形成补体结合增强的有序多聚化免疫球蛋白FC组合物的人类蛋白质片段融合蛋白质的制作方法

本发明大体上涉及免疫学、自身免疫性、炎症和肿瘤免疫学的领域。更具体来说，本发明涉及展现fc受体结合改变并保持或增强与补体系统元件的结合的包含免疫球蛋白fc结构域的生物活性仿生分子、包含此类仿生物质的组合物以及制造和使用此类仿生物质的方法。本发明进一步涉及治疗或预防如以下的病理学病状：补体介导的疾病、自身免疫性疾病、发炎性疾病、血液病以及癌症。

背景技术：

1、补体系统是免疫系统中参与标靶细胞溶解和抗原吞噬作用的部分。存在三种目前已知的主要补体路径：经典路径、替代性路径和凝集素结合路径。一旦蛋白质c1q结合于一个或多个完整免疫球蛋白igm分子或至少两个完整免疫球蛋白igg1、igg2或igg3分子，激活经典补体路径(《詹韦氏免疫生物学(janeway's immunobiology)》,第8版,murphy编,garland science,2012,第10章)。补体激活导致补体依赖性细胞毒性(complement-dependent cytotoxicity；cdc)。已经展示单克隆抗体fc区中的改变增强或降低补体结合亲和力(moore等人,《mabs》2(2):181-9(2010)。然而，此工作在单克隆抗体的情形下进行，并且因此至少部分地依赖于fab的标靶特异性并且不具有结合亲合力的情形。

2、过量的补体激活和/或沉积可能有害，并且与许多疾病相关联，包括重症肌无力、溶血性尿毒症综合征(hemolytic uremic syndrome；hus)和阵发性夜间血红蛋白尿(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria；pnh)。大脑老化与显著增加的补体组分c1q水平相关联(stephan等人,《神经科学杂志(j.neuroscience)》,2013年8月14日,33(33):13460-13474)。补体系统深度参与乙酰胆碱受体抗体相关重症肌无力的致病机制(和christadoss,《自身免疫性评论(autoimmun rev.)》2013年7月；12(9):904-11.doi:10.1016/j.autrev.2013.03.003)。来自免疫、遗传和蛋白质生化研究的多种发现指示补体系统在年龄相关性黄斑变性的病源学中起主要作用(weber等人,《德国医学杂志国际版(dtsch arztebl int.)》,2014年2月；111(8):133-138.doi:10.3238/arztebl.2014.0133)。存在关于以下的强有力证据：补体的经典和替代性路径都在类风湿性关节炎期间以及在类风湿性关节炎动物模型中得到病理学激活(okroj等人,《医学年鉴(ann med.)》2007；39(7):517-30)。

3、以依序方式激活经典、替代性和凝集素路径，并且所有三个路径都参与全身性疾病。补体系统的激活参与全身性自身免疫性疾病的致病机制。长期以来已经在免疫复合物介导的疾病(如冷球蛋白性脉管炎和全身性红斑狼疮)中认识到经由经典路径的激活(chen等人,《自身免疫性杂志(journal of autoimmunity)》,2009；doi:10.1016/j.jaut.2009.11.014)。在患有亨诺-许兰紫癜性肾炎(henoch-purpuranephritis)和iga肾病变的患者中发现通过替代性和凝集素路径两者的补体激活(hisano等人,《美国肾病杂志(am jkidney dis)》2005；45:295e302)。充分描述补体在膜性肾病变(成人肾病综合征最常见原因之一)中的重要性。膜性肾病变以肾小球上皮下免疫沉淀为特点。对膜性肾病变实验模型海曼肾炎(heymann nephritis)的研究已经证实，这些沉积局部激活补体以造成足细胞损伤，最终引起细胞骨架重组、裂孔隔膜(slit diaphragms)损失和蛋白尿(beck等人,补体在膜性肾病变中的作用(the role of complement in membranousnephropathy).《肾病学研讨会(semin nephrol)》2013nov；33(6):531-42)。

4、补体激活是非常复杂的过程，其中在最初认为理解所述过程之后数十年后仍发现新级联组分。经典路径补体级联中的第一步骤是c1q与抗体的结合。(《自然(nature)》.1988年4月21日；332(6166):738-40；igg上c1q的结合位点(the binding site for c1q onigg).duncan ar,winter g.)。

5、不认为非聚集抗体与c3或与c3b的结合在血浆中通过补体激活进行，但认为其主要由激活产物c3b2与igg的复合物维持(《分子免疫学(mol immunol)》.2006年1月；43(1-2):2-12.补体扩增重新讨论(complement amplification revisited).lutz hu,jelezarova e)。然而，在补体替代性路径由含有igg抗体的免疫聚集物激活期间，c3b的α'-链可以变为共价结合在igg重链fd部分中的一个或两个位点处(即，重链中包括于fab片段中的所述部分)(《生物化学杂志(biochem j.)》1981年5月1日；195(2):471-480).在人类血清中激活替代性路径之后，补体组分c3与抗体-抗原聚集物的结合(the binding ofcomplement component c3 to antibody-antigen aggregates after activation ofthe alternative pathway in human serum).k j gadd和k b reid)。补体组分c4a、c3a、c5a和攻膜复合物在历史上一直通常被称为补体分裂产物或过敏毒素。然而，文献现在清楚说明c4a(xie等人,《国际免疫药理学(international immunopharmacology)》12(2012)158-168)、c3a(coulthard和woodruff,《免疫学杂志(j immunol)》2015；194:3542-3548)和c5a(nishise等人,《治疗性单采血液成分术和透析(therapeutic apheresis anddialysis)》13(6):509-514和gerard等人,《生物化学杂志(j.biol chem.)》280(48):39677-39680,2005年12月2日)在某些情形中具有抗炎性并且不与级联递增相关联。

6、此时市场上用于治疗补体介导的疾病的主要疗法是抗c5抗体艾库组单抗(eculizumab)，其结合c5并且抑制其裂解为c5a和c5b-9，从而部分地抑制下游补体级联以及相关发炎性和血栓性反应的进展。然而，其对上游补体组分(如c1q、c1r、c1s、c1样复合物)或对c4、c4a、c4b、c2、c1、c4b2、c2b、c4b2a、c3、c3a或c3b(其是补体级联组分c5上游的凝集素路径、经典路径和替代性路径的组分并且可以是用于治疗疾病的优先标靶)不具有直接影响。相比之下，正常免疫球蛋白和单克隆抗体结合c5上游的c1q和其它标靶。因此，在所属领域中需要用于治疗补体介导的疾病的改进型方法，其通过结合上游补体级联组分并且因此调节补体级联来进行。在所属领域中进一步需要用于用包含免疫球蛋白fc的化合物治疗补体介导的疾病的改进型方法，所述化合物以亲合力而非仅以亲和力结合六聚c1q，并且进一步在不具有与低亲和力fc受体结合的高亲合力的情况下进行此结合。

7、原生免疫球蛋白igg1 fc天然结合超过十二个配体，其中的一个是补体因子c1q。其它igg1 fc配体包括(但不限于)典型fc受体，新生儿受体fcrn、铁、蛋白a、fcrl1-6、trim21以及dc-sign。可溶性同型二聚igg1以过低而无法起作用的亲和力(ca diebolder等人补体由在细胞表面处组装的igg六聚物激活(complement is activated by igghexamers assembled at the cell surface).《科学(science)》2014年3月；343(6176):1260-1263)并且以高解离速率(gaboriaud等人补体蛋白质c1q球状顶部的晶体结构提供其多功能识别特性的基础(the crystal structure of the globular head of complementprotein c1q provides a basis for its versatile recognition properties).《生物化学杂志(j.biol.chem.)》2003年11月21日；278(47):46974-82)天然结合c1q。然而，当igg1通过其fab固定于抗原标靶时，发生构象变化(m.oda等人在抗原结合时抗体恒定区中变构构象变化的证据(evidence of allosteric conformational changes in theantibody constant region upon antigen binding).《国际免疫学(int.immunol.)》(2003)15(3):417-426)并且与c1q的结合亲和力增加。

8、此外，由于igg1在抗原位点处积聚，故向c1q呈递多个免疫球蛋白fc，从而在抗原结合位点处产生更具亲合力的结合。由于c1q是具有六个fc结合位点的六聚体(kbreid.c1q的化学和分子遗传学(chemistry and molecular genetics of c1q).behringinst mitt.1989年7月；(84):8-19)，故聚集igg1的结合具有高亲合力(diebolder,2014)。因此，除可供用于使具有所得抗体依赖性细胞细胞毒性(antibody dependent cellcytotoxicity；adcc)和抗体依赖性细胞吞噬作用(antibody dependent cellphagocytosis；adcp)的fc受体交联以外，紧密结合的igg1不仅以同型二聚免疫球蛋白的亲和力结合c1q，而且还以导致补体依赖性细胞毒性的亲合力结合c1q。所结合fc的团簇与六聚c1q的结合的所得功能反应是激活经典补体路径，并且形成c1qc1rc1s并使c4裂解为c4a和c4b。以极低浓度天然存在(soltis和hasz.原生免疫球蛋白在低白蛋白血清中的自发性聚集(spontaneous aggregation of native immunoglobulins in hypoalbuminemicserum).《临床实验室免疫学杂志(j clin lab immunol.)》1982年10月；9(1):13-7)并且存在于汇集人类静脉内免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin；ivig)中(a.herrera等人三种可商购的静脉内免疫球蛋白制剂的免疫球蛋白组成(immunoglobulin compositionof three commercially available intravenous immunoglobulin preparations).《过敏与临床免疫学杂志(j.all clin immunol)》,84(1):556-561)的可溶性igg1聚集物提供与其配体未结合的多价igg1 fc，包括低亲和力fc受体和c1q。可溶性(即，未与细胞结合)的igg1聚集物由此以亲合力结合六聚c1q。可溶性c1q与可溶性igg1聚集物(即，未与细胞结合)的结合可以抑制补体级联的下游激活，包括抑制cdc。

9、由数万血液供体汇集的汇集人类ivig含有igg1聚集物中模拟可溶性原生igg1聚集物天然作用的极小并可变部分(0.1％-5％)。ivig结合c1q，并且已经证实其在临床上适用于补体介导的疾病，如重症肌无力。然而，ivig具有血液产物的所有伴随风险，不以重组方式产生，不充分地控制igg1聚集物量，并且主要包含用于治疗补体介导的疾病的无活性级分。而且，ivig治疗还常常通过结合于低亲和力fc受体而导致不合需要的促炎性反应(andresen等人比较各种人类免疫球蛋白-g调配物的产物等效性研究(productequivalence study comparing various human immunoglobulin-gformulations).《临床药理学杂志(j clin pharmacol)》2000；40:722-730和ghielmetti等人静脉内免疫球蛋白在人类全血中的作用的基因表达谱分析(gene expression profiling of the effectsof intravenous immunoglobulin in human whole blood).《分子免疫学》43(2006)939-949)。需要以下新颖、连贯、以重组方式产生的疗法，其模拟聚集可溶性igg1 fc通过亲合地结合c1q而充当补体沉降池的天然过程，同时通过相对于包括低亲和力fc受体的其它天然配体优先结合于补体组分来避免不合需要的促炎性反应。

技术实现思路

1、本发明涉及生物活性融合蛋白质仿生分子，包含一个或多个人类免疫球蛋白fc结构域和一个或多个多聚化结构域，其中所述融合蛋白质的所述fc结构域部分包含一个或多个点突变。在一个方面中，相对于正常非聚集人类免疫球蛋白fc，仿生分子优先结合一种或多种补体组分。在一些实施例中，优先结合于一种或多种补体组分通过与典型fc受体的结合相对于正常非聚集免疫球蛋白fc或替代地正常聚集免疫球蛋白fc减少的仿生物质fc结构域来实现。在一些实施例中，生物活性融合蛋白质仿生分子包含斯特拉多体(stradomer)单元。提供包含生物活性融合蛋白质仿生物质的组合物和用于使用所述组合物的方法。

2、在一个方面中，本公开提供一种斯特拉多体单元，包含至少一个具有一个或多个对应于igg1 fc结构域位置267、268和/或324中至少一个的点突变的igg1 fc结构域。在一些实施例中，斯特拉多体单元进一步包含至少一个多聚化结构域。在一些实施例中，处于位置267处的氨基酸由丝氨酸(ser；s)突变为任何其它氨基酸。在另外的实施例中，处于位置267处的氨基酸突变为谷氨酸(glu；e)。在一些实施例中，处于位置268处的氨基酸由组氨酸(his；h)突变为任何其它氨基酸。在另外的实施例中，处于位置268处的氨基酸突变为苯丙氨酸(phe；f)。在一些实施例中，处于位置324处的氨基酸由丝氨酸突变为任何其它氨基酸。在另外的实施例中，处于位置324处的氨基酸突变为苏氨酸(thr；t)。在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置267、268和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变s267e、h268f和s324t。

3、在一些实施例中，斯特拉多体单元包含具有以下氨基酸序列的igg1 fc结构域，所述氨基酸序列包含处于位置267、268和/或324处的点突变并且进一步包含至少一个处于位置233和/或234和/或235和/或236和/或238和/或265和/或297和/或299和/或328处的点突变。在一个实施例中，处于位置297处的氨基酸由天冬酰胺(asn；n)突变为任何其它氨基酸。在另一个实施例中，处于位置297处的氨基酸突变为丙氨酸(ala；a)。在一个实施例中，处于位置299处的氨基酸由苏氨酸(t)突变为除丝氨酸或半胱氨酸以外的任何其它氨基酸。在另一个实施例中，处于位置299处的氨基酸突变为丙氨酸(ala；a)。在一个实施例中，处于位置238处的氨基酸由脯氨酸(pro；p)突变为任何其它氨基酸。在另一个实施例中，处于位置238处的氨基酸突变为天冬氨酸(asp；d)。在一个实施例中，处于位置233处的氨基酸由谷氨酸(glu；e)突变为任何其它氨基酸。在另一个实施例中，处于位置233处的氨基酸突变为脯氨酸(pro；p)。在另一个实施例中，处于位置236处的氨基酸由甘氨酸(gly；g)突变为任何其它氨基酸。在另一个实施例中，处于位置236处的氨基酸突变为精氨酸(arg；r)。在一个实施例中，处于位置236处的氨基酸缺失。在一个实施例中，处于位置234处的氨基酸由亮氨酸(leu；l)突变为任何其它氨基酸。在另一个实施例中，处于位置234处的氨基酸突变为缬氨酸(val；v)或丙氨酸(ala；a)。在另一个实施例中，处于位置235处的氨基酸由亮氨酸(leu；l)突变为任何其它氨基酸。在另一个实施例中，处于位置235处的氨基酸突变为丙氨酸(ala；a)。在一个实施例中，处于位置265处的氨基酸由天冬氨酸(asp；d)突变为任何其它氨基酸。在另一个实施例中，处于位置265处的氨基酸突变为丙氨酸(ala；a)。在另一个实施例中，处于位置265处的氨基酸突变为色氨酸(trp；w)。在一个实施例中，处于位置297处的氨基酸由天冬酰胺(asn；n)突变为任何其它氨基酸。在一个实施例中，处于位置297处的氨基酸突变为丙氨酸(ala；a)。在一个实施例中，处于位置297处的氨基酸突变为谷氨酰胺(gln；q)。在一个实施例中，处于位置299处的氨基酸由苏氨酸(thr；t)突变为除丝氨酸(ser；s)或半胱氨酸(cys；c)以外的任何其它氨基酸。在一个实施例中，处于位置299处的氨基酸突变为丙氨酸。在一个实施例中，处于位置298处的氨基酸突变为除脯氨酸以外的任何氨基酸。在一个实施例中，处于位置328处的氨基酸由亮氨酸(leu；l)突变为任何其它氨基酸。在另一个实施例中，处于位置328处的氨基酸突变为苯丙氨酸(phe；f)。

4、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置267、268、297和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变s267e、h268f、n297a和s324t。

5、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置234、235、267、268和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变l234v、l235a、s267e、h268f和s324t。

6、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置234、235、267、268、297和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变l234v、l235a、s267e、h268f、n297a和s324t。

7、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、234、235、267、268和324处的点突变以及处于位置236处的氨基酸的缺失。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变e233p、l234a、l235a、s267e、h268f和s324t以及处于位置236处的氨基酸的缺失。

8、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、234、235、267、268、297和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变e233p、l234a、l235a、s267e、h268f、n297a和s324t。

9、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置265、267、268和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变d265a、s267e、h268f和s324t。

10、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置238、267、268和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变p238d、s267e、h268f和s324t。

11、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置238、267、268、297和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变p238d、s267e、h268f、n297a和s324t。

12、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置236、267、268和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变g236r、s267e、h268f和s324t。

13、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、236、267、268和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变e233p、g236r、s267e、h268f和s324t。

14、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、236、267、268、324和328处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变e233p、g236r、s267e、h268f、s324t和l328f。

15、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置238、265、267、268和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变p238d、d265g、s267e、h268f和s324t。在其它实施例中，fc结构域包含点突变p238d、d265w、s267e、h268f和s324t。

16、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置267、268、324和328处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变s267e、h268f、s324t和l328f。

17、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、234、235、267、268、297、324和328处的点突变以及处于位置236处的氨基酸的缺失。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变e233p、l234v、l235a、s267e、h268f、n297a、s324t和l328f以及处于位置236处的氨基酸的缺失。

18、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、268和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变e233p、h268f和s324t。

19、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、268、297和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变e233p、h268f、s324t和处于位置297处的除n297a或n297q以外的点突变。

20、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、268、299和324处的点突变。在另外的实施例中，fc结构域包含点突变e233p、h268f、s324t和处于位置299处的除t299s或t299c以外的点突变。在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含点突变e233p、h268f、s324t和t299a。

21、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、268、324和267处的点突变。在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含e233p、h268f、s324t和处于位置267处的除点突变s267e以外的点突变。

22、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、268、324、267和297处的点突变。在另外的实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含点突变e233p、h268f、s324t、处于位置267处的除点突变s267e以外的点突变以及处于位置297处的除点突变n297a和n297q以外的点突变。在另外的实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、268、324、267和297处的突变。在另外的实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含点突变e233p、h268f、s324t、处于位置267处的除点突变s267e以外的点突变、处于位置297处的除点突变n297a和n297q以外的点突变以及处于位置299处的除点突变t299s和t299c以外的点突变。在另外的实施例中，处于位置299处的突变是t299a。

23、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、268、324、267和236处的点突变。在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含点突变e233p、h268f、s324t、处于位置267处的除s267e以外的点突变以及处于位置236处的除g236r以外的点突变。

24、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、268、324、267、236和297处的点突变。在另外的实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含点突变e233p、h268f、s324t、处于位置267处的除点突变s267e以外的点突变、处于位置236处的除g236r以外的点突变以及处于位置297处的除点突变n297a和n297q以外的点突变。

25、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置233、268、324、267、236和299处的点突变，其中处于位置299处的点突变是除t299s和t299c以外的点突变。在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含点突变e233p、h268f、s324t、处于位置267处的除s267e以外的点突变、处于位置236处的除g236r以外的点突变以及t299a。

26、在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置267、268和/或324中至少一个处的点突变，并且进一步包含处于位置233、235、236、267、268、297、299和/或324中三个或超过三个处的点突变。在一些实施例中，斯特拉多体单元的fc结构域包含处于位置267、268和/或324中至少一个处的点突变，并且进一步包含处于位置233、235(除l235h以外)、236(除236r以外)、267(除s267e以外)、268、297(除n297a以外)或替代地299和/或324中三个或超过三个处的点突变。

27、在一个实施例中，斯特拉多体包含多聚化结构域，其中所述多聚化结构域选自由igg2铰链、异亮氨酸拉链和gpp结构域组成的群组并且能够使所述斯特拉多体单元多聚化。在一些实施例中，多聚化结构域形成所述斯特拉多体单元的多聚体。在另外的实施例中，所述斯特拉多体单元的多聚体是高阶多聚体。

28、在一些实施例中，斯特拉多体从氨基端到羧基端包含：前导序列；包含igg1铰链、igg1 ch2和igg1 ch3的fc结构域；以及igg2铰链，其中所述斯特拉多体包含一个或多个如本文所提供的点突变。在另一个实施例中，前导序列在表达时裂解。因此，在另一个实施例中，提供一种斯特拉多体，从氨基端到羧基端包含：包含igg1铰链、igg1 ch2和igg1 ch3的fc结构域；以及igg2铰链，其中所述斯特拉多体包含一个或多个如本文所提供的点突变。在一个实施例中，斯特拉多体包含选自由seq id no:10-16、18-63和65-77组成的群组的氨基酸序列，或其功能变异体。

29、在一些实施例中，斯特拉多体从氨基端到羧基端包含：前导序列；igg2铰链；以及包含igg1铰链、igg1 ch2和igg1 ch3的fc结构域，其中所述斯特拉多体包含一个或多个如本文所提供的点突变。在另一个实施例中，前导序列在表达时裂解。因此，在另一个实施例中，提供一种斯特拉多体，从氨基端到羧基端包含：igg2铰链；以及包含igg1铰链、igg1 ch2和igg1 ch3的fc结构域，其中所述斯特拉多体包含一个或多个如本文所提供的点突变。在一个实施例中，斯特拉多体包含选自由seq id no:17和seq id no:64组成的群组的氨基酸序列，或其功能变异体

30、在一些实施例中，斯特拉多体从氨基端到羧基端包含：前导序列；igg2铰链；以及包含igg1 ch2和igg1 ch3的fc结构域，其中所述斯特拉多体包含一个或多个如本文所提供的点突变。在另一个实施例中，前导序列在表达时裂解。因此，在另一个实施例中，提供一种斯特拉多体，从氨基端到羧基端包含：igg2铰链；以及包含igg1 ch2和igg1 ch3的fc结构域，其中所述斯特拉多体包含一个或多个如本文所提供的点突变。

31、在一个实施例中，斯特拉多体单元进一步包含一个或多个氨基酸连接序列。在另一个实施例中，连接子是可裂解的。在另一个实施例中，连接子是蛋白酶敏感性的。在一个实施例中，连接子由占优势地处于细胞内的蛋白酶裂解。在另一个实施例中，连接子由占优势地存在于高尔基体和内质网中的蛋白酶裂解。在一个实施例中，连接子由弗林蛋白酶裂解。在另一个实施例中，连接子由占优势地为器官特异性蛋白酶(例如大脑相关蛋白酶神经视蛋白酶(neuropsin))的蛋白酶裂解。在另一个实施例中，连接子由占优势地为肿瘤特异性蛋白酶(例如金属蛋白酶9和尿激酶纤维蛋白溶酶原活化子)的蛋白酶裂解。

32、在一些实施例中，斯特拉多体单元展现相对于fcγri、包括fcγriia和/或fcγriib的fcγrii、和/或fcγriii，与补体的结合优先。在某些实施例中，斯特拉多体单元展现与低亲和力fcγ受体的结合减少。在其它实施例中，斯特拉多体单元展现相对于不包含处于位置267、268和/或324中一个或多个处的点突变的相同结构斯特拉多体，与fcγri、包括fcγriia和/或fcγriib的fcγrii、和/或fcγriii的结合减少。

33、在某些实施例中，斯特拉多体单元包含处于297、298或299处的突变，并且保持结合于c1q，抑制cdc并且保持结合于fcγri或到结合于包括fcγriia、fcγriib和/或fcγriii的低亲和力fcγ受体。

34、在一个方面中，本公开提供一种团簇斯特拉多体，包含两个或更多个如本文所公开的斯特拉多体单元。举例来说，在一些实施例中，本公开提供一种团簇斯特拉多体，包含两个或更多个以下斯特拉多体单元，所述斯特拉多体单元包含氨基酸序列包含处于位置267、268和/或324处点突变的igg1 fc结构域。在另外的实施例中，两个或更多个斯特拉多体单元进一步包含至少一个处于位置233和/或234和/或235和/或236和/或238和/或265和/或297和/或299和/或328处的点突变。在一些实施例中，两个或更多个斯特拉多体单元包含处于位置236处的氨基酸的缺失。

35、在一些实施例中，本文所提供的斯特拉多体用于治疗或预防以下疾病和病症，包括(但不限于)补体介导的疾病、自身免疫性疾病、发炎性疾病、过敏、b细胞介导的疾病、抗体介导的疾病、肾病以及血液病。

36、在一些实施例中，抗体介导的疾病选自由以下组成的群组：古德帕斯丘氏病(goodpasture's disease)；实体器官移植排斥反应；视神经脊髓炎；神经性肌强直；边缘性脑炎；莫尔万氏肌原纤维性舞蹈症综合征(morvan'sfibrillary chorea syndrome)；重症肌无力；兰伯特伊顿肌无力综合征(lambert eaton myasthenic syndrome)；自主神经性病变；阿兹海默氏病(alzheimer'sdisease)；动脉粥样硬化；帕金森氏病(parkinson'sdisease)；刚人综合征或惊跳病；反复性自然流产；休斯综合征(hughes syndrome)；全身性红斑狼疮；自身免疫性小脑共济失调；结缔组织疾病，包括硬皮病、休格连氏综合征(sjogren's syndrome)；多发性肌炎；类风湿性关节炎；结节性多动脉炎；crest综合征；心内膜炎；桥本氏甲状腺炎(hashimoto's thyroiditis)；混合结缔组织疾病；离子通道病；与链球菌感染相关联的儿童自身免疫性神经精神病(pediatric autoimmuneneuropsychiatric disorders associated with streptococcal infections；pandas)；与针对n-甲基-d-天冬氨酸酯受体(尤其nr1)、接触蛋白相关蛋白质2、ampar、glur1/glur2、谷氨酸脱羧酶、glyrα1a、乙酰胆碱受体、vgcc p/q型、vgkc、musk、gaba(b)r的抗体相关联的临床病状；水通道蛋白-4；以及天疱疮。在一些实施例中，自身免疫性疾病是关节炎。

37、在一些实施例中，补体介导的疾病选自由以下组成的群组：重症肌无力；溶血性尿毒症综合征(hus)；非典型溶血性尿毒症综合征(ahus)；阵发性夜间血红蛋白尿(pnh)；视神经脊髓炎；抗体介导的同种异体移植排斥；肾病变，包括膜性肾病变；以及肾炎，包括膜增生性丝球体肾炎(membranoproliferative glomerulonephritis；mpgn)和狼疮肾炎。

38、在一些实施例中，血液病是贫血，如镰形细胞疾病，包括血红素ss、血红素sc、血红素sβ0地中海贫血、血红素sβ+地中海贫血、血红素sd和血红素se。在一些实施例中，发炎性病症是年龄相关性黄斑变性、阿兹海默氏病、肌肉萎缩性侧索硬化或帕金森氏病。

39、在一些实施例中，向有需要的个体投与本文所提供的斯特拉多体。在另外的实施例中，静脉内、皮下、经口、腹膜内、舌下、经颊、透皮、通过真皮下植入或肌肉内投与本文所提供的斯特拉多体。

40、在一些实施例中，本公开提供适用于治疗或预防自身免疫性相关的视力丧失或听力丧失(如噪音诱导或老化相关的听力丧失)的斯特拉多体。在另一个实施例中，所提供的斯特拉多体适用于减少与装置植入(如植入耳蜗或其它听力装置)相关的炎症或自身免疫性反应。