T细胞和抗原呈递细胞接合器及其用途的制作方法

1.本文在一些实施例中提供了多肽和编码该多肽的多核苷酸，该多肽包含嵌合抗原受体，该嵌合抗原受体与能够与例如抗原呈递细胞(apc)上的细胞表面抗原结合的结构域融合。本文在某些实施例中还提供了组合物及其用于治疗疾病或病症(如癌症)的用途，该组合物包含工程化免疫细胞，该工程化免疫细胞表达嵌合抗原受体以及能够与抗原呈递细胞的细胞表面抗原结合的另外的结构域。

背景技术：

0、2.背景技术

1、t细胞的过继转移代表一种新兴的抗癌创新治疗策略。例如，用嵌合抗原受体(car)工程化的t细胞诱导血癌患者产生有效的临床反应，证明了与常规疗法相比具有良好的预后。尽管如此，car-t细胞疗法从液体瘤转向实体瘤在临床上具有挑战性，最可能是由于肿瘤微环境。

2、最佳的t细胞增殖由抗原呈递细胞(apc)诱导的cd3ζ和cd28信号驱动。这样，car-t或tcr-t细胞部署这两种组分，以响应肿瘤相关抗原(taa)快速扩增和活化下游事件。不幸的是，由于缺乏全方位apc共刺激以及apc衍生的细胞因子，基因工程化t细胞的增殖能力通常有限，称为耗竭。因此，由于肿瘤微环境中缺乏活化的apc，car-t细胞或tcr-t细胞抗肿瘤的功效大大受损。已经设计了几种策略来克服这些障碍，但没有一种策略取得了临床和实际期望的结果。

3、因此，本领域仍然需要改进的构建体或工程化t细胞，例如，car-t细胞，以治疗疾病或病症，如实体瘤癌症。

4、3.
技术实现要素：

5、在一方面，本文提供了一种多肽，该多肽包含：(a)嵌合抗原受体(car)，该嵌合抗原受体包含(i)能够与第一抗原结合的胞外结构域、(ii)跨膜结构域和(iii)胞内结构域；以及(b)能够与第二抗原结合的结构域，该第二抗原在可以与t细胞相互作用的细胞的表面上表达，其中该car和该结构域通过肽接头融合。

6、在一些实施例中，可以与t细胞相互作用的细胞能够将第一抗原呈递给t细胞和/或在相互作用后诱导t细胞的应答。在一些实施例中，可以与t细胞相互作用的细胞是抗原呈递细胞(apc)。在一些实施例中，可以与t细胞相互作用的细胞表达mhc分子。在一些实施例中，mhc分子是mhc i类分子。在其他实施例中，mhc分子是mhc ii类分子。在一些实施例中，可以与t细胞相互作用的细胞选自由以下组成的组：巨噬细胞、树突状细胞、b淋巴细胞(b细胞)、肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、3型天然淋巴细胞(ilc3)、单核细胞、嗜中性粒细胞、自然杀伤细胞、成纤维细胞网状细胞、内皮细胞、周细胞、上皮细胞、成纤维细胞和人工apc细胞(aapc)。在一些实施例中，可以与t细胞相互作用的细胞是apc细胞，该apc细胞选自由以下组成的组：巨噬细胞、树突状细胞、和b淋巴细胞(b细胞)。

7、在一些实施例中，第一抗原选自肿瘤相关抗原。在一些实施例中，第一抗原选自由以下组成的组：707-ap、生物素化的分子、a-辅肌动蛋白-4、abl-bcr alb-b3(b2a2)、abl-bcr alb-b4(b3a2)、亲脂素、afp、aim-2、膜联蛋白ii、art-4、bage、bcma、b-连环素、bcr-abl、bcr-abl p190(e1a2)、bcr-abl p210(b2a2)、bcr-abl p210(b3a2)、bing-4、ca-125、cag-3、caix、camel、半胱天冬酶-8、cd171、cd19、cd20、cd22、cd23、cd24、cd30、cd33、cd38、cd44v7/8、cd70、cd123、cd133、cdc27、cdk-4、cea、clca2、cll-1、ctag1b、cyp-b、dam-10、dam-6、dek-can、dll3、egfr、egfrviii、egp-2、egp-40、elf2、ep-cam、epha2、epha3、erb-b2、erb-b3、erb-b4、es-eso-1a、etv6/aml、fap、fbp、胎儿乙酰胆碱受体、fgf-5、fn、fr-α、g250、gage-1、gage-2、gage-3、gage-4、gage-5、gage-6、gage-7b、gage-8、gd2、gd3、gnt-v、gp100、gp75、gpc3、gpc-2、gucy2c、her-2、hla-a*0201-r170i、hmw-maa、hsp70-2 m、hst-2(fgf6)、hst-2/neu、htert、ice、il-11rα、il-13rα2、kdr、kiaa0205、k-ras、l1-细胞粘附分子、lage-1、ldlr/fut、lewis y、l1-cam、mage-1、mage-10、mage-12、mage-2、mage-3、mage-4、mage-6、mage-a1、mage-a2、mage-a3、mage-a6、mage-b1、mage-b2、苹果酸酶、乳腺珠蛋白-a、mart-1/melan-a、mart-2、mc1r、m-csf、间皮素、muc1、muc16、muc2、mum-1、mum-2、mum-3、肌球蛋白、na88-a、neo-pap、nkg2d、npm/alk、n-ras、ny-eso-1、oa1、ogt、癌胚抗原(h5t4)、os-9、p多肽、p15、p53、prame、psa、psca、psma、ptprk、rage、ror1、ru1、ru2、sart-1、sart-2、sart-3、sox10、ssx-2、存活蛋白、存活蛋白-2b、syt/ssx、tag-72、tel/aml1、tgfarii、tgfbrii、tp1、trag-3、trg、trp-1、trp-2、trp-2/int2、trp-2-6b、酪氨酸酶、vegf-r2、wt1、α-叶酸受体、和κ-轻链。在一些实施例中，第二抗原是在细胞上表达的受体或配体，该细胞可以与t细胞相互作用。在一些实施例中，第二抗原选自由以下组成的组：cd40、cll1、flt3、flt3l、4-1bb、4-1bbl、gitr、gitrl、cd27、cd70、ox40、ox40l、pd-1、pd-l1、pd-l2、半乳凝素-9、b7-h3、b7-h4、icam1、icos、icosl、cd30、cd30l、tim1、tim3、tim4、sema4a、cd155、tigit、cd160、cd28、cd80、cd86、ctla4、lag3、lfa-1、ltβr、和hvem。

8、在一些实施例中，第二抗原是ltβr。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含ltα或其变体。在一些实施例中，ltα或其变体包含seq id no:7、seq id no:8或seqid no:9的氨基酸序列。在其他实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含ltβ或其变体。在一些实施例中，ltβ或其变体包含seq id no:10、seq id no:11或seq id no:12的氨基酸序列。在其他实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含ltα或其变体以及ltβ或其变体。在一些实施例中，ltα或其变体包含seq id no:7、seq id no:8或seq id no:9的氨基酸序列。在一些实施例中，ltβ或其变体包含seq id no:10、seq id no:11或seq id no:12的氨基酸序列。在一些实施例中，结构域包含seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15、seqid no:16、或seq id no:20的氨基酸序列。

9、在一些实施例中，第二抗原是hvem。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含light(tnfsf14)或其变体。在一些实施例中，light或其变体包含seq id no:17的氨基酸序列。

10、在其他实施例中，第二抗原是cd40。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含结合cd40的抗体或其片段。在一些实施例中，结合cd40的抗体或其片段包含seq idno:21的氨基酸序列。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含seq id no:24的氨基酸序列。

11、在一些实施例中，第二抗原是cll1。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含结合cll1的抗体或其片段。在一些实施例中，结合cll1的抗体或其片段包含seq idno:22或seq id no:23的氨基酸序列。

12、在一些实施例中，肽接头是可切割的肽接头。在一些实施例中，肽接头是2a自切割肽。在一些实施例中，2a自切割肽选自由f2a、e2a、p2a、t2a或其变体组成的组。在一些实施例中，2a自切割肽是p2a肽，该p2a肽包含seq id no:2的氨基酸序列。

13、在一些实施例中，car位于能够与第二抗原结合的结构域的n-末端。在其他实施例中，car位于能够与第二抗原结合的结构域的c-末端。

14、在另一方面，本文提供了包含编码本文提供的多肽的核酸序列的多核苷酸。

15、在另一方面，本文提供了多核苷酸，该多核苷酸包含：编码car的第一区，该car包含(i)能够与第一抗原结合的胞外结构域、(ii)跨膜结构域和(iii)胞内结构域；以及编码能够与第二抗原结合的结构域的第二区，该第二抗原在可以与t细胞相互作用的细胞的表面上表达，其中可以与t细胞相互作用的细胞能够将第一抗原呈递给t细胞和/或在相互作用后诱导t细胞的应答。

16、在另一方面，本文提供了一种载体，该载体包含含有编码本文提供的多肽的核酸序列的多核苷酸。

17、在又一方面，本文提供了一种用于制备car-t细胞的方法，该方法包括将本文提供的多核苷酸或载体引入t细胞。

18、在又一方面，本文提供了一种制备car-t细胞的方法，该方法包括将多核苷酸引入t细胞，该多核苷酸包含：编码car的第一区，该car包含(i)能够与第一抗原结合的胞外结构域、(ii)跨膜结构域和(iii)胞内结构域；以及编码能够与第二抗原结合的结构域的第二区，该第二抗原在可以与t细胞相互作用的细胞的表面上表达，其中可以与t细胞相互作用的细胞能够将第一抗原呈递给t细胞和/或在相互作用后诱导t细胞的应答。

19、在又一方面，本文提供了一种制备car-t细胞的方法，该方法包括将以下引入t细胞：编码car的第一多核苷酸，该car包含(i)能够与第一抗原结合的胞外结构域、(ii)跨膜结构域和(iii)胞内结构域；以及编码能够与第二抗原结合的结构域的第二多核苷酸，该第二抗原在可以与t细胞相互作用的细胞的表面上表达，其中可以与t细胞相互作用的细胞能够将第一抗原呈递给t细胞和/或在相互作用后诱导t细胞的应答。

20、在又一方面，本文提供了一种根据本文提供的方法产生的car-t细胞。

21、在又一方面，本文提供了一种car-t细胞，该car-t细胞包含本文提供的多肽、多核苷酸或载体。

22、在又一方面，本文提供了一种表达以下的car-t细胞：(a)car，该car包含(i)能够与第一抗原结合的胞外结构域、(ii)跨膜结构域和(iii)胞内结构域；以及(b)能够与第二抗原结合的结构域，该第二抗原在可以与t细胞相互作用的细胞的表面上表达，其中可以与t细胞相互作用的细胞能够将第一抗原呈递给t细胞和/或在相互作用后诱导t细胞的应答。

23、在一些实施例中，可以与t细胞相互作用的细胞是抗原呈递细胞(apc)。在一些实施例中，可以与t细胞相互作用的细胞表达mhc分子。在一些实施例中，mhc分子是mhc i类分子。在其他实施例中，mhc分子是mhc ii类分子。在一些实施例中，可以与t细胞相互作用的细胞选自由以下组成的组：巨噬细胞、树突状细胞、b淋巴细胞(b细胞)、肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、3型天然淋巴细胞(ilc3)、单核细胞、嗜中性粒细胞、自然杀伤细胞、成纤维细胞网状细胞、内皮细胞、周细胞、上皮细胞、成纤维细胞和人工apc细胞(aapc)。在一些实施例中，可以与t细胞相互作用的细胞是apc细胞，该apc细胞选自由以下组成的组：巨噬细胞、树突状细胞、和b淋巴细胞(b细胞)。

24、在一些实施例中，第一抗原选自肿瘤相关抗原。在一些实施例中，第一抗原选自由以下组成的组：707-ap、生物素化的分子、a-辅肌动蛋白-4、abl-bcr alb-b3(b2a2)、abl-bcr alb-b4(b3a2)、亲脂素、afp、aim-2、膜联蛋白ii、art-4、bage、bcma、b-连环素、bcr-abl、bcr-abl p190(e1a2)、bcr-abl p210(b2a2)、bcr-abl p210(b3a2)、bing-4、ca-125、cag-3、caix、camel、半胱天冬酶-8、cd171、cd19、cd20、cd22、cd23、cd24、cd30、cd33、cd38、cd44v7/8、cd70、cd123、cd133、cdc27、cdk-4、cea、clca2、cll-1、ctag1b、cyp-b、dam-10、dam-6、dek-can、dll3、egfr、egfrviii、egp-2、egp-40、elf2、ep-cam、epha2、epha3、erb-b2、erb-b3、erb-b4、es-eso-1a、etv6/aml、fap、fbp、胎儿乙酰胆碱受体、fgf-5、fn、fr-α、g250、gage-1、gage-2、gage-3、gage-4、gage-5、gage-6、gage-7b、gage-8、gd2、gd3、gnt-v、gp100、gp75、gpc3、gpc-2、gucy2c、her-2、hla-a*0201-r170i、hmw-maa、hsp70-2 m、hst-2(fgf6)、hst-2/neu、htert、ice、il-11rα、il-13rα2、kdr、kiaa0205、k-ras、l1-细胞粘附分子、lage-1、ldlr/fut、lewis y、l1-cam、mage-1、mage-10、mage-12、mage-2、mage-3、mage-4、mage-6、mage-a1、mage-a2、mage-a3、mage-a6、mage-b1、mage-b2、苹果酸酶、乳腺珠蛋白-a、mart-1/melan-a、mart-2、mc1r、m-csf、间皮素、muc1、muc16、muc2、mum-1、mum-2、mum-3、肌球蛋白、na88-a、neo-pap、nkg2d、npm/alk、n-ras、ny-eso-1、oa1、ogt、癌胚抗原(h5t4)、os-9、p多肽、p15、p53、prame、psa、psca、psma、ptprk、rage、ror1、ru1、ru2、sart-1、sart-2、sart-3、sox10、ssx-2、存活蛋白、存活蛋白-2b、syt/ssx、tag-72、tel/aml1、tgfarii、tgfbrii、tp1、trag-3、trg、trp-1、trp-2、trp-2/int2、trp-2-6b、酪氨酸酶、vegf-r2、wt1、α-叶酸受体、和κ-轻链。在一些实施例中，第二抗原是在细胞上表达的受体或配体，该细胞可以与t细胞相互作用。在一些实施例中，第二抗原选自由以下组成的组：cd40、cll1、flt3、flt3l、4-1bb、4-1bbl、gitr、gitrl、cd27、cd70、ox40、ox40l、pd-1、pd-l1、pd-l2、半乳凝素-9、b7-h3、b7-h4、icam1、icos、icosl、cd30、cd30l、tim1、tim3、tim4、sema4a、cd155、tigit、cd160、cd28、cd80、cd86、ctla4、lag3、lfa-1、ltβr、和hvem。

25、在一些实施例中，第二抗原是ltβr。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含ltα或其变体。在一些实施例中，ltα或其变体包含seq id no:7、seq id no:8或seqid no:9的氨基酸序列。在其他实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含ltβ或其变体。在一些实施例中，ltβ或其变体包含seq id no:10、seq id no:11或seq id no:12的氨基酸序列。在其他实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含ltα或其变体以及ltβ或其变体。在一些实施例中，ltα或其变体包含seq id no:7、seq id no:8或seq id no:9的氨基酸序列。在一些实施例中，ltβ或其变体包含seq id no:10、seq id no:11或seq id no:12的氨基酸序列。在其他实施例中，结构域包含seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15、seqid no:16、或seq id no:20的氨基酸序列。

26、在一些实施例中，第二抗原是hvem。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含light(tnfsf14)或其变体。在一些实施例中，light或其变体包含seq id no:17的氨基酸序列。

27、在其他实施例中，第二抗原是cd40。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含结合cd40的抗体或其片段。在一些实施例中，结合cd40的抗体或其片段包含seq idno:21的氨基酸序列。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含seq id no:24的氨基酸序列。

28、在一些实施例中，第二抗原是cll1。在一些实施例中，能够与第二抗原结合的结构域包含结合cll1的抗体或其片段。在一些实施例中，结合cll1的抗体或其片段包含seq idno:22或seq id no:23的氨基酸序列。

29、在另一方面，本文提供了一种药物组合物，该药物组合物包含本文提供的多肽、载体、或car-t细胞，以及药学上可接受的赋形剂。

30、在另一方面，本文提供了一种用于治疗受试者疾病或病症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本文提供的car-t细胞或药物组合物。在一些实施例中，疾病或病症是癌症。在一些实施例中，癌症是血癌。在其他实施例中，癌症是实体瘤癌症。在一些实施例中，受试者是有需要的人受试者。

31、在又一方面，本文提供了一种包含car-t细胞和apc的组合物，其中该car-t细胞表达：(a)car，该car包含(i)胞外结构域、(ii)跨膜结构域、和(iii)胞内结构域；以及(b)结构域，并且其中该胞外结构域与靶细胞的表面上表达的第一抗原结合，该结构域与apc的表面上表达的第二抗原结合。

32、                         序列表

33、<110>  南京传奇生物科技有限公司（nanjing legend biotechnology co., ltd.）

34、<120>  t细胞和抗原呈递细胞接合器及其用途

35、<130>  14651-031-228

36、<140>

37、<141>

38、<150>  pct/cn2020/118988

39、<151>  2020-09-29

40、<160>  30

41、<170>  patentin 3.5版

42、<210>  1

43、<211>  15

44、<212>  prt

45、<213> 人工序列

46、<220>

47、<223>  连接vl和vh的接头（kite/icell 抗cll1结合剂）

48、<400>  1

49、gly gly gly gly ser gly gly gly gly ser gly gly gly gly ser

50、1               5                   10                  15

51、<210>  2

52、<211>  22

53、<212>  prt

54、<213> 人工序列

55、<220>

56、<223>  p2a 元件

57、<400>  2

58、gly ser gly ala thr asn phe ser leu leu lys gln ala gly asp val

59、1               5                   10                  15

60、glu glu asn pro gly pro

61、            20

62、<210>  3

63、<211>  21

64、<212>  prt

65、<213> 人工序列

66、<220>

67、<223>  cd8α信号肽

68、<400>  3

69、met ala leu pro val thr ala leu leu leu pro leu ala leu leu leu

70、1               5                   10                  15

71、his ala ala arg pro

72、            20

73、<210>  4

74、<211>  45

75、<212>  prt

76、<213> 人工序列

77、<220>

78、<223>  cd8α铰链

79、<400>  4

80、thr thr thr pro ala pro arg pro pro thr pro ala pro thr ile ala

81、1               5                   10                  15

82、ser gln pro leu ser leu arg pro glu ala cys arg pro ala ala gly

83、            20                  25                  30

84、gly ala val his thr arg gly leu asp phe ala cys asp

85、        35                  40                  45

86、<210>  5

87、<211>  24

88、<212>  prt

89、<213> 人工序列

90、<220>

91、<223>  cd8α跨膜

92、<400>  5

93、ile tyr ile trp ala pro leu ala gly thr cys gly val leu leu leu

94、1               5                   10                  15

95、ser leu val ile thr leu tyr cys

96、            20

97、<210>  6

98、<211>  34

99、<212>  prt

100、<213> 人工序列

101、<220>

102、<223>  ltα信号肽

103、<400>  6

104、met thr pro pro glu arg leu phe leu pro arg val cys gly thr thr

105、1               5                   10                  15

106、leu his leu leu leu leu gly leu leu leu val leu leu pro gly ala

107、            20                  25                  30

108、gln gly

109、<210>  7

110、<211>  205

111、<212>  prt

112、<213> 人工序列

113、<220>

114、<223>  ltα

115、<400>  7

116、met thr pro pro glu arg leu phe leu pro arg val cys gly thr thr

117、1               5                   10                  15

118、leu his leu leu leu leu gly leu leu leu val leu leu pro gly ala

119、            20                  25                  30

120、gln gly leu pro gly val gly leu thr pro ser ala ala gln thr ala

121、        35                  40                  45

122、arg gln his pro lys met his leu ala his ser thr leu lys pro ala

123、    50                  55                  60

124、ala his leu ile gly asp pro ser lys gln asn ser leu leu trp arg

125、65                  70                  75                  80

126、ala asn thr asp arg ala phe leu gln asp gly phe ser leu ser asn

127、                85                  90                  95

128、asn ser leu leu val pro thr ser gly ile tyr phe val tyr ser gln

129、            100                 105                 110

130、val val phe ser gly lys ala tyr ser pro lys ala thr ser ser pro

131、        115                 120                 125

132、leu tyr leu ala his glu val gln leu phe ser ser gln tyr pro phe

133、    130                 135                 140

134、his val pro leu leu ser ser gln lys met val tyr pro gly leu gln

135、145                 150                 155                 160

136、glu pro trp leu his ser met tyr his gly ala ala phe gln leu thr

137、                165                 170                 175

138、gln gly asp gln leu ser thr his thr asp gly ile pro his leu val

139、            180                 185                 190

140、leu ser pro ser thr val phe phe gly ala phe ala leu

141、        195                 200                 205

142、<210>  8

143、<211>  144

144、<212>  prt

145、<213> 人工序列

146、<220>

147、<223>  ltα突变体1

148、<400>  8

149、lys pro ala ala his leu ile gly asp pro ser lys gln asn ser leu

150、1               5                   10                  15

151、leu trp arg ala asn thr asp arg ala phe leu gln asp gly phe ser

152、            20                  25                  30

153、leu ser asn asn ser leu leu val pro thr ser gly ile tyr phe val

154、        35                  40                  45

155、tyr ser gln val val phe ser gly lys ala tyr ser pro lys ala thr

156、    50                  55                  60

157、ser ser pro leu tyr leu ala his glu val gln leu phe ser ser gln

158、65                  70                  75                  80

159、tyr pro phe his val pro leu leu ser ser gln lys met val tyr pro

160、                85                  90                  95

161、gly leu gln glu pro trp leu his ser met tyr his gly ala ala phe

162、            100                 105                 110

163、gln leu thr gln gly asp gln leu ser thr his thr asp gly ile pro

164、        115                 120                 125

165、his leu val leu ser pro ser thr val phe phe gly ala phe ala leu

166、    130                 135                 140

167、<210>  9

168、<211>  171

169、<212>  prt

170、<213> 人工序列

171、<220>

172、<223>  ltα突变体2

173、<400>  9

174、leu pro gly val gly leu thr pro ser ala ala gln thr ala arg gln

175、1               5                   10                  15

176、his pro lys met his leu ala his ser thr leu lys pro ala ala his

177、            20                  25                  30

178、leu ile gly asp pro ser lys gln asn ser leu leu trp arg ala asn

179、        35                  40                  45

180、thr asp arg ala phe leu gln asp gly phe ser leu ser asn asn ser

181、    50                  55                  60

182、leu leu val pro thr ser gly ile tyr phe val tyr ser gln val val

183、65                  70                  75                  80

184、phe ser gly lys ala tyr ser pro lys ala thr ser ser pro leu tyr

185、                85                  90                  95

186、leu ala his glu val gln leu phe ser ser gln tyr pro phe his val

187、            100                 105                 110

188、pro leu leu ser ser gln lys met val tyr pro gly leu gln glu pro

189、        115                 120                 125

190、trp leu his ser met tyr his gly ala ala phe gln leu thr gln gly

191、    130                 135                 140

192、asp gln leu ser thr his thr asp gly ile pro his leu val leu ser

193、145                 150                 155                 160

194、pro ser thr val phe phe gly ala phe ala leu

195、                165                 170

196、<210>  10

197、<211>  244

198、<212>  prt

199、<213> 人工序列

200、<220>

201、<223>  ltβ

202、<400>  10

203、met gly ala leu gly leu glu gly arg gly gly arg leu gln gly arg

204、1               5                   10                  15

205、gly ser leu leu leu ala val ala gly ala thr ser leu val thr leu

206、            20                  25                  30

207、leu leu ala val pro ile thr val leu ala val leu ala leu val pro

208、        35                  40                  45

209、gln asp gln gly gly leu val thr glu thr ala asp pro gly ala gln

210、    50                  55                  60

211、ala gln gln gly leu gly phe gln lys leu pro glu glu glu pro glu

212、65                  70                  75                  80

213、thr asp leu ser pro gly leu pro ala ala his leu ile gly ala pro

214、                85                  90                  95

215、leu lys gly gln gly leu gly trp glu thr thr lys glu gln ala phe

216、            100                 105                 110

217、leu thr ser gly thr gln phe ser asp ala glu gly leu ala leu pro

218、        115                 120                 125

219、gln asp gly leu tyr tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg gly arg

220、    130                 135                 140

221、ala pro pro gly gly gly asp pro gln gly arg ser val thr leu arg

222、145                 150                 155                 160

223、ser ser leu tyr arg ala gly gly ala tyr gly pro gly thr pro glu

224、                165                 170                 175

225、leu leu leu glu gly ala glu thr val thr pro val leu asp pro ala

226、            180                 185                 190

227、arg arg gln gly tyr gly pro leu trp tyr thr ser val gly phe gly

228、        195                 200                 205

229、gly leu val gln leu arg arg gly glu arg val tyr val asn ile ser

230、    210                 215                 220

231、his pro asp met val asp phe ala arg gly lys thr phe phe gly ala

232、225                 230                 235                 240

233、val met val gly

234、<210>  11

235、<211>  196

236、<212>  prt

237、<213> 人工序列

238、<220>

239、<223>  ltβ突变体1

240、<400>  11

241、gln asp gln gly gly leu val thr glu thr ala asp pro gly ala gln

242、1               5                   10                  15

243、ala gln gln gly leu gly phe gln lys leu pro glu glu glu pro glu

244、            20                  25                  30

245、thr asp leu ser pro gly leu pro ala ala his leu ile gly ala pro

246、        35                  40                  45

247、leu lys gly gln gly leu gly trp glu thr thr lys glu gln ala phe

248、    50                  55                  60

249、leu thr ser gly thr gln phe ser asp ala glu gly leu ala leu pro

250、65                  70                  75                  80

251、gln asp gly leu tyr tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg gly arg

252、                85                  90                  95

253、ala pro pro gly gly gly asp pro gln gly arg ser val thr leu arg

254、            100                 105                 110

255、ser ser leu tyr arg ala gly gly ala tyr gly pro gly thr pro glu

256、        115                 120                 125

257、leu leu leu glu gly ala glu thr val thr pro val leu asp pro ala

258、    130                 135                 140

259、arg arg gln gly tyr gly pro leu trp tyr thr ser val gly phe gly

260、145                 150                 155                 160

261、gly leu val gln leu arg arg gly glu arg val tyr val asn ile ser

262、                165                 170                 175

263、his pro asp met val asp phe ala arg gly lys thr phe phe gly ala

264、            180                 185                 190

265、val met val gly

266、        195

267、<210>  12

268、<211>  158

269、<212>  prt

270、<213> 人工序列

271、<220>

272、<223>  ltβ突变体2

273、<400>  12

274、leu pro ala ala his leu ile gly ala pro leu lys gly gln gly leu

275、1               5                   10                  15

276、gly trp glu thr thr lys glu gln ala phe leu thr ser gly thr gln

277、            20                  25                  30

278、phe ser asp ala glu gly leu ala leu pro gln asp gly leu tyr tyr

279、        35                  40                  45

280、leu tyr cys leu val gly tyr arg gly arg ala pro pro gly gly gly

281、    50                  55                  60

282、asp pro gln gly arg ser val thr leu arg ser ser leu tyr arg ala

283、65                  70                  75                  80

284、gly gly ala tyr gly pro gly thr pro glu leu leu leu glu gly ala

285、                85                  90                  95

286、glu thr val thr pro val leu asp pro ala arg arg gln gly tyr gly

287、            100                 105                 110

288、pro leu trp tyr thr ser val gly phe gly gly leu val gln leu arg

289、        115                 120                 125

290、arg gly glu arg val tyr val asn ile ser his pro asp met val asp

291、    130                 135                 140

292、phe ala arg gly lys thr phe phe gly ala val met val gly

293、145                 150                 155

294、<210>  13

295、<211>  468

296、<212>  prt

297、<213> 人工序列

298、<220>

299、<223>  工程化突变体ltα/β 1

300、<400>  13

301、lys pro ala ala his leu ile gly asp pro ser lys gln asn ser leu

302、1               5                   10                  15

303、leu trp arg ala asn thr asp arg ala phe leu gln asp gly phe ser

304、            20                  25                  30

305、leu ser asn asn ser leu leu val pro thr ser gly ile tyr phe val

306、        35                  40                  45

307、tyr ser gln val val phe ser gly lys ala tyr ser pro lys ala thr

308、    50                  55                  60

309、ser ser pro leu tyr leu ala his glu val gln leu phe ser ser gln

310、65                  70                  75                  80

311、tyr pro phe his val pro leu leu ser ser gln lys met val tyr pro

312、                85                  90                  95

313、gly leu gln glu pro trp leu his ser met tyr his gly ala ala phe

314、            100                 105                 110

315、gln leu thr gln gly asp gln leu ser thr his thr asp gly ile pro

316、        115                 120                 125

317、his leu val leu ser pro ser thr val phe phe gly ala phe ala leu

318、    130                 135                 140

319、gly gly ser gly leu pro ala ala his leu ile gly ala pro leu lys

320、145                 150                 155                 160

321、gly gln gly leu gly trp glu thr thr lys glu gln ala phe leu thr

322、                165                 170                 175

323、ser gly thr gln phe ser asp ala glu gly leu ala leu pro gln asp

324、            180                 185                 190

325、gly leu tyr tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg gly arg ala pro

326、        195                 200                 205

327、pro gly gly gly asp pro gln gly arg ser val thr leu arg ser ser

328、    210                 215                 220

329、leu tyr arg ala gly gly ala tyr gly pro gly thr pro glu leu leu

330、225                 230                 235                 240

331、leu glu gly ala glu thr val thr pro val leu asp pro ala arg arg

332、                245                 250                 255

333、gln gly tyr gly pro leu trp tyr thr ser val gly phe gly gly leu

334、            260                 265                 270

335、val gln leu arg arg gly glu arg val tyr val asn ile ser his pro

336、        275                 280                 285

337、asp met val asp phe ala arg gly lys thr phe phe gly ala val met

338、    290                 295                 300

339、val gly gly gly ser gly leu pro ala ala his leu ile gly ala pro

340、305                 310                 315                 320

341、leu lys gly gln gly leu gly trp glu thr thr lys glu gln ala phe

342、                325                 330                 335

343、leu thr ser gly thr gln phe ser asp ala glu gly leu ala leu pro

344、            340                 345                 350

345、gln asp gly leu tyr tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg gly arg

346、        355                 360                 365

347、ala pro pro gly gly gly asp pro gln gly arg ser val thr leu arg

348、    370                 375                 380

349、ser ser leu tyr arg ala gly gly ala tyr gly pro gly thr pro glu

350、385                 390                 395                 400

351、leu leu leu glu gly ala glu thr val thr pro val leu asp pro ala

352、                405                 410                 415

353、arg arg gln gly tyr gly pro leu trp tyr thr ser val gly phe gly

354、            420                 425                 430

355、gly leu val gln leu arg arg gly glu arg val tyr val asn ile ser

356、        435                 440                 445

357、his pro asp met val asp phe ala arg gly lys thr phe phe gly ala

358、    450                 455                 460

359、val met val gly

360、465

361、<210>  14

362、<211>  607

363、<212>  prt

364、<213> 人工序列

365、<220>

366、<223>  工程化突变体ltα/β 2

367、<400>  14

368、met thr pro pro glu arg leu phe leu pro arg val cys gly thr thr

369、1               5                   10                  15

370、leu his leu leu leu leu gly leu leu leu val leu leu pro gly ala

371、            20                  25                  30

372、gln gly leu pro gly val gly leu thr pro ser ala ala gln thr ala

373、        35                  40                  45

374、arg gln his pro lys met his leu ala his ser thr leu lys pro ala

375、    50                  55                  60

376、ala his leu ile gly asp pro ser lys gln asn ser leu leu trp arg

377、65                  70                  75                  80

378、ala asn thr asp arg ala phe leu gln asp gly phe ser leu ser asn

379、                85                  90                  95

380、asn ser leu leu val pro thr ser gly ile tyr phe val tyr ser gln

381、            100                 105                 110

382、val val phe ser gly lys ala tyr ser pro lys ala thr ser ser pro

383、        115                 120                 125

384、leu tyr leu ala his glu val gln leu phe ser ser gln tyr pro phe

385、    130                 135                 140

386、his val pro leu leu ser ser gln lys met val tyr pro gly leu gln

387、145                 150                 155                 160

388、glu pro trp leu his ser met tyr his gly ala ala phe gln leu thr

389、                165                 170                 175

390、gln gly asp gln leu ser thr his thr asp gly ile pro his leu val

391、            180                 185                 190

392、leu ser pro ser thr val phe phe gly ala phe ala leu gly gly gly

393、        195                 200                 205

394、gly ser gln asp gln gly gly leu val thr glu thr ala asp pro gly

395、    210                 215                 220

396、ala gln ala gln gln gly leu gly phe gln lys leu pro glu glu glu

397、225                 230                 235                 240

398、pro glu thr asp leu ser pro gly leu pro ala ala his leu ile gly

399、                245                 250                 255

400、ala pro leu lys gly gln gly leu gly trp glu thr thr lys glu gln

401、            260                 265                 270

402、ala phe leu thr ser gly thr gln phe ser asp ala glu gly leu ala

403、        275                 280                 285

404、leu pro gln asp gly leu tyr tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg

405、    290                 295                 300

406、gly arg ala pro pro gly gly gly asp pro gln gly arg ser val thr

407、305                 310                 315                 320

408、leu arg ser ser leu tyr arg ala gly gly ala tyr gly pro gly thr

409、                325                 330                 335

410、pro glu leu leu leu glu gly ala glu thr val thr pro val leu asp

411、            340                 345                 350

412、pro ala arg arg gln gly tyr gly pro leu trp tyr thr ser val gly

413、        355                 360                 365

414、phe gly gly leu val gln leu arg arg gly glu arg val tyr val asn

415、    370                 375                 380

416、ile ser his pro asp met val asp phe ala arg gly lys thr phe phe

417、385                 390                 395                 400

418、gly ala val met val gly gly gly gly gly ser gln asp gln gly gly

419、                405                 410                 415

420、leu val thr glu thr ala asp pro gly ala gln ala gln gln gly leu

421、            420                 425                 430

422、gly phe gln lys leu pro glu glu glu pro glu thr asp leu ser pro

423、        435                 440                 445

424、gly leu pro ala ala his leu ile gly ala pro leu lys gly gln gly

425、    450                 455                 460

426、leu gly trp glu thr thr lys glu gln ala phe leu thr ser gly thr

427、465                 470                 475                 480

428、gln phe ser asp ala glu gly leu ala leu pro gln asp gly leu tyr

429、                485                 490                 495

430、tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg gly arg ala pro pro gly gly

431、            500                 505                 510

432、gly asp pro gln gly arg ser val thr leu arg ser ser leu tyr arg

433、        515                 520                 525

434、ala gly gly ala tyr gly pro gly thr pro glu leu leu leu glu gly

435、    530                 535                 540

436、ala glu thr val thr pro val leu asp pro ala arg arg gln gly tyr

437、545                 550                 555                 560

438、gly pro leu trp tyr thr ser val gly phe gly gly leu val gln leu

439、                565                 570                 575

440、arg arg gly glu arg val tyr val asn ile ser his pro asp met val

441、            580                 585                 590

442、asp phe ala arg gly lys thr phe phe gly ala val met val gly

443、        595                 600                 605

444、<210>  15

445、<211>  621

446、<212>  prt

447、<213> 人工序列

448、<220>

449、<223>  工程化突变体ltα/β 3

450、<400>  15

451、met gly ala leu gly leu glu gly arg gly gly arg leu gln gly arg

452、1               5                   10                  15

453、gly ser leu leu leu ala val ala gly ala thr ser leu val thr leu

454、            20                  25                  30

455、leu leu ala val pro ile thr val leu ala val leu ala leu val pro

456、        35                  40                  45

457、gln asp gln gly gly leu val thr glu thr ala asp pro gly ala gln

458、    50                  55                  60

459、ala gln gln gly leu gly phe gln lys leu pro glu glu glu pro glu

460、65                  70                  75                  80

461、thr asp leu ser pro gly leu pro ala ala his leu ile gly ala pro

462、                85                  90                  95

463、leu lys gly gln gly leu gly trp glu thr thr lys glu gln ala phe

464、            100                 105                 110

465、leu thr ser gly thr gln phe ser asp ala glu gly leu ala leu pro

466、        115                 120                 125

467、gln asp gly leu tyr tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg gly arg

468、    130                 135                 140

469、ala pro pro gly gly gly asp pro gln gly arg ser val thr leu arg

470、145                 150                 155                 160

471、ser ser leu tyr arg ala gly gly ala tyr gly pro gly thr pro glu

472、                165                 170                 175

473、leu leu leu glu gly ala glu thr val thr pro val leu asp pro ala

474、            180                 185                 190

475、arg arg gln gly tyr gly pro leu trp tyr thr ser val gly phe gly

476、        195                 200                 205

477、gly leu val gln leu arg arg gly glu arg val tyr val asn ile ser

478、    210                 215                 220

479、his pro asp met val asp phe ala arg gly lys thr phe phe gly ala

480、225                 230                 235                 240

481、val met val gly gly gly gly gly ser gln asp gln gly gly leu val

482、                245                 250                 255

483、thr glu thr ala asp pro gly ala gln ala gln gln gly leu gly phe

484、            260                 265                 270

485、gln lys leu pro glu glu glu pro glu thr asp leu ser pro gly leu

486、        275                 280                 285

487、pro ala ala his leu ile gly ala pro leu lys gly gln gly leu gly

488、    290                 295                 300

489、trp glu thr thr lys glu gln ala phe leu thr ser gly thr gln phe

490、305                 310                 315                 320

491、ser asp ala glu gly leu ala leu pro gln asp gly leu tyr tyr leu

492、                325                 330                 335

493、tyr cys leu val gly tyr arg gly arg ala pro pro gly gly gly asp

494、            340                 345                 350

495、pro gln gly arg ser val thr leu arg ser ser leu tyr arg ala gly

496、        355                 360                 365

497、gly ala tyr gly pro gly thr pro glu leu leu leu glu gly ala glu

498、    370                 375                 380

499、thr val thr pro val leu asp pro ala arg arg gln gly tyr gly pro

500、385                 390                 395                 400

501、leu trp tyr thr ser val gly phe gly gly leu val gln leu arg arg

502、                405                 410                 415

503、gly glu arg val tyr val asn ile ser his pro asp met val asp phe

504、            420                 425                 430

505、ala arg gly lys thr phe phe gly ala val met val gly gly gly gly

506、        435                 440                 445

507、gly ser leu pro gly val gly leu thr pro ser ala ala gln thr ala

508、    450                 455                 460

509、arg gln his pro lys met his leu ala his ser thr leu lys pro ala

510、465                 470                 475                 480

511、ala his leu ile gly asp pro ser lys gln asn ser leu leu trp arg

512、                485                 490                 495

513、ala asn thr asp arg ala phe leu gln asp gly phe ser leu ser asn

514、            500                 505                 510

515、asn ser leu leu val pro thr ser gly ile tyr phe val tyr ser gln

516、        515                 520                 525

517、val val phe ser gly lys ala tyr ser pro lys ala thr ser ser pro

518、    530                 535                 540

519、leu tyr leu ala his glu val gln leu phe ser ser gln tyr pro phe

520、545                 550                 555                 560

521、his val pro leu leu ser ser gln lys met val tyr pro gly leu gln

522、                565                 570                 575

523、glu pro trp leu his ser met tyr his gly ala ala phe gln leu thr

524、            580                 585                 590

525、gln gly asp gln leu ser thr his thr asp gly ile pro his leu val

526、        595                 600                 605

527、leu ser pro ser thr val phe phe gly ala phe ala leu

528、    610                 615                 620

529、<210>  16

530、<211>  621

531、<212>  prt

532、<213> 人工序列

533、<220>

534、<223>  工程化突变体ltα/β 4

535、<400>  16

536、met gly ala leu gly leu glu gly arg gly gly arg leu gln gly arg

537、1               5                   10                  15

538、gly ser leu leu leu ala val ala gly ala thr ser leu val thr leu

539、            20                  25                  30

540、leu leu ala val pro ile thr val leu ala val leu ala leu val pro

541、        35                  40                  45

542、gln asp gln gly gly leu val thr glu thr ala asp pro gly ala gln

543、    50                  55                  60

544、ala gln gln gly leu gly phe gln lys leu pro glu glu glu pro glu

545、65                  70                  75                  80

546、thr asp leu ser pro gly leu pro ala ala his leu ile gly ala pro

547、                85                  90                  95

548、leu lys gly gln gly leu gly trp glu thr thr lys glu gln ala phe

549、            100                 105                 110

550、leu thr ser gly thr gln phe ser asp ala glu gly leu ala leu pro

551、        115                 120                 125

552、gln asp gly leu tyr tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg gly arg

553、    130                 135                 140

554、ala pro pro gly gly gly asp pro gln gly arg ser val thr leu arg

555、145                 150                 155                 160

556、ser ser leu tyr arg ala gly gly ala tyr gly pro gly thr pro glu

557、                165                 170                 175

558、leu leu leu glu gly ala glu thr val thr pro val leu asp pro ala

559、            180                 185                 190

560、arg arg gln gly tyr gly pro leu trp tyr thr ser val gly phe gly

561、        195                 200                 205

562、gly leu val gln leu arg arg gly glu arg val tyr val asn ile ser

563、    210                 215                 220

564、his pro asp met val asp phe ala arg gly lys thr phe phe gly ala

565、225                 230                 235                 240

566、val met val gly gly gly gly gly ser leu pro gly val gly leu thr

567、                245                 250                 255

568、pro ser ala ala gln thr ala arg gln his pro lys met his leu ala

569、            260                 265                 270

570、his ser thr leu lys pro ala ala his leu ile gly asp pro ser lys

571、        275                 280                 285

572、gln asn ser leu leu trp arg ala asn thr asp arg ala phe leu gln

573、    290                 295                 300

574、asp gly phe ser leu ser asn asn ser leu leu val pro thr ser gly

575、305                 310                 315                 320

576、ile tyr phe val tyr ser gln val val phe ser gly lys ala tyr ser

577、                325                 330                 335

578、pro lys ala thr ser ser pro leu tyr leu ala his glu val gln leu

579、            340                 345                 350

580、phe ser ser gln tyr pro phe his val pro leu leu ser ser gln lys

581、        355                 360                 365

582、met val tyr pro gly leu gln glu pro trp leu his ser met tyr his

583、    370                 375                 380

584、gly ala ala phe gln leu thr gln gly asp gln leu ser thr his thr

585、385                 390                 395                 400

586、asp gly ile pro his leu val leu ser pro ser thr val phe phe gly

587、                405                 410                 415

588、ala phe ala leu gly gly gly gly ser gln asp gln gly gly leu val

589、            420                 425                 430

590、thr glu thr ala asp pro gly ala gln ala gln gln gly leu gly phe

591、        435                 440                 445

592、gln lys leu pro glu glu glu pro glu thr asp leu ser pro gly leu

593、    450                 455                 460

594、pro ala ala his leu ile gly ala pro leu lys gly gln gly leu gly

595、465                 470                 475                 480

596、trp glu thr thr lys glu gln ala phe leu thr ser gly thr gln phe

597、                485                 490                 495

598、ser asp ala glu gly leu ala leu pro gln asp gly leu tyr tyr leu

599、            500                 505                 510

600、tyr cys leu val gly tyr arg gly arg ala pro pro gly gly gly asp

601、        515                 520                 525

602、pro gln gly arg ser val thr leu arg ser ser leu tyr arg ala gly

603、    530                 535                 540

604、gly ala tyr gly pro gly thr pro glu leu leu leu glu gly ala glu

605、545                 550                 555                 560

606、thr val thr pro val leu asp pro ala arg arg gln gly tyr gly pro

607、                565                 570                 575

608、leu trp tyr thr ser val gly phe gly gly leu val gln leu arg arg

609、            580                 585                 590

610、gly glu arg val tyr val asn ile ser his pro asp met val asp phe

611、        595                 600                 605

612、ala arg gly lys thr phe phe gly ala val met val gly

613、    610                 615                 620

614、<210>  17

615、<211>  240

616、<212>  prt

617、<213> 人工序列

618、<220>

619、<223>  light

620、<400>  17

621、met glu glu ser val val arg pro ser val phe val val asp gly gln

622、1               5                   10                  15

623、thr asp ile pro phe thr arg leu gly arg ser his arg arg gln ser

624、            20                  25                  30

625、cys ser val ala arg val gly leu gly leu leu leu leu leu met gly

626、        35                  40                  45

627、ala gly leu ala val gln gly trp phe leu leu gln leu his trp arg

628、    50                  55                  60

629、leu gly glu met val thr arg leu pro asp gly pro ala gly ser trp

630、65                  70                  75                  80

631、glu gln leu ile gln glu arg arg ser his glu val asn pro ala ala

632、                85                  90                  95

633、his leu thr gly ala asn ser ser leu thr gly ser gly gly pro leu

634、            100                 105                 110

635、leu trp glu thr gln leu gly leu ala phe leu arg gly leu ser tyr

636、        115                 120                 125

637、his asp gly ala leu val val thr lys ala gly tyr tyr tyr ile tyr

638、    130                 135                 140

639、ser lys val gln leu gly gly val gly cys pro leu gly leu ala ser

640、145                 150                 155                 160

641、thr ile thr his gly leu tyr lys arg thr pro arg tyr pro glu glu

642、                165                 170                 175

643、leu glu leu leu val ser gln gln ser pro cys gly arg ala thr ser

644、            180                 185                 190

645、ser ser arg val trp trp asp ser ser phe leu gly gly val val his

646、        195                 200                 205

647、leu glu ala gly glu lys val val val arg val leu asp glu arg leu

648、    210                 215                 220

649、val arg leu arg asp gly thr arg ser tyr phe gly ala phe met val

650、225                 230                 235                 240

651、<210>  18

652、<211>  40

653、<212>  prt

654、<213> 人工序列

655、<220>

656、<223>  cd28铰链

657、<400>  18

658、lys ile glu val met tyr pro pro pro tyr leu asp asn glu lys ser

659、1               5                   10                  15

660、asn gly thr ile ile his val lys gly lys his leu cys pro ser pro

661、            20                  25                  30

662、leu phe pro gly pro ser lys pro

663、        35                  40

664、<210>  19

665、<211>  27

666、<212>  prt

667、<213> 人工序列

668、<220>

669、<223>  cd28跨膜

670、<400>  19

671、phe trp val leu val val val gly gly val leu ala cys tyr ser leu

672、1               5                   10                  15

673、leu val thr val ala phe ile ile phe trp val

674、            20                  25

675、<210>  20

676、<211>  679

677、<212>  prt

678、<213> 人工序列

679、<220>

680、<223>  膜锚定的工程化突变体ltα/β

681、<400>  20

682、met thr pro pro glu arg leu phe leu pro arg val cys gly thr thr

683、1               5                   10                  15

684、leu his leu leu leu leu gly leu leu leu val leu leu pro gly ala

685、            20                  25                  30

686、gln gly leu pro gly val gly leu thr pro ser ala ala gln thr ala

687、        35                  40                  45

688、arg gln his pro lys met his leu ala his ser thr leu lys pro ala

689、    50                  55                  60

690、ala his leu ile gly asp pro ser lys gln asn ser leu leu trp arg

691、65                  70                  75                  80

692、ala asn thr asp arg ala phe leu gln asp gly phe ser leu ser asn

693、                85                  90                  95

694、asn ser leu leu val pro thr ser gly ile tyr phe val tyr ser gln

695、            100                 105                 110

696、val val phe ser gly lys ala tyr ser pro lys ala thr ser ser pro

697、        115                 120                 125

698、leu tyr leu ala his glu val gln leu phe ser ser gln tyr pro phe

699、    130                 135                 140

700、his val pro leu leu ser ser gln lys met val tyr pro gly leu gln

701、145                 150                 155                 160

702、glu pro trp leu his ser met tyr his gly ala ala phe gln leu thr

703、                165                 170                 175

704、gln gly asp gln leu ser thr his thr asp gly ile pro his leu val

705、            180                 185                 190

706、leu ser pro ser thr val phe phe gly ala phe ala leu gly gly gly

707、        195                 200                 205

708、gly ser gln asp gln gly gly leu val thr glu thr ala asp pro gly

709、    210                 215                 220

710、ala gln ala gln gln gly leu gly phe gln lys leu pro glu glu glu

711、225                 230                 235                 240

712、pro glu thr asp leu ser pro gly leu pro ala ala his leu ile gly

713、                245                 250                 255

714、ala pro leu lys gly gln gly leu gly trp glu thr thr lys glu gln

715、            260                 265                 270

716、ala phe leu thr ser gly thr gln phe ser asp ala glu gly leu ala

717、        275                 280                 285

718、leu pro gln asp gly leu tyr tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg

719、    290                 295                 300

720、gly arg ala pro pro gly gly gly asp pro gln gly arg ser val thr

721、305                 310                 315                 320

722、leu arg ser ser leu tyr arg ala gly gly ala tyr gly pro gly thr

723、                325                 330                 335

724、pro glu leu leu leu glu gly ala glu thr val thr pro val leu asp

725、            340                 345                 350

726、pro ala arg arg gln gly tyr gly pro leu trp tyr thr ser val gly

727、        355                 360                 365

728、phe gly gly leu val gln leu arg arg gly glu arg val tyr val asn

729、    370                 375                 380

730、ile ser his pro asp met val asp phe ala arg gly lys thr phe phe

731、385                 390                 395                 400

732、gly ala val met val gly gly gly gly gly ser gln asp gln gly gly

733、                405                 410                 415

734、leu val thr glu thr ala asp pro gly ala gln ala gln gln gly leu

735、            420                 425                 430

736、gly phe gln lys leu pro glu glu glu pro glu thr asp leu ser pro

737、        435                 440                 445

738、gly leu pro ala ala his leu ile gly ala pro leu lys gly gln gly

739、    450                 455                 460

740、leu gly trp glu thr thr lys glu gln ala phe leu thr ser gly thr

741、465                 470                 475                 480

742、gln phe ser asp ala glu gly leu ala leu pro gln asp gly leu tyr

743、                485                 490                 495

744、tyr leu tyr cys leu val gly tyr arg gly arg ala pro pro gly gly

745、            500                 505                 510

746、gly asp pro gln gly arg ser val thr leu arg ser ser leu tyr arg

747、        515                 520                 525

748、ala gly gly ala tyr gly pro gly thr pro glu leu leu leu glu gly

749、    530                 535                 540

750、ala glu thr val thr pro val leu asp pro ala arg arg gln gly tyr

751、545                 550                 555                 560

752、gly pro leu trp tyr thr ser val gly phe gly gly leu val gln leu

753、                565                 570                 575

754、arg arg gly glu arg val tyr val asn ile ser his pro asp met val

755、            580                 585                 590

756、asp phe ala arg gly lys thr phe phe gly ala val met val gly gly

757、        595                 600                 605

758、gly gly gly ser lys ile glu val met tyr pro pro pro tyr leu asp

759、    610                 615                 620

760、asn glu lys ser asn gly thr ile ile his val lys gly lys his leu

761、625                 630                 635                 640

762、cys pro ser pro leu phe pro gly pro ser lys pro phe trp val leu

763、                645                 650                 655

764、val val val gly gly val leu ala cys tyr ser leu leu val thr val

765、            660                 665                 670

766、ala phe ile ile phe trp val

767、        675

768、<210>  21

769、<211>  239

770、<212>  prt

771、<213> 人工序列

772、<220>

773、<223>  cd40抗体（g28.5）

774、<400>  21

775、asp ile gln leu gln gln ser gly pro gly leu val lys pro ser gln

776、1               5                   10                  15

777、ser leu ser leu thr cys ser val thr gly tyr ser ile thr thr asn

778、            20                  25                  30

779、tyr asn trp asn trp ile arg gln phe pro gly asn lys leu glu trp

780、        35                  40                  45

781、met gly tyr ile arg tyr asp gly thr ser glu tyr thr pro ser leu

782、    50                  55                  60

783、lys asn arg val ser ile thr arg asp thr ser met asn gln phe phe

784、65                  70                  75                  80

785、leu arg leu thr ser val thr pro glu asp thr ala thr tyr tyr cys

786、                85                  90                  95

787、ala arg leu asp tyr trp gly gln gly thr leu val thr val ser ser

788、            100                 105                 110

789、gly gly gly gly ser gly gly gly gly ser gly gly gly gly ser asp

790、        115                 120                 125

791、ile val met thr gln asn pro leu ser leu pro val ser leu gly asp

792、    130                 135                 140

793、glu ala ser ile ser cys arg ser ser gln ser leu glu asn ser asn

794、145                 150                 155                 160

795、gly asn thr phe leu asn trp phe phe gln lys pro gly gln ser pro

796、                165                 170                 175

797、gln leu leu ile tyr arg val ser asn arg phe ser gly val pro asp

798、            180                 185                 190

799、arg phe ser gly ser gly ser gly thr asp phe thr leu lys ile ser

800、        195                 200                 205

801、arg val glu ala glu asp leu gly val tyr phe cys leu gln val thr

802、    210                 215                 220

803、his val pro tyr thr phe gly gly gly thr thr leu glu ile lys

804、225                 230                 235

805、<210>  22

806、<211>  245

807、<212>  prt

808、<213> 人工序列

809、<220>

810、<223>  cll1抗体（kite）

811、<400>  22

812、asp ile gln leu thr gln ser pro ser ser leu ser ala ser val gly

813、1               5                   10                  15

814、asp arg val ser phe thr cys gln ala ser gln asp ile asn asn phe

815、            20                  25                  30

816、leu asn trp tyr gln gln lys pro gly lys ala pro lys leu leu ile

817、        35                  40                  45

818、tyr asp ala ser asn leu glu thr gly val pro ser arg phe ser gly

819、    50                  55                  60

820、ser gly ser gly thr asp phe thr phe thr ile ser ser leu gln pro

821、65                  70                  75                  80

822、glu asp ile ala thr tyr tyr cys gln gln tyr gly asn leu pro phe

823、                85                  90                  95

824、thr phe gly gly gly thr lys val glu ile lys arg gly gly gly gly

825、            100                 105                 110

826、ser gly gly gly gly ser gly gly gly gly ser gln val gln leu gln

827、        115                 120                 125

828、glu ser gly pro gly leu val lys pro ser glu thr leu ser leu thr

829、    130                 135                 140

830、cys thr val ser gly gly ser ile ser ser tyr tyr trp ser trp ile

831、145                 150                 155                 160

832、arg gln pro pro gly lys gly leu glu trp ile gly tyr ile tyr tyr

833、                165                 170                 175

834、ser gly ser thr asn tyr asn pro ser leu lys ser arg val thr ile

835、            180                 185                 190

836、ser val asp thr ser lys asn gln phe ser leu lys leu ser ser val

837、        195                 200                 205

838、thr ala ala asp thr ala val tyr tyr cys val ser leu val tyr cys

839、    210                 215                 220

840、gly gly asp cys tyr ser gly phe asp tyr trp gly gln gly thr leu

841、225                 230                 235                 240

842、val thr val ser ser

843、                245

844、<210>  23

845、<211>  248

846、<212>  prt

847、<213> 人工序列

848、<220>

849、<223>  cll1抗体（icell）

850、<400>  23

851、asp ile gln met thr gln ser pro ser ser leu ser ala ser val gly

852、1               5                   10                  15

853、asp arg val thr ile thr cys arg ala ser gln ser val ser thr ser

854、            20                  25                  30

855、ser tyr asn tyr met his trp tyr gln gln lys pro gly lys pro pro

856、        35                  40                  45

857、lys leu leu ile lys tyr ala ser asn leu glu ser gly val pro ser

858、    50                  55                  60

859、arg phe ser gly ser gly ser gly thr asp phe thr leu thr ile ser

860、65                  70                  75                  80

861、ser leu gln pro glu asp phe ala thr tyr tyr cys gln his ser trp

862、                85                  90                  95

863、glu ile pro leu thr phe gly gln gly thr lys val glu ile lys gly

864、            100                 105                 110

865、gly gly gly ser gly gly gly gly ser gly gly gly gly ser glu val

866、        115                 120                 125

867、gln leu val gln ser gly ala glu val lys lys pro gly ala ser val

868、    130                 135                 140

869、lys val ser cys lys ala ser gly tyr ser phe thr asp tyr tyr met

870、145                 150                 155                 160

871、his trp val arg gln ala pro gly gln gly leu glu trp ile gly arg

872、                165                 170                 175

873、ile asn pro tyr asn gly ala ala phe tyr ser gln asn phe lys asp

874、            180                 185                 190

875、arg val thr leu thr val asp thr ser thr ser thr ala tyr leu glu

876、        195                 200                 205

877、leu ser ser leu arg ser glu asp thr ala val tyr tyr cys ala ile

878、    210                 215                 220

879、glu arg gly ala asp leu glu gly tyr ala met asp tyr trp gly gln

880、225                 230                 235                 240

881、gly thr leu val thr val ser ser

882、                245

883、<210>  24

884、<211>  261

885、<212>  prt

886、<213> 人工序列

887、<220>

888、<223>  cd40配体

889、<400>  24

890、met ile glu thr tyr asn gln thr ser pro arg ser ala ala thr gly

891、1               5                   10                  15

892、leu pro ile ser met lys ile phe met tyr leu leu thr val phe leu

893、            20                  25                  30

894、ile thr gln met ile gly ser ala leu phe ala val tyr leu his arg

895、        35                  40                  45

896、arg leu asp lys ile glu asp glu arg asn leu his glu asp phe val

897、    50                  55                  60

898、phe met lys thr ile gln arg cys asn thr gly glu arg ser leu ser

899、65                  70                  75                  80

900、leu leu asn cys glu glu ile lys ser gln phe glu gly phe val lys

901、                85                  90                  95

902、asp ile met leu asn lys glu glu thr lys lys glu asn ser phe glu

903、            100                 105                 110

904、met gln lys gly asp gln asn pro gln ile ala ala his val ile ser

905、        115                 120                 125

906、glu ala ser ser lys thr thr ser val leu gln trp ala glu lys gly

907、    130                 135                 140

908、tyr tyr thr met ser asn asn leu val thr leu glu asn gly lys gln

909、145                 150                 155                 160

910、leu thr val lys arg gln gly leu tyr tyr ile tyr ala gln val thr

911、                165                 170                 175

912、phe cys ser asn arg glu ala ser ser gln ala pro phe ile ala ser

913、            180                 185                 190

914、leu cys leu lys ser pro gly arg phe glu arg ile leu leu arg ala

915、        195                 200                 205

916、ala asn thr his ser ser ala lys pro cys gly gln gln ser ile his

917、    210                 215                 220

918、leu gly gly val phe glu leu gln pro gly ala ser val phe val asn

919、225                 230                 235                 240

920、val thr asp pro ser gln val ser his gly thr gly phe thr ser phe

921、                245                 250                 255

922、gly leu leu lys leu

923、            260

924、<210>  25

925、<211>  124

926、<212>  prt

927、<213> 人工序列

928、<220>

929、<223>  抗gpc2 sdab

930、<400>  25

931、glu val gln leu val glu ser gly gly gly leu val gln pro gly gly

932、1               5                   10                  15

933、ser leu arg leu ser cys ala ile ser glu phe thr tyr lys asn thr

934、            20                  25                  30

935、cys val gly trp phe arg gln ala pro gly lys gly arg glu gly val

936、        35                  40                  45

937、ala ala ile asp ser asp gly asn thr asn tyr val asp ser val lys

938、    50                  55                  60

939、gly arg phe thr ile ser gln asp asn ser lys asn thr val tyr leu

940、65                  70                  75                  80

941、gln met asn ser leu arg ala glu asp thr ala met tyr tyr cys ala

942、                85                  90                  95

943、ala gly ala tyr cys gly arg leu leu leu trp ile gly asn tyr ala

944、            100                 105                 110

945、tyr trp gly gln gly thr leu val thr val ser ser

946、        115                 120

947、<210>  26

948、<211>  42

949、<212>  prt

950、<213> 人工序列

951、<220>

952、<223>  4-1bb共刺激结构域

953、<400>  26

954、lys arg gly arg lys lys leu leu tyr ile phe lys gln pro phe met

955、1               5                   10                  15

956、arg pro val gln thr thr gln glu glu asp gly cys ser cys arg phe

957、            20                  25                  30

958、pro glu glu glu glu gly gly cys glu leu

959、        35                  40

960、<210>  27

961、<211>  112

962、<212>  prt

963、<213> 人工序列

964、<220>

965、<223>  cd3z

966、<400>  27

967、arg val lys phe ser arg ser ala asp ala pro ala tyr lys gln gly

968、1               5                   10                  15

969、gln asn gln leu tyr asn glu leu asn leu gly arg arg glu glu tyr

970、            20                  25                  30

971、asp val leu asp lys arg arg gly arg asp pro glu met gly gly lys

972、        35                  40                  45

973、pro arg arg lys asn pro gln glu gly leu tyr asn glu leu gln lys

974、    50                  55                  60

975、asp lys met ala glu ala tyr ser glu ile gly met lys gly glu arg

976、65                  70                  75                  80

977、arg arg gly lys gly his asp gly leu tyr gln gly leu ser thr ala

978、                85                  90                  95

979、thr lys asp thr tyr asp ala leu his met gln ala leu pro pro arg

980、            100                 105                 110

981、<210>  28

982、<211>  5

983、<212>  prt

984、<213> 人工序列

985、<220>

986、<223>  肽接头

987、<220>

988、<221>  重复

989、<222>  (1)..(5)

990、<223>  gsggs可以重复n次，其中n是至少为一的整数

991、<400>  28

992、gly ser gly gly ser

993、1               5

994、<210>  29

995、<211>  4

996、<212>  prt

997、<213> 人工序列

998、<220>

999、<223>  肽接头

1000、<220>

1001、<221>  重复

1002、<222>  (1)..(4)

1003、<223>  gggs可以重复n次，其中n是至少为一的整数

1004、<400>  29

1005、gly gly gly ser

1006、1

1007、<210>  30

1008、<211>  5

1009、<212>  prt

1010、<213> 人工序列

1011、<220>

1012、<223>  肽接头

1013、<220>

1014、<221>  重复

1015、<222>  (1)..(5)

1016、<223>  ggggs可以重复n次，其中n是至少为一的整数

1017、<400>  30

1018、gly gly gly gly ser

1019、1               5

技术实现思路