包含ANGPTL3单抗的融合蛋白

本发明涉及医学免疫学和分子生物学领域。具体涉及包含血管生成素样蛋白3(angptl3)的单抗的融合蛋白及其医学用途。

背景技术：

1、血管生成素样蛋白3(angptl3)是一种分泌性糖蛋白，其结构包括氨基端卷曲螺旋结构域(ccd)、分泌信号肽、短的连接肽和羧基端球状纤维蛋白原样结构域(fld)。angptl3氨基端的卷曲螺旋区域通过抑制脂蛋白酯酶lpl的活性使血浆甘油三酯(triglyceride,tg)水平升高，羧基端fld(207-460aa)与整合素αvβ3受体结合促进血管生成(camenisch g,pisabarro mt,sherman d,et al.angptl3 stimulates endothelial cell adhesion andmigration via integrinαvβ3and induces blood vessel formation in vivo.j biolchem,2002,277(19):17281-17290)，氨基端螺旋样结构域参与调节脂质代谢(ono m,shimizugawa t,shimamura m,et al.protein region important for regulation oflipid metabolism inangiopoietin-like 3(angptl3):angptl3 is cleaved andactivated in vivo[j].j biol chem,2003,278(43):41804-41809)，同时在足细胞损伤(liu j,gao x,zhai y,et al.a novel role of angiopoietin-like-3associated withpodocyte injury[j].pediatr res,2015,77(6):732-739.)、胰岛素抵抗(robciuc mr,maranghi m,lahikainen a,et al.angptl3 deficiency is associated with increasedinsulin sensitivity,lipoprotein lipase activity,and decreased serum freefatty acids[j].arterioscler thromb vasc biol,2013,33(7):1706-1713.)、动脉粥样硬化(dewey fe,gusarova v,dunbar rl,et al.genetic and pharmacologicinactivation of angptl3 and cardiovascular disease[j].n engl jmed,2017,377(3):211-221.)及肿瘤的发生及转移(koyama t,ogawara k,kasamatsu a,et al.angptl3is a novel biomarker as it activates erk/mapk pathway in oral cancer[j].cancer med,2015,4(5):759-769)、肥胖、糖尿病、家族性低β脂蛋白血症等方面也发挥着重要作用。此外，研究表明angptl3与其他代谢疾病如肾脏疾病发生发展有一定的相关性(liu j,gao x,zhai y,et al.a novel role of angiopoietin-like-3associated withpodocyte injury.pediatr res,2015,77(6):732-739)，angptl3在功能正常的肾脏中仅微量表达，而在多种以蛋白尿为主要表现的肾脏疾病中表达量显著增多(张强，尹卫东，唐朝克；angptl3与代谢紊乱相关疾病的研究进展[j]生命的化学,2018,38(1):30-34)。

2、炎症因子是由免疫细胞或组织细胞分泌的在细胞间发挥相互调控作用的一类高效性的小分子可溶性蛋白质，常见的炎症因子类型有白细胞介素(interleukin，il)、干扰素(interferon，ifn)和肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor，tnf)等，它们可调节影响免疫细胞的发育分化、参与固有免疫和适应性免疫应答、免疫调节，在炎症反应中扮演着重要角色(ektanyx.chao,a.westll.chanwpoewej.jankovicparkinson diseaseand theimmune system-associations,mechanisms and therapeuticsj].natrevneurol202016(6):303-318)。

3、糖尿病是一个系统性疾病，可引起多种并发症，其中糖尿病肾病为糖尿病并发症之一，糖尿病肾病是由糖尿病继发的肾脏病变。我国近十几年来，糖尿病肾病引起的终末期肾病发生率占首位(赵延香.早期糖尿病肾病患者血清tnf-a、il-6的变化及其与尿白蛋白/肌酐的相关性分析[u].中国医学创新,2020,17(4):121-124.)邵长娟,沈萌,孙丽丽.血清il-6、tnf-a、超敏c反应蛋白在糖尿病肾病患者中的水平变化及意义[j].中国卫生工程学，2020,19(3):444-446.)。近年来多项研究指出，血清炎症因子在糖尿病肾病的发病机制中起着重要作用，由于前炎症细胞因子作用于机体，诱导促炎细胞因子的产生，促进炎症因子反应，进而促进糖尿病肾病的发展(曹娟终末期糖尿病肾病患者实施血液透析联合血液灌流对血清炎症因子水平的影响[j].临床研究,2020,28(3):76-77.)。

4、足细胞损伤是肾病综合征(ns)常见病理变化。足细胞作为肾小球滤过屏障的重要组成成分，其损伤会引起蛋白尿，而蛋白尿是n s发展的主要推动因素，当蛋白尿达到特定阈值后，即出现低蛋白血症、水肿等表现(macéc,chugh ss.nephrotic syndrome:components,connections,and angiopoietin-like-4-related therapeutics[j].j amsoc nephrol,2014,25(11):2393-2398)，蛋白尿是肾脏疾病常见的临床表现；慢性肾疾病发展到一定阶段可引起肾纤维化。肾纤维化可由多种因素诱导产生，包括肾受到严重创伤和感染，肾血液循环阻塞或者免疫反应等。各种因素引起肾组织受损后，大量胶原纤维在间质沉积，瘢痕形成，导致肾结构和功能发生改变，从而引起肾纤维化，迄今关于肾纤维化的发生机制尚不完全明确。

5、目前ns病理诊断主要依靠肾活检，但其有创性限制了其广泛使用。而激素及免疫抑制剂作为治疗ns的基本药物，亦有诸多毒副作用。虽然在一种抗angptl3单克隆抗体及其在制备治疗肾病综合征药物中的用途(专利号：201911177503.5)中制备了angptl3-fld的鼠源单克隆抗体，其在体内、外有效减轻足细胞损伤和降低蛋白尿的治疗效果，但没有起到组织糖尿病肾病治疗过程中肾纤维化的一大关键问题。

6、目前需要开发一种能够达到保护足细胞、降低尿蛋白、减轻肾脏炎症、抑制肾脏纤维化的多维度、多时空药理效应的治疗方法及药剂，本发明可满足该需求。

技术实现思路

1、本技术公开了包含angptl3单抗的融合蛋白angptl3单抗-b，其所述融合蛋白angptl3单抗-b由angptl3单抗与序列b融合构成；所述b选自细胞因子。

2、进一步的，细胞因子可选自白细胞介素(interleukin，il)、干扰素(interferon，ifn)和肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor，tnf)等。在一些实施案例中，细胞因子进一步选自：il-22,il-1ra，il-4，il-10，il-13，tgf-β和/或epo等。进一步优选人源il-22(seq idno:5)和或鼠源il-22(seq id no:6),在一些实施方案中，angptl3单抗与序列b可以通过连接子连接，所述连接子可选自(ggggs)2，(ggggs)3，(ggggs)4，(eaaak)2，和/或(eaaak)3等。

3、本技术还公开了药物组合物，所述药物组合物包含所公开的融合蛋白angptl3单抗-b和药学上可接受的载体。

4、本技术还公开了编码本文所公开的融合蛋白angptl3单抗-b分离的核苷酸，本发明还涵盖所包含公开的核苷酸的载体，及包含该载体或编码本发明融合蛋白angptl3单抗-b的多核苷酸的宿主细胞。

5、本技术还公开了融合蛋白angptl3单抗-b在制备治疗其介导的疾病或病症的药物中的用途，该用途包括向有需要的患者施用包含本文所公开的融合蛋白angptl3单抗-b的药物组合物。