用于靶向降解雌激素受体的化合物的结晶形式的制作方法

背景技术：

1、大多数小分子药物在紧密且明确限定的口袋中与酶或受体结合。相比之下，众所周知，蛋白质-蛋白质相互作用很难使用小分子进行靶向，因为它们的接触面很大，并且通常涉及浅凹槽或平坦的界面。e3泛素连接酶赋予针对泛素化的底物特异性，并且由于其对某些蛋白质底物的特异性而成为有吸引力的治疗靶标。e3连接酶配体的开发已被证明具有挑战性，部分原因是它们必须破坏蛋白质-蛋白质相互作用。然而，最近的开发已经提供了与这些连接酶结合的特异性配体。例如，自从发现第一个小分子e3连接酶抑制剂努特林(nutlin)以来，已经报道了靶向e3连接酶的另外的化合物。

2、一种具有特殊治疗潜力的e3连接酶是羟脑苷脂(cereblon)，其是一种在人体中由crbn基因编码的蛋白质。crbn直系同源物从植物到人类都是高度保守的，这表明了其生理重要性。羟脑苷脂与受损的dna结合蛋白1(ddb1)、cullin-4a(cul4a)和cullin 1的调节子(roc1)形成e3泛素连接酶复合物。此复合物使若干种其它蛋白质泛素化。通过尚未完全阐明的机制，靶蛋白的羟脑苷脂泛素化导致成纤维细胞生长因子8(fgf8)和成纤维细胞生长因子10(fgf10)的水平升高。fgf8进而调节几个发育过程，如肢体和听觉囊泡的形成。最终结果是，此泛素连接酶复合物对于胚胎中的肢体生长是重要的。在不存在羟脑苷脂的情况下，ddb1与ddb2形成充当dna损伤结合蛋白的复合物。

3、已被批准用于治疗许多免疫学适应症的沙利度胺(thalidomide)还已被批准用于治疗某些赘生性疾病，包含多发性骨髓瘤。此外，目前正在研究沙利度胺及其若干种类似物用于治疗各种其它类型的癌症。尽管沙利度胺抗肿瘤活性的确切机制仍在不断涌现，但已知其可以抑制血管生成。论述酰亚胺生物学的近期文献包含lu等人《科学(science)》343,305(2014)和kroenke等人《科学》343,301(2014)。

4、值得注意的是，已知沙利度胺及其类似物(例如泊马度胺(pomalidomide)和来那度胺(lenalidomide))与羟脑苷脂结合，并改变复合物的特异性，以诱导多发性骨髓瘤生长所必需的转录因子ikaros(ikzf1)和aiolos(ikzf3)的泛素化和降解。事实上，羟脑苷脂的较高表达与酰亚胺药物治疗多发性骨髓瘤的功效增加有关。

5、雌激素受体(er)是核激素受体家族的成员，并且充当涉及基因表达的向上和向下调节的配体激活的转录因子。er的天然激素是17-β-雌二醇(e2)以及密切相关的代谢物。雌二醇与er的结合引起受体和二聚体的二聚化，进而与dna上的雌激素应答元件(ere)结合。er-dna复合物募集负责将ere下游的dna转录成mrna的其它转录因子，所述mrna最终被翻译成蛋白质。可替代地，通过其它转录因子，最突出的是fos和jun的中间性，er与dna的相互作用可以是间接的。由于大量基因的表达由er调节，并且由于er在许多细胞类型中表达，因此通过天然激素或合成er配体的结合来调节er可能对生物体的生理学和病理生理学产生深远影响。

6、多种疾病的病因学和/或病理学都是由er介导的。这些疾病被统称为雌激素依赖性疾病。雌激素对于女性的性发育至关重要。此外，雌激素在维持骨密度、调节血脂水平方面起重要作用，并且似乎具有神经保护作用。因此，绝经后女性体内的雌激素产生减少与许多疾病相关联，如骨质疏松症、动脉粥样硬化、抑郁症和认知障碍。相反，某些类型的增生性疾病，如乳腺癌和子宫癌以及子宫内膜异位由雌激素刺激，并且因此抗雌激素(即雌激素拮抗剂)可以用于预防和治疗这些类型的病症。

7、er有两种不同的形式，通常被称为α和β，每种形式由单独的基因(分别为esr1和esr2)编码。两种er广泛地在不同组织类型中表达，但是在其表达模式中存在一些显著差异。erα在子宫内膜、乳腺癌细胞、卵巢基质细胞和下丘脑中发现。在男性中，在输出小管的上皮中发现erα蛋白。erβ蛋白在肾脏、脑、骨骼、心脏、肺、肠粘膜、前列腺和内皮细胞中的表达已被证实。因此，针对一种形式或另一种形式的选择性配体的开发可以保留雌激素的有益方面。

8、乳腺癌是影响女性的最常见恶性肿瘤，并且此疾病的发病率在全世界范围内增加。具体地，雌激素充当至少三分之一乳腺癌的内分泌生长因子，并且剥夺肿瘤的这种刺激是针对绝经前女性的晚期疾病的公认疗法。这通过经过外科手术、放射治疗或医疗手段消除卵巢功能，以及在绝经后女性中使用芳香酶抑制剂来实现。

9、停用雌激素的替代性方法是用抗雌激素拮抗雌激素。这些是与雌激素应答组织中存在的er结合并竞争er的药物。常规的非类固醇抗雌激素，如他莫昔芬(tamoxifen)，有效地竞争er结合，但其功效通常受到其所表现出的部分激动的限制，这引起雌激素介导的活性的不完全阻断。在雌激素依赖性疾病的治疗中，对er具有高亲和力并且没有任何激动剂效应的特异性或“纯”抗雌激素可以具有优于常规非类固醇抗雌激素的优点。氟维司群(fulvestrant)是一类新型强效纯抗雌激素中的第一种，并且完全不含与他莫昔芬等目前可用的抗雌激素相关联的部分激动剂雌激素样活性。

10、因此，需要其它方法来拮抗er。一种方法是开发减少转录物或蛋白质水平上的er表达的选择性er下调剂或降解剂。

技术实现思路

1、根据本发明制备和使用的化合物是(s)-3-(5-(4-((1-(4-((1r,2s)-6-羟基-2-苯基-1,2,3,4-四氢萘-1-基)苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(化合物a)，其分子式为c45h49n5o4，并且具有以下结构式：

2、

3、化合物a作为靶向雌激素受体(er)的蛋白质降解剂正在开发中，用于潜在的乳腺癌治疗。化合物a已被证明是靶向蛋白泛素化和通过泛素-蛋白酶体途径进行降解的有用调节剂。

4、本公开提供了化合物a的若干种结晶形式(多晶型物)和无定形形式。

5、一方面，本公开提供了一种化合物a的多晶型物(“形式i”)，其特征在于使用x射线波长为的cu kα辐射的x射线粉末衍射图，所述x射线粉末衍射图包含在约13.9°2θ、约16.4°2θ和约17.9°2θ处的峰。

6、一方面，本公开提供了一种化合物a的多晶型物(“形式ii”)，其特征在于使用x射线波长为的cu kα辐射的x射线粉末衍射图，所述x射线粉末衍射图包含在约10.0°2θ、约16.3°2θ和约17.5°2θ处的峰。

7、一方面，本公开提供了一种化合物a的多晶型物(“形式iii”)，其特征在于使用x射线波长为的cu kα辐射的x射线粉末衍射图，所述x射线粉末衍射图包含在约8.8°2θ、约10.7°2θ和18.2°2θ处的峰。

8、一方面，本公开提供了一种化合物a的多晶型物(“形式iv”)，其特征在于x射线波长为的x射线粉末衍射图，所述x射线粉末衍射图包含在约10.5°2θ、约14.5°2θ和约16.9°2θ处的峰。

9、另一方面，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的化合物a的多晶型物和/或无定形形式。在一些实施例中，所述疾病或病症与er活性、过度活性、固有活性、表达、过表达或累积和聚集相关。在一些实施例中，所述疾病或病症与er活性相关。在一些实施例中，所述疾病或病症与er过度活性相关。在一些实施例中，所述疾病或病症与er固有活性相关。在一些实施例中，所述疾病或病症与er表达相关。在一些实施例中，所述疾病或病症与er过表达相关。在一些实施例中，所述疾病或病症与er累积和聚集相关。

10、在一些实施例中，所述疾病或病症是与er活性、过度活性、固有活性、表达、过表达或累积和聚集相关的癌症或瘤变。在一些实施例中，所述疾病或病症是乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌或子宫癌。在一些实施例中，所述疾病或病症是子宫内膜异位。

11、另一方面，本公开提供了一种药物组合物，其包括治疗有效量的化合物a的多晶型物和/或无定形形式，其中所述组合物在治疗或改善所述疾病或病症的至少一种症状方面是有效的。在一些实施例中，所述疾病或病症与er活性、过度活性、固有活性、表达、过表达或累积和聚集以因果关系相关。在一些实施例中，所述疾病或病症是与er活性、过度活性、固有活性、表达、过表达或累积和聚集以因果关系相关的癌症或瘤变。在一些实施例中，所述疾病或病症是乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌或子宫癌。在一些实施例中，所述疾病或病症是子宫内膜异位。

12、另一方面，本公开提供了一种药物组合物，其包括治疗有效量的化合物a的无定形形式和药学上可接受的分散剂。在一些实施例中，所述药学上可接受的分散剂进一步包括药学上可接受的添加剂。在一些实施例中，所述药学上可接受的分散剂是羟丙基甲基纤维素(hpmc)。在一些实施例中，所述药学上可接受的添加剂是d-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(维生素e tpgs或tpgs)。

13、在一些实施例中，本发明的多晶型物是用于在将化合物a转化为无定形化合物a之前散装储存化合物a的优选形式。在一些实施例中，化合物a的多晶型物为形式i。在一些实施例中，化合物a的多晶型物为形式ii。在一些实施例中，化合物a的多晶型物为形式iii。在一些实施例中，化合物a的多晶型物为形式iv。在一些实施例中，用于散装储存化合物a的形式是本文所公开的化合物a的一种或多种固体形式(例如多晶型物或无定形形式)的混合物。在一些实施例中，用于散装储存化合物a的形式是形式i与无定形形式的混合物。在一些实施例中，用于散装储存化合物a的形式是形式i与形式ii的混合物。在一些实施例中，用于散装储存化合物a的形式是形式i与形式iii的混合物。在一些实施例中，用于散装储存化合物a的优选形式是形式i与形式iv的混合物。

14、另一方面，本公开提供了化合物a的多晶型物和/或无定形形式在制备用于治疗疾病或病症的药物中的用途。在一些实施例中，所述疾病或病症与er活性、过度活性、固有活性、表达、过表达或累积和聚集相关。在一些实施例中，所述疾病或病症是与er活性、过度活性、固有活性、表达、过表达或累积和聚集相关的癌症或瘤变。在一些实施例中，所述疾病或病症是乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌或子宫癌。在一些实施例中，所述疾病或病症是子宫内膜异位。

15、另一方面，本公开提供了用于医学中的化合物a的多晶型物和/或无定形形式。

16、另一方面，本公开提供了用于治疗疾病或病症的化合物a的多晶型物和/或无定形形式。在一些实施例中，所述疾病或病症与er活性、过度活性、固有活性、表达、过表达或累积和聚集相关。在一些实施例中，所述疾病或病症是与er活性、过度活性、固有活性、表达、过表达或累积和聚集相关的癌症或瘤变。在一些实施例中，所述疾病或病症是乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌或子宫癌。在一些实施例中，所述疾病或病症是子宫内膜异位。

17、另一方面，本公开提供了一种制备化合物a的形式i多晶型物的方法，所述方法包括使化合物a从溶剂中再结晶。在一些实施例中，所述溶剂是丙酮、1-丁醇、2-乙氧基乙醇、乙醇、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、甲醇、甲基乙基酮、1-丙醇、2-丙醇或乙醇和水的混合物。

18、另一方面，本公开提供了一种制备化合物a的形式ii多晶型物的方法，所述方法包括使化合物a从溶剂中再结晶。在一些实施例中，所述溶剂是二氯甲烷或丙酮和水的混合物。

19、另一方面，本公开提供了一种制备化合物a的形式iii多晶型物的方法，所述方法包括使化合物a从溶剂中再结晶。在一些实施例中，所述溶剂是乙腈。

20、另一方面，本公开提供了一种制备化合物a的形式iv多晶型物的方法，所述方法包括使化合物a从溶剂中快速冷却。在一些实施例中，所述溶剂是二氯甲烷和甲醇的混合物。

21、另一方面，本公开提供了一种制备化合物a的形式iv多晶型物的方法，所述方法包括将抗溶剂添加到来自溶剂的化合物a的溶液中。在一些实施例中，所述溶剂包括二氯甲烷和甲醇的混合物。在一些实施例中，所述抗溶剂是甲基叔丁基醚。