ROCK2抑制剂belumosudil的氘代药物及用途的制作方法

rock2抑制剂belumosudil的氘代药物及用途
技术领域
1.本发明属于生物医药领域，具体涉及rock2抑制剂belumosudil的氘代药物及用途。


背景技术：

2.慢性移植物抗宿主病(cgvhd)是一类移植后并发症，一般指异基因造血干细胞移植晚期会出现的排斥反应。cgvhd的发生机制复杂，发生率很高，患者发作后表现出严重程度各异的排斥症状，严重影响患者术后的健康和生活质量，严重的甚至导致患者死亡。
3.rho相关蛋白激酶(rock)，属于丝氨酸/苏氨酸激酶蛋白家族，包括rock1和rock2两种亚型。rock广泛分布于全身组织，其中rock2主要位于中枢神经细胞、心脏和骨骼肌中。2021年，美国kadmon公司开发的belumosudil经fda批准，可用于12岁及以上患有cgvhd的成人和儿童。
4.氘代药物，既将药物分子的一个或多个碳氢键用碳氘键替代的新药物分子，可以通过改善原有药物的药代动力学性质，进而克服药物原有的易于代谢、副作用较大等缺陷。
5.本发明为rock2抑制剂belumosudil的氘代药物，可以进一步改善belumosudil的药代动力学性质，降低给药剂量和可能的毒副作用。


技术实现要素：

6.本发明提供了一种rock2抑制剂belumosudil的氘代药物，可以进一步改善belumosudil的药代动力学性质，降低给药剂量和可能的毒副作用。
7.为了实现上述目的，本发明提供了一种如下式ⅰ所示的rock2抑制剂belumosudil的氘代化合物及其药学上可接受的盐：
[0008][0009]
本发明所述的rock2抑制剂belumosudil的氘代化合物及其药学上可接受的盐，其药学上可接受的盐包括如甲磺酸盐、马来酸盐、盐酸盐、磷酸盐等的应用。
[0010]
本发明所述的rock2抑制剂belumosudil的氘代化合物及其药学上可接受的盐，其用于在制备治疗慢性移植物抗宿主病(cgvhd)、动脉粥样硬化、类风湿关节炎、血管瘤、血管纤维瘤、多发性硬化症、重症肌无力、克罗恩氏病、自身免疫性肾炎等疾病药物中的应用。
[0011]
有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点：
[0012]
本发明提供一类rock2抑制剂belumosudil的氘代药物，进一步降低belumosudil的给药剂量和可能的毒副作用，改善了药代动力学性质。
具体实施方式
[0013]
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
[0014]
实施例1 rock2抑制剂belumosudil的氘代药物的合成
[0015]
总体合成路线：
[0016][0017]
其中，
[0018]
中间体1可参照专利cn105101996a实施例50的方法可制得；
[0019]
中间体2的合成：
[0020]
向0.496g中间体1(1mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(20ml)溶液中加入氢氧化钾(4mmol，4eq)和碘单质(2mmol，2eq)，室温反应3小时，tlc监测反应完全，加入亚硫酸钠饱和溶液淬灭反应，水相用乙酸乙酯(10ml*2)萃取，水(20ml*2)洗，饱和食盐(20ml)水洗无水硫酸钠干燥，浓缩柱层析，得0.367g中间体2，收率59％。
[0021]
中间体3的合成
[0022]
向0.311g中间体2(0.5mmol)的氘代醋酸溶液(8ml)中加入醋酸钠(1mmol，2eq)，2小时滴完，室温反应24小时，tlc检测反应完全，减压浓缩，柱层析得0.196g中间体3，收率79％。
[0023]
中间体4
[0024]
放大试验后，将0.494g中间体3(1mmol)加入二氯甲烷(2ml)，滴入三氟乙酸(0.5ml)，室温反应2小时，tlc检测反应完全，过滤，减压浓缩，柱层析得0.260g中间体4，收率88％。
[0025]
实施例1化合物的制备
[0026]
将0.148g中间体4(0.5mmol)、pd(dppf)cl2(10％mol)、碳酸钠(1mmol，2eq)和n-异丙基-2-(3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环环戊烷-2-基)苯氧基)乙酰胺(0.75mmol，1.5eq)用二氧六环/水(10：1，10ml)的溶液溶解，100℃下搅拌过夜，tlc检测反应完全。冷却，减压浓缩旋干溶剂，通过hplc纯化可得实施例1化合物0.131g，收率58％。1h nmr
(300mhz,dmso-d6)δ13.09(s,1h),9.95(s,1h),8.59(d,j＝3.0hz,1h),8.32(s,1h),8.05
–
7.85(m,5h),7.63
–
7.59(m,2h),7.43
–
7.39(m,2h),7.06(d,j＝7.6hz,1h),4.52(s,1h),4.01
–
3.96(m,1h),1.11(d,j＝6.2hz,6h).
[0027]
试验例1：rho激酶抑制活性测试
[0028]
(一)试剂及耗材
[0029]
试剂名称供货商货号人rho激酶elisa试剂盒恒远生物hb2178-hu
[0030]
(二)仪器
[0031]
离心机(生产厂家：eppendorf，型号：5430)
[0032]
酶标仪(生产厂家：perkin elmer，型号：envision)
[0033]
(三)实验方法
[0034]
采用人rho激酶elisa试剂盒进行测试，将hrp标记rho激酶抗体加入r孔板中，再加入rock1或rock2激酶，经过彻底洗涤后，加入底物tmb染色，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度值(od值)，依据标准物的浓度为横坐标，od值为纵坐标，绘制标准曲线，根据样品的od值计算相应样品的ic
50
值。
[0035]
化合物rock1 ic
50
(nm)rock2 ic
50
(nm)实施例1》1000055belumosudil》10000100
[0036]
实施例1具有优异的rock2选择性抑制活性，相对于阳性药belumosudil，活性提高了一倍。
[0037]
试验例2：实施例1化合物的药代动力学实验
[0038]
(一)实验仪器和材料
[0039]
高速冷冻离心机，涡旋振荡器(vortex genius3)，高速离心机(eppendorf5415d)，一次性使用注射器，移液枪(eppendorf)，实验所用sd雄性大鼠均购自扬州大学，edta-k2真空采血管，生理盐水。所有口服组大鼠在给药前禁食12h，自由饮水，给药期间自由进水和进食。
[0040]
(二)实验步骤
[0041]
实施例1或belumosudil使用dmso/solutol/water(10/10/80)溶解制成澄清溶液，灌胃给药化合物剂量25mg/kg，尾静脉给药化合物的剂量为5mg/kg。于尾静脉给药后的2min,10min,30min,1h,2h,3h,5h,8h,12h,16h,24h，从眼底静脉丛连续取血0.5ml至肝素管中，灌胃给药后的5min,15min,30min,1h,2h,3h,5h,8h,12h,16h,24h，从眼底静脉丛连续取血0.5ml肝素管中。将样品在8000r，4℃条件下离心10min后，取上层血浆0.15ml，-20℃条件下保存，之后进行lc-ms/ms分析。数据通过winnolin非房室模型分析，得到关键药代动力学参数。
[0042]
(三)实验结果
[0043]
表1药代动力学参数
[0044][0045]
相对于阳性药belumosudil，实施例1口服给药的半衰期和达峰浓度都提高了一倍，口服生物利用度也明显提升，可以有效改进belumosudil的给药剂量，从而降低belumosudil高剂量给药的毒副作用。
[0046]
最后有必要说明的是，以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。