医用抗菌硅胶导管及其制备方法与流程

1.本发明涉及医疗器械领域，具体是涉及一种医用抗菌硅胶导管及其制备方法。


背景技术：

2.硅胶是指主链由硅和氧原子交替构成，硅原子上通常连有两个有机基团的橡胶，是橡胶中的佼佼者，无色无味，耐温性强，在300℃和-90℃时，仍不失原有的强度和弹性。硅胶具有优良的生物性能，无毒、不会引起异物反应，因此医用硅胶导管是硅胶制品中发展最快、用途最广的产品，按用途分成体外用和体内用两种；用于体外的主要是各类泵管，如人工心肺机泵管，与各种器械的连接管、制药厂的输液管等；用于体内的是各类插管、导管、引流管等，如导尿管、输血管、静脉插管、腹膜透析管、中耳炎通气管、鼻插管等。
3.医疗导管的使用要求除去具有优良的生物性能以外，还需要避免患者在使用时被定值在硅胶导管上的细菌感染而产生并发症，因此需要要求医疗硅胶导管具有抗菌性。
4.现有技术中，与硅胶导管结合的抗菌剂大多为有机物质，包括有机酸、酯、酚等，有机抗菌剂存在耐热性低、易挥发分解、安全性差和抗菌时间较短等缺点。市场上还销售天然抗菌剂，但是有天然抗菌剂受安全性和加工条件的制约，难以推广。


技术实现要素：

5.本发明的第一目的是提供一种含有无机抗菌剂的医用抗菌硅胶导管制备方法。
6.本发明的第二目的是提供一种通过上述制备方法制备得到的医用抗菌硅胶导管。
7.为了实现上述的第一目的，本发明提供的医用抗菌硅胶导管制备方法为：白炭黑载体承载银离子和铜离子得到铜银抗菌白炭黑，铜银抗菌白炭黑的粒径为2μm～7μm，铜银抗菌白炭黑、生硅胶、硫化剂和助剂混合制备得到具有抗菌功能的硅胶导管。
8.进一步的方案是，铜银抗菌白炭黑的制备反应式为：
[0009][0010]
进一步的方案是，白炭黑载体的制备反应式为：
[0011]
nahco3+na2sio3→
na2co3+h2sio3↓
。
[0012]
进一步的方案是，铜银抗菌白炭黑的制备步骤依次为：
[0013]
s1、按比例称量硅酸钠和碳酸氢铵，将硅酸钠和碳酸氢钠分别均分为两等份，将预热好的一份的硅酸钠的一份的碳酸氢钠投入反应器中进行第一步反应，反应器温度采用50
℃～100℃，反应器转速采用100rpm～1000rpm；
[0014]
s2、第一步反应结束后，调低转速，加入剩余的硅酸钠，继续将加入剩余的碳酸氢钠加入继续进行反应，调节ph值到5.5～6.0，反应时间为0.1h～10h，得到白炭黑载体；
[0015]
s3、在装有白炭黑载体的反应器中，加入适量抗凝剂；
[0016]
s4、反应器内反应物分散后，依次加入硝酸银水溶液和硫酸铜水溶液进行反应，反应温度为50℃～100℃，反应时间为0.1～10h，反应结束后抽滤，对滤饼干燥、粉碎。
[0017]
进一步的方案是，生硅胶为二甲基硅橡胶、甲基乙烯基硅橡胶、甲基乙烯基苯基硅橡胶、甲基乙烯基三氟丙基硅橡胶、亚苯基硅橡胶、亚苯醚基硅橡胶、腈硅橡胶、硅硼橡胶、氟基硅橡胶中的至少一种。
[0018]
进一步的方案是，硫化剂为有机过氧化物、脂肪族偶氮化合物、无机化合物硫化剂和高能射线中的至少一种，有机过氧化物为过氧化苯甲酰、2,4-二氯过氧化苯甲酰、过苯甲酸叔丁酯、过氧化二叔丁基、过氧化二异丙苯、2,5-二甲基-2,5二叔丁基过氧化己烷中的至少一种；
[0019]
和/或述助剂包括结构控制剂、耐热剂、着色剂和发泡剂；结构控制剂可采用二苯基硅二醇、甲基苯基二乙氧基硅烷、四甲基亚乙基二氧二甲基硅烷、低分子羟基硅油及硅氧烷中的至少一种；
[0020]
和/或耐热剂可采用三氧化二铁、锰的氧化物、锌的氧化物、镍的氧化物、铜的氧化物中的至少一种；
[0021]
和/或着色剂可采用氧化铁、镉黄、铬绿、炭黑、钛白、群青中的至少一种；
[0022]
和/或发泡剂可采用偶氮二甲酰胺、二亚硝基五亚甲基四胺中的至少一种。
[0023]
进一步的方案是，具有抗菌功能的硅胶导管的制备步骤依次为：
[0024]
a、将铜银抗菌白炭黑、生硅胶、硫化剂和助剂投入开炼机进行混炼，开炼机的辊筒间距采用4mm～6mm，混炼时间采用15min～40min，得到抗菌医用硅胶；
[0025]
b、将抗菌医用硅胶投入冷喂料挤出机，经过螺杆塑化、模具塑形后，挤出至隧道炉硫化，硫化完毕后送入恒温硫化箱二次硫化，得抗菌医用硅胶导管。
[0026]
进一步的方案是，具有抗菌功能的硅胶导管通过40份～80份铜银抗菌白炭黑、50份～150份生硅胶、0.5份～2份硫化剂和0.1份～10份助剂混合制备得到。
[0027]
进一步的方案是，银离子浓度为0.001mol/l～0.1mol/l，铜离子浓度为0.001mol/l～0.1mol/l，银离子、铜离子和白炭黑混合物质的量比例为1～100：1～100：1～600。
[0028]
由上述方案可见，具有抗菌功能的医用硅胶导管中采用银离子和铜离子这两种无机抗菌剂，无机抗菌剂具有抗菌持久、耐酸、耐碱、耐洗涤、广谱抗菌、细菌不易产生抗药性、对健康无害、无二次污染等优点，白炭黑，化学名称为水合无定形二氧化硅或沉淀二氧化硅，分子是为sio2.nh2o，白炭黑具有良好的补强和增粘作用的同时，具有良好的分散性和悬浮性，将白炭黑作为银离子和铜离子的载体，白炭黑粒径小且内表面积大，银离子和铜离子在白炭黑上有更多空间与更多细菌的基体中的酶蛋白的巯基结合，使得抗菌效果更多；再者作为生产硅胶导管常用的添加剂，银离子和铜离子可随着白炭黑载体在硅胶导管内的分散均匀地分散在硅胶导管上，使得硅胶导管整体的抗菌效果更好。
[0029]
为实现上述的第二目的，本发明提供的医用抗菌硅胶导管通过上述的医用抗菌硅胶导管制备方法制备得到。
附图说明
[0030]
图1是中抗菌离子的含量与杀菌率的关系。
[0031]
图2是金属离子溶液浓度与抗菌白炭黑中抗菌离子含量的关系。
[0032]
图3是实施例1和对比文件1、2中的抗菌白炭黑的粒径大小比较图。
[0033]
图4是白炭黑(1)、对比例2的含铜抗菌白炭黑(2)、对比例1的含银抗菌白炭黑(3)、实施例1的铜银抗菌白炭黑(4)的红外光谱图。
[0034]
图5是抗菌医用硅胶铜银不同添加量的抗菌效果比较图。
[0035]
以下结合附图及实施例对本发明作进一步说明。
具体实施方式
[0036]
本发明的医用抗菌硅胶导管应用于医疗器械行业，医用抗菌硅胶导管通过白炭黑作为抗菌剂银离子和铜离子的载体，将铜银抗菌白炭黑、生硅胶、硫化机和助剂混合制备得到，通过白炭黑作为载体引入无机抗菌剂，避免对硅胶导管的制备造成影响的同时，实现无机抗菌剂在硅胶导管上的分散，保证硅胶导管整体的抗菌效果。若是没有白炭黑作为载体，直接将银离子、铜离子、白炭黑和生硅胶混合制备硅胶导管，银离子和铜离子在硅胶内的分布不均匀，使得抗菌硅胶导管的抗菌有效时间变短，杀菌效率变低。
[0037]
医用抗菌硅胶导管具体的制备方法具体为依次进行铜银抗菌白炭黑制备步骤和硅胶导管制备步骤。
[0038]
铜银抗菌白炭黑制备步骤依次进行以下步骤：
[0039]
s1、按比例称量硅酸钠和碳酸氢铵，将硅酸钠和碳酸氢钠分别均分为两等份，将预热好的一份的硅酸钠的一份的碳酸氢钠投入反应器中进行第一步反应，反应器温度采用50℃～100℃，反应器转速采用100rpm～1000rpm；
[0040]
s2、第一步反应结束后，调低转速至100rpm～200rpm，加入剩余的硅酸钠，继续将加入剩余的碳酸氢钠加入继续进行反应，调节ph值到5.5～6.0，反应时间为0.1h～10h，得到白炭黑载体；
[0041]
s3、在装有所述白炭黑载体的反应器中，加入适量抗凝剂(抗凝剂可为聚乙烯醇、十二烷基苯磺酸钠等分散剂和表面活性剂)，或者通过调整反应器内的ph值，又或者采用超声振动反应器，以实现白炭黑在反应器内分散均匀；
[0042]
s4、反应器内反应物分散后，依次加入硝酸银水溶液和硫酸铜水溶液进行反应，硝酸银水溶液和硫酸铜水溶液的浓度分别为0.001mol/l～1mol/l，反应温度为50℃～100℃，反应时间为0.1h～10h，反应结束后趁热抽滤，滤饼在分散剂处理后送入烘箱彻底干燥、粉碎，过200目筛子。
[0043]
制备白炭黑的方法除去本发明中所提及使用硅酸钠和碳酸氢钠反应得到以外，还可以通过气相法、电弧法、硫酸沉淀法等，气相法为水和四氯化硅反应生成白炭黑，电弧法为石英砂在电炉中用焦炭还原成一氧化硅，然后空气氧化成白炭黑；硫酸沉淀法为：硫酸与硅酸钠反应生成白炭黑。
[0044]
硅胶导管制备步骤依次进行以下步骤：
[0045]
a、将40份～80份铜银抗菌白炭黑、50份～150份生硅胶、硫化剂0.5份～2份和6份～11份助剂投入开炼机进行混炼，开炼机的辊筒间距采用4mm～6mm，混炼时间采用15min～
40min，得到抗菌医用硅胶；
[0046]
b、将抗菌医用硅胶投入冷喂料挤出机，经过螺杆塑化、模具塑形后，挤出至隧道炉硫化，硫化完毕后送入恒温硫化箱二次硫化，得抗菌医用硅胶导管；冷喂料挤出机投料口螺杆转速采用25rpm～45rpm，塑化螺杆转速采用35rpm～70rpm，隧道炉的温度采用350℃～480℃。
[0047]
生硅胶可采用二甲基硅橡胶、甲基乙烯基硅橡胶、甲基乙烯基苯基硅橡胶、甲基乙烯基三氟丙基硅橡胶、亚苯基硅橡胶、亚苯醚基硅橡胶、腈硅橡胶、硅硼橡胶、氟基硅橡胶中的至少一种。硫化剂可采用有机过氧化物、脂肪族偶氮化合物、无机化合物硫化剂、高能射线的一种或多种，其中有机过氧化物可采用过氧化苯甲酰、2,4-二氯过氧化苯甲酰、过苯甲酸叔丁酯、过氧化二叔丁基、过氧化二异丙苯、2,5-二甲基-2,5二叔丁基过氧化己烷中的至少一种。助剂可采用结构控制剂、耐热剂、着色剂、发泡剂。结构控制剂可采用二苯基硅二醇、甲基苯基二乙氧基硅烷、四甲基亚乙基二氧二甲基硅烷、低分子羟基硅油及硅氧烷中的至少一种；耐热剂可采用三氧化二铁、锰的氧化物、锌的氧化物、镍的氧化物、铜的氧化物中的至少一种，着色剂可采用氧化铁、镉黄、铬绿、炭黑、钛白、群青中的至少一种。发泡剂可采用偶氮二甲酰胺、二亚硝基五亚甲基四胺中的至少一种。若硅胶需改善压延性能，则可采用四氟乙烯粉。若硅胶需增大粘性，则可采用硼酸酯或含硼化合物。若硅胶需提高抗撕性能，则可采用高乙烯基硅油。本领域技术人员可根据医用硅胶导管的最终性能而添加不同的助剂，上述的材料均可通过市售购买得到。
[0048]
硫化方法除了采用隧道炉的热空气连续硫化，也可采用蒸汽加压硫化、液体硫化槽连续硫化、鼓式硫化和辐射硫化等方法。二次硫化温度可采用150℃～200℃，时间可采用0.1h～2h。抗菌医用硅胶导管的外径可采用0.1mm～30mm，可内含单腔、双腔、三腔、四腔、五腔，每个腔截面积占抗菌医用硅胶导管截面积的1％～90％。
[0049]
下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
[0050]
实施例1
[0051]
实施例1中的医用抗菌硅胶导管的制备方法具体为：
[0052]
按比例称取硅酸钠溶液和碳酸氢钠溶液，且分别均分为两等份，将预热好的一份硅酸钠和一份碳酸氢钠注入内乘表面活性剂的恒温反应器(90℃)中，在500rpm转速下进行第一步反应，硅酸钠溶液和碳酸氢钠溶液添加物质的量比例为1：2。待第一步反应结束后，调低转速至100rpm，加入剩余的硅酸钠，稍后加入剩余的碳酸氢钠进行第二步反应，调节ph值到5.5，继续反应2h，所得即为白炭黑载体。
[0053]
将白炭黑载体制成水悬液，投入反应器中，可加入适量抗凝剂，抗凝剂为聚乙烯醇，分散一段时间后，先加入0.05mol/l硝酸银水溶液，再加入0.05mol/硫酸铜水溶液，控制温度为90℃，反应时间3h。反应结束后趁热抽滤，收集滤液，得到滤饼，滤饼可在分散剂处理后送入烘箱，120℃下彻底干燥，将烘干的抗菌白炭黑研碎，过200目筛子，所得即为铜银抗菌白炭黑。
[0054]
将生硅胶100份、银铜抗菌白炭黑40份、过氧化苯甲酰0.5份、1份其他助剂投入开炼机进行混炼，混炼时间采用20min，滚筒间距采用4mm，混炼完成后得到抗菌医用硅胶。
[0055]
将抗菌医用硅胶投入冷喂料挤出机，冷喂料挤出机投料口螺杆转速采用35rpm，塑
化螺杆转速采用60rpm，经过螺杆塑化、模具塑形后，挤出至隧道炉硫化，隧道炉靠近进料口部分温度采用450℃，靠近出料口部分温度采用370℃，硫化完毕后送入恒温硫化箱二次硫化，硫化温度采用180℃，硫化时间采用30min，得抗菌医用硅胶导管。
[0056]
对比例1
[0057]
对比例1中的医用抗菌硅胶导管的制备方法具体为：
[0058]
按比例称取硅酸钠溶液和碳酸氢钠溶液，且分别均分为两等份，将预热好的一份硅酸钠和一份碳酸氢钠注入内乘表面活性剂的恒温反应器(90℃)中，在500rpm转速下进行第一步反应，硅酸钠和碳酸氢钠添加物质的量比例为1：2。待第一步反应结束后，调低转速至100rpm，加入剩余的硅酸钠，稍后加入剩余的碳酸氢钠进行第二步反应，调节ph值到5.5～6.0，继续反应2h，所得即为白炭黑载体。
[0059]
将白炭黑载体制成水悬液，投入反应器中，可加入适量抗凝剂，抗凝剂为聚乙烯醇，分散一段时间后，加入0.05mol/l硝酸银水溶液，控制温度为90℃，反应时间3h。反应结束后趁热抽滤，收集滤液。滤饼可在分散剂处理后送入烘箱，120℃下彻底干燥，将烘干的抗菌白炭黑研碎，过200目筛子，所得即为含银抗菌白炭黑。
[0060]
将生硅胶100份、含银抗菌白炭黑40份、过氧化苯甲酰0.5份、1份其他助剂投入开炼机进行混炼，混炼时间采用20min，滚筒间距采用4mm，混炼完成后得到含银抗菌医用硅胶。
[0061]
将含银抗菌医用硅胶投入冷喂料挤出机，冷喂料挤出机投料口螺杆转速采用35rpm，塑化螺杆转速采用60rpm，经过螺杆塑化、模具塑形后，挤出至隧道炉硫化，隧道炉靠近进料口部分温度采用450℃，靠近出料口部分温度采用370℃，硫化完毕后送入恒温硫化箱二次硫化，硫化温度采用180℃，硫化时间采用30min，得含银抗菌医用硅胶导管。
[0062]
对比例2
[0063]
对比例2中的医用抗菌硅胶导管的制备方法具体为：
[0064]
按比例称取硅酸钠溶液和碳酸氢钠溶液，且分别均分为两等份，将预热好的一部分硅酸钠和碳酸氢钠注入内乘表面活性剂的恒温反应器(90℃)中，在500rpm转速下进行第一步反应，硅酸钠和碳酸氢钠添加物质的量比例为1：2。待第一步反应结束后，调低转速至100rpm，加入剩余的硅酸钠，稍后加入剩余的碳酸氢钠进行第二步反应，调节ph值到5.5～6.0，继续反应2h，所得即为白炭黑载体。
[0065]
将白炭黑载体制成水悬液，投入反应器中，可加入适量抗凝剂，抗凝剂为聚乙烯醇，分散一段时间后，先加入0.05mol/l硫酸铜水溶液，控制温度为90℃，反应时间3h。反应结束后趁热抽滤，收集滤液。滤饼可在分散剂处理后送入烘箱，120℃下彻底干燥，将烘干的抗菌白炭黑研碎，过200目筛子，所得即为含铜抗菌白炭黑。
[0066]
将生硅胶100份、含铜抗菌白炭黑40份、过氧化苯甲酰0.5份、1份其他助剂投入开炼机进行混炼，混炼时间采用20min，滚筒间距采用4mm，混炼完成后得到抗菌医用硅胶。
[0067]
将含铜抗菌医用硅胶投入冷喂料挤出机，冷喂料挤出机投料口螺杆转速采用35rpm，塑化螺杆转速采用60rpm，经过螺杆塑化、模具塑形后，挤出至隧道炉硫化，隧道炉靠近进料口部分温度采用450℃，靠近出料口部分温度采用370℃，硫化完毕后送入恒温硫化箱二次硫化，硫化温度采用180℃，硫化时间采用30min，得含铜抗菌医用硅胶导管。
[0068]
对上述的实施例1和对比例1、2就抗菌白炭黑抗菌性能、抗菌白炭黑抗菌离子含
量、抗菌白炭黑粒度分布、抗菌白炭黑ftir检测、抗菌白炭黑热稳定性和光稳定性、抗菌医用硅胶的抗菌性能和抗菌医用硅胶的细胞毒性等多个方面进行检测。
[0069]
抗菌白炭黑抗菌性能
[0070]
具体检测方法为：取营养琼脂33g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装后121℃高压灭菌15分钟，备用。取营养肉汤5ml，用接种针蘸取大肠杆菌菌液移植到肉汤中，放入培养箱中37℃下培养后取出，放入抗菌冰箱中备用。将1ml培养好的大肠杆菌菌液加入0.1g各实施例和对比例中的抗菌白炭黑，于振荡器中振荡。静置后，取上层清液，并使用0.85％的盐水稀释至所需倍数。取0.1ml稀释后的菌液于15ml40℃的琼脂培养基混合摇匀，加盖冷却至培养基凝固，将其倒置在培养箱中于37℃下培养24h。肉眼数出培养皿中大肠杆菌的菌落数，与空白实验组对比计算出杀菌率。
[0071]
由图1可知，无机抗菌剂为铜离子的对比例2和无机抗菌剂为银离子的对比例1中的抗菌白炭黑的杀菌率分别可达90％和99％，实施例1的铜银抗菌白炭黑杀菌率可达到99％以上，铜银抗菌白炭黑的抗菌能力与只含银的相当，但铜取代了一部分银，从而降低了生产成本。
[0072]
分别在15ml琼脂培养基、含铜银抗菌白炭黑悬浊液的琼脂培养基和含铜银抗菌白炭黑滤液的琼脂培养基中分别接种0.1ml菌液，37℃下培养24h，确定存活菌数。活菌数见下表1。
[0073]
表1不同试验溶液的细菌存活数：
[0074][0075]
表1中数据可看出，滤液和悬浊液都有抗菌效果，铜银抗菌白炭黑同时存在溶出和接触抗菌两种机制。
[0076]
测定抗菌白炭黑抗菌离子含量
[0077]
测定抗菌白炭黑抗菌离子含量的具体检测方法为：用wly100-1等离子型单道扫描光电直读光谱仪测出收集的实施例1、对比例1和对比例2中白炭黑载体的滤液中抗菌离子的谱线、强度和浓度。利用测出的滤液中抗菌离子的浓度，通过差量法计算出抗菌离子的吸收率，进一步计算出抗菌白炭黑中抗菌离子的含量，具体结果见图2。
[0078]
由图2可知，随着金属离子浓度的增加，抗菌白炭黑的抗菌离子含量呈上升趋势。当金属离子浓度达到0.05mol/l时，抗菌白炭黑的抗菌离子含量变化趋于稳定，此时，铜银抗菌白炭黑抗菌离子含量为5.13％，比对比例2含铜抗菌白炭黑与对比例1含银抗菌白炭黑高，反应中的硝酸银和硫酸铜先后加入反应器中，有利于两种抗菌离子充分附着在白炭黑基体上。
[0079]
抗菌白炭黑粒度分布
[0080]
抗菌白炭黑粒度分布距离检测方法为：使用gsl-101bi激光颗粒分布测量仪测定各种抗菌材料样品的粒度分布，检测结果见图3。
[0081]
由图3得，实施例1的铜银抗菌白炭黑粒度分布在2～7μm之间，对比文件2只含铜的抗菌白炭黑粒度在10～25μm之间，对比例1只含银的抗菌白炭黑粒度在10～18μm之间。实施例1铜银抗菌白炭黑粒度比对比例1、2单种离子抗菌白炭黑小且均一，其抗菌效率更高，更适合用来制备抗菌产品。
[0082]
抗菌白炭黑ftir检测
[0083]
抗菌白炭黑ftir检测具体方法为：使用wqf-2000傅里叶变换红外光谱仪，在频率为400～4000cm-1
范围内白炭黑、实施例1的铜银抗菌白炭黑、对比例1的含银离子抗菌白炭黑和对比例2的含铜离子抗菌白炭黑分别进行红外分析，推断出抗菌离子与载体的结合方式，具体结果见图4。
[0084]
由图4可见，实施例1中的铜银抗菌白炭黑在1101cm-1
、1099cm-1
处出现吸收峰，表明在铜银抗菌白炭黑中铜和银与si-oh的h发生交换反应使si-o键的振动峰发生偏移。而在1384cm-1
处出现的峰说明铜银抗菌白炭黑表面有吸附硝酸银的现象。由此推断，实施例1中的铜银抗菌白炭黑的铜是通过离子交换方式而银是通过离子交换和吸附两种方式结合到白炭黑上。
[0085]
抗菌白炭黑热稳定性和光稳定性
[0086]
抗菌白炭黑热稳定性和光稳定性的测试方法为：将实施例1中的铜银抗菌白炭黑置于马弗炉中高温焙烧24h或置于阳光和荧光灯下照射48h，通过外观颜色、粒度、杀菌性能等变化，考察其热稳定性，热稳定性测试结构见下表2，经太阳光和荧光灯照射48h后的抗菌性能测试结构见下表3。
[0087]
表2铜银抗菌白炭黑经高温焙烧24h后的抗菌性能：
[0088][0089]
由表2可见，实施例1的铜银抗菌白炭黑高温焙烧24h后颜色、粒度均无变化，且保持较好的抗菌性。
[0090]
表3铜银抗菌白炭黑经太阳光和荧光灯照射48h后的抗菌性能：
[0091][0092]
由表3可见，铜银抗菌白炭黑经太阳光和荧光灯照射48h后颜色、粒度均无变化，且保持较好的抗菌性。
[0093]
抗菌医用硅胶的抗菌性能
[0094]
试样的抗菌性能按照《消毒技术规范(2002版)》中2.1.8抑菌环试验方法进行。
[0095]
分别用接种环刮取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌菌落至无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中，用6
×
108cfu/ml比浊管对，达到其浊度后进行梯度稀释，每次稀释10倍，最终获得6
×
105cfu/ml菌悬液，备用。用无菌棉签蘸取浓度为6
×
105cfu/ml菌悬液，在胰酪大豆胨琼脂培
养基平板表面均匀涂抹3次。每涂抹1次，平板应转动60
°
。最后将棉签绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿，置室温干燥5min。将准备好的对照组样品和不同铜银含量的银铜抗菌硅胶试样(0号为空白硅胶，1、2、3号分别为铜银含量为0.03％、0.05％、0.07％的抗菌医用硅胶样品，其中1号试样品中所添加的抗菌白炭黑的份数为0.6份，2号试样品中所添加的抗菌白炭黑的份数为1.0份，3号试样品中所添加的抗菌白炭黑的份数为1.4份，另外试样品中的其他成分根本比例进行添加)，分别贴在染菌的平板上，位于平皿中心，使其紧贴平板表面，试样尺寸为5mm左右，盖好平皿，置32℃培养箱培养16～18h观察结果。用游标卡尺测量抑菌环的直径并记录。在所测试样尺寸小于5mm时，抑菌环的直径大于等于7mm时可以认为有抗菌作用，具体测试结果见图5和表4。
[0096]
表4不同硅胶的抑菌环直径：
[0097][0098]
由图5和表4可以看出，铜银含量为0.07％的抗菌医用硅胶试样对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有抑菌环产生，且抑菌环较大，对两种菌均有抗菌性。当含量减少到0.05％时，抗菌医用硅胶试样对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有抗菌性；再降至0.03％时，抗菌医用硅胶试样对金黄色葡萄球菌有抑菌环，对大肠杆菌无抑菌环，对金黄色葡萄球菌有抗菌性。
[0099]
抗菌医用硅胶的细胞毒性
[0100]
抗菌医用硅胶的细胞毒性按照gb/t 16886.5中的mtt细胞毒性试验方法进行。
[0101]
将生长良好的l929细胞用0.5％胰酶(含edta)消化后，用mem稀释到1
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105个/ml，接种于96孔板，每孔接种100μl，每个样品六个复孔，37℃，5％co2培养箱中培养24h。去掉各孔中的培养液，按100ul/孔把各组浸提液分别加入96孔板中。以含5％dmso的mem培养基为阳性对照，mem培养基为阴性组，置于37℃，5％co2培养箱中培养48h，然后向每孔中加入20μlmtt液(5mg/ml)，混匀后培养4h，吸净培养基，每孔加入120μl dmso，轻微震荡混匀后于酶标仪下570nm处进行吸光值检测。存活率＝实验组的od平均值/阴性组的od平均值
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100％，测试结果见表5。
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表5不同硅胶的细胞存活率
[0103][0104]
由表5数据可见，采用抗菌医用硅胶的实验组细胞存活率为110％，表明抗菌医用硅胶无潜在的细胞毒性。
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最后需要强调的是，以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种变化和更改，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。