本发明涉及细胞生物学领域,具体涉及一种从成年小鼠脑组织中分离两种类胶质细胞的方法。
背景技术:
1、从中枢神经系统中分离和富集小胶质细胞和星形胶质细胞的常用方法是磁珠分选,即通过连接在磁珠上的抗体,将目的细胞从总细胞群中分离出来(如图1所示),但是这种方法分离得到的小胶质细胞和星形胶质细胞的纯度却有些不足,会受到髓系细胞的影响,如果需要用这些细胞做后续更加精确的实验,则可能造成一些偏差。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提高从中枢神经系统中分离和富集小胶质细胞和星形胶质细胞的纯度,减少髓系细胞的污染的方法。
2、本发明上述目的通过以下技术方案予以实现:
3、将预处理好的中枢神经细胞,使用acsa2,cd11b,cd45三种抗体对细胞进行标记,通过流式细胞仪,首先使用fsc-a和fsc-w将单个核细胞排除,在通过cd11b+ cd45high位置排除髓系细胞,在cd11b+ cd45low -to- medium位置取得小胶质细胞,在acsa2+处取得星形胶质细胞,从而完成分离和富集。
4、与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
5、本发明进一步降低了分离和富集后小胶质细胞和星形胶质细胞中髓系细胞的比例,提高了目标细胞的纯度。
1.一种从成年小鼠脑组织中分离不同种类胶质细胞的方法,其特征在于通过acsa2,cd11b,cd45三种抗体对细胞的标记,在经过流式细胞仪的处理,分离和富集得到更高纯度的小胶质细胞和星形胶质细胞。