本发明涉及活性多肽,具体涉及一种多肽、制备方法及黄嘌呤氧化酶抑制剂、降尿酸制剂。
背景技术:
1、黄嘌呤氧化酶xod在体内可以催化次黄嘌呤生成黄嘌呤,并氧化成尿酸,黄嘌呤氧化酶活性异常增大时将导致尿酸生成过多,引发高尿酸。高尿酸症状hua,可导致痛风、肾结石等病症,还和心血管疾病等代谢性疾病存在密切联系,具有诸多危害。黄嘌呤氧化酶抑制剂即以黄嘌呤氧化酶为靶点抑制黄嘌呤氧化酶的活性,减少黄嘌呤向尿酸的转化,降低尿酸生成水平。目前临床常用的黄嘌呤氧化酶抑制剂主要是别嘌呤醇、非布索坦,但均有严重的副作用,如别嘌呤醇可引发致命的别嘌呤醇超敏综合征,非布索坦容易引发心血管事件。因此需要开发更加安全、高效的黄嘌呤氧化酶抑制剂。
2、从天然植物中获取具有黄嘌呤氧化酶活性抑制作用的多酚类化合物已经成为一个重要的研究方向,比如白杨素、芹菜素等黄酮类化合物,高良姜素等黄酮醇类化合物。但是这些多酚类化合物多存在稳定性弱、溶解性差以及低毒性等问题限制了其应用。因此随着多肽的生物活性、安全性被广泛认可,从动物或植物中开发获取具有黄嘌呤氧化酶抑制效果的多肽也逐渐引起研究人员的重视。如侯梦凡等(卵形鲳鲹黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备及其工艺优化[j],食品与发酵工业,2021年,47(23):185-192)利用酶解法,从卵形鲳鲹中提取了具有黄嘌呤氧化酶活性抑制作用的多肽,多肽的xod抑制率在50%~60%。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种多肽,具有黄嘌呤氧化酶体外抑制活性,而且抑制率较高。
2、本发明提供如下的技术方案:
3、一种多肽,包括氨基酸序列如seq id no.1、seq id no.2和seq id no.3所示的短肽中的一种或多种。
4、本发明提供的多肽选自三条短肽kr5、fl7、rk8或者其中的两种或三种的组合物。其中kr5的氨基酸序列seq id no.1为:lys-leu-ala-his-arg(klahr),fl7的氨基酸序列seq id no.2为:phe-val-gly-gly-leu-arg-leu(fvgglrl),rk8的氨基酸序列seq id no.3为:arg-met-pro-met-phe-phe-leu-lys(rmpmfflk)。
5、经过测试,kr5、fl7、rk8均具有xod抑制活性,其中1mg/ml低浓度下,rk8的xod抑制率可以达到69.80%,fl7可以达到68.22%;当浓度增大至30mg/ml时,rk8的抑制率可以达到87.6%,fl7则能够达到100%,xod抑制效果明显。
6、一种上述多肽的制备方法,包括以下步骤:
7、水煮金枪鱼鱼肉,分离上清液,从上清液中截取分子量<3kd的产物,冷冻干燥,然后纯化。与现有报道的具有xod抑制活性的多肽通过酶解法获得不同,本发明的多肽可以通过金枪鱼鱼肉水提得到。优选为金枪鱼红肉,金枪鱼红肉即金枪鱼加工中的暗色肉,往往因腥味重、肉质粗糙而被丢弃,因此本发明的技术方案对于实现暗色肉高值化开发,提高产品附加值水平具有重要意义。
8、作为本发明方法的优选,金枪鱼鱼肉和水的质量比为1:3~6。
9、作为本发明方法的优选,水煮温度为80~100℃,水煮时间为20~30min。
10、上述多肽在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂上的应用。
11、一种黄嘌呤氧化酶抑制剂,所述抑制剂含有上述多肽。
12、作为本发明的优选,所述抑制剂含有氨基酸序列如seq id no.2所示的短肽,抑制剂为液态形式,氨基酸序列如seq id no.2所示的短肽在抑制剂中的浓度≥20mg/ml。
13、作为本发明的优选,所述抑制剂含有氨基酸序列如seq id no.2所示的短肽,抑制剂为液态形式,氨基酸序列如seq id no.2所示的短肽在抑制剂中的浓度≥30mg/ml。当浓度达到30mg/ml时,fl7的xod抑制效果可以达到100%。
14、一种降尿酸制剂,所述降尿酸制剂含有上述黄嘌呤氧化酶活性抑制剂。
15、本发明的有益效果如下:
16、本发明提供了一种具有xod抑制活性的多肽,选自短肽kr5、fl7、rk8或者其组合物,氨基酸序列分别为seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3,具有xod抑制活性,可以作为xod抑制剂、降尿酸制剂开发。同时本发明提供的多肽可以从金枪鱼红肉中水提得到,实现了金枪鱼暗色肉的高值化开发。
1.一种多肽,其特征在于,包括氨基酸序列如seq id no.1、seq id no.2和seq idno.3所示的短肽中的一种或多种。
2.一种如权利要求1所述的多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的多肽的制备方法,其特征在于,金枪鱼鱼肉和水的质量比为1:3~6。
4.根据权利要求2或3所述的多肽的制备方法,其特征在于,水煮温度为80~100℃,水煮时间为20~30min。
5.如权利要求1所述的多肽在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂上的应用。
6.一种黄嘌呤氧化酶抑制剂,其特征在于,所述抑制剂含有如权利要求1所述的多肽。
7.根据权利要求6所述的抑制剂,其特征在于,所述抑制剂含有氨基酸序列如seq idno.2所示的短肽,抑制剂为液态形式,氨基酸序列如seq id no.2所示的短肽在抑制剂中的浓度≥20mg/ml。
8.根据权利要求6所述的抑制剂,其特征在于,所述抑制剂含有氨基酸序列如seq idno.2所示的短肽,抑制剂为液态形式,氨基酸序列如seq id no.2所示的短肽在抑制剂中的浓度≥30mg/ml。
9.一种降尿酸制剂,其特征在于,所述降尿酸制剂含有如权利要求6至8任一所述的黄嘌呤氧化酶活性抑制剂。