液体酶制剂的制作方法

本发明涉及一种液体酶制剂。更具体而言，本发明涉及活性稳定性优异的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂。

背景技术：

1、作为对蛋白质中的谷氨酰胺残基和天冬酰胺残基的γ-酰胺基和β-酰胺基进行脱酰胺的酶，如专利文献1等中记载的那样，已知有来源于粘金黄杆菌(chryseobacteriumgleum)jcm2410株的蛋白质谷氨酰胺酶和来源于解朊金黄杆菌(chryseobacteriumproteolyticum)9670株的蛋白质谷氨酰胺酶。这样的蛋白质脱酰胺酶的酶制剂制品目前仅以粉末形态市售。

2、关于酶制剂，一般而言，如果考虑到除尘和处理这一点，则与粉末形态相比，优选为液体形态。因此，对各种酶研究将酶制剂以液态形态制剂化的技术。例如，专利文献2中提出了一种液体酶制剂，其特征在于，在多元醇-水悬浊液中包含至少1种乳蛋白交联和/或修饰酶，所述多元醇-水悬浊液包含25％～100％(w/w)的多元醇，具有4.4～5.1范围内的ph值。具体而言，在专利文献2中，发现在ph5.2中的转谷氨酰胺酶的稳定性低，基于该见解，公开了ph4.4～4.8的甘油-水悬浊液中的转谷氨酰胺酶制剂、ph4.6的山梨醇-水悬浊液中的转谷氨酰胺酶制剂的稳定性提高，与此同时，还公开了ph4.6的甘油-水悬浊液中的谷氨酰胺酶制剂和ph4.6的甘油-水悬浊液中的蛋白质谷氨酰胺酶制剂。

3、现有技术文献

4、专利文献

5、专利文献1：国际公开第2010/029685号

6、专利文献2：国际公开第2013/064736号

技术实现思路

1、发明所要解决的技术问题

2、专利文献2中，对于转谷氨酰胺酶制剂的液体酶制剂研究了稳定性，另一方面，对于蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂，仅公开了制剂处方，对于该酶的稳定性没有进行充分的研究。

3、因此，本发明的目的在于提供一种活性稳定性优异的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂。

4、用于解决技术问题的技术方案

5、本发明人进行了深入研究，结果发现，通过调整为ph5.5以上且配合30w/v％以上的山梨醇的新的配方，蛋白质脱酰胺酶的活性稳定性提高。本发明是基于该见解而完成的。本发明包括以下揭示的发明。

6、项1.一种液体酶制剂，其包含蛋白质脱酰胺酶和30w/v％以上的山梨醇，ph为5.5以上。

7、项2.根据项1所述的液体酶制剂，其中，所述山梨醇的含量为65w/v％以下。

8、项3.根据项1或2所述的液体酶制剂，其中，所述液体酶制剂的ph为8.2以下。

9、项4.根据项1～3中任一项所述的液体酶制剂，其中，所述液体酶制剂还包含亚硫酸盐、硫代硫酸盐和/或焦硫酸盐。

10、项5.根据项1～4中任一项所述的液体酶制剂，其中，蛋白质脱酰胺酶活性为0.1～10000u/ml。

11、项6.根据项1～5中任一项所述的液体酶制剂，其中，所述蛋白质脱酰胺酶来源于解朊金黄杆菌。

12、项7.一种蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂的酶活性稳定剂，其包含山梨醇作为有效成分，在ph5.5以上的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂中以30w/v％以上的浓度使用。

13、项8.根据项7所述的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂的酶活性稳定剂，其中，还包含亚硫酸盐、硫代硫酸盐和/或焦硫酸盐。

14、项9.一种蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂的沉淀抑制剂，其包含山梨醇作为有效成分，在ph5.5以上的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂中以30w/v％以上的浓度使用。

15、发明效果

16、根据本发明，提供一种活性稳定性优异的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂。

1.一种液体酶制剂，其特征在于，包含蛋白质脱酰胺酶和30w/v％以上的山梨醇，ph为5.5以上。

2.根据权利要求1所述的液体酶制剂，其中，所述山梨醇的含量为65w/v％以下。

3.根据权利要求1或2所述的液体酶制剂，其中，所述液体酶制剂的ph为8.2以下。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的液体酶制剂，其中，所述液体酶制剂还包含亚硫酸盐、硫代硫酸盐和/或焦硫酸盐。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的液体酶制剂，其中，蛋白质脱酰胺酶活性为0.1～10000u/ml。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的液体酶制剂，其中，所述蛋白质脱酰胺酶来源于解朊金黄杆菌。

7.一种蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂的酶活性稳定剂，其特征在于，包含山梨醇作为有效成分，在ph5.5以上的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂中以30w/v％以上的浓度使用。

8.根据权利要求7所述的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂的酶活性稳定剂，其中，所述酶活性稳定剂还包含亚硫酸盐、硫代硫酸盐和/或焦硫酸盐。

9.一种蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂的沉淀抑制剂，其特征在于，包含山梨醇作为有效成分，在ph5.5以上的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂中以30w/v％以上的浓度使用。