用于抑制PLP1表达的组合物和方法与流程

背景技术：

1、髓磷脂蛋白脂质蛋白(plp)是在来自中枢神经系统(cns)的髓鞘中发现的最丰富的蛋白质。tetraspan蛋白在髓磷脂的结构和功能中起主要作用，并且对于少突胶质细胞和轴突之间的通讯是重要的(gruennfelder等人，《解剖学杂志(j anat)》，219:33–43(2011))。蛋白质起到神经保护作用；它是将蛋白质适当隔离到髓磷脂室中所必需的，据称对轴突的轴突-神经胶质代谢和长期支持很重要(werner等人，《神经科学杂志(jneurosci)》，27:7717-30(2007))。

2、plp1基因的表达以空间-时间方式调节(wight和dobrettova，《细胞和分子生命科学(cell mol life sci)》，61:810–21(2004))。在发育的活跃髓鞘形成期，在少突胶质细胞中产生高水平。其表达必须严格调节，如通过与plp1的表达相关联的x连锁遗传疾病所证明的。

3、在人类中，含有plp1基因的染色体区域的区段性缺失(raskind等人，《美国人类遗传学杂志(am j hum genet)》，49:1355–60(1991)；inoue等人，《美国人类遗传学杂志》，71:838–853(2002))和复制(sistermans等人，《神经学(neurology)》，50:1749–54(1998)；inoue等人，《神经病学年鉴(ann neurol)》，45:624–32(1999)；mimault等人，《美国人类遗传学杂志》，65:360–69(1999)；hodes等人，《美国人类遗传学杂志》67:14–22(2000))或更高的拷贝数(wolf等人，《脑(brain)》128:743–51(2005))可以导致髓鞘形成病症佩梅病(pelizaeus–merzbacher disease)(pmd)或相关的等位基因病症、即痉挛性截瘫2型(spg2)。

4、需要靶向plp1基因以防止此类疾病的策略。

技术实现思路

1、本公开至少部分地基于以下发现：包括如本文所述的合成rnai寡核苷酸的小型干扰rna(sirna)可用于沉默编码与脑组织中的神经疾病或病症相关联的蛋白质的mrna,如在神经元和神经胶质细胞(包括少突胶质细胞、小胶质细胞和星形胶质细胞)中表达的mrna。令人惊讶地发现，在不存在细胞特异性或组织特异性靶向配体或递送媒介物(如病毒载体、脂质体或脂质纳米颗粒)的情况下，此类rnai寡核苷酸有效地沉默在神经胶质细胞(如少突胶质细胞)中表达的mrna。还发现，当与药学上可接受的载剂一起配制时，此类rnai寡核苷酸提供了用于直接施用于受试者的脑脊液(csf)的组合物，如通过鞘内、脑室内或小脑内延髓池施用。出乎意料的是，在将rnai寡核苷酸单次或重复施用到非人灵长类动物的cfs中后，此类rnai寡核苷酸在各种脑区域中表现出靶mrna(plp1)表达的持久敲低，可达84天。

2、本公开部分地基于双链寡核苷酸(例如，rnai寡核苷酸)降低中枢神经系统(cns)中plp1表达的发现。因此，鉴定了plp1mrna内的靶序列，并且产生了与这些靶序列结合并抑制plp1 mrna表达的rnai寡核苷酸。如本文所证实的，rnai寡核苷酸抑制cns的不同区域中的鼠plp1表达和/或猴和人plp1表达。不受理论的束缚，本文所述的rnai寡核苷酸可用于治疗与plp1表达相关联的疾病、病症或病状(例如，佩梅病(pmd)和/或痉挛性截瘫2型(spg2)。在一些实施例中，本文所述的rnai寡核苷酸可用于治疗与异常plp1表达(例如，由plp1基因复制或有害的plp1突变等位基因的表达导致的plp1过表达)相关联的疾病、病症或病状。在一些实施例中，本文所述的rnai寡核苷酸可用于治疗与plp1基因中的突变相关联的疾病、病症或病状。

3、由于plp1复制是与pmd相关联的常见突变，因此具有鼠plp1基因的复制的小鼠模型被用于证明本文所述的rnai寡核苷酸的功效。靶向鼠plp1的rnai寡核苷酸不仅降低了plp1 mrna和蛋白质的水平，而且还逆转了在复制模型中诱导的星形胶质细胞增生和髓鞘形成障碍。值得注意的是，由于plp1对于正常的脑功能是必需的，因此证实rnai寡核苷酸不完全消除plp1表达，而是降低与野生型小鼠中表达的那些相似的plp1水平。不希望受理论的束缚，这些结果指示本文所述的rnai寡核苷酸不仅可用于治疗与plp1表达相关联的疾病、病症或病状，而且还可用于维持足够水平的plp1表达以支持有益的脑功能并避免不希望的副作用。

4、还已经证实靶向plp1的rnai寡核苷酸减少神经胶质纤维酸性蛋白(gfap)的表达，所述神经胶质纤维酸性蛋白是一种星形胶质细胞增生的标志物。当星形胶质细胞对cns中的损伤和疾病作出响应时，就发生星形胶质细胞增生。如本文所述,gfap表达的增加在具有plp1的复制的小鼠模型中发生，指示cns中的损伤。如本文所证实，靶向plp1的rnai寡核苷酸不仅减少该小鼠模型中的plp1表达，而且还减少gfap。不希望受理论的束缚，在已经接受或正在接受用本公开的rnai寡核苷酸治疗的受试者中监测gfap的表达水平可用于监测治疗结果、监测与plp1表达相关联的疾病、病状或病症的进展和/或用于确定对用本公开的rnai寡核苷酸治疗的响应性。

5、因此，在一些方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括有义链和反义链，其中所述有义链和反义链形成双链体区域，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸。

6、在一些方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包括与seq id no:212-231中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸。

7、在前述或相关方面中的任一个中，有义链的长度为15至50个核苷酸。在一些实施例中，有义链的长度为18至36个核苷酸。

8、在前述或相关方面中的任一个中，反义链的长度为15至30个核苷酸。

9、在前述或相关方面中的任一个中，反义链的长度为22个核苷酸，并且其中反义链和有义链形成长度至少19个核苷酸，任选地长度至少20个核苷酸的双链体区域。

10、在前述或相关方面中的任一个中，互补性区域的长度为至少19个连续核苷酸，任选地长度为至少20个核苷酸。

11、在前述或相关方面中的任一个中，有义链的3'端包括被示出为s1-l-s2的茎-环，其中s1与s2互补，并且其中l在s1与s2之间形成长度为3至5个核苷酸的环。

12、在一些方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括长度15至50个核苷酸的有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸。

13、在其他方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括长度15至50个核苷酸的有义链和长度15至30个核苷酸的反义链，其中所述有义链和反义链形成双链体区域，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸。

14、在其他方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括长度15至50个核苷酸的有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。

15、在另外的方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括长度18至36个核苷酸的有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。

16、在其他方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括长度18至36个核苷酸的有义链和长度22个核苷酸的反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。

17、在一些方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括长度18至36个核苷酸的有义链和长度22个核苷酸的反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述有义链的3'端包括阐述为s1-l-s2的茎环，其中s1与s2互补，并且其中l在s1和s2之间形成长度为3-5个核苷酸的环，其中所述反义链包括与seq idno:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。

18、在其他方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括长度36个核苷酸的有义链和长度22个核苷酸的反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述有义链的3'端包括阐述为s1-l-s2的茎环，其中s1与s2互补，并且其中l在s1和s2之间形成长度为3-5个核苷酸的环，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。

19、在其他方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括长度36个核苷酸的有义链和长度22个核苷酸的反义链，其中所述有义链和所述反义链形成长度至少19个核苷酸，任选地长度20个核苷酸的双链体区域，其中所述有义链的3'端包括阐述为s1-l-s2的茎环，其中s1与s2互补，并且其中l在s1和s2之间形成长度为3-5个核苷酸的环，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为19个连续核苷酸，任选地长度为20个核苷酸。

20、一种用于减少plp1表达的双链rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括：

21、(i)长度19-30个核苷酸的反义链，其中所述反义链包括有包括与plp1mrna靶序列的互补性区域的核苷酸序列，其中所述互补性区域选自seq id no:235-254；和

22、(ii)长度19-50个核苷酸的有义链，其包括与反义链的互补性区域，其中反义链和有义链是分开的链，它们形成不对称的双链体区域，该双链体区域在反义链的3'末端处具有1-4个核苷酸的突出端。在一些方面，有义链包括选自seq id no:212-231的核苷酸序列。

23、在前述或相关方面中的任一个中，靶序列包括seq id no:212-231中的任一者。

24、在前述或相关方面中的任一个中，互补性区域与plp1 mrna靶序列的长度相差不超过3个核苷酸。在其他方面，互补性区域与plp1 mrna靶序列完全互补。

25、在前述或相关方面中的任一个中，l为三环或四环。在一些方面，l是四环。在一些方面，四环包括序列5'-gaaa-3'。在一些方面，l的一个或多个核苷酸包括2'-o-甲基修饰。在一些方面，l的每个核苷酸包括2'-o-甲基修饰。

26、在前述或相关方面中的任一个中，s1和s2为长度1-10个核苷酸并且具有相同的长度。在一些方面，s1和s2为长度1个核苷酸、2个核苷酸、3个核苷酸、4个核苷酸、5个核苷酸、6个核苷酸、7个核苷酸、8个核苷酸、9个核苷酸或10个核苷酸。在一些方面，s1和s2为长度6个核苷酸。在一些实施例中，茎-环包括序列5'-gcagccgaaaggcugc-3'(seq id no:190)。

27、在前述或相关方面中的任一个中，反义链包括长度为一个或多个核苷酸的3'突出端序列。在一些方面，3'突出端序列的长度为2个核苷酸，任选地其中所述3'突出端序列是gg。

28、在前述或相关方面中的任一个中，寡核苷酸包括至少一个经修饰的核苷酸。在一些方面，经修饰的核苷酸包括2'-修饰。在一些方面，2'-修饰是选自2'-氨基乙基、2'-氟、2'-o-甲基、2'-o-甲氧基乙基和2'-脱氧-2'-氟-β-d-阿拉伯糖核酸的修饰。在一些方面，包括寡核苷酸的所有核苷酸都是经修饰的，任选地，其中所述修饰是选自2'-氟和2'-o-甲基的2'-修饰。

29、在前述或相关方面中的任一个中，有义链的约10-15％、10％、11％、12％、13％、14％或15％的核苷酸包括2'-氟修饰。在一些方面，反义链的约25-35％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、31％、32％、33％、34％或35％的核苷酸包括2'-氟修饰；在一些方面，寡核苷酸的约15-25％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％或25％的核苷酸包括2'-氟修饰。

30、在前述或相关方面中的任一个中，所述有义链包括36个核苷酸，其中位置从5'至3'编号为1-36，其中位置8-11包括2'-氟修饰；在一些方面，反义链包括22个核苷酸，其中位置从5'至3'编号为1-22，并且其中位置2、3、4、5、7、10和14包括2'-氟修饰。在一些方面，寡核苷酸的其余核苷酸包括2'-o-甲基修饰。

31、在前述或相关方面中的任一个中，寡核苷酸包括至少一个经修饰的核苷酸间键。在一些方面，至少一个修饰的核苷酸间键是硫代磷酸酯键。

32、在前述或相关方面中的任一个中，反义链的5'核苷酸的糖的4'-碳包括磷酸酯类似物。在一些方面，磷酸酯类似物是氧基甲基膦酸酯、乙烯基膦酸酯或丙二酰基膦酸酯，任选地其中所述磷酸酯类似物是包括5'-甲氧基膦酸酯-4'-氧基的4'-磷酸酯类似物。在一些方面，磷酸酯类似物是4'-氧基甲基膦酸酯。

33、在前述或相关方面中的任一个中，寡核苷酸的至少一个核苷酸与一种或多种靶向配体缀合。在一些方面，每个靶向配体包括碳水化合物、氨基糖、胆固醇、多肽或脂质。在一些方面，每个靶向配体包括n-乙酰半乳糖胺(galnac)部分。在一些方面，galnac部分包括单价galnac部分、二价galnac部分、三价galnac部分或四价galnac部分。在一些方面，茎-环的l的高达4个核苷酸各自与单价galnac部分缀合。

34、在一些方面，寡核苷酸不包括靶向配体。

35、在前述或相关方面中的任一个中，所述有义链包括seq id no:76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108和110中任一者的核苷酸序列。

36、在前述或相关方面中的任一个中，所述反义链包括seq id no:77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109和111中任一者的核苷酸序列。

37、在前述或相关方面中的任一个中，所述有义链和反义链包括选自由以下组成的组的核苷酸序列：

38、(a)分别为seq id no:76和77；

39、(b)分别为seq id no:78和79；

40、(c)分别为seq id no:80和81；

41、(d)分别为seq id no:82和83；

42、(e)分别为seq id no:84和85；

43、(f)分别为seq id no:86和87；

44、(g)分别为seq id no:88和89；

45、(h)分别为seq id no:90和91；

46、(i)分别为seq id no:92和93；

47、(j)分别为seq id no:94和95；

48、(k)分别为seq id no:96和97；

49、(l)分别为seq id no:98和99；

50、(m)分别为seq id no:100和101；

51、(n)分别为seq id no:102和103；

52、(o)分别为seq id no:104和105；

53、(p)分别为seq id no:106和107；

54、(q)分别为seq id no:108和109；以及

55、(r)分别为seq id no:110和111。

56、在一些方面，所述有义链包括如seq id no:76中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:77中所示的核苷酸序列。在其他方面，所述有义链包括如seq idno:78中所示的核苷酸序列，其中反义链包括如seq id no:79中所示的核苷酸序列。在其他方面，所述有义链包括如seq id no:80中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seqid no:81中所示的核苷酸序列。在一些方面，所述有义链包括如seq id no:82所示的核苷酸序列，其中反义链包括如seq id no:83所示的核苷酸序列。在其他方面，所述有义链包括如seq id no:84中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:85中所示的核苷酸序列。在又其他方面，所述有义链包括如seq id no:86中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:87中所示的核苷酸序列。在一些方面，所述有义链包括如seq idno:88中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:89中所示的核苷酸序列。在其他方面，所述有义链包括如seq id no:90中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:91中所示的核苷酸序列。在又其他方面，所述有义链包括如seq id no:92中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:93中所示的核苷酸序列。在一些方面，所述有义链包括如seq id no:94中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:95中所示的核苷酸序列。在其他方面，所述有义链包括如seq id no:96中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:97中所示的核苷酸序列。在又其他方面，所述有义链包括如seq id no:98中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:99中所示的核苷酸序列。在一些方面，所述有义链包括如seq id no:100所示的核苷酸序列，其中反义链包括如seq id no:101所示的核苷酸序列。在其他方面，所述有义链包括如seq id no:102中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:103中所示的核苷酸序列。在又其他方面，所述有义链包括如seq id no:104中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:105中所示的核苷酸序列。在一些方面，所述有义链包括如seq id no:106中所示的核苷酸序列，其中反义链包括如seq id no:107中所示的核苷酸序列。在其他方面，所述有义链包括如seq id no:108中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq idno:109中所示的核苷酸序列。在又其他方面，所述有义链包括如seq id no:110中所示的核苷酸序列，其中所述反义链包括如seq id no:111中所示的核苷酸序列。

57、在一些方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中包括有义链和反义链的所有核苷酸都是经修饰的，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸。

58、在另外的方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中包括有义链和反义链的所有核苷酸都是经修饰的，其中所述反义链的5'核苷酸的糖的4'-碳包括磷酸酯类似物，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸。

59、在其他方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中包括有义链和反义链的所有核苷酸都是经修饰的，其中所述反义链的5'核苷酸的糖的4'-碳包括磷酸酯类似物，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸。

60、在一些方面，本公开提供了一种用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸，所述寡核苷酸包括有义链和反义链，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中包括有义链和所述反义链的所有核苷酸都是经修饰的，其中所述反义链和所述有义链包括一个或多个2'-氟和2'-o-甲基修饰的核苷酸和至少一个硫代磷酸酯键，其中所述反义链的5'核苷酸的糖的4'-碳包括磷酸酯类似物，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸。

61、在前述或相关方面中的任一个中，所述有义链包括seq id no:112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146和191中的任一者。

62、在前述或相关方面中的任一个中，所述反义链包括seq id no:113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147和192中的任一者。在前述或相关方面中的任一个中，所述反义链包括seq id no:113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147和207中的任一者。

63、在前述或相关方面中的任一个中，所述有义链和反义链选自由以下组成的组：

64、(a)分别为seq id no:112和113；

65、(b)分别为seq id no:114和115；

66、(c)分别为seq id no:116和117；

67、(d)分别为seq id no:118和119；

68、(e)分别为seq id no:120和121；

69、(f)分别为seq id no:122和123；

70、(g)分别为seq id no:124和125；

71、(h)分别为seq id no:126和127；

72、(i)分别为seq id no:128和129；

73、(j)分别为seq id no:130和131；

74、(k)分别为seq id no:131和133；

75、(l)分别为seq id no:134和135；

76、(m)分别为seq id no:136和137；

77、(n)分别为seq id no:138和139；

78、(o)分别为seq id no:140和141；

79、(p)分别为seq id no:142和143；

80、(q)分别为seq id no:144和145；

81、(r)分别为seq id no:146和147；以及

82、(s)分别为seq id no:191和192。

83、在前述或相关方面中的任一个中，所述有义链和反义链选自由以下组成的组：

84、(a)分别为seq id no:112和113；

85、(b)分别为seq id no:114和115；

86、(c)分别为seq id no:116和117；

87、(d)分别为seq id no:118和119；

88、(e)分别为seq id no:120和121；

89、(f)分别为seq id no:122和123；

90、(g)分别为seq id no:124和125；

91、(h)分别为seq id no:126和127；

92、(i)分别为seq id no:128和129；

93、(j)分别为seq id no:130和131；

94、(k)分别为seq id no:131和133；

95、(l)分别为seq id no:134和135；

96、(m)分别为seq id no:136和137；

97、(n)分别为seq id no:138和139；

98、(o)分别为seq id no:140和141；

99、(p)分别为seq id no:142和143；

100、(q)分别为seq id no:144和145；

101、(r)分别为seq id no:146和147；以及

102、(s)分别为seq id no:191和207。

103、在一些方面，有义链包括seq id no:112，并且其中反义链包括seq id no:113。在其他方面，有义链包括seq id no:114，并且其中反义链包括seq id no:115。在又其他方面，有义链包括seq id no:116，并且其中反义链包括seq id no:117。在一些方面，有义链包括seq id no:118，并且其中反义链包括seq id no:119。在其他方面，有义链包括seq idno:120，并且其中反义链包括seq id no:121。在又其他方面，有义链包括seq id no:122，并且其中反义链包括seq id no:123。在一些方面，有义链包括seq id no:124，并且其中反义链包括seq id no:125。在其他方面，有义链包括seq id no:126，并且其中反义链包括seq id no:127。在一些方面，有义链包括seq id no:128，并且其中反义链包括seq id no:129。在其他方面，有义链包括seq id no:130，并且其中反义链包括seq id no:131。在又其他方面，有义链包括seq id no:132，并且其中反义链包括seq id no:133。在一些方面，有义链包括seq id no:134，并且其中反义链包括seq id no:135。在其他方面，有义链包括seq id no:136，并且其中反义链包括seq id no:137。在又其他方面，有义链包括seq idno:138，并且其中反义链包括seq id no:139。在一些方面，有义链包括seq id no:140，并且其中反义链包括seq id no:141。在其他方面，有义链包括seq id no:142，并且其中反义链包括seq id no:143。在一些方面，有义链包括seq id no:144，并且其中反义链包括seqid no:145。在其他方面，有义链包括seq id no:146，并且其中反义链包括seq id no:147。在其他方面，有义链包括seq id no:191，并且其中反义链包括seq id no:192。在其他方面，有义链包括seq id no:191，并且其中反义链包括seq id no:207。

104、在一些方面，本公开提供了一种用于治疗患有与plp1表达相关联的疾病、病症或病状的受试者的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的本文所述的rnai寡核苷酸或其药物组合物，从而治疗受试者。在一些方面，将rnai寡核苷酸施用于中枢神经系统。在一些方面，将rnai寡核苷酸施用于脑髓液。在一些方面，rnai寡核苷酸被鞘内、脑室内或通过小脑内延髓池注射施用。在一些方面，施用单剂量的rnai寡核苷酸。在其他方面，施用多于一个剂量的rnai寡核苷酸。

105、在前述或相关方面中的任一个中，plp1表达减少持续约1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周。在一些方面，plp1表达减少持续约1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月。在一些方面，plp1表达减少持续约7天、14天、21天、28天、35天、42天、49天、56天、63天、70天、77天、84天或91天。

106、在一些实施例中，本公开提供了一种包括本文所述的rnai寡核苷酸和药学上可接受的载剂、递送剂或赋形剂的药物组合物。

107、在一些实施例中，本公开提供了一种将寡核苷酸递送至受试者的方法，所述方法包括将本文所述的药物组合物施用于受试者。

108、在另一方面，本公开提供了一种用于减少细胞、细胞的群体或受试者中的plp1表达的方法，所述方法包括以下步骤：

109、i.使所述细胞或细胞的群体与本文所述的rnai寡核苷酸或药物组合物接触；或

110、ii.向所述受试者施用本文所述的rnai寡核苷酸或药物组合物。在一些方面，减少plp1表达包括减少plp1 mrna的量或水平、plp1蛋白的量或水平或两者。在一些方面，plp1表达减少持续约1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周。在一些方面，plp1表达减少持续约1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月。在一些方面，plp1表达减少持续约7天、14天、21天、28天、35天、42天、49天、56天、63天、70天、77天、84天或91天。在一些方面，受试者患有与plp1表达相关联的疾病、病症或病状。在一些方面，与plp1表达相关联的疾病、病症或病状是佩梅病(pmd)或痉挛性截瘫2型(spg2)。在一些方面，rnai寡核苷酸或药物组合物与第二组合物或治疗剂组合施用。

111、在其他方面，本公开提供了一种用于治疗患有与plp1表达相关联的疾病、病症或病状的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包括有义链和反义链的rnai寡核苷酸，其中所述有义链和所述反义链形成双链体区域，其中所述反义链包括与seq id no:171-188中任一者的plp1 mrna靶序列的互补性区域，并且其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸。

112、在另一方面，本公开提供了一种用于治疗患有与plp1表达相关联的疾病、病症或病状的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包括选自表5中所示的行的有义链和反义链的rnai寡核苷酸或其药物组合物，从而治疗所述受试者。

113、在其他方面，本公开提供了一种用于治疗患有与plp1表达相关联的疾病、病症或病状的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包括有义链和反义链的rnai寡核苷酸，其中所述有义链和反义链包括选自由以下组成的组的核苷酸序列：

114、(a)分别为seq id no:76和77；

115、(b)分别为seq id no:78和79；

116、(c)分别为seq id no:80和81；

117、(d)分别为seq id no:82和83；

118、(e)分别为seq id no:84和85；

119、(f)分别为seq id no:86和87；

120、(g)分别为seq id no:88和89；

121、(h)分别为seq id no:90和91；

122、(i)分别为seq id no:92和93；

123、(j)分别为seq id no:94和95；

124、(k)分别为seq id no:96和97；

125、(l)分别为seq id no:98和99；

126、(m)分别为seq id no:100和101；

127、(n)分别为seq id no:102和103；

128、(o)分别为seq id no:104和105；

129、(p)分别为seq id no:106和107；

130、(q)分别为seq id no:108和109；以及

131、(r)分别为seq id no:110和111。

132、在其他方面，本公开提供了一种用于治疗患有与plp1表达相关联的疾病、病症或病状的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包括有义链和反义链的rnai寡核苷酸，其中所述有义链和反义链选自由以下组成的组：

133、(a)分别为seq id no:112和113；

134、(b)分别为seq id no:114和115；

135、(c)分别为seq id no:116和117；

136、(d)分别为seq id no:118和119；

137、(e)分别为seq id no:120和121；

138、(f)分别为seq id no:122和123；

139、(g)分别为seq id no:124和125；

140、(h)分别为seq id no:126和127；

141、(i)分别为seq id no:128和129；

142、(j)分别为seq id no:130和131；

143、(k)分别为seq id no:131和133；

144、(l)分别为seq id no:134和135；

145、(m)分别为seq id no:136和137；

146、(n)分别为seq id no:138和139；

147、(o)分别为seq id no:140和141；

148、(p)分别为seq id no:142和143；

149、(q)分别为seq id no:144和145；

150、(r)分别为seq id no:146和147；以及

151、(s)分别为seq id no:191和192。

152、在其他方面，本公开提供了一种用于治疗患有与plp1表达相关联的疾病、病症或病状的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包括有义链和反义链的rnai寡核苷酸，其中所述有义链和反义链选自由以下组成的组：

153、(a)分别为seq id no:112和113；

154、(b)分别为seq id no:114和115；

155、(c)分别为seq id no:116和117；

156、(d)分别为seq id no:118和119；

157、(e)分别为seq id no:120和121；

158、(f)分别为seq id no:122和123；

159、(g)分别为seq id no:124和125；

160、(h)分别为seq id no:126和127；

161、(i)分别为seq id no:128和129；

162、(j)分别为seq id no:130和131；

163、(k)分别为seq id no:131和133；

164、(l)分别为seq id no:134和135；

165、(m)分别为seq id no:136和137；

166、(n)分别为seq id no:138和139；

167、(o)分别为seq id no:140和141；

168、(p)分别为seq id no:142和143；

169、(q)分别为seq id no:144和145；

170、(r)分别为seq id no:146和147；以及

171、(s)分别为seq id no:191和207。

172、在一些方面，有义链包括seq id no:112，并且其中反义链包括seq id no:113。在其他方面，有义链包括seq id no:114，并且其中反义链包括seq id no:115。在又其他方面，有义链包括seq id no:116，并且其中反义链包括seq id no:117。在一些方面，有义链包括seq id no:118，并且其中反义链包括seq id no:119。在其他方面，有义链包括seq idno:120，并且其中反义链包括seq id no:121。在又其他方面，有义链包括seq id no:122，并且其中反义链包括seq id no:123。在一些方面，有义链包括seq id no:124，并且其中反义链包括seq id no:125。在其他方面，有义链包括seq id no:126，并且其中反义链包括seq id no:127。在一些方面，有义链包括seq id no:128，并且其中反义链包括seq id no:129。在其他方面，有义链包括seq id no:130，并且其中反义链包括seq id no:131。在又其他方面，有义链包括seq id no:132，并且其中反义链包括seq id no:133。在一些方面，有义链包括seq id no:134，并且其中反义链包括seq id no:135。在其他方面，有义链包括seq id no:136，并且其中反义链包括seq id no:137。在又其他方面，有义链包括seq idno:138，并且其中反义链包括seq id no:139。在一些方面，有义链包括seq id no:140，并且其中反义链包括seq id no:141。在其他方面，有义链包括seq id no:142，并且其中反义链包括seq id no:143。在一些方面，有义链包括seq id no:144，并且其中反义链包括seqid no:145。在其他方面，有义链包括seq id no:146，并且其中反义链包括seq id no:147。在其他方面，有义链包括seq id no:191，并且其中反义链包括seq id no:192。在其他方面，有义链包括seq id no:191，并且其中反义链包括seq id no:207。

173、在一些方面，与plp1表达相关联的疾病、病症或病状是佩梅病(pmd)或痉挛性截瘫2型(spg2)。

174、在前述或相关方面中的任一个中，将rnai寡核苷酸施用于中枢神经系统。在一些方面，将rnai寡核苷酸施用于脑髓液。在一些方面，rnai寡核苷酸被鞘内、脑室内或通过小脑内延髓池注射施用。在一些方面，施用单剂量的rnai寡核苷酸。在其他方面，施用多于一个剂量的rnai寡核苷酸。

175、在前述或相关方面中的任一个中，plp1表达减少持续约1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周。在一些方面，plp1表达减少持续约1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月。在一些方面，plp1表达减少持续约7天、14天、21天、28天、35天、42天、49天、56天、63天、70天、77天、84天或91天。

176、在一些方面，本公开提供了本文所述的rnai寡核苷酸或药物组合物在制造用于治疗与plp1表达相关联的疾病、病症或病状，任选地用于治疗佩梅病(pmd)或痉挛性截瘫2型(spg2)的药物中的用途。

177、在一些方面，本公开提供了本文所述的rnai寡核苷酸或药物组合物的用途，其用于或适于用于治疗与plp1表达相关联的疾病、病症或病状，任选地用于治疗佩梅病(pmd)或痉挛性截瘫2型(spg2)。

178、在其他方面，本公开提供了一种试剂盒，其包括本文所述的rnai寡核苷酸、任选的药学上可接受的载剂，以及包括施用于患有与plp1表达相关联的疾病、病症或病状的受试者的说明书的包装插页。

179、在前述或相关方面中的任一个中，与plp1表达相关联的疾病、病症或病状是佩梅病(pmd)或痉挛性截瘫2型(spg2)。

180、在一些方面，本公开提供了一种组合物，其包括用于减少plp1表达的rnai寡核苷酸和药学上可接受的载剂，其中所述寡核苷酸包括形成双链体区域的有义链和反义链，其中所述反义链包括与plp1 mrna靶序列的互补性区域，其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸，并且其中所述组合物被配制成用于施用于受试者的脑髓液(csf)。在一些方面，rnai寡核苷酸是本文所述的rnai寡核苷酸。在一些方面，所述组合物被配制成用于鞘内、脑室内或小脑内延髓池施用。在一些方面，寡核苷酸不包括靶向配体。在一些方面，寡核苷酸不在脂质、脂质体或脂质纳米颗粒递送媒介物中配制。在一些方面，药学上可接受的载剂包括磷酸盐缓冲盐水。

181、在其他方面，本公开提供了一种用于减少受试者的中枢神经系统中plp1的表达的方法，其包括施用包括rnai寡核苷酸和药学上可接受的载剂的组合物，其中所述rnai寡核苷酸包括形成双链体区域的有义链和反义链，其中所述反义链包括与plp1 mrna的互补性区域，其中所述互补性区域的长度为至少15个连续核苷酸，并且其中所述组合物被配制成用于施用于脑髓液(csf)、从而减少中枢神经系统中的plp1表达。在一些方面，rnai寡核苷酸是本文所述的rnai寡核苷酸。在一些方面，施用单剂量或多于一个剂量的rnai寡核苷酸。在一些方面，plp1表达减少持续约1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周。在一些方面，plp1表达减少持续约1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月。在一些方面，plp1表达减少持续约7天、14天、21天、28天、35天、42天、49天、56天、63天、70天、77天、84天或91天。在一些方面，plp1表达在脑的至少一个区域中减少。在一些方面，脑的至少一个区域选自：额叶皮质、顶叶皮质、颞叶皮质、枕叶皮质和小脑。在一些方面，plp1表达在颈部脊髓、胸脊髓、腰脊髓和/或腰椎背根神经节中减少。在一些方面，组合物和/或寡核苷酸不包括靶向配体。在一些方面，寡核苷酸不在脂质、脂质体或脂质纳米颗粒递送媒介物中配制。在一些方面，药学上可接受的载剂包括磷酸盐缓冲盐水。

182、在一些方面，本公开提供了一种用于减少受试者的中枢神经系统中的gfap表达的方法，其包括施用本文所述的rnai寡核苷酸。在一些方面，gfap mrna表达、gfap蛋白表达或两者在受试者中均减少。在一些方面，受试者患有星形胶质细胞增生，并且gfap表达的减少在受试者中减少了星形胶质细胞增生。在其他方面，本公开提供了一种在受试者中减少星形胶质细胞增生的方法，其包括施用本文所述的rnai寡核苷酸。在一些方面，本公开提供了一种在受试者中减少脱髓鞘的方法，其包括施用本文所述的rnai寡核苷酸。在其他方面，本公开提供了一种在受试者中减少髓鞘形成障碍的方法，其包括施用本文所述的rnai寡核苷酸。

183、在一些方面，本公开提供了一种确定在已经或正在接受靶向plp1的rna寡核苷酸治疗的患者中对治疗的响应性的方法，其包括：确定来自患者的样品中的gfap表达水平，其中gfap表达水平的降低指示对患者的治疗的响应性。

184、在其他方面，本公开提供了一种确定在患有与plp1表达相关联的疾病、病症或病状的患者中对治疗的响应性的方法，其包括：

185、(i)向所述患者施用靶向plp1的rnai寡核苷酸治疗；以及

186、(ii)确定来自所述患者的样品中的gfap表达水平，

187、其中gfap表达水平的降低指示对所述患者中的治疗的响应性。

188、在另外的方面，本公开提供了一种确定在患有星形胶质细胞增生的患者中对治疗的响应性的方法，其包括：

189、(i)向所述患者施用靶向plp1的rnai寡核苷酸治疗；以及

190、(ii)确定来自所述患者的样品中的gfap表达水平，

191、其中gfap表达水平的降低指示对所述患者中的治疗的响应性。