免疫活化Fc结构域结合分子的制作方法

本发明整体上涉及用于活化免疫细胞和重定向至特定靶细胞的新型免疫活化fc结构域结合分子。此外，本发明涉及编码此类分子的多核苷酸，以及包含此类多核苷酸的载体和宿主细胞。本发明进一步涉及用于产生本发明的双特异性抗原结合分子的方法，以及使用这些双特异性抗原结合分子治疗疾病的方法。

背景技术：

1、在多种临床环境中，通常需要选择性摧毁单个细胞或特定细胞类型。例如，癌症疗法的主要目标是特异性地摧毁肿瘤细胞，同时保持健康细胞和组织完好无损，或摧毁由特定表面抗原鉴定的某些细胞亚群。

2、实现这一目标的一种有吸引力的方法是通过募集免疫效应细胞(诸如自然杀伤(nk)细胞、单核细胞/巨噬细胞或细胞毒性t淋巴细胞(ctl))来攻击和摧毁肿瘤细胞，从而诱导针对目标细胞的免疫应答。

3、诱导免疫效应细胞介导的靶细胞杀伤或消耗的一种方法是抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)或抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcp)，经由igg1同种型的adcc感受态抗体以及具有增强的adcc效应子功能的抗体进行(zahavi等人，antibodytherapeutics,1,7-12(2018))。替代性地，可以经由(t细胞)双特异性抗体募集t细胞以杀伤靶细胞，该抗体经设计为与靶细胞上的表面抗原结合，并具有与t细胞受体(tcr)复合物的活化、不变组分结合的第二结合部分(clynes和desjarlais，annu rev med 70:427-450(2019))。已经开发了几种双特异性形式，包括bite(双特异性t细胞接合物)(nagorsen和expcell res 317,1255-1260(2011))双体(holliger等人，prot eng 9,299-305(1996))，dart(双亲和力重定向)(moore等人，blood 117,4542-51(2011))或所谓2+1 t细胞双特异性抗体(tcb)(bacac等人，clin cancer res 24,4785-4797(2018))，并研究了它们对t细胞介导的免疫疗法的适用性。

4、正在开发的多种形式显示了免疫细胞重定向和活化在免疫疗法中的巨大潜力。迄今为止，开发的双特异性抗体总是直接与所需的目标抗原接合，从而将靶细胞与ctl连接起来，导致靶细胞裂解。这些双特异性抗体形式面临着与毒性、适用性和可生产性相关的挑战。此外，对于每个单靶(组合)，需要生成对每个靶具有特异性的单个分子。抗体及其衍生物的治疗效用不仅限于作为t细胞接合物的功能，还可以在抑制性或活化性检查点的调节中找到指示。示例性地，使用免疫检查点抑制抗体在几种适应症中显示出持久的应答(hodie等人n engl j med.；363(8):711-23.(2010)；prieto pa,等人clin cancer res.；18:2039–2047(2012))。此外，最近，已经表明t细胞双特异性抗体的活性可以通过双特异性药物来进一步增强，该双特异性药物经由cd28(skokos等人，sci trans med 12(525):1-14(2020))或4-1bb信号传导(claus等人，sci trans med 11(496),eaav5989(2019))的活化来活化t细胞上的所谓共刺激途径。

5、除了目前的成功之外，疗法在靶向多种不同抗原的灵活性方面受到限制，并且在一种应用中选择性地利用nk或ctl功能的能力方面也受到限制。

技术实现思路

1、本文提供一种免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其包含

2、(a)fc结构域结合部分，其与包含第一组至少一个氨基酸取代的靶fc结构域特异性地结合，和

3、(b)免疫活化部分。

4、在一个实施例中，第一组至少一个氨基酸取代降低与fc受体的结合且/或降低效应子功能。

5、在一个实施例中，免疫活化fc结构域结合分子进一步包含

6、(c)延长半衰期的fc结构域，

7、其中fc结构域结合部分不与延长半衰期的fc结构域特异性地结合。

8、在一个实施例中，延长半衰期的fc结构域包含第二组至少一个氨基。在一个实施例中，第二组至少一个氨基酸取代降低与fc的结合。在一个实施例中，靶fc结构域和/或延长半衰期的fc结构域由能够稳定缔合的第一亚基和第二亚基组成。

9、在一个实施例中，靶fc结构域和/或延长半衰期的fc结构域是igg fc结构域，特别是igg1或igg4 fc结构域。

10、在一个实施例中，与天然igg1 fc结构域相比，靶fc结构域表现出降低的与fc受体的结合亲和力和/或降低的效应子功能。

11、在一个实施例中，与天然igg1 fc结构域相比，延长半衰期的fc结构域表现出降低的与fc受体的结合亲和力和/或降低的效应子功能。

12、在一个实施例中，第一组至少一个氨基酸取代降低与fc受体的结合亲和力和/或效应子功能，并且其中第二组至少一个氨基酸取代包括在与第一组至少一个氨基酸取代相同的氨基酸位置处的一个或多个氨基酸取代，其中与第一组至少一个氨基酸取代相比，第二组至少一个氨基酸取代中的氨基酸在相同的位置处被不同的氨基酸取代。

13、在一个实施例中，第二组至少一个氨基酸取代降低与fc受体的结合亲和力和/或效应子功能。

14、在一个实施例中，第一组至少一个氨基酸取代包括在选自由233、234、235、238、253、265、269、270、297、310、331、327、329和435(根据kabat eu索引编号)组成的列表的位置处的至少一个氨基酸取代。

15、在一个实施例中，第二组至少一个氨基酸取代包括在选自由233、234、235、238、253、265、269、270、297、310、331、327、329和435(根据kabat eu索引编号)组成的列表的位置处的至少一个氨基酸取代。

16、在一个实施例中，第一组至少一个氨基酸取代包括氨基酸取代p329g(根据kabateu索引编号)，并且其中第二组至少一个氨基酸取代包括在位置p329(根据kabat eu索引编号)处由除甘氨酸(g)以外的氨基酸进行的取代。

17、在一个实施例中，第二组至少一个氨基酸取代包括在位置p329(根据kabat eu索引编号)处由选自由精氨酸(r)、亮氨酸(l)、异亮氨酸(i)和丙氨酸(a)组成的列表的氨基酸进行的取代。

18、在一个实施例中，第二组至少一个氨基酸取代包括在位置p329(根据kabat eu索引编号)处由精氨酸(r)进行的取代。

技术特征：

1.一种免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其包含

2.根据权利要求1所述的免疫活化fc结构域结合分子，其进一步包含(c)延长半衰期的fc，

3.根据权利要求1或2所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述延长半衰期的fc结构域包含第二组至少一个氨基酸取代。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第一组至少一个氨基酸取代降低与fc受体的结合亲和力和/或效应子功能，并且其中所述第二组至少一个氨基酸取代包括在与所述第一组至少一个氨基酸取代相同的氨基酸位置处的一个或多个氨基酸取代，其中与所述第一组至少一个氨基酸取代相比，所述第二组至少一个氨基酸取代中的氨基酸在相同的位置处被不同的氨基酸取代。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第一组至少一个氨基酸取代包括在选自由233、234、235、238、253、265、269、270、297、310、331、327、329和435(根据kabat eu索引编号)组成的列表的位置处的至少一个氨基酸取代。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第二组至少一个氨基酸取代包括在选自由233、234、235、238、253、265、269、270、297、310、331、327、329和435(根据kabat eu索引编号)组成的列表的位置处的至少一个氨基酸取代。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第一组至少一个氨基酸取代包括氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第一组至少一个氨基酸取代包括所述氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)，并且其中所述第二组至少一个氨基酸取代包括在位置p329(根据kabat eu索引编号)处由除甘氨酸(g)以外的氨基酸进行的取代。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第二组至少一个氨基酸取代包括在位置p329(根据kabat eu索引)处由选自由精氨酸(r)、亮氨酸(l)、异亮氨酸(i)和丙氨酸(a)组成的列表的氨基酸进行的取代。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第二组至少一个氨基酸取代包括在位置p329(根据kabat eu索引编号)处由精氨酸(r)进行的取代。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分能够与包含氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)的igg1 fc结构域特异性结合但不能够与亲本未突变的igg1 fc结构域特异性结合。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第一组至少一个氨基酸取代包括在选自l234、l235(根据kabat eu索引编号)的组的位置处的至少一个氨基酸取代。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第二组至少一个氨基酸取代包括在选自l234、l235(根据kabat eu索引编号)的组的位置处的至少一个氨基酸取代。

14.根据权利要求1至10中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述靶fc结构域包含三个氨基酸取代，所述氨基酸取代降低与活化fc受体的结合和/或效应子功能，其中所述氨基酸取代是l234a、l235a和p329g(kabat eu索引编号)。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述延长半衰期的fc结构域包含三个氨基酸取代，所述氨基酸取代降低与活化fc受体的结合和/或效应子功能，其中所述氨基酸取代是l234a、l235a和p329x(kabat eu索引编号)，其中x是除甘氨酸(g)以外的氨基酸。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分和/或所述免疫活化部分是fab分子。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分能够与包含所述氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)的igg1 fc结构域特异性结合，其中所述fc结构域结合部分包含：

18.根据权利要求17所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分能够与包含所述氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)的igg1 fc结构域特异性结合，其中所述fc结构域结合部分包含：

19.根据权利要求17所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分能够与包含所述氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)的igg1 fc结构域特异性结合，其中所述fc结构域结合部分包含：

20.根据权利要求17所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分能够与包含所述氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)的igg1 fc结构域特异性结合，其中所述fc结构域结合部分包含：

21.根据权利要求1至20中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分能够与包含所述氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)的igg1 fc结构域特异性结合，其中所述fc结构域结合部分包含：重链可变区序列，所述重链可变区序列与选自由seq id no：7、seq id no：12、seq id no：17和seq id no：19组成的组的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同；和轻链可变区序列，所述轻链可变区序列与选自由seq id no：8和seq id no：13组成的组的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。

22.根据权利要求21所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分能够与包含所述氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)的igg1 fc结构域特异性结合，其中所述fc结构域结合部分包含：

23.根据权利要求22所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分能够与包含所述氨基酸取代p329g(根据kabat eu索引编号)的igg1 fc结构域特异性结合，其中所述fc结构域结合部分包含seq id no：19的重链可变区序列和seq id no：13的轻链可变区序列。

24.根据权利要求1至23中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc结构域结合部分包含第一fab分子且所述免疫活化部分包含第二fab分子。

25.根据权利要求24所述的免疫活化fc结构域结合分子，其进一步包含

26.根据权利要求25所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述第三fab分子与所述第一fab分子相同。

27.根据权利要求1至26中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分能够与活化t细胞抗原特异性结合。

28.根据权利要求27所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述活化t细胞抗原是cd3。

29.根据权利要求27或28所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述活化t细胞抗原是cd3ε。

30.根据权利要求27至29中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分与活化t细胞抗原，特别是cd3，更特别是cd3ε特异性地结合。

31.根据权利要求27至30中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分是fab分子。

32.根据权利要求31所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述活化t细胞抗原是cd3，特别是cd3，且与所述活化t细胞抗原特异性地结合的所述fab分子包含seq id no：35的重链互补决定区(cdr)1、seq id no：37的重链cdr 2、seq id no：43的重链cdr 3、seq idno：53的轻链cdr 1、seq id no：54的轻链cdr 2和seq id no：55的轻链cdr 3。

33.根据权利要求31或32所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述活化t细胞抗原是cd3，特别是cd3，且与所述活化t细胞抗原特异性地结合的所述fab分子包含：重链可变区，所述重链可变区包含与seq id no：49的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列；和轻链可变区，所述轻链可变区包含与seq id no：56的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。

34.根据权利要求31所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述活化t细胞抗原是cd3，特别是cd3，且与所述活化t细胞抗原特异性地结合的所述fab分子包含seq id no：35的重链互补决定区(cdr)1、seq id no：33的重链cdr 2、seq id no：176的重链cdr 3、seqid no：53的轻链cdr 1、seq id no：54的轻链cdr 2和seq id no：55的轻链cdr 3。

35.根据权利要求31或34所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述活化t细胞抗原是cd3，特别是cd3，且与所述活化t细胞抗原特异性地结合的所述fab分子包含：重链可变区，所述重链可变区包含与seq id no：177的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列；和轻链可变区，所述轻链可变区包含与seq id no：56的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。

36.根据权利要求31所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述活化t细胞抗原是cd3，特别是cd3ε，且与所述活化t细胞抗原特异性地结合的所述fab分子包含seq id no：34的重链互补决定区(cdr)1、seq id no：37的重链cdr 2、seq id no：41的重链cdr 3、seq idno：53的轻链cdr 1、seq id no：54的轻链cdr 2和seq id no：55的轻链cdr 3。

37.根据权利要求31或36所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述活化t细胞抗原是cd3，特别是cd3ε，且与所述活化t细胞抗原特异性地结合的所述fab分子包含：重链可变区，所述重链可变区包含与seq id no：47的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列；和轻链可变区，所述轻链可变区包含与seq id no：56的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。

38.一种免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其包含：

39.一种免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其包含：

40.一种免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其包含：

41.根据权利要求1至26中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分能够与共刺激t细胞抗原特异性结合。

42.根据权利要求41所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述共刺激t细胞抗原是cd28。

43.根据权利要求41或42所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分与共刺激t细胞抗原特异性地结合。

44.根据权利要求41至43中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分与cd28特异性地结合。

45.根据权利要求41至44中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分是fab分子。

46.根据权利要求45所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中与cd28特异性地结合的所述fab分子包含seq id no：94的重链互补决定区(cdr)1、seq id no：95的重链cdr 2、seqid no：96的重链cdr 3、seq id no：97的轻链cdr 1、seq id no：98的轻链cdr2和seq idno：99的轻链cdr 3；或seq id no：94的重链互补决定区(cdr)1、seq id no：95的重链cdr2、seq id no：102的重链cdr 3、seq id no：103的轻链cdr 1、seq id no：98的轻链cdr 2和seq id no：99的轻链cdr 3。

47.根据权利要求45或46所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中与cd28特异性地结合的所述fab分子包含：重链可变区，所述重链可变区包含与seq id no：100的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，和轻链可变区，所述轻链可变区包含与seq id no：101的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列；或者重链可变区，所述重链可变区包含与seq id no：104的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，和轻链可变区，所述轻链可变区包含与seq id no：105的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。

48.根据权利要求1至26中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分能够与共刺激t细胞抗原特异性结合。

49.根据权利要求48所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述共刺激t细胞抗原是4-1bb。

50.根据权利要求48或49所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分与共刺激t细胞抗原特异性地结合。

51.根据权利要求48至50中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分与4-1bb特异性地结合。

52.根据权利要求48至51中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分是fab分子。

53.根据权利要求52所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中与4-1bb特异性地结合的所述fab分子包含seq id no：133的重链互补决定区(cdr)1、seq id no：134的重链cdr 2、seq id no：135的重链cdr 3、seq id no：136的轻链cdr 1、seq id no：137的轻链cdr 2和seq id no：138的轻链cdr 3。

54.根据权利要求52或53所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中与4-1bb特异性地结合的所述fab分子包含：重链可变区，所述重链可变区包含i)与seq id no：139的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列；和轻链可变区，所述轻链可变区包含与seq id no：140的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。

55.根据权利要求1至23中任一项所述的免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其中所述免疫活化部分是细胞因子。

56.根据权利要求55所述的免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其中所述细胞因子选自由il2、il7、il15、il18、ifna和ifng组成的组。

57.根据权利要求55或56所述的免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其中所述免疫活化部分是突变白细胞介素-2(il-2)多肽。

58.根据权利要求57所述的免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其中所述突变il-2多肽是包含氨基酸取代f42a、y45a和l72g(相对于人il-2序列seq id no：166编号)的人il-2分子。

59.根据权利要求58所述的免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其中所述突变il-2多肽进一步包含氨基酸取代t3a和/或氨基酸取代c125a。

60.根据权利要求57至59中任一项所述的免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其中所述突变il-2多肽包含与seq id no：167的氨基酸序列至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列，其中所述突变il-2多肽显示与高亲和力il-2受体的降低的亲和力和与中等亲和力il-2受体的基本上类似的亲和力，各自与野生型il-2多肽相比。

61.根据权利要求57至60中任一项所述的免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子，其中所述突变il-2多肽包含seq id no：167的氨基酸序列。

62.根据权利要求1至23中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分包含4-1bbl的三个胞外域或其片段。

63.根据权利要求1至23中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分包含第一多肽和第二多肽，其中分别地，所述第一多肽含有第一重链恒定(ch1)结构域或轻链恒定(cl)结构域，且所述第二多肽含有cl或ch1结构域，其中所述第二多肽通过所述ch1与cl结构域之间的二硫键连接到所述第一多肽，并且其中所述第一多肽包含通过肽接头彼此连结并且连结至所述ch1或cl结构域的4-1bbl的两个胞外域或其片段，并且其中所述第二多肽包含经由肽接头连结至所述多肽的所述cl或ch1结构域的所述4-1bbl的一个胞外域或其片段。

64.根据权利要求62或63所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述4-1bbl的胞外域或其片段包含选自由seq id no：117、seq id no：118、seq id no：119、seq id no：120、seq id no：121、seq id no：122、seq id no：123和seq id no：124组成的组的氨基酸序列，特别是seq id no：117或seq id no：121的氨基酸序列。

65.根据权利要求62至64中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活性部分包含通过二硫键彼此连接的第一多肽和第二多肽，其中所述抗原结合分子的特征在于，所述第一多肽包含选自由seq id no：125、seq id no：126、seq id no：127和seq idno：128组成的组的氨基酸序列，并且特征在于，所述第二多肽包含选自由seq id no：117、seq id no：121、seq id no：119和seq id no：120组成的组的氨基酸序列。

66.根据权利要求1至23或62至65中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述分子包含：第一重链和第一轻链，其包含所述fc结构域结合部分，特别是能够与所述靶fc结构域特异性结合的fab分子；以及第二重链和第二轻链，其包含所述免疫活化部分，其中分别地，所述第二重链包含所述第一多肽，所述第一多肽包含通过肽彼此连结并且连结至所述ch 1或cl结构域的4-1bbl的两个胞外域或其片段，且所述第二轻链包含所述第二多肽，所述第二多肽包含经由肽接头连结至所述多肽的所述cl或ch1结构域的所述4-1bbl的一个胞外域或其片段。

67.根据权利要求63至66中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中包含通过第一肽接头彼此连结的4-1bbl的两个胞外域或其片段的第一肽在其c末端通过第二肽接头与作为重链一部分的cl结构域融合，并且包含所述4-1bbl的一个胞外域或其片段的第二肽在其c端通过第三肽接头与作为轻链一部分的ch1结构域融合。

68.根据权利要求1至23中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述免疫活化部分能够与fc受体特异性结合。

69.根据权利要求68所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc是fcγ受体，特别是fcgriiia受体。

70.根据权利要求68或69所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述fc受体是cd16。

71.一种或多种分离的多核苷酸，其编码根据权利要求1至70中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子。

72.一种或多种载体，特别是表达载体，其包含根据权利要求71所述的多核苷酸。

73.一种宿主细胞，其包含根据权利要求71所述的多核苷酸或根据权利要求73所述的载体。

74.一种生产免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子的方法，其包括以下步骤：a)在适用于表达所述免疫活化fc结构域结合分子的条件下培养根据权利要求73所述的宿主细胞，和b)回收所述免疫活化fc结构域结合分子。

75.一种通过根据权利要求74所述的方法生产的免疫活化可结晶片段(fc)结构域结合分子。

76.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至70中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子和药用载体。

77.根据权利要求1至70中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子或根据权利要求76所述的药物组合物，其用作药物。

78.根据权利要求1至70中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子或根据权利要求76所述的药物组合物，其用于治疗有此需要的个体的疾病。

79.根据权利要求78所述的供使用的免疫活化fc结构域结合分子或药物组合物，其中所述疾病是癌症。

80.根据权利要求1至70中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子或根据权利要求76所述的药物组合物，其用于治疗有此需要的个体的疾病，其中所述免疫活化fc结构域结合分子与包含所述靶fc结构域的靶向抗体组合使用。

81.根据权利要求80所述的供使用的免疫活化fc结构域结合分子或药物组合物，其中所述疾病是癌症。

82.根据权利要求80或81所述的免疫活化fc结构域结合分子，其中所述靶向抗体能够与靶抗原，特别是癌细胞上的靶抗原特异性结合。

83.根据权利要求1至70中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子在制备药物中的用途，所述药物用于治疗有此需要的个体的疾病。

84.一种治疗个体的疾病的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的组合物，所述组合物包含药用形式的根据权利要求1至70中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子。

85.根据权利要求83所述的用途或根据权利要求84所述的方法，其中所述疾病是癌症。

86.一种治疗个体的疾病的方法，其包括：

87.根据权利要求85所述的方法，其中所述疾病是癌症。

88.根据权利要求85或87所述的方法，其中所述靶向抗体能够与靶抗原，特别是癌细胞上的靶抗原特异性结合。

89.根据权利要求86至88中任一项所述的方法，其中在施用包含所述靶fc结构域的所述抗体之前、同时或之后施用免疫活化fc结构域结合分子。

90.一种用于诱导细胞裂解的方法，其包括在存在t细胞的情况下使所述细胞与根据权利要求1至70中任一项所述的免疫活化fc结构域结合分子和与包含所述靶fc结构域的靶向抗体接触，其中所述靶向抗体能够与所述细胞上的抗原特异性结合。

91.如前所述的发明。

技术总结
本发明整体上涉及用于活化免疫细胞和重定向至特定靶细胞的新型免疫活化Fc结构域结合分子。此外，本发明涉及编码此类分子的多核苷酸，以及包含此类多核苷酸的载体和宿主细胞。本发明进一步涉及用于产生本发明的双特异性抗原结合分子的方法，以及使用这些双特异性抗原结合分子治疗疾病的方法。

技术研发人员：M·阿曼,A·卡比·古铁雷斯·西洛斯,C·克劳斯,L·科达里·迪克,D·达罗斯基,T·法蒂,C·费拉拉·科勒,A·弗莱莫瑟-格伦特肖伯,S·赫尔特,T·霍费尔,C·克莱因,L·劳纳,S·勒克莱尔,E·莫斯纳,C·纽曼,P·乌玛娜,M·苏鲁瓦卡,A·布兰西
受保护的技术使用者：豪夫迈·罗氏有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12