针对FAP的抗体片段的制作方法

本发明涉及抗体片段领域，其特异性结合成纤维细胞活化蛋白(fap)的表位并且可以连接至实体例如部分。取决于所述抗体片段的应用，该部分可以是标记，该标记可以是放射性核素。本发明涉及用于预防和/或治疗癌症的经标记的抗体片段。

背景技术：

0、背景

1、癌症是全球发病率和死亡率的主要原因之一。不断需要改进的抗癌疗法，同时最大限度地减少副作用。已发现fap在癌症相关成纤维细胞(caf)以及骨、脑、乳腺、结直肠、食道、胃、肝、肺、卵巢、胰腺、甲状旁腺、肾癌细胞等癌细胞上表达或甚至过表达(puré等人,2018,oncogene[原癌基因],8月；37(32):4343-43573)，而fap在健康细胞上不表达或表达水平较低。因此，fap似乎是有意义的癌症靶标。迄今为止，还没有靶向fap的抗体被批准作为治疗性抗体。

2、因此，本领域需要更多靶向人fap的抗体。

技术实现思路

1.一种特异性结合人和/或鼠fap的抗体片段，其中所述抗体片段由包含与seq id no:4、1、2或3中的至少一个具有至少80％序列同一性或在所述seq id no的长度的50％以上具有至少80％序列同一性的氨基酸序列表示。

2.如权利要求1所述的抗体片段，其包含seq id no:4、1、2或3中的任何一个。

3.如权利要求1或2所述的抗体片段，其长度范围为seq id no:4的确切长度或比seqid no:4的确切长度长1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60个氨基酸。

4.优选如权利要求1至3中任一项所述的抗体片段，其特异性结合人和/或鼠fap，其中所述抗体的表位包含在seq id no:26的氨基酸区段或区域65-90和/或101-140内。

5.优选如权利要求1至3中任一项所述的抗体片段，其特异性结合人和/或鼠fap，其中所述抗体的构象表位包含在seq id no:26的氨基酸区段或区域65-90和101-140的组合内。

6.如权利要求4或5所述的抗体片段，其特异性结合seq id no:26的以下氨基酸：

7.如权利要求1至6中任一项所述的抗体片段，其是衍生自重链抗体(vhh)或其片段的重链可变结构域。

8.如权利要求1至7中任一项所述的抗体片段，其中所述抗体片段特异性结合人fap(seq id no:26)和特异性结合鼠fap(seq id no:30)。

9.如权利要求1至8中任一项所述的抗体片段，其不是人和/或鼠fap的调节剂，优选地其基本上不抑制fap二肽基肽酶活性。

10.如权利要求1至9中任一项所述的抗体片段，其中所述抗体片段特异性结合人fap，kd范围为10-9至10-12摩尔/升和/或koff范围为10-2至10-5s-1，优选地使用生物层干涉测量法评估。

11.一种化合物，其包含连接至实体例如部分的如权利要求1至10中任一项所述的抗体片段。

12.如权利要求11所述的化合物，其中该部分是标记，优选放射性核素。

13.如权利要求12所述的化合物，其中所述放射性核素选自由以下组成的组：发射α的放射性核素和发射β的放射性核素，优选地其中所述放射性核素选自由以下组成的组：锕-225、砹-211、铋-212、铋-213、铯-137、铬-51、钴-60、铜-67、镝-165、铒-169、镄-255、金-198、钬-166、碘-125、碘-131、铱-192、铁-59、铅-212、镥-177、钼-99、钯-103、磷-32、钾-42、铼-186、铼-188、钐-153、镭-223、镭-224、钌-106、钪-47、钠-24、锶-89、铽-149、铽-161、铽-149、钍-227、氙-133、镱-169、镱-177和钇-90。

14.如权利要求12所述的化合物，其中所述放射性核素选自由以下组成的组：发射正电子的放射性同位素(pet)或发射γ的放射性同位素(spect)，包括选自由以下组成的组：碘-131、钇-90、碘-125、镥-177、铼-186、铼-188、钪-43、钪-44、锝-99m、铽-161、铟-111、氙-133、铊-201、氟-18、镓-68、镓-67、铜-67、碘-123、碘-124、锆-89和铜-64。

15.如权利要求13或14所述的化合物，其中所述放射性核素是碘-131。

16.如权利要求11至15中任一项所述的化合物，其中所述抗体片段和所述放射性核素由接头分开，优选苯甲酸酯接头，更优选其中所述接头包含n-琥珀酰亚胺基-4-胍基甲基-3-[l-131]碘苯甲酸酯或其合适的衍生物。

17.如权利要求11至16中任一项所述的化合物，其中该化合物包含或是：

18.如权利要求11至16中任一项所述的化合物，其中该化合物包含或是：

19.一种组合物，其包含如权利要求1至10中任一项所定义的抗体片段或如权利要求11至18中任一项所定义的化合物和药学上可接受的赋形剂。

20.如权利要求1至10中任一项所述的抗体片段、如权利要求11至13、15或16-18中任一项所述的化合物或如权利要求19所述的组合物，用作药物，优选地

21.一种诊断组合物，其包含如权利要求1至10中任一项所定义的抗体片段或如权利要求11、12、14至18中任一项所定义的化合物。

22.一种组合疗法，其包含如权利要求1至10中任一项所定义的抗体片段、如权利要求11至13、15或16-18中任一项所定义的化合物或如权利要求19或20所述的组合物，其中该药物用于治疗与人fap在癌细胞上和/或在caf上的表达相关的癌症，并且其中使用另外的化合物。

23.如权利要求22所述的组合疗法，其中该另外的化合物是抗体或抗体片段，或者是能够优化肾保留的分子，例如血浆或血液替代品或带正电荷的氨基酸。

24.一种方法，其中使用如权利要求1至10中任一项所定义的抗体片段或如权利要求11、12、14至18中任一项所定义的化合物或如权利要求21所定义的组合物来评估受试者中的fap的表达，优选人fap的表达。

25.一种非人动物，其包含允许人fap表达的核酸构建体。