续断皂苷类化合物及其制备方法和在制备防治脂肪肝类药物中的应用与流程

本发明属于生物医药，更具体地，涉及一种续断皂苷类化合物及其制备方法和在制备预防治疗脂肪肝类药物中的应用。

背景技术：

1、续断为川续断科植物川续断dipsacus asperoides c.y.cheng et t.m.ai(或dipsacus asper wall)的干燥根，《神农本草经》将其列为上品，具有补肝肾、强筋骨、续折伤、行血脉、止崩漏、安胎等功效，为补肝肾疗骨伤之要药，临床多用于治疗肝肾不足所致腰膝酸痛、足软无力及跌打损伤、骨折等证。续断具有复杂多样的化学成分，包括皂苷类、环烯醚萜类、生物碱类、挥发油类等，现代药理学研究表明，续断提取物具有抑制子宫自发收缩活性、提高免疫能力、抗衰老、抗菌消炎等药理活性。

2、脂肪性肝病以肝细胞弥漫性脂肪变为病理特征，是指肝细胞内脂肪堆积过多影响了肝脏正常功能，简称脂肪肝。脂肪肝是一种异质性疾病，由遗传易感因素、环境因素与代谢应激相互作用导致，主要包括酒精性脂肪性肝、非酒精性脂肪性肝以及特殊类型脂肪肝。

3、全球四分之一以上的成人有脂肪肝，东西方国家患病率无显著差异；随着肥胖和三高人群的不断增加，脂肪肝的患病率呈现上升趋势，且起病年龄趋向年轻化，甚至儿童脂肪肝日益增多。此外，在肥胖、代谢综合征、2型糖尿病以及长期过量饮酒患者中，脂肪肝的患病率高达50％以上。

4、肝脏是是人体脂肪代谢的主要场所，长期高脂肪、高果糖、高热量的膳食结构，多坐少动的生活方式，以及酒精消耗量的增加，都会使肝脏摄取脂肪增多，酯化作用增强，当脂肪过载并出现肝脏脂肪代谢障碍时，未被氧化的脂肪会沉积在肝细胞内，蓄积过多就好发生弥漫性脂肪浸润，肝细胞弥漫性脂肪变，即脂肪肝。随着病情的发展可表现为单纯性脂肪肝，脂肪肝炎，肝纤维化和肝硬化，甚至还可能发展为肝癌。

5、脂肪肝除了可直接导致失代偿期肝硬化、肝细胞癌变等病变外，还可诱发其他慢性肝病的进展，并参与2型糖尿病和动脉粥样硬化的发病诱因。同时，与代谢综合征相关的恶性肿瘤、动脉粥样硬化性心脑血管疾病，以及肝硬化又为影响脂肪肝患者生活质量和预期寿命的重要因素。另外，大量临床研究表明，大多数降血脂药物都有肝毒性，主要是由于降血脂药物具有“驱脂”作用，将血液中的脂类“驱赶”到肝脏，使肝脏内本来就已有脂肪堆积，大量涌来的脂类更加难以处理，使脂肪肝更加严重，还会导致肝内胆汁淤积，引起黄疸或药物性肝损伤，甚至导致肝硬化和肝功能衰竭。脂肪肝患者群庞大，而且目前全球尚未有特异性治疗脂肪肝的确切疗效药物上市，尤其是非酒精脂肪肝，只能使用保肝药，需长期服药控制疾病进展，不能达到治愈。

6、可以预测，未来脂肪肝对人类健康的危害仍将不断增加，并将成为全球肝病防治的主要流行性疾病。因此，研究与开发治疗和预防脂肪肝的新药是当代医药学领域的新挑战，具有重要的创新意义和临床价值，脂肪肝领域的新药开发也是一个极具发展潜力的大市场。

7、迄今为止，尚未见到续断皂苷类化合物的制备及其在预防治疗脂肪肝类疾病的应用的相关报道。

8、鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、为解决上述技术中存在的缺陷，本发明提供了一种续断皂苷类化合物及其制备方法和在制备预防治疗脂肪肝类药物中的应用。

2、为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

3、一种续断皂苷类化合物的制备方法，包括：

4、s1、以续断药材饮片为原料，加入醇类水溶液，加热回流提取1-4次，每次提取1-6h，收集提取液；

5、s2、对提取液进行减压浓缩，得到断续粗提物；

6、s3、将断续粗提物加水溶解后，上样至大孔吸附树脂中，依次经水洗、除杂和洗脱后，回收洗脱液后制得续断皂苷类化合物。

7、在上述技术方案中，步骤s1中，所述醇类水溶液为65-78v％的乙醇水溶液。

8、优选地，在上述技术方案中，所述醇类水溶液的加入质量为续断药材饮片的4-7.5倍，加热回流2-3次，每次提取2-4h，收集提取液后合并。

9、在上述技术方案中，步骤s3中，所述大孔吸附树脂为ab-8大孔吸附树脂。

10、进一步地，在上述技术方案中，步骤s3具体为，

11、往断续粗提物中加入8-14倍质量的水溶解后，上样至装有质量为断续粗提物的2-3倍质量的ab-8大孔吸附树脂的树脂柱中，依次用3倍柱体积的水洗涤和2倍柱体积的30v％乙醇水溶液除杂，最后用3倍柱体积的70v％乙醇水溶液洗脱并收集洗脱液，减压回收乙醇后浓缩蒸干，即可。

12、在本发明的一个优选实施方式中，所述续断皂苷类化合物的制备方法还包括：

13、采用正相硅胶柱对步骤s3中制得的续断皂苷类化合物进行精制，收集流动相为体积比7：3的氯仿-甲醇的洗脱液，并减压回收有机溶剂后浓缩蒸干，得到续断皂苷类化合物的精制品。

14、本发明另一方面还提供了上述制备方法制备得到的续断皂苷类化合物。

15、具体地，在上述技术方案中，所述续断皂苷类化合物的分子结构通式为：

16、

17、其中：

18、木桶皂苷d(dipsacus saponin d)中，r1＝ara，r2＝oh，r3＝glc(1→6)glc；

19、3-o-(4-o-乙酰基)-α-l-吡喃阿拉伯糖基常春藤皂苷元-28-o-β-d-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-d-吡喃葡萄糖苷r1＝(4-o-acetyl)ara，r2＝oh，r3＝glc(1→6)glc；

20、3-o-α-l-吡喃阿拉伯糖基齐墩果酸-28-o-β-d-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-d-吡喃萄糖苷中，r1＝ara，r2＝h，r3＝glc(1→6)glc；

21、川续断皂苷m(dipsacus saponin m)中，r1＝ara(1→2)rha，r2＝oh，r3＝glc(1→6)glc；

22、川续断皂苷c(dipsacus saponin c)中，r1＝xyl(1→4)glc(1→4)glc(1→3)rha(1→4)rha(1→2)ara，r2＝oh，r3＝h；

23、川续断皂苷b(dipsacus saponin b)中，r1＝glc(1→4)rha(1→6)glc(1→3)rha(1→2)ara，r2＝oh，r3＝h；

24、川续断皂苷pa(akebia saponin pa)中，r1＝ara，r2＝oh，r3＝h。

25、详细地，所述续断皂苷类化合物为含有木通皂苷d(3-o-α-l-吡喃阿拉伯糖基常春藤皂苷元-28-o-β-d-吡喃葡萄糖基(1→6)-β-d-吡喃葡萄糖苷)、川续断皂苷m(3-o-α-l-吡喃阿拉伯糖-(1→2)-α-l-吡喃鼠李糖常春藤皂苷元28-o-β-d-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-d-吡喃葡萄糖酯苷)、川续断皂苷c(常春藤皂苷元-3-o-α-l-吡喃阿拉伯糖-(1→2)-α-l-吡喃鼠李糖-(1→4)-α-l-吡喃鼠李糖-(1→3)-β-d-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-d-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-d-吡喃木糖酯苷)、川续断皂苷b(常春藤皂苷元-3-o-α-l-吡喃阿拉伯糖-(1→2)-α-l-吡喃鼠李糖-(1→3)-β-d-吡喃葡萄糖-[(1→6)-α-l-吡喃鼠李糖](1→4)-β-d-吡喃葡萄糖酯苷)、木通皂苷pa(常春藤皂苷元-3-o-α-l-吡喃阿拉伯糖酯苷)、(3-o-α-l-吡喃阿拉伯糖基齐墩果酸-28-o-β-d-吡喃葡萄糖基(1→6)-β-d-吡喃萄糖苷)和(3-o-(4-o-乙酰基)-α-l-吡喃阿拉伯糖基常春藤皂苷元-28-o-β-d-吡喃葡萄糖基(1→6)-β-d-吡喃葡萄糖苷)的混合物。

26、本发明再一方面还提供了上述续断皂苷类化合物在制备预防和治疗脂肪肝类药物中的应用。

27、具体地，所述应用包括，调节脂肪肝引起的肝功能异常和血脂异常，抑制肝组织氧化应激反应，抑制肝细胞内脂质沉积和阻断肝细胞凋亡，修复和保护肝细胞。

28、此外，本发明还提供了含有上述续断皂苷类化合物或由上述续断皂苷类化合物制备得到的预防和治疗脂肪肝类疾病的药物组合物、保健品或食品。

29、本发明与现有技术相比，具有以下优点：

30、(1)本发明提供了简单易行的从续断药材饮片中提取得到续断皂苷类化合物的方法；

31、(2)本发明所提供的续断皂苷类化合物可有效调节脂肪肝引起的肝功能异常和血脂异常，抑制肝组织氧化应激反应，抑制肝细胞内脂质沉积和阻断肝细胞凋亡，对脂肪肝出现的肝细胞弥漫性脂肪变，伴有不同程度的炎细胞浸润和肝细胞碎屑样坏死，及凋亡小体形成等组织病理病变具有肝细胞修复和保护作用，即对治疗与预防脂肪肝及其相关疾病具有显著的药理作用效果，并且毒性极小，安全性高，具有潜在的应用价值。