01270mmol)于thf(200μl)和meoh(100μl)中的溶液中添加naoh(100μl的1m,0.1000mmol)并将混合物在50℃下加热1小时。将混合物浓缩并通过反相c18色谱法(于水、0.2％甲酸中的乙腈)纯化，得到立体化学未知的一种异构体4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]四氢呋喃-2-甲酸(3.6mg,63％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.32(s,1h),7.94(s,1h),7.82(s,1h),7.51(q,j＝9.2hz,1h),7.37(d,j＝9.4hz,1h),7.21(s,1h),7.13(s,1h),4.62(t,j＝8.3hz,1h),4.48(s,1h),4.11(q,j＝11.1,8.2hz,2h),3.05(p,j＝7.2hz,1h),2.63(d,j＝9.8hz,2h),1.37(t,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值425.1551，实测值426.21[m+1]
+
。
[0722]
化合物12和13
[0723][0724]
步骤1：1-甲氧基-4-氧代-环己烷羧酸甲酯(c76)
[0725]
在冰浴中至0℃时在1小时内向1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-酮c75(10g,64.03mmol)于chbr3(53ml,606.9mmol)中的溶液中滴加koh(28.7g,511.5mmol)于meoh(150ml,3.703mol)中的溶液中。将反应在室温下搅拌22小时。将混合物浓缩，分配于etoac与水之间，用etoac(3x)萃取，并将合并的有机相用盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。将粗品溶解于1,4-二噁烷(100ml)中，添加hcl水溶液(25ml的6m,150.0mmol)，并将混合物搅拌2天。添加水并将混合物用etoac(3x)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤，并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至90％etoac)纯化，得到1-甲氧基-4-氧代-环己烷羧酸甲酯(4.34g,36％)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ3.73(s,3h),3.30(s,3h),2.60-2.41(m,2h),2.35-2.18(m,4h),2.15-2.03(m,2h)。
[0726]
步骤2：4-羟基-1-甲氧基-环己烷羧酸甲酯(c77)
[0727]
在冰浴中时向1-甲氧基-4-氧代-环己烷羧酸甲酯c76(4.34g,23.31mmol)于meoh
(100ml)中的溶液中分批添加nabh4(1.76g,46.52mmol)并将反应搅拌90分钟。添加nh4cl饱和水溶液并将混合物浓缩以去除meoh。将水性悬浮液用etoac(3x)萃取。将合并的有机相用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至100％etoac)纯化，得到4-羟基-1-甲氧基-环己烷羧酸甲酯(3.46g,79％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ3.68(d,j＝5.8hz,3h),3.60(td,j＝10.3,5.0hz,1h),3.18(d,j＝3.7hz,3h),2.04-1.85(m,2h),1.80-1.60(m,4h),1.51(tdd,j＝12.2,10.2,3.5hz,3h),1.34(s,1h,oh)。
[0728]
步骤3：4-碘-1-甲氧基-环己烷羧酸甲酯(c78)
[0729]
向4-羟基-1-甲氧基-环己烷羧酸甲酯c77(3.46g,18.38mmol)于thf(35ml)中的溶液中添加pph3(5.90g,22.49mmol)和咪唑(1.26g,18.51mmol)。然后，在30分钟内在冰浴中时分批添加碘(5.6g,22.06mmol)于thf(20ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌2天。将混合物分配于水(200ml)和etoac中，用etoac(3x)萃取。将合并的有机相依次用硫代硫酸钠1n水溶液和盐水洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至15％etoac)纯化，得到4-碘-1-甲氧基-环己烷羧酸甲酯(4.4g,80％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ4.64(t,j＝4.1hz,1h),3.72(s,3h),3.16(s,3h),2.11(dt,j＝14.4,7.6hz,2h),1.86(dt,j＝7.6,3.9hz,4h),1.83-1.72(m,2h)。
[0730]
步骤4：4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-甲氧基-环己烷羧酸甲酯(c79)
[0731]
锌酸盐的制备：将licl(356mg,8.397mmol)和zn(552mg,8.439mmol)置于真空下的管中并用加热枪加热5分钟。将固体冷却至室温，并添加thf(6ml)和1,2-二溴乙烷(20μl,0.2321mmol)。将混合物用加热枪轻微加热。然后，添加4-碘-1-甲氧基-环己烷羧酸甲酯c78(834mg,2.798mmol)于thf(4ml)中的溶液并将混合物在室温下并在氮气下搅拌4小时。在制备后立即使用试剂。
[0732]
negishi偶合：在氮气下向1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-碘-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s5(500mg,0.9591mmol)、pd(oac)2(23mg,0.1024mmol)和cphos(66mg,0.1512mmol)于thf(6ml)中的溶液中滴加最新制备的碘-(4-甲氧基-4-甲氧基羰基-环己基)锌(697mg,1.917mmol)于thf中的溶液中。将反应在室温下搅拌90分钟。添加盐水并将混合物用etoac(3x)萃取。将合并的有机相用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至20％etoac)纯化，得到4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-甲氧基-环己烷羧酸甲酯(471mg,43％)。esi-ms m/z计算值565.2752，实测值566.24[m+1]
+
。
[0733]
步骤5：4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-甲氧基-环己烷羧酸(12)和4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-甲氧基-环己烷羧酸(13)
[0734]
向4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-甲氧基-环己烷羧酸甲酯c79(50mg,0.08839mmol)于thf(3ml)和meoh(2ml)中的溶液中添加lioh水合物(200μl的5m,1.000mmol)并将反应在50℃下加热20小时。将混合物冷却，用hcl 6n水溶液酸化并浓缩。通过反相hplc(方法：c18 waters sunfire柱(30x150mm,5微米).梯度：于具有0.1％tfa的水中的乙腈)纯化，得到立体化学未知的两种异构体4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-甲氧基-环己烷
羧酸(三氟乙酸盐)12(12.7mg,22％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.65(s,1h),7.95(d,j＝0.9hz,1h),7.76-7.54(m,3h),7.29(ddt,j＝8.3,4.0,1.8hz,1h),7.11(d,j＝1.0hz,1h),3.39(s,3h),3.18-3.03(m,1h),2.94(p,j＝7.2hz,1h),2.46-2.26(m,2h),2.22-2.01(m,2h),1.83(td,j＝13.7,4.1hz,2h),1.61(d,j＝13.0hz,2h),1.30(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值467.20206，实测值468.19[m+1]
+
；以及4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-甲氧基-环己烷羧酸(三氟乙酸盐)13(5.6mg,10％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.66(s,1h),7.95(d,j＝0.9hz,1h),7.74-7.59(m,2h),7.50(d,j＝1.2hz,1h),7.33-7.23(m,1h),7.09(d,j＝1.0hz,1h),3.23(s,3h),3.09(ddt,j＝13.3,8.2,4.2hz,1h),2.96(p,j＝7.2hz,1h),2.42(d,j＝12.4hz,2h),2.39-2.15(m,2h),1.77(d,j＝10.9hz,2h),1.57(td,j＝13.1,4.1hz,2h),1.29(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值467.20206，实测值468.19[m+1]
+
。
[0735]
化合物14-16
[0736][0737]
步骤1：8-碘-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(c81)
[0738]
在冰浴中时向咪唑(11.1g,163.0mmol)、pph3(42.8g,163.2mmol)、1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-ol(21.5g,135.9mmol)c80于thf(200ml)中的混合物中分批添加碘(41.4g,163.1mmol)于thf(100ml)中的溶液，并将反应在室温下搅拌18小时。添加水(200ml)、盐水(200ml)和etoac。将有机相依次用硫代硫酸钠1n水溶液和盐水洗涤。将水相用etoac(2x)萃取。将合并的有机相用na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物悬浮于et2o(500ml)中，过滤并用et2o洗涤。将滤液浓缩并通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至20％etoac)纯化，得到呈无色油状物的8-碘-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(33.3g,87％)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ4.36(d,j＝3.9hz,1h),3.97-3.71(m,4h),2.07(dddt,j＝18.7,11.5,7.6,3.9hz,4h),1.82-1.68(m,2h),1.55(ddd,j＝14.3,8.4,4.6hz,2h)。esi-ms m/z计算值267.99603，实测值269.23[m+
1]
+
。
[0739]
步骤2：1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(c82)
[0740]
锌酸盐的制备：将licl(711mg,16.77mmol)和zn(1.10g,16.82mmol)置于真空下并用加热枪加热5分钟。将混合物冷却，添加thf(12ml)和1,2-二溴乙烷(40μl,0.4642mmol)并将混合物用加热枪轻微加热。添加8-碘-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷c81(1.5g,5.595mmol)于thf(6ml)中的溶液，并将反应在室温下并在氮气下搅拌4小时。在制备后立即使用试剂。
[0741]
negishi偶合：向1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-碘-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s5(1.1g,2.110mmol)、pd(oac)2(50mg,0.2227mmol)、cphos(145mg,0.3321mmol)于thf(13ml)中的溶液中滴加1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基(碘)锌(639mg,1.916mmol)于thf中的溶液，并将反应在室温下搅拌1小时。将混合物用etoac稀释，用盐水洗涤，并用etoac(2x)萃取。将合并的有机相用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至30％etoac纯化，得到1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(943mg,42％)esi-ms m/z计算值535.26465，实测值536.23[m+1]
+
。
[0742]
步骤3：4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己酮(c83)
[0743]
向1-[5-(3,4-二氟苯基)-7-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮c82(943mg,1.761mmol)于thf(15ml)中的溶液中添加hcl水溶液(3ml的6m,18.00mmol)并将反应在室温下搅拌2天。添加nahco3饱和水溶液(75ml)并将混合物用etoac(3x)萃取。将合并的有机相用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至30％etoac纯化，得到4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己酮(570mg,66％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.68(t,j＝1.0hz,1h),7.95(d,j＝0.8hz,1h),7.31(dt,j＝9.9,8.6hz,1h),7.15(ddd,j＝10.1,7.0,2.5hz,1h),7.08-7.03(m,1h),7.02(d,j＝0.9hz,1h),3.49(td,j＝12.3,3.4hz,1h),3.04(p,j＝7.2hz,1h),2.70-2.39(m,6h),2.12(d,j＝12.8hz,2h),1.51(s,9h),1.30(dd,j＝7.3,1.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值491.23843，实测值492.22[m+1]
+
。
[0744][0745]
向4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己酮c83(100mg,0.1962mmol)于dcm(4ml)中的溶液中添加碘(14mg,0.05516mmol)，随后在冰浴中时滴加tmscn(大约23.53mg,31.63μl,0.2372mmol)于dcm(0.24ml)中的溶液，并将反应在室温下搅拌40分钟。添加水(5ml)和硫代硫酸钠1n水溶液(1ml)。将混合物搅拌5分钟，通过相分离器过滤并浓缩。然后，将粗品溶解于thf(2ml)和meoh(2ml)中，添加lioh水溶液(100μl的5m,0.5000mmol)并将反应在50℃下加热30分钟。将混合物浓缩，将残余物悬浮于nh4cl饱和水溶液中并用dcm(3x)萃取。将有机相用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于dcm中的0至6％meoh)纯化，得到三种感兴趣的产物。异构体的立体化学是未知的。4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己酮14(28.3mg,34％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ10.05(s,1h),7.94(d,j＝1.0hz,1h),7.54(t,j＝1.1hz,1h),7.29(dt,j＝9.9,8.6hz,1h),7.21-7.11(m,1h),7.09-6.94(m,2h),3.52(dp,j＝11.9,4.5,3.9hz,1h),3.00(p,j＝7.2hz,1h),2.74-2.39(m,6h),2.16(dd,j＝10.2,4.4hz,2h),1.31(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值407.1809，实测值408.21[m+1]
+
；反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷-甲腈15(19mg,20％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ10.86(s,1h),7.97(d,j＝1.0hz,1h),7.81(t,j＝1.1hz,1h),7.36-7.23(m,1h),7.15-7.08(m,1h),7.08-6.97(m,2h),3.15-2.98(m,1h),2.93(p,j＝7.2hz,1h),2.69-2.47(m,2h),2.47-2.34(m,2h),1.95(t,j＝12.3hz,2h),1.82(td,j＝13.3,3.9hz,2h),1.65(s,1h),1.25(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值434.1918，实测值435.2[m+1]
+
；以及顺式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷-甲腈16(6.4mg,6％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ10.68(s,1h),7.95(d,j＝0.9hz,1h),7.72(t,j＝1.1hz,1h),7.27(dt,j＝9.9,
8.6hz,1h),7.10(ddd,j＝10.5,7.0,2.5hz,1h),7.06-6.95(m,2h),3.03(tt,j＝12.6,4.1hz,1h),2.90(p,j＝7.2hz,1h),2.62-2.44(m,2h),2.39-2.23(m,2h),2.09-1.91(m,2h),1.77(s,1h),1.63(d,j＝13.6hz,2h),1.22(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值434.1918，实测值435.2[m+1]
+
。
[0746]
化合物17
[0747]
4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷甲酰胺
[0748][0749]
向4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己酮c83(82mg,0.1668mmol)于dcm(3ml)中的溶液中添加碘(7mg,0.02758mmol)，随后在冰浴中时滴加tmscn(20mg,0.2016mmol)于dcm(1.8ml)中的溶液并将反应在室温下搅拌40分钟。添加水(5ml)和硫代硫酸钠1n水溶液(1ml)。将混合物搅拌5分钟，通过相分离器过滤并浓缩。将粗品悬浮于hcl水溶液(10ml的37％w/v,101.5mmol)中，在室温下持续1小时并在60℃下再持续1小时。将混合物浓缩并通过反相hplc(方法：c18waters sunfire柱(30x150mm,5微米).梯度：于具有0.1％tfa的水中的乙腈)纯化，以得到立体化学未知的异构体4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷甲酰胺(三氟乙酸盐)(7.2mg,7％)1h nmr(400mhz,氯仿-d+甲醇-d4)δ7.94(s,1h),7.80(s,1h),7.28(q,j＝9.2hz,1h),7.12(dd,j＝10.3,7.1hz,1h),7.05(d,j＝10.6hz,2h),3.16-3.01(m,1h),2.91(p,j＝7.2hz,1h),2.50(q,j＝12.8,12.0hz,2h),2.09(td,j＝13.7,4.2hz,2h),1.83(d,j＝13.7hz,2h),1.69(d,j＝13.7hz,2h),1.25(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值452.2024，实测值453.2[m+1]
+
。
[0750]
化合物18和19
[0751]
甲基4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷甲腈(c84)和4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷甲腈(c85)
[0752][0753]
向mac-tbs(152mg,0.7742mmol)和4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己酮c83(220mg,0.4475mmol)于meoh(10ml)中的溶液中添加dmap(190mg,1.555mmol)并将混合物在室温下搅拌18小时。将混合物浓缩并通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至40％etoac)纯化，以得到立体化学未知的两种异构体4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷甲腈c84(53mg,23％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.67(d,j＝0.9hz,1h),7.81(d,j＝0.7hz,1h),7.16(dt,j＝9.9,8.6hz,1h),7.00(ddd,j＝10.4,7.0,2.5hz,1h),6.94-6.83(m,2h),3.08(s,1h),2.99-2.72(m,2h),2.51(qd,j＝13.4,3.7hz,2h),2.23-2.13(m,2h),1.85(td,j＝13.7,4.3hz,2h),1.62-1.47(m,2h),1.36(s,9h),1.18-1.08(m,6h)。esi-ms m/z计算值518.2493，实测值519.22[m+1]
+
；以及4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷甲腈c85(30mg,13％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.83(d,j＝1.0hz,1h),7.94(d,j＝0.7hz,1h),7.29(dt,j＝9.9,8.6hz,1h),7.17-7.09(m,1h),7.05(dddd,j＝8.4,4.0,2.5,1.6hz,1h),6.99(d,j＝0.9hz,1h),3.16-2.93(m,2h),2.76(s,1h),2.52(q,j＝13.7,12.2hz,2h),2.36(dt,j＝12.4,2.2hz,2h),1.92(dd,j＝14.7,3.6hz,2h),1.78(td,j＝13.2,3.8hz,2h),1.51(s,9h),1.23(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值518.2493，实测值517.64[m+1]
+
。
[0754]
化合物18
[0755]
顺式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷羧酸
[0756][0757]
向4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷甲腈(53mg,0.1022mmol)c84于meoh(2ml)中的混合物中添加hcl水溶液(2ml的37％w/w,24.35mmol)，在室温下搅拌1小时，并在60℃下再搅拌1小时。然后，
添加hcl水溶液(2ml的37％w/w,24.35mmol)、meoh(1ml)和1,4-二噁烷(1ml)并将反应在密封管中在80℃下加热16小时。将混合物浓缩并溶解于meoh(1ml)和thf(1ml)以及lioh水溶液(200μl的5m,1.000mmol)中。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物浓缩并通过反相hplc(方法：c18 waters sunfire柱(30x150mm,5微米).梯度：于具有0.1％tfa的水中的乙腈)纯化，得到4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷羧酸(三氟乙酸盐)(27.5mg,45％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.68(s,1h),7.94(d,j＝0.9hz,1h),7.73(d,j＝1.1hz,1h),7.71-7.61(m,2h),7.35-7.21(m,1h),7.10(d,j＝1.0hz,1h),3.08(t,j＝12.6hz,1h),2.95(p,j＝7.2hz,1h),2.56(td,j＝11.0,9.3,3.9hz,2h),1.88(d,j＝13.2hz,4h),1.58(d,j＝12.7hz,2h),1.30(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值453.1864，实测值454.15[m+1]
+
。
[0758]
化合物19
[0759]
反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷羧酸
[0760][0761]
将4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷甲腈(30mg,0.05785mmol)c85于acoh(2ml,35.17mmol)和hcl水溶液(4ml的37％w/w,24.35mmol)中的溶液在80℃下在密封管中搅拌16小时。将混合物浓缩并通过反相hplc(方法：c18 waters sunfire柱(30x150mm,5微米).梯度：于具有0.1％tfa的水中的乙腈)纯化，得到4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-1-羟基-环己烷羧酸(三氟乙酸盐)(12.8mg,35％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.64(s,1h),7.94(d,j＝0.9hz,1h),7.75-7.59(m,2h),7.55(t,j＝1.1hz,1h),7.34-7.23(m,1h),7.09(d,j＝1.0hz,1h),3.06(t,j＝12.5hz,1h),2.96(p,j＝7.0hz,1h),2.30(t,j＝14.2hz,4h),1.71(d,j＝12.0hz,2h),1.64-1.46(m,2h),1.29(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值453.1864，实测值454.19[m+1]
+
。
[0762]
化合物20和21
基]环己烷羧酸(20)和顺式-4-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(21)
[0771]
向4-[1-(2,2-二甲基丙酰基)-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸乙酯c89(50mg,0.07583mmol)于thf(1.3ml)和meoh(545μl)中的溶液中添加naoh水溶液(470μl的1m,0.4700mmol)并将反应在50℃下加热1小时。将混合物浓缩并通过反相hplc(方法：c18waters sunfire柱(30x150mm,5微米).梯度：于具有0.1％1,4-二噁烷的水中的乙腈)纯化，得到反式-4-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(7.4mg,21％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.02(s,1h),7.73(s,1h),7.30(t,j＝9.7hz,1h),7.14(s,1h),7.07(d,j＝7.5hz,1h),6.95-6.89(m,1h),3.86(s,3h),3.18-3.01(m,2h),2.55(t,j＝12.0hz,1h),2.31(q,j＝13.0hz,2h),2.20(d,j＝12.6hz,2h),1.93(d,j＝12.7hz,2h),1.65(q,j＝12.1hz,2h),1.35(t,j＝6.6hz,6h)。esi-ms m/z计算值449.21146，实测值450.19[m+1]
+
；以及顺式-4-[5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(5.5mg,14％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.05(s,1h),7.75(s,1h),7.35-7.27(m,1h),7.15(s,1h),7.12-7.06(m,1h),6.96-6.90(m,1h),3.87(s,3h),3.20(t,j＝12.2hz,1h),3.08(p,j＝7.4hz,1h),2.54(t,j＝10.4hz,1h),2.34(q,j＝12.5hz,1h),2.23-2.02(m,4h),1.86(d,j＝12.8hz,1h),1.69-1.55(m,2h),1.40-1.32(m,6h)。esi-ms m/z计算值449.21146，实测值450.91[m+1]
+
。
[0772]
化合物22-35
[0773]
化合物22-35(表2)通过形成适当碘的锌酸盐并与对应的吲唑中间体进行negishi偶合，随后根据对于c20所遵循的程序对酯进行皂化来制备。对方法的任何修改在表2和所附脚注中标识。
[0774]
表2.化合物22-35的制备方法、结构、生物化学数据
[0775]
[0776]
[0777]
[0778]
[0779][0780]
1.
在negishi偶合后分离异构体。单独皂化每种异构体。
[0781]
化合物36
[0782]
4-[6-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-5-(4-氟苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸
[0783]
[0784]
步骤1：4-碘环己烷羧酸甲酯(c91)
[0785]
在0℃时向4-羟基环己烷羧酸甲酯c90(10g,63.21mmol)、咪唑(12.9g,189.5mmol)和pph3(28.2g,107.5mmol)于dcm(200ml)中的溶液中分批添加i2(27.1g,106.8mmol)并且将反应搅拌18小时，同时缓慢升温至室温。添加et2o(300ml)和na2s3o4水溶液(100ml)。将有机相干燥并浓缩。将残余物溶解于dcm中，通过添加et2o使其沉淀，过滤，用et2o洗涤并将滤液浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至45％etoac)纯化，得到4-碘环己烷羧酸甲酯(1.1g,6％)1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ4.67(s,1h),3.72(s,3h),2.45(tt,j＝9.6,3.9hz,1h),2.14(ddt,j＝14.3,10.8,5.5hz,2h),2.06-1.94(m,2h),1.79(dddd,j＝18.1,14.0,9.2,3.7hz,4h)。
[0786]
步骤2：4-(4-氰基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯(c93)
[0787]
在氮气下向cui(22mg,0.1155mmol)、pybox(122mg,0.5616mmol)和liotbu(598mg,7.470mmol)于dme(15ml)和dma(1.5ml)中的悬浮液中添加ni(cod)2(103mg,0.3745mmol)。在氮气下添加4-碘环己烷羧酸甲酯c91(1g,3.730mmol)并将反应搅拌5分钟。然后，添加3,3-二甲基戊-4-炔腈c92(600mg,5.599mmol)并将反应在室温下搅拌18小时。将反应混合物浓缩，添加nh4cl水溶液(50ml)和etoac(100ml)。将有机相干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至50％etoac)纯化，得到呈顺式:反式3:1混合物形式的4-(4-氰基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯(330mg,36％)。esi-ms m/z计算值247.15723，实测值248.11[m+1]
+
；246.11[m-1]-。
[0788]
步骤3：反式-4-[6-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-5-(4-氟苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(36)
[0789]
部分a.向4-(4-氰基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯c93(82mg,0.3315mmol)、6-溴-n-(4-氟苯基)-1h-吲唑-5-胺s13(110mg,0.3575mmol)和pd(t-bu3p)2(20mg,0.03914mmol)于1,4-二噁烷(1.3ml)中的悬浮液中添加cy2men(70μl,0.3268mmol)并将反应在110℃下加热90分钟。添加水和dcm。将混合物用dcm(3x)萃取。使有机相穿过相分离器，将其合并并浓缩，以得到粗制的4-[6-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-5-(4-氟苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯。esi-ms m/z计算值472.22745，实测值473.4[m+1]
+
。将粗品按原样使用。
[0790]
部分b.将来自部分a的粗品悬浮于etoh(2ml)中并添加naoh水溶液(1000μl的2m,2.000mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。添加hcl 1.0m水溶液和chcl3:ipa(3:1)。将混合物用chcl3:ipa(3:1)(3x)萃取。使有机相穿过相分离器，将其合并并浓缩。通过反相c18色谱法(于水、作为添加剂的0.2％甲酸中的0至50％乙腈)纯化，得到反式4-[6-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-5-(4-氟苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(16.1mg,10％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.89(s,1h),7.85-7.74(m,1h),7.37(m,2h),7.27(m,2h),6.87(s,1h),3.19(m,1h),2.87(s,2h),2.63-2.51(m,1h),2.50-2.32(m,2h),2.20(m,2h),2.02-1.86(m,2h),1.66(m,3h),1.40(s,6h)。esi-ms m/z计算值458.2118，实测值459.36[m+1]
+
。
[0791]
化合物37
[0792]
(2s)-1-[3-[5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]氮杂环丁烷-1-基]-2-羟基-丙-1-酮
[0793][0794]
步骤1：3-(4-甲氧基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(c96)
[0795]
向烧瓶中保持在氮气下的氯(异丙基)镁(500μl的2.0m,1.000mmol)于thf中的溶液中添加额外的thf(100μl)，随后滴加4-甲氧基-3,3-二甲基-丁-1-炔c94(100mg,0.8024mmol)。将反应在室温下搅拌15分钟。在第二烧瓶中，将3-碘氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯c95(200mg,0.7064mmol)和fecl2(5mg,0.03945mmol)溶解于无水dmf(800μl)中。在5分钟内将grignard溶液逐滴插管到第二烧瓶中并将反应在室温下搅拌2小时。添加水和乙醚。将混合物用乙醚(3x)萃取。将合并的有机相用mgso4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至20％etoac)纯化，得到3-(4-甲氧基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)氮杂环丁烷-1-甲
酸叔丁酯(65mg,31％)1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ4.02(t,j＝8.4hz,2h),3.79(dd,j＝8.1,6.4hz,2h),3.32(s,3h),3.23(tt,j＝8.7,6.4hz,1h),3.14(s,2h),1.36(s,9h),1.12(s,6h)。
[0796]
步骤2：3-[1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(c97)
[0797]
在氮气下向1-(苯磺酰基)-6-溴-n-(4-氟苯基)吲唑-5-胺s2(100mg,0.2017mmol)、3-(4-甲氧基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯c96(65mg,0.2188mmol)和cy2men(110μl,0.5136mmol)于1,4-二噁烷(600μl)中的悬浮液中添加pd(t-bu3p)2(10mg,0.01957mmol)。将反应管密封，并将反应在110℃下加热3小时。添加水和dcm。将混合物用dcm(3x)萃取。使有机相穿过相分离器，将其合并并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至20％etoac)纯化，得到呈白色固体的3-[1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(94.7mg,73％)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.70(t,j＝1.0hz,1h),8.10(d,j＝0.9hz,1h),8.05-7.99(m,2h),7.51-7.46(m,1h),7.46-7.40(m,2h),7.31-7.27(m,2h),7.18(m,2h),6.82(d,j＝1.0hz,1h),4.75-4.34(m,5h),3.32(s,2h),3.20(s,3h),1.59(s,9h),1.24(s,6h)。esi-ms m/z计算值632.2469，实测值633.4[m+1]
+
。
[0798]
步骤3：7-(氮杂环丁烷-3-基)-1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)吡咯并[2,3-f]吲唑(c98)
[0799]
向3-[1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯c97(94.7mg,0.1481mmol)于dcm(1.5ml)中的溶液中添加tfa(80μl,1.038mmol)并将反应在室温下搅拌24小时。将混合物浓缩，以得到呈黄色油状物的粗制7-(氮杂环丁烷-3-基)-1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)吡咯并[2,3-f]吲唑(三氟乙酸盐)(118.8mg,99％)。esi-ms m/z计算值532.19446，实测值533.31[m+1]
+
。
[0800]
步骤4：7-(氮杂环丁烷-3-基)-5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(c99)
[0801]
向7-(氮杂环丁烷-3-基)-1-(苯磺酰基)-5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)吡咯并[2,3-f]吲唑(三氟乙酸盐)c98(118mg,0.1634mmol)于t-buoh(1.5ml)中的悬浮液中添加naoh水溶液(500μl的2.0m,1.000mmol)并将反应在室温下搅拌24小时。将混合物浓缩，添加水和naoh 1m水溶液以达到ph 10。将混合物用chcl3:ipa(3:1)(3x)萃取。使有机相穿过相分离器，将其合并并浓缩，以得到粗制的7-(氮杂环丁烷-3-基)-5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑(72.6mg,76％)。esi-ms m/z计算值392.20123，实测值393.3[m+1]
+
。
[0802]
步骤5：(2s)-1-[3-[5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]氮杂环丁烷-1-基]-2-羟基-丙-1-酮(37)
[0803]
向7-(氮杂环丁烷-3-基)-5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑c99(72mg,0.1237mmol)、hatu(55mg,0.1446mmol)和(2s)-2-羟基丙酸c100(15mg,0.1665mmol)于dmf(1.2ml)中的悬浮液中添加diea(65μl,0.3732mmol)并将反应在室温下搅拌30分钟。将混合物通过反相hplc(方法：c18 waters sunfire柱(30x150mm,
5微米).梯度：于具有0.2％甲酸的水中的乙腈)纯化。样品通过溶解于dcm中并用水(ph大约4)萃取来脱盐。将有机相浓缩，以得到(2s)-1-[3-[5-(4-氟苯基)-6-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]氮杂环丁烷-1-基]-2-羟基-丙-1-酮(26.7mg,46％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.92(d,j＝0.9hz,1h),7.78(m,1h),7.42-7.32(m,2h),7.32-7.21(m,2h),6.92(t,j＝1.2hz,1h),4.94-4.88(m,1h),4.87-4.72(m,2h),4.68-4.56(m,1h),4.55-4.40(m,2h),3.39(s,2h),3.21(s,3h),1.48(dd,j＝6.7,4.5hz,3h),1.27(s,6h)。esi-ms m/z计算值464.22238，实测值465.27[m+1]
+
。
[0804]
化合物38和39
[0805][0806]
反式-4-[6-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-5-(3,4-二氟苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(38)和顺式-4-[6-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-5-(3,4-二氟苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(39)的合成
[0807]
部分a.在氮气下向4-(4-氰基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸乙酯c93(200mg,0.7652mmol)、6-溴-n-(3,4-二氟苯基)-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-胺s14(350mg,0.8428mmol)和pd(t-bu3p)2(40mg,0.07827mmol)于1,4-二噁烷(3ml)中的悬浮液中添加cy2men(400μl,1.867mmol)，并将反应在110℃下加热2小时。添加水和dcm。将混合物用dcm(3x)萃取。使有机相穿过相分离器，将其合并并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至30％etoac)纯化，得到顺式和反式4-[6-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-5-(3,4-二氟苯基)-1-四氢吡喃-2-基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸乙酯(400mg,89％)的混合物。esi-ms m/z计算值588.2912，实测值589.29[m+1]
+
。
[0808]
部分b.向来自部分a的混合物于dcm(2ml)中的溶液中添加tfa(1000μl,12.98mmol)并将混合物在室温下搅拌18小时。混合物浓缩并按原样使用。
[0809]
部分c.将来自部分b的材料悬浮于etoh(6ml)中，添加naoh水溶液(2000μl的2m,4.000mmol)并将反应在室温下搅拌18小时。将混合物浓缩，添加hcl 1.0m水溶液和chcl3:ipa(3:1)。将混合物用chcl3:ipa(3:1)(3x)萃取。使有机相穿过相分离器，将其合并并浓缩。通过反相c18色谱法(于水、作为添加剂的0.2％甲酸中的0至50％乙腈)纯化，得到两种异构体：反式-4-[6-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-5-(3,4-二氟苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸4(170.8mg,47％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.93(d,j＝0.9hz,1h),7.81(t,j＝1.1hz,1h),7.47(dt,j＝10.4,8.8hz,1h),7.39(ddd,j＝10.8,7.1,2.6hz,1h),7.22(m,1h),6.94(d,j＝1.0hz,1h),3.22(tt,j＝12.3,3.6hz,1h),2.92(s,2h),2.59(tt,j＝11.9,3.0hz,1h),2.51-2.36(m,2h),2.22(m,2h),1.97(m,2h),1.77-1.62(m,2h),1.44(s,6h)。esi-ms m/z计算值476.2024，实测值477.32[m+1]
+
；以及顺式-4-[6-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-5-(3,4-二氟苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸5(11.1mg,
3％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.92(d,j＝1.0hz,1h),7.81(d,j＝1.1hz,1h),7.46(dt,j＝10.4,8.8hz,1h),7.39(ddd,j＝10.8,7.2,2.5hz,1h),7.22(m,1h),6.93(d,j＝1.1hz,1h),3.23(tt,j＝12.0,3.6hz,1h),2.93(s,2h),2.85(m,1h),2.71-2.53(m,2h),2.34(d,j＝13.4hz,2h),1.86-1.70(m,4h),1.43(s,6h)。esi-ms m/z计算值476.2024，实测值477.32[m+1]
+
。
[0810]
化合物40-43
[0811]
化合物40-43(表3)根据对于化合物38所述的方法由中间体c93和适当的吲唑制备。对方法的任何修改在表3和所附脚注中标识。
[0812]
表3.化合物40-43的制备方法、结构、生物化学数据
[0813]
[0814][0815]
化合物44
[0816]
3-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸
[0817][0818]
步骤1：3-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙烯基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸(c102)
[0819]
部分a.将6-羟基-6-甲基-庚-4-酸c101(50mg,0.3201mmol)和bsa(150μl)在室温下搅拌10分钟。然后，添加6-溴-7-氟-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吲唑-5-胺s17(60mg,0.1586mmol)和pd(t-bu3p)2(10mg,0.01957mmol)。将混合物悬浮于1,4-二噁烷(500μl)中，并添加cy2men(90μl,0.4202mmol)。将反应在110℃下加热1小时。添加hcl 1.0水溶液和dcm。将混合物用dcm(3x)萃取。使有机相穿过相分离器，将其合并并浓缩。通过反相c18色谱法(于于水、作为添加剂的0.2％甲酸中的0至50％乙腈)纯化，得到按原样使用的杂质材料3-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸(134.9mg,53％)。esi-ms m/z计算值429.15002，实测值430.25[m+1]
+
。
[0820]
部分b.向来自部分a的材料于dcm(1,000μl)中的溶液中添加nai(190mg,1.268mmol)和tmscl(160μl,1.261mmol)。将反应在室温下搅拌4小时。添加hcl 1.0m水溶液和chcl3:ipa(3:1)。将混合物用chcl3:ipa(3:1)(3x)萃取。使有机相穿过相分离器，将其合并并浓缩。通过反相hplc(方法：c18 waters sunfire柱，30x150mm,5微米；梯度：于具有0.2％甲酸的水中的乙腈)纯化，得到3-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙烯基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸(31.9mg,45％)。esi-ms m/z计算值411.13943，实测值412.17[m+1]
+
。
[0821]
步骤2：3-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸(44)
[0822]
向3-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙烯基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸c102(31mg,0.06911mmol)于meoh(2ml)中的溶液中添加钯碳(8mg的10％w/w,
0.007517mmol)。将混合物用氢气吹扫并在室温下搅拌8小时。通过硅胶垫过滤混合物，将其用etoac洗涤，并将滤液浓缩，以得到3-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸(21.6mg,75％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.97(m,1h),7.30(dd,j＝11.1,8.5hz,1h),7.10(dd,j＝7.6,2.4hz,1h),6.94(m,1h),6.90(s,1h),3.86(s,3h),3.27(m,2h),3.12(h,j＝7.2hz,1h),2.76-2.66(m,2h),1.33(m,6h)。esi-ms m/z计算值413.1551，实测值414.15[m+1]
+
。
[0823]
化合物45
[0824]
4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸
[0825][0826]
步骤1：4-(3-羟基-3-甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯(c104)
[0827]
向冷却至-78℃(干冰/丙酮浴)并在氮气下的4-乙炔基环己烷羧酸甲酯c103(1g,6.016mmol)于thf(30.0ml)中的溶液中滴加lda(6.6ml的1m,6.600mmol)于thf中的溶液。将反应在-78℃下搅拌15分钟并滴加丙酮(4.3ml,58.56mmol)。在搅拌30分钟后，移除冷却浴
并将反应升温至室温并搅拌1小时。将反应冷却至0℃并添加nh4cl饱和水溶液。将混合物用etoac萃取。将有机相用盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至40％etoac)纯化，得到4-(3-羟基-3-甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸酯(747mg,55％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ3.64(s,3h),2.35-2.22(m,2h),1.99-1.92(m,4h),1.46-1.33(m,10h)。
[0828]
步骤2：4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(c105)
[0829]
在氮气下向6-溴-7-氟-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吲唑-5-胺s17(100mg,0.2727mmol)、cy2men(145μl,0.6770mmol)和反式-4-(3-羟基-3-甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯c104(61.1mg,0.2724mmol)于1,4-二噁烷(936μl)中的悬浮液中添加jackiephos pd g3(22.1mg,0.01895mmol)并将反应在110℃下加热2小时。添加nh4cl水溶液和dcm，使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至50％etoac)纯化，得到4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸酯(141mg,87％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.96(d,j＝3.4hz,1h),7.26(dd,j＝11.2,8.5hz,1h),7.03(dd,j＝7.7,2.4hz,1h),6.91-6.86(m,1h),6.81(s,1h),3.86(s,3h),3.71(s,3h),2.57-2.49(m,1h),2.22-2.10(m,4h),1.91(d,j＝13.0hz,2h),1.72-1.58(m,3h),1.51(d,j＝1.9hz,6h)。esi-ms m/z计算值497.21262，实测值498.2[m+1]
+
。
[0830]
步骤3：4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙烯基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(c106)
[0831]
在0℃时向4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯c105(164mg,0.3296mmol)于dcm(3.2ml)中的溶液中添加tfa(76.1μl,0.9878mmol)并将反应搅拌2小时。添加nahco3水溶液和dcm，使有机相穿过相分离器并浓缩。通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至60％etoac)纯化，得到4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙烯基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(81mg,48％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.03(d,j＝3.4hz,1h),7.29-7.22(m,2h),7.11(dd,j＝7.7,2.4hz,1h),6.97(ddd,j＝8.5,3.8,2.5hz,1h),5.49(t,j＝1.8hz,1h),5.25-5.23(m,1h),3.86(s,3h),3.70(s,3h),3.10-3.00(m,1h),2.54-2.44(m,1h),2.14(dd,j＝20.0,13.1hz,4h),1.89-1.81(m,2h),1.75(s,3h),1.66-1.53(m,2h)。esi-ms m/z计算值479.20206，实测值480.2[m+1]
+
。
[0832]
步骤4：4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(c107)
[0833]
向4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙烯基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯c106(26mg,0.05422mmol)于meoh(0.7ml)中的溶液中添加pd/c(1.1mg,0.01034mmol)。将反应用氢气吹扫并在室温下搅拌90分钟。通过过滤混合物，将其浓缩并通过硅胶色谱法(于庚烷中的0至50％etoac)纯化，得到4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(7.1mg,27％)。esi-ms m/z计算值481.2177，实测值482.18[m+1]
+
。
[0834]
步骤5：4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(45)
[0835]
向4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯c107(17mg,0.03530mmol)于thf(496μl)和meoh(214μl)中的溶液中添加naoh水溶液(216μl的1m,0.2160mmol)并将反应在50℃下加热1小时。将混合物浓缩并通过反相c18色谱法(于水、0.2％甲酸中的乙腈)纯化，得到4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(4.4mg,26％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.98(d,j＝3.4hz,1h),7.32(dd,j＝11.1,8.5hz,1h),7.09(dd,j＝7.7,2.4hz,1h),6.95-6.90(m,2h),3.87(s,3h),3.19-3.01(m,2h),2.52-2.43(m,1h),2.25-2.12(m,4h),1.92-1.85(m,2h),1.65(q,j＝13.3hz,2h),1.37(t,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值467.20206，实测值468.23[m+1]
+
。
[0836]
化合物46
[0837]
4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,3-二氢呋喃-2-甲酸
[0838][0839]
向4-[5-(3,4-二氟苯基)-1-(2,2-二甲基丙酰基)-6-异丙基-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,3-二氢呋喃-2-甲酸甲酯c73(14mg,0.02684mmol)于thf(300μl)和meoh(120μl)中的溶液中添加naoh水溶液(120μl的1m,0.1200mmol)并将混合物在50℃下加热1小时。将混合物浓缩并通过反相c18色谱法(于于水、0.2％甲酸中的乙腈)纯化，得到4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]-2,3-二氢呋喃-2-甲酸(6mg,51％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.96(s,1h),7.60-7.45(m,2h),7.42(ddd,j＝10.4,7.2,2.5hz,1h),7.30-7.21(m,1h),7.11(d,j＝1.1hz,1h),6.52(t,j＝2.1hz,1h),5.22(dd,j＝11.4,6.6hz,1h),3.42(d,j＝13.1hz,1h),3.12(tt,j＝14.3,6.9hz,2h),1.30(dd,j＝7.2,2.9hz,6h)。esi-ms m/z计算值423.13943，实测值424.14[m+1]
+
。
[0840]
化合物74
[0841]
反式-4-[11-(3-乙基氧杂环丁烷-3-基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸
[0842][0843]
步骤1：环己烷-1,4-二羧酸1-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)酯4-甲酯(c108)
[0844]
将4-甲氧基羰基环己烷羧酸c119(1.034g,5.55mmol)、2-羟基异吲哚啉-1,3-二酮(1.318g,8.07mmol)、dmap(85mg,0.695mmol)和3-(乙基亚氨基亚甲基氨基)-n,n-二甲基-丙-1-胺(hcl)(2.057g,10.73mmol)溶解于dcm(60ml)中并在室温下搅拌整个周末。将反应用水(100ml)稀释并使混合物穿过相分离器。收集有机相，并蒸发溶剂。通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-40％etoac)纯化，得到呈约5:1比率的顺式和反式异构体形式的环己烷-1,4-二羧酸1-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)酯4-甲酯c108(1.661g,87％)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ7.93-7.84(m,2h),7.84-7.73(m,2h),3.69(s,3h),2.91(td,j＝7.1,3.7hz,1h),2.52(tt,j＝7.5,4.1hz,1h),2.19-2.00(m,4h),1.94-1.74(m,4h)。esi-ms m/z计算值331.1056，实测值332.08[m+1]
+
。
[0845]
步骤2：4-[2-(3-乙基氧杂环丁烷-3-基)乙炔基]环己烷羧酸甲酯(c109)
[0846]
向30ml闪烁管中添加环己烷-1,4-二羧酸1-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)酯4-甲酯c108(863mg,2.60mmol)、cucl(24.6mg,0.248mmol)、双[(z)-1-甲基-3-氧代-丁-1-烯氧基]铜(49.1mg,0.187mmol)和2-苯基乙炔基铜(30.9mg,0.1876mmol)。将管密封并抽真空/
用n2再填充3x。添加thf(10.0ml)，并将混合物用氮气吹扫。添加3-乙基-3-乙炔基-氧杂环丁烷(200mg,1.797mmol)和三乙胺(606μl,4.34mmol)，随后添加thf(10ml)。将混合物用氮气流脱气10分钟。将管密封并用两个蓝色led光辐照过夜。
[0847]
通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-25％etoac，cam染色剂)纯化，得到4-[2-(3-乙基氧杂环丁烷-3-基)乙炔基]环己烷羧酸甲酯c109(313mg,54％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ4.73-4.63(m,2h),4.46-4.38(m,2h),3.67-3.62(m,3h),2.41-2.27(m,1h),2.00-1.92(m,2h),1.92-1.84(m,3h),1.77-1.69(m,2h),1.65-1.59(m,1h),1.50-1.30(m,3h),1.04-0.94(m,3h)。
[0848]
步骤3：1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲氧基-苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s44)
[0849]
将6-氯-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺c42(14.16g,42.87mmol)溶解于thf(300ml)中，置于n2氛围下，并冷却至0℃。在5-10分钟内分若干批次添加kotbu(5.54g,49.37mmol)，并将反应搅拌约5分钟。在30分钟内滴加2,2-二甲基丙酰氯(6.1ml,49.58mmol)于thf(150ml)中的溶液，其中温度保持低于6℃。将混合物再搅拌15分钟。然后将混合物用dcm(300ml)稀释并用水(300ml)洗涤。将水层用dcm(200ml)萃取。使合并的有机层穿过相分离器并在减压下浓缩至干。通过硅胶色谱法(装载在celite上的干物质，梯度：于庚烷中的0-100％etoac)纯化，得到1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲氧基-苯胺基)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s44(16.22g,80％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.34(s,1h),8.04(s,1h),7.88(s,1h),7.13(dd,j＝11.4,8.7hz,1h),6.96(dd,j＝7.7,2.6hz,1h),6.68(ddd,j＝8.7,3.7,2.6hz,1h),3.79(s,3h),1.48(s,9h)。esi-ms m/z计算值376.11023，实测值377.16[m+1]
+
。
[0850]
步骤4：4-[4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(3-乙基氧杂环丁烷-3-基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(c110)
[0851]
向1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲氧基-苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s44(320mg,0.8248mmol)和4-[2-(3-乙基氧杂环丁烷-3-基)乙炔基]环己烷羧酸甲酯c109(312mg,1.246mmol)于1,4-二噁烷(4.8ml)中的溶液中添加n-环己基-n-甲基-环己胺(531μl,2.479mmol)。将溶液用氮气吹扫15分钟并且然后添加pd(t-bu3p)2(42.5mg,0.08316mmol)。将反应加热至100℃持续5小时。通过反相色谱法(0-100％水/acn+0.2fa)纯化，得到4-[4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(3-乙基氧杂环丁烷-3-基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯c110(151mg,30％)。esi-ms m/z计算值590.29047，实测值591.49[m+1]
+
。
[0852]
步骤5：反式-4-[11-(3-乙基氧杂环丁烷-3-基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(74)
[0853]
将4-[4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(3-乙基氧杂环丁烷-3-基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯c110(151mg,0.2556mmol)溶解于thf(3.0ml)和ipa(1.5ml)中，然后添加naoh(1.5ml的1m,1.500mmol)。将溶液加热至50℃持续1小时。在减压下蒸发溶剂，并将粗材料溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(0-100％水/acn+0.1tfa)纯化，得到反式-4-[11-(3-乙
基氧杂环丁烷-3-基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸74(18.2mg,14％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.40(s,1h),8.15(s,1h),7.41-7.29(m,2h),7.10(s,1h),5.05-4.99(m,2h),3.90(s,3h),2.70(d,j＝12.6hz,1h),2.48-2.37(m,2h),2.37-2.29(m,2h),2.21(d,j＝12.7hz,3h),1.96-1.88(m,2h),1.60(q,j＝12.7hz,2h),1.20(t,j＝7.6hz,3h)。esi-ms m/z计算值492.2173，实测值493.44[m+1]
+
。
[0854]
化合物75
[0855]
反式-4-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-[1-(甲氧基甲基)环丁基]-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸
[0856][0857]
步骤1：4-[2-[1-(甲氧基甲基)环丁基]乙炔基]环己烷羧酸甲酯(c111)
[0858]
向具有压力减轻隔膜的30ml闪烁管中添加环己烷-1,4-二羧酸1-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)酯4-甲酯c108(765mg,2.309mmol)、cucl(21.8mg,0.2202mmol)、双[(z)-1-甲基-3-氧代-丁-1-烯氧基]铜(43.6mg,0.1666mmol)和2-苯基乙炔基铜(27.4mg,
0.1664mmol)。将管密封并抽真空/用n2再填充3x。添加thf(10.0ml)，并将混合物脱气。添加1-乙炔基-1-(甲氧基甲基)环丁烷(200mg,1.594mmol)和三乙胺(538μl,3.860mmol)，随后添加thf(10ml)。将混合物用氮气脱气10分钟。将管密封并用两个蓝色led光辐照过夜。通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-25％etoac，cam染色剂)纯化，得到4-[2-[1-(甲氧基甲基)环丁基]乙炔基]环己烷羧酸甲酯c111(394mg,72％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ3.68-3.62(m,3h),3.44-3.34(m,5h),2.38-2.21(m,2h),2.18-2.05(m,4h),1.99-1.84(m,5h),1.75-1.67(m,2h),1.62-1.51(m,1h),1.46-1.30(m,2h)。
[0859]
步骤2：1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲氧基-苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s44)
[0860]
将6-氯-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺c42(14.16g,42.87mmol)溶解于thf(300ml)中，置于n2氛围下，并冷却至0℃。在5-10分钟内分若干批次添加kot-bu(5.54g,49.37mmol)，并将反应搅拌约5分钟。在30分钟内滴加2,2-二甲基丙酰氯(6.1ml,49.58mmol)于thf(150ml)中的溶液，其中温度保持低于6℃。将混合物再搅拌15分钟。然后将混合物用dcm(300ml)稀释并用水(300ml)洗涤。将水层用dcm(200ml)萃取，并将有机层合并并使其穿过相分离器。在减压下蒸发溶剂。通过硅胶色谱法(装载在celite上的干物质，梯度：于庚烷中的0-100％etoac)纯化，得到1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲氧基-苯胺基)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s44(16.22g,80％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.34(s,1h),8.04(s,1h),7.88(s,1h),7.13(dd,j＝11.4,8.7hz,1h),6.96(dd,j＝7.7,2.6hz,1h),6.68(ddd,j＝8.7,3.7,2.6hz,1h),3.79(s,3h),1.48(s,9h)。esi-ms m/z计算值376.11023，实测值377.16[m+1]
+
。
[0861]
步骤3：4-[4-(2,2-二甲基丙酰基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-[1-(甲氧基甲基)环丁基]-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(c112)
[0862]
向1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲氧基-苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s44(370mg,0.9536mmol)和4-[2-[1-(甲氧基甲基)环丁基]乙炔基]环己烷羧酸甲酯c111(381mg,1.441mmol)于1,4-二噁烷(5.5ml)中的溶液中添加n-环己基-n-甲基-环己胺(614μl,2.867mmol)。将混合物用氮气吹扫15分钟。添加pd(t-bu3p)2(49.2mg,0.09627mmol)，并将混合物加热至100℃持续5小时。通过反相色谱法(0-100％水/acn+0.2fa)纯化，得到4-[4-(2,2-二甲基丙酰基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-[1-(甲氧基甲基)环丁基]-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯c112(178mg,4％)。esi-ms m/z计算值604.3061，实测值605.49[m+1]
+
。
[0863]
步骤4：反式-4-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-[1-(甲氧基甲基)环丁基]-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(75)
[0864]
将4-[4-(2,2-二甲基丙酰基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-[1-(甲氧基甲基)环丁基]-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯c112(308mg,0.5093mmol)溶解于thf(6.1ml)和ipa(3ml)中。添加naoh(3.0ml的1m,3.0mmol)，并将混合物加热至50℃持续1小时。在减压下移除溶剂并将粗材料溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(0-100％水/acn+0.2fa)纯化，得到反式-4-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-[1-(甲氧基甲基)环丁基]-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3
(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸75(37.7mg,14％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.33(s,1h),8.06(s,1h),7.42(dd,j＝7.7,2.5hz,1h),7.31(dd,j＝11.0,8.5hz,1h),7.12(ddd,j＝8.6,3.9,2.5hz,1h),3.97(d,j＝9.3hz,1h),3.92-3.85(m,4h),3.41(s,3h),2.94-2.84(m,1h),2.72-2.63(m,1h),2.53-2.30(m,4h),2.19(d,j＝13.2hz,2h),2.14-1.97(m,3h),1.88(d,j＝13.0hz,2h),1.78(q,j＝9.2,8.4hz,1h),1.66-1.52(m,2h)。esi-ms m/z计算值506.23294，实测值507.43[m+1]
+
。
[0865]
化合物76(也公开为化合物id-156)
[0866]
4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸
[0867][0868]
步骤1：反式-4-[2-(4-羟基四氢吡喃-4-基)乙炔基]环己烷羧酸甲酯(c113)
[0869]
在氮气下将反式-4-乙炔基环己烷羧酸甲酯(2g,12.03mmol)于thf(60.0ml)中的溶液冷却至-78℃(干冰/丙酮浴)。在15分钟后，滴加(二异丙基氨基)锂(12.4ml的1m,12.4mmol)。将反应搅拌15分钟，此后将四氢吡喃-4-酮(10.4ml,112.6mmol)滴加到所述溶液中。在30分钟后，移除冷却浴并将反应升温至室温并搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃并用饱和nh4cl水溶液淬灭并用etoac萃取。将有机相用盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤，并在减压下浓缩至干。将粗材料通过硅胶柱(12g柱，0-40％etoac:庚烷)纯化，以得到反式-4-[2-(4-羟基四氢吡喃-4-基)乙炔基]环己烷羧酸甲酯c113(2.05g,64％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ3.88-3.80(m,2h),3.66-3.57(m,4h),2.39-2.25(m,2h),2.03-1.93(m,4h),
1.85-1.76(m,2h),1.73-1.65(m,2h),1.51-1.25(m,5h)。
[0870]
步骤2：反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(4-羟基四氢吡喃-4-基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(c114)
[0871]
将6-溴-7-氟-n-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吲唑-5-胺s17(510mg,1.391mmol)、n-环己基-n-甲基-环己胺(672mg,3.440mmol)和反式-4-[2-(4-羟基四氢吡喃-4-基)乙炔基]环己烷羧酸甲酯c113(369mg,1.385mmol)添加到管中并用氮气吹扫。向反应混合物中添加二噁烷(4.6ml)，并将混合物脱气5分钟。添加jackiephos pd g3(112mg,0.09602mmol)并将反应在110℃下加热2小时。添加nh4cl(水溶液)和dcm，并通过相分离器收集有机层。通过正相色谱法(0-100％etoac/庚烷)纯化，得到反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(4-羟基四氢吡喃-4-基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯c114(500mg,46％)。esi-ms m/z计算值539.2232，实测值540.41[m+1]
+
。
[0872]
步骤3：反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(c115)
[0873]
向反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(4-羟基四氢吡喃-4-基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯c114(726mg,0.9261mmol)和nai(1.15g,7.672mmol)于dcm(10.6ml)中的溶液中添加氯(三甲基)硅烷(975μl,7.682mmol)。将混合物在室温下搅拌并搅拌3小时。将反应用dcm(9ml)稀释。将有机相用0.5m硫代硫酸钠水溶液洗涤。使有机相穿过相分离器并将其浓缩至干。通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-40％etoac)纯化，得到由以下组成的混合物(103mg)：反式-4-[6-(3,6-二氢-2h-吡喃-4-基)-8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(esi-ms m/z计算值521.2283，实测值522.32[m+1]
+
)和反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯c115(esi-ms m/z计算值523.2283，实测值524.35[m+1]
+
)。
[0874]
步骤4：反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(c116)
[0875]
在氮气氛围下将4-[6-(3,6-二氢-2h-吡喃-4-基)-8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯和反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯c115(103mg,0.09431mmol)悬浮于meoh(1.5ml)中的混合物添加到湿润的氢氧化钯碳(14.9mg的20％w/w,0.02122mmol)中。将系统抽真空并用氮气再填充3x，随后用h2再填充3x。将反应在室温下在氢气球下搅拌3小时。将系统抽真空并用n2再填充，并然后通过celite垫过滤溶液。将滤液蒸发并再溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯c116(18mg,3.6％，在2个步骤内)esi-ms m/z计算值523.2283，实测值524.35[m+1]
+
。
[0876]
步骤5：反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(76,id-156)
[0877]
向反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯c116(18mg,0.03438mmol)中添加thf(1.6ml)和meoh(777μ
l)。然后添加氢氧化钠水溶液(204μl的1m,0.2040mmol)。将反应将混合物在50℃下加热1小时。通过减压移除溶剂。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[8-氟-5-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-四氢吡喃-4-基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸76(13.9mg,78％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.01(d,j＝3.2hz,1h),7.34(dd,j＝10.8,8.7hz,1h),7.10(d,j＝7.2hz,1h),6.99-6.90(m,2h),4.00(dd,j＝11.1,3.8hz,2h),3.87(s,3h),3.37-3.33(m,1h),3.24-3.17(m,1h),2.94(t,j＝12.8hz,1h),2.48(t,j＝12.5hz,1h),2.27-2.11(m,6h),1.88(d,j＝12.9hz,2h),1.83-1.59(m,5h)。esi-ms m/z计算值509.21262，实测值510.41[m+1]
+
。
[0878]
化合物77(也公开为化合物ib-176)
[0879]
反式-4-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸
[0880][0881]
步骤1：4-(4-甲氧基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯(c117)
[0882]
向具有压力减轻隔膜的20ml闪烁管中添加环己烷-1,4-二羧酸1-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)酯4-甲酯c108(848mg,2.559mmol)、cucl(24.2mg,0.2444mmol)、双[(z)-1-甲基-3-氧代-丁-1-烯氧基]铜(48.3mg,0.1845mmol)和2-苯基乙炔基铜(29.0mg,0.1761mmol)。将管密封并抽真空/用n2再填充3次。添加thf(10ml)，并将混合物脱气5分钟。经由注射器添加4-甲氧基-3,3-二甲基-丁-1-炔(200mg,1.765mmol)和tea(596μl,4.276mmol)，随后添加thf(10ml)。将混合物脱气10分钟。将管密封并用两个蓝色led光辐照过夜。通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-25％etoac，cam染色剂)纯化，得到4-(4-甲氧基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯c117(528mg,91％)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ3.60(d,j＝9.4hz,4h),3.32(dd,j＝2.2,0.7hz,3h),3.15(dd,j＝10.4,0.7hz,2h),2.22-2.17(m,1h),1.90(td,j＝9.8,9.3,4.6hz,2h),1.70-1.64(m,2h),1.24-1.18(m,4h),1.11
(d,j＝11.3hz,6h)。
[0883]
步骤2：4-[4-(2,2-二甲基丙酰基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(c118a)
[0884]
向1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲氧基-苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s44(100mg,0.2577mmol)和4-(4-甲氧基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯c117(98.4mg,0.3899mmol)于1,4-二噁烷(1.5ml)中的溶液中添加n-环己基-n-甲基-环己胺(166μl,0.7750mmol)。将溶液用n2脱气15分钟。向此混合物中添加pd(t-bu3p)2(13.3mg,0.026mmol)。将管密封并加热至100℃持续过夜。通过正相色谱法(0-40％etoac/庚烷)纯化，得到4-[4-(2,2-二甲基丙酰基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯c118a(47mg,17％)，esi-ms m/z计算值592.3061，实测值593.2[m+1]
+
；保留时间：0.92分钟。
[0885]
步骤3：反式-4-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(77,ib-176)
[0886]
向4-[4-(2,2-二甲基丙酰基)-10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯c118a(47mg,0.079mmol)于thf(941μl)和ipa(470μl)中的溶液中添加naoh(475μl的1m,0.475mmol)。将混合物在50℃下搅拌4小时。通过减压移除溶剂，并将粗材料溶解于dmso(2ml)中。通过反相色谱法(0-100％水/acn+0.2fa)纯化，得到反式-4-[10-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸77(2.0mg,5％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.93(s,1h),7.30-7.22(m,2h),7.14-7.08(m,1h),6.99-6.94(m,1h),3.85(s,3h),3.64-3.59(m,1h),3.49(d,j＝9.0hz,1h),3.28(s,3h),3.23-3.16(m,1h),2.87(q,j＝12.7hz,2h),2.48-2.39(m,1h),2.12(d,j＝12.9hz,2h),1.77(d,j＝13.0hz,2h),1.62(q,j＝12.9hz,2h),1.33(d,j＝25.6hz,6h)。esi-ms m/z计算值494.23294，实测值495.38[m+1]
+
。
[0887]
化合物78(也公开为化合物ib-166)
[0888]
4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸
[0889][0890]
步骤1：1-[6-氯-5-(3,4-二氟苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s45)
[0891]
在装备有搅拌棒的1000ml圆底烧瓶中，在1℃(冰-水浴)中将kot-bu(10.32g,91.97mmol)添加到6-氯-n-(3,4-二氟苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺c39(24.7g,87.15mmol)于thf(560ml)中的悬浮液中。在约15分钟后，添加2,2-二甲基丙酰氯(11.87ml,96.47mmol)。在相同冷却浴中将混合物搅拌30分钟。将反应用水(100ml)淬灭并搅拌5分钟。在减压下将反应将混合物浓缩至近干。将混合物分配在dcm(1000ml)与水(500ml)之间。使有机层穿过相分离器并在减压下浓缩至干。将粗材料用mtbe(480ml)稀释。将混合物超声处理并过滤沉淀物。将滤饼用庚烷洗涤。将滤饼在高真空下干燥过夜，以得到1-[6-氯-5-(3,4-二氟苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s45(24.23g,74％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.39-8.35(m,1h),8.16(s,1h),8.11(s,1h),7.37-7.27(m,1h),7.09(ddd,j＝12.9,7.1,2.7hz,1h),6.92-6.86(m,1h),1.48(s,9h)。esi-ms m/z计算值364.09024，实测值365.26[m+1]
+
。
[0892]
步骤2：4-[10-(3,4-二氟苯基)-4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(c118b)
[0893]
向1-[6-氯-5-(3,4-二氟苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s45(120mg,0.319mmol)和4-(4-甲氧基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯c117(122mg,0.483mmol)于1,4-二噁烷(1.7ml)中的溶液中添加n-环己基-n-甲基-环己胺(205μl,0.9571mmol)，并将溶液用n2脱气15分钟。添加pd(t-bu3p)2(16.4mg,0.0320mmol)，并将反
应将混合物加热至100℃过夜。通过正相色谱法(0-40％etoac/庚烷)纯化，得到4-[10-(3,4-二氟苯基)-4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯c118b(65mg,29％)，esi-ms m/z计算值580.28613，实测值581.5[m+1]
+
。
[0894]
步骤3：反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(78,ib-166)
[0895]
向4-[10-(3,4-二氟苯基)-4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯c118b(65mg,0.1119mmol)于thf(1.3ml)和ipa(650μl)中的溶液中添加naoh(671μl的1m,0.671mmol)。将混合物加热至50℃持续1小时。在减压下移除溶剂并将粗材料溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(0-100％水/acn+0.2fa)纯化，得到反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-(2-甲氧基-1,1-二甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸78(7.9mg,14％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.25(s,1h),7.76(s,1h),7.55-7.46(m,2h),7.31(d,j＝8.6hz,1h),3.57-3.51(m,2h),3.27(s,3h),2.74-2.51(m,3h),2.22(d,j＝12.9hz,2h),1.88(d,j＝13.2hz,2h),1.72-1.55(m,3h),1.36(d,j＝6.8hz,6h)。esi-ms m/z计算值482.21295，实测值483.37[m+1]
+
。
[0896]
化合物79(也公开为化合物ic-161)和80
[0897]
反式-4-[11-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-10-(4-氟-3-甲基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(79,ic-161)和顺式-4-[11-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-10-(4-氟-3-甲基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(80)
[0898][0899]
步骤1：6-氯-n-(4-氟-3-甲基-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺(s47)
[0900]
在n2氛围下在50℃加热块上将5-溴-6-氯-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶c38(5.13g,22.07mmol)、4-氟-3-甲基-苯胺(3.09g,24.69mmol)和kot-bu(6.38g,56.86mmol)溶解于t-buoh(100ml)中。将溶液用n2脱气15分钟，并一次性添加t-buxphos pd g4(0.947g,1.060mmol)。将反应在50℃下搅拌过夜。在减压下移除溶剂，并将粗材料分配于水(150ml)与etoac(150ml)之间。将水相用etoac(3x150ml)萃取，并将有机相合并并用na2so4干燥。将有机物过滤并在减压下浓缩至干。通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-40％etoac)纯化，得到6-氯-n-(4-氟-3-甲基-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺s47(1.407g,22％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.66(s,1h),8.06(s,1h),8.02(s,1h),7.56(s,1h),6.99(t,j＝9.1hz,1h),6.79(dd,j＝6.8,2.8hz,1h),6.72(dt,j＝7.9,3.7hz,1h),2.17(d,j＝2.0hz,3h)。esi-ms m/z计算值276.0578，实测值277.33[m+1]
+
。
[0901]
步骤2：1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲基-苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s48)
[0902]
将6-氯-n-(4-氟-3-甲基-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺s47(1.434g,4.923mmol)溶解于thf(30ml)中，置于n2氛围下，并冷却至0℃。一次性添加kotbu(611mg,5.445mmol)并搅拌约5分钟。在10分钟内滴加2,2-二甲基丙酰氯(700μl,5.689mmol)并在0℃下搅拌1小时。将混合物分配于水(500ml)与dcm(500ml)之间。收集有机相并蒸发溶剂。通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-50％etoac)纯化，得到1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲基-苯胺基)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s48(880mg,49％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.34(s,1h),7.94(s,1h),7.81(s,1h),7.12-7.03(m,2h),6.98(ddd,j＝8.3,4.4,2.9hz,1h),2.20(d,j＝1.9hz,3h),1.48(s,9h)。esi-ms m/z计算值360.11533，实测值361.1[m+1]
+
。
[0903]
步骤3：反式-4-[11-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-10-(4-氟-3-甲基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(79,ic-161)和顺式-4-[11-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-10-(4-氟-3-甲基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(80)
[0904]
向1-[6-氯-5-(4-氟-3-甲基-苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s48(100mg,0.2740mmol)和4-(4-氰基-3,3-二甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯c93(115mg,0.4138mmol)于1,4-二噁烷(1.6ml)中的溶液中添加n-环己基-n-甲基-环己胺(180μl,0.8404mmol)。将溶液用n2脱气15分钟。添加pd(t-bu3p)2(13mg,0.02544mmol)。将混合物加热至90℃持续过夜。在恢复时，形成一些产物，但混合物主要是起始材料。将混合物用n2脱气10分钟，然后添加pd(t-bu3p)2(14mg,0.02739mmol)。在约18小时内将混合物增加到110℃。在减压下将混合物浓缩至干，并将粗材料溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％tfa的水中的0-100％mecn)纯化，得到呈三氟乙酸盐形成的两种异构体的混合物的产物(82mg,44％)esi-ms m/z计算值571.30，实测值572.45[m+1]
+
，将其溶解于thf(2ml)和ipa(1ml)中。添加naoh(1.64ml的1m,1.64mmol)。将混合物加热至40℃持续4小时并然后在减压下浓缩至干并再溶解于少量水中。通过添加hcl(822μl的2m,1.644mmol)来中和混合物并在减压下将其浓缩至干。将粗材料溶解于少量dmso并加载到c18 rp柱上：通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[11-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-10-(4-氟-3-甲基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环
[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸79(4.7mg,3％)1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ13.14(s,1h),12.06(s,1h),7.99(s,1h),7.41-7.36(m,2h),7.34-7.27(m,2h),3.19-3.05(m,1h),3.02(s,2h),2.76(q,j＝12.3hz,2h),2.43-2.33(m,1h),2.30(s,3h),2.05(d,j＝12.1hz,2h),1.76(d,j＝12.7hz,2h),1.69-1.54(m,2h),1.36(d,j＝2.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值473.22272，实测值474.35[m+1]
+
以及顺式-4-[11-(2-氰基-1,1-二甲基-乙基)-10-(4-氟-3-甲基-苯基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸80(2.9mg,2％)1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ13.03(s,1h),12.05(s,1h),7.99(d,j＝1.1hz,1h),7.42-7.21(m,4h),3.07(s,1h),3.01(s,2h),2.79-2.64(m,3h),2.34-2.24(m,5h),1.74(d,j＝16.0hz,2h),1.59(d,j＝12.5hz,2h),1.42-1.32(m,6h)。esi-ms m/z计算值473.22272，实测值474.35[m+1]
+
。
[0905]
化合物81
[0906]
反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸
[0907]
[0908]
步骤1：6-氯-n-(3-氯-4-氟-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺(s49)
[0909]
将5-溴-6-氯-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶e c38(2.75g,11.83mmol)、二-叔丁基-[2-(2,4,6-tri异丙基苯基)苯基]磷烷(1g,2.355mmol)、2-甲基丙-2-酸钾(4g,35.65mmol)、3-氯-4-氟-苯胺(1.73g,11.88mmol)和t-butylxphos pd g4称量到40ml管中。添加2-甲基丙-2-醇(95ml)并在氮气氛围下在30℃下搅拌隔夜。将混合物用dcm(100ml)稀释并用100ml水洗涤。使有机物穿过相分离器，添加celite，并在减压下将混合物浓缩至干并在120g si金柱上纯化。硅胶梯度：通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-100％etoac)纯化，得到6-氯-n-(3-氯-4-氟-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺s49(1.9g,48％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.77(s,1h),8.17(s,1h),8.11(d,j＝1.3hz,1h),7.96(s,1h),7.22(t,j＝9.1hz,1h),6.91(dd,j＝6.4,2.8hz,1h),6.78(ddd,j＝9.0,4.0,2.8hz,1h)。esi-ms m/z计算值296.00317，实测值297.21[m+1]
+
。
[0910]
步骤2：1-[6-氯-5-(3-氯-4-氟-苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮(s50)
[0911]
将6-氯-n-(3-氯-4-氟-苯基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-胺s49(230mg,0.7378mmol)溶解于thf(5ml)中，置于n2氛围下，并冷却至0℃。一次性添加kot-bu(94mg,0.8377mmol)，并将反应搅拌约5分钟。在5分钟内滴加2,2-二甲基丙酰氯(110μl,0.8940mmol)于thf(2.5ml)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌30分钟。添加水(100ml)并然后将水层用dcm(100ml)萃取并使其穿过相分离器。添加celite并将其在减压下浓缩至干。通过硅胶色谱法(梯度：于庚烷中的0-25％etoac)纯化，得到1-[6-氯-5-(3-氯-4-氟-苯胺基)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s50(204mg,59％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.39(s,1h),8.14(s,1h),8.12(s,1h),7.32(t,j＝9.0hz,1h),7.21(dd,j＝6.6,2.6hz,1h),7.06(dt,j＝8.4,3.4hz,1h),1.48(s,9h)。esi-ms m/z计算值380.0607，实测值381.12[m+1]
+
。
[0912]
步骤3：反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(s51)
[0913]
将1-[6-氯-5-(3-氯-4-氟-苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s50(200mg,0.5129mmol)和反式-4-(3-羟基-3-甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯c104(188mg,0.8382mmol)溶解于1,4-二噁烷(3.2ml)中。添加n-环己基-n-甲基-环己胺(330μl,1.541mmol)，并将溶液用n2脱气15分钟。添加pd(t-bu3p)2(26mg,0.0509mmol)，并将混合物加热至90℃持续过夜。在减压下将混合物浓缩至干，并将粗材料溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％tfa的水中的0-100％mecn)纯化，得到呈三氟乙酸盐形式的反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s51(264mg,75％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.32(s,1h),7.72(dd,j＝6.7,2.5hz,1h),7.60-7.50(m,2h),7.39(dt,j＝7.9,3.5hz,1h),3.65(s,3h),3.38-3.24(m,1h),2.77(q,j＝12.0hz,2h),2.49-2.42(m,1h),2.12-2.01(m,2h),1.81-1.71(m,2h),1.53(d,j＝7.2hz,17h)。esi-ms m/z计算值568.2253，实测值569.39[m+1]
+
。
[0914]
步骤4：反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙烯基-2,4,5,10-四氮杂三环
[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(s52)
[0915]
将反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s51(260mg,0.3796mmol)溶解于dce(10ml)中，并添加tfa(1.5ml,19.47mmol)。将反应在n2氛围下加热至80℃持续过夜。将粗反应在减压下浓缩至干并溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％tfa的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙烯基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s52(137mg,62％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.26(s,1h),8.08(s,1h),7.89(s,1h),7.82(dd,j＝6.7,2.6hz,1h),7.63(t,j＝9.0hz,1h),7.51(ddd,j＝8.8,4.3,2.6hz,1h),5.55(t,j＝1.8hz,1h),5.31-5.24(m,1h),3.63(s,3h),2.93-2.81(m,1h),2.48-2.37(m,3h),2.12-2.02(m,2h),1.85-1.77(m,2h),1.74(s,3h),1.55-1.40(m,2h)。esi-ms m/z计算值466.1572，实测值467.29[m+1]
+
。
[0916]
步骤5：反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(s53)
[0917]
将pto2(28mg,0.1233mmol)添加到圆底烧瓶中并置于n2氛围下。将反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙烯基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s52(108mg,0.1856mmol)于甲醇(25ml)中的溶液添加到系统中。将系统抽真空并用n2再填充3x，然后用h2再填充3x(气球)。将反应在室温下在气球氢气氛围下搅拌过夜。然后将系统抽真空并用n2再填充。通过celite垫过滤溶液，并将其用甲醇洗涤。将甲醇溶液在减压下浓缩至干并溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s53(66mg,75％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.13(s,1h),8.00(d,j＝1.4hz,1h),7.86(dd,j＝6.7,2.6hz,1h),7.67(t,j＝8.9hz,1h),7.57(s,1h),7.50(ddd,j＝8.7,4.3,2.6hz,1h),3.64(s,3h),3.07-2.96(m,2h),2.63-2.55(m,2h),2.47-2.39(m,1h),2.14-2.03(m,2h),1.85-1.74(m,2h),1.64-1.50(m,2h),1.32(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值468.17282，实测值469.31[m+1]
+
。
[0918]
步骤6：反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(81)
[0919]
向反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s53(65mg,0.1386mmol)于thf(1.3ml)和ipa(650μl)中的溶液中添加naoh(832μl的1m,0.8320mmol)。将混合物加热至50℃持续75分钟。在减压下移除溶剂，并通过添加hcl(416μl的2m,0.8320mmol)来中和粗材料。在减压下移除溶剂并将粗材料溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸81(44.2mg,70％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.13(s,1h),12.09(s,1h),8.00(s,1h),7.86(dd,j＝6.7,2.4hz,1h),7.67(t,j＝8.9hz,1h),7.57(s,1h),7.51(dt,j＝7.8,3.5hz,1h),3.07-2.92(m,2h),2.58(q,j＝9.5,6.3hz,2h),2.41-2.30(m,1h),2.12-2.01(m,2h),1.77
(d,j＝12.9hz,2h),1.59-1.45(m,2h),1.32(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值454.1572，实测值455.32[m+1]
+
。
[0920]
化合物82(也公开为化合物ia-171)
[0921]
反式-4-[10-(4-氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸
[0922][0923]
将氢氧化钯碳(24mg的20％w/w,0.03418mmol)添加到管中并置于n2氛围下。添加反式-4-[10-(3-氯-4-氟-苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸81(15mg,0.03270mmol)于甲醇(2.5ml)中的溶液，并将系统抽真空并用n2再填充3x，随后用h2再填充3x(气球)。将反应在室温下搅拌5小时。观察到起始材料和所需产物。将系统抽真空并用n2再填充，添加dcm，并通过celite垫过滤混合物。在减压下蒸发有机物。将氢氧化钯碳(23mg的20％w/w,0.03276mmol)添加到含有反应混合物的管中并置于n2氛围下。添加甲醇(2.5ml)，并将系统抽真空并用n2再填充3x，随后用h2再填充3x(气球)。将反应在室温下在氢气球氛围下搅拌4小时。将系统抽真空并用n2再填充。添加dcm，并然后通过celite垫过滤混合物。在减压下蒸发滤液并将其溶解于少量dmso中。c18 rp柱：通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[10-(4-氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸82(4.1mg,30％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ13.10(s,1h),12.13(s,1h),7.99(s,1h),7.60-7.38(m,5h),3.06-2.92(m,2h),2.67-2.54(m,2h),2.42-2.27(m,1h),2.13-2.01(m,2h),1.84-1.72(m,2h),1.53(q,j＝12.9hz,2h),1.31(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值420.19617，实测值421.35[m+1]
+
。
[0924]
化合物83(也公开为化合物33和化合物ia-166)
[0925]
反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸
[0926][0927]
步骤1：反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(s54)
[0928]
将1-[6-氯-5-(3,4-二氟苯胺)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-基]-2,2-二甲基-丙-1-酮s45(260mg,0.7128mmol)和反式-4-(3-羟基-3-甲基-丁-1-炔基)环己烷羧酸甲酯c104(215mg,0.9586mmol)溶解于1,4-二噁烷(3.6ml)和n-环己基-n-甲基-环己胺(460μl,2.148mmol)中。将溶液用n2脱气10分钟，随后添加pd(t-bu3p)2(40mg,0.07827mmol)。将反应加热至90℃持续90分钟。将反应冷却至室温，并将混合物分配于水(25ml)与dcm(25ml)之间。使混合物穿过相分离器，并收集有机相并将其在减压下蒸发。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s54(237mg,59％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.31(s,1h),7.65-7.54(m,2h),7.52(s,1h),7.24(dq,j＝10.4,3.2,2.5hz,1h),5.16(s,1h),3.65(s,3h),3.41-3.27(m,1h),2.83-2.68(m,2h),2.48-2.40(m,1h),2.12-2.00(m,2h),1.74(d,j＝12.9hz,2h),1.58-1.44(m,17h)。esi-ms m/z计算值552.2548，实测值553.6[m+1]
+
。
[0929]
步骤2：反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙烯基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(s55)
[0930]
将反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-4-(2,2-二甲基丙酰基)-11-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1(9),2,5,7,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s54(233mg,0.4123mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(4.2ml)中，并滴加tfa(800μl,10.38mmol)。将反应加热至80℃持续约18小时。将反应冷却至室温并通过添加饱和nahco3来中和。使混合物穿过相分离器，并收集有机相并在减压下浓缩至干。将粗材料溶解于少量dmso中并装载到c18柱上。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙烯基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s55(149mg,79％)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ10.51(s,1h),8.05(s,1h),7.73(s,1h),7.32(dt,j＝9.8,8.6hz,1h),7.25-7.21(m,1h),7.19-7.13(m,1h),5.50(p,j＝1.6hz,1h),5.25(dd,j＝1.9,1.0hz,1h),3.71(s,3h),2.96(tt,j＝12.2,3.6hz,1h),2.65-2.46(m,3h),2.14(dd,j＝13.7,3.5hz,2h),1.85(dd,j＝13.6,3.5hz,2h),1.74(dd,j＝1.5,0.9hz,3h),1.62(qd,j＝13.2,3.5hz,2h)。esi-ms m/z计算值450.18674，实测值451.22[m+1]
+
。
[0931]
步骤3：反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯(s56)
[0932]
在n2氛围下将反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙烯基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s55(145mg,0.3187mmol)溶解于meoh(8ml)和thf(4ml)中，并经由注射器将所述溶液添加到含有氢氧化钯碳(309mg的20％w/w,0.4401mmol)的管中。将系统抽真空并用n2再填充3x，随后用h2再填充(气球)。将反应在室温下搅拌90分钟。将h2氛围抽真空并用n2再填充，通过celite垫过滤溶液。将滤液蒸发，并将所得固体用庚烷研磨。在真空下干燥剩余的固体，以得到反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s56(132mg,92％)，esi-ms m/z计算值452.2024，实测值453.2[m+1]
+
。
[0933]
步骤4：反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸(83,ia-166)
[0934]
向反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸甲酯s56(125mg,0.2762mmol)于thf(4ml)和meoh(2ml)中的溶液中添加naoh(1.66ml的1m,1.660mmol)。将溶液加热至50℃持续90分钟，在此时间之后，通过lc/ms确认反应完成。将溶剂蒸发，并通过添加hcl(1.66ml的1m,1.660mmol)来中和粗材料。将溶剂蒸发，并将粗材料溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：于具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羧酸83(70.4mg,57％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.02(s,1h),7.60-7.51(m,2h),7.45(ddd,j＝10.9,7.1,2.5hz,1h),7.26(ddt,j＝8.4,4.0,2.1hz,1h),3.20-3.00(m,2h),2.74(qd,j＝13.1,3.5hz,2h),2.61-2.49(m,1h),2.19(d,j＝13.0hz,2h),1.95-1.81(m,2h),1.64(qd,j＝13.2,3.6hz,2h),1.41(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值438.18674，实测值439.29[m+1]
+
。
[0935]
化合物84-91
[0936]
化合物84-91(表4)经由与化合物83相同的方法制备。
[0937]
表4.化合物84-91的结构、物理化学数据
[0938]
[0939]
[0940][0941]
化合物92(也公开为化合物ia-126)
[0942]
反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸
基]环己烷羧酸甲酯s58(431mg,46％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.92(d,j＝1.0hz,1h),7.77(s,1h),7.47-7.37(m,1h),7.33-7.26(m,1h),7.16-7.10(m,1h),6.97(s,1h),3.71(s,3h),3.67-3.58(m,1h),2.66-2.57(m,1h),2.34(q,j＝13.4,11.7hz,2h),2.17(d,j＝11.4hz,2h),1.96(d,j＝13.7hz,2h),1.70-1.60(m,2h),1.53(d,j＝11.3hz,6h)。esi-ms m/z计算值467.20206，实测值68.37[m+1]
+
。
[0948]
步骤3：反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙烯基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(s59)
[0949]
将反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯s58(431mg,0.9219mmol)溶解于dcm(8.4ml)中并冷却至0℃。添加2,2,2-三氟乙酸(212μl,2.752mmol)并将混合物搅拌2小时。添加nahco3饱和水溶液和dcm，并通过相分离器收集有机层。将有机物在减压下浓缩至干。通过正相色谱法(0-60％etoac/庚烷)纯化，得到反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙烯基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯s59(265mg,46％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.00(d,j＝1.0hz,1h),7.79(s,1h),7.47-7.44(m,2h),7.42-7.35(m,1h),7.29-7.23(m,1h),5.52-5.48(m,1h),5.24(s,1h),3.70(s,3h),3.03-2.97(m,1h),2.60-2.54(m,1h),2.32-2.21(m,3h),2.19-2.11(m,2h),1.95-1.88(m,2h),1.67-1.53(m,3h),1.29(s,1h)。esi-ms m/z计算值449.1915，实测值450.32[m+1]
+
。
[0950]
步骤4：反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯(s60)
[0951]
在n2氛围下将反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙烯基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯s59(265mg,0.4248mmol)悬浮于meoh(10ml)中的溶液添加到湿润的氢氧化钯碳(118mg,20％w/w,0.1681mmol)。将系统抽真空并用n2再填充3x，随后用h2再填充3x。将反应在室温下搅拌3小时。将系统抽真空并用n2再填充，并然后通过celite垫过滤溶液。在减压下蒸发滤液并将其再溶解于少量dmso中。通过反相色谱法(柱：c18.梯度：具有0.1％甲酸的水中的0-100％mecn)纯化，得到反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯s60(66mg,32％)。esi ms m/z计算值451.20712，实测值452.35[m+1]
+
。
[0952]
步骤5：反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸(92,ia-126)
[0953]
向含有反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸甲酯s60(66mg,0.1462mmol)的管中添加thf(1.8ml)和meoh(801μl)。然后添加氢氧化钠水溶液(871μl的1m,0.8710mmol)，并将混合物在50℃下加热1小时。在减压下移除溶剂。通过反相色谱法(acn/水+0.2％fa)纯化，以得到反式-4-[5-(3,4-二氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]环己烷羧酸92(31.3mg,48％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.52(s,1h),12.17(s,1h),7.95(s,1h),7.72-7.63(m,3h),7.32-7.26(m,1h),7.10(s,1h),3.08-3.00(m,1h),2.98-2.91(m,1h),2.26-2.05(m,5h),1.82(d,j＝12.9hz,2h),1.61-1.50(m,2h),1.29(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值437.1915，实测值438.31[m+1]
+
。
[0954]
化合物93
[0955]
(2s,3s,4s,5r)-6-[3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酰氧基]-3,4,5-三羟基-四氢吡喃-2-甲酸
[0956][0957]
步骤1：3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸(s61)
[0958]
将3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸甲酯c58(35.75g,91.42mmol)溶解于thf(336ml)中。添加甲醇(336ml)。添加lioh水溶液(183ml的2.5m,457.5mmol)。将反应在室温下搅拌一小时。将反应的体积在减压下减小至约400ml。将反应用400ml 1m naoh稀释。将水层用dcm洗涤两次(500ml)。合并的dcm层不含有所需产物并且去除一些杂质。丢弃合并的dcm层。将水层用6n hcl酸化，直到ph 3-4，并将其用800ml etoac萃取两次。将萃取物用硫酸钠干燥，过滤，并在真空中蒸发。在硅胶330g柱上纯化此材料。将粗材料装载到dcm中的柱上并用dcm中的0-10％甲醇洗脱。将所需级分合并并在减压下浓缩至干，得到泡沫。将所述泡沫用少量etoac再稀释并超声处理几分钟。将混合物在环境温度下静置5分钟。过滤沉淀物并然后将其用额外etoac洗涤，以得到均匀的灰白色固体。在高真空下在炉中在40℃下干燥固体过夜，以得到3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸s61(40.2g,66％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ12.57(s,1h),12.22(s,1h),7.94(d,j＝1.0hz,1h),7.52-7.39(m,5h),7.00(d,j＝1.1hz,1h),3.13(dd,j＝9.5,6.6hz,2h),3.02(p,j＝7.2hz,1h),2.63-2.53(m,2h),1.25(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值365.15396，实测值366.19[m+1]
+
。
[0959]
步骤2：(2s,3s,4s,5r)-6-[3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酰氧基]-3,4,5-三羟基-四氢吡喃-2-甲酸烯丙酯(s62)
[0960]
将3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酸s61(2.09g,5.665mmol)、(2s,3s,4s,5r)-3,4,5,6-四羟基四氢吡喃-2-甲酸烯丙酯(1.33g,5.679mmol)
和hatu(2.16g,5.68mmol)称量到装备有搅拌棒的圆底烧瓶中。添加乙腈(55ml)，随后添加nmm(1.25ml,11.3mmol)。将混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用dcm稀释并用50％饱和碳酸氢钠洗涤。使混合物穿过相分离器并在减压下浓缩至干。将粗材料用dcm稀释并装载到120g si金柱上。将所述柱用dcm中的0-10％甲醇洗脱。将所需级分合并并在减压下浓缩，以得到(2s,3s,4s,5r)-6-[3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酰氧基]-3,4,5-三羟基-四氢吡喃-2-甲酸烯丙酯s62(570mg,17％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.63-12.54(m,1h),7.95(t,j＝1.3hz,1h),7.52(d,j＝1.1hz,1h),7.50-7.40(m,4h),7.01(d,j＝1.0hz,1h),5.98-5.86(m,1h),5.53(d,j＝8.1hz,1h),5.46(dd,j＝10.6,5.4hz,2h),5.35(dq,j＝17.3,1.7hz,1h),5.29(d,j＝5.2hz,1h),5.23(dq,j＝10.5,1.4hz,1h),4.63(dq,j＝5.5,1.5hz,2h),3.98(d,j＝9.3hz,1h),3.57(t,j＝4.7hz,3h),3.44-3.33(m,2h),3.28-3.20(m,1h),3.20-3.12(m,2h),3.03(p,j＝7.1hz,1h),2.81-2.65(m,2h),1.24(d,j＝7.2hz,6h)。esi-ms m/z计算值581.21735，实测值582.32[m+1]
+
。
[0961]
步骤3：(2s,3s,4s,5r)-6-[3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酰氧基]-3,4,5-三羟基-四氢吡喃-2-甲酸(93)
[0962]
在室温下向(2s,3s,4s,5r)-6-[3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酰氧基]-3,4,5-三羟基-四氢吡喃-2-甲酸烯丙酯s62(568mg,0.9384mmol)于dcm(45ml)中的溶液中添加吗啉(175μl,2.007mmol)。混合物并不处于溶液中。添加thf(6ml)，并将混合物搅拌15分钟。观察到澄清溶液。将混合物用氮气鼓泡5分钟，然后添加ps-pph
3-pd(780mg的0.11mmol/g,0.0858mmol)。将混合物搅拌4小时，过滤，并在减压下浓缩至干。将粗材料用dmso(5ml)和几滴甲醇稀释。将混合物注入在c18 240g柱上并用具有甲酸改性剂的水中的10-50％乙腈洗脱。将级分冷冻干燥，以得到(2s,3s,4s,5r)-6-[3-[5-(4-氟苯基)-6-异丙基-1h-吡咯并[2,3-f]吲唑-7-基]丙酰氧基]-3,4,5-三羟基-四氢吡喃-2-甲酸93(234.7mg,45％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.88(s,1h),12.58(s,1h),7.95(d,j＝1.0hz,1h),7.52(t,j＝1.1hz,1h),7.50-7.39(m,4h),7.01(d,j＝1.1hz,1h),5.48(d,j＝8.1hz,1h),5.43(d,j＝5.0hz,1h),5.40-5.22(m,2h),3.79(d,j＝9.4hz,1h),3.41-3.34(m,2h),3.26-3.12(m,3h),3.03(p,j＝7.1hz,1h),2.80-2.70(m,2h),1.25(d,j＝7.1hz,6h)。esi-ms m/z计算值541.18604，实测值542.31[m+1]
+
。
[0963]
化合物94和95
[0964]
化合物94和95(表5)经由与化合物93相同的方法制备。
[0965]
表5.化合物94和95的结构、物理化学数据
[0966][0967]
化合物96
[0968]
(2s,3s,4s,5r)-6-[4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羰基]氧基-3,4,5-三羟基-四氢吡喃-2-甲酸
四氢吡喃-2-甲酸(96)
[0973]
在环境温度下向(2s,3s,4s,5r)-6-[4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羰基]氧基-3,4,5-三羟基-四氢吡喃-2-甲酸烯丙酯s63(90mg,0.07799mmol)于dcm(3.2ml)中的溶液中添加吗啉(14μl,0.1605mmol)。将溶液用n2鼓泡5分钟，然后添加pd(pph3)4(3mg,0.002596mmol)并搅拌2小时。将反应混合物过滤并在减压下浓缩至干。将粗材料用dmso(2ml)和几滴甲醇稀释。将混合物注入在c18aq 50g柱上并用具有甲酸改性剂的水中的10-100％acn洗脱。将所需级分浓缩至干，以得到(2s,3s,4s,5r)-6-[4-[10-(3,4-二氟苯基)-11-异丙基-2,4,5,10-四氮杂三环[7.3.0.03,7]十二碳-1,3(7),5,8,11-戊烯-12-基]环己烷羰基]氧基-3,4,5-三羟基-四氢吡喃-2-甲酸96(42.7mg,87％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.00(s,1h),7.57-7.48(m,2h),7.46-7.38(m,1h),7.26-7.20(m,1h),5.57-5.50(m,1h),3.92(d,j＝9.7hz,1h),3.57(t,j＝9.1hz,1h),3.51-3.40(m,2h),3.15-3.03(m,2h),2.78-2.60(m,3h),2.27-2.17(m,2h),1.86(d,j＝13.0hz,2h),1.65(q,j＝13.1,12.2hz,2h),1.41-1.36(m,6h)。esi-ms m/z计算值614.2188，实测值615.57[m+1]
+
。
[0974]
实施例2：用于检测和测量化合物的aat调节剂性质的测定
[0975]
a.aat功能测定(msd测定nl20-si细胞系)
[0976]
α-1抗胰蛋白酶(aat)是通过与酶共价结合而使酶灭活的serpin(丝氨酸蛋白酶抑制剂)。通过测定aat与人中性粒细胞弹性蛋白酶(hne)形成不可逆复合物的能力，该测定测量了在公开的化合物1-46和74-96存在下样品中功能活性aat的量。在实践中，将样品(细胞上清液、血液样品或其他)与过量的hne一起温育，以使得能够与样品中的所有功能性aat形成aat-弹性蛋白酶复合物。然后将该复合物捕获到涂覆有抗aat抗体的微孔板上。用标记的抗弹性蛋白酶抗体检测捕获到板上的复合物，并使用跨越样品中存在的浓度范围的一组aat标准品进行定量。使用meso scale discovery(msd)板阅读器、磺基标签标记和微孔板来提供高灵敏度和宽动态范围。
[0977]
材料：
[0978]
[0979][0980]
仪器：
[0981]
meso sector s600
[0982]
bravo
[0983]
洗涤器分配器
[0984]
multidrop combi
[0985]
测定方案
[0986]
第1天细胞培养
[0987]
1.收获在含有pen/strep(p/s)的optimem
tm
中表达人z-aat的nl20人支气管上皮细胞。
[0988]
2.在30μl中以16,000个细胞/孔接种(384孔板)。
[0989]
3.将板离心短暂加速(1200rpm)并置于37℃培养箱中过夜。
[0990]
第2天：化合物添加和用捕获抗体涂覆板
[0991]
化合物添加：
[0992]
1.在通风柜中使用multidrop combi将40μl具有多西环素(1:1000原液＝0.1μm最终)的optimem
tm
(p/s)分配到化合物板的每个孔中。
[0993]
2.从培养箱中取出细胞板，翻转/吸干并立即带到bravo以转移化合物。
[0994]
3.将板放回培养箱中过夜。
[0995]
涂覆msd板
[0996]
1.将捕获抗体(多克隆山羊抗aat)以pbs(无bsa)稀释至5μg/ml(1:200)。
[0997]
2.使用装备有标准盒的multidrop将25μl稀释的捕获抗体分配到msd 384-孔高结合板的所有孔中。
[0998]
3.在4℃下孵育过夜
[0999]
制备封闭剂a(bsa)溶液
[1000]
1.遵循制造商的说明来制备5％msd封闭剂a(bsa)溶液。
[1001]
2.根据需要，将pbs中的5％msd封闭剂a进一步稀释至1％(封闭剂a)。
[1002]
第3天：运行msd测定
[1003]
封闭板
[1004]
1.用50μl洗涤缓冲液(pbs+0.5％tween 20)洗涤板1x，并添加35μl5％封闭剂a缓
冲液以封闭在洗涤器分配器上的非特异性结合。
[1005]
2.在振动器上将板以600rpm旋转1小时。
[1006]
准备m-aat标准品
[1007]
1.把m-aat原液以1％bsa封闭剂a(储存在-70℃下)稀释到1.6μg/ml；然后以1％封闭剂a制备12x1:2系列稀释液。
[1008]
2.msd板上的最高起始终浓度为320ng/ml。这些稀释度对应于320、160、80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156ng/ml的浓度。
[1009]
稀释板
[1010]
1.使用multidrop combi将80μl的1％测定缓冲液添加到除了第1/24列(标准品)的所有孔。
[1011]
2.向第1列和第24列中添加稀释的标准品。
[1012]
3.将稀释板1200rpm短暂离心。
[1013]
细胞板
[1014]
1.在通风柜中使用16针抽吸器从细胞板上抽吸含有标准品的列。
[1015]
制备人中性粒细胞弹性蛋白酶(hne)
[1016]
1.通过在1％封闭剂a中稀释来制备1μg/ml人中性粒细胞弹性蛋白酶。
[1017]
a.小100μg管
–
添加1ml pbs(100μg/ml)
[1018]
i.然后可以将此在1％测定缓冲液中1:100稀释至最终1μg/ml浓度。
[1019]
msd-添加hne(20μl/孔)
[1020]
1.在将msd板封闭至少1小时后，用50μl洗涤缓冲液(pbs+0.5％tween 20)洗涤板1x并且然后将20μl hne添加到每个孔中。
[1021]
bravo
–
细胞板
–
稀释板
–
msd板
[1022]
使用bravo从细胞板抽吸10μl，将其转移到稀释板(9倍稀释)
[1023]
1.混合25μl 3x，然后抽吸5μl，转移到msd板(5倍稀释)。
[1024]
2.混合10μl 3x。总稀释度为45倍。
[1025]
3.将板以600rpm振摇1.5小时。
[1026]
添加功能检测hne抗体
[1027]
1.用洗涤缓冲液洗涤板1x。
[1028]
2.使用洗涤器/分配器将在1％封闭剂a中稀释至0.45μg/ml(1:2000)的25μl磺基标记的抗弹性蛋白酶(单克隆小鼠抗弹性蛋白酶)添加到功能活性msd板的所有孔中。
[1029]
注意：必须确定每批新的标记抗体的足够信号所需的稀释度。
[1030]
3.在室温下孵育，在600rpm下振摇1小时。
[1031]
最终洗涤和msd成像仪读数
[1032]
1.将板洗涤1x，并将25μl洗涤缓冲液添加到板中。
[1033]
2.制备2x读取缓冲液。
[1034]
3.从msd板上移除洗涤缓冲液。
[1035]
4.使用bravo将35μl 2x读取缓冲液转移到msd板中，并立即对msd进行读取。
[1036]
msd discovery workbench 4.0软件中的数据分析和ec
50
值使用genedata确定。数据参见表6。
[1037]
b.生化分析(z-aat弹性蛋白酶活性测定)
[1038]
该测定使用纯化的z-aat和纯化的人中性粒细胞弹性蛋白酶(hne)测量了化合物1-46和74-96对z-aat serpin活性的调节。通常，当活性单体z-aat遇到蛋白酶诸如胰蛋白酶或弹性蛋白酶时，它形成1:1共价“自杀”复合物，其中aat和蛋白酶都不可逆地被灭活。然而，化合物与z-aat结合可导致serpin活性降低。在此类情况下，当蛋白酶遇到化合物结合的z-aat时，所述蛋白酶切割并灭活z-aat，而其本身没有被灭活。
[1039]
材料
[1040]
试剂
[1041]
pbs缓冲液(培养基配制)+0.01％brij35洗涤剂(calbiochem目录号203728)
[1042]
opti-mem培养基(fisher 11058-021)
[1043]
人中性粒细胞弹性蛋白酶(hne，athens research#16-14-051200)
[1044]
以50mm乙酸钠、ph 5.5、150mm nacl制备的3.4μm原液(0.1mg/ml)，储存在-80℃下
[1045]
弹性蛋白酶底物v(es v，荧光肽底物meosuc-ala-ala-pro-val-amc，calbiochem目录号324740)
[1046]
dmso中的20mm原液，储存在-20℃下
[1047]
从人血浆中纯化的z-aat蛋白；
[1048]
来自患者#061-ssn的12.9μm(0.67mg/ml)z-aat vertex cambridge样品4942，储存在-80℃下
[1049]
板
[1050]
corning 4511(384孔黑色低容量)
[1051]
仪器
[1052]
envision
tm
[1053]
测定方案
[1054]
z-aat与化合物的预孵育
[1055]
1.将7.5μl的z-aat(20nm)与化合物1-46和74-96在gca板中在室温下孵育1小时。
[1056]
hne的添加
[1057]
1.将7.5ul hne溶液(在pbs+0.01％brij35中的3nm)添加到gca板中。
[1058]
2.将板孵育30分钟以允许z-aat/hne自杀复合物形成。
[1059]
在pe envision上添加底物并读取板
[1060]
1.将7.5μl底物(在pbs+0.01％brij35中的弹性蛋白酶底物(es v)的300μm溶液)分配到gca板的每个孔中。
[1061]
2.立即在envision上读取。
[1062]
c.化合物1-46和74-96的ec50和z-aat弹性蛋白酶活性数据
[1063]
式i化合物可用作aat活性的调节剂。下表6示出了使用上文部分a中描述的程序得到的化合物1-46和74-96的ec
50
)。下表6还提供了使用上文部分b中描述的程序得到的z-aat弹性蛋白酶活性。在下表6中，下列含义适用：对于ec
50
和ic
50
：“+++”表示《1.16μm；“++”意指在1.16μm与3.0μm之间；“+”意指大于3.0μm；“n/a”意指活性未评估。对于ic
50
，“n.d.”意指在30
·
m未检测到活性。
[1064]
表6：化合物1-46和74-96的ec50和ic50数据
[1065]
[1066][1067]
其他实施方案
[1068]
该描述仅提供本公开的示例性实施方案。本领域技术人员将从本公开和从所附权利要求书中容易地认识到，在不脱离如以下权利要求书中限定的本公开的精神和范围的情况下，可在其中进行各种改变、修改和变化。