一种酰胺类化合物、其制备方法及其应用与流程

1.本发明涉及一种酰胺类化合物、其制备方法及其应用。


背景技术：

2.环氧化物水解酶(eh，ec3.3.2.3)催化环氧化物或芳烃氧化物水解为其相应的二醇(参见，oesch，f.等，xenobiotica，1973，3，305-340)。一些eh在各种化合物的代谢中发挥至关重要的作用，所述化合物包括激素、化疗药物、致癌物、环境污染物、真菌毒素和其它有害的外来化合物。
3.微粒体环氧化物水解酶(meh)和可溶性环氧化物水解酶(seh)是两种充分研究的eh。近年来，报道了1，3-二取代的脲、氨基甲酸酯和酰胺是seh的有效且稳定的新抑制剂。中国专利cn101084216a报道了含有三氟甲基苯基、三氟甲氧基苯基取代的脲。但仍需开发更多具有活性相似或提高的化合物。


技术实现要素：

4.本发明所要解决的技术问题为现有的抑制可溶性环氧酶的药物的结构较为单一的缺陷，为此，本发明提供一种酰胺类化合物、其制备方法及其应用。本发明的化合物对可溶性环氧酶具有较好的抑制效果。
5.本发明还提供一种如式i-2所示的化合物或其药学上可接受的盐，
[0006][0007]
其中，环a为3到6元的环烷烃；n为0、1、2或3；
[0008]
r3独立地为“被1个或多个卤素取代的c
1-c6烷基”、“被1个或多个卤素取代的c
1-c6烷氧基”、卤素或五氟化硫；
[0009]
r2为氢、c
1-c6烷基、苯基或“被1个或多个羧基取代的苯基”；r
2-1
为氢、c
3-c6环烷基或c
1-c6烷基；r
2-1-1
为c
1-c6烷基。
[0010]
在某一方案中，所述如式i-2所示的化合物或其药学上可接受的盐里，某些基团的定义可如下所述，其他基团的定义可如上任一方案所述(以下简称“在某一方案中”)：其中，环a为3或5元的环烷烃，n为1或2；r3独立地为“被3个卤素取代的c
1-c6烷基”、“被3个卤素取代的c
1-c6烷氧基”、卤素或五氟化硫；r2为氢或r
2-1
为c
3-c6环烷基或c
1-c6烷基；r
2-1-1
为c
1-c6烷基。
[0011]
在某一方案中，环a为3或5元的环烷烃。
[0012]
在某一方案中，n为1或2。
[0013]
在某一方案中，r3独立地为“被3个卤素取代的c
1-c6烷基”、“被3个卤素取代的c
1-c6烷氧基”、卤素或五氟化硫。
[0014]
在某一方案中，r2为氢或
[0015]
在某一方案中，r
2-1
为c
3-c6环烷基或c
1-c6烷基。
[0016]
在某一方案中，r
2-1
为或异丙基；r
2-1-1
为甲基。
[0017]
在某一方案中，当r3为“被3个卤素取代的c
1-c6烷基”时，r2为r
2-1
为异丙基。
[0018]
在某一方案中，当r3为五氟化硫时，r2为r
2-1
为r
2-1-1
为甲基。
[0019]
在某一方案中，所述如式i-2所示的化合物为如i-2-1所示其中，n为1或2；r3独立地为“被3个卤素取代的c
1-c6烷基”、“被3个卤素取代的c
1-c6烷氧基”或卤素；r2为r
2-1
为c
3-c6环烷基或c
1-c6烷基；r
2-1-1
为c
1-c6烷基。
[0020]
在某一方案中，所述如式i-2所示的化合物为如i-2-1所示其中，n为1或2；r3独立地为“被3个卤素取代的c
1-c6烷基”、“被3个卤素取代的c
1-c6烷氧基”、卤素或五氟化硫；r2为r
2-1
为c
3-c6环烷基或c
1-c6烷基；r
2-1-1
为c
1-c6烷基。
[0021]
在某一方案中，所述如式i-2所示的化合物为如i-2-2所示
其中，n为1或2；r3独立地为“被1个或多个氟取代的c
1-c6烷基”、“被1个或多个卤素取代的c
1-c6烷氧基”或卤素；r2为氢或r
2-1
为c
3-c6环烷基或c
1-c6烷基。
[0022]
在某一方案中，所述如式i-2所示的化合物为如i-2-2所示其中，n为1或2；r3独立地为“被1个或多个氟取代的c
1-c6烷基”、“被1个或多个卤素取代的c
1-c6烷氧基”、卤素或五氟化硫；r2为氢或r
2-1
为c
3-c6环烷基或c
1-c6烷基。
[0023]
在某一方案中，所述如式i-2所示的化合物为如i-2-3所示其中，n为1或2；r2为r
2-1
为或c
1-c6烷基；r
2-1-1
为c
1-c6烷基；较佳地，五氟化硫位于酰胺氮的间位和/或对位。
[0024]
在某一方案中，所述如式i-2所示的化合物中，n为1或2；r3为五氟化硫；r2为r
2-1
为或c
1-c6烷基；r
2-1-1
为c
1-c6烷基；较佳地，五氟化硫位于酰胺氮的间位和/或对位。
[0025]
在某一方案中，所述如式i-2所示的化合物为如i-2-4所示n为1或2；r3独立地为“被3个卤素取代的c
1-c6烷基”或五氟
化硫；r2为r
2-1
为或c
1-c6烷基；r
2-1-1
为c
1-c6烷基。
[0026]
在某一方案中，r3独立地为“被3个卤素取代的c
1-c6烷基”或五氟化硫。
[0027]
在某一方案中，r3独立地为“被1个或多个氟取代的c
1-c6烷基”、“被1个或多个卤素取代的c
1-c6烷氧基”、卤素或五氟化硫。
[0028]
在某一方案中，r2为
[0029]
在某一方案中，r
2-1
为或c
1-c6烷基。
[0030]
在某一方案中，r
2-1
为c
3-c6环烷基或c
1-c6烷基。
[0031]
在某一方案中，五氟化硫位于酰胺氮的间位和/或对位。
[0032]
在某一方案中，r3中，所述“被1个或多个卤素取代的c
1-c6烷基”中c
1-c6烷基可为c
1-c4烷基；所述c
1-c4烷基优选为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基；所述c
1-c4烷基还优选为甲基；更佳地，所述“被1个或多个卤素取代的c
1-c6烷基为三氟取代的c
1-c4烷基”，例如三氟甲基。
[0033]
在某一方案中，r3中，所述“被1个或多个卤素取代的c
1-c6烷氧基”中c
1-c6烷氧基可为c
1-c4烷氧基；所述c
1-c4烷氧基优选为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基；所述c
1-c4烷氧基还优选为甲基氧；更佳地，所述“被1个或多个卤素取代的c
1-c6烷氧基为三氟取代的c
1-c4烷氧基，例如三氟甲氧基。
[0034]
在某一方案中，r3中，所述卤素可为氟、氯、溴或碘；还可为氟。
[0035]
在某一方案中，r2中，所述c
1-c6烷基可为c
1-c4烷基；又可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。
[0036]
在某一方案中，r
2-1
中，所述c
1-c6烷基可为c
1-c4烷基；又可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基；还可为异丁基或异丙基。
[0037]
在某一方案中，r
2-1
中，所述的c
3-c6环烷基可为环丙基、环丁基、环戊基或环己基，又可为环丙基。
[0038]
在某一方案中，r
2-1-1
中，所述c
1-c6烷基可为c
1-c4烷基；又可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基；还可为叔丁基。
[0039]
在某一方案中，r2可为boc、
[0040]
在某一方案中，r3可为氟、三氟甲基、三氟甲氧基或五氟化硫。
[0041]
在某一方案中，可又可为
[0042]
在某一方案中，中的r3位于酰胺氮的间位和/或对位。
[0043]
在某一方案中，所述如式i-2所示的化合物选自如下任一化合物：
[0044]
[0045]
[0046][0047]
本发明还提供一种如式i-3所示的化合物或其盐，
[0048][0049]
其中，环a、n和r3如前所述。
[0050]
在某一方案中，所述盐为本领域常规的无机酸与如式i-3所示的化合物形成的盐；例如所述盐为i-3所示的化合物与盐酸形成的盐，再例如所述盐为i-3所示的化合物与盐酸以摩尔比1∶1形成的盐。
[0051]
在某一方案中，所述如式i-3所示的化合物选自如下任一化合物：
[0052]
[0053][0054]
本发明还提供一种如式i-2所示的化合物的制备方法，所述制备方法为方案1或方案2，
[0055]
所述方案1包括如下步骤：溶剂中，如式ii所示化合物与胺类化合物在碱存在下进行如下式所示的缩合反应，即可；环a、n、r2和r3的定义如前所述；
[0056][0057]
所述方案2包括如下步骤：溶剂中，如式i-3所示化合物或其盐与式i-4所示化合物在碱存在下进行如下式所示的酰胺化反应，即可；r2为r
2-1
、环a、n和r3的定义如前所述；
[0058][0059]
所述缩合反应中，所述溶剂可为本领域常规的溶剂。所述溶剂可选自醚类溶剂、氯代烷烃和芳烃类溶剂中的一种或多种。所述醚类溶剂优选为乙醚、四氢呋喃或甲基叔丁基醚。所述氯代烷烃优选为二氯甲烷。所述芳烃类溶剂优选为甲苯或苯。
[0060]
所述缩合反应中，所述溶剂的用量为本领域常规用量，所述溶剂与如式ii所示化合物的体积摩尔比可为1-10ml/mmol；例如7ml/mmol或8ml/mmol。
[0061]
所述缩合反应中，所述如式ii所示化合物与胺类化合物的摩尔比可为1∶(1-3)；例如1∶1.5或1∶1.7。
[0062]
所述缩合反应中，所述碱可为本领域常规的有机碱，所述碱可为含氮有机碱；例如三乙胺。
[0063]
所述缩合反应中，所述碱的用量可为本领域常规用量；所述如式ii所示化合物与碱的摩尔比可为1∶(1-3)；例如1∶1.5或1∶1.8。
[0064]
所述缩合反应中，所述缩合反应的反应温度为本领域常规的反应温度，优选为0-40℃，例如0℃、15℃或25℃。
[0065]
所述方案2中，酰胺化反应可以在酸酐的存在下进行。所述酸酐为本领域常规的酸酐；较佳地，所述酸酐选自丙基磷酸酐、hatu(2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n，n，n
′
，n
′‑
四甲基脲六氟磷酸酯)、edci(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)和hobt(1-羟基苯并三
唑)中的一种或多种；例如丙基磷酸酐。所述丙基磷酸酐的加入方式优选为丙基磷酸酐质量分数为50％的乙酸乙酯溶液。
[0066]
所述酰胺化反应中，所述盐为本领域常规的盐，较佳地为盐酸盐。
[0067]
所述方案2中，所述酸酐的用量为本领域常规用量，所述酸酐与如式i-3所示的化合物的摩尔比可为4∶(1-10)，例如3∶1、4∶1或5∶1。
[0068]
所述酰胺化反应中，所述如式ii所示化合物与式i-4所示化合物的摩尔比可为1∶(1-3)；例如1∶1.3、1∶1.5或1∶1.7。
[0069]
所述酰胺化反应中，所述溶剂可为本领域常规的溶剂。所述溶剂可为氯代烷烃类溶剂和/或酰胺类溶剂。所述氯代烷烃类溶剂优选为dcm。所述酰胺类溶剂优选为dmf。
[0070]
所述酰胺化反应中，所述溶剂的用量为本领域常规用量，所述溶剂与如式ii所示化合物的体积摩尔比可为1-20ml/mmol；例如11ml/mmol或12ml/mmol。
[0071]
所述酰胺化反应中，所述碱可为本领域常规的有机碱，所述碱可为含氮有机碱；例如三乙胺。
[0072]
所述酰胺化反应中，所述碱的用量可为本领域常规用量；所述如式ii所示化合物与碱的摩尔比可为1∶(1-10)；例如1∶3、1∶4或1∶5。
[0073]
所述酰胺化反应中，所述缩合反应的反应温度为本领域常规的反应温度，优选为0-40℃，例如0℃、15℃或25℃。
[0074]
本发明还提供一种物质z在制备治疗和/或预防与可溶性环氧酶相关疾病的药物中的应用；所述物质z为前述如式i-2所示的化合物或其药学上可接受的盐。
[0075]
较佳地，所述疾病为高血压、疼痛、心肌病、炎症、成人呼吸窘迫综合征、糖尿病并发症、肾病、雷诺综合征或关节炎。
[0076]
所述疼痛优选神经性疼痛和/或炎症性疼痛。
[0077]
所述肾病优选晚期肾病。
[0078]
所述高血压优选肾高血压、肝高血压或肺高血压。
[0079]
所述炎症优选肾脏炎症、血管炎症或肺炎症。
[0080]
本发明还提供一种物质z在制备可溶性环氧酶抑制剂中的应用；所述物质z为前述如式i-2所示的化合物或其药学上可接受的盐。
[0081]
本发明还提供一种药物组合物，其包括其包含物质z和药用辅料，所述物质z为前述如式i-2所示的化合物或其药学上可接受的盐。
[0082]
所述的药物组合物中，所述的物质z可为治疗有效量的物质z。
[0083]
术语定义
[0084]
在本文中定义的某些化学基团前面通过简化符号来表示该基团中存在的碳原子总数。例如，c
1-c6烷基是指具有总共1、2、3、4、5或6个碳原子的如下文所定义的烷基。简化符号中的碳原子总数不包括可能存在于所述基团的取代基中的碳。
[0085]
术语“室温”一般是指25-30℃。
[0086]
术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
[0087]
术语“多个”是指2个、3个、4个或5个。
[0088]
术语“药学上可接受的盐”表示由适宜的非毒性有机酸、无机酸、有机碱或无机碱与如式i-1所示化合物形成的盐，其保留如式i-1所示化合物的生物活性。
[0089]
术语“药用辅料”是指生产药品和调配处方时使用的赋形剂和附加剂，是除活性成分以外，包含在药物制剂中的所有物质。可参见中华人民共和国药典(2015年版)四部、或、handbook of pharmaceutical excipients(raymond c rowe，2009sixth edition)。
[0090]
术语“治疗”指治疗性疗法。涉及具体病症时，治疗指：(1)缓解疾病或者病症的一种或多种生物学表现，(2)干扰(a)导致或引起病症的生物级联中的一个或多个点或(b)病症的一种或多种生物学表现，(3)改善与病症相关的一种或多种症状、影响或副作用，或者与病症或其治疗相关的一种或多种症状、影响或副作用，或(4)减缓病症或者病症的一种或多种生物学表现发展。
[0091]
术语“预防”是指获得或发生疾病或障碍的风险降低。
[0092]
术语“治疗有效量”是指在给予患者时足以有效治疗本文所述的疾病或病症的化合物的量。“治疗有效量”将根据化合物、病症及其严重度、以及欲治疗患者的年龄而变化，但可由本领域技术人员根据需要进行调整。
[0093]
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
[0094]
本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0095]
本发明的积极进步效果在于：本发明的化合物对可溶性环氧酶具有较好的抑制效果或者具有良好的代谢性质(例如：半衰期、暴露量auc、最大血药浓度cmax)。
具体实施方式
[0096]
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0097]
制备分离(纯化)的色谱条件：
[0098]
分离条件：
[0099]
流动相：流动相a：水(0.225％甲酸)；流动相b：乙腈
[0100]
色谱柱：phenomenexluna c18150*40mm*15μm
[0101]
梯度洗脱：37-67％流动相b
[0102]
梯度洗脱时间：10min
[0103]
检测波长：254nm
[0104]
流速(ml/min)：60ml/min。
[0105]
实施例1 bx20-6-i06的合成
[0106]
合成路线如下式所示：
[0107][0108]
将化合物xr02-s1(0.27g，1.46mmol)、化合物int-1(0.30g，1.33mmol)和tea(三乙
胺)(0.27g，2.66mmol)依次加入到dcm(10.0ml)中，反应混合液于15℃反应12h。反应完成后，将反应液直接于40℃减压浓缩后，残留物经过柱层析(pe/ea＝2/1～0/1，v/v)纯化，得到淡黄色固体化合物bx20-6-i06(0.27g，收率为49％)。
[0109]1h nmr(400mhz，cdcl3)δ＝7.51-7.43(m，4h)，7.22(s，1h)，5.18(s，1h)，4.28(q，j＝7.2hz，1h)，3.56-3.51(m，2h)，3.15-3.12(m，2h)，2.73(s，2h)，1.89-1.67(m，4h)，1.45(s，9h)；ms(esi，m/z)358.1[m-t-bu+h]
+
。
[0110]
实施例2 bx20-6-i07的合成
[0111]
第一步xr020009-i01的合成
[0112]
合成路线如下式所示：
[0113][0114]
将化合物xr02-s4(2.00g，8.90mmol)溶于dcm(30ml)中，反应液降温至0℃以下，加入bnnh2(0.95g，8.90mmol)，乙酸(0.53g，8.90mm0l)，将反应液置于冰浴下，搅拌30min，加入nabh(oac)3(3.76g，17.8mmol)的dcm(30ml)溶液，于25℃下搅拌12h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后，残留物经过柱层析(pe/ea/meoh＝1/1/0～0/5/1，v/v)纯化，得到淡黄色油状化合物xr020009-i01(2.30g，收率为82.1％)。ms(esi，m/z)317.2[m+h]
+
。
[0115]
第二步：xr020009-i02的合成
[0116]
合成路线如下式所示：
[0117][0118]
将化合物xr020009-i01(2.30g，7.00mmol)，pd(oh)2/c(2.07g)，置换h2后，反应混合液在h2(15psi)下于25℃下反应12h。反应毕，将反应液直接过滤后收集滤液，滤液于40℃减压浓缩后得到无色油状化合物xr020009-i02(1.70g，粗品)，直接用于下一步反应，m/z＝227.17[m+h]
+
。
[0119]
第三步：化合物bx20-6-i07的合成
[0120]
合成路线如下式所示：
[0121][0122]
将化合物xr020009-i02(1.00g，4.40mmol)，xr02-s1(0.90g，4.84mmol)，tea(0.90g，8.80mmol)依次加入dcm(30ml)中，反应混合液于25℃下反应4h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后，残留物经过柱层析(pe/ea＝20/1～1/1，v/v)纯化，得到白色粉末
状化合物bx20-6-i07(1.50g，收率为83.0％)。
[0123]1h nmr(400mhz，cdcl3)δ＝7.58(s，1h)，7.28-7.26(m，3h)，5.61(d，j＝7.6hz，1h)，4.03-3.94(m，1h)，3.25-3.22(m，2h)，3.13-3.10(m，2h)，2.43-2.41(m，2h)，2.21-2.14(m，2h)，1.28(s，9h)，0.95-0.91(m，2h)；ms(esi，m/z)414.19[m+h]
+
。
[0124]
实施例3 bx20-6-008的合成
[0125]
第一步：bx20-6-i06的合成
[0126]
根据实施例1进行，得到淡黄色固体化合物bx20-6-i06。
[0127]
第二步：化合物xr020008-i02的合成
[0128]
合成路线如下式所示：
[0129][0130]
将化合物bx20-6-i06(0.20g，0.48mmol)溶于无水甲醇(5.0ml)中，加入2mhcl/ea溶液(2.4ml，4.80mmol)。反应混合液于10℃反应5h。反应完成后，于40℃减压浓缩后，得到白色固体化合物xr020008-i02(0.16g，盐酸盐，粗品)，直接用于下一步反应。
[0131]
第三步：化合物bx20-6-008的合成
[0132]
合成路线如下式所示：
[0133][0134]
将化合物xr020008-i02(0.16g，0.46mmol)、化合物异丁酸(52.0mg，0.59mmol)、tea(0.23g，2.30mmol)和t3p(丙基磷酸酐)(1.17g，t3p质量分数为50％的乙酸乙酯溶液，1.84mmol)，依次加入到dcm(5.0ml)中，反应混合液于15℃反应6h。反应完成后，将反应液于40℃减压浓缩后，得到残留物经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-008(23mg，收率为13％)。
[0135]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.74(s，1h)，7.59-7.51(m，4h)，6.41(d，j＝7.6hz，1h)，4.08(q，j＝7.2hz，1h)，3.65(t，j＝7.2hz，1h)，3.50-3.45(m，1h)，3.28-3.25(m，1h)，3.14(dd，j＝8.8，4.0hz，1h)，2.82-2.76(m，1h)，2.70-2.60(m，2h)，1.80-1.64(m，4h)，1.00-0.95(m，6h)；ms(esi，m/z)384.2[m+h]
+
。
[0136]
实施例4 bx20-6-009的合成
[0137]
第一步：bx20-6-i07的合成
[0138]
根据实施例2进行，得到白色粉末状化合物bx20-6-i07。
[0139]
第二步：xr020009-i04的合成
[0140]
合成路线如下式所示：
[0141][0142]
将化合物bx20-6-i07(1.20g，2.90mmol)溶于meoh(10ml)中，加入hcl(5ml，1m)，反应混合液于25℃下反应12h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后，得到白色粉末状化合物xr020009-i04(1.00g，粗产品，盐酸盐)，粗产物直接用于下一步。ms(esi，m/z)314.14[m+h]
+
。
[0143]
第三步：bx20-6-009的合成
[0144]
合成路线如下式所示：
[0145][0146]
将化合物xr020009-i04(0.60g，1.71mmol)，异丁酸(0.18g，2.06mmol)，tea(0.87g，8.58mmol)，t3p(5.40g，8.58mmol)依次加入dcm(20ml)中，反应混合液于25℃下反应12h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后，得到残留物经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-009(147mg，收率为22.5％)。
[0147]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.72(s，1h)，7.57-7.51(m，4h)，6.46(d，j＝7.2hz，1h)，4.01-3.94(m，1h)，3.61-3.56(m，1h)，3.42-3.37(m，2h)，2.66-2.61(m，2h)，2.53-2.50(m，2h)，2.21-2.16(m，2h)，1.24-1.14(m，2h)，1.00-0.95(m，6h)；ms(esi，m/z)384.1[m+h]
+
。
[0148]
实施例5 bx20-6-011的合成
[0149]
第一步：s2-011的合成
[0150]
合成路线如下式所示：
[0151][0152]
在-78℃下，将化合物s1-011(0.15g，0.66mmol)的dcm(3.0ml)溶液缓慢滴加到化合物int-1(0.15g，0.75mmol)、tea(0.10g，1.00mmol)的dcm(5.0ml)溶液中，反应混合液升温至20℃下反应0.5h。反应完成后，将反应液直接于40℃减压浓缩后，残留物经过柱层析(pe/ea＝3/1～1/1，v/v)纯化，得到白色固体化合物s2-011(160mg，收率为49.7％)，m/z＝430.2[m+h]
+
。
[0153]
第二步：s3-011的合成
[0154]
合成路线如下式所示：
[0155][0156]
将化合物s2-011(160mg，0.37mmol)溶于meoh(5.0ml)中，再加入hcl/ea(2m，5ml)，反应在20℃下搅拌5小时。反应毕，直接于40℃减压浓缩，得到黄色固体化合物s3-011(136mg，粗产物，盐酸盐)，m/z＝330.3[m+h]
+
。
[0157]
第三步：bx20-6-011的合成
[0158]
合成路线如下式所示：
[0159][0160]
将化合物s3-011(136mg，粗产物，盐酸盐)、(s)-(+)-2-甲基丁酸(46mg，0.45mmol)、t3p(50％的乙酸乙酯溶液，0.76g，1.11mmol)和tea(187mg，1.85mmol)依次加入dmf(2ml)中，反应混合液于室温下搅拌16h。反应毕，加入水(20ml)，乙酸乙酯(5ml
×
3)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-011(25mg，收率为16.3％)。
[0161]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.60(s，1h)，7.46(d，j＝7.6hz，2h)，7.20(d，j＝7.6hz，2h)，6.37(d，j＝8.0hz，1h)，4.11-4.08(m，1h)，3.69-3.66(m，1h)，3.52-3.49(m，1h)，3.31-3.28(m，1h)，3.20-3.17(m，1h)，2.86-2.65(m，2h)，2.49-2.46(m，1h)，1.80-1.65(m，4h)，1.58-1.53(m，1h)，1.31-1.23(m，1h)，1.00-0.95(m，3h)，0.83-0.78(m，3h).
[0162]
实施例6bx20-6-012的合成
[0163]
第一步：s2-012的合成
[0164]
合成路线如下式所示：
[0165][0166]
在-78℃下，将化合物s1-011(500mg，2.46mmol)的dcm(5.0ml)溶液缓慢滴加到化合物int-2(528mg，2.34mmol)、tea(28.0mg，2.77mmol)的dcm溶液中，反应混合液于0℃下反应3h。反应完成后，将反应液直接于40℃减压浓缩后，残留物经过柱层析(pe/ea＝3/1～1/1，v/v)纯化，得到白色固体化合物s2-012(750mg，收率为71.0％)，m/z＝430.2[m+h]
+
。
[0167]
第二步：s3-012的合成
[0168]
合成路线如下式所示：
[0169][0170]
将化合物s2-012(750mg，1.74mmol)溶于meoh(10.0ml)中，再加入hcl/ea(2m，20ml)，反应在室温下搅拌3小时。反应毕，直接于40℃减压浓缩，得到黄色固体化合物s3-012(700mg，粗产物，盐酸盐)，m/z＝330.3[m+h]
+
。
[0171]
第三步：bx20-6-012的合成
[0172]
合成路线如下式所示：
[0173][0174]
将化合物s3-012(700mg，粗产物，盐酸盐)、(s)-(+)-2-甲基丁酸(250mg，2.46mmol)、t3p(50％的乙酸乙酯溶液，3.90g，6.20mmol)和tea(626mg，6.20mmol)依次加入dmf(10ml)中，反应混合液于室温下搅拌16h。反应毕，加入水(80ml)，乙酸乙酯(35ml
×
3)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-012(110mg，收率为15.3％)。m/z＝414.3[m+h]
+
。
[0175]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.46(s，1h)，7.44(d，j＝8.8hz，2h)，7.18(d，j＝8.4hz，2h)，6.32(d，j＝7.6hz，1h)，4.01-3.90(m，1h)，3.60-3.55(m，1h)，3.42-3.36(m，2h)，3.33-3.31(m，1h)，2.63-2.58(m，1h)，2.53-2.50(m，1h)，2.49-2.44(m，1h)，2.22-2.13(m，2h)，1.56-1.48(m，1h)，1.31-1.11(m，3h)，0.98-0.93(m，3h)，0.83-0.76(m，3h).
[0176]
实施例7 bx20-6-013的合成
[0177]
第一步：xr020008-i02的合成
[0178]
根据实施例3，合成化合物xr020008-i02。
[0179]
第三步：bx20-6-013的合成
[0180]
合成路线如下式所示：
[0181][0182]
将化合物xr020008-i02(135mg，粗产物，盐酸盐)、(s)-(+)-2-甲基丁酸(46mg，0.45mmol)、t3p(50％的乙酸乙酯溶液，0.76g，1.11mmol)和tea(187mg，1.85mmol)依次加入dmf(2ml)中，反应混合液于室温下搅拌12h。反应毕，加入水(20ml)，乙酸乙酯(5ml
×
3)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉
末状化合物bx20-6-013(55mg，收率为33.7％)。
[0183]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.74(s，1h)，7.58-7.53(m，4h)，6.41(s，1h)，4.11-4.09(m，1h)，3.69-3.64(m，1h)，3.51-3.49(m，1h)，3.33-3.30(m，1h)，3.21-3.16(mm，1h)，2.83-2.70(m，2h)，2.49-2.45(m，1h)，1.79-1.68(m，4h)，1.58-1.48(m，1h)，1.31-1.24(m，1h)，1.00-0.95(m，3h)，0.85-0.80(m，3h).
[0184]
实施例8 bx20-6-014的合成
[0185]
第一步xr020009-i04的合成
[0186]
根据实施例4第二步进行，获得化合物xr020009-i04。
[0187]
第二步bx20-6-014的合成
[0188]
合成路线如下式所示：
[0189][0190]
将化合物xr020009-i04(0.35g，1.00mmol)、化合物(s)-(+)-2-甲基丁酸(0.13g，1.2mmol)和tea(0.30g，3.00mmol)，t3p(50％的乙酸乙酯溶液，1.90g，3.00mmol)依次加入到dmf(5.0ml)中，反应混合液于50℃反应12h。反应完成后，将反应液于40℃减压浓缩后，得到残留物经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-014(59.4mg，收率为15％)。
[0191]1h nmr(400mhz，dmso-d6)＝8.75(s，1h)，7.54(t，j＝8.0hz，4h)，6.50(d，j＝7.6hz，1h)，3.98-3.96(m，1h)，3.60-3.56(m，1h)，3.42-3.40(m，3h)，2.64-2.61(m，1h)，2.57-2.51(m，2h)，2.21-2.16(m，2h)，1.65-1.47(m，1h)，1.21-1.16(m，3h)，0.99-0.94(m，3h)，0.83-0.78(m，3h).
[0192]
实施例9 bx20-6-015的合成
[0193]
第一步：xr020008-i02的合成
[0194]
根据实施例3，合成化合物xr020008-i02。
[0195]
第三步：bx20-6-015的合成
[0196]
合成路线如下式所示：
[0197][0198]
将化合物xr020008-i02(130mg，粗产物，盐酸盐)、环丙甲酸(70mg，0.80mmol)、t3p(50％的乙酸乙酯溶液，1.27g，2.00mmol)和tea(160mg，1.60mmol)依次加入到dmf(3ml)中，反应混合液于室温下搅拌16h。反应毕，加入水(40ml)，乙酸乙酯(25ml
×
3)萃取，得有机相干燥后40℃减压浓缩，经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物
bx20-6-015(55mg，收率为36.9％)。m/z＝382.3[m+h]
+
。
[0199]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.73(s，1h)，7.58-7.53(m，4h)，6.42(d，j＝7.2hz，1h)，4.16-4.08(m，1h)，3.81(t，j＝10.8hz，1h)，3.54-3.42(m，2h)，3.17(dd，j＝12.0hz，4.8hz，1h)，2.87-2.82(m，1h)，2.74-2.67(m，1h)，1.84-1.64(m，5h)，0.73-0.68(m，4h).
[0200]
实施例10 bx20-6-016的合成
[0201]
第一步：xr020009-i04的合成
[0202]
根据实施例4第二步进行，获得化合物xr020009-i04。
[0203]
第二步：bx20-6-016的合成
[0204]
合成路线如下式所示：
[0205][0206]
在0℃下，将化合物xr020009-i04(667mg，1.9mmol，粗产物)、环丙甲酸(197mg，2.30mmol)、t3p(50％的乙酸乙酯溶液，3.60g，5.70mmol)和tea(580mg，5.70mmol)依次加入dmf(8ml)中，反应混合液于室温下搅拌16h。反应毕，加入水(30ml)，乙酸乙酯(50ml*3)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，残留物经过层析柱(pe/ea/meoh＝1/1/0～0/20/1，1％氨水)纯化，得白色粉末状化合物bx20-6-016(320mg，收率为43.9％)。m/z＝382.2[m+h]
+
。
[0207]1h nmr(400mhz，methanol-d4)δ＝7.54-7.49(m，4h)，4.15-4.13(m，1h)，3.88-3.84(m，1h)，3.68-3.62(m，1h)，3.58-3.55(m，1h)，3.46-3.41(m，1h)，2.82-2.66(m，2h)，2.43-2.32(m，2h)，1.84-1.77(m，1h)，1.40-1.28(m，2h)，0.89-0.80(m，4h).
[0208]
实施例11 bx20-6-017的合成
[0209]
第一步：s2-017的合成
[0210]
合成路线如下式所示：
[0211][0212]
将三光气(59mg，0.20mmol)溶于dcm(5ml)中，n2置换后，降温至-78℃，将化合物s1-017(86.2mg，0.44mmol)，溶于dcm(5ml)的反应混合液滴加到上述反应体系中，滴毕，自然升温至20℃搅拌1h。反应毕，将反应液直接用于下一步反应。
[0213]
第二步：s3-017的合成
[0214]
合成路线如下式所示：
[0215][0216]
将实例1中的反应液降温至-78℃，将int-1(150mg，0.66mmol)，tea(134mg，1.33mmol)溶于dcm(2ml)中，将反应混合液缓慢滴加至实例1中的反应液中并维持-78℃，滴毕，自然升温至室温后搅拌反应3h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后，残留物经过柱层析(pe/ea＝3/1～2/1，v/v)纯化，得到无色油状化合物s3-017(0.14g，73％)。ms(esi，m/z)448.18[m+h]
+
。
[0217]
第三步：s4-017的合成
[0218]
合成路线如下式所示：
[0219][0220]
将化合物s3-017(0.14g，0.32mmol)，hcl/ea(2ml，1.0m)溶于meoh(10ml)中，反应混合液于25℃下搅拌3h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后，得到无色油状化合物s4-017(0.10g，粗产物)。ms(esi，m/z)348.13[m+h]
+
。
[0221]
第四步：bx20-6-017的合成
[0222]
合成路线如下式所示：
[0223][0224]
将化合物s4-017(0.10g，0.26mmol)，(s)-(+)-2-甲基丁酸(0.10g，0.94mmol)，t3p(1.2g，1.88mmol)，tea(0.16g，1.57mmol)依次加入dmf(3ml)中，反应混合液于25℃下搅拌反应12h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后，得到残留物经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-017(12mg，16％)。ms(esi，m/z)432.18[m+h]
+
。
[0225]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.72(s，1h)，7.66-7.62(m，1h)，7.36(t，j＝8.0hz，1h)，7.08(d，j＝7.6hz，1h)，6.43-6.42(m，1h)，4.08-4.06(m，1h)，3.64(t，j＝＝11.6hz，1h)，3.48(t，j＝8.0hz，1h)，3.18-2.17(m，1h)，3.15-3.14(m，1h)，2.79-2.76(m，1h)，2.71-2.66(m，1h)，2.46-2.43(m，1h)，1.77-1.67(m，4h)，1.54-1.46(m，1h)，1.27-1.23(m，1h)，0.98-0.93(m，3h)，0.83-0.78(m，3h)。
[0226]
实施例12 bx20-6-018的合成
[0227]
第一步：s1-018的合成
[0228]
合成路线如下式所示：
[0229][0230]
将三光气(345mg，1.20mmol)加入到无水dcm(5.0ml)中，置换氮气，反应液降温到-78℃。s1-017(517mg，2.60mmol)，tea(400mg，4.00mmol)溶于无水dcm(5.0ml)中配置成溶液a并滴加至反应液中，体系升温至0℃搅拌1小时。将反应液再次降温至-78℃，将int-2(500mg，2.20mmol)，tea(400mg，4.00mmol)溶于无水dcm(5.0ml)配置溶液b并滴加至反应液中，缓慢恢复至室温继续搅拌3小时。反应毕，加水(30ml)淬灭，dcm(50ml*3)萃取，有机相干燥后于40℃减压浓缩，残留物经过层析柱(pe：ea＝4∶1～1∶1)纯化，得到白色固体s1-018(600mg，收率50.7％)，m/z＝448.2[m+h]
+
。
[0231]
第二步：s2-018的合成
[0232]
合成路线如下式所示：
[0233][0234]
室温下，将s1-018(600mg，1.30mmol)溶于meoh(3.0ml)中，再加入hcl/ea(2m，6.0ml)，反应液于25℃搅拌2小时。反应毕，反应液直接于40℃减压浓缩后，得到白色固体化合物s2-018(465mg，粗产物，盐酸盐)，m/z＝348.1[m+h]
+
。
[0235]
第三步：bx20-6-018的合成
[0236]
合成路线如下式所示：
[0237][0238]
在0℃下，将化合物s2-018(465mg，1.20mmol，粗产物)、(s)-(+)-2-甲基丁酸(207mg，2.0mmol)、t3p(50％的乙酸乙酯溶液，2.56g，4.00mmol)和tea(407mg，4.00mmol)依次加入dmf(6.0ml)中，反应混合液于25℃下搅拌16h。反应毕，加入水(30ml)，乙酸乙酯(50ml*3)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，残留物经过层析柱(pe：ea＝1∶1～ea：meoh＝20：1，1％氨水)纯化，粗品再经过制备分离得白色粉末状化合物bx20-6-018(62mg，收率为13.5％)。m/z＝432.2[m+h]
+
。
[0239]1h nmr(400mhz，methanol-d4)＝7.56(d，j＝12.0hz，1h)，7.25(t，j＝7.6hz，1h)，7.04(d，＝12.0hz，1h)，4.15-4.06(m，1h)，3.75-3.69(m，1h)，3.60-3.52(m，2h)，3.49-3.45(m，1h)，2.79-2.58(m，3h)，2.41-2.32(m，2h)，1.69-1.61(m，1h)，1.45-1.37(m，1h)，1.34-1.26(m，2h)，1.10-1.06(m，3h)，0.93-0.86(m，3h)。
[0240]
实施例13 bx20-6-019的合成
[0241]
第一步：s3-011的合成
[0242]
根据实施例8，合成s3-011。
[0243]
第二步：bx20-6-019的合成
[0244]
合成路线如下式所示：
[0245][0246]
在0℃下，将化合物s3-011(62mg，0.20mmol，粗产物)、环丙甲酸(32mg，4.00mmol)、t3p(50％的乙酸乙酯溶液，700mg，1.20mmol)和tea(76.0mg，0.80mmol)依次加入dmf(1.0ml)中，反应混合液于20℃下搅拌12h。反应毕，加入水(5.0ml)，乙酸乙酯(20.0ml*3)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，残留物经过制备分离，得白色粉末状化合物bx20-6-019(10mg，收率为14.9％)。m/z＝398.2[m+h]
+
。
[0247]1h nmr(400mhz，dmso-d6)＝8.48(s，1h)，7.44(d，j＝7.6hz，2h)，7.19(d，j＝7.6hz，2h)，6.28(d，j＝4.0hz，1h)，4.12-4.08(m，1h)，3.79(t，j＝8.0hz，1h)，3.50-3.40(m，2h)，3.16-3.12(m，1h)，2.82-2.78(m，1h)，2.71-2.66(m，1h)，1.78-1.65(m，5h)，0.71-0.61(m，4h).
[0248]
实施例14bx20-6-020的合成
[0249]
第一步：s3-012的合成
[0250]
根据实施例9第一步及第二步，合成化合物s3-012。
[0251]
第二步：bx20-6-020的合成
[0252]
合成路线如下式所示：
[0253][0254]
将化合物s3-012(0.45g，粗产物，盐酸盐)、环丙甲酸(0.21g，2.46mmol)、t3p(50％的乙酸乙酯溶液，3.90g，6.20mmol)和tea(626mg，6.20mmol)依次加入dmf(10ml)中，反应混合液于40℃下搅拌5h。反应毕，加入水(80ml)，乙酸乙酯(35ml
×
3)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-020(180mg，收率为36.8％)。
[0255]1h nmr(400mhz，dmso-d6)＝8.50(s，1h)，7.47(d，j＝7.6hz，2h)，7.20(d，j＝7.6hz，2h)，6.37(d，j＝4.0hz，1h)，4.03-3.99(m，1h)，3.74(t，j＝8.8hz，1h)，3.57-3.55(m，1h)，3.46-3.44(m，1h)，2.67-2.53(m，2h)，2.23-2.18(m，2h)，1.78-1.78(m，1h)，1.30-1.20(m，2h)，0.71-0.61(m，4h)。
[0256]
实施例15bx20-6-021的合成
[0257]
第一步：s3-021的合成
[0258]
合成路线如下式所示：
[0259][0260]
在0℃下，memgcl(3m，10.4ml，31.2mmol)缓慢滴加到s1-021(4.37g，25.8mmol)和ti(oipr)4(9.20ml，30.9mmol)的thf(70ml)溶液中，搅拌15分钟后，加入s2-021(6.98g，30.9mmol)的thf(25ml)溶液。最后，在0℃下，缓慢滴加cymgbr(2m，25.8ml，51.6mmol)。滴加完毕，反应回流15分钟，冷却后加入h2o(18ml)，室温下搅拌1h。硅藻土过滤，滤液干燥后，于40℃减压浓缩后，残留物经过柱层析(pe/ea＝10/1～5/1，v/v)纯化得浅黄色油状化合物s3-021(2.00g，收率为20.5％)，m/z＝379.3[m+h]
+
。
[0261]
第二步：s4-021的合成
[0262]
合成路线如下式所示：
[0263][0264]
室温下，将s3-021(2.00g，5.20mmol)溶于meoh(25ml)中，加入pd/c(10％，600mg)，反应体系置换氢气，氢气氛围下搅拌48小时，反应毕，反应液过滤，直接于40℃减压浓缩得浅黄色油状化合物s4-021(1.20g)的粗产品，m/z＝199.2[m+h]
+
。
[0265]
第三步：中间体s6-021的合成
[0266]
合成路线如下式所示：
[0267][0268]
在-78℃下，将化合物s1-011(700mg，3.45mmol)的dcm(5.0ml)溶液缓慢滴加到化合物s4-021(500mg，粗产品)、tea(300mg，2.96mmol)的dcm溶液中，反应混合液于0℃下反应3h。反应完成后，反应体系加入2滴水淬灭，反应液直接于40℃减压浓缩后，残留物经过柱层析(pe/ea＝3/1～1/1，v/v)纯化，得到白色固体化合物s6-021(525mg，收率为52.0％)，m/z＝402.3[m+h]
+
。
[0269]
第四步：s7-021的合成
[0270]
合成路线如下式所示：
[0271][0272]
将化合物s6-021(500mg，1.24mmol)溶于meoh(10.0ml)中，再加入hcl/1，4-二氧六环(1，4-dioxane)(4m，2.00ml)，室温下搅拌3小时。反应毕，直接于40℃减压浓缩得到白色固体化合物s7-021(400mg，盐酸盐的粗产品)，m/z＝302.3[m+h]
+
。
[0273]
第五步：bx20-6-021的合成
[0274]
合成路线如下式所示：
[0275][0276]
在0℃下，将化合物s7-021(400mg，盐酸盐的粗产品)、s8-021(250mg，2.50mmol)、t3p(t3p质量分数为50％的乙酸乙酯溶液，2.40g，4.00mmol)和tea(505mg，5.00mmol)依次加入dmf(10ml)中，反应混合液于室温下搅拌16h。反应毕，加入水(80ml)，乙酸乙酯(35ml
×
3)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，经过制备分离(盐酸体系)纯化，冻干后，得白色粉末状化合物bx20-6-021(133mg，收率为29.2％)。m/z＝386.2[m+h]
+
。
[0277]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.59(d，j＝3.6hz，1h)，7.50(dd，j＝9.2hz，2.0hz，2h)，7.22(d，j＝8.8hz，2h)，6.51(s，1h)，3.75-3.58(m，3h)，3.33-3.28(m，1h)，2.45-2.38(m，1h)，2.23-2.20(m，1h)，1.78-1.75(m，1h)，1.70-1.66(m，1h)，1.56-1.45(m，1h)，1.31-1.21(m，1h)，0.95(dd，j＝6.8hz，2.4hz，3h)，0.80(q，j＝7.2hz，3h)。
[0278]
实施例16bx20-6-022的合成
[0279]
第一步：s3-022的合成
[0280]
合成路线如下式所示：
[0281][0282]
将s1-011226mg，1.10mmol)溶于无水dcm(1.5ml)中，置换氮气，溶液降温至-78℃。s2-022(200mg，1.00mmol)，tea(204mg，2.00mmol)溶于无水dcm(1.5ml)中配置溶液a，将a溶液滴加至反应液中，滴加完毕反应液缓慢恢复至室温，继续搅拌4小时。反应毕，加水(30.0ml)淬灭，dcm(50.0ml*2)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，残留物经过层析柱(pe/ea＝5/1～2/1，v/v)纯化，得到白色固体化合物s3-022(250mg，收率61.7％)，m/z＝402.2[m+h]
+
。
[0283]
第二步：s4-022的合成
[0284]
合成路线如下式所示：
[0285][0286]
室温下，将s3-022(250mg，0.60mmol)溶于meoh(2.0ml)中，再加入hcl/ea(2m，3.0ml)，搅拌2小时。反应毕，反应液直接于40℃减压浓缩后，得到白色固体化合物s4-022(188mg，粗产物，盐酸盐)，m/z＝302.1[m+h]
+
。
[0287]
第三步：bx20-6-022的合成
[0288]
合成路线如下式所示：
[0289][0290]
在0℃下，将化合物s4-022(188mg，0.60mmol，粗产物)、(s)-(+)-2-甲基丁酸(128mg，1.20mmol)、t3p(t3p质量分数为50％的乙酸乙酯溶液，2.40g，3.60mmol)和tea(252mg，2.4.mmol)依次加入dmf(4.0ml)中，反应混合液于20℃下搅拌16h。反应毕，加入水(30.0ml)，乙酸乙酯(10.0ml*3)萃取，得有机相干燥后于40℃减压浓缩，残留物经制备分离，得白色粉末状化合物bx20-6-022(103mg，收率为42.9％)，m/z＝386.2[m+h]
+
。
[0291]1h nmr(400mhz，dmso-d6)＝8.68(s，1h)，7.48(d，j＝8.0hz，1h)，7.19(d，j＝12.0hz，1h)，6.60(s，1h)，3.73-3.59(m，3h)，3.28-3.26(m，1h)，2.43-2.36(m，1h)，2.19(d，j＝1.6hz，1h)，1.75-1.72(m，1h)，1.67-1.64(m，1h)，1.52-1.45(m，1h)，1.26-1.22(m，1h)，0.93(dd，j＝4.0hz，3h)，0.80-0.74(m，3h)。
[0292]
实施例17bx20-6-030的合成
[0293]
合成路线如下式所示：
[0294][0295]
将三光气(368mg，1.24mmol)加入到三口瓶中，置换氮气，加入无水dcm(20ml)，降温至-78℃，再缓慢滴加xr02-s4(605mg，2.76mmol)和tea(1ml)的dcm(5.0ml)溶液。反应液自然升温至-10℃后，继续在冰浴下搅拌1小时，得到中间体xr020007-i01的溶液。降温至-78℃，将int-1(600mg，2.30mmol)和tea(1.3ml)的dcm溶液(5ml)滴加到中间体xr020007-i01的dcm溶液中。滴加完毕，反应室温下搅拌1小时，加水淬灭，于40℃减压浓缩后，残留物经过柱层析(pe/ea＝3/1～1/1，v/v)纯化，得到粗产品(620mg，收率为51.5％，纯度为90％)。取150mg粗品，经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-030(60mg，收率为22.0％)。m/z＝472.2[m+h]
+
。
[0296]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.97(s，1h)，7.72(d，j＝9.2hz，2h)，7.55(d，j＝8.8hz，2h)，6.56(d，j＝7.2hz，1h)，4.12-4.07(m，1h)，3.47-3.42(m，2h)，3.04(dd，j＝11.6、3.6hz，2h)，2.72(s，2h)，1.76-1.65(m，4h)，1.34(s，9h).
[0297]
实施例18bx20-6-031的合成
[0298]
合成路线如下式所示：
[0299][0300]
将化合物三光气(0.49g，1.64mmol)溶于无水dcm(10ml)中，为混合液a，置换n2保护，降温至-78℃，再将xr02-s4(0.80g，3.65mmol)，tea(1.5ml)溶于无水dcm(10ml)中，为混
合液b。用注射器取混合液b，在-78℃条件下缓慢滴加至混合液a中，滴毕，反应混合液升温至0℃反应1h。取int-2(0.73g，3.29mmol)，tea(1.5ml)溶于无水dcm(15ml)中，在-78℃条件下，滴入上述反应液ab中，搅拌反应2h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后，得到残留物经过硅胶柱层析(pe：ea＝3：1～1：3)纯化，得到620mg目标产物，其中取110mg冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-031(90mg，38.7％)。m/z＝472.1[m+h]
+
。
[0301]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.80(s，1h)，7.71-7.69(m，2h)，7.54-7.52(m，2h)，6.47-6.45(m，1h)，3.97-3.95(m，1h)，3.36-3.43(m，2h)，3.17-3.14(m，2h)，2.52(s，2h)，2.19-2.13(m，2h)，1.38(s，9h)，1.23-1.20(m，2h)。
[0302]
实施例19bx20-6-028的合成
[0303]
第一步：bx20-6-030的合成
[0304]
根据实施例16，合成化合物bx20-6-030。
[0305]
第二步：xr020028-i01的合成
[0306]
合成路线如下式所示：
[0307][0308]
将化合物bx20-6-030(470mg，0.86mmol)溶于meoh(10.0ml)中，再加入hcl/ea(2m，2.5ml)，反应于室温下搅拌2小时。反应毕，直接于40℃减压浓缩，得到黄色固体化合物xr020028-i01(450mg，粗品，盐酸盐)，m/z＝372.1[m+h]
+
。
[0309]
第三步：bx20-6-028的合成
[0310]
合成路线如下式所示：
[0311][0312]
将化合物(r)-2-甲基丁酸(60mg，0.59mmo1)、hatu(220mg，0.58mmol)和tea(157mg，1.55mmol)加入到dmf(3ml)中，室温搅拌10分钟后，加入xr020028-i01(200mg，0.49mmol，粗品，盐酸盐)，反应混合液于室温下搅拌2h。反应毕，加入水(30ml)，乙酸乙酯(25ml
×
3)萃取，得有机相干燥后，于40℃减压浓缩，残留物经过柱层析(pe/ea＝1/1～1/3，v/v)纯化，得到粗产品，经制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-028(50mg，收率为33.0％)。m/z＝456.2[m+h]
+
。
[0313]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.88(s，1h)，7.74-7.70(m，2h)，7.54(d，j＝8.8hz，2h)，6.49(d，j＝6.8hz，1h)，4.13-4.07(m，1h)，3.69-3.64(m，1h)，3.52-3.47(m，1h)，3.32-3.27(m，1h)，3.19(dd，j＝12.8、4.8hz，1h)，2.82-2.77(m，1h)，2.73-2.67(m，1h)，1.81-1.66(m，4h)，1.57-1.49(m，1h)，1.32-1.23(m，2h)，0.97(q，j＝6.8hz，3h)，0.85-0.78(m，3h).
[0314]
实施例20bx20-6-029的合成
[0315]
第一步：bx20-6-031的合成
[0316]
根据实施例17，合成化合物bx20-6-031。
[0317]
第二步：xr020029-i01的合成
[0318]
合成路线如下式所示：
[0319][0320]
将化合物bx20-6-031(0.51g，1.08mmol)溶于meoh(10ml)中，滴加hcl/dioxane(2.5ml，4m)，滴毕，反应混合液于室温下搅拌3h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后得到黄色固体化合物xr020029-i01(0.44g，粗品)。m/z＝408.09[m+h]
+
。
[0321]
第三步：bx20-6-029的合成
[0322]
合成路线如下式所示：
[0323][0324]
将化合物(s)-(+)-2-甲基丁酸(0.13g，1.27mmol)，hatu(0.49g，1.30mmol)，tea(0.40g，3.90mmol)依次加入dmf(5ml)中，为混合液a，反应混合液a于室温下搅拌反应10min。反应毕，取xr020029-i01(0.44g，1.08mmol)，tea(0.40g，3.90mmol)加入dmf(5ml)中，为混合液b，b搅拌5min后，用注射器取混合液b滴加到混合液a中，过夜搅拌反应12h。反应毕，将反应液直接于40℃减压浓缩后，得到残留物经过制备分离(甲酸体系)纯化，冻干后，得到白色粉末状化合物bx20-6-029(270mg，收率为55％)。m/z＝456.17[m+h]
+
。
[0325]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.87-8.86(m，1h)，7.73-7.71(m，2h)，7.56-7.54(m，2h)，6.56-6.54(m，1h)，4.00-3.98(m，1h)，3.62-3.57(m，1h)，3.44-3.39(m，2h)，2.66-2.62(m，1h)，2.58-2.53(m，2h)，2.25-2.16(m，2h)，1.58-1.50(m，1h)，1.38-1.12(m，4h)，1.00-0.96(dd，j＝12.0，4.0hz，3h)，0.85-0.78(m，3h)。
[0326]
实施例21bx20-6-039的合成
[0327]
第一步：s3的合成
[0328]
合成路线如下式所示：
[0329][0330]
方法：将二(三氯甲基)碳酸酯(178mg，0.6mmol)加入到三口瓶中，置换氮气，加入
无水dcm(10ml)，降温至-78℃，再缓慢滴加s1(291mg，1.33mmol)和tea(403mg，3.99mmol)的dcm(5.0ml)溶液。反应液自然升温至-10℃后，继续在冰浴下搅拌1小时，得到中间体s2的溶液。降温至-78℃，将int-1(300mg，1.33mmol)和tea(403mg，3.99mmol)的dcm溶液(5ml)滴加到中间体s2的dcm溶液中。滴加完毕，反应室温下搅拌1小时。反应毕，加水淬灭，乙酸乙酯萃取后有机相减压浓缩，残留物经过柱层析(pe/ea＝3/1～2/1，v/v)纯化，得到浅黄色固体产物s3(498mg，收率为79.6％)。ms(esi，m/z)472.2[m+h]
+
。
[0331]
第二步：中间体s4的合成
[0332]
合成路线如下式所示：
[0333][0334]
方法：将化合物s3(498mg，1.05mmol)溶于meoh(10.0ml)中，再加入hcl/1，4-dioxane(4m，2.5ml，10.0mmol)，反应于室温下搅拌3小时。反应毕，直接减压浓缩得到黄色固体s4(400mg，crude)。ms(esi，m/z)372.2[m+h]
+
。
[0335]
第三步：bx20-6-039的合成
[0336]
合成路线如下式所示：
[0337][0338]
方法：在0℃下，将化合物s4(400mg，crude)，焦碳酸二甲酯(147mg，1.1mmol)，tea(320mg，3.2mmol)加入到dcm(10ml)中，反应混合液于室温下搅拌12h。反应毕，将反应液减压浓缩后，通过制备(甲酸体系)纯化，得到白色粉末状化合物bx20-6-039(295mg，收率为62.5％)。ms(esi，m/z)430.1[m+h]
+
。
[0339]1h nmr(400mhz，methanol-d4)δ 7.68-7.64(m，2h)，7.50(d，j＝8.8hz，2h)，4.26-4.19(m，1h)，3.67(s，3h)，3.60-3.56(m，2h)，3.25-3.22(m，2h)，2.84(brs，2h)，1.91-1.75(m，4h).
[0340]
实施例22bx20-6-040的合成：
[0341]
第一步：s3’的合成
[0342]
合成路线如下式所示：
[0343][0344]
方法：将二(三氯甲基)碳酸酯(178mg，0.6mmol)加入到三口瓶中，置换氮气，加入无水dcm(10ml)，降温至-78℃，再缓慢滴加s1(291mg，1.33mmol)和tea(403mg，3.99mmol)的dcm(5.0ml)溶液。反应液自然升温至-10℃后，继续在冰浴下搅拌1小时，得到中间体s2的溶液。降温至-78℃，将int-1’(300mg，1.33mmol)和tea(403mg，3.99mmol)的dcm溶液(5ml)滴
加到中间体s2的dcm溶液中。滴加完毕，反应室温下搅拌1小时。反应毕，加水淬灭，乙酸乙酯萃取后有机相减压浓缩，残留物经过柱层析(pe/ea＝3/1～2/1，v/v)纯化，得到浅黄色固体产物s3’(500mg，收率为79.8％)。ms(esi，m/z)472.2[m+h]
+
。
[0345]
第二步：中间体s4’的合成
[0346]
合成路线如下式所示：
[0347][0348]
方法：将化合物s3’(500mg，1.06mmol)溶于meoh(10.0ml)中，再加入hcl/1，4-dioxane(4m，2.5ml，10.0mmol)，反应于室温下搅拌3小时。反应毕，直接减压浓缩得到黄色固体s4’(400mg，粗品)。ms(esi，m/z)372.2[m+h]
+
。
[0349]
第三步：bx20-6-040的合成
[0350]
合成路线如下式所示：
[0351][0352]
方法：在0℃下，将化合物s4’(400mg，粗品)，焦碳酸二甲酯(147mg，1.1mmol)，tea(320mg，3.2mmol)加入到dcm(10ml)中，反应混合液于室温下搅拌12h。反应毕，将反应液减压浓缩后，通过制备(甲酸体系)纯化，得到白色粉末状化合物bx20-6-040(323mg，收率为68.4％)。ms(esi，m/z)430.2[m+h]
+
。
[0353]1h nmr(400mhz，dmso-d4)δ 8.88(s，1h)，7.74-7.70(m，2h)，7.56(d，j＝8.8hz，2h)，6.51(d，j＝7.6hz，1h)，4.03-3.93(m，1h)，3.58(s，3h)，3.42(dd，j＝10.8hz，j＝7.6hz，2h)，3.23(dd，j＝10.8hz，j＝2.8hz，2h)，2.57(brs，2h)，2.22-2.15(m，2h)，1.27-1.19(m，2h).
[0354]
生物学测试评价
[0355]
以下结合测试例进一步描述解释本发明
[0356]
测试例1本发明化合物对人可溶性环氧化酶抑制活性测试(ic
50
)
[0357]
1.实验目的
[0358]
使用基于敏感荧光的测定确定本发明化合物对人重组可溶性环氧化酶(seh)抑制活性ic
50
值。
[0359]
2.实验仪器和试剂
[0360]
2.1实验样品
[0361]
本发明实施例及参比化合物，自制。
[0362]
2.2实验仪器
[0363]
多功能酶标仪(tecan；spark20m)
[0364]
微孔板恒温孵育器(thermo；pst-60hl-4)
[0365]
384孔白板(cisbio；66pl384025)
[0366]
2.3实验试剂
[0367]
3-苯基-氰基(6-甲氧基-2-萘基)甲酯-2-环氧乙烷乙酸(phome)(cayman)
[0368]
auda(阳性化合物)(cayman)
[0369]
tris buffer(三羟基甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液)(ph 7.0，25mm，sigma)
[0370]
人可溶性环氧化水解酶(hseh)(cayman)
[0371]
3.实验步骤
[0372]
使用基于敏感荧光的测定确定ic50值
[0373]
1)将用tris buffer(三羟基甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液)配制成2μg/ml的hseh按照8μl/孔(终浓度1μg/ml)，加入384黑板中。
[0374]
2)然后将配制好的化合物和阳性对照按照4μl/孔，加入板中。混匀后，1000rpm离心1min。30℃孵育5min。同时设定阳性(不加化合物)和阴性对照孔(不加seh)。
[0375]
3)然后再将配制好的荧光底物phome按照4μl/孔([s]＝1μm)，加入板中。混匀后，1000rpm离心1min。30℃孵育15min。
[0376]
4)上机检测：激发波长：330nm；发射波长：465nm。
[0377]
4.数据分析
[0378]
使用graphpad prism分析数据，拟合百分比抑制率和十点浓度数据至参数非线性逻辑公式计算出化合物的ic
50
值。
[0379]
5.实验结果
[0380]
本发明实施例化合物对人可溶性环氧酶抑制活性测试结果见表1。
[0381]
表1
[0382]
[0383]
[0384]
[0385][0386]
6.实验结论
[0387]
通过以上方案得出，本发明所示化合物对重组人可溶性环氧化酶显示出较好的抑制作用。
[0388]
测试例2本发明化合物在sd大鼠体内药代动力学测定
[0389]
1.试验目的
[0390]
以sd大鼠为受试动物，研究一下化合物实施例，在6mg/kg剂量下口服给药在大鼠体内血浆的药代动力学行为。
[0391]
2.试验方法
[0392]
2.1.试验药品
[0393]
本发明实施例及参比化合物，自制。
[0394]
2.2.试验动物
[0395]
雄性spf级sd大鼠，体重(200
±
20)g，斯贝福(北京)生物技术有限公司，动物生产许可证号scxk(京)2019-0010。
[0396]
2.3.试验用药的制备
[0397]
药物配制：配制药物浓度0.3mg/ml或0.6mg/ml，配制溶液为0.5％cmc溶液。
[0398]
具体配制：用百万分之一的精密天平称取药物各4.5mg或9mg，均匀混悬于15ml 0.5％cmc溶液中。注意药物配制过程中防止药物粘附搅拌棒或试管壁。
[0399]
2.4.给药：
[0400]
雄性spf级sd大鼠，适应性喂养3-4天后，分别灌胃给药，给药剂量为6mg/kg，给药体积为10ml/kg。
[0401]
2.5.样本采集
[0402]
大鼠给药前(0h)和给药后，在0.5h、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h、24h采血，经眼底穿刺采血，采血量约0.5ml，置于贴好标签的edta-k2抗凝试管内，采血后立即将采血管轻轻完全颠倒3次与抗凝剂混匀，并立即在冰水浴中，4℃条件下以4500rpm，离心10min，待离心操作结束后，取血浆及时分装于贴好对应标签的ep管中，于-80℃冰箱保存。
[0403]
2.6.样品检测
[0404]
本实验采用简略验证的hplc-ms/ms方法测定给药后血浆中实施例x和实施例y的浓度。
[0405]
2.6.1.样品处理：取2μl空白血浆于96深孔板中，加入沉淀剂甲醇400μl，涡旋10min，4000rpm离心15min，取上清250μl于96深孔板中，进hplc-ms/ms分析，进样体积5μl。
[0406]
2.6.2.液质分析：
[0407]
1)液相条件
[0408]
色谱柱：waters xselect chs c18，2.1*50mm，1.8μm；编号：154；
[0409]
预柱：waters在线过滤器；
[0410]
流动相a：0.1％甲酸&5mm乙酸铵水溶液；
[0411]
流动相b：0.1％甲酸乙腈溶液；
[0412]
流速(flow rate)：0.6ml/min；
[0413]
柱温(column temperature)：40℃；
[0414]
自动进样器温度(sample tray temperature)：4℃；
[0415]
进样体积(injection volume)：5.0μl；
[0416]
自动进样清洗模式(rinse mode)：进样前及进样后(before and after aspiration)；
[0417]
自动进样器洗针体积(rinsing volume)：500.0μl；
[0418]
自动进样器进样针清洗时浸泡时间(rinse dip time)：5sec；
[0419]
自动进样器进样针清洗方法(rinse method)：rinse port only；
[0420]
自动进样器进样针清洗时间(rinse time)：2sec
[0421]
自动进样器清洗溶液(rinse pump and port wash solution)：50％乙腈水溶液。
[0422]
洗脱方式：梯度洗脱
[0423]
2)质谱条件：
[0424]
离子源：electrospray ionization(esi)；
[0425]
离子化模式(ionization)：正离子模式(positive)；
[0426]
检测模式(mode)：多反应检测(mrm)；
[0427]
碰撞池气体(cad)：8psi；
[0428]
气帘气(curtain gas type)：40psi；
[0429]
雾化气(gs1)：50psi；
[0430]
辅助气(gs2)：50～60psi；
[0431]
电喷雾电压(ion spray voltage)：4500v；
[0432]
涡旋离子喷雾温度(turbo ion spray temperature)：600～650℃；
[0433]
质谱分辨率：unit；
[0434]
3.试验结果与分析
[0435]
药代动力学主要参数用winnonlin 7.0计算得到，大鼠药代实验结果见下表2。
[0436]
表2大鼠药代试验结果(6mg/kg剂量)
[0437]
[0438][0439]
4.实验结论
[0440]
从表中大鼠药代试验结果可以看出，本发明实施例与参比化合物相比表现出较好的代谢性质。