一种金荞麦片来源的微小核糖核酸及其用途的制作方法

本发明涉及生物医药，具体涉及一种金荞麦片来源的微小核糖核酸及其用途。

背景技术：

1、微小核糖核酸(microrna，简称mirna)是一类内源性非编码小rna。mirna基因由rna聚合酶ⅱ转录并产生初级产物(primary mirna，简称pri-mirna)，经过加工处理后最终在细胞质中形成单链的成熟mirna。成熟的mirna长度一般在18～25nt，能与靶mrna部分互补，下调基因的表达，以此来发挥对疾病的治疗效果，在生物医药研发具有广阔的应用前景。

2、近年来，随着生物信息学和高通量测序技术的发展，植物中mirna相关研究成果增长迅猛，对中药中含有的mirna研究也越来越深入。早在2012年，有研究人员通过实验证明丹参和地黄中mirna可通过消化道进入人体血液中。也有文献报道，在金银花的汤剂中发现mir2911能靶向作用于甲型流感病毒(influenza a viruses，iav)，用金银花汤剂对小鼠采用连续灌胃导致小鼠外周血和肺部mir2911浓度明显升高且降低小鼠死亡率。也有研究表明经过炮制煎煮等中药汤剂中仍含有稳定存在的小核酸片段，这些片段对人体有潜在的调节作用。

3、狂犬病是由狂犬病毒(rabies virus,rv)引起的侵犯中枢神经系统的人畜共患传染病，发病后致死率几乎为100％。rv入侵宿主后能够在宿主体内大量复制，进而转移至中枢神经系统而使其发病，狂犬病常见的临床症状包括神经兴奋、意识障碍等，最终全身麻痹死亡。rv属于弹状病毒科(rhabdoviridae)狂犬病毒属(lyssavirus)，是一种具有包膜的单链负股rna病毒。它具有5种主要的结构蛋白，分别是核蛋白(n)、磷蛋白(p)、基质蛋白(m)、包膜糖蛋白(g)和依赖rna的rna聚合酶(l)。

4、人鼻病毒(human rhinovirus，hrv)属于小核糖核酸病毒科肠道病毒属，基因组为单股正链rna，全长约7,200bp，编码4个结构蛋白和7个非结构蛋白，根据基因特征，将其分为a、b和c型。hrv是引起普通感冒的主要病原体,该病毒是引起急性呼吸道疾病的罪魁祸首，将近半数的急性呼吸道疾病感染是由hrv感染引起。hrv通常寄居于上呼吸道，在成人主要引起普通感冒等上呼吸道感染，在婴幼儿和慢性呼吸道疾病患者，除上呼吸道感染外，还能引起支气管炎和支气管肺炎。临床常表现为流涕、喷嚏、咽部不适、鼻塞、咳嗽、咽痛、声音嘶哑、体温不增高或略微增高，常伴有鼻窦炎和中耳炎。婴幼儿、老年人和免疫低下患者病情相对较严重，可发展为下呼吸道感染，最常诊断为支气管炎、肺炎。有慢性呼吸道疾病病史的患者感染hrv，可引起慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，copd)、哮喘等呼吸道疾病急性发作。

技术实现思路

1、因此，本发明要解决的技术问题在于提供一种金荞麦片来源的微小核糖核酸及其用途，所述金荞麦片来源的微小核糖核酸具有抑制狂犬病毒和人鼻病毒复制和活性的作用，以及治疗上述病毒所致疾病和感染的作用。

2、为此，本发明提供了如下的技术方案：

3、一种金荞麦片来源的微小核糖核酸，所述微小核糖核酸选自mir5717、mirn2340、mir166a、mir319b、mir171a、mir162a、mir159、mirn571、mir168a、mir398、mir159d、mirn34、mirn1444、mir-1897-5p、mir-554、mir396a-3p和mir-548f-3p中的至少一个；其中，

4、所述mir5717核苷酸序列如seq id no.1所示；

5、所述mirn2340核苷酸序列如seq id no.2所示；

6、所述mir166a核苷酸序列如seq id no.3所示；

7、所述mir319b核苷酸序列如seq id no.4所示；

8、所述mir171a核苷酸序列如seq id no.5所示；

9、所述mir162a核苷酸序列如seq id no.6所示；

10、所述mir159核苷酸序列如seq id no.7所示；

11、所述mirn571核苷酸序列如seq id no.8所示；

12、所述mir168a核苷酸序列如seq id no.9所示；

13、所述mir398核苷酸序列如seq id no.10所示；

14、所述mir159d核苷酸序列如seq id no.11所示；

15、所述mirn34核苷酸序列如seq id no.12所示；

16、所述mirn1444核苷酸序列如seq id no.13所示；

17、所述mir-1897-5p核苷酸序列如seq id no.14所示；

18、所述mir-554核苷酸序列如seq id no.15所示；

19、所述mir396a-3p核苷酸序列如seq id no.16所示；

20、所述mir-548f-3p核苷酸序列如seq id no.17所示。

21、所述的金荞麦片来源的微小核糖核酸，所述微小核糖核酸为mir159，包括人工合成mir159、植物来源mir159、mir159前体形式或mir159的成熟体形式。

22、可选的，所述的金荞麦片来源的微小核糖核酸具有如下的用途：

23、(1)、在制备抑制狂犬病毒复制或活性的产品中的用途；

24、(2)、在制备预防、缓解、辅助治疗或治疗狂犬病毒所致疾病或狂犬病毒感染的药物中的用途。

25、可选的，所述微小核糖核酸通过抑制狂犬病毒的rna聚合酶合成抑制狂犬病毒复制或活性；

26、可选的，狂犬病毒所致疾病包括狂犬病；

27、可选的，所述微小核糖核酸为mir159。

28、所述的金荞麦片来源的微小核糖核酸具有如下的用途：

29、(1)、在制备抑制人鼻病毒复制或活性的产品中的用途；

30、(2)、在制备预防、缓解、辅助治疗或治疗人鼻病毒所致疾病或人鼻病毒感染的药物中的用途。

31、可选的，所述微小核糖核酸通过敲低hrv-b35 p1078 sr410 2007多蛋白基因表达从而抑制人鼻病毒复制或活性；

32、可选的，所述人鼻病毒所致疾病包括上呼吸道感染、支气管炎、支气管肺炎、下呼吸道感染、慢性阻塞性肺疾病或哮喘；

33、可选的，所述人鼻病毒所致疾病包括急性呼吸道疾病；

34、可选的，所述微小核糖核酸为mir159。

35、一种狂犬病毒抑制剂，包括所述的金荞麦片来源的微小核糖核酸mir159，及药学上可接受的载体。

36、一种人鼻病毒抑制剂，包括所述的金荞麦片来源的微小核糖核酸mir159，及药学上可接受的载体。

37、本发明技术方案，具有如下优点：

38、1.本发明提供的一种金荞麦片来源的微小核糖核酸，所述金荞麦片来源的微小核糖核酸具有抑制狂犬病毒和人鼻病毒复制和活性的作用，以及治疗上述病毒所致疾病和感染的作用。

39、2.本发明提供的一种金荞麦片来源的微小核糖核酸中，所述微小核糖核酸为mir159具有抑制狂犬病毒复制或活性的作用，可以用于制备预防、缓解、辅助治疗或治疗狂犬病毒所致疾病或狂犬病毒感染的药物，如狂犬病毒所致的狂犬病。

40、3.本发明提供的一种金荞麦片来源的微小核糖核酸中，所述微小核糖核酸为mir159具有抑制人鼻病毒复制或活性的作用，可以用于制备预防、缓解、辅助治疗或治疗人鼻病毒所致疾病或人鼻病毒感染的药物，如人鼻病毒所致疾病包括上呼吸道感染、支气管炎、支气管肺炎、下呼吸道感染、慢性阻塞性肺疾病或哮喘。